含有植物提取物的组合物的制作方法

1.本发明涉及含有植物提取物的组合物，涉及具有血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善效果的组合物。


背景技术：

2.占全世界死亡原因约39％的血栓相关疾病最近在韩国也因饮食生活的西式化、过度的压力、人口老龄化等而呈现出进一步增加的趋势。
3.作为目前使用的血栓溶解酶剂，已知有链激酶(streptokinase)、尿激酶(urokinase)、组织纤溶酶原激活剂(t-pa)等，主要通过将生物体内的纤溶酶原(plasminogen)激活成纤溶酶(plasmin)的间接方法来溶解血栓。对于上述纤溶酶原激活剂，被分类为过敏、发热、局部出血、短半衰期以及高价医药品，因此存在局限于血栓治疗剂使用的问题。链激酶和尿激酶作为将纤溶酶原转化成纤溶酶的外来性酶物质，不仅含有发热、过敏、局部出血、低血压诱发等的副作用，而且价格非常昂贵，因此实情是无法用于预防体内血栓形成。
4.因此，需要对在安全的同时血液循环预防和改善效果优异的物质进行研究。
5.另一方面，胆固醇存在于我们身体的大脑、神经、肌肉、皮肤、肝、肠、心脏等任何地方，并且已知为参与各种生理生化反应的重要物质，例如在体内充当细胞膜的构成成分并且充当激素、维生素d、与脂质消化相关的胆汁酸的原料。然而，另一方面，据悉，与最近病例急剧增加的代表性成人病之一的包括动脉硬化症、第2型糖尿病等在内的心血管疾病发病有着密切的关联。胆固醇是我们体内不可缺少的重要物质，但如果胆固醇过量存在，则会在血管内皮细胞或血管内膜中积累，形成斑块(plaque)，诱发诸如高脂血症等血管疾病，并且高脂血症诱发诸如动脉硬化、高血压、肥胖、糖尿病等继发性疾病。像这样，血液中的总胆固醇显示出与冠状动脉疾病发生密切的相关性，因此维持血液中的胆固醇恒常性非常重要。血液中的胆固醇通过肝细胞中的合成和肠细胞中的再吸收维持一定水平的血液中的胆固醇数值。高脂血症是指血液中存在必要以上的胆固醇或中性脂肪的浓度从而诱发炎症的状态，虽然没有显示出特别的症状，但成为高血压、动脉硬化、脑中风等的危险因素。当在体内无法顺利实现适当的胆固醇调节功能而导致胆固醇积累时，出现血液内总胆固醇数值升高的高胆固醇血症，并且当胆固醇代谢调节出现异常时，不仅总胆固醇，而且ldl胆固醇、hdl胆固醇等脂蛋白(lipoprotein)成分也会在量上发生变化。ldl-胆固醇沉积在动脉壁上，对血管造成伤害并诱发动脉硬化，相反，hdl-胆固醇去除有害的ldl-胆固醇并减少诸如动脉硬化、心脏病、脑中风等心血管疾病。因此，即使总胆固醇的数值正常，如果ldl胆固醇高或hdl胆固醇的量低，则也会成为动脉硬化的原因。
6.迄今为止，作为对降低血液中的胆固醇浓度的效果的研究，有研究将昌宁洋葱提取液、大麦β-葡聚糖提取液、亚麻仁、普洱茶提取物、紅麴米、植物甾烷醇酯、普利醇(policosanol)-甘蔗蜡醇、螺旋藻、unibex
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竹提取物、cj木槿等复合提取物、芦荟复合提取
物粉末、芦荟提取物粉末等作为源自天然物的显示出胆固醇改善效果的功能性原料。为了给高胆固醇患者在药物治疗的同时，从天然物中分离并给药能够同时产生持续治疗和预防效果的物质，正在持续进行从天然物中分离具有胆固醇降低效果的物质的研究。
7.另一方面，据悉，肥胖是发生糖尿病、高血压、高脂血症、呼吸道疾病、脑疾病、癌症等的重要危险因子，因此对其治疗和预防的关注正在增加。目前，肥胖和肥胖相关疾病导致的医疗费支出和死亡率不仅在韩国而且在全世界都在剧增，目前全世界肥胖人口约为20亿人，并且在韩国每3人中就有1人被分类为肥胖。
8.正在进行用于治疗这种肥胖的多种研究，但目前为止开发的大部分肥胖治疗剂主要与抑制食欲或抑制脂肪吸收的机制有关。通过抑制食欲的机制开发的肥胖治疗剂有西布曲明(sibutramine)、芬特明(phentermine)、苯甲曲秦(phendimetrazine)、芬特明/托吡酯(phentermine/topiramate)复合剂、氯卡色林(locaserin)等，但上述治疗剂可诱发中枢神经系统副作用或心血管系统副作用，因此大部分被禁止使用或极为有限地使用。另外，据悉，与抑制脂肪吸收的机制相关而开发的肥胖治疗剂即奥利司他(orlistat)是相对安全的，因此可以长期服用，但报道有腹泻、脂肪便、肛门失禁等的副作用，诱发不便，特别是，对于像韩国人一样，肥胖的主要原因是摄取过多的碳水化合物而不是摄取脂肪，存在难以期待大效果的缺点(sangman kim.对orlistat的研究.大韩肥胖学会杂志1998；7(4):287-92.)。因此，迄今为止尚未开发出体重调节功效优异且长期服用的安全性得到确认的肥胖治疗剂，因此需要通过除了目前为止已知的机制之外的新机制的肥胖预防或治疗剂。
