本发明属于漱口水技术领域，具体涉及一种苹果多酚除口臭漱口水及其制备方法。
背景技术：
随着人们生活水平的提高，对美的不断追求，口腔卫生已成为现代人关注的焦点之一。漱口水也称为含漱剂，主要功效在于清洁口腔，掩盖由于细菌或酵母菌分解食物残渣引起的口臭，以及使口腔内留下舒适清爽的感觉。目前，针对口腔问题，一部分漱口水中会添加抗菌素，长期使用会造成口腔菌群失衡以及其他的安全隐患；另一部分漱口水中会添加芳香剂来掩盖口气异味，但这些芳香剂易挥发，因此其除臭效果维持时间较短。cn109125176a公开了一种含茶多酚漱口液及其制备方法，其中茶多酚0.02％～0.03％；菊花提取物0.01％～0.03％；薄荷提取物0.2％～0.9％，制备的漱口液可抑制口腔的细菌繁殖。cn106924095a公开了一种花茶漱口水，其配方中含茉莉花茶、桂花、洋槐花、金银花、荷花等，制得的漱口水能维持清新口气，防止蛀牙产生。
技术实现要素：
本发明的目的是针对上述现有漱口水清除口腔异味不明显，除臭时间短，长期使用会造成口腔菌群失衡等问题，提供一种以苹果为主要原料，使用高速逆流色谱法分离得到绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素等苹果多酚单体，将上述苹果多酚单体进行复配制备天然的清除口臭气的苹果多酚漱口水，该漱口水清除口臭气的效果明显，能长久的保持口气清新，预防龋齿，口感良好且无毒副作用，丰富了苹果多酚的产业应用。
针对上述目的，本发明所采用的苹果多酚漱口水由下述方法制备得到：
1、苹果多酚单体的提取与分离
(1)将干燥的苹果渣粉碎成70～80目的粉末，所得粉末与纯净水按照重量比1:1～2混合，得到渣浆；向渣浆中加入果胶酶和淀粉酶，在45～55℃下酶解30～50分钟；所得酶解液与体积浓度为50％～80％的乙醇水溶液按重量比1:5～6混合，在40～60℃下超声提取20～30分钟，去除滤渣，得到澄清的提取液。
(2)采用高速逆流色谱分离提取液，高速逆流色谱的固定相和流动相由乙酸异丙酯、正丁醇、乙腈、去离子水按体积比5:2:1:7混合后，再加入混合液体积0.1％的乙酸静置分层，其中上相为固定相，下相为流动相；开机预热后，将固定相充满高速逆流色谱仪的分离柱中，然后使其主机转动，再将流动相泵入分离柱内，提取液由进样阀进样，根据检测器谱图收集目标成分流出液，流出液经真空冷冻干燥，得到绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素单体。
2、苹果多酚除口臭漱口水配制
按照质量百分比组成为：绿原酸0.05％～0.08％、儿茶素0.07％～0.1％、根皮苷0.1％～0.2％、花青素0.06％～0.08％、木糖醇1％～3％、山梨酸钾0.1％～0.2％、维生素c0.02％～0.04％、食盐0.1％～0.3％、乙醇5％～8％、甘油8％～10％、去离子水加至100％，将步骤1得到的绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素加入到乙醇中，并加入甘油，搅拌均匀，得到a液；将木糖醇、山梨酸钾、维生素c、食盐完全溶解于去离子水中，得到b液；将a液与b液搅拌混匀，所得混合液装入瓶中，采用微波杀菌处理，冷却后得到苹果多酚除口臭漱口水；
上述步骤1中，优选果胶酶和淀粉酶的加入量分别为渣浆质量的0.03％～0.05％、0.02％～0.03％。
上述步骤1中，进一步优选高速逆流色谱的主机转速为900～1000rpm，流动相的流速为1～3ml/min；检测波长为280nm；分离温度为20～30℃；进样后80～100min收集绿原酸，110～120min收集儿茶素，150～170min收集根皮苷，200～220min收集花青素。
本发明优选苹果多酚除口臭漱口水的质量百分比组成为：所述苹果多酚除口臭漱口水的质量百分比组成为：绿原酸0.06％、儿茶素0.08％、根皮苷0.15％、花青素0.07％、木糖醇2％、山梨酸钾0.1％、维生素c0.03％、食盐0.2％、乙醇7％、甘油8％、去离子水82.31％。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明以苹果为主要原料，使用高速逆流色谱法分离得到绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素等苹果多酚单体，将所得四种多酚单体进行复配制备纯天然的清除口臭气的苹果多酚漱口水，该漱口水清除口臭气的效果明显，能长久的保持口气清新，预防龋齿，口感良好且无毒副作用，丰富了苹果多酚的产业应用。
2、本发明首次利用高速逆流色谱分离苹果多酚，得到的多酚单体产率高，纯度高。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步详细说明，但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
1、苹果多酚单体的提取与分离
