促进肿瘤细胞溶解的软化剂及其制备方法与流程

本发明属于医疗技术领域，具体涉及一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂及其制备方法。

背景技术：

肿瘤(tumour)是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物。研究发现，肿瘤细胞会出现不同于正常细胞的代谢变化，同时肿瘤细胞自身可通过糖酵解和氧化磷酸化之间的转换来适应代谢环境的改变。手术、放疗、化疗和分子靶向药物是治疗癌症的几大主要手段。其中手术和放疗为局部治疗，化疗和分子靶向药物治疗为全身治疗。另外还有内分泌治疗、生物治疗等。一些微创治疗方法，如介入治疗、电化学治疗、激光治疗、微波热疗、超声热疗、冷冻治疗、射频治疗等有时也能取得治疗效果。2019年，cancercell最新刊登了一篇文章，研究人员发现在禁食状态下使用二甲双胍可以显著抑制肿瘤生长，并提出pp2a-gsk3β-mcl-1通路可能是肿瘤治疗的新靶点。但以上治疗方法往往都忽视了肿瘤固有的生物学特性这一内因及肿瘤治疗的免疫机制，而且，预防就是最好的治疗，目前，肿瘤预防未收到应有的重视。

鉴于此，申请此专利。

技术实现要素：

为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂及其制备方法。

本发明所采用的技术方案为：

一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下原料制成，所述原料包括：半枝莲、南岭荛花、土木香、越南槐、天冬、地榆、牛蒡子、苦瓜、蒲公英、独活、甘草和姜黄。

其中，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下重量份的原料制成，所述原料包括：

半枝莲6-10份、南岭荛花10-20份、土木香3-7份、越南槐5-15份、天冬10-14份、地榆5-15份、牛蒡子10-30份、苦瓜5-15份、蒲公英2-8份、独活3-7份、甘草3-7份和姜黄10-20份。

进一步的，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下重量份的原料制成，所述原料包括：半枝莲8份、南岭荛花15份、土木香5份、越南槐10份、天冬12份、地榆10份、牛蒡子20份、苦瓜10份、蒲公英5份、独活5份、甘草5份和姜黄15份。

制备所述的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)选料：将所有原料洗净，干燥至水分含量为7％以下；

(2)浸泡：将步骤(1)干燥后的所有原料进行混合，加入水进行浸泡，得到原料浸泡液；

(3)熬制：将步骤(2)中得到的所述原料浸泡液进行大火加热至烧开，然后小火熬制30-50分钟，得到熬制液；

(4)蒸馏：将步骤(3)中得到的所述熬制液进行蒸馏，保留蒸馏后的液体得到原浆待用；

(5)发酵：将步骤(4)得到的原浆进行稀释，加入发酵粉混合均匀进行发酵1.5-2.5小时，即得促进肿瘤细胞溶解的软化剂。

进一步的，步骤(2)中，所述浸泡时间为1.5-2.5小时，所述浸泡温度为40-50℃。

进一步的，步骤(3)中，所述大火的温度为130-170℃，所述小火的温度为80-90℃。

进一步的，步骤(4)中，所述蒸馏的温度为60-70℃。

进一步的，步骤(5)中，所述发酵粉的制备方法为：向混合粉中加入中药制剂混合均匀，发酵20-22天，即得所述发酵粉；所述混合粉为绿豆面、黄豆面和玉米面进行混合形成的混合粉；所述中药制剂由以下原料药进行制备，所述原料药包括佛手、甘草、白术、毛根、地骨皮、芦根、竹叶、莲叶和莲籽心。

更进一步的，所述中药制剂由以下重量份的原料药进行制备，所述原料药包括佛手50份，甘草10份，白术15份，毛根20份，地骨皮15份，芦根30份，竹叶15份，莲叶20份和莲籽心5份。佛手属君，地骨，毛根为臣，其它是佐使。