9.另一方面，免疫增强(immunostimulation)作为对诸如癌症和炎症疾病等多种疾病加强身体防御机制的重要治疗学战略之一，可以增加免疫细胞的活性并刺激免疫反应，从而获得免疫增强效果。例如，巨噬细胞在免疫反应中起主要作用，巨噬细胞中的主要作用即吞噬细胞作用吸收微生物和其他发热性颗粒，另外，通过分泌诸如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor；tnf-α)、白细胞介素-1β(interleukin；il-1β)、白细胞介素-12(interleukin；il-12)等多数细胞因子(cytokin)和诸如一氧化氮(nitric oxide；no)等细胞毒性和炎症性物质来刺激免疫反应(wolf等人,1994；lee和hong,2011；murray和wynn,2011)。因此，增加巨噬细胞活性可以成为用于增强免疫的一种手段。
10.天然物在亚洲国家被用于治疗多种疾病，特别是被用作用于增强免疫、维持健康和长寿的强壮剂，并且多种结构的成分，特别是多糖(polysaccharides)、β-葡聚糖(glucans)、皂苷(saponins)和类姜黄素(curcuminoids)等的成分在临床和药物应用上被广泛作为免疫增强剂提出(ragupathi等人,2008；won等人,2011；sun等人,2005)。
11.另一方面，女性的绝经(menopause)是出生后约50年的遗传上已经决定的卵巢的功能结束寿命而出现的月经中断现象，意味着生殖能力的消失，并且是生理变化而不是病态现象。目前，韩国女性的平均寿命为81.2岁(2011年：统计厅)，假设大韩妇产科学会中规定的韩国女性的平均绝经年龄为50岁，则意味着女性一生的约1/3以上活在女性荷尔蒙耗竭的状态下。
12.女性在迎来绝经的同时，由于女性荷尔蒙的分泌不均衡和减少，血管系统、肌骨骼系统、泌尿生殖器系统和脑神经等整个身体都会发生变化。即，伴有血管运动性症状和心理症状即面部潮红、夜间出汗、睡眠障碍、疲劳感、抑郁症、不安感、集中力障碍、还有记忆障碍和泌尿生殖系统萎缩引起的性交痛、尿频、胶原质减少引起的皮肤弹性的消失、乳房的下
垂、还有心血管和肌骨骼系统症状、痴呆等的多种疾病等。对于更年期症状，虽然每个个体存在差异，但据报道，更年期症状经历越多，程度越严重，还有时间越长，女性的生活质量越低，而且更年期症状很有可能伴随着身体老化而发展成慢性疾病。
13.在更年期症状的治疗中可应用激素疗法、药物疗法、运动疗法、饮食疗法，但医学上常用的女性荷尔蒙治疗可增加乳腺癌等的风险，并且在长期使用时可增加子宫癌、血栓血管疾病、胆囊疾病、高血压的比率。因此，最近，为了替代雌激素疗法和其他药物疗法等，正在对报道起到与雌激素相似的功能的植物雌激素(phytoestrogen)进行大量研究。
14.另一方面，过敏(allergy)作为免疫不均衡引起的超敏反应的一种，是对称为过敏原(allergn)的特定抗原产生的反应，是对其抗原的特异性ige级抗体结合于肥大细胞(mast cell)或嗜碱性粒细胞(basophile)而诱导的反应。如果产生很多对过敏原的特异性ige抗体，则这些抗体会与存在于肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的fc受体结合，并且如果过敏原结合于此，则这些细胞被激活并分泌各种生理活性物质(细胞因子、前列腺素、白三烯、组胺、缓激肽、类胰蛋白酶(tryptase)等)，诱导诸如血管扩张、血管的渗透性的增加、平滑肌收缩、炎症反应等变化。这种反应可局部或全身发生，这取决于由这些细胞产生的介质的种类和量。作为疾病，有过敏性特应症、全身过敏、过敏性鼻炎、哮喘、食物过敏、皮肤过敏等。对于过敏疾病，1979年每10万人中有0.9人，但1998年为1.4人，大幅增加约55.6％左右，因此对缓解和预防疾病的重要性日益凸显。
