技术特征:
1.一种人源性血红蛋白类氧载体的制备方法,其包括:(1)将人源血液进行清洗、破膜、有机溶剂萃取,取水相,离心,取上清液,得到血红蛋白溶液;(2)调节反应体系的ph为7
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9,向所述血红蛋白溶液中加入浓度为1.5
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2.5mol/l的赖氨酸,和终浓度为0.5
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2%(w/v)的酶活保护剂,搅拌并加入浓度为0.5
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1.5%(w/v)的戊二醛,其中,戊二醛与血红蛋白的摩尔比为(10
‑
20):1,赖氨酸与血红蛋白的摩尔比为(5
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10):1;(3)2℃
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25℃的反应温度下进行聚合反应,反应时间2
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6小时;(4)加入浓度为1.5
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2.5mol/l的赖氨酸终止反应,其中,赖氨酸与血红蛋白的物质的量之比为(180
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220):1;(5)离心,取上清液,获得人源性血红蛋白类氧载体溶液。2.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述酶活保护剂选自海藻糖、葡萄糖、甘露醇、羟丙基
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β
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环糊精和蔗糖中的至少一种。3.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤(2)中,赖氨酸、戊二醛与血红蛋白的摩尔比为(6.5
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7.5):(15
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20):1。4.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤(2)中,反应体系的ph为7
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8。5.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤(3)中,反应温度为2℃
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6℃。6.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤(3)中,反应时间为2
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4小时。7.根据权利要求1
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6中任一项所述的制备方法,其中,还包括所述人源性血红蛋白类氧载体的精制:(6)将所述人源性血红蛋白类氧载体溶液经2
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6℃,2500
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3500rpm离心15
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30分钟;(7)取上清液进行超滤离心,其中,超滤离心的条件包括:超滤离心管的截留分子量为50
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100kd,离心温度2
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6℃,转速2500
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3500rpm,离心时间15
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30分钟;(8)重复超滤离心5
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7次;(9)取上清液,于生理盐水中进行透析,透析温度2
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6℃,透析时间20
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30小时。8.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤(1)和步骤(5)的离心条件各自独立地包括:离心温度2
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6℃,转速6000
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10000rpm,离心时间30
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60分钟。9.采用权利要求1
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8中任一项所述的方法制备的人源性血红蛋白类氧载体。10.采用权利要求1
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8中任一项所述的方法制备的人源性血红蛋白类氧载体作为血液代用品的用途。