一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置的制作方法

本发明涉及生物组织脱细胞技术领域，具体为一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置。

背景技术：

脱细胞化的猪小肠黏膜下层(smallintestinalsubmucosa，sis)主要由i型和iii型胶原构成，同时含有少量的v型和ⅵ型胶原。另外还含有转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β，tgf-β)、碱性成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor-2，fgf-2)、血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，vegf)和糖胺聚糖(glycosaminoglycan，gag)、层粘连蛋白(laminin，ln)、纤连蛋白(fibronectin，fn)等多种细胞外活性组分，几乎没有免疫排斥性，是目前研究最多、有望大规模用于临床的天然细胞外基质材料，该材料通过物理或化学方法进行去细胞处理后，是一种潜在的多孔网状生物活性支架。

现有技术存在以下缺陷与不足：

然而，现有去细胞装置无法实现自动化脱细胞处理，而且人工去细胞耗费人力，耽误时间，不同操作者也很难实现去细胞的标准化，影响批次与批次之间的效果统一。

技术实现要素：

针对现有技术的不足，本发明提供了一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，可以解决现有去细胞装置无法实现自动化脱细胞处理，而且人工去细胞耗费人力，耽误时间，不同操作者也很难实现去细胞的标准化，影响批次与批次之间的效果统一问题；本发明所述的全自动动物组织脱细胞装置，在多连温控磁力搅拌器的基础上，加上可以装不同去细胞试剂和1xpbs的隔间，以及在1xpbs的隔间装上超声波清洗装置用于深度清洗减少试剂残留，有效解决现有去细胞装置无法实现自动化脱细胞处理，而且人工去细胞耗费人力，耽误时间，不同操作者也很难实现去细胞的标准化，影响批次与批次之间的效果统一问题。本一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，结构简单紧凑，易于制造，成本低廉，使用时灵活方便，易于推广应用。

为实现上述的一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置目的，本发明提供如下技术方案：一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，包括温控磁力搅拌器，所述温控磁力搅拌器正面设置有转速调节旋钮，所述转速调节旋钮一侧设置有电源键，所述温控磁力搅拌器顶部设置有加热台，所述加热台正面设置有时间调节旋钮和温度调节旋钮，所述加热台顶部分别固定安装有一号隔间、二号隔间、三号隔间、四号隔间、五号隔间、六号隔间、七号隔间、八号隔间、九号隔间、十号隔间，所述一号隔间、二号隔间、三号隔间、四号隔间、五号隔间、六号隔间、七号隔间、八号隔间、九号隔间、十号隔间内部分别放置有转子，所述温控磁力搅拌器顶部设置有安装架，所述安装架底部设置有横向电动导轨，所述横向电动导轨一端设置有第一滑块，所述第一滑块一侧设置有纵向电动导轨，所述横向电动导轨底部设置有电动伸缩杆，所述电动伸缩杆底端设置有滤筛网，所述滤筛网表面开设有粗过滤孔和细过滤孔，所述三号隔间、四号隔间、六号隔间、七号隔间、十号隔间内部固定分别安装有超声波清洗装置。

优选的，所述温控磁力搅拌器通过导线与外部电源电性连接，所述转速调节旋钮通过导线与温控磁力搅拌器电性连接，所述电源键通过导线与温控磁力搅拌器电性连接，所述加热台通过导线与温控磁力搅拌器电性连接，所述时间调节旋钮通过导线与温控磁力搅拌器电性连接，所述温度调节旋钮通过导线与温控磁力搅拌器电性连接。

优选的，所述加热台呈2x5方阵等距排列，所述加热台的数量为10个。

优选的，所述一号隔间、二号隔间、三号隔间、四号隔间、五号隔间、六号隔间、七号隔间、八号隔间、九号隔间、十号隔间结构、规格尺寸相同。

优选的，所述横向电动导轨通过导线与外部电源电性连接，所述纵向电动导轨通过螺栓固定安装在安装架底部，所述横向电动导轨一端通过第一滑块与纵向电动导轨导轨滑动连接，所述电动伸缩杆顶部通过第二滑块与横向电动导轨导轨滑动连接，所述电动伸缩杆通过导线与外部电源电性连接。