15.作为用于治疗过敏的治疗剂，大致可分为甾体性消炎剂或非甾体性消炎剂、抗组胺剂或抗白三烯剂，并且前者大部分具有强烈的免疫抑制作用，因此可以在短时间内显示出暂时的镇定效果，但具有从恶心等的轻微副作用到诸如生长抑制或骨质疏松症等严重副作用，因此长期服用会带来很多问题。后者可表现出暂时的缓解效果，但具有困倦或头晕等的副作用，因此在使用上受到限制。因此，体内副作用少并且抗过敏活性高的源自天然提取物的物质的必要性日益突出。
16.另一方面，糖尿病(diabetes mellitus)是胰岛素作用不足引起的以慢性高血糖症为特征的同时伴有多种特征性代谢异常的疾病群。胰岛素主要参与碳水化合物代谢，因此对于糖尿病，碳水化合物代谢的异常是基本问题，但由此导致体内的所有营养素代谢都受到影响，因此也可以说是总体代谢上的疾病，尤其被认为是在现代最重要的慢性疾病，特别是越是发达国家发生频率越高。糖尿病是以静脉血的血浆葡萄糖浓度为基准来诊断的，不同日期检查2次并且如果空腹时(通常检查前8～12小时禁食状态)血浆葡萄糖浓度均在126mg/dl以上，则诊断为糖尿病。
17.韩国糖尿病人口在70年代为1.5％，而进入90年代后增加到8～10％，因此糖尿病性慢性并发症的发生率也呈现出急剧增加的趋势。
18.糖尿病大致分为胰岛素依赖型糖尿病和非胰岛素依赖型糖尿病，胰岛素依赖型糖尿病主要在青春期发病并且一定需要胰岛素注射治疗，占糖尿病患者84％的非胰岛素依赖型糖尿病主要在成人中缓慢进行并发病，因此主要通过饮食疗法和运动处方进行治疗。
19.糖尿病的治疗必须给药血糖调节药物，并且作为常规的血糖调节药剂，广泛使用胰岛素(insulin)，并且作为口服用制剂，主要使用磺酰脲(sulfonyl urea)类药物和双胍(biguanide)类药物等。
20.然而，这些药剂价格昂贵，而且需要终身给药的费用负担相当大，并且过敏、骨髓
抑制、低血糖等的副作用也很多，因此对肝或肾脏障碍患者或患有低血压、心肌梗塞、低氧血症的患者或老人等使用需要注意和禁忌。
21.因此，实情是考虑到需要终身给药的疾病上的特点，迫切需要开发尽可能没有副作用的健康功能食品和天然物医药品。
22.另一方面，基于由老年性痴呆症的一种即阿尔茨海默病诱发的记忆力和学习能力的丧失等认知功能障碍是由大脑基底部的乙酰胆碱能神经元(acetylcholinergic neuron)损伤引起的研究结果，开发出可根据对毒蕈碱性乙酰胆碱受体(muscarine acetylcholine receptor)的功效剂(激动剂，agonist)、乙酰胆碱生成促进剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂等各种作用机制强化乙酰胆碱能神经元的功能的药物。目前，作为乙酰胆碱酯酶抑制剂，开发出他克林(tacrine)，但出现诸如胃肠障碍等部分副作用，因此有必要从天然植物材料中探索并利用抑制活性材料。
23.另一方面，据报道，现代人的饮酒习惯和喜好油腻食物的西式饮食习惯的变化与脂肪肝疾病的增加趋势有着很深的关联。脂肪肝是指说明人体肝的脂肪含量超过5％时的非健康状态，已知由多种复杂原因诱发，但大致可分为过量饮酒导致的酒精性脂肪肝和与酒精无关的与其他病因相关而发生的非酒精性脂肪肝。其中，饮酒导致的脂肪肝即酒精性脂肪肝(alcoholic steatohepatitis,ash)是发达国家40-50多岁成人人口的死亡原因中仅次于癌症的严重疾病即肝病之一，在以发达国家为基准酒精摄取量排在最前列的韩国，脂肪肝发生率以成人为基准，2009年曾报道为32％。另外，不同于与酒精有直接关系的酒精性脂肪肝，非酒精性脂肪肝(non-alcoholic steatohepatitis,nash)是指与饮酒无关的肝内中性脂肪积累的疾病，并且在临床上作为进行性肝病，被认为是诱发肝硬变或肝癌的先行疾病(基础疾病，underlying diseases)，其意义非常大。特别是，随着诸如肥胖和胰岛素抵抗性糖尿病以及高脂血症等主要成人疾病被认为是危险因子，需要积极的调节和治疗(jonathan等人,metabolism.65:1096-1108,2016)。
24.另一方面，男性更年期(padam；partial androgen deficiency in aging male)是指男性随着身体的老化现象而经历整体身体、精神方面的衰退现象的过程，意味着由于男性荷尔蒙下降导致的影响，男性特征、整体生活活力或情绪逐渐下降。作为男性更年期症状，有神经过敏、情绪不安、忧郁症、眩晕症、面部潮红、出汗、睡眠障碍、活力下降、记忆力下降、工作能力降低、性欲减退、皮肤老化、骨密度减少、内脏脂肪的增加等。
