一种含NMN的组合物的制备方法与应用与流程

一种含nmn的组合物的制备方法与应用
技术领域
1.本发明涉及nmn制备技术领域，尤其涉及一种含nmn的组合物的制备方法与应用。


背景技术：

2.nmn，即β
‑
烟酰胺单核苷酸，是一种自然存在的生物活性核苷酸，nmn有α和β两种不同的形式，其中β异构体是nmn的活性形式。nmn在日常食物中分布较广，如蔬菜、水果、肉类等都含有丰富的nmn，人体内也会不断合成nmn。现代科学研究表明：nmn在人体细胞能量生成中扮演重要角色，它参与细胞内nad(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，细胞能量转化的重要辅酶)的合成，烟酰胺单核苷酸w+nmn能增加脏器中的nad，从而抑制神经和血管等老化，还能改善糖尿病症状。然而，随着年龄的增长人体自身合成nmn的能力不断下降，容易引起一系列疾病。尽管通过食物也可以为人体补充部分nmn，但食物中的nmn含量太低，补够人体所需的nmn明显不现实，因此，通过口服nmn制剂是一种较为可行的方法。
3.然而，nmn容易在胃液的作用下分解，单纯地口服nmn制剂实际起到的效果不大。为此，人们将nmn制成了各种胶囊，然而，现有的nmn胶囊的制备方法普遍是将买来的成品nmn再次加工成胶囊，但由于nmn本身化学性质不稳定，对光和氧比较敏感，不宜长期保存，容易分解，影响制备的nmn胶囊的品质，而且增加了制备过程的复杂性，提高了成本。


