一种含大麻二酚的纳米复合材料及其制备方法和应用

1.本发明属于生物医药技术领域，涉及一种含天然化合物的抗菌纳米复合材料及其制备方法和应用，具体涉及一种壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料及其制备方法和应用。


背景技术：

2.抗生素自发现以来在治疗伤口细菌感染中已经拯救了无数生命。然而，随着抗生素的广泛推广和运用以及滥用抗生素行为的出现，细菌出现耐药现象，对抗生素敏感性降低，甚至出现对多种抗生素不敏感的多药耐药细菌，多药耐药细菌的出现严重威胁人类的健康。长期以来，研究人员通过不断筛选新型抗生素和改造现有抗生素来缓解这一问题。
3.大麻二酚(cbd)是大麻中提取量第二的生物活性成分，也存在于其它纤维性型植物内，被应用于化妆品、服装、食品、饮料、药品等。与δ9‑
四氢大麻酚(thc)具有精神活性不同，cbd与精神活动无关，且不影响人体运动、记忆等功能。目前，cbd在炎症、神经退行性疾病、癫痫、多发性硬化症、关节炎等自身免疫性疾病等多种病理模型中均具有已报道的药理作用。cbd具有调节免疫，抑制炎症，抗氧化损伤等药效，同时报导表明有镇痛以及抗焦虑作用。此外，cbd还被发现对包括多种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在内的革兰氏阳性菌有强效抑制作用，而对革兰氏阴性菌没有直接杀伤效果。但是，在与抗生素连用的情况下，可显著增强其抗菌效果。cbd具有潜在的抗生素功效，具有用于治疗伤口感染及促进伤口愈合的潜在价值。
4.随着纳米技术的发展，利用纳米材料通过物理或化学方式杀死致病菌成为了解决问题的新希望，设计用于抗菌的纳米材料成为近年热门主题。诸如金属及金属衍生物、脂质体、高分子聚合材料以及复合纳米材料等优良抗菌纳米材料已被广泛报道，其中纳米材料的抗菌机制包括对细菌细胞膜的物理损害、对细菌内部的化学破坏、对膜生物功能的抑制。纳米抗菌剂对细菌作用的方式也多种多样，包括光热、光动力、模拟酶活性、联合递送化疗药物等。在纳米材料中，纳米颗粒具有高的表面体积比及其独特的物理、化学特性，为改善抗菌药物性能提供了新的前景。


技术实现要素：

5.本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种含大麻二酚的纳米复合材料及其制备方法和应用，所述的纳米复合材料抗菌效果好、不易使细菌产生耐药性，并且稳定性和分散性好，利于用于制备抗菌光热治疗药物或制备慢性的外伤性感染治疗药物。
6.为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案包括：
7.一种含大麻二酚的纳米复合材料，包括壳聚糖膜层和负载大麻二酚的普鲁士蓝纳米颗粒，所述壳聚糖膜层包裹在负载大麻二酚的普鲁士蓝纳米颗粒上，所述纳米复合材料带正电荷。
8.在本发明的实施例中，所提供的含大麻二酚的纳米复合材料是一种抗菌效果好、不易使细菌产生耐药性、稳定性和分散性好的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米材料，主要由中空普鲁士蓝、大麻二酚、壳聚糖制备而成，所述大麻二酚负载于中空普鲁士蓝上，所述壳聚糖涂覆于负载大麻二酚的普鲁士蓝表面；具体地，所述纳米复合材料的粒径为100nm～200nm，优选为100nm～150nm，并且带有正电荷。
9.上述壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米材料可用于抗菌，尤其是联合近红外光抗菌。
10.普鲁士蓝(pb)纳米颗粒是一种含铁的金属
‑
有机框架材料，由fe
3+
、fe
2+
与氰基配位形成的晶体多孔配位化合物。pb纳米颗粒在蓄电池、检测、环境处理、生物医学等方面被广泛研究；pb具有良好的生物相容性，且对重金属有显著吸附能力，已经被美国食品药品管理局批准作为铊的解毒剂。同时，pb是一种模拟酶，具有过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性，可减轻机体内氧化应激对组织细胞的损伤。另一方面，pb骨架结构fe(ii)
–
cn
–
fe(iii)链使得纳米颗粒在700nm左右有强的吸收峰，可有效的将近红外光(nir)转换为热量，具有优良的光热效应。
11.本发明实施例所述的纳米复合材料由中空普鲁士蓝装载天然化合物大麻二酚，再由壳聚糖对复合纳米颗粒进行涂层包裹。其中，壳聚糖(cs)是一种高分子阳离子聚合物，并可通过静电吸附与带负电的细菌结合，将氨基插入细菌膜，破坏膜电位。壳聚糖具有优良的生物相容性，被用作纳米材料修饰，以增强稳定性和降低毒性。
12.对于本发明所述的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚的纳米复合材料，原材料中空普鲁士蓝、大麻二酚和壳聚糖三者有序的结合，对纳米复合材料的整体功效发挥很重要。大麻二酚是拥有同等于抗生素抗菌功效的天然化合物，且本身不易诱导产生耐药性，装载于拥有中空结构的普鲁士蓝(称为中空普鲁士蓝)内外；中空普鲁士蓝不仅可作为载体负载天然化合物大麻二酚，而且可以吸收近红外光并转化为热能，辅助杀死细菌，同时还可促进药物释放；壳聚糖位于纳米复合材料的表层，壳聚糖层可增强材料的稳定性，可逆转原有材料所带负电荷，使材料带正电荷，从而能与带负电荷的细菌吸附。
