本发明涉及枸杞子提取物的制备方法，具体涉及一种富含枸杞酸的枸杞子提取物的制备方法。尤其涉及一种利用酵母生物发酵法去除单糖和双糖，制备富含枸杞酸且无需添加赋形剂的枸杞子提取物的方法。
背景技术：
枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(lyciumbarbaruml.)的干燥成熟果实。传统中医认为，枸杞子具有滋补肝肾、益精明目、润肺止咳、延续衰老等功效。现代药理学研究表明，枸杞子具有调节免疫能力、降血糖和血脂、抗肿瘤、抗氧化等作用。枸杞子具有多种保健功效，是经中国卫生部批准的药食两用的食物。适量食用，有益健康，与菊花茶配合使用，有清肝明目的功效。
酵母是一种单细胞真菌，分布于整个自然界，喜在糖分高，偏酸性的环境中生长。酵母菌生长繁殖所需的能量主要来自糖类的分解代谢，其可以利用多种不同的单糖和低聚糖、非碳水化合物(如多元醇、石油裂解物)、工业生产的碳源(如糖质原料糖蜜、淀粉质原料玉米和大友等谷物、含糖废液、亚硫酸盐废液)等，最终的代谢产物为酒精和co2。
现有研究表明，酵母生物发酵法可以有效地去除葡萄糖、果糖和蔗糖等碳水化合物，而且葡萄糖的有效去除率可达到96％以上；酵母发酵法还可以有效去除果汁中的有机酸，如苹果酸、琥珀酸、柠檬酸和乳酸等有机酸，其中苹果酸的有效去除率可达到86％以上。同时，酵母对低聚糖无较高的发酵力。
目前，市场上的枸杞子提取物均以枸杞多糖作为质量标志物。同时，常规制备方法所得枸杞提取物在生产过程中会添加大量麦芽糊精等辅料，严重影响了功效成分—枸杞多糖含量检测的准确性和稳定性。同时，枸杞多糖的检测方法多为紫外分光光度计法，该方法重复性和稳定性差，无法满足作为质量标志物的要求。因此，寻求更合理的制备工艺和提高枸杞子提取物质量标准是亟待解决的问题，也是枸杞子提取物产业保持健康、可持续发展的重要诉求。目前，尚未见到以枸杞酸为质量标志物的枸杞子提取物的报道。
本发明人基于所述酵母发酵的生物学特性，采用酵母发酵法能够有效地去除枸杞子提取液中的葡萄糖、果糖和蔗糖等糖分，相对地提高枸杞酸的含量。制备高枸杞酸含量的新型枸杞子提取物具有重要的应用价值。
技术实现要素：
本发明所要解决的问题在于克服上述不足之处，研究设计采用酵母生物发酵法制备以枸杞酸为质量标志物的富含枸杞酸且无需添加赋形剂的新型枸杞子提取物的方法。
本发明提供了一种富含枸杞酸的枸杞子提取物的制备方法。
本发明所采用的技术方案是：
所述的制备枸杞子提取物的方法为酵母生物发酵法。
所述的酵母生物发酵法是指利用酵母的对葡萄糖、果糖、蔗糖和小分子有机酸具有较强的发酵力，而对低聚糖和枸杞多糖有较低的或无发酵力的生物学特性，有效地去除单糖和双糖，提高枸杞酸的含量。
具体的，本发明一种富含枸杞酸的枸杞子提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)提取：
取枸杞子干果适量，精密称定，置于2000ml的烧杯中，按重量比1：5-10(枸杞子干果：去离子水)加入去离子水，浸泡30-60min，待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆，匀浆液转入2000ml的烧杯中，再次用重量比1：5-10(枸杞子干果：去离子水)的去离子水分三次清洗破壁料理机，清洗液转入烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于50-60℃水浴中，浸提1-2h，浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子，过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟，离心液经定性滤纸过滤后，得枸杞子提取液，备用；
(2)发酵：
枸杞子提取液中加入0.5-2g酵母，混匀后，置于20-40℃水浴中培育发酵。发酵结束后，升高水浴温度至40-60℃，灭活5-10min，发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟，离心液过滤后，得枸杞子发酵液，备用；
(3)浓缩、干燥、打粉：
枸杞子发酵液于50-60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏，浓缩，干燥，用粉碎机打粉，枸杞粉过80目筛，备用；
(4)检测
制备0.8-1.5mg/ml的供试样品溶液，依据本申请人研发的枸杞酸的高效液相的检测方法对枸杞粉中的枸杞酸进行检测，检测结果显示，枸杞酸的含量可达到3.0％以上。