25.和女性一样，男性也从50多岁左右开始出现更年期，发生频率随年龄增长而增加，肾上腺分泌的功能、精子的生殖力、睾丸间质(leydig)细胞功能随年龄增长而减退，并且男性更年期症状随血清睾酮减少而出现。这种男性更年期的原因除了其他环境因素之外，主要原因是以男性荷尔蒙为主轴的内分泌系统的衰退，因此，据悉，传统上以补充男性荷尔蒙的治疗为主要治疗疗法。男性荷尔蒙补充疗法有服用的药或涂抹的制剂、贴的贴片型制剂、注射疗法等。
26.作为与男性更年期相关的激素，睾酮是男性的主要循环雄激素。主要由睾丸的睾丸间质细胞分泌，睾酮主要参与男性二次性征的发育及维持。在身体中循环的睾酮可以由5α-还原酶代谢为双氢睾酮(dihydrotestosterone,dht)。睾酮可以由在肝、脂肪和睾丸中发现的芳香化酶(aromatase)酶复合体代谢为雌二醇(estradiol)。睾酮芳构化成雌二醇，从而可出现诸如女性型乳房症状等男性更年期症状。增加睾酮、减少双氢睾酮和雌二醇的水
aster)、茖葱(学名：allium victorialis或allium ulleungense，英文名：myeongyi)、山韭(学名：allium senescens，英文名：aging chive)、七灶花楸(学名：sorbus commixta，英文名：silvery mountain ash)、日本地椒(学名：thymus quinquecostatus var.japonica hara,)、峨参(学名：anthriscus sylvestris，英文名：wild chervil)、虎杖根(学名：fallopia sachalinensis，英文名：giant knotweed)、色木槭(学名：acer pictum，英文名：mono maple)、尖头蹄盖蕨(学名：athyrium acutipinnulum，英文名：ulleungdo ladyfern)、山嵛菜(学名：wasabia japonica，英文名：wild wasabi)、黄栝楼(学名：trichosanthes kirilowii，英文名：yellow mongolian snakegourd)、丰岛玉竹(学名：polygonatum odoratum，英文名：pungdo solomon’s seal)、菱叶常春藤(学名：hedera rhombea，英文名：songak)、于山堇菜(学名：viola woosanensis，英文名：ulleungdo sweet violet)、韩国风铃草(学名：campanula takesimana，英文名：korean bellflower)、竹叶百合(学名：lilium hansonii，英文名：ulleungdo turk’s-cap lily)、岛生穗花(学名：pseudolysimachion insulare，英文名：ulleungdo spike speedwell)、大唐米(学名：sedum oryzifolium，英文名：coastal moss-like stonecrop)、牛繁缕(学名：stellaria aquatica，英文名：water chickweed,giant chickweed)、鱼腥草(学名：houttuynia cordata thunb.，英文名：heartleaf houttuynia)、岛生獐耳细辛(学名：hepatica maxima(nakai)nakai，英文名：ulleungdo liverleaf)、钩柱毛茛(学名：ranunculus quelpaertensis(h.lev.)nakai)、悬铃叶苎麻(学名：boehmeria tricuspis(hance)makino，英文名：tricuspidate falsenettle)、长萼瞿麦(学名：dianthus longicalyx miq.，英文名：long-calyx pink)、皱叶酸模(学名：rumex crispus l.，英文名：curled dock)、小连翘(学名：hypericum erectum thunb.，英文名：erect st.johnswort)、绞股蓝(学名：gynostemma pentaphylla(thunb.)makino，英文名：five-leaf gynostemma)、老鼠拉冬瓜(学名：melothria japonica(thunb.)maxim.