本发明涉及中药制备技术领域，尤其涉及一种蛇胆川贝液的生产工艺。
背景技术：
蛇胆，是蛇体内贮存胆汁的胆囊。所有的蛇胆都可入药。蛇胆治病最灵效的是：清热解毒，祛风祛湿，明目清心；特别是急性风湿性关节炎、肺热咳嗽、胃热疼痛、肝热目赤、皮肤热毒等患者，疗效极为显著；用蛇胆治外痔，以麻油调涂至患处，二三日即可见效；对于未溃的疼痛、腮腺炎、淋巴结肿大等，涂用蛇胆后，即可消炎止痛；疥疮，顽皮癣、神经性皮炎等皮肤类疾病，经常涂抹蛇胆，也可收到很好的疗效。
川贝，拉丁学名：fritillariacirrhosa，川贝母是一味名贵中药材。药用始载于明代的《滇南本草》一书。其主要功用适用于外感风热咳嗽、肺虚久咳、痰少咽燥等症的良药，具有镇咳、祛痰、降压、抗菌等作用。
蛇胆川贝液为现代研制方，是一种常用的著名中成药，用于风热咳嗽，痰多，气喘，胸闷，咳痰不爽或久咳不止。现有的蛇胆川贝液制备方法存在原料加工处理方式不合理、制备工艺流程相对较简单等缺陷，因此，制备的蛇胆川贝液在卫生、澄明度以及原料有效成分的利用率方面有待提高。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提出一种蛇胆川贝液的生产工艺，目的是优化制备工艺，保证卫生标准及澄明度要求。
基于上述目的，本发明提供了一种蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量50％以上的白酒中，经密封存储、除胆衣收集蛇胆汁、蛇胆汁与等量浸泡酒液配液、一次过滤、灭菌、二次过滤后得蛇胆汁处理液；
步骤三、将蔗糖制成单糖浆；
步骤四、将蜂蜜加纯化水加热沸腾溶解后炼至透明清亮，过滤后输送至配液罐中；
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆加入配液罐中，经搅拌、加热沸腾后加入杏仁腈溶液，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灭菌；
其中，每升蛇胆川贝液中，包括平贝母提取物70-80g、蛇胆汁处理液8-12g、蜂蜜75-85g、单糖浆550-570g和杏仁腈溶液25-35ml。
因蛇胆汁除含胆汁酸等有效成份外，还含有大量的粘液质，蛋白质，壁细胞，细菌等无效杂质和异物，有些还含有虫卵。蛇胆汁处理拟采用过滤-灭菌-过滤，剔除杂质及异物，保证产品卫生及澄明度。
作为一种可选的实施形式，所述步骤一中平贝母提取物的制备方法是将粉碎后的平贝母用75-85％的乙醇回流提取两次，第一次加3-4倍量的75-85％乙醇，浸润30-40min，蒸汽加热至80-85℃提取2-3h，过滤得第一次滤液；第二次加2-2.5倍量的75-85％乙醇，加热至80-85℃提取1.5-2h，过滤得第二次滤液，合并第一次滤液与第二次滤液，在25℃条件下浓缩成流浸膏。
优选的，所述步骤二中蛇胆与白酒的质量比为1:1，密封存储的温度不超过20℃，存储时间不超过两个月。
优选的，所述步骤二和步骤三中的过滤均采用板框式过滤器进行过滤。能够有效过滤杂质。
所述步骤三还包括在单糖浆中添加有防腐剂，每升蛇胆川贝液中含有防腐剂1-1.5g。防腐剂优选采用苯甲酸钠。
优选的，所述步骤五中灭菌采用加热至100-110℃高温灭菌。采用高温灭菌的方式进行灭菌，有效保证蛇胆川贝液中无活性细菌及虫卵等，保证卫生需求，同时还能够延长保存时间。
优选的，所述步骤五中通过冷冻机组对加热沸腾后的配液罐降温，当降温至80℃时，添加所述杏仁腈溶液。通过此种优化的工艺步骤设置，提高蛇胆川贝液有效成分的疗效。
优选的，所述步骤五的配液罐中在加热沸腾后还添加有薄荷脑，每升蛇胆川贝液中含有0.1-0.2g。
优选的，所述步骤一中平贝母提取物的制备方法是采用超临界co2提取法提取收集。采用超临界co2提取法相对溶剂提取法具有更高的提取率。
