一种水溶性富勒烯复合物及其制备方法和应用与流程

1.本公开涉及高分子材料领域，特别涉及一种水溶性富勒烯复合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.1985年科学家kroto、smalley、curl等人在研究太空深处的碳元素时发现了c60富勒烯，1996年三人因此而获得诺贝尔化学奖。富勒烯与金刚石、石墨同为碳的同素异形体。c60是由60个碳原子组成的球形分子，由12个五边形和20个六边形组成，每个碳原子和相邻的三个碳原子通过sp2杂化成键，因形似足球而被称为足球烯。
3.富勒烯的多个p轨道构成的大π键共轭体系，使得其具有较强的接受电子的能力，因其独特的结构和理化性质，使其具有优异的清除自由基性能，被称为“自由基海绵”，同时还表现出了优异的抗氧化性能。使其在化妆品材料、生物医药等方面得到广泛关注。
4.通过将c60嵌入表面活性剂中，c60仍可以消除细胞内的活性氧，抑制线粒体的去极化、半胱氨酸蛋白酶的激活、细胞膜上磷脂酰丝氨酸的曝光以及dna的分裂，c60表现出了保护细胞不被氧化凋亡的作用。c60脂质体复合物通过防御uva对皮肤结构，细胞核和胶原纤维的破坏以及向人体皮肤组织的渗透来起到抗氧化作用，是维他命c的几百倍，能够猝灭自由基。
5.作为外用品，已有专利报道了富勒烯相关的产品，例如c60-pvp(申请号cn200480005008.1，cn200580049615.2)，由于制备工艺及pvp与c60的复合特性限制，在该复合物中，c60的含量不超过1％。201810871219.7，由于与高分子组合物进行复配，过多的涂敷在皮肤表层后对某些化妆品功效的发挥会起到一定的阻碍作用。如富勒烯纳米悬浮液(cn201510971343.7)，但是该成分为大颗粒的富勒烯成分，添加到配方中后会影响配方稳定性和外观及使用舒适度，并且大颗粒的富勒烯成分很难在皮肤起到修复作用，仅能附着在皮肤表层，起到屏障作用。
6.富勒烯是一种非极性分子，具有强烈的疏水性，仅能够溶于对生物体有害的非极性有机溶剂如甲苯、苯、环己烷、氯仿中。富勒烯本身疏水性性质直接影响了其生物活性的发挥。油溶性富勒烯材料难于加到水系产品。而现有技术中存在诸多缺陷，包括工艺过程复杂、工业化成本高，不会大量生产，难以达到产业化目的；大量使用有机试剂，导致溶剂残留；混悬富勒烯未将富勒烯充分的分散或溶解状态；富勒烯与高分子材料或组合物进行复配可能会影响后期使用效果，难以被皮肤吸收。
7.因此为了更好的促进吸收，将富勒烯制成水溶性、易于皮肤快速吸收状态的溶液型，使得产品能够更易加入到化妆品中，达到更好的清除自由基、美白亮肤、淡化皱纹、屏障修复、治疗干燥肌肤等效果，是迫切需要解决的问题。


技术实现要素：

8.本公开的目的在于提供一种新型水溶性富勒烯复合材料，及其制备方法和在化妆
品中的应用。
9.具体地，本公开提供了一种水溶性富勒烯复合物，由富勒烯和水溶性原料复合制得，所述水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、玻色因、依克多因、神经酰胺、胶原蛋白、水解胶原蛋白、糖原、海藻胶或氨基酸中的一种或多种。
10.本公开的一方面，所述水溶性富勒烯复合物，其中富勒烯为空心富勒烯、金属富勒烯、杂环富勒烯中的至少一种，优选地富勒烯选自c2n、m@c2n、m2@c2n、ma@c2n、m3n@c2n、m2c2@c2n、m2s@c2n、m2o@c2n和mxa3-xn@c2n中的任一种或其混合物，其中，m和a均为金属元素，所述m和a均选自sc、y和镧系金属元素中的任意一种；其中30≤n≤60；0≤x≤3。
11.本公开的一方面，所述富勒烯在所述水溶性富勒烯复合物中占质量比为0.5％-10％，优选地为1％-5％。
12.本公开的另一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物，所述水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、玻色因、依克多因、神经酰胺、胶原蛋白、水解胶原蛋白、糖原、海藻胶或氨基酸中的至少两种；可选地，所述水溶性富勒烯复合物中富勒烯重量占比为0.5％-10％，或0.5％-5％，或1％-5％。
13.本公开的另一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物，所述水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、依克多因中的一种或多种；可选地，所述水溶性富勒烯复合物中富勒烯重量占比为0.5％-10％，或1％-10％，或0.5％-5％，或1％-5％，或1.5％-4％，或2％-3％。
14.本公开的另一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物，所述水溶性富勒烯复合物选自富勒烯银耳多糖复合物，富勒烯依克多因复合物，或富勒烯聚谷氨酸复合物中的一种或多种。