优选的，本发明一种富含枸杞酸的枸杞子提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)提取：
取枸杞子干果适量，精密称定，置于2000ml的烧杯中，按重量比1：5-10(枸杞子干果：去离子水)加入去离子水，浸泡30-60min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆，匀浆液转入2000ml的烧杯中，再次用重量比1：5-10(枸杞子干果：去离子水)的去离子水分三次清洗破壁料理机，清洗液转入烧杯中，备用；
(2)发酵：
匀浆液中加入0.5-2g酵母，混匀后，置于20-40℃水浴中培育发酵，发酵过程中使用电子搅拌机，100转/分搅拌，发酵结束后，升高水浴温度至40-60℃，灭活5-10min。发酵液过80目筛去掉枸杞籽及渣子，过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，得枸杞子发酵液，备用；
步骤(3)和(4)与上述制备方法相同。
本发明制备方法中，所述步骤(1)制备枸杞子提取液时所用的总的去离子水与枸杞子干果的重量比为1：10-20；优选的，去离子水与枸杞子干果的重量比为：1：10-15；更优选的，去离子水与枸杞子干果的重量比为：1：10。
所述步骤(1)枸杞子提取温度为55-60℃；更优地，枸杞子提取温度为60℃。
所述步骤(1)优选的，枸杞子提取时间为1-1.5h；更优选的，枸杞子提取时间为1h。
所述步骤(2)，枸杞子提取液中所用的酵母的为0.7-1.4g；更优选的，所用的酵母为0.7g；
所述步骤(2)中，发酵时所用的酵母为购买自安琪酵母股份有限公司酵母粉(ya200)、高活性干酵母、耐高糖高活性干酵母；更优选的，采用耐高糖高活性干活性干酵母为发酵用酵母；
所述步骤(2)中，发酵时的体系温度为25-35℃；更优选的，发酵温度为30℃。
所述步骤(2)中，发酵结束后，灭活温度为50-60℃；更优选的，灭活温度为60℃；
所述步骤(2)中，发酵结束后，灭活时间为5-8min；更优选的，灭活温度为5min；
所述步骤(2)中，离心后的发酵液采用定性滤纸过滤或膜过滤的方法；优选的，采用定性滤纸过滤的方法进行发酵液过滤；
所述步骤(3)中，旋转蒸发仪浓缩时的温度为55-60℃；优选的，灭活温度为60℃；
所述步骤(4)中，供试样制备浓度为0.8-1.5mg/ml；优选的，供试样制备浓度为1mg/ml。
本发明方法建立了以枸杞酸为质量标志物的枸杞子提取物的质量标准，不仅推动枸杞子提取物产业的产品升级和质量升级，而且保障了枸杞子提取物产业的健康发展。
本发明方法制得的枸杞子提取物降低了提取物中糖的含量，拓宽了应用范围，例如可用于抗糖化产品，糖尿病人的食品等。
本发明采用的酵母生物发酵法与现有的精滤、超滤和纳滤等膜工艺相比，该方法具有操作简便、生产效率高、不易污染等显著优势。因膜工艺在生产过程中，尤其是纳滤过程中时间较长，而枸杞子中含有三分之一的碳水化合物，单糖的含量也达到了30％，极易造成污染，产生酸败现象，严重影响了枸杞子提取物的风味。本发明所采用的方法对生产设备无特殊要求，操作简单，实用性强，具有较高的应用价值。
本发明采用酵母生物发酵法制备枸杞子提取物的方法结果表明，该方法可以用于枸杞子提取物的制备，可以制备枸杞酸含量为3.0％的枸杞子提取物，显著提高了枸杞酸的含量。与市场上的同类产品(枸杞酸的含量为0.5％)相比，枸杞酸的含量提高了一个数量级。
本发明方法得到的枸杞子提取物富含枸杞酸，是真正意义上的源于天然的稳定的抗坏血酸衍生物，是抗坏血酸的最稳定、性能最佳的替代品，也更易被消费者接受。作为抗坏血酸的一种缓释剂，富含枸杞酸的枸杞子提取物在化妆品市场上、制药工业上和食品防腐剂上都将有广阔的应用前景和使用价值，具有较大的社会效益和经济价值。
具体实施方式
下面利用实施例对本发明进行近一步说明：
实施例用使用的原料、酵母和试剂除另有说明外，均通过市售获得。
实施例中所使用的枸杞子采购自宁夏早康枸杞股份有限公司，枸杞子中枸杞酸的含量为0.9-1.2％。
实施例中使用的酵母粉(ya200)、高活性干酵母、耐高糖高活性干酵母均购买自安琪酵母股份有限公司。
实施例得到的枸杞子提取物均依据本申请人研究开发的枸杞酸的高效液相的检测方法(已发表文章《hplc测定枸杞提取物中枸杞酸的含量》杨延超,董慧燕,殷梦龙.hplc测定枸杞提取物中枸杞酸的含量[j].食品工业,2014(10):255-257.
实施例1
