一种甜菜碱与益生菌的组合物的制作方法

1.本发明属于医药技术领域，涉及一种含有甜菜碱和益生菌的组合物及该组合物用于制备降低高同型半胱氨酸或其所引起的心脑血管疾病风险的产品中的用途。


背景技术：

2.研究表明，血液中hcy水平升高是心血管疾病的一个独立危险因子，它可以诱发大量氧自由基产生，引起脂质过氧化、内皮细胞损伤，从而对心血管系统造成损害。hcy主要通过再甲基化和转硫两条途径进行代谢：约有50％hcy在蛋氨酸合成酶的作用下，以维生素b
12
为辅因子，以n5-甲基四氢叶酸(叶酸转化而来)为甲基供体，进行再甲基化，重新合成蛋氨酸；另外约50％的hcy在胱硫醚β合成酶的催化下，与丝氨酸缩合成胱硫醚，后者进一步生成半胱氨酸和α酮丁酸，此过程需要维生素b6作为辅助因子。可见，b族维生素与hcy代谢息息相关。
3.益生菌(probiotics)是一类对宿主有益的活性微生物，它们定殖在人体内，能改变宿主某一部位菌群组成，可以是单微生物，亦可以是成份明确的混合微生物。益生菌通过调节宿主黏膜与系统免疫功能或调节肠道内菌群平衡，促进营养吸收，保持肠道健康。
4.甜菜碱(betaine)是甘氨酸甜菜碱的简称，又名三甲基甘氨酸、甜菜素等，是广泛存在于动物、植物、微生物体内的季胺型生物碱。体内的甜菜碱可来源于食物，如甜菜、小麦等，内源性甜菜碱是由体内胆碱经逐步氧化生成的。甜菜碱作为重要的甲基供体参与hcy代谢，一分子甜菜碱可以提供三个甲基，在hcy再甲基化生成蛋氨酸的反应中提供一个甲基，该反应在甜菜碱同型半胱氨酸甲基转移酶的作用下，主要发生于肝脏和肾脏中；甜菜碱的其余两个甲基在线粒体中参与叶酸代谢，用于生成n5，n10－二甲基四氢叶酸。甜菜碱的代谢终产物为氨基乙酸。由以上生化反应不难看出，甜菜碱有促hcy转化代谢的作用。
5.目前市场上益生菌产品众多，但都是常规菌种，没有对同型半胱氨酸水平较高人群的益生菌产品。本发明首次将甜菜碱引入到益生菌产品中，除了作为营养补充剂外，更有利于辅助人体对抗因同型半胱氨酸水平升高带来的心血管症状，是对现有产品技术的一个显著改进。