13.本发明实施例公开的纳米复合材料具有良好的抗菌效果，不易使细菌产生耐药性，稳定性和分散性好，毒性低。并且，所述含大麻二酚的纳米复合材料制备方法简单，耗时短，易规模化，该复合材料可用于制备光热抗菌药物或伤口感染多功能治疗药物。
14.作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的含大麻二酚的纳米复合材料的制备方法，包括以下步骤：
15.s1、将中空普鲁士蓝和大麻二酚在溶剂中混合，搅拌进行负载，得到负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液；
16.s2、将壳聚糖溶液与所述负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液混合后，搅拌反应，得到壳聚糖包裹普鲁士蓝负载大麻二酚的纳米复合材料。
17.本发明实施例首先用铁氰化钾和聚乙烯吡咯烷酮反应制得普鲁士蓝，再通过酸腐蚀得到中空普鲁士蓝。其中，所述的普鲁士蓝具有立方体实心结构；具体可将铁氰化钾和聚乙烯吡咯烷酮溶解于盐酸hcl溶液中，经加热反应后，离心、水洗，得到立方体实心普鲁士蓝分散液。在该步骤中，所述铁氰化钾与聚乙烯吡咯烷酮的质量比可为1∶10～24，优选为1:11～23。所述hcl溶液的浓度可为0.003mol/l～0.03mol/l，所述hcl溶液的ph为1.5～2.5。
18.在本发明实施例制备普鲁士蓝的具体步骤中，所述加热反应的温度为75℃～85℃，所述加热反应的时间为18h～22h，所述加热反应采用油浴或水浴方式进行。本发明实施例将反应所得产物溶液离心，所得沉淀物重悬分散在去离子水中，继续水洗至少3次，得到所述的普鲁士蓝分散液，也可将沉淀真空冷冻干燥获得立方体普鲁士蓝粉末。所述离心的转速可为10000rpm～13000rpm，优选12000rpm离心10
‑
20min。
19.本发明实施例优选按照以下方式制备中空普鲁士蓝：将普鲁士蓝和聚乙烯吡咯烷酮添加到盐酸溶液中，加热反应，经离心、水洗、干燥，得到中空普鲁士蓝粉末。本发明一些实施例是将普鲁士蓝分散液加入到含有聚乙烯吡咯烷酮的hcl溶液中，超声分散，搅拌混匀后于反应釜中加热反应，再离心、分散，得到中空普鲁士蓝的分散液。
20.所述中空普鲁士蓝的制备过程中，所述的普鲁士蓝与聚乙烯吡咯烷酮的质量比为1∶5～10；所述hcl溶液的ph值为1～2。所述超声分散的时间可为1min～10min(或搅拌1～2h)，加热反应的温度为130℃～150℃，所述加热反应的时间可为1～5h；所述离心的转速为10000rpm～13000rpm。本发明实施例将反应混合溶液离心以收集沉淀物，并用水洗涤几次，所得沉淀通过真空冷冻干燥，可得到中空介孔普鲁士蓝粉末。
21.然后，本发明实施例制备负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液：所述的中空普鲁士蓝和大麻二酚溶解于溶剂中，优选室温下搅拌一定时间，经离心、水洗、分散，得到负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液。
22.在本发明的优选实施例中，所述搅拌混合液中中空普鲁士蓝与大麻二酚的质量比为1∶4～10。并且，所述的溶剂优选为无水乙醇；所述大麻二酚在混合溶液的浓度可为1mg/ml～10mg/ml。所述的搅拌进行负载的时间优选为6h～16h，更优选为8～14h；所述搅拌负载的转速可为500rpm～800rpm。此外，所述离心的转速为10000rpm～13000rpm；离心并水洗后，用去离子水重悬，即得负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液。
23.本发明实施例将壳聚糖溶液与得到的负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液超声混匀后，搅拌反应，然后经离心、水洗，得到壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料(含大麻二酚的纳米复合材料)。
24.在本发明的优选实施例中，所述搅拌反应混合液中壳聚糖与负载大麻二酚的普鲁士蓝的质量比为1∶5～20，优选为1：6～15。具体地，所述壳聚糖溶液的浓度可为1mg/ml～5mg/ml。所述制备壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的壳聚糖涂覆步骤中，所述超声混匀的时间可为1min～10min，优选为2～8min；所述搅拌反应的时间优选为1h～3h，所述搅拌反应的转速为500rpm～800rpm，可得到澄清透明的蓝色溶液。本发明实施例通过离心去除上清多余的壳聚糖溶液，所述离心的转速优选为10000rpm～13000rpm；可用去离子水重悬，即获得壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料。
25.本发明首次将天然化合物大麻二酚装载于中空普鲁士蓝，并用壳聚糖进行涂层，所得的纳米复合材料可用于治疗细菌所致的伤口感染。本发明所述壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的制备方法工艺简单，绿色环保，耗时短、易于规模化。