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入3000ml的三角瓶中，用2000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为800ml、800ml、400ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经常规定性滤纸过滤后，去离子水定容至3l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至3l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压(-0.1mpa压力)蒸馏，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物55g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液，依据本申请人研究开发的枸杞酸的高效液相的检测方法(已发表文章《hplc测定枸杞提取物中枸杞酸的含量》杨延超,董慧燕,殷梦龙.hplc测定枸杞提取物中枸杞酸的含量[j].食品工业,2014(10):255-257.对枸杞粉中的枸杞酸进行检测。经检测，枸杞酸的含量为3.8％。
实施例2
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物32g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.4％。
实施例3
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1.5h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物35g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.2％。
实施例4
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于50±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物33g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.6％。
实施例5
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入1.4g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物36g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.0％。
实施例6
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分两次清洗破壁料理机，每次500ml。合并洗液倒入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵，分别于0h、14h、16h、18h和20h取样。20h时，发酵即结束。升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用。
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物32g。，备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。检测结果详见下表。
依据检测结果，酵母生物发酵法制备(14小时)的枸杞子提取物中枸杞酸的含量可达到3.0％以上。
实施例7
(1).枸杞子提取物的提取过程同实施例6.
(2)发酵
枸杞子提取液2l中加入0.7g高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵，分别于0h、16h、17h、19h、20h和22h取样。22h时，发酵即结束。升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用。
(3)发酵液浓缩、干燥、打粉和检测均同实施例6.得到枸杞子提取物30g。
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。检测结果详见下表。
依据检测结果，酵母生物发酵法(16小时)制备的枸杞子提取物中枸杞酸的含量可达到3.0％以上。
实施例8
(1).枸杞子提取物的提取过程同实施例7.