采用超临界co2提取法提取平贝母提取物的方法是先经平贝母粉碎，之后装入超临界萃取釜中，超临界萃取釜中，萃取温度为30～40℃，co2流体压力为25～35mpa，夹带剂乙醇流速0.3～0.4ml/min，萃取时间2～3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中100g平贝母粉末萃取后需用20～30ml甲醇吸收，吸收液用ab-8大孔树脂层析柱层析，层析速度为每小时两个柱床体积流速，层析后先用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50％乙醇洗层析柱，再用浓度逐渐增大的乙醇溶液阶段洗脱，流速为0.8-1.5ml/min，收集洗脱液得到平贝母洗脱液，真空浓缩后透析2-3d，冻干得得到主要成份为贝母总生物碱的平贝母提取物。所述乙醇溶液阶段洗脱的浓度为80％、90％、95％。收集洗脱液为收集90％乙醇溶液洗脱液。
优选的，所述生产工艺还包括对灌装、灭菌后的蛇胆川贝液依次进行灯检、包装的步骤。灌装采用玻璃瓶灌装，灯检的目的是保证灯检后的产品无装量不够、扎盖不紧、破损瓶、有玻屑、絮状物、沉淀、焦屑等异物等不合格品。
本发明的有益效果：
1、采用本发明的生产工艺制得的蛇胆川贝液，能够保证卫生标准及澄明度需求，能够有效祛风止咳，除痰散结，用于风热咳嗽，痰多，气喘，胸闷，咳痰不爽或久咳不止。
2、采用本发明的生产工艺，能够有效去除蛇胆中的粘液质，壁细胞，细菌，虫卵等无效杂质和异物。
3、超临界萃取可以在接近室温(35～40℃)及co2气体笼罩下进行提取，有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散。因此，在萃取物中保持着平贝母的有效成分。超临界co2流体萃取总生物碱提取率约为93％，乙醇溶剂提取总生物碱提取率约为86％，超临界co2流体萃取法优于溶剂提取法。
具体实施方式
为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本公开进一步详细说明。
需要说明的是，除非另外定义，本说明书的实施例使用的技术术语或者科学术语应当为本公开所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。“包括”或者“包含”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同，而不排除其他元件或者物件。
实施例1
一种蛇胆川贝液，每升蛇胆川贝液中包括组分：
平贝母提取物75g、蛇胆汁处理液10g、蜂蜜80g、单糖浆560g、杏仁腈溶液30ml、苯甲酸钠1.5g和薄荷脑0.15g。
该蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；平贝母提取物的制备方法是将粉碎后的平贝母用80％的乙醇回流提取两次，第一次加3倍量的80％乙醇，浸润30-40min，蒸汽加热至80℃提取3h，过滤得第一次滤液；第二次加2倍量的80％乙醇，加热至80℃提取2h，过滤得第二次滤液，合并第一次滤液与第二次滤液，在25℃条件下浓缩成流浸膏。
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量52％的白酒中，蛇胆与白酒的质量比为1:1g/g，用塑料桶密封好，放置阴凉处，温度不超过20℃，防止酒精挥发。最长保存时间为两个月，两个月内投料入成品中。使用时，除去胆衣，压干胆衣中胆汁，收集胆汁，连同等量酒液配液，之后经过一次过滤、灭菌、二次过滤后得蛇胆汁处理液；其中，过滤采用板框式过滤器进行过滤，过滤过程中采用三层滤纸+一层绸布/单面板。
步骤三、将化糖罐的海底阀关上，打开化糖罐纯化水阀门，将纯化水放至水面快要把搅拌桨全部淹没时，关掉纯水阀，开启蒸汽阀，将纯化水加热至沸腾，再开启搅拌，打开真空阀门，将蔗糖加入到化糖罐，加热充分溶解后炼成单糖浆。
步骤四、将蜂蜜加入到炼蜜罐中，加与蜂蜜等重量的纯化水适量,加热沸腾充分溶解后炼至透明清亮,用装有两层滤纸的板框式过滤器过滤后输送至配液罐中。
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆加入配液罐中，经搅拌、加热沸腾后，通过冷冻机组降温至80℃时，加入杏仁腈溶液和薄荷脑，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灭菌，灯检，包装。