15.本公开的另一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物，所述水溶性富勒烯复合物为富勒烯与银耳多糖、依克多因和聚谷氨酸的多元复合物，可选地所述水溶性富勒烯多元复合物中富勒烯重量占比为0.5％-10％，优选地为1％-5％。
16.本公开的另一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物的制备方法，所述制备方法包括：取富勒烯粉末与水溶性原料混合均匀，其中富勒烯与水溶性原料重量比为1:10
–
1:200；可选地，所述制备方法包括将所述富勒烯粉末与水溶性原料混合物通过强力分散处理，得到混合物粉体材料；所得粉体材料加水充分溶解，在离心设备中高速离心后，得到上清液；使用过滤设备过滤后经浓缩、干燥得到所述水溶性富勒烯复合物。
17.如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物的制备方法，所述制备方法包括：
18.取富勒烯粉末与水溶性原料混合均匀，其中富勒烯与水溶性原料重量比为1:10
–
1:200；可选地为1:20-1:100，或1:20-1:50，或1:30-1:50；
19.可选地，所述制备方法包括将所述富勒烯粉末与水溶性原料混合物通过强力分散处理，得到混合物粉体材料，其中所述强力分散处理设备选自混料机、球磨机、气流磨、超高压均质机或超声震荡机中的任一种；
20.所得粉体材料加水充分溶解，在离心设备中高速离心后，得到上清液，其中所述离心设备选自管式离心器、板式过滤器、台式过滤器中的任一种；
21.使用过滤设备过滤所述上清液后经浓缩、干燥得到所述水溶性富勒烯复合物，其中所述过滤设备选用板框过滤器、卷式过滤器或薄膜过滤器中的任一种；其中所述浓缩步
骤采用的设备选自旋转蒸发仪、反渗透卷式ro膜、薄膜蒸发器中的任一种。
22.本公开另一方面，提供如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物的应用，包括其在清除自由基、抑制细胞氧化损伤中的应用。
23.一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物的应用，包括其在治疗或修复皮肤干燥、修复皮肤屏障、增加或保持皮肤角质层含水量中的应用。
24.一方面，如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物在化妆品中的应用，其中所述化妆品具有补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、修复皮肤屏障的一种或多种效果。
25.本公开的另一方面，涉及一种组合物，所述组合物包括如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物，以及化妆品原料。
26.本公开的另一方面，涉及如前所述的任一种组合物在化妆品中的应用。
27.如前所述的任一种组合物在清除自由基、抑制细胞氧化损伤中、增加或保持皮肤角质层含水量、治疗或修复皮肤干燥、修复皮肤屏障中的应用。
28.如前所述的任一种组合物在化妆品中的应用，其中所述化妆品具有补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、修复皮肤屏障的一种或多种效果。
29.本公开的另一方面，涉及一种改善皮肤状态的方法，改善皮肤状态包括补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、修复皮肤屏障中的一种或多种；所述方法包括使用如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物的步骤。
30.本公开的另一方面，涉及一种清除自由基、抑制细胞氧化损伤、治疗皮肤干燥的方法，所述方法包括使用如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物的步骤。
31.有益效果：
32.本公开富勒烯复合材料制备工艺简单、处理时间短、效率高、能耗低，容易实现产业化。且本公开的水溶性原料多为植物提取，非发酵及化学合成原料，有机绿色。
33.本公开富勒烯复合材料具有良好的水溶性，容易被皮肤吸收；本公开的富勒烯复合物，在后期使用过程不会行成薄膜层，会促进富勒烯被皮肤吸收；本公开的富勒烯复合物具有良好的美白亮肤、淡化皱纹、屏障修复、治疗干燥肌肤、修复皮肤屏障等作用效果。
附图说明
34.图1示出了自旋捕获法测试不同浓度条件下富勒烯银耳多糖复合物清除羟基自由基的能力；
35.图2示出了双氧水损伤细胞存活率实验中，水溶性富勒烯复合物具有明显的抑制氧化损伤的作用；
36.图3示出了受试者测试区域角质层水分含量变化趋势；