(2)发酵
枸杞子提取液2l。中加入0.7g酵母粉(安琪酵母股份有限公司)(ya200)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵，分别于0h、20h、40h、64h、和72h取样。72h时，发酵即结束。升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用。
(3)发酵液浓缩、干燥、打粉和检测均同实施例7.得到枸杞提取物35g。
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。检测结果详见下表。
依据检测结果，酵母生物发酵法制备的枸杞子提取物中枸杞酸的含量可达到3.0％以上。
本实施例说明不同的酵母发酵时间必定不同。选择耐高糖高活性的酵母的优势。
实施例9
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于35±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至2l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物34g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.3％。
实施例10
选择过滤方法：
(1)提取：
取枸杞子干果600g，精密称定，置于10l的铁锅中，加入3l的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入10l的铁锅中，用3l水分三次清洗破壁料理机，分别为1000ml、1000ml、1000ml。合并洗液转入匀浆液铁锅中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至6l，得枸杞子提取液。备用。
(2)发酵
枸杞子提取液中加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，混匀后，置于30±2℃水浴中培育发酵14h，升高水浴温度至60℃，灭活5min。发酵液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液过滤后，去离子水定容至6l，即得枸杞子发酵液。备用；
(3)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液过10万道尔顿的超滤膜，得6570g的超滤液。超滤液过400道尔顿的纳滤膜，得672g的纳滤液。纳滤液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物86g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为2.4％。
本实施例说明膜过滤方法会造成枸杞酸的损失，因此，我们选择采用定性滤纸过滤的方法。
实施例11
(1)枸杞提取物提取过程和发酵过程同实施例6.
(2)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于50℃经旋转蒸发仪减压蒸馏，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛得到枸杞子提取物30g。备用。
(3)检测
取步骤(2)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.4％。
实施例12
(1)匀浆、发酵和浸提：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于5l的铁锅中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入5l的铁锅中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液铁锅中，加入0.7g耐高糖高活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)，铁锅用铝箔纸封盖后，置于30±2℃水浴中发酵14h。发酵过程中使用电子搅拌机搅拌，转速为100转/分。发酵结束后，发酵液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)浓缩、干燥、打粉
枸杞子发酵液于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物43g。备用。
(3)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为3.3％。
实施例13(与现有技术对比例)
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)浓缩、干燥、打粉
枸杞子提取液中加入1：1的麦芽糊精(麦芽糊精：干物质)，于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物210g。备用。
(3)检测
取步骤(2)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液。经检测，枸杞酸的含量为0.44％。
实施例14((与现有技术膜过滤工艺对比例)
(1)提取：
取枸杞子干果200g，精密称定，置于2000ml的烧杯中，加入1000ml的去离子水，浸泡30min。待枸杞子完全吸胀后，用破壁料理机匀浆。匀浆液转入2000ml的烧杯中，用1000ml水分三次清洗破壁料理机，分别为400ml、400ml、200ml。合并洗液转入匀浆液烧杯中，烧杯用铝箔纸封盖后，置于60±2℃水浴中，浸提1h。浸提液过80目筛去掉枸杞籽及渣子。过滤液经高速冷冻离心机7000r/min离心10分钟。离心液经定性滤纸过滤后，去离子水定容至2l，得枸杞子提取液。备用。
(2)膜过滤
枸杞子发酵液过10万道尔顿的超滤膜，得1830g的超滤液。超滤液过400道尔顿的纳滤膜，得475g的纳滤液。
(3)浓缩、干燥、打粉
纳滤液中加入1：1的麦芽糊精(麦芽糊精：干物质)，于60℃经旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.1mpa)，浓缩，干燥，用粉碎机打粉。枸杞粉过80目筛，得到枸杞子提取物456g。备用。
(4)检测
取步骤(3)枸杞子提取物制备1mg/ml的供试样品溶液，依据我司开发的枸杞酸的高效液相的检测方法对枸杞粉中的枸杞酸进行检测。经检测，枸杞酸的含量为0.91％。
综上所述，本发明采用的酵母生物发酵法可以用于制备富含枸杞酸且无需添加赋形剂的枸杞子提取物。所制备的枸杞子提取物的含量可以达到3.0％以上。
本发明所述的实施例是为了解释说明本发明的技术方案，需要说明的是，本领域的普通技术人员应当理解，并可以对发明的技术方案进行调整或改进。这些调整或改进也应在本发明的保护范围之内。