更进一步的，所述中药制剂的制备方法为：将所有的原料药进行混合，混合均匀后加入清水进行浸泡1-3小时，然后熬制1-3小时，过滤得到滤液，即为中药制剂。

具体的，所述中药制剂的制备方法为：将所有的原料药进行混合，混合均匀后加入清水进行浸泡2小时，然后熬制2小时，过滤得到滤液，即为中药制剂。

进一步的，步骤(5)中，所述发酵1.5-2.5小时后，进行过滤，得到滤液即为所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂。

进一步的，步骤(5)中，原浆进行稀释10倍，加入发酵粉混合均匀进行两次发酵，每次发酵1小时，然后进行过滤，得到的滤液即为所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂。二次发酵目的是可以起到增效作用，获得更多的有益菌。

本发明的原料中，半枝莲，含花红素，清热解毒，对癌细胞有抑制作用；南岭荛花又称了哥王，含有南荛素，牛蒡苷，罗汉松脂，对金黃色葡萄球菌，溶血性链球菌，乙型肝炎病毒，艾滋病毒，均有抑制作用；土木香，含挥发油及菊糖，达玛二烯醇乙酸酯，对阴道滴宏具有杀灭作用，对结核杆菌，须发癣菌和犬小孢子菌有完全抑制作用；越南槐一山豆根，含氧化苦参碱，广豆根素，紫檀素，高丽槐素等；能抗肿瘤，对白血病细胞有抑制作用，可增加白细胞数量等功效。天冬，含天冬苷，天冬酰胺，爪氨酸等，对白喉杆菌，金黃色葡萄球菌，枯草杆菌，链球菌，炭疽菌，均有很強抑制作用；地榆，含地榆皂苷，鞣花酸，儿茶素等；对伤寒杆菌，乙型溶血性链球菌，大肠杆菌，并对子宫癌细胞有抑制增长作用；牛蒡子，含牛蒡苷，有抗癌细胞作用；姜黄，含姜黄素，有抗肿瘤的作用。对革兰氐阴牲及阳性菌(如大肠杆菌，金黄色葡萄球菌)、真菌(白色念珠菌)均有很强的抑杀作用；苦瓜，含苦瓜苷，苦瓜素，钾等元素，是很强的抗癌细胞作用，抗艾滋病毒的作用，清热解毒功效；蒲公英，主要含，蒲公英甾醇，其功能，清热解毒，话血化结，故能防止癌细胞的产生；独活，含香柑内酯，对各种菌有抑杀作用，并有抗肿瘤作用；甘草，含生物碱，香豆素，黄酮等；有清热解毒，抗毒，抑制癌细胞生长之作用。

本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂可以直接饮用，用于预防肿瘤疾病，也可通过注射入人体或动物体内用于治疗肿瘤，对肿瘤起到抑制或软化溶解的功效。

本发明的有益效果为：

(1)本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂具有杀毒能力；在一定浓度范围内比胸腺分泌的免疫物质更具有杀毒效力；配合抗生素的使用能更好的保护器官不受影响。

(2)本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂对脊髓灰质炎病毒的灭活率为90％以上。

(3)注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂下，小白鼠大脑肿瘤的面积在1小时内增长不大，4小时后甚至还有被溶解的迹象。

(4)本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂对胸腺癌细胞具有溶解作用。

附图说明

图1为第一次将标记后的实验鼠放至暗室的胸腺电镜图；

图2为再次将实验鼠放至暗室的胸腺电镜图；

图3为小白鼠大脑各个皮层电镜图；

图4为小白鼠大脑各神经回路电镜图；

图5为小白鼠大脑神经元的树突和轴突、神经纤维电镜图；

图6为小白鼠大脑神经细胞体电镜图；

图7为注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂后，小白鼠的肿瘤情况；

图8为未注射软化剂，小白鼠的肿瘤情况；

图9为未注射软化剂和注射软化剂后肿瘤随时间的变化比较结果；

图10为胸腺癌细胞的电镜图；

图11为刚刚注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂后的电镜图；

图12为软化剂溶解癌细胞的过程的电镜图；

图13为第24小时软化剂与癌细胞的分布电镜图；

图14为第24小时软化剂和胸腺癌细胞分布的扩大图。

附图标记：

1、肿瘤；2、正在癌变的胸腺细胞；3、已经癌变的胸腺细胞；4、本发明的软化剂；5、软化剂溶解作用点；6、癌细胞聚合点。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。