技术实现要素：

4.针对上述问题，本发明提供一种含nmn的组合物的制备方法与应用，该方法通过将nmn的制备阶段与胶囊的制备阶段融合，有效简化了nmn胶囊的制备流程，缓解了nmn容易受外界因素影响造成分解的问题。为实现上述发明目的，本发明公开以下技术方案：
5.在本发明的第一方面，公开一种含nmn的组合物的制备方法，包括步骤：
6.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂混合，静置分层后取下层的含有nmn的油状液体，备用。
7.(2)将所述油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂混合均匀，然后造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。
8.(3)将所述含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，完成后干燥，即得含nmn的组合物。
9.进一步地，步骤(1)中，所述萃取剂包括甲醇、乙醇、异丙醇等中的任意一种。该醇类萃取剂可以夺取nmn水溶液中的水分，使nmn从水中析出。
10.进一步地，步骤(1)中，将所述油状液体再次用萃取剂提取1～2次，进一步减少油状液体中含有的水分，提高油状液体中nmn的浓度。
11.进一步地，步骤(1)中，所述萃取剂与nmn水溶液的体积比为8～12倍。
12.进一步地，步骤(2)中，所述油状液体、单脂肪酸甘油酯、磷脂的质量比为20～45：20～40：15～30。
13.进一步地，步骤(2)中，所述单脂肪酸甘油酯包括单硬脂酸甘油酯、单月桂酸甘油
酯、单油酸甘油酯等中的任意一种。
14.进一步地，步骤(2)中，所述磷脂包括蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、葵花磷脂等中的任意一种。
15.进一步地，步骤(3)中，所述含有骨粉的肠溶性包衣液包括水溶性聚合物、骨粉与水的混合液，其可以在含有nmn的脂质颗粒的外表面上形成一层含有棕色骨粉的肠溶性包衣。
16.进一步地，所述骨粉、水溶性聚合物、水的质量比为5～10：30～35：55～65。
17.可选地，所述水溶性聚合物包括甲基丙烯酸
‑
丙烯酸乙酯共聚物、丙烯酸类聚合物、乙基纤维素、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素等中的任意一种。
18.进一步地，所述肠溶性包衣液中含还有增塑剂，可选地，所述增塑剂包括柠檬酸三乙酯、乙酸甘油酯、邻苯二甲酸酯等中的任意一种。
19.在本发明的第二方面，公开所述含nmn的组合物的制备方法制备的产品在医疗、康复等领域中的应用。
20.现有技术相比，本发明取得的有益效果包括：
21.(1)本发明将经过微生物发酵法制备后提纯得到的nmn水溶液直接用萃取剂提取成含有nmn的油状液体，然后与其他组成共同制成nmn胶囊，从而直接将nmn的制备阶段与胶囊的制备融合，不仅可以有效简化nmn胶囊的制备工序，避免nmn在空气环境中暴露时间过长导致nmn分解变质，造成nmn的浪费，提高了nmn的利用率，也避免了采用这种分解变质后的nmn制备的胶囊的品质较低的问题。
22.(2)本发明将nmn与单脂肪酸甘油酯、磷脂混合后制备成了含nmn的脂质颗粒，从而可以将nmn包裹在其中，防止nmn与外界氧气、光接触，造成nmn分解变质，从而可以更好地保护nmn，同时使nmn胶囊进入肠道中后可以逐渐缓释，从而保持持久的药效，确避免血液中nmn的浓度大幅波动，提高药效。
23.(3)本发明在nmn胶囊的外表包覆了一层含有棕色骨粉的肠溶性包衣，肠溶性包衣可以确保nmn胶囊在胃液中不分解，避免nmn在到达肠道之前已经被胃液分解的问题，因为分解后的nmn已经无法起到补充人体缺失的nmn的作用，导致口服nmn胶囊作用不大的问题。同时，包衣中的骨粉在胃液中可以进行有效分解，释放出大量的无机矿物质，同时为人体补充钙、磷等人体骨骼所需的元素。除此之外，棕色的骨粉具有良好的避光作用，其可以进一步保护胶囊中的nmn不受光的影响。
具体实施方式
24.应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。现通过具体实施对本发明进一步说明。
25.下列实施例中，所述通过微生物发酵制备nmn水溶液的方法主要包括在液态发酵培养基中发酵，然后过滤、脱色、提纯等步骤，具体可参考现有技术，其不涉及发明与改进，亦不是本发明的核心，因此，下列实施例中不再赘述。
26.实施例1
27.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
28.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(乙醇)按照体积比
为1:10的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置30min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
29.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：35：20的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为大豆磷脂。
30.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(乙基纤维素)、水按照5：30：60的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
31.实施例2
32.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
33.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(乙醇)按照体积比为1:8的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置30min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
34.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为20：30：15的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单硬脂酸甘油酯，所述磷脂为葵花磷脂。
35.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(甲基丙烯酸
‑
丙烯酸乙酯共聚物)、水按照8：35：55的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
36.实施例3
37.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
38.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(异丙醇)按照体积比为1:12的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置35min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取一次，得到含有nmn的油状液体，备用。
39.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为45：40：30的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单月桂酸甘油酯，所述磷脂为黄卵磷脂。
40.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(邻苯二甲酸羟丙甲纤维素)、水按照10：35：65的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
41.实施例4
42.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
43.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(甲醇)按照体积比
为1:11的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置35min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
44.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：20：15的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为黄卵磷脂。
45.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(乙基纤维素)、增塑剂(乙酸甘油酯)水按照10：35：3：65的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
46.实施例5
47.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
48.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(乙醇)按照体积比为1:10的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置35min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
49.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：30：25的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为黄卵磷脂。
50.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(乙基纤维素)、增塑剂(柠檬酸三乙酯)水按照6：30：3：65的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
51.试验例1
52.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
53.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(乙醇)按照体积比为1:10的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置30min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
54.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：35：20的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为大豆磷脂。
55.试验例2
56.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
57.(1)将经过微生物发酵制备后提纯得到的nmn水溶液与萃取剂(乙醇)按照体积比为1:10的比例混合，然后搅拌30min，将得到的混合液静置30min，待分层后将液体加入分液漏斗中，分离出含有油状液体，其为nmn与水形成的油状混合物，然后将该油状液体再次用上述的萃取剂萃取两次，得到含有nmn的油状液体，备用。
58.(2)将步骤(1)最后得到的油状液体与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：35：
20的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为大豆磷脂。
59.(3)将步骤(2)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由水溶性聚合物(乙基纤维素)和水按照30：60的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
60.试验例3
61.一种含nmn的组合物的制备方法，包括如下步骤：
62.(1)将购买的商品nmn与单脂肪酸甘油酯、磷脂按照质量比为25：35：20的比例混合后搅拌均匀，然后在造粒机中造粒，得到含nmn的脂质颗粒，备用。其中，所述单脂肪酸甘油酯为单油酸甘油酯，所述磷脂为大豆磷脂。
63.(2)将步骤(1)得到的含nmn的脂质颗粒加入含有骨粉的肠溶性包衣液中进行包衣，其中：所述含有骨粉的肠溶性包衣液是由骨粉、水溶性聚合物(乙基纤维素)、水按照5：30：60的质量比混合而成，包衣完成后将得到的湿胶囊置于干燥机中干燥，完成后得到含nmn的组合物，即nmn胶囊。
64.性能测试
65.(1)取上述实施例和试验例制备的nmn胶囊，对其光稳定性进行测试，具体方法为：将这些nmn胶囊溶解在异丙醇溶剂中，并配置成nmn浓度相同的待测液，然后采用100w的日光灯对待测液持续照射五小时，然后检测待测液的吸光度，结果如表1和表2所示。
66.表1
67.序号实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5吸光度降低值11.2％15.7％14.6％17.3％11.6％
68.表2
69.序号试验例1试验例2试验例3吸光度降低值39.5％27.8％44.3％
70.(2)取实施例1和试验例1和试验例2制备的nmn胶囊，参考《中国药典》2015版，对上述nmn胶囊在模拟胃液(ph＝1.0)、肠液(ph＝6.8)中的累积释放度进行测试，结果如表3所示。
71.表3
[0072][0073]
可以看出，在nmn胶囊的外表包覆含有棕色骨粉的肠溶性包衣，肠溶性包衣可以确保nmn胶囊在胃液中不分解，避免nmn在到达肠道之前已经被胃液分解的问题，而且棕色的骨粉具有良好的避光作用，其可以进一步保护胶囊中的nmn不受光的影响；同时，包衣中的
骨粉在胃液中可以进行有效分解，释放出大量的无机矿物质，同时为人体补充钙、磷等人体骨骼所需的元素。
[0074]
以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。