一种安寐颗粒及其制备方法

本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种安寐颗粒及其制备方法。

背景技术：

随着社会生活节奏的加快，失眠症的发生率呈不断上升趋势。患者使用镇静剂治疗虽有一定疗效，但长期使用副作用较大，易产生依赖和成瘾性。近年来，中医疗法以其独特的安全、有效、无毒副作用等优点被广泛应用于失眠的临床治疗。失眠，中医称为不寐，病机多为心脾两虚，心血不足，心血虚不能养心导致的，主要表现为失眠多梦、疲倦乏力等。安寐丹来源于清代著名医家陈士铎所编著《石室秘录》卷一，由人参、丹参、麦冬、甘草、茯神、生枣仁、熟枣仁、石菖蒲、当归、五味子组成，用于治疗心血少所致怔忡不寐等症。此方以人参益心气，丹参、当归补心血，麦冬养心阴，菖蒲开心窍，茯神、枣仁、甘草补心神，五味子敛心气。诸药合用，共奏益气、养心、安神之功效。方中妙用生、熟枣仁各五钱，而以诸补心之药为佐使。枣仁乃安心上不寐之圣药，生用使人日间不卧，熟用使人夜间不醒，日夜既安，则怔忡自定。但本方传统服用方式为汤剂，仅在民间有所应用，或在中医临床上作为院内临时制剂，因原方服用不便和质量不可控限制了安寐丹的临床应用。本发明安寐颗粒针对上述问题，采用现代制剂工艺，保留水煎煮的传统方法，以麦芽糊精为辅料，拌软材后制粒，另添加适量阿司帕坦作为矫味剂以改善药味。本发明目的是提供一种服用方便、疗效稳定，患者依从性高的安寐颗粒的制备新工艺；本发明目的还在于提供一种安寐颗粒的质量检测方法。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：化学药物治疗失眠虽然见效快，但治标不治本，长期服用会产生耐药性和依赖性，副作用较多。中药方剂针对病机施治，标本兼治，副作用小，具有西医不可比拟的独特优势。安寐丹作为治疗失眠的经典方剂，其传统剂型需临用前煎制、服用量大、口感差、及不易保存和运输的缺点限制了它的广泛使用，同时可因为药材品质和处方的差异导致药物成分和质量不稳定而影响临床疗效，亟需简便可靠的质量控制方法。

解决以上问题及缺陷的难度为：为确保安寐丹新剂型的有效成分与原方接近，同时减少服用量和提高服用方便性，兼顾制药成本，需要选择适宜的剂型，并对提取工艺进行考察和优化。本方药材含糖和皂苷较多，得膏率偏高，吸湿性强，采用的干燥、制粒成型方式和辅料类型、添加量均需考察。为改善药物服用口感的同时不升高血糖，需要采用无热量的甜味剂。为保证制剂在不同原材料、生产厂家和生产批次中质量的一致性，有必要制定简便有效的质量控制方法。

解决以上问题及缺陷的意义为：本方来源于清代著名医家陈士铎治疗失眠的经典验方，发明人经过实验室小试、工厂中试、大生产结合临床需求，改良经典名方安寐丹的传统工艺，制成颗粒剂，制剂颗粒粒度好，色泽均匀，溶化性佳，相较于原方质量可控，疗效良好，工艺简单，服用方便，口感良好，以阿司帕坦代替蔗糖或者蜂蜜，满足糖尿病患者用药，且稳定性好，易于贮存。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种安寐颗粒及其制备方法。

一种安寐颗粒按照质量份数由人参6-12份、丹参4-8份、麦冬6-12份、甘草2-4份、茯神6-12份、生枣仁10-20份、熟枣仁10-20份、石菖蒲2-4份、当归6-12份以及五味子2-4份组成。

本发明的另一目的在于提供一种所述安寐颗粒的制备方法，包括：将人参、丹参、麦冬、甘草、茯神、生枣仁、熟枣仁、石菖蒲、当归、五味子热水提取、浓缩干燥后加入麦芽糊精制粒。