实施例2
一种蛇胆川贝液，每升蛇胆川贝液中包括组分：
平贝母提取物70g、蛇胆汁处理液8g、蜂蜜75g、单糖浆550g、杏仁腈溶液25ml、苯甲酸钠1.3g和薄荷脑0.12g。
该蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；平贝母提取物采用超临界co2提取法提取，其方法是先经平贝母粉碎，之后装入超临界萃取釜中，超临界萃取釜中，萃取温度为35℃，co2流体压力为30mpa，夹带剂乙醇流速0.35ml/min，萃取时间2.5h，萃取物在25℃条件下浓缩成流浸膏。
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量52％的白酒中，蛇胆与白酒的质量比为1:1g/g，用塑料桶密封好，放置阴凉处，温度不超过20℃，防止酒精挥发。最长保存时间为两个月，两个月内投料入成品中。使用时，除去胆衣，压干胆衣中胆汁，收集胆汁，连同等量酒液配液，之后经过一次过滤、灭菌、二次过滤后得蛇胆汁处理液；其中，过滤采用板框式过滤器进行过滤，过滤过程中采用三层滤纸+一层绸布/单面板。
步骤三、将化糖罐的海底阀关上，打开化糖罐纯化水阀门，将纯化水放至水面快要把搅拌桨全部淹没时，关掉纯水阀，开启蒸汽阀，将纯化水加热至沸腾，再开启搅拌，打开真空阀门，将蔗糖加入到化糖罐，加热充分溶解后炼成单糖浆。
步骤四、将蜂蜜加入到炼蜜罐中，加与蜂蜜等重量的纯化水适量,加热沸腾充分溶解后炼至透明清亮,用装有两层滤纸的板框式过滤器过滤后输送至配液罐中。
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆加入配液罐中，经搅拌、加热沸腾后，通过冷冻机组降温至80℃时，加入杏仁腈溶液和薄荷脑，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灭菌，灯检，包装。
实施例3
一种蛇胆川贝液，每升蛇胆川贝液中包括组分：
平贝母提取物75g、蛇胆汁处理液10g、蜂蜜80g、单糖浆560g、杏仁腈溶液30ml、苯甲酸钠1.5g和薄荷脑0.15g。
该蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；平贝母提取物采用超临界co2提取法提取，其方法是先经平贝母粉碎，之后装入超临界萃取釜中，超临界萃取釜中，萃取温度为35℃，co2流体压力为30mpa，夹带剂乙醇流速0.35ml/min，萃取时间3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中100g平贝母粉末萃取后需用25ml甲醇吸收，吸收液用ab-8大孔树脂层析柱层析，层析速度为每小时两个柱床体积流速，层析后先用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50％乙醇洗层析柱，再用浓度逐渐增大的乙醇溶液阶段洗脱，流速为1.0ml/min，收集洗脱液得到平贝母洗脱液，真空浓缩后透析2d，每天换3次水，以除去小分子杂质，并冻干得得到主要成份为贝母总生物碱的平贝母提取物。其中，乙醇溶液阶段洗脱的浓度为80％、90％、95％。收集洗脱液为收集90％乙醇溶液洗脱液。
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量52％的白酒中，蛇胆与白酒的质量比为1:1g/g，用塑料桶密封好，放置阴凉处，温度不超过20℃，防止酒精挥发。最长保存时间为两个月，两个月内投料入成品中。使用时，除去胆衣，压干胆衣中胆汁，收集胆汁，连同等量酒液配液，之后经过一次过滤、灭菌、二次过滤后得蛇胆汁处理液；其中，过滤采用板框式过滤器进行过滤，过滤过程中采用三层滤纸+一层绸布/单面板。
步骤三、将化糖罐的海底阀关上，打开化糖罐纯化水阀门，将纯化水放至水面快要把搅拌桨全部淹没时，关掉纯水阀，开启蒸汽阀，将纯化水加热至沸腾，再开启搅拌，打开真空阀门，将蔗糖加入到化糖罐，加热充分溶解后炼成单糖浆。