，英文名：bird’s egg cucumber)、岛生筷子芥(学名：arabis takesimana nakai，英文名：ulleungdo rockcress)、钻果大蒜芥(学名：sisymbrium officinale(l.)scop.，英文名：hedge mustard)、杜鹃(学名：rhododendron fauriei)、喜冬草(学名：chimaphila japonica miq.，英文名：asian prince’s pine)、紫金牛(学名：ardisia japonica(thunb.)blume，英文名：marlberry)、滨海珍珠菜(学名：lysimachia mauritiana lam.，英文名：spoon-leaf yellow loosestrife)、藤绣球(学名：hydrangea petiolaris siebold&zucc.，英文名：climbing hydrangea)、垂盆草(学名：sedum sarmentosum bunge，英文名：stringy stonecrop)、竹岛景天(学名：sedum takesimense nakai，英文名：ulleungdo stonecrop)、黄水枝(学名：tiarella polyphylla d.don，英文名：foam flower)、委陵菜(学名：potentilla chinensis ser.，英文名：east asian cinquefoil)、紫穗槐(学名：amorpha fruticosa l.，英文名：indigobush amorpha)、截叶铁扫帚(学名：lespedeza cuneata(dum.cours.)g.don.，英文名：sericea lespedeza)、紫花苜蓿(学名：medicago sativa l.，英文名：alfalfa)、黑龙江野豌豆(学名：vicia amurensis oett.，英文名：amur vetch)、千屈菜(学名：lythrum salicaria l.，英文名：hairy purple loosestrife)、南方露珠草(学名：circaea mollis siebold&zucc.，英文名：south enchanter’s nightshade)、长籽柳叶菜(学名：epilobium pyrricholophum franch.&sav.，英文名：long-seed willowherb)、月见
草(学名：oenothera biennis l.，英文名：evening primrose)、蔓金腰(学名：chrysosplenium flagelliferum f.schmidt，英文名：stolon golden saxifrage)、大文字草(学名：saxifraga fortunei var.incisolobata(engl.&irmsch.)nakai，英文名：serrate-petal rockfoil)、岛生野芝麻(学名：lamium takesimense nakai.，英文名：ulleungdo deadnettle)、岛生风箱果(学名：physocarpus insularis(nakai)nakai，英文名：island ninebark)、岛生延胡索(学名：corydalis ilistipes nakai，英文名：island corydalis)、岛生覆盆子(学名：rubus takesimensis nakai，英文名：ulleungdo raspberry)、郁陵芹(学名：dystaenia takeshimana(nakai)kitag，英文名：korea dystaenia)、岛生堇菜(学名：viola takeshimana nakai，英文名：ulleungdo violet)、冬青卫矛(学名：euonymus japonicus thunb.，英文名：spindle tree)、紫葛葡萄(学名：vitis coignetiae pulliat ex planch.，英文名：crimson grapevine)、长白楤木(学名：aralia cordata var.continentalis(kitag.)y.c.chu)、楤木(学名：aralia elata(miq.)seem.，英文名：japanese angelica)、八角金盘(学名：fatsia japonica(thunb.)decne.&planch.，英文名：glossy-leaf paper plant)、女萎(学名：clematis apiifolia dc.