技术实现要素：

6.发明人在长期试验和临床研究中发现：当益生菌缺乏时，机体除了产生肠道菌群失衡、免疫功能下降、胃肠道炎症、腐败菌滋生、乳糖不耐受外，还可能由此影响人体内同型半胱氨酸(homocysteine，hcy)的代谢。
7.为了开发一种能够满足同型半胱氨酸水平偏高的人群益生菌产品的需求，本发明提供了以下的技术方案：
8.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括甜菜碱和益生菌。
9.在本发明中，所述组合物，其特征在于，所述的益生菌选自长双枝杆菌、乳酸乳球菌、嗜热链球菌、嗜酸性乳酸杆菌、植物乳酸杆菌、罗伊氏乳酸杆菌、费氏丙酸杆菌的一种或
多种。优选的，益生菌选自乳酸乳球菌、嗜热链球菌、嗜酸性乳酸杆菌、植物乳酸杆菌的一种或多种。更加优选的，益生菌选自嗜酸性乳酸杆菌、植物乳酸杆菌的一种或两种。
10.在本发明中，所述的组合物，其特征在于，含有以重量份数计100份～1000份的甜菜碱和100份～1000份的益生菌。
11.在本发明中，所述的组合物，其特征在于，含有以重量份数计100份～500份的甜菜碱和100份～600份的益生菌。
12.在本发明中，所述的份可以是微克、毫克、克、微升、毫升、分升等。
13.在本发明中，所述的组合物，其特征在于，还可以含有一种或多种的合生元，所述合生元选自菊粉、低聚果糖、半乳寡糖、葡寡糖、木寡糖、阿拉伯半乳聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖和/或它们的组合。
14.在本发明中，所述的组合物，其特征在于，其制备形式包括固体饮料、片剂、胶囊剂、凝胶、粉剂、丸剂、果实饮料、糖棒、酸奶饮料、发酵的乳制品、膳食替代物、冰淇淋、奶酪和奶昔。
15.在本发明中，所述的组合物在制备降低高同型半胱氨酸及其所引起的心脑血管疾病风险的制品中的应用。
16.上述所述组合物、产品或制品可以为药品组合物、保健品、保健食品、功能食品等形式。
17.本发明提供的甜菜碱和益生菌组合物与现有产品和技术相比，其优势是明确其使用的人群和需要解决的特定问题，即针对中国人的同型半胱氨酸升高导致的心脑血管系统症状。基于上述问题，本发明筛选出益生菌菌株与具有降低同型半胱氨酸作用的甜菜碱组合，具有协同改善同型半胱氨酸水平的作用，其效果显著强于单用，具有创新性和良好的应用价值。
具体实施例
18.本发明公开了一种组合物、用途及产品。本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合来实现和应用本发明技术。
19.本发明提供的组合物、用途及产品中所用原药与辅料均可从市场购得。实施例中所涉及的甜菜碱购自公司；益生菌购自杜邦营养食品配料(北京)有限公司；长双枝杆菌、乳酸乳球菌、嗜热链球菌、嗜酸性乳酸杆菌、植物乳酸杆菌、罗伊氏乳酸杆菌、费氏丙酸杆菌以及实施例中所涉及的其余菌种的益生菌总量均不小于106cfu/g。
20.实施例1：益生菌+甜菜碱组合物对高同型半胱氨酸血症sd大鼠hcy的影响
21.spf级sd大鼠，雄性，6-8周龄，检疫合格后纳入实验。
22.选取10只作为对照组，喂养普通纯化饲料(ain-93m)，其余大鼠喂养以不含叶酸的纯化饲料6周，采血测定同型半胱氨酸(hcy)浓度。选取同型半胱氨酸血清浓度大于10μmol/l的大鼠作为试验组，其中选取10只作为模型对照，另外模型大鼠随机分成9组，每组9-10只，给以大鼠喂养益生菌与甜菜碱的组合物或服用本发明组合物中益生菌的其中一种或甜
菜碱。灌胃体积为10ml/kg，每天一次，喂食4周，给药结束后采血，测定血同型半胱氨酸水平。分组及给药情况见表1。通过金正均q值法计算组合物中各组分之间的相互作用：
23.金正均q值法计算组合物相互作用:q＝e
a+b
/(ea+eb－ea×
eb)，其中e
a+b
为a组分和b组分联合时的数据平均值，ea和eb分别是a组分和b组分单独使用时的数据平均值。式中分子代表“实测合并效应”，分母代表“期望合并效应”，q是两者之比，q＜0.85为拮抗作用，0.85≤q＜1.15为相加作用，q≥1.15为协同作用。为满足药理作用关系的分析，将实测值转化为可以直观体现药理作用强弱的效应，计算公式：ei＝(1-pi/p
模型组
)
×
100％，pi为各组的实测值，p
模型组
为模型组的实测值。
24.试验结果如下表所示：
25.表1：甜菜碱与益生菌组合物对高同型半胱氨酸血症大鼠hcy水平的影响(n＝9-10)
[0026][0027]
与对照组比较，
##
p《0.01；与模型组比较
*
p《0.05，
**
p《0.01；与甜菜碱组比较，
△
p《0.05，
△△
p《0.01；与对应益生菌组比较，
▲
p《0.05，
▲▲
p《0.01。
[0028]
从上述的试验结果中得出：甜菜碱单用50mg/kg具有降hcy的作用，益生菌单用具
有降hcy的趋势，但与模型组比较无显著性差异。与甜菜碱组或益生菌单独组相比，使用益生菌+甜菜碱组合具有更好降低同型半胱氨酸的效果，且其中嗜酸性乳酸杆菌、植物乳酸杆菌、乳酸乳球菌、嗜热链球菌与甜菜碱组合表现出明显的协同增效的作用(q值》1.15),表现出益生菌与甜菜碱协同降低同型半胱氨酸的效果。
[0029]
实施例2：本发明组合物对高同型半胱氨酸血症sd大鼠的hcy及内皮功能的影响
[0030]
本发明组合物中主要原料含量：
[0031][0032]
spf级sd大鼠，雄性，6-8周龄，检疫合格后纳入实验。
[0033]
选取10只作为对照组，喂养普通纯化饲料(ain-93m)，其余大鼠喂养以不含叶酸的纯化饲料6周，采血测定同型半胱氨酸浓度。选取同型半胱氨酸血清浓度大于10μmol/l的大鼠作为试验组，其中选取10只作为模型对照，另外的模型大鼠随机分成9组，每组9-10只，给以大鼠喂养相应的本发明的益生菌组合物或服用嗜酸性乳酸杆菌或甜菜碱。灌胃体积为10ml/kg，每天一次，喂食8周，给药结束后采血，测定血同型半胱氨酸水平，一氧化氮no和内皮素et-1的水平。
[0034]
试验结果如下表所示：
[0035]
表2：甜菜碱与益生菌组合物对高同型半胱氨酸血症大鼠的hcy及内皮功能的影响(n＝9-10)
[0036][0037]
与对照组比较，
##
p《0.01；与模型组比较
*
p《0.05，
**
p《0.01；与甜菜碱组比较，
△
p《0.05，
△△
p《0.01；与嗜酸性乳酸杆菌组比较，
▲
p《0.05，
▲▲
p《0.01。
[0038]
从上述的试验结果中得出：与甜菜碱组或嗜酸性乳酸杆菌单剂量组相比，使用总剂量相同的组合物1-7给予高同型半胱氨酸血症的sd大鼠，其具有更好降低同型半胱氨酸的效果，说明通过甜菜碱和益生菌减少剂量的配伍组合，产生了协同增加降低同型半胱氨酸的效果；对具有血管内皮作用的no和et-1进行了检测，结果表现出明显的协同增加no和降低et-1的作用，说明本发明组合物具有血管内皮保护的作用，有利于心脑血管疾病的预防和治疗。