进一步，所述安寐颗粒制备方法还包括以下步骤：

步骤一，将人参、丹参、麦冬、甘草、茯神、生枣仁、熟枣仁、石菖蒲、当归以及五味子每次加10倍量水煎煮3次；过滤，合并煎液；

步骤二，静置12-16小时后浓缩至适量；采用喷雾干燥得到干膏粉，加入辅料麦芽糊精及阿司帕坦，以水适量喷雾制粒，干燥，即得。

进一步，步骤一中，所述煎煮包括：煎煮每次2小时。

本发明的另一目的在于提供一种所述安寐颗粒的鉴别方法，所述安寐颗粒的鉴别方法包括：

(1)取制备的安寐颗粒4g，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

(2)取酸枣仁对照药材1g，加石油醚(60～90℃)30ml，加热回流2小时，过滤，弃去石油醚液，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，得到对照药材溶液；

(3)取酸枣仁皂苷a、b对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

(4)吸取制备的供试品溶液5μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以水饱和的正丁醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液；

(5)分别置日光和紫外光灯365nm下检视供试品色谱中在与对照品和对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点或荧光斑点。

本发明的另一目的在于提供一种所述安寐颗粒的鉴别方法，所述安寐颗粒的鉴别方法包括：

1)取制备的安寐颗粒4g，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水饱和正丁醇20ml，超声30分钟，过滤；

2)滤液加5倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；

3)取人参对照药材1g，同法制备对照药材溶液；再取人参皂苷rb1、人参皂苷re、人参皂苷rf、人参皂苷rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

4)吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷、甲醇、水的混合液10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；

5)喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视供试品色谱中在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点或荧光斑点。

进一步，所述三氯甲烷、甲醇、水的混合比例为13:6:2。

本发明的另一目的在于提供一种所述安寐颗粒的含量测定方法，所述安寐颗粒的含量测定方法包括：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相a，以水为流动相b；按梯度洗脱；检测波长335nm；流速1.0ml/min；温度25℃；取斯皮诺素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得对照品溶液；取样品适量，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

进一步，所述超声处理包括：超声功率500w，频率40khz。

结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明颗粒剂，经科学实验证实具有安寐丹的传统功效，质量稳定可控。本发明公开了安寐颗粒的含量测定和鉴别方法。

对比的技术效果或者实验效果。

本发明的药效学实验：

本实验对本发明工艺制备得到的安寐颗粒进行镇静作用的药效学实验，证实其具有与传统汤剂同样的功效。

试剂：本发明安寐颗粒(按实施例1方法制备得到)、安寐丹汤剂均由李时珍医药集团有限公司提供，颗粒剂临用前用0.5％cmc-na磨碎配制成所需浓度的均匀混悬液。

自发活动检测：sd大鼠分为对照组、模型组、治疗组(安寐颗粒低、高剂量组及安寐丹组)和阳性药组(褪黑素)，模型组大鼠腹腔注射pcpa造模，治疗组连续给药1周。应用ethovision视频分析系统进行监测，实验过程中保持周围环境安静，将各组大鼠放入活动测试箱中，检测大鼠在2min内的各项行为学指标，包括移动距离、活动速度、活动时间等。以生药量折算，安寐丹(汤剂)给药剂量为4.55g·kg^-1·d^-1，安寐颗粒低、高剂量组给药剂量分别为4.55g·kg^-1·d^-1和18.18g·kg^-1·d^-1。

