一种治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物及其应用的制作方法

1.本发明属于医药技术领域，更具体的说是涉及一种治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物及其应用。


背景技术：

2.慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流阻塞特征的慢性支气管炎和(或)肺气肿，可进一步发展为肺心病和呼吸衰竭的常见慢性疾病，与有害气体及有害颗粒的异常炎症反应有关，致残率和病死率很高，全球40岁以上发病率已高达9％～10％。慢性阻塞性肺疾病是一种常见的以持续气流受限为特征的可以预防和治疗的疾病，气流受限进行性发展，与气道和肺脏对有毒颗粒或气体的慢性炎性反应增强有关。慢性阻塞性肺病的确切病因不清楚，一般认为与慢支和阻塞性肺气肿发生有关的因素都可能参与慢性阻塞性肺病的发病。已经发现的危险因素大致可以分为外因(即环境因素)与内因(即个体易患因素)两类。外因包括吸烟、粉尘和化学物质的吸入、空气污染、呼吸道感染及社会经济地位较低的人群(可能与室内和室外空气污染、居室拥挤、营养较差及其他与社会经济地位较低相关联的因素有关)。内因包括遗传因素、气道反应性增高、在怀孕期、新生儿期、婴儿期或儿童期由各种原因导致肺发育或生长不良的个体。
3.目前，现有药物治疗可以减少或消除患者的症状、提高活动耐力、减少急性发作次数和严重程度以改善健康状态。吸入治疗为首选，(1)支气管扩张剂临床常用的支气管扩张剂有三类，β2受体激动剂、胆碱能受体阻断剂和甲基黄嘌呤，联合应用有协同作用。(2)吸入糖皮质激素有反复病情恶化史和严重气道阻塞，fev1<50％预计值的患者可吸入糖皮质激素。(3)祛痰和镇咳祛痰剂仅用于痰黏难咳着，不推荐规则使用。(4)抗氧化剂应用抗氧化剂如n
‑
乙酰半胱氨酸、羧甲司坦等可稀化痰液，使痰液容易咳出，并降低疾病反复加重的频率。
4.矽肺又称硅肺、硅沉着症，是一种常见的尘肺病类型。指在职业活动中，劳动者长期吸入游离二氧化硅含量较高的粉尘，引起以双肺弥漫结节性肺纤维化为特征的肺纤维化。可分为慢性矽肺、急性矽肺和急进性矽肺，其中慢性矽肺最为常见，主要表现为咳嗽、咳痰、胸闷、气急等，通过肺功能检查、x线胸片可诊断，矽肺早期如不干预可并发肺结核、肺部感染、阻塞性肺气肿等疾病，矽肺的治疗包括对症治疗、并发症的治疗以及药物治疗。
5.现有技术的治疗方式存在以下诸多问题：治疗时间长，而且治疗不彻底，留下一些后遗症，影响病人的正常工作和生活，而且治疗费用高昂，具有不同程度的毒副作用。
6.因此，研发一种疗程短、见效快、治疗彻底、无毒副作用、成本低廉的治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物是本领域技术人员亟需解决的问题。


技术实现要素：

7.有鉴于此，本发明提供了一种治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物及其在制备治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药物中的应用。
8.为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
9.一种治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物，包括以下重量份的原料制成：
10.广藿香4
‑
14份、苍术9
‑
28份、香薷5
‑
18份、艾叶11
‑
33份、丁香0.1
‑
3份和薄荷2
‑
10份，天然冰片0.01
‑
0.2份。
11.本发明的有益效果是：本发明治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物具有芳香化浊，宣散通窍的功效，用于新型冠状肺炎的轻型、普通型、恢复期及感冒或流感，中医属湿浊内阻、郁肺困脾，症见鼻塞、流涕、咳嗽、胸闷气短、痞满、乏力、肌肉酸痛、咽痛、汗出等。
12.配方机理：
13.1.主治病症的病因
14.本方的主治病症为“新冠肺炎的轻型、普通型、恢复期及感冒或流感引起的鼻塞、流涕、咳嗽和咽喉肿痛等”。其中，新冠肺炎(2019
‑
