1.本发明涉及辐照灭菌领域，具体涉及一种体外循环血路的辐照灭菌方法。
背景技术：
2.体外循环血路主要由透析器接口、导血管、气体捕获器、过滤网、肝素管、泵管、泵管接头、导管夹、采样口、测压器、内圆锥接头、外圆锥接头、锁口接头、冲洗接头、保护套、三通接头、四通接头、透析器侧口接头、预冲针、预冲器、瓶塞穿刺器、贮液袋、加热袋、螺旋式外圆锥接头、补液转换接口、滴斗、变径接头、传感器保护器、连接件与导管连接等部件组装构成。产品由动脉管、静脉管、置换管、输液加热管、吸附连接管、滤出压力传感通道连接管及血液净化附件根据临床治疗模式配置成整套的体外循环血路。
3.在体外循环血路制备过程中如果灭菌不彻底，可能会引发生物学危害，例如：(1)体外循环血路未在洁净环境中生产，极易引入微粒物质和微生物污染，例如，细菌内毒素会对无内毒素管的检验结果产生不良影响；(2)体外循环血路制备过程中工艺和生产环境不当，所用的溶解水纯度没达到要求，产品不经灭菌或未达到预期的灭菌效果，队徽导致采血管内液体发生霉变；(3)体外循环血路灭菌不彻底，会造成产品污染，在使用过程中发生血液逆流导致病人发生败血症。
4.随着辐照灭菌的逐渐推广，医疗器材领域也可是逐渐使用辐照灭菌工艺。伽马射线和电子束辐照的穿透力强，无菌保证水平可达到10
‑6，并且辐照时间短，灭菌效果显著。
5.值得说明的是，辐照腔室一般集中设置，与体外循环血路生产基地有一定的距离。因此，体外循环血路通常是生产完成之后再运输到辐照腔室进行灭菌处理。同时，针对一次性的体外循环血路，其机械性能要求一般都不是很高，若辐照剂量过大或者辐照时间较长时，会影响到体外循环血路的性能。因此，现有技术中辐照灭菌的有效性是建立在标准的灭菌过程控制之上的，根据《gb 18280.2
‑
2015医疗保健产品灭菌辐射第2部分建立灭菌剂量(iso 11137
‑
2:2006)》的要求，确定出同一批生产工艺下体外循环血路的最佳剂量要求。针对该最佳剂量，如果体外循环血路在生产后到辐照灭菌前，因运输时间长等原因造成采血管表面微生物繁殖过渡，超出已设定的初始污染菌水平，则已建立的灭菌剂量将失效，需要重新进行灭菌剂量的设定。然而，灭菌剂量的设定需要耗费大量的时间和工艺，并且运输过程中采血管表面微生物的繁殖情况并不确定，进而无法确定辐照的最佳剂量；若都采用提前设定的最佳剂量，并不能对同一批次所有的体外循环血路实现相同效果的灭菌。
技术实现要素：
6.针对现有技术的不足，本发明的目的旨在提供一种体外循环血路的辐照灭菌方法。
7.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种体外循环血路的辐照灭菌方法，包括如下步骤：
8.s01：将体外循环血路浸泡在抑菌溶液中；
9.s02：将浸泡后的体外循环血路烘干，使得体外循环血路内表面和外表面形成一层抑菌膜；
10.s03：将体外循环血路整体密封包装运输至辐照基地；
11.s04：将所述体外循环血路进行超声清洗并烘干；
12.s05：对所述体外循环血路进行单独密封包装；
13.s06：将包装后的体外循环血路进行辐照灭菌，辐照灭菌的剂量为8
‑
20kgy。
14.进一步的，所述步骤s01中采用压板将体外循环血路完全压入液体槽内保持24
‑
48h并捞出，所述液体槽内部填充所述抑菌溶液。
15.进一步的，所述步骤s02和步骤s04中体外循环血路在烘箱中于60
‑
80℃下烘干。
16.进一步的，所述抑菌溶液包括以下重量份的组分：白术提取物5
‑
8份，芦荟素5
‑
8份，硫酸银0.5
‑
1份，表面活性剂2
‑
4份，乳酸0.5
‑
1份和去离子水78
‑
87份。
