本发明涉及材料制备技术领域，具体涉及一种葡聚糖微球及其制备方法和应用。
背景技术：
近年来，由于社会竞争的加剧和生活压力不断增大使到人们的身心长期处于高压状态，高强度的工作和生活节奏也经常导致人们身体素质也不断下降，身体抵抗力逐渐减弱；而且，由于现在食品当中添加剂的违法添加和滥用，以及快餐文化的盛行，这些都对食品中的营养物质和维生素有破坏，导致人们出现各种营养物质和维生素的缺乏，进而对人们的身体健康产生伤害，并导致了现在的肿瘤、癌症等疾病的发病率大大增加，并有年轻化的趋势。
天然高分子磁性微球是近多年发展起来的一种新型多功能材料；而且，天然高分子材料因其原料丰富，价格低廉，生物相容性好等优点，己在生物化工、细胞学、生物医学工程等领域得到了广泛应用。其中，葡聚糖微球由于其优良的生物相容性和生物可溶性，骨架材料性质稳定，强度较高和无毒副作用等优点而受到越来越多的关注。高分子葡聚糖上的活性基团经过表面修饰可以负载多种功能分子酶、抗体、肤、及，从而可制备多功能磁性复合物，作为新型的功能材料在酶的固定化、靶向药物、细胞分离和免疫测定等领域得到了广泛应用。
目前，虽然治疗肿瘤、癌症等疑难杂症的治疗方法已经十分成熟，而且，现行的治疗方法在治疗肿瘤、癌症等疑难杂症的过程中，也取得了不错的效果，但是对于治疗相关的疑难杂症还存在很大的局限和不足，很多的疾病尚未得到有效根治，而且，传统的化疗和放疗等治疗方法，对于患者身体伤害较大，对于病灶打击的精准度也有待提升，使得患者治疗后的恢复也较慢，恢复难度也相对较大。
技术实现要素：
针对传统临床疗法在治疗肿瘤、癌症等疑难杂症的过程中仍然存在不足的情况，这使到临床上肿瘤、癌症等疑难杂症的治疗的效果遇到了一定局限和不足，特别是对一些难治的肿瘤、癌症等的治疗还不尽理想的问题，本发明目的在于提供一种葡聚糖微球及其制备方法和应用。
因为传统的治疗肿瘤、癌症等疑难杂症的治疗方法不能满足相关治疗需求，对于部分的肿瘤、癌症治疗效果疗效不显著，治疗效果受到了局限，不能满足相关的临床治疗需求；而且传统的化疗、放疗等治疗方法对于患者的身体要求素质也较高，对于身体虚弱的患者风险相对较大，而且，传统疗法的治疗精确度也有待提升，这也制约了治疗效果；通过本制备方法制备的一种葡聚糖微球对于病灶治疗的精确度更高，便于临床治疗应用；而且与目前临床上的注射用维生素组合物相比本发明的葡聚糖微球的安全性更好，不良反应少，适用人群更广，更适宜临床上治疗使用，更能保证患者的安全。因而本发明通过开发葡聚糖微球不仅能解决现在对一些难治的肿瘤、癌症等的治疗还不尽理想的问题，更能满足相关领域的使用需求。
为实现上述目标，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种葡聚糖微球，按重量分数计包含以下原料：1.5～3.2份水相溶剂、45～85份油相溶剂和0.8～1.5份交联剂。
优选地，所述的水相溶剂为改性葡聚糖；所述的改性葡聚糖制备为将葡聚糖与丁二酸酐在二甲基亚砜条件下，室温反应36～60h，再用无水乙醇进行洗涤，取沉淀并干燥得产物。
优选地，所述的油相溶剂为液体石蜡或甲基硅油中的任意一种。
更优选地，所述的赋形剂为甲基硅油。
优选地，所述的交联剂为氮氮亚甲基双丙烯酰胺或接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐。
优选地，所述的接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐为将聚丙烯乙烯基马来酸酐和β-环糊精溶于干燥的dmf中进行反应，反应时间6.5～9h，温度为70～90℃；其后将dmf蒸发出去，得到接枝β-环糊精的的聚丙烯乙烯基马来酸酐。
优选地，所述的一种葡聚糖微球的制备方法，包含以下步骤：
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s3.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s4.将部分改性完成的葡聚糖溶于油相溶剂中，并与交联剂一起进行反应，反应时间为18～36h，温度70～95℃，反应完成后再静置18～30h；
s5.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤1～3次；
s6.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
优选地，所述的一种葡聚糖微球的制备方法，包含以下步骤：
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.将交联剂和β-环糊精溶于干燥的dmf中进行反应，反应时间6.5～9h，温度为70～90℃；
s3.随后将dmf蒸发出去，得到接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐；
s4.并在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s5.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s6.将部分改性完成的葡聚糖溶于交联剂中，并与油相溶剂进行反应一段时间，反应时间为18～36h，温度70～95℃，反应完成后再静置18～30h；
s7.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤1～3次；
s8.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
优选地，所述的一种葡聚糖微球的应用，其特征在于，以葡聚糖微球作为动脉栓塞剂。
优选地，所述的一种葡聚糖微球的应用，其特征在于，将葡聚糖微球用于三维细胞培养的应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
一种葡聚糖微球，按重量分数计包含以下原料1.6份改性葡聚糖、50份甲基硅油和1份氮氮亚甲基双丙烯酰胺。
一种葡聚糖微球的制备方法，包含以下步骤：