ncov)属于中医湿邪性质的疫疠范畴，其病因属性为“湿毒之邪”。湿困脾闭肺，气机升降失司，湿毒化热，传入阳明，形成阳明腑实，湿毒瘀热内闭，热深厥深。感冒或流感的病因可为六淫病邪风寒暑湿躁火，有当令之时气和非时之气。
15.2.主治病症的病机
16.根据《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案―试行第七版》，新冠肺炎轻型有寒湿郁肺证和湿热蕴肺证两种证型；新冠肺炎普通型有湿毒郁肺证和寒湿阻肺证两种证型；新冠肺炎的恢复期有肺脾气虚证和气阴两虚证两种证型。对新冠肺炎的病机，其特点为“湿、毒、瘀、闭”，故治疗需始终围绕湿邪论治，还涉及虚的一面，核心病机为“湿、热、毒、瘀、虚”，全程贯穿着湿毒淫肺、壅肺、闭肺。湿邪是新冠肺炎的一个重要因素，且贯穿疾病全过程。初起证候有寒湿、湿热之别，在疾病发展过程中易出现阳气郁滞而化热，湿热并重，阻滞中焦，影响脾胃升降，或湿热蒙上流下，累及三焦而出现发热汗出、胸闷气短、头晕乏力、腹泻纳呆等。根据《流行性感冒诊疗方案2019》可知，中医轻症辨证为风热犯卫和热毒袭肺两种证型。综上，新冠肺炎的轻型、普通型和感冒、流感多是外邪内侵影响肺卫功能失调，导致卫表不和，肺失宣肃。症多见恶寒，发热，鼻塞，流涕，咳嗽，胸闷，痞满等。病程过长者可致脾虚、肺虚。
17.3.主治病症的治法
18.根据病机分析结果，遵循“宣肺散邪、祛湿健脾、扶正祛邪”的治疗原则进行论治。治肺重在宣肺化湿透热，湿去热散，肺气宣肃正常则咳喘平；治脾重在调和气机，通达膜原，脾升胃降，清升浊降，则湿邪得除，枢机通达，三焦和畅。王玉光等将新型冠状病毒肺炎归属于“湿毒疫”范畴，并以此病机为核心进行分期论治，早期(相当于《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案―试行第七版》的轻型、普通型)治法为辟秽化浊、宣肺透郁，恢复期治法为清解余邪。综上，针对新冠肺炎的轻型、普通型、恢复期及感冒或流感的治法宜芳香化浊，宣散通窍。
19.4.处方分析
20.方中以广藿香油和苍术油为君，以香薷油、艾叶油、丁香油和薄荷素油为臣，以和天然冰片为佐使。
21.4.1君药分析
22.广藿香[pogostemon cablin(blanco)benth.]首载于《名医别录》，性味辛温，归脾、胃、肺经。具有芳香化浊，和中止呕，发表解暑的功效。用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿表证，湿温初起，发热倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑，腹痛吐泻，鼻渊头痛。功重在芳香健脾，运化湿浊。芳香辛散而能宣发肺气，助脾化湿浊、透郁热。《别录》、《珍珠囊》载有本品“疗霍乱”，另在《医学入门
·
本草》《本草述》中载有本品“止疟”，而“霍乱”和“疟疾”均与湿邪密切相关，突显《本草述》所载“散寒湿、暑湿、郁热、湿热”以及《医林纂要
·
药性》所载“泻肺邪之清冷，舒胸膈之热郁”的功效，即芳香化浊、发表解暑。倪朱谟《本草汇言》载其：“乃辟秽气为专用”。其性微温，张山雷《本草正义》载其“能祛除阴霾湿邪，而助脾胃正气，为湿困脾阳，倦怠无力，饮食不甘，舌苔浊腻者最捷之药。”本方以广藿香油入药，此油具有抗细菌、抗真菌、抗疟原虫、抗植物病原菌、调节胃肠运动功能、促进消化液分泌、保护肠屏障功能、免疫调节、止咳化痰、止吐、抗炎、镇痛、抗氧化、抗病毒等药理活性
[11]
。《中国药典》(2005年版增补)载广藿香油芳香辛温，入脾、胃、肺经，有芳香化浊，和中止呕，发表解表的功效，与药材功效相应。
[0023]
苍术[茅苍术atractylodes lancea(thunb.)dc.或北苍术atractylodes chinensis(dc.)koidz.]首载于《神农本草经》，性味辛、苦，温。归脾、胃、肝经。具有燥湿健脾，祛风散寒，明目的功效。用于湿阻中焦，脘腹胀满，泄泻水肿，脚气痿躄，风湿痹痛，外感风寒，夜盲，眼目昏涩。《神农本草经》说：苍术“主风寒湿痹，驰肌、痉，疸。”《用药法象》：说：能“除湿发汗，健胃安脾，治痿要药”。可见其功重在辟秽、燥湿、强胃健脾。《本草纲目》记载：“气味雄厚，芳香辟秽，胜四时不正之气，故时疫之病多用之”，古代用于辟秽、燥湿。其味辛散苦燥，《本草纲目》载其“又能用于湿邪在表诸证，除湿发汗以散邪”。《本草正义》说：“苍术气味雄厚，较白术愈猛，能彻上彻下，燥湿而化痰饮，芳香辟秽，胜四时不正之气，故时疫之病多用之，最能祛除秽浊恶气
