牙痛停滴丸在制备治疗口腔溃疡药中的应用的制作方法

1.本发明属于制药领域，特别是涉及牙痛停滴丸在制备治疗口腔溃疡药中的应用。


背景技术：

2.口腔溃疡，是一种常见的发生于口腔黏膜的溃疡性损伤病症，多见于唇内侧、舌头、舌腹、颊黏膜、前庭沟、软腭等部位，这些部位的黏膜缺乏角质化层或角化较差。口腔溃疡发作时疼痛剧烈，局部灼痛明显，严重者还会影响饮食、说话和休息，并可并发口臭、烦躁、发热、淋巴结肿大等全身症状。
3.目前，有一些糖皮质激素类药物用于口腔溃疡，但糖皮质激素类药物的副作用，使患者不乐于接受。


技术实现要素：

4.本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种安全性高的牙痛停滴丸在制备治疗口腔溃疡药中的应用。
5.本发明的技术方案概述如下：
6.牙痛停滴丸在制备治疗口腔溃疡药中的应用。
7.本发明的优点：
8.实验证明，牙痛停滴丸可以使口腔溃疡创面明显变红、收缩，愈合，且疼痛感明显降低，直至完全恢复。
附图说明
9.图1为牙痛停滴丸对大鼠口腔溃疡的大体形态影响图。
10.图2为牙痛停滴丸对大鼠口腔溃疡病理组织形态的影响图。
具体实施方式
11.下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明。
12.实施例1
13.牙痛停滴丸治疗口腔溃疡作用研究：
14.1实验材料
15.1.1实验动物
16.sd大鼠，雄性，体重240
±
20g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：scxk(京)2016
‑
0006。
17.饲养于中国医学科学院放射医学研究所spf级屏障室，饲养室温度为21
±
2℃，昼夜12小时交替。
18.1.2药品与试剂
19.牙痛停滴丸(天津中新药业集团股份有限公司第六中药厂)生产批号：698010；
20.丁细牙痛胶囊(深圳市泰康制药有限公司)；
21.水合氯醛；
22.冰醋酸(天津市富宇精细化工有限公司，中国)，制成质量浓度80％的醋酸水溶液；
23.4％多聚甲醛固定液。
24.1.3仪器与耗材
25.酶标仪(tecan,infinitem200pro)；
26.显微镜；
27.手术器械、注射器、滤纸片。
28.2实验方法
29.2.1口腔溃疡大鼠模型的制备
30.购置sd实验大鼠(240
±
20g)并适应性饲养1周后，参考文献进行口腔溃疡模型的制备
[1
‑
3]
。
[0031]
具体方法如下：首先将实验大鼠利用水合氯醛麻醉，使用质量浓度80％的醋酸水溶液，使用直径6mm滤纸片，每片滤纸放30ul质量浓度80％的醋酸水溶液，置于大鼠一侧颊黏膜上贴敷烧灼30s，取下。
[0032]
化学灼伤后24h，观察记录溃疡形成情况，大鼠口腔黏膜上出现直经约6mm的溃疡，有局部红肿、溃烂的表现，随着时间的延长，有黄白色伪膜覆盖、中央凹陷、边缘隆起等表现，符合人类口腔溃疡的临床特征，说明大鼠口腔溃疡模型复制成功(见图1)。
[0033]
2.2分组及给药
[0034]
将实验动物分为正常对照组、模型组、牙痛停滴丸高、低剂量组、丁细牙痛胶囊组，每组8只，其中正常对照组贴敷蒸馏水。
[0035]
将各组大鼠用表1的给药方式进行灌胃给药，初步考察牙痛停滴丸治疗口腔溃疡的效果。
[0036]
表1牙痛停滴丸抗口腔溃疡作用分组与给药
[0037][0038]
在治疗大鼠口腔溃疡实验中，临床等效剂量是依据大鼠与人体表面积换算公式进行计算，大鼠的临床等效剂量是21.6mg/kg，配置成2.16mg/ml的水溶液，依据大鼠体重，根据1ml/100g进行灌胃；
[0039]
临床等效4倍剂量是86.4mg/kg，配置成8.64mg/ml的水溶液，依据大鼠体重，根据
1ml/100g进行灌胃。
[0040]
为探究牙痛停滴丸对动物口腔溃疡面表观改善、溃疡面积及愈合时间的影响，对大鼠口腔溃疡表面进行连续观察。连续灌胃给药10天，结果发现，正常对照组口腔粘膜完整、光滑，无明显损伤。实验其他各组溃疡面积随时间的延长均有减少的趋势(见图1)。
[0041]
2.3溃疡大体形态观察
[0042]
