一种含有NMN的改善更年期症状的药物组合物的制作方法

一种含有nmn的改善更年期症状的药物组合物
技术领域
1.本发明创造属于制药技术领域，尤其是涉及一种含有nmn的改善更年期症状的药物组合物。


背景技术：

2.女性更年期综合征是指女性在绝经前后，由于性激素含量的减少导致的一系列精神及躯体表现，如植物神经功能紊乱、生殖系统萎缩等，还可能出现一系列生理和心理方面的变化，如焦虑、抑郁和睡眠障碍等。女性更年期综合征多见于46～50岁的女性，近年来有发病年龄提早、发病率上升的趋势。
3.目前，对于更年期综合征的质量普遍采用的治疗方法为“激素替代疗法”，即通过给患者添加人工合成的激素，比如克龄蒙、尼尔雌醇、炔雌醇等作替代治疗，但短期服用这些人工合成激素效果明显，但是长期服用会对机体产生诸多毒副作用，比如子宫肌瘤、子宫内膜异位症、更年期功血，严重容易诱发子宫内膜癌与乳腺癌等恶性肿瘤。另外，近几年出现的副作用较小的激素类药物，虽然能明显减少毒副作用，但是对于服用人群的要求较多，且对服药剂量要求非常严格。
4.故研发一种效果明显的治疗妇女更年期综合症的药物是本领域技术研发人员的重要课题之一。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明创造旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种含有nmn的改善更年期症状的药物组合物及其制备方法。
6.为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：
7.一种含有nmn的改善更年期症状的药物组合物，包括nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物以及其他药学上可接受的辅料，所述碱蓬提取物由碱蓬地上部分的茎和嫩芽以及碱蓬籽提取而得，所述罗汉果提取物由罗汉果果瓤和罗汉果果皮提取而得。
8.优选的，所述nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物的质量比为1：(50
‑
300)：(10
‑
200)。
9.优选的，所述nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物的质量比为1：(150
‑
200)：(50
‑
150)。
10.优选的，所述nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物的质量比为1：150：120。
11.优选地，所述碱蓬提取物的制备方法包括如下步骤：
12.(1)分别取碱蓬的地上部分的茎和嫩芽原料研磨后加入有机试剂并混合均匀；
13.(2)对混合物进行超声破壁操作后加入乙醇水溶液作为提取溶剂，采用热回流提取法提取，提取次数2～4次，合并提取液，过滤后对提取液进行浓缩回收乙醇，至浓缩液呈稠膏后干燥至固态得到提取物a；
14.(3)将干燥后的碱蓬籽粉碎与纤维素酶充分混合进行酶解后，加入3
‑
5倍体积量的水进行煮沸处理，高温灭酶后抽滤，收集滤液后进行减压浓缩；
15.(4)将浓缩的滤液中加入2
‑
3倍的95％乙醇浸提，将浸提液置于微波中处理10min
后，进行抽滤，收集滤液，加压浓缩、干燥即得提取物b；
16.(5)将提取物a和提取物b混合研磨即得碱蓬提取物。
17.优选的，所述提取物a和提取物b的质量比为(2
‑
10)：(5
‑
20)。
18.优选地，所述提取物a和提取物b的质量比为(2
‑
5)：(5
‑
15)。
19.优选的，所述罗汉果提取物的制备方法包括如下步骤：
20.(1)将罗汉果果瓤粉末或鲜罗汉果果皮细胞培养物中分别加入质量浓度为40％
‑
60％的乙醇后混合均匀，分别经过超声破壁后得到c液和d液；
21.(2)向c液和d液液加入5
‑
10倍体积的纯水，在80
‑
120℃的条件下浸提得到浸提产物e和浸提产物f；
22.(3)浸提产物e和浸提产物f分别离心或抽滤进行固液分离并保留液体得到预处理产物m和预处理产物n；