37.图4示出了受试者测试区域角质层水分含量变化率；
38.图5示出了受试者测试区域皮肤白皙度l值变化趋势；
39.图6示出了受试者测试区域皮肤黑色素含量mi值变化趋势；
40.图7示出了受试者测试区域皮肤皱纹深度变化趋势；
41.图8示出了富勒烯银耳多糖面霜组受试者皮肤屏障修复效果；
42.图9示出了富勒烯银耳多糖面霜组干燥肌肤修复效果。
具体实施方式
43.根据本公开的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本公开上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
44.i.定义
45.除非另有其它明确表示，否则在整个说明书和权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。
46.如本文所用，术语“富勒烯”是一系列由偶数个碳原子组成，有12个五元环，其余为六元环组成的类球形团簇分子。富勒烯包括空心富勒烯、内嵌金属富勒烯，所述内嵌富勒烯为在富勒烯的碳笼结构内包入金属或金属原子簇。
47.术语“金属富勒烯”、“内嵌富勒烯”是指在富勒烯的碳笼结构内包入各种不同的金属或金属原子簇，形成一类具有特殊结构和性质的化合物，此类化合物通常被称为内嵌富勒烯，一般用m@c2n形式表示，其中m代表金属元素。
48.术语“化妆品原料”指制备化妆品用到的原料，化妆品是由各种原料经过合理调配加工而成的复配混合物。化妆品的原料种类繁多，性能各异。根据化妆品的原料性能和用途，大体上可分为基质原料和辅助原料两大类。
49.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本公开的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本公开上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本公开上述内容所实现的技术均属于本公开的范围。
50.ii.具体实施方式
51.本公开的一个方面，涉及一种水溶性富勒烯复合物，由富勒烯和水溶性原料复合制得，所述水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、玻色因、依克多因、神经酰胺、胶原蛋白、水解胶原蛋白、糖原、海藻胶或氨基酸中的一种或多种。
52.在一个实施例中，所述富勒烯为空心富勒烯、金属富勒烯、杂环富勒烯中的至少一种，优选地富勒烯选自c2n、m@c2n、m2@c2n、ma@c2n、m3n@c2n、m2c2@c2n、m2s@c2n、m2o@c2n和mxa3-xn@c2n中的任一种或其混合物，其中，m和a均为金属元素，所述m和a均选自sc、y和镧系金属元素中的任意一种；其中30≤n≤60；0≤x≤3。
53.在本公开的一个具体实施例中，所述富勒烯选自富勒烯c60、c70、c76、c84或金属富勒烯gd@c82中的一种或多种。
54.在一个具体实施例中，所述富勒烯优选地为富勒烯c60、c70中的一种或多种。
55.在一个实施例中，水溶性富勒烯复合物中所述富勒烯质量占比0.5％-30％。
56.在一个实施例中，水溶性富勒烯复合物中所述富勒烯质量占比0.5％-10％或1％-10％。
57.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯质量占比优选地为0.5％-5％或1％-5％。
58.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯质量占比优选地为1.5％-4％。
59.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯质量占比优选地为2％-3％。
60.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯质量占比优选地为2％。
61.在一个实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯：水溶性原料的重量配比为1:2-1:200。
62.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物中富勒烯：水溶性原料的重量配比优选地为1:20-1:100，或1:20-1:50，最优选地为1:50。
63.在一个实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯和水溶性原料复合制得，水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、依克多因中的至少一种。
