一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂及其制备方法

1.本发明涉及生物医用材料技术领域，具体是一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂及其制备方法。


背景技术：

2.凝胶是药物与能形成凝胶的辅料制成溶液、混悬或乳状液型的稠厚液体或半固体制剂。其中运用较广的为水凝胶，它在水中迅速溶胀并在此溶胀状态可以保持大量体积的水而不溶解，具有涂布性好、粘滞度小和生物相容性好等优点，但同时具有容易失水和发霉的缺点。
3.目前水凝胶的制备常常加入稳定剂来增加凝胶的稳定性，添加防腐剂预防凝胶体系发生霉变；常见的防腐剂对羟基苯甲酸丁酯和常见的稳定剂乙二胺四乙酸二钠均对眼睛和皮肤有刺激作用，其中乙二胺四乙酸二钠受高热分解还会产生有毒的腐蚀性烟气。虽然在实际使用中防腐剂和稳定剂的添加量较少，不仅对人体有毒害作用，还会影响药物的药性。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂及其制备方法，以至少达到增加凝胶剂的稳定性和防腐能力，抑制表面葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌等体表细菌的滋生以及缓解皮肤炎、关节炎等体表炎症的目的。
5.本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
6.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂，一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂，所述凝胶剂包括含绿原酸和安石榴苷的任意一种或两种的天然植物提取物、皂树皂苷；所述凝胶剂的组分的按质量百分数计，含有20％的天然植物提取物和5％
‑
10％的皂树皂苷；所述天然提取物中的安石榴苷的含量为60％
‑
100％；所述天然提取物中的绿原酸的含量为40％
‑
100％。
7.进一步的，含安石榴苷的所述天然植物提取物为石榴皮提取物，含绿原酸的所述天然植物提取物为金银花提取物
8.进一步的，所述凝胶剂的组分的按质量百分数计，为20％的天然植物提取物、5％
‑
10％的皂树皂苷、1％
‑
2.5％的卡波姆、5％
‑
10％的1,2
‑
丙二醇、10％
‑
20％的甘油、0.4％
‑
1％的氢氧化钠，余量为蒸馏水。
9.进一步的，所述凝胶剂的组分的按质量百分数计，为10％的石榴皮提取物、10％的金银花提取物、10％的皂树皂苷、2.5％的卡波姆、10％的1,2丙二醇、20％的甘油、1％的氢氧化钠，余量为蒸馏水。
10.进一步的，所述皂树皂苷纯度为95％
‑
100％。
11.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂的制备方法，根据所述凝胶剂的组分含量准备原材料，制备方法包括以下步骤：
12.s1：首先将5
‑
10％的皂树皂苷溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1
‑
2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
13.s2：其后倾倒加入5
‑
10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10
‑
20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
14.s3：其后将20％的石榴皮提取物溶于等质量的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
15.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4
‑
1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph在6.5
‑
7.5皂树皂苷凝胶剂。
16.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂的制备方法，根据所述凝胶剂的组分含量准备原材料，制备方法包括以下步骤：
17.s1：首先将5
‑
10％的皂树皂苷溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1
‑
2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
18.s2：其后倾倒加入5
‑
10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10
‑
20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
19.s3：其后将20％的金银花提取物溶于等质量的温度为50℃
‑
80℃蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
20.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4
‑
1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph在6.5
‑
7.5皂树皂苷凝胶剂.