……
凡湿困脾阳，倦怠嗜卧，肢体酸软，胸膈满闷
……
亦非此不化”。本方以苍术油入药，此油具有显著的抑菌活性
[12
‑
14]
，与药材功效基本相应。
[0024]
广藿香辛宣温通、芳香化湿，苍术辛苦而温、燥湿散寒，两药相合，宣通肺气、健脾化浊，共为君药。
[0025]
4.2臣药分析
[0026]
香薷(石香薷mosla chinensis maxim.或江香薷mosla chinensis
‘
jiangxiangru’)性味辛，微温。归肺、胃经。具有发汗解表，化湿和中之功。用于暑湿感冒，恶寒发热，头痛无汗，腹痛吐泻，水肿，小便不利。本品适用于寒霍乱之轻者，《本草正义》载：“《别录》主霍乱腹痛吐下者，
……
香薷能通阳气，所以可治。”《纲目》载：“霍乱者，宜用此药，以发越阳气，散水和脾。”张山雷《本草正义》载其：“重在散表，又重在利导”。与苍术相似，《本草衍义补遗》和《本草汇言》均载其“有彻上彻下之功，肺得之则清气化行而蕴热自下，脾得之则浊气不干而水道流行”，能增强苍术散表湿之功。本方以香薷油入药，此油具有解热、镇痛、镇静、对离体肠的作用、免疫增强作用、抗菌、抗病毒、降压、降低胆固醇、利尿、镇咳、祛痰等作用
[15]
，与药材功效基本相应。
[0027]
艾叶(艾artemisia argyi l
é
vl.et vant.)性味辛、苦，温；有小毒。归肝、脾、肾经。具有温经止血，散瘀止痛之功；外用能祛湿止痒。用于吐血，衄血，崩漏，月经过多，胎漏下血，少腹冷痛，经寒不调，宫寒不孕；外治皮肤瘙痒。在本方中取其温经，散寒止痛，祛湿的
功效，《本草纲目》载：“温中，逐冷，除湿。”以及《医林纂要
·
药性》载其：“燥脾土，养胃气，温中去寒”“坚肾固命门，养阳逐阴。”《食疗本草》和《本草正义》中治疗与寒湿密切相关的“霍乱”和“瘴疟”又可止由外邪引起的疼痛，《履巉岩本草》载其可“疗咽喉闭痛热壅”。本方以艾叶油入药，此油对心血管系统、中枢神经系统、血凝和血小板等有作用，还具有抗菌、增强网状内皮细胞的吞噬功能、平喘、抗过敏性休克作、镇咳、祛痰、利胆、兴奋子宫等作用，《中国药典》(1977年版)载其功能主治与药材艾叶相应。
[0028]
丁香(eugenia caryophyllata thunb.)性味辛，温。归脾、胃、肺、肾经。具有温中降逆，补肾助阳之功。用于脾虚呃逆呕吐，食少吐泻，心脘冷痛，肾虚阳痿。《开宝本草》丁香“温脾胃，止霍乱壅胀，风毒诸肿。”还有“泻肺寒”“散风湿”(《本草元命苞》《医林纂要
·
药性》)的功效。本方以丁香油入药，此油对消化系统、胃液分泌、实验性胃溃疡均有作用，还具有止泻、利胆、镇痛、抗缺氧、抗凝血、抗突变、抑菌杀虫等作用。《卫生部药品标准维药分册》载丁香油“诸脏，养神经，化顽痰，解三级寒性药(如鸦片)之毒。用于哮喘，咯痰不爽，口臭，胸膜炎等。外涂用于各种寒性疼痛，四肢麻木，冻疮及脑、脊髓病变引起的瘫痪。”《福建省中药材标准》(2006年版)《贵州省中药材民族药材质量标准》(2003版)均载丁香油“辛、甘，大热。归脾、胃、肾经。暖胃，降逆，温肾，止痛。用于胃寒胀痛，呃逆，吐泻，痹痛，疝痛，牙痛”，与药材功效相应。
[0029]
薄荷(mentha haplocalyx briq.)性味辛，凉。归肺、肝经。具有疏散风热，清利头目，利咽，透疹，疏肝行气之功。用于风热感冒，风温初起，头痛，目赤，喉痹，口疮，风疹，麻疹，胸胁胀闷。《本草纲目》载：“其辛能发散，能清利，专于消风散热
……
头痛、头风、眼目、咽喉、口齿诸病，小儿惊热及瘰疬、疮疥为要药。”《药品化义》载其又能“引表药入营卫以疏结滞之气”。本方以薄荷素油入药，此油对中枢神经系统、心血管、呼吸系统等均有作用，还具有解痉、保肝利胆、抗早孕及子宫、抗炎、促进透皮吸收、抗微生物等作用
[15]
，《中华本草》载其“味辛，性凉。具有疏风，清热的功效。主治外感风热，头痛目赤，咽痛，齿痛，皮肤风痒。”其功效与药材相应。
[0030]
香薷辛温，薄荷辛凉，均归肺经，宣散通窍力强，艾叶、丁香辛温入脾，温中散寒化湿，四药共为臣药，以助君药之力。
[0031]
4.3佐使药分析
[0032]