(1)选取果径在5cm以下的苹果，腐烂果和杂质不得大于5％；用自来水清洗苹果，除去果实表面附着的泥沙和污物；将苹果榨汁后剩余的苹果渣经过烘干，粉碎成70～80目的粉末，所得粉末与纯净水按照重量比1:1.5混合，得到渣浆；将渣浆中加入渣浆质量0.04％的果胶酶和0.025％的淀粉酶，在50℃下酶解40分钟。所得酶解液与体积浓度为60％的乙醇水溶液按重量比1:6混合，在50℃下超声提取25分钟，去除滤渣，得到澄清的提取液。
(2)采用上海同田生化技术有限公司的tbe-300b高速逆流色谱仪分离提取液，高速逆流色谱的固定相和流动相由乙酸异丙酯、正丁醇、乙腈、去离子水按体积比5:2:1:7混合后，再加入混合液体积0.1％的乙酸，置于分液漏斗中充分振摇后静置分层，其中上相为固定相，下相为流动相；色谱仪开机预热至25℃后，将固定相以20ml/min的流速泵入高速逆流色谱仪的分离柱中，待固定相充满柱体后，缓慢调节主机转速至950r/min，同时以2ml/min的流速向分离柱内泵入流动相，待两相平衡后，将提取液由进样阀进样，检测波长为280nm，分离温度为25℃；根据检测器谱图收集目标成分流出液，进样后80～100min收集绿原酸，110～120min收集儿茶素，150～170min收集根皮苷，200～220min收集花青素。流出液经真空冷冻干燥，得到绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素单体。
同时以乙酸异丙酯、正丁醇、乙腈、去离子水按体积比5:1:2:6的混合液以及正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水＝2:5:2:5的混合液替换上述的乙酸异丙酯、正丁醇、乙腈、去离子水按体积比5:2:1:7的混合液，做对比实验，三种方法得到的多酚单体的得率及纯度见表1。
表1不同溶剂系分离得到多酚单体的得率及纯度
由表1可见，本发明方法得到的多酚单体绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素的产率和纯度均最高。
2、苹果多酚漱口水配制
按照质量百分比组成为：绿原酸0.06％、儿茶素0.08％、根皮苷0.15％、花青素0.07％、木糖醇2％、山梨酸钾0.1％、维生素c0.03％、食盐0.2％、乙醇7％、甘油8％、去离子水82.31％，将步骤1得到的绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素加入到乙醇中，并加入甘油，搅拌均匀，得到a液；将木糖醇、山梨酸钾、维生素c、食盐完全溶解于去离子水中，得到b液；将a液与b液搅拌混匀，所得混合液装入瓶中，采用微波杀菌处理，冷却后得到苹果多酚除口臭漱口水。
实施例2
本实施例的步骤1与实施例1的步骤1相同。本实施例的步骤2中，按照质量百分比组成为：绿原酸0.05％、儿茶素0.07％、根皮苷0.13％、花青素0.06％、木糖醇2％、山梨酸钾0.1％、维生素c0.03％、食盐0.2％、乙醇7％、甘油8％、去离子水82.31％，将步骤1得到的绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素加入到乙醇中，并加入甘油，搅拌均匀，得到a液；将木糖醇、山梨酸钾、维生素c、食盐完全溶解于去离子水中，得到b液；将a液与b液搅拌混匀，所得混合液装入瓶中，采用微波杀菌处理，冷却后得到苹果多酚除口臭漱口水。
实施例3
本实施例的步骤1与实施例1的步骤1相同。本实施例的步骤2中，按照质量百分比组成为：绿原酸0.08％、儿茶素0.1％、根皮苷0.2％、花青素0.08％、木糖醇2％、山梨酸钾0.1％、维生素c0.03％、食盐0.2％、乙醇7％、甘油8％、去离子水82.31％，将步骤1得到的绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素加入到乙醇中，并加入甘油，搅拌均匀，得到a液；将木糖醇、山梨酸钾、维生素c、食盐完全溶解于去离子水中，得到b液；将a液与b液搅拌混匀，所得混合液装入瓶中，采用微波杀菌处理，冷却后得到苹果多酚除口臭漱口水。
为了证明本发明的有益效果，发明人进行了如下实验：
1、除臭率测定实验
将实施例1、2、3所得的漱口水和市售某品牌漱口水进行除臭率测定实验，具体方法为：将漱口水放入顶空瓶中，在通风橱中用密封针将臭味化合物甲硫醚和硫化氢注射顶空瓶中，反应1分钟。按gc-ms设定的条件对臭味物质进行分析，通过测定密封瓶中臭味化合物的峰面积变化说明漱口水对臭味物质的吸附能力，以不添加绿原酸、儿茶素、根皮苷、花青素的漱口水为空白组，每一试验重复三次。实验结果见表2。
表2实施例1～3所得漱口水和市售某品牌漱口水的除臭率
由表2可见，本发明制备的漱口水清除口臭气的效果明显。
2、消口臭实验
将本发明实施例1、2、3所得漱口水和市售某品牌漱口水进行消口臭实验。实验是以含硫的蛋氨酸为基质，加入含口腔细菌的人体唾液，37℃下产生甲硫醇。结果发现当实验基质中加入本发明苹果多酚除口臭漱口水时，2h后甲硫醇开始增加，而加入市售漱口水的实验基质1h后甲硫醇开始增加。由结果可知，本发明所得的漱口水能较长时间地保持口气清新。