一种吗替麦考酚酯冻干制剂及其制备方法与流程

1.本发明涉及一种吗替麦考酚酯的高水溶性组合物，属于药物制剂领域。


背景技术：

2.吗替麦考酚酯由罗氏(roche)制药公司研制开发，吗替麦考酚酸(mycophenolicacid，mpa)的2一乙基酯类衍生物，为一种免疫抑制剂，可抑制t淋巴细胞、b淋巴细胞中嘌呤的合成，对增殖的淋巴细胞有很高的选择作用，还能通过直接抑制细胞增殖来抑制抗体的形成。临床上主要用于预防同种肾移植患者的排斥反应和治疗难治性排斥反应，可与环孢素和肾上腺皮质激素同时应用。mmf是一种前药，在体循环中检测不到mmf，代谢为活性成分mpa。化学名为：(e)-6-(4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-1,3-二氢异苯并呋喃-5-基)-4-甲基-4-己烯酸2-(吗啉-4-基)乙酯，1995年5月，吗替麦考酚酯(cellcept)在美国首次获准作为免疫抑制治疗用于同种肾移植。它代替硫唑嘌呤加入经典的“激素+硫唑嘌呤+环孢素”三联疗法后，使对移植肾存活影响最大的急性排斥发生率一下减少了50％，毒性反应明显下降。之后分别在1998年2月、2000年8月和2001年12月获准用于心脏、肝脏和儿童肾移植。目前，该药品已在美国、欧盟、日本、加拿大等40多个国家上市，广泛用于肾脏及心脏移植术后器官排斥的预防和难治性排斥反应的治疗。与现有药品相比，吗替麦考酚酯最大的优点是没有肝脏、肾脏、神经毒性等不良反应。目前为止，还未出现严格意义上的替代产品。
3.吗替麦考酚酯的水溶性差，在ph 7.4的水溶液中溶解度约为43μg/ml，随着ph降低，在酸性介质中溶解度增大，在ph 3.6时约为4.27mg/ml，对于口服困难的患者通常采用静脉给药的方式，而在临床静脉给药过程中吗替麦考酚酯的浓度通常在6mg/ml，人体血液的ph为7.35～7.45之间，因此仅通过降低溶液ph提高吗替麦考酚酯的溶解度会导致在药物进入体内后析出，产生巨大的安全性风险。
4.现有技术手段通常采用盐酸酸化吗替麦考酚酯成盐，并加入表面活性剂吐温80来提高溶解度。吐温80，又名聚山梨酯80，偶有关于聚山梨酯用于局部和肌注时出现过敏的报道，聚山梨酯也与一些严重不良反应有关，包括在低体重新生儿身上静脉注射含有聚山梨酯20和聚山梨酯80混合物的维生素e制剂时，有导致死亡的报道。当加热至分解时，聚山梨酯散发出辛辣和刺激性的烟气。吐温80的静注毒性中等、胃肠道摄取毒性中等、对眼有刺激性。为实验性致癌物，对生殖有影响。有致突变的报道。