天然冰片性味辛、苦，微寒。归心、脾、肺经。具有开窍醒神，清热止痛之功。用于热病神昏，惊厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，心痹胸痛，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓。《中华本草(蒙药卷)》和《中华本草(藏药卷)》均本品其在清热、消炎方面疗效显著。现代药理研究表明，天然冰片对中枢神经系统有作用，还具有抗炎、抗菌、抗生育等作用。
[0033]
冰片微寒，调和诸药之温燥之性，为佐使之意。
[0034]
4.4处方药味配伍分析
[0035]
广藿香辛宣温通、芳香化湿，苍术辛苦而温、燥湿散寒，两药相合，宣通肺气、健脾化浊，共为君药；香薷辛温，薄荷辛凉，均归肺经，宣散通窍力强，艾叶、丁香辛温入脾，温中散寒化湿，四药共为臣药，以助君药之力；冰片微寒，调和诸药之温燥之性，为佐使之意。诸药除冰片外均以挥发油入药制成喷喉剂，加大宣散通窍、辟秽化浊之功。
[0036]
以上七药合方，共奏芳香化浊，宣散通窍之功。在临床应用上，有助于治疗新型冠状肺炎的轻型、普通型、恢复期及感冒或流感，中医属湿浊内阻、郁肺困脾，症见鼻塞、流涕、
咳嗽、胸闷气短、痞满、乏力、肌肉酸痛、咽痛、汗出等。
[0037]
5.结论
[0038]
新型冠肺炎的轻型、普通型和普通感冒、流感多是外邪内侵影响肺卫功能失调，导致卫表不和，肺失宣肃。症多见恶寒，发热，鼻塞，流涕，咳嗽，胸闷，痞满等。病程过长者可致脾虚、肺虚。治宜芳香化浊、宣散通窍。
[0039]
本发明治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物具有芳香化浊、宣散通窍之功。在临床应用上，有助于治疗新型冠肺炎的轻型、普通型、恢复期及感冒或流感，中医属湿浊内阻、郁肺困脾，症见鼻塞、流涕、咳嗽、胸闷气短、痞满、乏力、肌肉酸痛、咽痛、汗出等。
[0040]
进一步，还包括以下重量份的原料：中链甘油三酸酯8
‑
9份。
[0041]
本发明还提供一种治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药用组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0042]
分别称取上述各原料，将广藿香、苍术、香薷、艾叶、丁香和薄荷粉碎，使用二氧化碳超临界萃取、分离，分别得到广藿香挥发油、苍术挥发油、香薷挥发油、艾叶挥发油、丁香挥发油和薄荷挥发油，将所得各挥发油和天然冰片混合，得药用组合物。
[0043]
进一步，上述广藿香、苍术、香薷、艾叶、丁香和薄荷粉碎至20
‑
40目。
[0044]
采用上述进一步技术方案的有益效果：粉碎至20
‑
40目有利于挥发油的萃出。
[0045]
进一步，上述萃取压力为20
‑
25mpa，萃取温度为35
‑
40℃，萃取时间为90
‑
120min，分离压力5
‑
8mpa，分离温度50
‑
55℃。
[0046]
采用上述进一步技术方案的有益效果：精确的工艺参数可以更多地提取挥发油。
[0047]
本发明还提供上述药用组合物在制备治疗慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的药物中的应用。
[0048]
进一步，上述药物的剂型为喷雾剂、气雾剂或滴鼻剂。
[0049]
采用上述进一步技术方案的有益效果：制成喷雾剂、气雾剂或滴鼻剂便于给药，更好的发挥药效。
[0050]
进一步，上述喷雾剂的制备方法为：
[0051]
将天然冰片加入到链甘油三酸酯中，50
‑
60℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入药用组合物，搅拌均匀，灌装至鼻腔给药喷雾剂瓶中，得到喷雾剂；
[0052]
上述气雾剂的制备方法如下：
[0053]
或，将天然冰片加入到链甘油三酸酯中，50
‑
60℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入药用组合物，搅拌均匀，灌装到气雾剂铝罐中，压盖，充入氮气，安装鼻腔给药按钮，得到气雾剂；
[0054]
上述滴鼻剂的制备方法如下：
[0055]
将天然冰片加入到链甘油三酸酯中，50
‑
60℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入药用组合物，搅拌均匀，灌装至滴瓶中，得到滴鼻剂。
[0056]
采用上述进一步技术方案的有益效果：
[0057]
进一步，上述气雾剂的制备方法中，充入氮气至气雾剂铝罐内压力为0.8
‑
1.0mpa。