，英文名：three-leaf clematis)、白英(学名：solanum lyratum thunb.，英文名：lyre-leaf nightshade)、打碗花(学名：calystegia hederacea wall.，英文名：ivy morning glory)、肾叶打碗花(学名：calystegia soldanella(l.)roem.&schult.，英文名：beach morning glory)、紫珠(学名：callicarpa japonica thunb.，英文名：east asian beautyberry)、藿香(学名：agastache rugosa(fisch.&c.a.mey.)kuntze，英文名：korean mint)、风轮菜(学名：clinopodium chinense var.parviflorum(kudo)h.hara，英文名：small-flower asian calamint)、宝盖草(学名：lamium amplexicaule l.，英文名：henbit deadnettle)、益母草(学名：leonurus japonicus houtt.，英文名：oriental motherwort)、长梗亚欧唐松草(学名：thalictrum kemense fr.，英文名：long-stalk low meadow-rue)、红蕾荚蒾(学名：viburnum carlesii hemsl.，英文名：korean spice viburnum)、白屈菜(学名：chelidonium majus var.asiaticum(h.hara)ohwi，英文名：asian greater celandine)、扫帚菊(学名：aster spathulifolius maxim.，英文名：seashore spatulate aster)、大吴风草(学名：farfugium japonicum(l.)kitam.，英文名：leopard plant)、旋覆花(学名：inula britannica var.japonica(thunb.)franch.&sav.，英文名：oriental yellowhead)、蜂斗菜(学名：petasites japonicus(siebold&zucc.)maxim.，英文名：giant butterbur)、狐尾薹草(学名：carex blepharicarpa franch.)、青绿薹草(学名：carex breviculmis r.br.，英文名：short-stem sedge)、紫芒(学名：miscanthus sinensis var.purpurascens(andersson)rendle，英文名：purple maiden silvergrass)、狼尾草(学名：pennisetum alopecuroides(l.)spreng.，英文名：foxtail fountaingrass)、矢竹(学名：pseudosasa japonica(siebold&zucc.ex steud.)makino ex nakai，英文名：arrow bamboo)、岛生箬竹(学名：sasa kurilensis(rupr.)makino&shibata，英文名：kuril bamboo)、苦参(学名：sophora flavescens aiton，英文名：shrubby sophora)、萱草(学名：hemerocallis fulva(l.)l.，英文名：orange daylily)、卷丹(学名：lilium lancifolium thunb.，英文名：tiger lily)、阔叶山麦冬(学名：liriope platyphylla f.t.wang&t.tang，英文名：big blue lilyturf)、北方舞鹤草(学名：maianthemum dilatatum