26.本发明所述的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料具有综合杀菌作用：由于细胞壁结构中存在脂多糖细菌通常带有负电荷，带有正电荷的复合纳米材料在细菌存在的环境下，首先通过正负静电的吸附作用聚集于细菌表面，一方面聚集沉降细菌，减少活跃细菌量，另一方面通过聚集作用形成局部高复合纳米材料浓度，在光热辅助下
集中释放大麻二酚，快速高效杀死细菌。释放出的大麻二酚可与细菌细胞壁作用造成穿孔，促使材料的进一步作用，同时也造成细菌内容物的渗漏，大麻二酚还可诱导细菌内活性氧的产生，破坏内部代谢，降低内部atp水平。本发明的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料通过多种途径综合清除细菌，在高效快速杀菌的同时，可进一步延缓耐药性的产生。
27.本发明实施例的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的粒径为100nm～150nm，带有正电荷，可与带负电荷的细菌吸附，具有较强的近红外吸收，拥有良好的光热转化效率，经808nm近红外光数分钟照射即可到达细菌被杀灭的温度条件，使其在光热抗菌治疗的应用中方便快捷，见效快。
28.相应地，作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的含大麻二酚的纳米复合材料在制备光热抗菌药物或慢性的外伤性感染治疗药物中的应用。
29.上述应用中，优选的，所述药物可用于清除多耐药性细菌及有效治疗多耐药性细菌诱发的慢性伤口感染，如可有效治疗糖尿病慢性伤口感染；所述光热抗菌药物主要用于皮肤。
30.与现有技术相比，本发明的优点在于：
31.(1)本发明的纳米复合材料先由中空普鲁士蓝装载天然化合物大麻二酚，再由壳聚糖对复合纳米颗粒进行涂层，形成壳聚糖涂层或膜层，使纳米材料带正电荷。其中，大麻二酚本身诱导细菌产生耐药的能力明显低于抗生素；而且原材料的选择及其特定的结合顺序使该纳米复合材料通过多种途径综合清除细菌，在高效快速杀菌的同时，可进一步延缓耐药性的产生。
32.(2)本发明提供的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的制备方法操作简单，绿色环保，耗时短，易于规模化生产应用。
33.(3)本发明的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料可应用于制备光热抗菌治疗药物及慢性的外伤性感染治疗药物，药物抗菌效率高、光照时间短、安全，治疗效果好。
附图说明
34.图1为本发明实施例1中的普鲁士蓝的透射电镜图；
35.图2为本发明实施例1中的中空普鲁士蓝的透射电镜(a)和扫描电镜(b)图；
36.图3为本发明实施例1中的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的粒径曲线图；
37.图4为本发明实施例1中的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的电位柱状图；
38.图5为本发明实施例2中对100μg/ml中空普鲁士蓝在1w/cm2、808nm波长的近红外激光照射下的温度变化与光热杀菌效果图；
39.图6为本发明实施例2中的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的光热效果红外成像图；
40.图7为本发明实施例2中的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的抗菌效果图；
41.图8为本发明实施例2中经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料处理后细菌表面电位柱状图；
42.图9为本发明实施例2中经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料处理后细菌悬液实物图；
43.图10为本发明实施例2中经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料处理后细菌扫描电镜图；
44.图11为本发明实施例2中经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料处理后悬液溶剂中蛋白(a)和核酸(b)含量柱状图；
45.图12为本发明实施例2中经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料处理后细菌内ros信号荧光成像图；
46.图13为本发明实施例3中慢性伤口感染模型小鼠经壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料治疗后小鼠伤口实物图。
具体实施方式
47.下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
48.为了进一步理解本技术，下面结合实施例进行详细说明。以下实施例中，若无特别说明，所采用的原料和仪器均为市售。浓度单位m为mol/l。所述聚乙烯吡咯烷酮(pvp，cas：9003