技术实现要素：

5.为解决现有技术在保证吗替麦考酚酯静脉注射制剂的溶解度时无法兼顾其安全性的问题，发明人进行了深入研究。结果意外发现采用一种注射剂中常用的安全可靠的药用助剂-磺丁基倍他环糊精来提高吗替麦考酚酯的溶解性和稳定性，且在稀释、配伍和用药过程中不会产生药物析出和刺激血管的风险。
6.本发明涉及一种环糊精包合的吗替麦考酚酯冻干制剂组合物和制备方法，以吗替
麦考酚酯为活性成分，药用级别的磺丁基倍他环糊精钠、盐酸、枸橼酸钠、氢氧化钠和注射用水为辅料，经过溶解、酸化、过滤、调节ph值、定容、过滤、灌装、冷冻干燥、冲入无菌氮气，轧盖制备而得的安全稳定的制剂。本发明的技术方案如下：
7.所述的吗替麦考酚酯冻干制剂的药物组合物，其特征在于含有吗替麦考酚酯、增溶剂磺丁基倍他环糊精钠和其他药用辅料，其中吗替麦考酚酯与磺丁基倍他环糊精钠的重量比为1:2.5～1:3.5，且组合物具有特定的ph值。
8.所述的药物组合物，其特征在于冻干制剂的药物组合物的ph值为3.3～3.9。
9.吗替麦考酚酯，如下式(ⅰ)结构：
[0010][0011]
增溶剂磺丁基倍他环糊精钠，如下式(ⅱ)结构：
[0012][0013]
所述的药物组合物，其特征在于吗替麦考酚酯与磺丁基倍他环糊精钠的重量比为1:2.5～1:3.5。
[0014]
所述的组合物，其特征在于磺丁基倍他环糊精钠的取代度为6.5。
[0015]
所述组合物，其中还包含药用助剂盐酸、枸橼酸钠、氢氧化钠和注射用水。
[0016]
且该组合物用处方量体积的注射用水复溶，配制成含吗替麦考酚酯为40mg/ml浓度的液体时，其ph值为2.7～4.1。
[0017]
所述组合物的制备过程包含但不限于如下步骤：
[0018]
(1)首先将2.5～3.5份质量的磺丁基倍他环糊精钠加入至16份质量的注射用水中，搅拌溶解，然后加入1份质量的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入0.014份质量的枸橼酸钠和2份质量的1mol/l盐酸溶液，维持溶液温度30～40℃，搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，根据溶液ph以1mol/l盐酸或1mol/l氢氧化钠调节ph值至3.3～3.9，最后加入注射用水至溶液总质量为25.25份，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，盖上溴化丁基胶塞，保持为半开状态。
[0019]
(2)将盛有药液的西林瓶转移至冷冻干燥箱内，以-0.25℃/min的速率降温至制品-8～-16℃，优选为-12℃，并在此温度保持120min。
[0020]
(3)以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，并在此温度保持240min。
[0021]
(4)开启真空泵，控制干燥箱真空压力至0.1mbar～0.3mbar，以0.04℃/min的速率升温至制品-14～-18℃，并在此温度保持600min～1000min。
[0022]
(5)控制干燥箱真空压力至0.02mbar～0.05mbar，，以0.04℃/min的速率将制品降温至45℃，并在此温度保持240～360min。
[0023]
(6)开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至3～5mbar，压塞。
[0024]
(7)待真空箱内压力恢复至常压，出料，轧盖，即得本静脉注射用组合物。
[0025]
进一步地步骤(4)升温至制品温度为-14～-18℃，并在此温度保持700min～900min。
[0026]
进一步地步骤(5)中控制干燥箱真空压力至0.2mbar～0.3mbar，升温至制品-14～-16℃，并在此温度保持并在此温度保持280～320min。
[0027]
按照上述方法制备的吗替麦考酚酯药物组合物，以5％葡萄糖注射液稀释至含吗替麦考酚酯为3mg～60mg/ml时均不会有固体析出，且在8小时内稳定。
[0028]
按照上述方法制备的药物组合物在原有玻璃瓶包装内，40℃以下保存至少6个月和30℃以下保存至少36月后降解产物总计不会超过1.0％，符合标准要求。
[0029]
与现有技术相比，本发明具有如下优点和有益效果：
[0030]
(1)本发明制备的组合物通过加入磺丁基倍他环糊精钠增溶助剂，并探索出吗替麦考酚酯与磺丁基倍他环糊精钠的重量比为1:2.5～1:3.5，且组合物在特定的ph值下可使难溶性的吗替麦考酚酯充分溶解；
[0031]
(2)本发明的制备的组合物稳定性好，在储存、稀释和静脉注射过程中不会导致活性成分吗替麦考酚酯析出，且不会产生刺激血管的风险；
[0032]
(3)本发明的制备方法还避免了现有技术中使用吐温80在静脉给药时存在的安全隐患，大大提高用药安全性。
具体实施方式
[0033]
在寻求安全性和提高药物溶解度的过程中采取了各种方法，其中静脉滴注用冻干组合物为具有足够的溶解度和稳定性。
[0034]
本发明使用的磺丁基倍他环糊精商品名为：取代度为6.5，结构如下：
[0035][0036]
毒理学数据表明，大鼠分别静脉注射剂量为1000、5000、10000mg/kg的一
个月，血清的脂质生化水平都在正常范围，未出现病理学病变。长期静脉注射150、750、3750mg/kg的一个月，血清的脂质生化水平也都在正常范围。静脉注射后，主要分布在肾脏中，由于含有硫酸根离子，它可以在被肾小球过滤后保持离子化，不经过肾小球重吸收，直接排出体外。是一种无药理活性，且安全无毒性的辅料。
[0037]
目前，fda的dmf中收录的毒理安全性数据资料超过70卷，支持使用用于注射用药制剂以及其他给药途径。
[0038]
配合使用磺丁基倍他环糊精钠的溶液中吗替麦考酚酯的溶解度数据如表1所示：
[0039]
表1：不同浓度的磺丁基倍他环糊精钠溶液的吗替麦考酚酯溶解度
[0040][0041]
实施例1：
[0042]
将1250g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1000g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.9，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0043]
冷冻干燥过程：
[0044]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-16℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0045]
升华：真空度0.3mbar，以0.04℃/min的速率升温至制品-18℃，保温800min；
[0046]
解析干燥：真空度0.02mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持240min。
[0047]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至5mbar，压塞，出料。
[0048]
实施例2：
[0049]
将1250g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1000g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.6，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0050]
冷冻干燥过程：
[0051]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-14℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0052]
升华：真空度0.3mbar，以0.04℃/min的速率升温至制品-16℃，保温700min；
[0053]
解析干燥：真空度0.03mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持300min。