在一些较为具体的实施例中，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下重量份的原料制成，所述原料包括：

半枝莲6-10份、南岭荛花10-20份、土木香3-7份、越南槐5-15份、天冬10-14份、地榆5-15份、牛蒡子10-30份、苦瓜5-15份、蒲公英2-8份、独活3-7份、甘草3-7份和姜黄10-20份。

制备所述的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)选料：将所有原料洗净，干燥至水分含量为7％以下；

(2)浸泡：将步骤(1)干燥后的所有原料进行混合，加入水进行浸泡，得到原料浸泡液；

(3)熬制：将步骤(2)中得到的所述原料浸泡液进行大火加热至烧开，然后小火熬制30-50分钟，得到熬制液；

(4)蒸馏：将步骤(3)中得到的所述熬制液进行蒸馏，保留蒸馏后的液体得到原浆待用；

(5)发酵：将步骤(4)得到的原浆进行稀释，加入发酵粉混合均匀进行发酵1.5-2.5小时，即得促进肿瘤细胞溶解的软化剂。

实施例1

本实施例提供了一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下原料制成：

半枝莲10g、南岭荛花10g、土木香7g、越南槐5g、天冬14g、地榆5g、牛蒡子10g、苦瓜15g、蒲公英2g、独活7g、甘草7g和姜黄10g。

制备所述的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)选料：将所有原料洗净，干燥至水分含量为7％；

(2)浸泡：将步骤(1)干燥后的所有原料进行混合，加入温水保温至50℃进行浸泡1.5小时，得到原料浸泡液；

(3)熬制：将步骤(2)中得到的所述原料浸泡液先170℃大火加热至烧开，然后80℃小火熬制50分钟，得到熬制液；

(4)蒸馏：将步骤(3)中得到的所述熬制液进行70℃下蒸馏，保留蒸馏后的液体得到原浆待用；

(5)发酵：将步骤(4)得到的原浆进行稀释10倍，加入发酵粉混合均匀进行两次发酵1.5小时，进行过滤，得到滤液，即为促进肿瘤细胞溶解的软化剂。

实施例2

本实施例提供了一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下原料制成：

半枝莲6g、南岭荛花20g、土木香3g、越南槐15g、天冬10g、地榆15g、牛蒡子30g、苦瓜5g、蒲公英8g、独活3g、甘草3g和姜黄20g。

制备所述的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)选料：将所有原料洗净，干燥至水分含量为6％；

(2)浸泡：将步骤(1)干燥后的所有原料进行混合，加入温水保温至40℃进行浸泡2.5小时，得到原料浸泡液；

(3)熬制：将步骤(2)中得到的所述原料浸泡液先170℃大火加热至烧开，然后90℃小火熬制30分钟，得到熬制液；

(4)蒸馏：将步骤(3)中得到的所述熬制液进行60℃下蒸馏，保留蒸馏后的液体得到原浆待用；

(5)发酵：将步骤(4)得到的原浆进行稀释8倍，加入发酵粉混合均匀进行两次发酵1.5小时，进行过滤，得到滤液，即为促进肿瘤细胞溶解的软化剂。发酵粉的制备方法为：向绿豆面、黄豆面和玉米面进行混合形成的混合粉中加入中药制剂混合均匀，发酵20-22天，即得所述发酵粉；所述中药制剂由以下原料药进行制备：佛手50g，甘草10g，白术15g，毛根20g，地骨皮15g，芦根30g，竹叶15g，莲叶20g和莲籽心5g；制备方法为：将所有的原料药进行混合，混合均匀后加入清水进行浸泡1小时，然后熬制3小时，过滤得到滤液，即为中药制剂。

