咖啡酸类衍生物在制备治疗淋病药物中的应用

1.本发明涉及抗菌药物领域，具体涉及咖啡酸类衍生物在制备治疗淋病药物中的应用。


背景技术：

2.人类是淋球菌的唯一宿主，感染淋球菌后通常引起性传播疾病，目前淋球菌对大多曾作为经验药物使用的抗生素，如盘尼西林、四环素、磺胺类药、甲氧苄氨嘧啶、(氟代)喹诺酮类和大环内酯类等均进化出了耐药性。
3.头孢曲松是国际公认的一线经验药物，2013
‑
2014年美国头孢曲松耐药率为0.1％，2014年欧洲耐药率为0.25％，2014年澳大利亚头孢曲松耐药率为0.6％，然而我国2013
‑
2015年头孢曲松低敏率已经高达10.8％，由此，头孢曲松作为一线药物的地位被敲响了警钟，不过现如今并没有很好的替代药物进入市场，因此我们急需新的抗菌药物，以预防未来出现的无药可医的局面。
4.植物化学物质是天然存在的一大类化合物，广泛存在于自然界的植物中，根据这些天然化合物结构上的差异，可将其划分为生物碱、萜类化合物及多酚类化合物等几大类。
5.经研究，这些化合物中的某些可以保护生物体免受自由基、病毒、细菌和真菌的侵害，其可通过抑制细菌的粘附和侵染、抑制细菌毒力因子的表达、损伤或破坏细菌细胞膜、抑制细菌生物膜的形成等方式表现出卓越的杀菌抑菌能力，例如小檗碱能有效抑制表皮葡萄球菌的粘附能力和生物膜的形成，源于生姜辛辣油的6
‑
姜酚的可抑制铜绿假单胞菌毒力因子的产生和生物膜的形成。
6.类似的具有抗菌抑菌能力的天然化合物还有很多，可以预见，针对迫在眉睫的淋球菌耐药现状，植物源化学物质具有发展成为有效的、安全的、廉价的新型抗菌剂的巨大潜力。
7.公开号为cn102795953b的中国发明专利申请公开了以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成咖啡酸酰胺衍生物的合成方法及用途，该专利合成的咖啡酸酰胺衍生物对肺炎球菌、大肠杆菌，绿脓杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌具有抑制作用。
8.公开号为cn104823974a的中国发明专利申请公开了一种咖啡酸烷基酯对3种革兰氏阳性菌2种革兰氏阴性菌及1种真菌应用。
9.然而，现有技术对于咖啡酸衍生物能否用于治疗淋病并未有任何报导。