步骤四、将蜂蜜加入到炼蜜罐中，加与蜂蜜等重量的纯化水适量,加热沸腾充分溶解后炼至透明清亮,用装有两层滤纸的板框式过滤器过滤后输送至配液罐中。
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆加入配液罐中，经搅拌、加热沸腾后，通过冷冻机组降温至80℃时，加入杏仁腈溶液和薄荷脑，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灭菌，灯检，包装。
实施例4
一种蛇胆川贝液，每升蛇胆川贝液中包括组分：
平贝母提取物80g、蛇胆汁处理液12g、蜂蜜85g、单糖浆570g、杏仁腈溶液35ml、苯甲酸钠1.5g和薄荷脑0.18g。
该蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；平贝母提取物采用超临界co2提取法提取，其方法是先经平贝母粉碎，之后装入超临界萃取釜中，超临界萃取釜中，萃取温度为40℃，co2流体压力为35mpa，夹带剂乙醇流速0.4ml/min，萃取时间2h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中100g平贝母粉末萃取后需用30ml甲醇吸收，吸收液用ab-8大孔树脂层析柱层析，层析速度为每小时两个柱床体积流速，层析后先用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50％乙醇洗层析柱，再用浓度逐渐增大的乙醇溶液阶段洗脱，流速为1.2ml/min，收集洗脱液得到平贝母洗脱液，真空浓缩后透析2d，每天换3次水，以除去小分子杂质，并冻干得得到主要成份为贝母总生物碱的平贝母提取物。其中，乙醇溶液阶段洗脱的浓度为80％、90％、95％。收集洗脱液为收集90％乙醇溶液洗脱液。
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量52％的白酒中，蛇胆与白酒的质量比为1:1g/g，用塑料桶密封好，放置阴凉处，温度不超过20℃，防止酒精挥发。最长保存时间为两个月，两个月内投料入成品中。使用时，除去胆衣，压干胆衣中胆汁，收集胆汁，连同等量酒液配液，之后经过一次过滤、灭菌、二次过滤后得蛇胆汁处理液；其中，过滤采用板框式过滤器进行过滤，过滤过程中采用三层滤纸+一层绸布/单面板。
步骤三、将化糖罐的海底阀关上，打开化糖罐纯化水阀门，将纯化水放至水面快要把搅拌桨全部淹没时，关掉纯水阀，开启蒸汽阀，将纯化水加热至沸腾，再开启搅拌，打开真空阀门，将蔗糖加入到化糖罐，加热充分溶解后炼成单糖浆。
步骤四、将蜂蜜加入到炼蜜罐中，加与蜂蜜等重量的纯化水适量,加热沸腾充分溶解后炼至透明清亮,用装有两层滤纸的板框式过滤器过滤后输送至配液罐中。
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆加入配液罐中，经搅拌、加热沸腾后，通过冷冻机组降温至80℃时，加入杏仁腈溶液和薄荷脑，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灭菌，灯检，包装。
对比例1
一种蛇胆川贝液，每升蛇胆川贝液中包括组分：
平贝母提取物75g、蛇胆汁处理液10g、蜂蜜80g、单糖浆560g、杏仁腈溶液30ml、苯甲酸钠1.5g和薄荷脑0.15g。
该蛇胆川贝液的生产工艺，包括如下步骤：
步骤一、取平贝母经粉碎、提取后得平贝母提取物；平贝母提取物的制备方法是将粉碎后的平贝母用80％的乙醇回流提取，加3倍量的80％乙醇，浸润30min，蒸汽加热至80℃提取3h，过滤得滤液在25℃条件下浓缩成流浸膏。
步骤二、将蛇胆装入盛有含醇量52％的白酒中，蛇胆与白酒的质量比为1:1g/g，用塑料桶密封好，放置阴凉处，温度不超过20℃，防止酒精挥发。最长保存时间为两个月，两个月内投料入成品中。使用时，除去胆衣，压干胆衣中胆汁，收集胆汁，连同等量酒液配液，之后经过过滤后得蛇胆汁处理液；其中，过滤采用板框式过滤器进行过滤，过滤过程中采用三层滤纸+一层绸布/单面板。