实施例3

本实施例提供了一种促进肿瘤细胞溶解的软化剂，所述促进肿瘤细胞溶解的软化剂由以下原料制成：

半枝莲8g、南岭荛花15g、土木香5g、越南槐10g、天冬12g、地榆10g、牛蒡子20g、苦瓜10g、蒲公英5g、独活5g、甘草5g和姜黄15g。

制备所述的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)选料：将所有原料洗净，干燥至水分含量为6％；

(2)浸泡：将步骤(1)干燥后的所有原料进行混合，加入温水保温至45℃进行浸泡2小时，得到原料浸泡液；

(3)熬制：将步骤(2)中得到的所述原料浸泡液先150℃大火加热至烧开，然后85℃小火熬制40分钟，得到熬制液；

(4)蒸馏：将步骤(3)中得到的所述熬制液进行60℃下蒸馏，保留蒸馏后的液体得到原浆待用；

(5)发酵：将步骤(4)得到的原浆进行稀释10倍，加入发酵粉混合均匀进行两次发酵2小时，进行过滤，得到滤液，即为促进肿瘤细胞溶解的软化剂；发酵粉的制备方法为：向绿豆面、黄豆面和玉米面以重量比1:1:1进行混合形成的混合粉中加入中药制剂混合均匀，发酵21天，即得所述发酵粉；所述中药制剂由以下原料药进行制备：佛手50g，甘草10g，白术15g，毛根20g，地骨皮15g，芦根30g，竹叶15g，莲叶20g和莲籽心5g；制备方法为：将所有的原料药进行混合，混合均匀后加入清水进行浸泡2小时，然后熬制2小时，过滤得到滤液，即为中药制剂。

脊髓灰质炎病毒灭活试验

一、经广东省微生物分析检测中心监测本发明的实施例2得到的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的脊髓灰质炎病毒灭活率试验，广东省微生物分析检测中心的检验报告(2020fm01541r01)如表1和表2所示：

1、悬液定量鉴定试验结果见下表1：

表1悬液定量鉴定试验结果

2、病毒灭活试验结果见下表2：

表2病毒灭活试验结果

结论：本发明实施例2的促进肿瘤细胞溶解的软化剂对脊髓灰质炎病毒的灭活率为90.37％。

二、经广东省微生物分析检测中心监测本发明的实施例3得到的促进肿瘤细胞溶解的软化剂的脊髓灰质炎病毒灭活率试验，广东省微生物分析检测中心的检验报告(2020fm01541r04)如表3和表4所示：

1、悬液定量鉴定试验结果见下表3：

表3悬液定量鉴定试验结果

2、病毒灭活试验结果见下表2：

表2病毒灭活试验结果

结论：本发明实施例3的促进肿瘤细胞溶解的软化剂对脊髓灰质炎病毒的灭活率为99.99％以上。

动物试验

试验一、2017年4月，经日本弘前大学医学部韩方研究会进行试验，研究本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂在动物体内环境下的杀毒效果

试验对象：小白鼠

实验所使用的病毒类型：流感病毒(influenzavirus)

试验方法：1.使用提取器将培养好的流感病毒提取出来；2.将提取出来的流感病毒注射进实验鼠的胸腺附近；3.使用电磁波测量实验鼠胸腺周围的变化；4.向实验鼠体内插入输送管利用同位素标记法对实验鼠胸腺周围进行荧光标记；5.将标记后的实验鼠放至暗室的物理电子显微镜下拍摄电镜照片；6.使用提取器提取本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂，调整浓度(将原液稀释10倍)；7.将调整好浓度的软化剂注射进实验鼠的胸腺周围；8.注射完成后，同时注射抗生素，进一步防止胸腺细胞遭到破坏；9.一段时间后，再次将实验鼠放入暗室的物理电子显微镜下拍摄电镜照片。