(a.w.wood)a.nelson&j.f.macbr.，英文名：false lily of the valley)、日本柳杉(学名：cryptomeria japonica(thunb.ex l.f.)d.don，英文名：japanese cedar)、红楠(学名：machilus thunbergii siebold&zucc.，英文名：thunberg’s bay-tree)、日本五针松(学名：pinus parviflora siebold&zucc.，英文名：ulleungdo white pine)、铁杉(学名：tsuga sieboldii carriere，英文名：ulleungdo hemlock)、舟山新木姜子(学名：neolitsea sericea(blume)koidz.，英文名：sericeous newlitsea)、交让木(学名：daphniphyllum macropodum miq.，英文名：macropodous daphniphyllum)、糙叶树(学名：aphananthe aspera(thunb.)planch.，英文名：scabrous aphananthe)、狭叶朴(学名：celtis jessoensis koidz.，英文名：caudate-leaf hackberry)、裂叶榆(学名：ulmus laciniata(trautv.)mayr，英文名：manchurian elm)、深山桤木(学名：alnus maximowiczii callier，英文名：montane alder)、岛生椴(学名：tilia insularis nakai，英文名：ulleungdo linden)、玉铃花(学名：styrax obassia siebold&zucc.，英文名：fragrant snowbell)、岛生樱(学名：prunus takesimensis nakai，英文名：ulleungdo flowering cherry)、洒金桃叶珊瑚(学名：aucuba japonica thunb.，英文名：spotted laurel)、岛生槭(学名：acer takesimense nakai，英文名：ulleungdo maple)、岛生黄檗(学名：phellodendron insulare nakai)、樗叶花椒(学名：zanthoxylum ailanthoides siebold&zucc.，英文名：alianthus-like prickly-ash)、日本女贞(学名：ligustrum japonicum thunb.，英文名：wax-leaf privet)、岛生忍冬(学名：lonicera insularis nakai，英文名：ulleungdo honeysuckle)和粗齿绣球(学名：hydrangea serrata)组成的组中的一种以上的植物提取物作为有效成分。
35.解决方案
36.作为用于解决上述课题的手段，本发明提供了一种用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康以及改善男性更年期的组合物，其含有选自由岛蓟(学名：cirsium nipponicum(maxim.)makino，英文名：island thistle)、沙参(学名：codonopsis lanceolata，英文名：deodeok)、毛果一枝黄花(学名：solidago virgaurea，英文名：ulleung goldenrod)、假升麻(学名：aruncus dioicus，英文名：goat's beard)、格兰尼紫菀(学名：aster glehnii，英文名：ulleungdo aster)、茖葱(学名：allium victorialis或allium ulleungense，英文名：myeongyi)、山韭(学名：allium senescens，英文名：aging chive)、七灶花楸(学名：sorbus commixta，英文名：silvery mountain ash)、日本地椒(学名：thymus quinquecostatus var.japonica hara,)、峨参(学名：anthriscus sylvestris，英文名：wild chervil)、虎杖根(学名：fallopia sachalinensis，英文名：giant knotweed)、色木槭(学名：acer pictum，英文名：mono maple)、尖头蹄盖蕨(学名：athyrium acutipinnulum，英文名：ulleungdo ladyfern)、山嵛菜(学名：wasabia japonica，英文名：wild wasabi)、黄栝楼(学名：trichosanthes kirilowii，英文名：yellow mongolian snakegourd)、丰岛玉竹(学名：polygonatum odoratum，英文名：pungdo solomon’s seal)、菱叶常春藤(学名：hedera rhombea，英文名：songak)、于山堇菜(学名：viola woosanensis，英文名：ulleungdo sweet violet)、韩国风铃草(学名：campanula takesimana，英文名：korean bellflower)、竹叶百合(学名：lilium hansonii，英文名：