21.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂的制备方法，根据所述凝胶剂的组分含量准备原材料，制备方法包括以下步骤：
22.s1：首先将5
‑
10％的皂树皂苷溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1
‑
2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
23.s2：其后倾倒加入5
‑
10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10
‑
20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
24.s3：其后10％的石榴皮提取物溶于等质量的蒸馏水中，并将10％的金银花提取物溶于等质量的温度为50℃
‑
80℃蒸馏水中，其后将溶有石榴皮提取物和溶有金银花提取物的溶液与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
25.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4
‑
1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph在6.5
‑
7.5皂树皂苷凝胶剂。
26.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂及其制备方法，以所述皂树皂苷作为凝胶体系中的乳化剂、稳定剂和防腐剂，卡波姆为高分子基质材料，甘油为保湿剂，1,2
‑
丙二醇为促渗剂，氢氧化钠为ph调节剂；卡波姆不支持细菌、霉菌生长；所述皂树皂苷为一种三萜类皂苷，将皂树酸作为三萜(烯)的配糖体，皂树酸作亲油基，低聚糖作亲水基，使得皂树皂苷具有很好的乳化性和起泡性，能够增强凝胶体系的稳定性，同时还具有一定的抗菌消炎活性，能够增强凝胶体系的抑菌抗霉变能力；在此基础上，本发明涉及的凝胶剂中的石榴皮提取物的主要成分安石榴苷和金银花提取物的主要成分绿原酸均具有抑菌抗炎、抗病毒和抗氧化等作用，其中安石榴苷还具有镇痛、抗惊厥的功效，绿原酸对治愈创伤、润滑皮肤等有一定的疗效，两者的协同作用下显著提高了所述皂树皂苷凝胶剂的抑菌作用，使得所述皂树皂苷凝胶剂能抑制表面葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌等体表细菌的滋生以及缓解皮肤炎、关节
炎等体表炎症；所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的主要成分均来源于天然植物提取，具有非常高的安全性，使用后无不良反应发生；且其制备方法简单，制备条件温和，不会影响所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的成分的功效。
27.本发明的有益效果是：
28.(1)所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶主要成分来源于天然提取物，对皮肤无刺激、无致敏作用，能稳定持久释放药物，生物利用度高，具有很高的安全性，无不良反应发生。
29.(2)通过所述皂树皂苷作为凝胶体系中的乳化剂、稳定剂和防腐剂，能增强凝胶体系的稳定性的同时还具有一定的抗菌消炎活性，且能够增强凝胶体系的抑菌抗霉变能力。
30.(3)所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶中通过石榴皮提取物和金银花提取物的联用，使其抑菌作用显著增强，同时还具有抗炎、抗病毒、抗氧化、镇痛、抗惊厥、治愈创伤和润滑皮肤等作用。
31.(4)所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶制备方法简单，制备条件温和，不会影响所述抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的成分的功效。
32.(5)采用抑菌圈法测试本发明得到的凝胶剂的抑菌作用，本发明所述的凝胶剂对表面葡萄球菌的抑菌圈直径高达19.88mm，对绿脓杆菌的抑菌圈直径高达17.79mm，对白念珠菌的抑菌圈直径高达17.11mm；耳肿胀抑制率高达64.68％。
附图说明
33.图1为稳定性实验评分结果图；
34.图2为皂树皂苷凝胶剂的制备流程图。
具体实施方式
35.下面结合附图进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。
36.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶剂，所述凝胶剂包括以下组分：天然植物提取物(含绿原酸和安石榴苷的任意一种或两种的天然植物提取物)、皂树皂苷、卡波姆、1,2
‑
丙二醇、甘油、氢氧化钠和蒸馏水；所述凝胶剂的组分的按质量百分数计，为20％的天然植物提取物、5
‑
10％的皂树皂苷、1
‑
2.5％的卡波姆、5
‑
10％的1,2
‑
丙二醇、10
‑
20％的甘油、0.4
‑
1％的氢氧化钠，余量为蒸馏水。
37.实施例1
38.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
39.s1：按质量分数计，将5％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
40.s2：其后倾倒加入5％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
41.s3：其后将20％的石榴皮提取物(含60％安石榴苷)溶于等质量的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
42.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.03的皂树皂苷凝胶剂。
43.实施例2
44.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
45.s1：按质量分数计，将5％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
46.s2：其后倾倒加入5％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