试验结果：将提取出来的流感病毒注射进实验鼠的胸腺附近后，胸腺会分泌出免疫物质进行抵抗，然而还是有大量病毒残留；第一次将标记后的实验鼠放至暗室的物理电子显微镜下拍摄电镜照片如图1所示，其中，紫色为流感病毒，绿色为免疫物质，红色为胸腺细胞；再次将实验鼠放入暗室的物理电子显微镜下拍摄电镜照片如图2所示，其中红色部分为胸腺细胞基本全部保留，紫色部分的流感病毒及绿色部分的免疫物质全部消失。

以上试验说明，本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂具有杀毒能力；在一定浓度范围内比胸腺分泌的免疫物质更具有杀毒效力；配合抗生素的使用能更好的保护器官不受影响。

试验二、2017年5月，经日本弘前大学医学部韩方研究会进行试验，研究本发明的促进肿瘤细胞溶解的软化剂注射进动物体内后对动物大脑的影响及对癌细胞的溶解作用

试验对象：小白鼠

试验方法：1.向小白鼠体内注射同试验一浓度相同(10倍稀释)的本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂，通过脑固定解剖工具提取完整的老小白鼠大脑；2.清除提取的老鼠大脑周边的其他杂质后放入显微镜下调整；3.利用同位素标记法使用物理高倍电子显微镜对老鼠大脑进行综合分析；4.提取癌细胞；5.将提取的癌细胞注射进小白鼠大脑的右侧；6.将含有癌细胞的小白鼠大脑培养至肿瘤增大；7.在肿瘤部位注射进5倍稀释的本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂，与不注射软化剂相比较，观察肿瘤情况。

试验结果：

注射10倍稀释的本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂，利用同位素标记法使用物理高倍电子显微镜对小白鼠大脑的综合分析结果如图3-6，图3可看出小白鼠大脑各个皮层未发现异常，图4可看出小白鼠大脑各神经回路连接正常，图5可看出小白鼠大脑神经元的树突和轴突、神经纤维未发现异常，图6可看出小白鼠大脑神经细胞体未发现异常；因此，向小白鼠体内注射10倍稀释的本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂对人体大脑没有影响。

注射5倍稀释的本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂后，小白鼠的肿瘤情况如图7所示，未注射软化剂，小白鼠的肿瘤情况如图8所示；将未注射软化剂和注射软化剂后肿瘤随时间的变化进行比较，结果如图9所示；从而得出，不注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂下，肿瘤的面积会在1小时内迅速增长1.55倍左右，之后变化不大；注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂下，肿瘤的面积在1小时内增长不大，4小时后甚至还有被溶解的迹象。

试验三、2017年6月，经日本弘前大学医学部韩方研究会进行试验，研究本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂对癌细胞的溶解作用

试验对象：胸腺癌细胞

试验方法：1.提取含有胸腺癌细胞的血液；2.将提取出来的癌细胞血液放至培养皿内培养；3.将培养皿放至高倍物理电子显微镜下观察胸腺癌细胞的活性；4.向含有胸腺癌细胞的培养皿内注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂，为了防止空气内其他物质混入，采取密封式注射；5.将注射好软化剂的培养皿再次放入高倍物理电子显微镜下观察；6.24小时后，为了更好的只显示软化剂与癌细胞的分布，采取黑白解像度的电镜照片。

试验结果：胸腺癌细胞的电镜图如图10所示；注射本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂后，软化剂立即包围了整个癌细胞如图11所示，软化剂溶解癌细胞的过程的电镜图如图12所示；第24小时软化剂与癌细胞的分布电镜图如图13所示，第24小时软化剂和胸腺癌细胞分布的扩大图如图14所示，可以发现第24小时胸腺癌细胞的数量明显减少，软化剂的范围已经大于癌细胞的范围。

结论：本发明促进肿瘤细胞溶解的软化剂对胸腺癌细胞具有溶解作用。

本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。