17.进一步的，所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮。
18.进一步的，所述抑菌溶液的制备方法包括如下步骤：
19.s011：将白术提取物和芦荟素加入去离子水中，搅拌均匀形成提取液溶液；
20.s012：在所述提取液溶液中添加表面活性剂和乳酸，搅拌均匀；
21.s013：加入硫酸银溶液并搅拌均匀，形成抑菌溶液。
22.进一步的，所述步骤s04具体包括：
23.s041：所述体外循环血路进行第一次超声清洗；
24.s042：所述体外循环血路进行第二次超声清洗；
25.s043：所述体外循环血路在烘箱中于60
‑
80℃下烘干。
26.进一步的，所述第一次超声清洗中所应用的清洗液和所述第二次超声清洗中所应用的清洗液均为去离子水。
27.进一步的，所述多孔纳米硅的粒径为50
‑
70nm。
28.进一步的，所述步骤s06中采用
60
钴γ射线进行辐照灭菌。
29.本发明的有益效果在于：本发明创造性地在体外循环血路生产完成之后，在其表面涂覆抑菌膜，该抑菌膜可以很好地抑制体外循环血路运输过程中外表面的微生物繁殖，进而保证同一批体外循环血路在最佳剂量辐照下均能达到预设的灭菌效果；其次，在运输至辐照腔室且未进行辐照灭菌之前，将抑菌膜超声清洗去除，确保体外循环血路的正常使用。
具体实施方式
30.下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述：
31.本发明的核心思想在于：在体外循环血路生产完成之后，运输至辐照腔室所在地之前，在体外循环血路的外表面涂覆一层抑菌膜；并在运输至辐照腔室后，辐照灭菌之前清楚该抑菌膜，并进行包装。本发明中抑菌膜具有如下作用：在体外循环血路从生产基地到辐照基地的运输过程中，抑制体外循环血路外面微生物的繁殖。体外循环血路的外表面与空气接触，若其表面在生产过程存在微生物，则在长时间运输过程中，无法控制微生物的繁殖情况，就有可能如背景技术中所述出现微生物繁殖超标，使得提前设定的最佳剂量与实际微生物数量不匹配的情况，进而造成辐照灭菌效果不理想。本发明中抑菌膜的存在，可以确
保在运输过程中，外表面的微生物繁殖速度受限，从而确保运输前和运输后体外循环血路外表面的微生物差别不大，使得在提前设置的最佳辐照剂量下，体外循环血路可以实现完全灭菌。
32.在体外循环血路正常使用过程时需要将抑菌膜完全融掉，这是因为体外循环血路内部的抑菌膜会对循环的血液造成一定的影响；因此，本发明在运输至辐照腔室一侧的体外循环血路需要进行超声清洗，配合本发明中超声清洗液，将抑菌膜溶解掉，确保其在灭菌之后可以正常使用。
33.本发明中抑菌溶液包含白术提取物、芦荟素、硫酸银、表面活性剂和乳酸，其中，白术提取物、芦荟素和银离子均具有杀菌效果，三者配合实用可以起到明显的抑菌效果。抑菌溶液中加入乳酸可以使得溶液呈酸性，使得后续加入的银离子更加容易溶解；抑菌溶液中表面活性剂选用聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯吡咯烷酮可以和银离子漯河，使银离子在溶液中更加稳定，不易析出。
34.本发明中超声清洗中所应用的清洗液包括多孔纳米颗粒、十二烷基硫酸钠、乙二醇正丁醚、苯酚、异丙醇和水。含有多孔纳米颗粒的清洗液可以有效清除及吸附体外循环血路中被溶解的抑菌膜杂质，提高灭菌效果。第一次超声清洗的主要作用是溶解并去除体外循环血路中的抑菌膜，因为抑菌膜中成分本身就是水溶性的，在水溶性的超声清洗液中可以将其溶解并去除。第二次超声清洗的主要作用是进一步去除体外循环血路中的其他附着的杂质，因为在第一次超声清洗的时候，清洗液中可能会含有抑菌溶液中成分，第二超声清洗确保抑菌膜溶解之后的体外循环血路可以被再次超声清洗干净，进而保证包装之后的体外循环血路的洁净度。