结果显示(见表1)，与对照组比较，模型组大鼠平均移动距离延长，同时平均活动速度增加(p＜0.01)，与模型组比较，安寐颗粒高剂量组干预后大鼠的移动距离缩短，活动速度降低(p＜0.01)。但安寐颗粒低剂量组在移动距离和平均速度上与模型组比较并无统计学差异(p＞0.05)。同时与安寐丹组比较，安寐颗粒高剂量进一步降低大鼠的移动距离和活动速度(p＜0.05)，但低剂量组与安寐丹比较无统计学差异(p＞0.05)。进一步统计各组大鼠的移动累计时间，结果显示，与对照组比较，模型组大鼠移动累计时间延长(p＜0.01)。与模型组比较，安寐颗粒低、高剂量组均能够显著缩短大鼠移动累计时间(p＜0.01)。同时与安寐丹组比较，安寐颗粒低剂量组无统计学差异(p＞0.05)。

表1各组间自发活动的移动距离、速度和时间比较

注：与对照组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与模型组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01。与安寐丹组比较，^p＜0.05，^{^^}p＜0.01。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的安寐颗粒制备方法流程图。

图2是本发明实施例提供的安寐颗粒的鉴别方法流程图。

图3是本发明实施例提供的安寐颗粒的鉴别方法流程图。

图4是本发明实施例提供的含量测定方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种安寐颗粒及其制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。

本发明实施例提供的安寐颗粒按照质量份数由人参6-12份、丹参4-8份、麦冬6-12份、甘草2-4份、茯神6-12份、生枣仁10-20份、熟枣仁10-20份、石菖蒲2-4份、当归6-12份以及五味子2-4份组成。

如图1所示，本发明实施例提供的安寐颗粒制备方法包括以下步骤：

s101，将人参9份、丹参6份、麦冬9份、甘草3份、茯神9份、生枣仁15份、熟枣仁15份、石菖蒲3份、当归9份以及五味子3份每次加10倍量水煎煮3次，每次2小时；过滤，合并煎液；

s102，静置12小时后浓缩至适量(比重1.10-1.20)；采用喷雾干燥得到干膏粉，加入与干膏粉等量辅料麦芽糊精和2‰阿司帕坦，混匀，以适量水为润湿剂喷雾制粒，60-80℃下干燥至水份3.3％，过振动筛(上层12目，下层50目)即得。

如图2所示，本发明实施例提供的安寐颗粒的鉴别方法包括：

s201，取制备的安寐颗粒4g，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

s202，取酸枣仁对照药材1g，加石油醚(60～90℃)30ml，加热回流2小时，过滤，弃去石油醚液，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，得到对照药材溶液；

s203，取酸枣仁皂苷a、b对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

s204，吸取制备的供试品溶液5μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以水饱和的正丁醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液；

s205，分别置日光和紫外光灯365nm下检视供试品色谱中在与对照品和对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点或荧光斑点。

如图3所示，本发明实施例提供的安寐颗粒的鉴别方法包括：

s301，取制备的安寐颗粒4g，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水饱和正丁醇20ml，超声30分钟，过滤；

s302，滤液加5倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；

s303，取人参对照药材1g，同法制备对照药材溶液；再取人参皂苷rb1、人参皂苷re、人参皂苷rf、人参皂苷rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

s304，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷、甲醇、水的混合液10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；

s305，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视供试品色谱中在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点或荧光斑点。

本发明实施例提供的三氯甲烷、甲醇、水的混合比例为13:6:2。

本发明实施例提供的安寐颗粒的含量测定方法包括：

s401，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相a，以水为流动相b；按梯度洗脱；检测波长335nm；流速1.0ml/min；温度25℃；取斯皮诺素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得对照品溶液；

s402，取样品适量，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷；

s403，称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

s404，精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本发明实施例提供的超声处理包括：超声功率500w，频率40khz。