游标卡尺测量口腔溃疡面的直径是对其大小进行测量，表2牙痛停滴丸对口腔溃疡直径变化的影响显示的是其具体数值。仅反应其大小，不能反应溃疡面的具体情况，因此依据文献，对溃疡面进行评分。
[0043]
表2牙痛停滴丸对口腔溃疡直径变化的影响
[0044][0045]
注：*p<0.05
[0046]
对不同阶段的溃疡严重情况进行了评分，具体结果见表3。
[0047]
表3牙痛停滴丸对口腔溃疡评分的影响，是依据参考文献的指标评价溃疡的严重情况
[4]
：
[0048]
在大体形态观察实验中，观察溃疡大体形态，包括：红肿、溃烂、黄白色伪膜覆盖、中央凹陷、边缘隆起、溃疡面积、修复程度、愈合时间，拍照记录愈合情况。
[0049]
①
溃疡黏膜红肿；
[0050]
②
溃疡黏膜溃烂；
[0051]
③
溃疡表面有黄白色伪膜覆盖；
[0052]
④
中央凹陷，边缘整齐隆起；
[0053]
⑤
口唇肿胀、流口水；
[0054]
⑥
摄食量减少、体重减轻。
[0055]
对上述表观指标进行量化积分，分三级：无、轻度、显著，分别计0、1、2分。根据这几个指标，每组8只，评估其第1、4、10天的得分。
[0056]
表3牙痛停滴丸对口腔溃疡评分的影响
[0057][0058]
注：*p<0.05
[0059]
结果显示模型组随着时间的延长溃疡评分逐渐降低，显示溃疡有一定自愈情况。与模型组比较，牙痛停滴丸高剂量组评分显著降低，说明牙痛停滴丸给药后溃疡愈合情况更明显。
[0060]
两个数据虽然是反应同一个指标，但是其具体评价方法不一样，因此数据是不一致的。
[0061]
为了进一步评价牙痛停滴丸治疗口腔溃疡的效果，我们用游标卡尺对溃疡面积进行了测量，结果显示与模型组比较，给药干预4
‑
6天时牙痛停滴丸高剂量组溃疡面积减小明显，丁细牙痛胶囊组溃疡面积与模型组无明显差异。给药十天，模型组溃疡表面仍存在假膜，牙痛停滴丸高剂量组基本愈合，丁细牙痛胶囊组溃疡面积略有减小并伴有假膜。结果提示牙痛停滴丸给药后可明显减小口腔溃疡面积。
[0062]
2.4病理组织学检查
[0063]
给药结束后，10％水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射麻醉，切取溃疡部位边缘黏膜组织，4％多聚甲醛固定液中充分固定，梯度酒精脱水，常规石蜡包埋，连续切片(5μm)，行he染色，显微镜下观察大鼠口腔黏膜结构，考察每张切片溃疡部位视野的炎症细胞浸润情况、上皮及血管变化情况。(见图2)。给药四天的口腔黏膜组织染he后可见，正常组黏膜完好，模型组黏膜可见明显假膜，牙痛停滴丸(高剂量)组假膜较模型组较小，显示牙痛停滴丸对口腔溃疡有较好的疗效。
[0064]
2.5统计学方法
[0065]
采用spss 19.0软件进行统计学分析，计量数据以均数
±
标准差表示，愈合时间的比较采用t检验，p＜0.05表明差异具有显著性。
[0066]
3.小结
[0067]
牙痛停滴丸具有明确的促进醋酸灼伤的实验大鼠口腔溃疡愈合的作用，体现在促进溃疡快速愈合，减少红肿溃烂的发生，缓解溃疡病理结构变化。
[0068]
参考文献：
[0069]
[1]刘赟,任思秀,季红健,等.黄氏生肌散治疗大鼠口腔溃疡的实验研究.中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志.2019,27(2):84
‑
6.
[0070]
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‑
10.
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[3]颜彦,陈烈,朱咏絮,等.溃宁散治疗口腔溃疡的动物实验研究.湖北中医杂志
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‑
26.
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[4]中华中医药学会中药实验药理专业委员会.口腔溃疡动物模型制备规范(草案).中药药理与临床.2017；33(6):162
‑
3.