35.本发明针对体外循环血路的初次包装可以采用整体密封的形式进行，因为运输至辐照腔室一侧时还需要进行超声清洗，无需对体外循环血路一个个进行单独包装；直至超声清洗并烘干之后的体外循环血路再进行单独密封包装，此时的体外循环血路经过灭菌之后即可出厂使用，需要进行单独的密封包装。
36.以下通过具体实施例对本发明辐照灭菌方法进行进一步解释说明：值得说明的是本发明中辐照剂量是根据同一批次的体外循环血路的材质和制备工艺提前测定的最佳剂量，具体的测定方法可以采用现有技术中方法进行，在此不做详细介绍。下述实施例中所采用的体外循环血路的最佳辐照剂量为12kgy；针对其他批次的体外循环血路，其最佳辐照剂量可以具体测定，范围一般保持在8
‑
20kgy。
37.实施例1
38.一种体外循环血路的辐照灭菌方法，包括如下步骤：
39.s01：采用压板将体外循环血路完全压入液体槽内保持24h并捞出，液体槽内部填充所述抑菌溶液。其中，抑菌溶液的制备方法具体包括如下步骤：
40.s011：将5kg白术提取物和8kg芦荟素加入83.5kg去离子水中，搅拌均匀形成提取液溶液；其中，本发明中采用的白术提取物为西安雨诺生物工程有限公司提供的白术提取物；本发明中采用的芦荟素为湖北实顺生物科技有限公司提供的芦荟素粉末。
41.s012：在提取液溶液中添加聚乙烯吡咯烷酮2kg和乳酸0.5kg，搅拌均匀；
42.s013：加入硫酸银溶液1kg并搅拌均匀，形成抑菌溶液。
43.s02：将浸泡后的体外循环血路在烘箱中于60℃下烘干；使得体外循环血路外表面
形成一层抑菌膜；
44.s03：将体外循环血路整体密封包装运输至辐照基地；
45.s04：将体外循环血路进行超声清洗并烘干；具体包括：
46.s041：对体外循环血路进行第一次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为10分钟；第一次超声中所应用的清洗液为去离子水；
47.s042：对体外循环血路进行第二次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为2分钟；第二次超声中所应用的清洗液为去离子水；
48.s043：对体外循环血路在烘箱中于60℃下烘干。
49.s05：对体外循环血路进行单独密封包装；
50.s06：将包装后的体外循环血路进行辐照灭菌，其中，采用
60
钴γ射线进行辐照处理并输出，辐照剂量为12kgy。
51.实施例2
52.一种体外循环血路的辐照灭菌方法，包括如下步骤：
53.s01：采用压板将体外循环血路完全压入液体槽内保持48h并捞出，液体槽内部填充所述抑菌溶液。其中，抑菌溶液的制备方法具体包括如下步骤：
54.s011：将8kg白术提取物和5kg芦荟素加入81.5kg去离子水中，搅拌均匀形成提取液溶液；
55.s012：在提取液溶液中添加聚乙烯吡咯烷酮4kg和乳酸1kg，搅拌均匀；
56.s013：加入硫酸银溶液0.5kg并搅拌均匀，形成抑菌溶液。
57.s02：将浸泡后的体外循环血路在烘箱中于80℃下烘干；使得体外循环血路外表面形成一层抑菌膜；
58.s03：将体外循环血路整体密封包装运输至辐照基地；
59.s04：将体外循环血路进行超声清洗并烘干；具体包括：
60.s041：对体外循环血路进行第一次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为10分钟；第一次超声中所应用的清洗液为去离子水；