‑
39
‑
8，(c6h9no)n)和壳聚糖(cas:83512
‑
85
‑
0，c20h37n3o14，分子量:543.5g/mol)均购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司。
49.实施例1：
50.一种壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料，该纳米复合材料主要由中空普鲁士蓝、大麻二酚和壳聚糖制成，所述大麻二酚负载于中空普鲁士蓝上，所述壳聚糖包裹在中空普鲁士蓝上，所述纳米复合材料的粒径在100nm～150nm范围。
51.上述壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的制备方法，包括以下步骤：
52.(1)制备普鲁士蓝
53.将264mg铁氰化钾和3g聚乙烯吡咯烷酮溶解在40ml浓度为0.01m的hcl溶液中，hcl溶液的ph值为2，然后将所得黄色混合液于80℃的油浴中加热反应20小时，再将反应所得产物溶液在12000rpm的转速下离心15min，沉淀物重悬分散在去离子水中，继续水洗3次，沉淀真空冷冻干燥，获得立方体普鲁士蓝粉末(记作：pb)。
54.(2)制备中空普鲁士蓝
55.将20mg制备得到的固体实心介孔普鲁士蓝和100mg聚乙烯吡咯烷酮添加到hcl溶液(1.0m，20ml)中，超声分散1
‑
10min，将混合溶液转移至不锈钢高压反应釜中，并在140℃的电烤箱中加热4h。然后将反应混合溶液在12000rpm的转速下离心10min，收集的沉淀物用去离子水洗涤，沉淀真空冷冻干燥，获得中空介孔普鲁士蓝粉末(记作：hmpb)。
56.(3)制备负载大麻二酚的中空普鲁士蓝分散液
57.2mg中空介孔普鲁士蓝和8mg大麻二酚溶解于1ml无水乙醇中，室温下搅拌12h(转速为500rpm～800rpm)，将搅拌后的混合液12000rpm、10min离心，并水洗3次，最后用去离子水重悬，获得负载大麻二酚的普鲁士蓝分散液(记作：hmpb@cbd)。
58.(4)制备壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料
59.将获得的hmpb@cbd溶液离心去除上清，用1
‑
5mg/ml的cs溶液(2％乙酸)重悬，用超声细胞粉碎仪器在50w条件下超声3min，得到澄清透明的蓝色溶液，12000rpm离心10min后，用去离子水重悬，获得壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料(记作：chi@hmpb@cbd)；复合材料经静置24小时，最终测得上清液中未被包裹吸附的cbd含量为0.52mg，根据包封率计算公式可以得出，壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料chi@hmpb@cbd的cbd封包率为74％。
60.对本实施例中制得的普鲁士蓝进行透射电镜分析，如图1所示，结果表明成功合成了粒径范围在100～150纳米的立方体实心普鲁士蓝。
61.如图2所示，对本实施例中制得的中空普鲁士蓝进行了透射电镜和扫描电镜分析，结果表明成功将立方体实心普鲁士蓝制成了具有多孔中空结构的中空普鲁士蓝。
62.对本实施例的中空普鲁士蓝、负载大麻二酚的普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的粒径进行分析，如图3所示。结果表明：相较于单纯中空普鲁士蓝，负载大麻二酚的普鲁士蓝的平均粒径(size)增大约10nm，表明大麻二酚成功负载于中空普鲁士蓝内外；相较于负载大麻二酚的普鲁士蓝，壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的平均粒径增大约2nm，表明壳聚糖成功涂层于负载大麻二酚的普鲁士蓝的表面。
63.如图4所示，对本实施例的中空普鲁士蓝、负载大麻二酚的普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的电位进行了分析，结果表明：壳聚糖成功涂覆于负载大麻二酚的普鲁士蓝的表面后，成功逆转了材料的电荷，使得壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料带有正电荷。
64.实施例2：
65.本发明所述的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料在制备光热抗菌药物中的应用，采用实施例1制得的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料。
66.图5所示的是，将壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料与20μl的细菌pbs溶液(～1
×
106cfu ml
‑1)混合于1.5ml离心管中，并在1w/cm2、808nm波长的近红外激光照射3分钟。然后取经近红外激光照射后的混合溶液，经磷酸盐缓冲盐水(pbs)适当稀释后，均匀涂布到lb固体培养基上，放置于电热恒温培养箱中37℃培养12小时左右。利用菌落计数法计算出材料的光热杀菌效率。结果表明，3min的激光照射即可产生约50％的杀菌功效。