64.本公开的一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯和银耳多糖复合制得，复合物中富勒烯占比0.5％-10％，优选地为1％-10％，或1％-5％，或2％-3％，最优选为2％。
65.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯和聚谷氨酸复合制得，复合物中富勒烯占比2％-5％，优选地为2％-4％，或2％-3％，最优选为2％。
66.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯和依克多因复合制得，复合物中富勒烯占比2％-10％，优选地为2％-8％，或2％-5％，或2％-3％，最优选为2％。
67.本公开的另一方面，涉及一种水溶性富勒烯多元复合物，所述水溶性原料包括银耳多糖、聚谷氨酸、玻色因、依克多因、神经酰胺、胶原蛋白、水解胶原蛋白、糖原、海藻胶或氨基酸中的至少两种。
68.在一个实施例中，水溶性富勒烯多元复合物中所述富勒烯占比0.5％-30％，优选0.5％-10％，或0.5％-5％，或1％-5％；最优选地为1％。
69.在一个实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯、第一水溶性原料和第二水溶性原料复合制得，所述第一水溶性原料为银耳多糖，所述第二水溶性原料选自聚谷氨酸、玻色因、依克多因、神经酰胺、胶原蛋白、水解胶原蛋白、糖原、海藻胶或氨基酸中的一种或多种。
70.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯、银耳多糖、聚谷氨酸、依克多因复合制得。
71.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯、银耳多糖、聚谷氨酸复合制得。
72.在一个具体实施例中，水溶性富勒烯复合物由富勒烯、银耳多糖、依克多因复合制得。
73.本公开的另一方面，涉及水溶性富勒烯复合物的制备方法，所述制备方法包括：
74.取富勒烯粉末与水溶性原料混合均匀，其中富勒烯与水溶性原料重量比为1:10
–
1:200；
75.将所述富勒烯粉末与水溶性原料混合物通过强力分散处理，得到混合物粉体材料；所得粉体材料加水充分溶解，在离心设备中高速离心后，得到上清液；使用过滤设备过滤后经浓缩、干燥得到所述水溶性富勒烯复合物。
76.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的制备方法，其中所述富勒烯与水溶性原料重量百分比为1:2-1:200，优选1:10-1:100，或1:20-1:100，或1:20-1:50，或1:30-1:50，或1:50-1:100。
77.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的制备方法，其中所述强力分散处理设备选自混料机、球磨机、气流磨、超高压均质机或超声震荡机中的任一种；其中所述强力分散处理时间选自1h-7h，优选3h-6h。
78.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的制备方法，其中所述离心设备选自管式离心器、板式过滤器、台式过滤器中的任一种。
79.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的制备方法，其中所述过滤设备选用板框过滤器、卷式过滤器或薄膜过滤器中的任一种。
80.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的制备方法，其中所述浓缩采用的设备选自旋转蒸发仪、反渗透卷式ro膜、薄膜蒸发器中的任一种。
81.本公开的一个具体实施例中，提供了水溶性富勒烯银耳多糖复合物的制备方法，所述制备方法包括：a)取富勒烯粉末与银耳多糖原料混合均匀，其中富勒烯与银耳多糖原料重量百分比为1:2
–
1:200；优选1:40
–
1:100，更优选地1:50-1：100；
82.b)混合物通过共振声混合器强力分散处理，得到混合物粉体材料，处理时间1h-7h，优选地3h-6h，更优选地为5h；
83.c)所得粉体材料加水充分溶解；
84.d)通过离心设备管式离心机将c)中溶液高速离心，得到上清液；再使用过滤设备板式膜过滤对滤液进行过滤；
85.e)将上述滤液在薄膜蒸发器中进行浓缩得到高富勒烯含量的水溶性富勒烯复合材料；
86.f)将上述浓缩液采用干燥设备进行脱水处理，得到水溶性富勒烯银耳多糖复合物粉体材料。
87.本公开的另一个具体实施例中，提供了水溶性富勒烯依克多因或富勒烯聚谷氨酸复合物的制备方法，所述制备方法包括：a)取富勒烯粉末分别与依克多因或聚谷氨酸原料混合均匀，其中富勒烯与依克多因和聚谷氨酸原料重量百分比为1:2
–
1:50，其中优选1：40；
88.b)混合物通过共振声混合器强力分散处理，得到混合物粉体材料，处理时间1h-5h，优选地3h-5h，更优选地为5h；