下面结合具体实施例对本发明的技术效果作进一步描述。

实施例1

本发明实施例提供的安寐颗粒按照质量份数由人参9份、丹参6份、麦冬9份、甘草3份、茯神9份、生枣仁15份、熟枣仁15份、石菖蒲3份、当归9份以及五味子3份组成。

实施例2

本发明实施例提供的安寐颗粒按照质量份数由人参6份、丹参4份、麦冬6份、甘草2份、茯神6份、生枣仁10份、熟枣仁10份、石菖蒲2份、当归6份以及五味子2份组成。

实施例3

本发明实施例提供的安寐颗粒按照质量份数由人参12份、丹参8份、麦冬12份、甘草4份、茯神12份、生枣仁20份、熟枣仁20份、石菖蒲4份、当归12份以及五味子4份组成。

实施例4

一种安寐颗粒的质量检测方法，该方法为：

鉴别：取本品4g，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取酸枣仁对照药材1g，加石油醚(60～90℃)30ml，加热回流2小时，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干，加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液。再取酸枣仁皂苷a、b对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以水饱和的正丁醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同的蓝色荧光斑点。

取本品4g，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水饱和正丁醇20ml，超声30分钟，滤过，滤液加5倍量氨试液，摇匀，放置使分层，取上层液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷rb1、人参皂苷re、人参皂苷rf、人参皂苷rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13:6:2)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点或荧光斑点。

含量测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相a，以水为流动相b；按下表中的规定梯度洗脱；检测波长335nm；流速1.0ml/min；温度25℃。

取斯皮诺素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得对照品溶液。取样品适量，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

上述安寐颗粒是以生酸枣仁15份，熟酸枣仁15份，人参9份，丹参6份，麦冬9份，茯神9份，当归9份，五味子3份，石菖蒲3份，甘草3份每次加10倍量水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，静置12小时后浓缩至适量；采用喷雾干燥得到干膏粉，加入与干膏粉等量辅料麦芽糊精及适量阿司帕坦，混匀，以水喷雾制粒，干燥，过筛制成。

下面结合药效学实验对本发明的技术方案作进一步描述。

本实验通过对本发明工艺制备得到的安寐颗粒镇静作用的药效学实验，证实其具有与传统汤剂同样的功效。

试剂：本发明安寐颗粒(按实施例1方法制备得到)、安寐丹汤剂均由李时珍医药集团有限公司提供，颗粒剂临用前用0.5％cmc-na磨碎配制成所需浓度的均匀混悬液。

自发活动检测：sd大鼠分为对照组、模型组、治疗组(安寐颗粒低、高剂量组及安寐丹组)和阳性药组(褪黑素)，模型组大鼠腹腔注射pcpa造模，治疗组连续给药1周。应用ethovision视频分析系统进行监测，实验过程中保持周围环境安静，将各组大鼠放入活动测试箱中，检测大鼠在2min内的各项行为学指标，包括移动距离、活动速度、活动时间等。以生药量折算，安寐丹(汤剂)给药剂量为4.55g·kg^-1·d^-1，安寐颗粒低、高剂量组给药剂量分别为4.55g·kg^-1·d^-1和18.18g·kg^-1·d^-1。

结果显示(见表1)，与对照组比较，模型组大鼠平均移动距离延长，同时平均活动速度增加(p＜0.01)，与模型组比较，安寐颗粒高剂量组干预后大鼠的移动距离缩短，活动速度降低(p＜0.01)。但安寐颗粒低剂量组在移动距离和平均速度上与模型组比较并无统计学差异(p＞0.05)。同时与安寐丹组比较，安寐颗粒高剂量进一步降低大鼠的移动距离和活动速度(p＜0.05)，但低剂量组与安寐丹比较无统计学差异(p＞0.05)。进一步统计各组大鼠的移动累计时间，结果显示，与对照组比较，模型组大鼠移动累计时间延长(p＜0.01)。与模型组比较，安寐颗粒低、高剂量组均能够显著缩短大鼠移动累计时间(p＜0.01)。同时与安寐丹组比较，安寐颗粒低剂量组无统计学差异(p＞0.05)。

表1各组间自发活动的移动距离、速度和时间比较

注：与对照组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与模型组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01。与安寐丹组比较，^p＜0.05，^^p＜0.01。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。