[0058]
采用上述进一步技术方案的有益效果：控制铝罐内压，以保证雾化性能，是雾滴粒径能够达到要求。
具体实施方式
[0059]
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
[0060]
实施例1
[0061]
治疗慢性阻塞性肺疾病的药用组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0062]
(1)称取广藿香400克、苍术900克、香薷500克、艾叶1100克、丁香10克和薄荷200克，天然冰片1克，中链甘油三酸酯800克，将广藿香、苍术、香薷、艾叶、丁香和薄荷粉碎至20目，置于超临界萃取提取器中，二氧化碳超临界萃取、分离，萃取压力为20mpa，萃取温度为35℃，萃取时间为90min，分离压力为5mpa，分离温度为50℃，分别得到广藿香挥发油、苍术挥发油、香薷挥发油、艾叶挥发油、丁香挥发油和薄荷挥发油，将所得各挥发油混合，得混合物；
[0063]
(2)将天然冰片加入到中链甘油三酸酯中，50℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入混合物，用中链甘油三酸酯补足体积至1000ml，搅拌均匀，灌装至鼻腔给药喷雾剂瓶中，得到喷雾剂。
[0064]
实施例2
[0065]
治疗矽肺病的药用组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0066]
(1)称取广藿香1000克、苍术1800克、香薷1200克、艾叶2200克、丁香150克和薄荷700克，天然冰片0.110克，中链甘油三酸酯800克。将广藿香、苍术、香薷、艾叶、丁香和薄荷粉碎至20目，置于超临界萃取提取器中，二氧化碳超临界萃取、分离，萃取压力为22mpa，萃取温度为38℃，萃取时间为110min，分离压力为7mpa，分离温度为52℃，分别得到广藿香挥发油、苍术挥发油、香薷挥发油、艾叶挥发油、丁香挥发油和薄荷挥发油，将所得各挥发油混合，得混合物；
[0067]
(2)将天然冰片加入到中链甘油三酸酯中，55℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入药用组合物，用中链甘油三酸酯补足体积至1000ml，搅拌均匀，灌装到气雾剂铝罐中，压盖，充入氮气至气雾剂铝罐内压力为0.9mpa，安装鼻腔给药按钮，得到气雾剂。
[0068]
实施例3
[0069]
治疗慢性阻塞性肺疾病的药用组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0070]
(1)称取广藿香1400克、苍术2800克、香薷1800克、艾叶3300克、丁香300克和薄荷1000克，天然冰片0.220克，中链甘油三酸酯900克。将广藿香、苍术、香薷、艾叶、丁香和薄荷粉碎至20目，置于超临界萃取提取器中，二氧化碳超临界萃取、分离，萃取压力为25mpa，萃取温度为40℃，萃取时间为120min，分离压力为8mpa，分离温度为55℃，分别得到广藿香挥发油、苍术挥发油、香薷挥发油、艾叶挥发油、丁香挥发油和薄荷挥发油，将所得各挥发油混合，得混合物；
[0071]
(2)将天然冰片加入到链甘油三酸酯中，60℃加热搅拌至溶解，然后冷却至室温，再加入药用组合物，用中链甘油三酸酯补足体积至1000ml，搅拌均匀，灌装至滴瓶中，得到滴鼻剂。
[0072]
效果实验
[0073]
1实验方法
[0074]
1.1慢性阻塞性肺疾病(copd)模型的制备
[0075]
spf级大鼠72只，体重250
±
20g，雌雄各半，大鼠适应性饲养3d，自由饮食、进水，随机取60只大鼠，雌雄各半，采用气管内注射脂多糖法联合香烟烟熏制备copd大鼠模型。第1d禁食12h后，用10％的水合氯醛麻醉大鼠，固定于实验台上，用碘酒消毒颈部皮肤，并用乙醇脱碘，逐层分离，暴露气管，抬高大鼠头部，用2ml注射器向气管内注入脂多糖(1g/l)，竖立大鼠，使药物均匀分布于两肺，然后缝合颈部皮肤，对手术创口进行消毒，大鼠清醒后，放入笼中，自由饮水、进食。第20天再次注入脂多糖1次，方法同上。从造模开始，每日大鼠在烟箱中被动吸烟10支
×
1次(第1,20天除外)，上、下午各吸烟5支，每间隔5～10min敲打箱壁1次，避免大鼠扎堆而引起窒息、踩伤或者吸烟量不均匀而影响实验结果。
[0076]