89.c)所得粉体材料加水充分溶解；
90.d)通过离心设备管式离心机将c)中溶液高速离心，得到上清液；再使用过滤设备对滤液进行过滤；
91.e)将上述滤液在板式膜过滤中进行浓缩得到高富勒烯含量的水溶性富勒烯复合材料；
92.f)将上述浓缩液采用干燥设备进行脱水处理，得到水溶性水溶性富勒烯依克多因或富勒烯聚谷氨酸复合物粉体材料。
93.本公开的另一个具体实施例中，提供了水溶性富勒烯多元复合物的制备方法，所述制备方法包括：a)取富勒烯粉末与银耳多糖、依克多因和聚谷氨酸原料混合均匀，其中富勒烯与水溶性银耳多糖、依克多因和聚谷氨酸重量比为1:30:40:30；
94.b)混合物通过超声震荡混合强力分散处理，处理时间5h，得到混合物粉体材料；
95.c)所得粉体材料加水充分溶解；
96.d)使用管式心机将c)中溶液进行离心，得到上清液；取上清液进行板式过滤；
97.e)将上述滤液在薄膜蒸发器中进行浓缩得到高富勒烯含量的水溶性富勒烯复合材料；
98.f)将上述浓缩液采用干燥设备进行脱水处理，得到水溶性富勒烯与银耳多糖、依
克多因和聚谷氨酸的多元复合物粉体材料。
99.本公开的另一方面，涉及如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物在化妆品中的应用。
100.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物能够清除自由基。
101.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物能够抑制细胞氧化损伤。
102.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物具有补水保湿的效果，能够增加或保持受试者皮肤角质层含水量，治疗或修复肌肤干燥。
103.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物具有美白亮肤的效果，能够增加皮肤白皙度，降低皮肤黑色素含量。
104.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物具有淡化皱纹的效果，能够降低或改善皮肤皱纹深度。
105.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物具有修复皮肤屏障的效果。
106.在一个具体实施例中，所述水溶性富勒烯复合物修复皮肤屏障的效果，包括减少皮肤泛红、改善皮肤崩裂、减少掉皮、减少对外界刺激的敏感度、增加角质层厚度中一种或多种效果。
107.在本公开一个具体实施例中，涉及如前所述的任一种水溶性富勒烯复合物在化妆品中的应用，所述化妆品具有清除自由基、补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、抑制细胞氧化损伤、治疗或修复干燥肌肤、修复皮肤屏障中的一种或多种效果。
108.本公开的另一方面，涉及一种组合物，所述组合物包括如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物。
109.本公开的另一方面，涉及一种组合物，所述组合物包括如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物，和另一种或多种化妆品原料。
110.在一个实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的组合物的形式可以是溶液、乳液、悬浊液、乳霜、膏体、喷雾中的一种或多种。
111.本公开的另一方面，还涉及如前所述的任一种组合物在化妆品中的应用。
112.在本公开一个具体实施例中，所述水溶性富勒烯复合物的组合物在化妆品中的应用，其中所述化妆品具有清除自由基、补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、抑制细胞氧化损伤、增加或保持受试者皮肤角质层含水量、治疗或修复干燥肌肤、修复皮肤屏障中的一种或多种效果。
113.本公开的另一方面，涉及一种改善皮肤状态的方法，改善皮肤状态包括补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、修复皮肤屏障中的一种或多种；所述方法包括使用如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物的步骤。
114.本公开的另一方面，涉及一种清除自由基、抑制细胞氧化损伤、治疗或修复皮肤干燥的方法，所述方法包括使用如前所述的任一种或多种水溶性富勒烯复合物的步骤。
115.iii.实施例