优选的，所述滤筛网通过螺栓固定安装在电动伸缩杆底端，所述滤筛网外径尺寸分别与一号隔间、二号隔间、三号隔间、四号隔间、五号隔间、六号隔间、七号隔间、八号隔间、九号隔间、十号隔间内径尺寸相适配，所述粗过滤孔孔径尺寸大于生物组织外表尺寸，所述细过滤孔孔径尺寸小于生物组织外表尺寸。

优选的，所述超声波清洗装置分别固定安装在三号隔间、四号隔间、六号隔间、七号隔间、十号隔间内壁底部，所述超声波清洗装置通过导线与外部电源电性连接，所述超声波清洗装置超声功率可调，功率范围500w～2000w。

与现有技术相比，本发明提供了一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，具备以下有益效果：

本一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，通过设置温控磁力搅拌器，在温控磁力搅拌器的基础上，加上可以装不同去细胞试剂和1xpbs的多连排隔间，通过设置横向电动导轨、纵向电动导轨、电动伸缩杆控制滤筛网水平横向与纵向移动，能将组织捞起来，转移到隔壁的隔间，以及在1xpbs的隔间装上超声波清洗装置用于深度清洗减少试剂残留，有效解决了现有脱细胞装置无法实现自动化、标准化的去细胞处理问题。

附图说明

图1为本发明立体结构示意图；

图2为本发明整体结构示意图；

图3为本发明俯视结构示意图；

图4为本发明俯视结构示意图；

图5为本发明滤筛网结构示意图。

图中：1、温控磁力搅拌器；2、转速调节旋钮；3、电源键；4、加热台；5、时间调节旋钮；6、温度调节旋钮；7、一号隔间；8、二号隔间；9、三号隔间；10、四号隔间；11、五号隔间；12、六号隔间；13、七号隔间；14、八号隔间；15、九号隔间；16、十号隔间；17、转子；18、安装架；19、横向电动导轨；20、第一滑块；21、纵向电动导轨；22、电动伸缩杆；23、第二滑块；24、滤筛网；241、粗过滤孔；242、细过滤孔；25、超声波清洗装置。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1-5，一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置，包括温控磁力搅拌器1，温控磁力搅拌器1正面设置有转速调节旋钮2，转速调节旋钮2一侧设置有电源键3，温控磁力搅拌器1顶部设置有加热台4，加热台4正面设置有时间调节旋钮5和温度调节旋钮6，加热台4顶部分别固定安装有一号隔间7、二号隔间8、三号隔间9、四号隔间10、五号隔间11、六号隔间12、七号隔间13、八号隔间14、九号隔间15、十号隔间16，一号隔间7、二号隔间8、三号隔间9、四号隔间10、五号隔间11、六号隔间12、七号隔间13、八号隔间14、九号隔间15、十号隔间16内部分别放置有转子17，温控磁力搅拌器1顶部设置有安装架18，安装架18底部设置有横向电动导轨19，横向电动导轨19一端设置有第一滑块20，第一滑块20一侧设置有纵向电动导轨21，横向电动导轨19底部设置有电动伸缩杆22，电动伸缩杆22底端设置有滤筛网24，滤筛网24表面开设有粗过滤孔241和细过滤孔242，三号隔间9、四号隔间10、六号隔间12、七号隔间13、十号隔间16内部固定分别安装有超声波清洗装置25。