[0054]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至3mbar，压塞，出料。
[0055]
实施例3：
[0056]
将1500g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1000g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.3，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0057]
冷冻干燥过程：
[0058]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-8℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0059]
升华：真空度0.1mbar，以0.04℃/min的速率升温至制品-14℃，保温600min；
[0060]
解析干燥：真空度0.05mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持320min。
[0061]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至4mbar，压塞，出料。
[0062]
实施例4：
[0063]
将1750g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1000g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.5，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0064]
冷冻干燥过程：
[0065]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-12℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0066]
升华：真空度0.2mbar，以0.04℃/min的速率降温至制品-16℃，保温1000min；
[0067]
解析干燥：真空度0.03mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持360min。
[0068]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至4mbar，压塞，出料。
[0069]
对比实施例1：
[0070]
将600g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入10g枸橼酸钠和1200g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.9，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0071]
冷冻干燥过程：
[0072]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-16℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0073]
升华：真空度0.3mbar，以0.04℃/min的速率升温至制品-18℃，保温800min；
[0074]
解析干燥：真空度0.02mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持240min。
[0075]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至5mbar，压塞，出料。
[0076]
对比实施例2：
[0077]
将800g磺丁基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦
考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1200g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.6，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0078]
冷冻干燥过程：
[0079]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-14℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0080]
升华：真空度0.3mbar，以0.04℃/min的速率降温至制品-16℃，保温700min；
[0081]
解析干燥：真空度0.03mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持300min。
[0082]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至3mbar，压塞，出料。
[0083]
对比实施例3：
[0084]
将3500g羟丙基倍他环糊精钠加入8000g注射用水中，搅拌溶解，加入500g的吗替麦考酚酯，搅拌均匀，接着加入7g枸橼酸钠和1000g的1mol/l盐酸溶液，30～40℃搅拌30min后经0.45μm孔径的pes滤芯滤过，以1mol/l盐酸调节ph至3.5，最后加入注射用水至12.625kg，搅拌均匀，经串联的两级0.22μm孔径的pes滤芯滤过，灌装至无菌西林瓶中，冻干，即得。
[0085]
冷冻干燥过程：
[0086]
预冻：以-0.25℃/min的速率降温至制品-12℃，保温120min；以-0.2℃/min的速率将制品降温至-45℃，保温240min。
[0087]
升华：真空度0.2mbar，以0.04℃/min的速率降温至制品-16℃，保温1000min；
[0088]
解析干燥：真空度0.03mbar，以0.04℃/min的速率将制品升温至45℃保持360min。
[0089]
出料：开启复压阀充入无菌氮气至箱内压力至4mbar，压塞，出料。
[0090]
本发明的药物组合物复溶时间对比
[0091]
以复溶时间、复溶后外观、不溶性微粒、ph、含量等质量指标对本发明的实施例和对比实施例质量进行比较，结果见表2。
[0092]
表2：实施例和对比实施例质量比较
[0093]
检样品含量(％)水分(％)复溶时间复溶后外观不溶性微粒ph实施例199.50.34秒无色澄清溶液合格3.5实施例2100.20.43秒无色澄清溶液合格3.4实施例3100.00.43秒无色澄清溶液合格3.5实施例499.60.44秒无色澄清溶液合格3.5对比实施例180.50.3＞5min乳白色浑浊液不合格4.6对比实施例287.40.5＞5min无色澄清溶液不合格4.2对比实施例398.53.525秒无色澄清溶液合格4.6
[0094]
模拟临床给药，将本组合物以5％的葡萄糖注射液稀释至不同浓度，考察稳定性和安全性。结果见表3。
[0095]
表3：5％的葡萄糖注射液稀释稳定性和安全性比较(配伍后4小时测定)
[0096][0097]
上述研究结果证明，各实施例的复溶时间，不同浓度的稳定性，不溶性微粒，及溶血刺激性的安全性指标均显著优于对比实施例。
[0098]
本发明的药物组合物的质量稳定性研究：考察了上述实施例的制剂在中硼硅玻璃管制注射剂瓶内，30℃rh65％环境36个月和加速试验40℃rh75％的条件下6个月的关键质量属性，结果见表4。
[0099]
表4：实施例制剂稳定性结果统计
[0100][0101]
稳定性数据结果证明本发明所述组合物质量稳定，溶解性好，各项质量指标符合要用要求。
[0102]
本发明所列举的实施例仅为本发明解决现有技术不足内容的列举，实施例仅用于例证，不限制本发明的范围，在权利要求范围内的修改都是本发明的保护范围。