47.s3：其后将20％的金银花提取物(含40％绿原酸)溶于等质量的温度为50℃的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
48.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.01的皂树皂苷凝胶剂。
49.实施例3
50.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
51.s1：按质量分数计，将5％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
52.s2：其后倾倒加入5％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
53.s3：其后将10％的金银花提取物(含40％绿原酸)溶于等质量的温度为50℃的蒸馏水中，将10％的石榴皮提取物(含60％安石榴苷)溶于等质量的蒸馏水中；其后将溶有石榴皮提取物和溶有金银花提取物的溶液与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
54.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.02的皂树皂苷凝胶剂。
55.实施例4
56.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
57.s1：按质量分数计，将10％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
58.s2：其后倾倒加入10％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
59.s3：其后将20％的石榴皮提取物(含60％安石榴苷)溶于等质量的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
60.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.12的皂树皂苷凝胶剂。
61.实施例5
62.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
63.s1：按质量分数计，将10％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
64.s2：其后倾倒加入10％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
65.s3：其后将20％的金银花提取物(含40％绿原酸)溶于等质量的温度为50℃的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
66.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.07的皂树皂苷凝胶剂
67.实施例6
68.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
69.s1：按质量分数计，将10％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
70.s2：其后倾倒加入10％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
71.s3：其后将10％的石榴皮提取物(含60％安石榴苷)溶于等质量的蒸馏水中，并将10％的金银花提取物(含40％绿原酸)溶于等质量的温度为50℃的蒸馏水中，其后与步骤s2中得到的凝胶基质混合溶液混合搅拌均匀；
72.s4：向步骤s3中得到的溶液搅拌均匀后加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.09的皂树皂苷凝胶剂。
73.对比例1
74.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
75.s1：按质量分数计，将5％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
76.s2：其后倾倒加入5％1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
77.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.02的皂树皂苷凝胶剂。
78.对比例2
79.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
80.s1：按质量分数计，将10％的皂树皂苷(纯度为95％)溶于皂树皂苷等质量的蒸馏水中，其后加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
81.s2：其后倾倒加入10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
82.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.09的皂树皂苷凝胶剂。
83.对比例3
84.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
85.s1：按质量分数计，向10％的蒸馏水中加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
86.s2：其后倾倒加入5％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
87.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.02的皂树皂苷凝胶剂。
88.对比例4
89.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
90.s1：按质量分数计，向20％的蒸馏水中加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
91.s2：其后倾倒加入10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
92.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.09的皂树皂苷凝胶剂。
93.对比例5