23.(4)将预处理产物m和预处理产物n以(1
‑
10):1的质量比混合，浓缩后并冻干即得罗汉果提取物。
24.优选的，所述预处理产物m与预处理产物n重量份数比为7：1。
25.本发明还提供一种上述含有nmn的改善更年期症状的药物组合物的制备方法，包括如下步骤：
26.称取配方量的nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物混合即得药物组合物；在药物组合物中加入适量的药学上可接受的辅料并制剂成型即得。
27.在本发明中，术语“药学上可接受的辅料”包括药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂等，它们与药物活性成分相容。运用药学上可接受的辅料制备药物制剂对本领域普通技术人员来说是公知的。
28.本发明将药物组合物和药学上可接受的辅剂(如本领域普通技术人员所熟知的载体、赋形剂、稀释剂等)组合在一起，配制成各种制剂，优选为固体制剂和液体制剂，如片剂、丸剂、胶囊、粉剂、混悬剂、颗粒剂、糖浆剂、乳液剂、悬浮液等剂型以及各种缓释剂型，优选以口服给药形式。
29.本发明还提供了一种如上述所述的药物组合物用于改善更年期症状的应用。
30.相对于现有技术，本发明创造具有以下优势：
31.本发明创造所述的药物组合物中各组分采用适宜的配伍比例，协同发挥作用，改善更年期症状。发明人意外地发现将碱蓬的地上部分的茎和嫩芽以及碱蓬籽作为提取原料以及罗汉果的果瓤和果皮作为提取原料，同时以适宜的配比混合提取，能够显著提高药效。
具体实施方式
32.除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
33.下面结合实施例来详细说明本发明创造。
34.实施例1碱蓬提取物的制备
35.(1)分别取碱蓬的地上部分的茎和嫩芽原料研磨后加入有机试剂并混合均匀；
36.(2)对混合物进行超声破壁操作后加入乙醇水溶液作为提取溶剂，采用热回流提
取法提取，提取次数4次，合并提取液，过滤后对提取液进行浓缩回收乙醇，至浓缩液呈稠膏后干燥至固态得到提取物a；
37.(3)将干燥后的碱蓬籽粉碎与纤维素酶充分混合进行酶解后，加入5倍体积量的水进行煮沸处理，高温灭酶后抽滤，收集滤液后进行减压浓缩；
38.(4)将浓缩的滤液中加入3倍的95％乙醇浸提，将浸提液置于微波中处理10min后，进行抽滤，收集滤液，加压浓缩、干燥即得提取物b；
39.(5)将提取物a和提取物b以1:2的质量比混合研磨即得碱蓬提取物。
40.实施例2罗汉果提取物的制备
41.(1)将罗汉果果瓤粉末或鲜罗汉果果皮细胞培养物中分别加入质量浓度为40％
‑
60％的乙醇后混合均匀，分别经过超声破壁后得到c液和d液；
42.(2)向c液和d液加入5倍体积的纯水，在100℃的条件下浸提得到浸提产物e和浸提产物f；
43.(3)浸提产物e和浸提产物f分别离心或抽滤进行固液分离并保留液体得到预处理产物m和预处理产物n；
44.(4)将预处理产物m和预处理产物n以7:1的质量比混合，浓缩后并冻干即得罗汉果提取物。
45.实施例3药物组合物的制备
46.表1药物组合物成分表
47.组别nmn/g碱蓬提取物/g罗汉果提取物/g1115012021150503120015041501051300200
48.按照表1分别按比例混合nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物配置药物组合物1、2、3、4、5。
49.另外，为验证碱蓬提取物和罗汉果提取物的复配效果，增加了6
‑
11组药物组合物的制备，其具体的成分表见表2。
50.表2药物组合物成分表
51.[0052][0053]
注：辅料不是本发明重点，因此在实验中不添加，只考察提取物与nmn之间的关系。
[0054]
试验例睡眠改善试验
[0055]
取健康昆明种小鼠，体重20
±
2g小鼠140只，随机分为14组，每组10只，雄雌各5只。分别将药物组合物1
‑