116.下面参照实施例进一步阐释本公开。对本公开的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本公开限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据本公开说明书的教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本公开的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用
本公开的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。
117.下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
118.下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
119.实施例1：富勒烯银耳多糖复合物的制备及水溶性测试
120.称取1g富勒烯c60和60g银耳多糖，加入到混料罐中，设备加速度为10g，运行7h，每间隔1h取样0.2g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯银耳多糖溶液进行紫外检测。实验结果如表1所示。
121.结果表明：相同投料比的情况下，处理时间1-7h均可得到良好水溶性的富勒烯银耳多糖复合物。随处理时间的增加，紫外检测吸光度a数值逐渐增大，说明水溶性组合物中富勒烯含量逐渐增加，复合率逐渐提升，但处理达到6h时，富勒烯含量比5h低，说明当处理时间过长后，导致水溶性组合物溶解性降低，相应的水溶液中富勒烯含量随之降低，通过高速离心后，处理复合5h，无沉淀产生，能够全部溶解。3-6h为优选的处理时间。
122.表1：不同处理时间的富勒烯银耳多糖复合物水溶性测试
[0123][0124][0125]
不同配比下富勒烯银耳多糖复合物水溶性测试：
[0126]
将富勒烯与银耳多糖按照不同重量配比加入到混料罐中，设备加速度为10g，运行5h，每间隔1h取样0.2g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯银耳多糖溶液进行紫外检测；实验结果如表2所示。
[0127]
结果表明：不同质量比的情况下，随富勒烯质量的增加，水溶性逐渐降低；离心后沉淀物逐渐增加。富勒烯：银耳多糖重量配比1:10-1:200均可制得良好水溶性的富勒烯银耳多糖复合物。
[0128]
表2：不同配比下富勒烯银耳多糖复合物水溶性测试
[0129][0130]
实施例2：富勒烯依克多因复合物的制备及水溶性测试
[0131]
称取1g富勒烯c60和50g依克多因，加入到混料罐中，设备加速度为10g，运行7h，每间隔1h取样0.5g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯依克多因溶液进行紫外检测。实验结果如表3所示。
[0132]
结果表明：相同投料比的情况下，处理时间1-5h均可得到良好水溶性的富勒烯依克多因复合物。随处理时间的增加，紫外检测吸光度a数值逐渐增大，说明富勒烯依克多因水溶性组合物中富勒烯含量逐渐增加，复合率逐渐提升，处理5h时，富勒烯含量最高。通过高速离心后，板式0.45um过滤，得到水溶性富勒烯依克多因复合材料。3-5h为优选的处理时间,5h为更优的处理时间。
[0133]
表3：不同处理时间的富勒烯依克多因复合物水溶性测试
[0134][0135]
不同配比下富勒烯依克多因复合物水溶性测试：
[0136]
将富勒烯与依克多因按照不同重量配比加入到混料罐中，设备加速度为20g，运行5h，每间隔1h取样0.5g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯依克多因溶液进行紫外检测实验结果如表4所示。
[0137]
结果表明：不同质量比的情况下，随富勒烯质量的增加，水溶性逐渐减弱。富勒烯：依克多因重量配比1:10-1:50时均可制得良好水溶性的富勒烯依克多因复合物。
[0138]
表4：不同配比下富勒烯依克多因复合物水溶性测试
[0139][0140]
实施例3：富勒烯聚谷氨酸复合物的制备及水溶性测试
[0141]
称取1g富勒烯c60和50g聚谷氨酸，加入到混料罐中，设备加速度为20g，运行5h，每间隔1h取样0.3g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯聚谷氨酸溶液进行紫外检测；实验结果如表5所示。
[0142]
结果表明：相同投料比的情况下，随处理时间的增加，紫外检测吸光度a数值逐渐增大，说明富勒烯聚谷氨酸水溶性组合物中富勒烯含量逐渐增加，复合率逐渐提升，处理时间3-5h均可得到良好水溶性的富勒烯聚谷氨酸复合物。处理5h时，富勒烯含量最高。通过高速离心后，板式0.45um过滤，得到水溶性富勒烯聚谷氨酸复合材料。
[0143]
表5：不同处理时间的富勒烯聚谷氨酸复合物水溶性测试
[0144][0145]