61.s042：对体外循环血路进行第二次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为2分钟；第二次超声中所应用的清洗液为去离子水；
62.s043：对体外循环血路在烘箱中于80℃下烘干。
63.s05：对体外循环血路进行单独密封包装；
64.s06：将包装后的体外循环血路进行辐照灭菌，其中，采用
60
钴γ射线进行辐照处理并输出，辐照剂量为12kgy。
65.实施例3
66.一种体外循环血路的辐照灭菌方法，包括如下步骤：
67.s01：采用压板将体外循环血路完全压入液体槽内保持24h并捞出，液体槽内部填充所述抑菌溶液。其中，抑菌溶液的制备方法具体包括如下步骤：
68.s011：将7kg白术提取物和6kg芦荟素加入82.4kg去离子水中，搅拌均匀形成提取液溶液；
69.s012：在提取液溶液中添加聚乙烯吡咯烷酮3kg和乳酸0.8kg，搅拌均匀；
70.s013：加入硫酸银溶液0.8kg并搅拌均匀，形成抑菌溶液。
71.s02：将浸泡后的体外循环血路在烘箱中于70℃下烘干；使得体外循环血路外表面形成一层抑菌膜；
72.s03：将体外循环血路整体密封包装运输至辐照基地；
73.s04：将体外循环血路进行超声清洗并烘干；具体包括：
74.s041：对体外循环血路进行第一次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为10分钟；第一次超声中所应用的清洗液为去离子水；
75.s042：对体外循环血路进行第二次超声清洗；超声功率为80w，超声频率为30khz，超声功率密度为7.1w
·
cm
‑2，超声时间为2分钟；第二次超声中所应用的清洗液为去离子水；
76.s043：对体外循环血路在烘箱中于70℃下烘干。
77.s05：对体外循环血路进行单独密封包装；
78.s06：将包装后的体外循环血路进行辐照灭菌，其中，采用
60
钴γ射线进行辐照处理并输出，辐照剂量为12kgy。
79.对比例1
80.与实施例3相比，本对比例的区别仅在于：步骤s01中抑菌溶液为等体积的去离子水。
81.实验例1
82.分别在采用实施例1
‑
3和对比例1方法辐照灭菌后的体外循环血路中随机抽取100个样品。在100级净化工作台内进行如下操作：准备400个培养皿(共4组，每组100个培养皿)，无菌操作注入同种类且相同体积的牛肉膏琼脂培养基，然后无菌打开包装，用灭菌剪刀、镊子等将体外循环血路完全插入至牛肉膏琼脂培养基中，接着将培养皿放置在32℃恒温培养箱中培养14天。之后统计各组培养基中的菌落数量，若培养皿中的菌落数量小于1，则认定其灭菌合格；若培养皿中的菌落数量大于等于1，则认定其灭菌不合格，统计每组培养皿的灭菌合格率。统计结果如表1所示。
83.表1不同组体外循环血路的灭菌合格率
84.项目灭菌合格率(％)实施例1100实施例2100实施例3100对比例197
85.由于对比例1中体外循环血路没有抑菌膜的沉积和清洗，而在运输至辐照灭菌腔室之前并没有经过严格的灭菌工艺，在运输过程中，体外循环血路表面的细菌存在繁殖超标的情况，从而使得在预设好的最佳辐照剂量下并不能达到完全灭菌的效果；对比例1中随机抽选的100个体外循环血路中就存在三个在辐照灭菌之后没有完全灭菌的现象；本发明的目的就在于杜绝这种运输过程中细菌繁殖超标的现象，确保最佳辐照剂量下可以实现百分百的灭菌效果，如表1中所述，采用本发明方法最终形成的体外循环血路的灭菌合格率可以达到100％。
86.对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。