11溶于0.5ml生理盐水，按表1和表2的顺序灌胃，给药剂量为：以nmn质量300ng/只/天计，同时增加nmn对照组和空白对照组，nmn对照组为只灌胃nmn，给药剂量为300ng/只/天，空白对照组为每日用0.5ml/g生理盐水灌胃。连续给药5天。末次药后1h，以35mg/kg的剂量小鼠灌胃给药戊巴比妥钠，以翻正反射消失为指标，记录小鼠睡眠时间。试验结果见表3。
[0056]
表3睡眠时间实验结果
[0057][0058][0059]
注：与空白对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01
[0060]
从表3中可以看出，本发明的中药组合物均能明显延长睡眠时间，改善睡眠质量。从6
‑
11组的数据与1
‑
5组的数据对比可以看出，将nmn与碱蓬提取物、罗汉果提取物复配给药，明显优于单独nmn给药，同时，保证nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物适当的比例还可达到更优的效果。综上，本发明中药组合物在改善更年期患者的睡眠质量方面具有优异的疗效。
[0061]
试验例sod活性和mda含量试验
[0062]
动物分组和处理
[0063]
取健康二级雌性昆明种小鼠，体重20
±
2g小鼠140只，随机分为14组，每组10只。分
别将药物组合物1
‑
11溶于0.5ml生理盐水，按表1和表2的顺序灌胃，给药剂量为：以nmn质量300ng/只/天计,同时腹腔注射d
‑
半乳糖，注射剂量为0.3mg/g；nmn对照组为灌胃nmn，给药剂量为300ng/只/天，同时腹腔注射d
‑
半乳糖，注射剂量为0.3mg/g；空白对照组为每日用0.3ml/g生理盐水灌胃，同时腹腔注射生理盐水，注射剂量为0.3mg/g。模型组为每日用0.3ml/g生理盐水灌胃，同时腹腔注射d
‑
半乳糖，注射剂量为0.3mg/g。连续给药60天。
[0064]
测定方法
[0065]
取小鼠的脑组织样品，按1:5的比例加入生理盐水，在水浴环境下匀浆，以1500r/min离心10分钟，取上清液20微升，测定脑组织中sod活性和mda含量，试剂盒购自南京建成生物研究所，组织蛋白测定使用考马斯亮兰试剂盒，按照说明书使用。测试结果见表4。
[0066]
表4各组小鼠脑组织mda含量与sod活性的测试数据
[0067]
组别mda(nmol/mg)sod(u/ml)114.09
±
2.09
**
135
±
13.11
**
216.21
±
1.95
*
130
±
14.64
*
315.77
±
3.07
*
131
±
13.98
*
415.31
±
1.30
*
127
±
18.10
**
518.06
±
1.64
**
130
±
17.90
**
618.91
±
1.82
*
128
±
15.33719.70
±
2.33
*
120
±
16.37
**
819.64
±
2.90
*
121
±
16.91
*
920.11
±
1.56
*
123
±
19.55
*
1022.43
±
1.71
*
119
±
18.07
**
1121.20
±
2.14
*
119
±
16.41
*
nmn对照组22.90
±
3.03
**
115
±
15.97
**
空白对照组23.84
±
1.94
**
103
±
16.13
*
模型组25.11
±
1.73
##
115
±
18.01
##
[0068]
注：与正常对照比较，
##
p＜0.01；与模型组比较，
*
p＜0.05，
**
p＜0.01。
[0069]
由表4结果可见，本发明的中药组合物mda含量较对照组都有所下降，sod活性均低于对照组。从6
‑
11组的数据与1
‑
5组的数据对比可以看出，将nmn与碱蓬提取物、罗汉果提取物复配给药，明显优于单独nmn给药，同时，保证nmn、碱蓬提取物、罗汉果提取物适当的比例还可达到更优的效果。综上，本发明中药组合物能明显增强机体内sod的活性，清除过多的自由基，而可能阻止自由基对细胞及其基质的损害。
[0070]
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。