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s3.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s4.将改性完成的葡聚糖慢慢滴加到甲基硅油中，再往里加入氮氮亚甲基双丙烯酰胺，一起进行反应，反应时间为20h，温度75℃，反应完成后再静置20h；
s5.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤2次；
s6.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
实施例2
一种葡聚糖微球，按重量分数计包含以下原料：2.5份改性葡聚糖、60份液体石蜡和1.5份接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐。
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.将交联剂和β-环糊精溶于干燥的dmf中进行反应，反应时间7h，温度为80℃；
s3.随后将dmf蒸发出去，得到接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐；
s4.并在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s5.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s6.将部分改性完成的葡聚糖慢慢滴加到油相溶剂中，并与油相溶剂进行反应一段时间，反应时间为24h，温度85℃，反应完成后再静置24h；
s7.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤2次；
s8.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
实施例3
一种葡聚糖微球，按重量分数计包含以下原料：2.8份改性葡聚糖、75份甲基硅油和1.2份接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐。
一种葡聚糖微球的制备方法，包含以下步骤：
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.将交联剂和β-环糊精溶于干燥的dmf中进行反应，反应时间8.5h，温度为85℃；
s3.随后将dmf蒸发出去，得到接枝β-环糊精的聚丙烯乙烯基马来酸酐；
s4.并在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s5.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s6.将部分改性完成的葡聚糖溶于油相溶剂中，并与油相溶剂进行反应一段时间，反应时间为30h，温度85℃，反应完成后再静置30h；
s7.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤3次；
s8.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
实施例4
一种葡聚糖微球，按重量分数计包含以下原料：3份改性葡聚糖、60份液体石蜡和1份氮氮亚甲基双丙烯酰胺。
一种葡聚糖微球的制备方法，包含以下步骤：
s1.按配方准备好各种原材料，并进行原料筛选；
s2.在氮气氛围下，将葡聚糖和丁二酸酐在二甲基亚砜中，进行反应改性；
s3.将各改性完成的葡聚糖进行真空干燥；
s4.将部分改性完成的葡聚糖溶于液体石蜡中，并与氮氮亚甲基双丙烯酰胺进行反应，反应时间为18h，温度75℃，反应完成后再静置20h；
s5.反应结束后，弃上清液，取沉淀，用无水乙醇洗涤1次；
s6.再将沉淀进行真空干燥，即得产物。
一、体外载药和释放试验
1.载药试验：
测试对象和药物：取实施例1、实施例2、实施例3和实施例4制备的样品作为测试组，其它市售的葡聚糖微球作为对照组1和市售其它具有吸附作用的天然高分子材料作为对照组2。
测试方法：称取各组测试样品各100mg，35mg阿霉素盐酸盐，分别溶解于10ml生理盐水中，低温超声15min，放置36h，再取0.5ml上清液用分光光度计测定上清液中的残留，以推算各组样品的吸附量。
2.体外释放试验：
测试对象和药物：取实施例1、实施例2、实施例3和实施例4制备的样品作为测试组，其它市售的葡聚糖微球作为对照组1和市售其它具有吸附作用的天然高分子材料作为对照组2。
测试方法：将上述溶液离心，弃上清液，往里加入pbs10ml，超声10min，取0.5ml上清液，用分光光度计测定各组溶液中阿霉素盐酸盐的浓度。(测试结果如表1所示)
表1体外载药和释放试验
由表1中的测试数据可以看出，本发明的实施例1～4的葡聚糖微球的阿霉素盐酸盐的吸附率要远高于其它市售的葡聚糖微球和市售其它具有吸附作用的天然高分子材料的吸附率，其对于提高吸附抗肿瘤药物吸收率，用于抗击肿瘤具有重要意义。
并且，从表1也可知道，3h时本发明的实施例1～4的葡聚糖微球的阿霉素盐酸盐的释放率已超过50％，并且随着时间的推移，到达36h时，其释放量已经超过60％，满足临床上用药需求，明显优于对照组1和对照组2的释放量，更能满足临床使用需要，更具有市场价值和商业前景。
二、显影试验
测试对象和药物：取实施例1、实施例2、实施例3和实施例4制备的样品作为测试组1～4，其它市售的葡聚糖微球作为对照组1和市售其它具有吸附作用的天然高分子材料作为参照组2，超纯水作为参照组3。
分别称取测试组1～4和对照组1和对照组2的测试对象各0.2g，并往上述各组测试对象中加入2ml碘-正己烷溶液(碘含量0.1g)充分浸泡，然后离心，取各组沉淀并放入透明塑料袋中，分别加入2ml超纯水，进行测试；同时，再将上述各组测试对象再称取0.2g，不经碘-正己烷浸泡，直接加入2ml超纯水，作为对照，将两者同时放入ct测试台进行测试，结果见表2。
表2显影测试
从表2中的测试数据可以知道，与参照组1和参照组2相比，测试组1～4的本发明实施例制备的葡聚糖微球的与碘油显影的效果更好，灰度值更高，更适用于ct显影，对于临床上动脉栓塞帮助更有大，对临床治疗更有意义。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。