67.对中空普鲁士蓝、负载大麻二酚的普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料的光热效果进行分析；如图6所示，结果表明负载大麻二酚的普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料都完整的保留中空普鲁士蓝的优良光热效果。
68.分别采用100μg/ml的中空普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米
复合材料分散液(均用去离子水分散)，处理耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，有近红外光照射的组用1w/cm2、808nm近红外光(nir)照射3min。如图7所示，结果表明，壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料可直接杀死接近40％的高浓度细菌，在近红外光的辅助下可杀死超过99％的细菌。
69.如图8细菌表面电位分析，结果表明：壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料可通过正负电荷相互作用吸附于细菌表面并改变细菌电位，导致如图9所示的细菌聚集。
70.如图10细菌扫描电镜结果表明，单纯的大麻二酚可使细菌表面穿孔；壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料吸附于细菌表面，有穿插入细菌的趋势，在近红外光的辅助作用下，细菌形态几乎完全被破坏。
71.如图11菌分散液中成分分析，结果显示蛋白和核酸含量升高，表明壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料可破坏细菌并使细菌内容物泄露。如图12对细菌内ros含量分析，结果表明，壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料可保留大麻二酚自身的性质，诱导细菌内ros产生并在近红外的辅助下进一步促进其产生。
72.这些结果表明：壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料在近红外光的辅助下具有最强烈的杀菌效果。
73.实施例3：
74.本发明所述的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料在治疗慢性的外伤性感染治疗药物中的应用，采用实施例1制得的壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料。
75.在balb/c小鼠背部剪切的伤口处加入耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液(107cfu ml
‑1)，感染小鼠两天后，用100μl浓度为100μg/ml的中空普鲁士蓝、壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米复合材料分散液，处理耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的慢性伤口，并记录小鼠的体重及伤口面积等各项生理指标。另设一组实验滴加等量助溶剂作为对照组。计算伤口面积公式：宽度
×
长度
×
(π/4)。有近红外光照射的组用1w/cm2、808nm近红外光照射3min。
76.结果如图13所示，在药物处理第3天，所有组小鼠伤口处均出现结痂现象。接着在第9天给药时，对照组的伤口面积减少到15.22％，而壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米纳米复合材料联合近红外光处理组的伤口面积减少到1.63％，伤口基本愈合，且炎症细胞数量明显减少。此外整个治疗过程中，小鼠体重变化一直控制在安全范围内，无显著波动，表明壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米纳米复合材料具有良好的生物安全性。与对照组相比，壳聚糖包裹中空普鲁士蓝负载大麻二酚纳米纳米复合材料联合近红外光处理具有最高的促进伤口愈合的效率。
77.综上所述，本发明原材料的选择和结构顺序的设计及粒径和电位的控制都恰到好处，它们相辅相成，使本发明的纳米复合材料同时具备了较好的稳定性、分散性及优异的抗菌效果，在近红外光辅助下，该纳米复合材料能有效清除多耐药性细菌，并且可应用于有效治疗多耐药性细菌诱发的慢性伤口感染，尤其可应用于有效治疗糖尿病慢性伤口感染。
78.以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制。虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明。任何熟悉本领域的技术人
员，在不脱离本发明的精神实质和技术方案的情况下，都可利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同替换、等效变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。