1.2分组及给药
[0077]
将造模成功的60只copd大鼠按体重随机分为5组，分别为模型对照组、实施例1喷雾剂低剂量组(37mg/kg)、实施例1喷雾剂低剂量组(74mg/kg)、实施例1喷雾剂低剂量组(148mg/kg)和地塞米松组(0.09mg/kg)，每组12只，另取12只大鼠作为正常对照组。各给药组按10ml/kg灌胃给予相应药物，正常对照组和模型对照组灌胃给予相同体积的纯水，每日给药1次，给药30d。
[0078]
1.3标本采集
[0079]
末次给药后1h，大鼠水合氯醛麻醉，腹主动脉采血，3000r/min离心15min，取上清液，检测大鼠血清中的tnf
‑
α，il
‑
8，vegf以及il
‑
1β含量。开胸暴露气管和肺脏，进行肺泡灌洗并回收肺泡灌洗液，3000r/min离心15min，取上清液，检测肺泡灌洗液中的白细胞总数、巨噬细胞(am)百分比、嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比。
[0080]
实验结果
[0081]
表1实施例1喷雾剂对copd大鼠血清中tnf
‑
α和il
‑
8含量的影响
[0082][0083]
注：与溶剂对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01。
[0084]
实验结果(表1)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠血清中的tnf
‑
α和il
‑
8含量均显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例1喷雾剂各组大鼠血清中的tnf
‑
α和il
‑
8含量均显著降低(p<0.05或p<0.01)。
[0085]
表2实施例1喷雾剂对copd大鼠血清中vegf和il
‑
1β含量的影响
[0086][0087]
注：与溶剂对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01。
[0088]
实验结果(表2)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠血清中的vegf含量显著降低(p<0.01)，il
‑
1β含量显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例1喷雾剂各组大鼠血清中vegf含量显著升高(p<0.05或p<0.01)，il
‑
1β含量显著降低(p<0.05或p<0.01)。
[0089]
表3实施例1喷雾剂对copd大鼠中白细胞总数和am百分比的影响
[0090][0091]
注：与溶剂对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01。
[0092]
表4实施例1喷雾剂对copd大鼠中pmn和lym百分比的影响
[0093][0094]
注：与溶剂对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01。
[0095]
实验结果(表3和表4)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数、嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比均显著升高(p<0.01)，巨噬细胞(am)百分比显著降低(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例1喷雾剂各组大鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数、嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比均显著降低(p<0.05或p<0.01)，巨噬细胞(am)百分比显著升高(p<0.05或p<0.01)。
[0096]
终上所述，在本实验条件及所涉及的剂量下，实施例1喷雾剂可以明显改善慢性阻塞性肺疾病和矽肺病的症状，具有一定的治疗作用。
[0097]
实施例2气雾剂对矽肺模型大鼠的影响
[0098]
2实验方法
[0099]
2.1动物分组
[0100]