不同配比下富勒烯聚谷氨酸复合物水溶性测试：
[0146]
将富勒烯与聚谷氨酸按照不同重量配比加入到混料罐中，设备加速度为20g，运行5h，每间隔1h取样0.3g，加水50ml溶解、采用台式离心机进行离心，取上清液进行0.45um针筒过滤器进行过滤，得到富勒烯聚谷氨酸溶液进行紫外检测；实验结果如表6所示。
[0147]
结果表明：相同处理时间，不同质量比的情况下，随富勒烯质量的增加，水溶性逐渐减弱。富勒烯：聚谷氨酸重量配比1:20-1:50时均可制得良好水溶性的富勒烯依克多因复合物。
[0148]
表6：不同配比下富勒烯聚谷氨酸复合物水溶性测试
[0149][0150]
实施例4：富勒烯多元复合物的制备
[0151]
富勒烯与银耳多糖、依克多因和聚谷氨酸的多元复合物的制备，制备方法步骤包括：
[0152]
将富勒烯与银耳多糖、依克多因和聚谷氨酸按照质量百分含量1:30:40:30进行超声震荡混合处理，处理时间：5h；
[0153]
溶解：将制备得到的富勒烯多元复合物1kg，采用去离子水5kg进行充分溶解；
[0154]
离心：使用管式心机进行离心；
[0155]
过滤：取上清液进行板式过滤；
[0156]
干燥：在进行冷冻干燥最终得到水溶性富勒烯多元复合物粉体材料。
[0157]
实施例5：自旋捕获法测试不同浓度条件下富勒烯银耳多糖复合物清除羟基自由基的能力
[0158]
实验方法：20ul的0.1mol/l dmpo和20ul 0.03mol/l的h2o2水溶液中分别，加入一定体积的实施例1，表2-6样品配置为1ppm、2ppm和4ppm样品，加入vc原料配置为1000ppm样品作为对比品，加入银耳多糖原料1000ppm作为空白对照品。由紫外光激发双氧水产生羟基自由基，通过检测epr信号变化，分析组合物清除羟基自由基的效果。实验结果如图1所示。
[0159]
可以发现富勒烯银耳多糖具有优异的猝灭自由基效果，并随体系中富勒烯银耳多糖复合物含量的增加而增强，并明显强于银耳多糖和vc材料。
[0160]
实施例6：双氧水损伤细胞存活率实验
[0161]
实验方法：5x104个hek-a细胞接种到96孔板中培养过夜，取实施例1表2-6样品在每一列孔中分别加入不同富勒烯银耳多糖复合物含量(2ppm、10ppm和20ppm)的培养液作为试验组、vc1000ppm和银耳多糖1000ppm的培养液作为对照，放回二氧化碳培养箱，孵育3h后取出96孔板，移取培养基，用pbs轻轻冲洗后，然后用h2o2(800μm)处理1h，将细胞与新鲜培养基孵育24h，检测细胞活力cck-8。实验结果如图2所示。
[0162]
可以发现富勒烯银耳多糖复合物具有明显的抑制氧化损伤的作用，2ppm富勒烯银耳多糖复合物的效果效果优于银耳多糖，并随富勒烯含量的增加，效果增强。
[0163]
实施例7：水溶性富勒烯复合物补水、美白亮肤、淡化皱纹、屏障修复效果实验受试者筛选条件：
[0164]
1)身体健康的中国人群，性别随机，年龄35-55岁
[0165]
2)近2年内未做过激光美容或化学换肤
[0166]
3)医疗和健康状况符合纳入标准
[0167]
4)既往对护肤类化妆品无过敏史
[0168]
5)无伦理学禁忌
[0169]
6)在研究前已阅读并在知情同意书上签字
[0170]
7)测试期间受试者不得使用与样品功能相似的化妆品
[0171]
实验方法：
[0172][0173]
4组样品进行对比实验，60名符合条件的受试者参加测试，半脸试验，共4组样品，保证每组有效数据30例。
[0174]
受试者根据使用要求使用测试产品。在受试者相应测试部位采集皮肤数据，并分析各测试区域使用样品前后皮肤数据变化。具体实验设计如下：
[0175]
(1)受试者入组后填写知情同意书和皮肤调查问卷。
[0176]
(2)测试当天受试部位不使用任何化妆品。
[0177]
(3)清水清洗受试部位，恒温恒湿环境中静坐30min。
[0178]
(4)测试人员在相应测试部位进行皮肤本底数据采集，即采集使用样品前测试区域皮肤的数据。
[0179]
(5)受试者完成皮肤本底值采集和问卷填写后，领取测试样品，并按要求使用。
[0180]
(6)受试者使用样品第2周、第4周、第6周后进行回访，测试人员对受试者面部皮肤数据进行重复采集。
[0181]
(7)应用sas 9.4软件进行统计学分析，采用配对样本t检验，分析单一测试样品使用前后皮肤生理指标的变化，采用基于混合模型的重复测量方差分析法分析各个测试样品的组间差异，并采用多重比较(duncan法)分析测试样品之间的效果差异，双侧检验，检验标准α＝0.05。
[0182]
补水效果(角质层水分含量)测试：
[0183]
角质层水分含量，其值越大，水分含量越高。变化率，此值越高，样品补水效果越明显。以下测定受试者角质层水分含量来测试样品的补水效果。
[0184]
实验结果统计如表7。受试者测试区域角质层水分含量变化趋势及变化率，见图3和图4。
[0185]
表7：角质层水分含量统计结果