94.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
95.s1：按质量分数计，将0.2％的稳定剂乙二胺四乙酸二钠溶于10％的蒸馏水中，其后加入1％的卡波姆充分溶胀过夜；
96.s2：其后倾倒加入5％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加10％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
97.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入0.4％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.02的皂树皂苷凝胶剂。
98.对比例6
99.一种抗菌消炎的皂树皂苷凝胶的制备方法，包括以下步骤：
100.s1：按质量分数计，将0.4％的稳定剂乙二胺四乙酸二钠溶于10％的蒸馏水中，其后加入2.5％的卡波姆充分溶胀过夜；
101.s2：其后倾倒加入10％的1,2
‑
丙二醇，其后在搅拌的条件下滴加20％的甘油，混合均匀得到凝胶基质溶液；
102.s3：向步骤s2中得到的凝胶基质溶液中加入1％的氢氧化钠，补足蒸馏水得到ph为7.09的皂树皂苷凝胶剂。
103.(1)稳定性测试
104.将所有实施例及对比例进行稳定性测试，测试方法为：
105.将待测样品具塞分别放置于0℃，25℃和37℃条件下，分别在第10天、第20天和第30天通过观察凝胶的外观状态、均匀性、涂抹性及离心稳定性来判断样品凝胶的稳定状态。评分标准见下表1，根据实际情况进行上下微调；选定10个实验评分员进行独立评分，评分结果去掉最大值和最小值，取其余结果的平均值比较各凝胶的稳定性状态绘制折线图见图1。
106.表1：水凝胶感官指标评分标准表
107.[0108][0109]
如图1可知，对比例1
‑
2和对比例5
‑
6的对比可见，皂树皂苷与稳定剂乙二胺四乙酸二钠对于增强凝胶稳定性的效果相当，实验结果中实例1
‑
6的稳定性较好，说明本发明制备的凝胶在一般情况下室温保存即可；实例4
‑
6制得的凝胶与实例1
‑
3制得的凝胶相比，实例4
‑
6制得凝胶水的添加量少，黏度较好但均匀度和外观状态没有实例1
‑
3制得凝胶好；本发明制备出的微乳稳定性都较好。
[0110]
(2)抑菌实验
[0111]
将实施例对实施例1
‑
6、对比例1
‑
4所制的抗菌消炎的皂树皂苷凝胶均进行体外抑菌测试。
[0112]
试验菌株：表面葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌，由中国普通微生物菌种保藏中心提供。
[0113]
实验用品：牛津杯(外径7.8mm
±
0.1mm)、培养皿、lb液体培养基、lb固体培养基、生理盐水、阳性对照药物盐酸米诺环素胶囊等。
[0114]
供试药液：实施例1
‑
6对比例1
‑
4制得的凝胶溶液。
[0115]
对照药液：配制1mg/ml盐酸米诺环素溶液，并稀释100倍，作为阳性对照药液。
[0116]
实验方法：取冷藏保存的表面葡萄球菌、白念珠菌、绿脓杆菌菌种，在37℃下培养24h，挑取单菌落用划线法转接至数个灭菌斜面培养基上养24h；将活化的3种试验菌用接种环挑取菌落，转至lb液体培养基在37℃下培养8～10h，离心后用无菌生理盐水稀释成含菌量大约为1.5
×
108cfu/ml的菌悬液，备用。
[0117]
使用牛津杯法测所制凝胶的抑菌能力，培养皿上对称放置4个牛津杯，倒入10ml lb固体培养基，再倒入含菌悬液1ml的10ml lb固体培养基，凝固后取出牛津杯，1孔中加入蒸馏水作为空白对照，其余3孔加入供试液。每个菌做11组受试液，分别为：阳性对照组、实施例1
‑
6、对比例1
‑
4；使用游标卡尺测定每个抑菌圈的直径，每个抑菌圈从不同的方向测3次取平均值，实验结果见表2所示。
[0118]
表2：凝胶的抑菌实验结果
[0119][0120]
对比例1、2相较于对比例3、4的实验结果表明皂树皂苷存在一定的抑菌活性，且对白念珠菌的抑制效果比绿脓杆菌和表面葡萄球菌抑制效果要强，说明皂树皂苷有一定的防腐能力。实施例1
‑
6的实验结果表明，石榴皮提取物和金银花提取物联用时抑菌作用显著增强；实验结果表示本发明所制得的凝胶具有较好的抑菌能力，对比例3、4表明不含天然提取物和皂树皂苷制备的凝胶剂基本对白念珠菌、比绿脓杆菌和表面葡萄球菌无抑制效果。
[0121]
(3)体外消炎实验
[0122]
对实施例对实施例1
‑
6、对比例1
‑
4所制的抗菌消炎的皂树皂苷凝胶进行体外消炎测试。
[0123]
实验动物：spf级昆明种小鼠，成都达硕实验动物有限公司。
[0124]
药物与试剂：实施例1
‑
6和对比例1
‑
4制得的凝胶，二甲苯，阳性对照药物复方醋酸地塞米松乳膏、蒸馏水等。
[0125]
实验方法：将雄性小鼠78只，随机分为13组，分为空白对照组，模型对照组，阳性对照组，实施例1
‑
6组、对比例1
‑
6组，每组6只，空白对照组和模型对照组每天使用蒸馏水涂抹小鼠右耳廓正反面两次，其余组用相同的方法涂抹受试药，连续给药7d；末次给药30min后取0.03ml二甲苯涂于除空白对照组外的小鼠右耳正反面，30min后将动物处死，沿小鼠耳廓剪下两耳，用直径8mm的打孔器分别打出左右耳相同部位的耳片，称重，并按下式计算肿胀度和肿胀度抑制率：
[0126]
耳廓肿胀度＝右耳片质量
‑
左耳片质量
[0127][0128]
实验结果见表3。
[0129]
表3：各组耳廓肿胀度与耳肿胀抑制率
[0130]
实验组耳廓肿胀度/mg耳肿胀抑制率空白对照组0.21
±
2.15
‑
模型对照组19.28
±
1.94
‑
阳性对照组6.43
±
2.2166.65％实施例1组8.51
±
1.1155.86％实施例2组8.76
±
2.1654.56％实施例3组7.03
±
1.1563.54％实施例4组8.21
±
1.1157.42％实施例5组8.33
±
2.1656.79％实施例6组6.81
±
2.2164.68％对比例117.75
±
3.127.94％对比例217.27
±
2.1810.43％对比例319.33
±
1.24
‑
对比例419.27
±
0.94
‑
[0131]
对比例1、2组和对比例3、4组的实验结果表明皂树皂苷存在一定的消炎作用；实例1、2、4、5组和实施例3、6组的测试结果表明，石榴皮提取物和金银花提取物联用时抗炎效果增强；抗炎作用结果表明本发明所制得的凝胶存在较好的抗炎作用。
[0132]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。