spf级sd雄性大鼠72只，大鼠适应性喂养3d，将sd大鼠随机分为5组，分别为模型对照组、实施例2气雾剂低剂量组(37mg/kg)、实施例2气雾剂中剂量组(74mg/kg)、实施例2气雾剂高剂量组(148mg/kg)和吡非尼酮组(100mg/kg)，每组12只，另取12只大鼠作为正常对照组。
[0101]
2.2矽肺大鼠模型的制备及给药
[0102]
应用1％戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔内注射麻醉，将大鼠仰卧位固定在鼠板上，固定四肢及头部；使用一次性静脉留置针行气管插管，使用注射器经气管内一次性注射50mg/ml二氧化硅粉尘悬浊液(游离二氧化硅含量为99％，<5pm颗粒大于99％，使用前按8000u/ml加入青霉素)1ml，空白对照组注射相同体积的生理盐水。注入后立刻旋转动物，使药液均匀分布于肺内。
[0103]
造模后第3d开始给药，各给药组按10ml/kg灌胃给予相应药物，正常对照组和模型对照组灌胃给予相同体积的纯水，每日给药1次，给药40d。
[0104]
2.3指标检测
[0105]
末次给药后1h，大鼠水合氯醛麻醉，放血后，开胸暴露气管和肺脏，使用动脉夹夹毕右肺，进行肺泡灌洗并回收肺泡灌洗液，3000r/min离心15min，取上清液，检测肺泡灌洗液中的白细胞总数、嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比。称取200mg左右的右肺，快速冷冻于
‑
80℃冰箱中，制备10％肺组织匀浆，检测匀浆液中的tnf
‑
α，il
‑
6以及il
‑
1β含量。
[0106]
实验结果
[0107]
表5实施例2气雾剂对矽肺大鼠肺组织中tnf
‑
α和il
‑
6含量的影响6含量的影响
[0108][0109]
注：与模型对照组比较，
**
p<0.01。
[0110]
实验结果(表5)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺组织中的tnf
‑
α和il
‑
6含量均显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例2气雾剂各组大鼠肺组织中的tnf
‑
α和il
‑
6含量均显著降低(均p<0.01)，且呈一定的剂量依赖性。
[0111]
表6实施例2气雾剂对矽肺大鼠肺组织中il
‑
1β含量的影响
[0112][0113][0114]
注：与模型对照组比较，
**
p<0.01。
[0115]
实验结果(表6)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺组织中的il
‑
1β含量显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例2气雾剂各组大鼠肺组织中的il
‑
1β含量均显著降低(均p<0.01)，且呈一定的剂量依赖性。
[0116]
表7实施例2气雾剂对矽肺大鼠中白细胞总数的影响
[0117][0118]
注：与模型对照组比较，
**
p<0.01。
[0119]
实验结果(表7)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例2气雾剂各组大鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数均显著降低(均p<0.01)。
[0120]
表8实施例2气雾剂对矽肺大鼠中pmn和lym百分比的影响
[0121][0122]
注：与模型对照组比较，
*
p<0.05，
**
p<0.01。
[0123]
实验结果(表8)所示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺泡灌洗液中的嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比均显著升高(p<0.01)；与模型对照组比较，实施例2气雾剂各组大鼠肺泡灌洗液中的嗜中性粒细胞(pmn)百分比和淋巴细胞(lym)百分比均显著降低(p<0.05或p<0.01)。
[0124]
终上所述，在本实验条件及所涉及的剂量下，实施例2气雾剂可以明显改善矽肺疾病的症状，具有一定的治疗作用。
[0125]
上述所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。