综上，温控磁力搅拌器1通过导线与外部电源电性连接，转速调节旋钮2通过导线与温控磁力搅拌器1电性连接，电源键3通过导线与温控磁力搅拌器1电性连接，加热台4通过导线与温控磁力搅拌器1电性连接，时间调节旋钮5通过导线与温控磁力搅拌器1电性连接，温度调节旋钮6通过导线与温控磁力搅拌器1电性连接，转速调节旋钮2可用于调节转子17的转动速率，时间调节旋钮5可通过控制加热台4用于调节相应加热台4内转子17的搅拌时间，温度调节旋钮6可通过控制加热台4调节搅拌温度；加热台4呈2x5方阵等距排列，加热台4的数量为10个，加热台4对隔间起到稳定支撑作用，同时可用于对隔间进行加热；一号隔间7、二号隔间8、三号隔间9、四号隔间10、五号隔间11、六号隔间12、七号隔间13、八号隔间14、九号隔间15、十号隔间16结构、规格尺寸相同，用于装不同去细胞试剂和1xpbs；横向电动导轨19通过导线与外部电源电性连接，纵向电动导轨21通过螺栓固定安装在安装架18底部，横向电动导轨19一端通过第一滑块20与纵向电动导轨21导轨滑动连接，电动伸缩杆22顶部通过第二滑块23与横向电动导轨19导轨滑动连接，电动伸缩杆22通过导线与外部电源电性连接，通过启动横向电动导轨19可带动电动伸缩杆22水平横向移动，通过启动纵向电动导轨21可带动电动伸缩杆22水平纵向移动，从而实现位置移动调节全自动化操作；滤筛网24通过螺栓固定安装在电动伸缩杆22底端，滤筛网24外径尺寸分别与一号隔间7、二号隔间8、三号隔间9、四号隔间10、五号隔间11、六号隔间12、七号隔间13、八号隔间14、九号隔间15、十号隔间16内径尺寸相适配，粗过滤孔241孔径尺寸大于生物组织外表尺寸，细过滤孔242孔径尺寸小于生物组织外表尺寸，通过滤筛网24可将隔间内部组织捞起，从而方便转移到隔壁的隔间；超声波清洗装置25分别固定安装在三号隔间9、四号隔间10、六号隔间12、七号隔间13、十号隔间16内壁底部，超声波清洗装置25通过导线与外部电源电性连接，超声波清洗装置25超声功率可调，功率范围500w～2000w，通过超声波清洗装置25可用于深度清洗隔间，减少残留试剂。

下面给出本发明的具体实施方式，猪小肠黏膜下层组织去细胞方法：

第一步是将新鲜猪小肠置于清水中仔细清洗，清洗干净后纵向切开，获得每段长度8～12cm长，然后进行机械处理，处理过程中撕去浆膜、刮去粘膜层和粘膜肌层后得到小肠黏膜下层组织smallintestinalsubmucosa，sis，用1×pbs溶液清洗；

第二步利用本发明设计的装置进行全自动去细胞，发明装置分为10个隔间，分别为一号隔间7，二号隔间8、三号隔间9、四号隔间10、五号隔间11、六号隔间12、七号隔间13、八号隔间14、九号隔间15、十号隔间16，具体操作为，

1)在通风橱制备体积比为1：1的甲醇和氯仿混合液简称cm混合液分别装入一号隔间7，二号隔间8，将sis依次置于一号隔间7、二号隔间8通过磁力搅拌以提取酚类，搅拌10～15h；

2)随后置于三号隔间9、四号隔间10内通过超声波清洗装置25用1×pbs溶液超声清洗；

3)清洗完成后，将组织转入五号隔间11，用含0.05％胰蛋白酶的0.05％edta溶液处理，10～15h后取出sis；

4)之后再次组织分别转入六号隔间12、七号隔间13通过超声波清洗装置25用1xpbs清洗2次；

5)紧接着，将sis转入于八号隔间14、九号隔间15，用含0.5％sds的0.9％的氯化钠溶液处理两次，搅拌3～6h；

6)最后将sis转入十号隔间16通过超声波清洗装置25用1xpbs超声清洗，所有步骤完成后将组织放于-80度冰箱，之后进行冷冻干燥。

本结构的工作使用流程以及安装方法为，本一种全自动、标准化生物组织脱细胞装置在使用时，通过设置温控磁力搅拌器1，在温控磁力搅拌器1的基础上，加上可以装不同去细胞试剂和1xpbs的多连排隔间，通过设置横向电动导轨19、纵向电动导轨21、电动伸缩杆22控制滤筛网24水平横向与纵向移动，能将组织捞起来，转移到隔壁的隔间，以及在1xpbs的隔间装上超声波清洗装置25用于深度清洗减少试剂残留，有效解决了现有脱细胞装置无法实现自动化、标准化的去细胞处理问题。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。