步骤三、将化糖罐的海底阀关上，打开化糖罐纯化水阀门，将纯化水放至水面快要把搅拌桨全部淹没时，关掉纯水阀，开启蒸汽阀，将纯化水加热至沸腾，再开启搅拌，打开真空阀门，将蔗糖加入到化糖罐，加热充分溶解后炼成单糖浆。
步骤四、将蜂蜜加入到炼蜜罐中，加与蜂蜜等重量的纯化水适量,加热沸腾充分溶解后炼至透明清亮,用装有两层滤纸的板框式过滤器过滤后输送至配液罐中。
步骤五、将平贝母提取物、蛇胆汁处理液、单糖浆、杏仁腈溶液在炼蜜罐中加热后输送入配液罐中，混匀得蛇胆川贝液，之后进行灌装，灯检，包装。
对上述各实施例鉴别试验：
(1)取本品40ml，用10％氢氧化钠溶液调节ph值至12以上，用氯仿振摇提取2次，每次25ml，合并氯仿提取液，备用；调节以上水溶液的ph值至2，以用水饱和的正丁醇振摇提取3次(20、20、10ml)，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次(20、15ml)，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取蛇胆汁对照药材适量，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照药材溶液。再取牛磺胆酸钠对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照簿层色谱法(中国药典1995年版一部附录vib)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一新制备的硅胶g薄层板上，在五氧化二磷真空干燥器中放置过夜后，以甲苯-异丙醇-甲醇-冰醋酸-水(8：4：3：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取(1)项下的氯仿提取液，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取平贝母对照药材2g，用80％乙醇加热回流2小时，滤过，滤液置水浴上蒸至近干时移入分液漏斗中，用浓氨溶液调至碱性，用氯仿振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录vib)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶g薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-浓氨试液(12：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，依次喷以稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果表明，本发明制备的蛇胆川贝液符合生产标准。
以总生物碱提取率为评价指标，通过比较两种提取方法的优越性，预试试验结果表明乙醇溶剂提取总生物碱提取率约为86％，超临界co2流体萃取总生物碱提取率约为93％，超临界co2流体萃取法优于溶剂提取法。
通过实验测试结果表明，实施例3和实施例4制得的蛇胆川贝液澄明度相对更好，实施例2次之，实施例1再次之，对比例1的澄明度相对较差一些。从提取纯度及提取率而言，实施例3的配方相对更符合生产工艺需求。
所属领域的普通技术人员应当理解：以上任何实施例的讨论仅为示例性的，并非旨在暗示本公开的范围(包括权利要求)被限于这些例子；在本公开的思路下，以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组合，步骤可以以任意顺序实现，并存在如上所述的本说明书实施例的不同方面的许多其它变化，为了简明它们没有在细节中提供。
本说明书的实施例旨在涵盖落入所附权利要求的宽泛范围之内的所有这样的替换、修改和变型。因此，凡在本说明书实施例的精神和原则之内，所做的任何省略、修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。