[0186][0187]
注：角质层水分含量数值(c.u.)越高，皮肤含水量越高，变化率越大，治疗干燥肌肤效果越好。
[0188]
美白亮肤效果测试：
[0189]
受试者测试区域皮肤白皙度测试统计结果如表8，皮肤白皙度l值变化趋势如图5。受试者测试区域皮肤黑色素含量mi统计结果如表9所示，皮肤黑色素含量mi值变化趋势如图6,。
[0190]
表8：皮肤白皙度l值统计结果
[0191][0192]
注：皮肤白皙度l数值越高，皮肤亮度越高，皮肤颜色越偏向“亮白”，变化率越大，样品提高皮肤亮度效果越好。
[0193]
表9：皮肤黑色素含量mi值统计结果
[0194][0195][0196]
注：mi值表征皮肤表面黑色素含量，测量数值越高，说明黑色素的含量越高。
[0197]
mi值变化率，此值越低，样品降低皮肤黑色素含量效果越好，淡化色素的效果越明显。
[0198]
淡化皱纹效果测试：
[0199]
受试者测试区域皮肤皱纹深度测试统计结果如表10所示。
[0200]
表10：皮肤皱纹深度统计结果
[0201][0202]
注：皮肤皱纹深度，数值越小，皱纹深度越浅，变化率越低，测试产品改善皱纹深度的效果越好。
[0203]
结论：添加富勒烯复合物产品组具有良好的补水保湿、美白亮肤、淡化皱纹、治疗干燥肌肤等作用效果，效果均优于含有vc的样品组和含银耳多糖的空白霜样品组，并随富勒烯含量增加效果增强。
[0204]
实施例8：富勒烯银耳多糖复合物与其他保湿材料保湿性对比
[0205]
受试者筛选条件：
[0206]
1)身体健康的中国人群，性别随机，年龄35-55岁
[0207]
2)近2年内未做过激光美容或化学换肤
[0208]
3)医疗和健康状况符合纳入标准
[0209]
4)既往对护肤类化妆品无过敏史
[0210]
5)无伦理学禁忌
[0211]
6)在研究前已阅读并在知情同意书上签字
[0212]
7)测试期间受试者不得使用与样品功能相似的化妆品
[0213]
试验用样品配置：将保湿成分按照表11配比添加到保湿霜中
[0214]
表11试验用样品配置
[0215][0216]
实验方法：
[0217]
试验前受试者需要统一进行洁面，并在恒温恒湿环境中静坐30min，然后使用皮肤色差测试探头及多探头皮肤测试系统(德国c&k,cl 400&mpa 10)对受试区域进行检测3次，得出其平均值；然后由试验工作人员将样品按顺序涂于各部位，每处受试区域5*5cm2，在涂抹后0周、2周、4周、6周在这些部位进行检测。受试者皮肤含水量检测结果如表12所示。
[0218]
表12皮肤含水量检测结果统计
[0219][0220]
结论：皮肤含水量数值越大，含水量越高，从测试结果可以发现，添加保湿成分对皮肤含水量均具有促进作用，但添加了富勒烯复合物的样品组更有利于保护皮肤减少水分流失，说明富勒烯复合物具有良好的保湿效果。
[0221]
实施例9：测试不同原料使用后皮肤感觉
[0222]
采用调查问卷的形式进行：
[0223]
使用人数：60人
[0224]
测试样品:
[0225]
样品1组：富勒烯银耳多糖(8ppm)面霜组
[0226]
样品2组：富勒烯透明质酸钠(8ppm)面霜组
[0227]
样品3组：银耳多糖(0.4％)面霜组
[0228]
样品4组：透明质酸钠(0.5％)面霜组
[0229]
使用方法：将不同面霜组随机分配给60位志愿者，将不同组面霜分别涂抹在面部4个部位3*3cm2，2h后填写调差问卷，各项指标满分10分。受试者评分统计结果如表13所示。
[0230]
表13受试者对不同样品的评分
[0231]
样品组吸收速度半干后状态吸收完全后肤感平均得分19.199.29.129898.6738.988.88.5748.67.88.68.33
[0232]
总结：含有富勒烯面霜总体评价高于未添加富勒烯组，富勒烯银耳多糖肤感优于富勒烯透明质酸钠组，说明富勒烯银耳多糖原料肤感最优。
[0233]
实施例10：对干燥肌肤和屏障肌肤的护理实验
[0234]
采用调查问卷的形式进行：
[0235]
受试者人数：60人
[0236]
测试样品：
[0237]
样品1组：银耳多糖(0.4％)面霜组
[0238]
样品2组：富勒烯银耳多糖(10ppm)面霜组
[0239]
使用方法：将样品1组和样品2组面霜分别分配给30人，每天连续使用，坚持使用4周，采用调查问卷形式进行。受试者评测结果如表14所示。
[0240]
表14受试者使用后保湿、补水评测
[0241][0242][0243]
总结：干燥肌肤修复测评结果可以发现添加富勒烯的面霜组整体效果优于未添加富勒烯组，说明富勒烯银耳多糖复合物保湿效果很好，且添加富勒烯后皮肤亮度提高得到大多数人认可,富勒烯银耳多糖面霜受试者干燥肌肤修复效果如图9。
[0244]
皮肤屏障修复添加富勒烯后整体效果要远远优于未添加富勒烯组，尤其是添加富勒烯后减少皮肤的泛红得到大多数人认可。富勒烯银耳多糖面霜受试者皮肤屏障修复效果
如图8。