技术实现要素：

10.本发明的目的是提供一种新型的可用于治疗淋球菌引起的感染性疾病的咖啡酸苯乙酯及其衍生物，并且阐述该天然化合物在淋球菌引起的感染性疾病中的应用。该天然化合物对于淋球菌具有极高的抗菌活性，应用前景广阔。
11.本发明采用的具体技术方案如下：
12.式(i)化合物在制备治疗淋病药物中的应用，
[0013][0014]
其中，r1为h或oh；
[0015]
l1为c
1～3
亚烷基或单键；
[0016]
r2为h或羧基；
[0017]
r3为苯基或c
2～5
烯基，所述的苯基或c
2～5
烯基任选被1、2或3个r
a
取代；r
a
为h、f、cl、br、i、ch3、oh、nh2或cn。
[0018]
所述的c
1～3
亚烷基为
‑
ch2‑
、
‑
ch2ch2‑
、
‑
ch
2 ch2ch2‑
或
‑
ch(ch3)ch2‑
。
[0019]
所述的r3为苯基或所述的苯基或任选被1、2或3个卤素取代。
[0020]
所述的r1为oh；l1为
‑
ch2‑
或单键；r2为h；r3为苯基或
[0021]
作为优选，所述式(i)化合物如式(2)～(7)化合物所示：
[0022][0023]
本发明所述的式(i)化合物进一步优选为式(2)～(4)化合物，式(2)～(4)化合物
表现出很强的抗淋球菌活性，最小抑菌浓度分别为32μm和64μm。
[0024]
所述淋病为由淋球菌引起的感染性疾病；所述的淋球菌为对头孢曲松、头孢克肟、阿奇霉素、盘尼西林、环丙沙星或四环素耐药的淋球菌。
[0025]
所述的感染为泌尿生殖道、直肠、咽喉或眼部感染。
[0026]
所述的药物组合物包括本发明所述的式(i)化合物以及药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂，所述的药物制剂为乳剂、凝胶、胶囊、栓剂、片剂、溶剂或混悬液。
[0027]
所述淋病为由淋球菌引起的感染性疾病；所述的淋球菌为对头孢曲松、头孢克肟、阿奇霉素、盘尼西林、环丙沙星或四环素耐药的淋球菌。
[0028]
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝o)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
[0029]
如本文所用，术语“烯基”本身或作为另一个取代基的一部分是指具有至少一个碳
‑
碳双键的直链或支链烃基。具有一个双键的烯基可以表示为
‑
c
n
h
2n
‑1，具有两个双键的表示为
‑
c
n
h
2n
‑3。当一个烯基前面有碳原子数修饰，例如c2‑8时，它表示烯基含有2
‑
8个碳原子。例如，c2‑8烯基的实例可以包括乙烯基，烯丙基，1,2
‑
丁烯基，2,3
‑
丁烯基和丁二烯基等。
[0030]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0031]
(1)本发明化合物作为新型抗菌化合物，与已有抗生素及其衍生物相比较，本发明化合物对耐药菌敏感。
[0032]
(2)本发明化合物作为新型抗菌化合物，本发明化合物不易形成耐药，且经济实惠。
附图说明
[0033]
图1为式(2)化合物以及盘尼西林对淋球菌的时间
‑
杀菌活性。
[0034]
图2为式(2)化合物对淋球菌临床分离株的最小抑菌浓度分布。
具体实施方式
[0035]
在下面的实施例中对本发明的具体实施方案进行详细叙述。这些是对本发明进行说明，而不是对本发明的范围进行限制。除非另有说明，所有的试剂均为从市场上购得。
[0036]
实施例1
[0037]
本发明化合物在体外的活性可根据欧盟药敏实验测试标准(eucast；www.eucast.org)进行评定。
[0038]
根据欧盟药敏实验测试标准，用琼脂板稀释法检测不同病原菌对本发明式(2)化合物～式(7)化合物的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,mic)。从超低温冰箱复苏细菌，接种到含有添加1％vitox gc琼脂平板上，37℃，5％co2，倒置培养14～18h，刮取细菌制备细菌悬液(od
600
＝0.01)，用微量加样器吸取5μl菌液点样在含有各个浓度本发明化合物的平板上，自然风干，在37℃，5％co2条件下培养24～48h，观察并记录mic值。本发明化合物对不同病原菌的mic值如表1所示。
[0039]
表1本发明化合物对不同病原菌的最小抑菌浓度(mic,μm)
[0040][0041]
实施例2
[0042]
过夜培养的淋球菌(atcc 49226)在gc液体培养基中制备为od
600
＝1的菌悬液，取一定量的菌悬液加入12ml含有1％vitox的gc液体培养基中(107cfu/ml)。将其在37℃,200rpm/min的摇床中培养1h后加入式(2)化合物，盘尼西林作为阳性对照。
[0043]
在不同时间点，取样后稀释到合适浓度，吸取稀释后的100μl菌液涂在gc琼脂糖平板上，将平板置于37℃、5％co2的培养箱中培养24
‑
48h，观察并记录克隆数(cfu)。
[0044]
结果如图1所示，结果表示为三次生物学重复结果的平均值
±
sd，虚线表示为检测下限。与盘尼西林对比，在4*mic(4*32μm)和2*mic(2*32μm)浓度下，式(2)化合物能有效的快速杀死淋球菌，而在1*mic(1*32μm)时，亦能在一定程度上杀死淋球菌，1/2*mic(1/2*32μm)的(2)依然能在一定程度上抑制淋球菌的生长，表明式(2)化合物对淋球菌具有良好的杀菌活性。
[0045]
实施例3
[0046]
本发明化合物在体外的活性可根据欧盟药敏实验测试标准(eucast；www.eucast.org)进行评定。
[0047]
根据欧盟药敏实验测试标准，用琼脂板稀释法检测淋球菌临床分离株(n＝100)对本发明式(2)化合物的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,mic)，该100株淋球菌临床分离株包含对头孢曲松、头孢克肟、阿奇霉素、盘尼西林、环丙沙星和四环素耐药的淋球菌。从超低温冰箱复苏细菌，接种到含有添加1％vitox gc琼脂平板上，37℃，5％co2，倒置培养14～18h，刮取细菌制备细菌悬液(od
600
＝0.01)，用微量加样器吸取5μl菌液点样在含有各个浓度本发明化合物的平板上，自然风干，在37℃，5％co2条件下培养24～48h，观察并记录mic值。
[0048]
结果如图2所示，式(2)化合物对淋球菌临床分离株的最小抑菌浓度分布于32μm～64μm，证明临床分离的淋球菌对式(2)化合物均敏感，表明式(2)化合物能有效杀灭淋球菌，
有利于式(2)化合物应用于淋球菌引起的感染性疾病的治疗。