ulleungdo turk’s-cap lily)、岛生穗花(学名：pseudolysimachion insulare，英文名：ulleungdo spike speedwell)、大唐米(学名：sedum oryzifolium，英文名：coastal moss-like stonecrop)、牛繁缕(学名：stellaria aquatica，英文名：water chickweed,giant chickweed)、鱼腥草(学名：houttuynia cordata thunb.，英文名：heartleaf houttuynia)、岛生獐耳细辛(学名：hepatica maxima(nakai)nakai，英文名：ulleungdo liverleaf)、钩柱毛茛(学名：ranunculus quelpaertensis(h.lev.)nakai)、悬铃叶苎麻(学名：boehmeria tricuspis(hance)makino，英文名：tricuspidate falsenettle)、长萼瞿麦(学名：dianthus longicalyx miq.，英文名：long-calyx pink)、皱叶酸模(学名：rumex crispus l.，英文名：curled dock)、小连翘(学名：hypericum erectum thunb.，英文名：erect st.johnswort)、绞股蓝(学名：gynostemma pentaphylla(thunb.)makino，英文名：five-leaf gynostemma)、老鼠拉冬瓜(学名：melothria japonica(thunb.)maxim.，英文名：bird’s egg cucumber)、岛生筷子芥(学名：arabis takesimana nakai，英文名：ulleungdo rockcress)、钻果大蒜芥(学名：sisymbrium officinale(l.)scop.，英文名：hedge mustard)、杜鹃(学名：rhododendron fauriei)、喜冬草(学名：chimaphila japonica miq.，英文名：asian prince’s pine)、紫金牛(学名：ardisia japonica(thunb.)blume，英文名：marlberry)、滨海珍珠菜(学名：lysimachia mauritiana lam.，英文名：spoon-leaf yellow loosestrife)、藤绣球(学名：hydrangea petiolaris siebold&zucc.，英文名：climbing hydrangea)、垂盆草(学名：sedum sarmentosum bunge，英文名：stringy stonecrop)、竹岛景天(学名：sedum takesimense nakai，英文名：ulleungdo stonecrop)、黄水枝(学名：tiarella polyphylla d.don，英文名：foam flower)、委陵菜(学名：potentilla chinensis ser.，英文名：east asian cinquefoil)、紫穗槐(学名：amorpha fruticosa l.，英文名：indigobush amorpha)、截叶铁扫帚(学名：lespedeza cuneata(dum.cours.)g.don.，英文名：sericea lespedeza)、紫花苜蓿(学名：medicago sativa l.，英文名：alfalfa)、黑龙江野豌豆(学名：vicia amurensis oett.，英文名：amur vetch)、千屈菜(学名：lythrum salicaria l.，英文名：hairy purple loosestrife)、南方露珠草(学名：circaea mollis siebold&zucc.，英文名：south enchanter’s nightshade)、长籽柳叶菜(学名：epilobium pyrricholophum franch.&sav.，英文名：long-seed willowherb)、月见草(学名：oenothera biennis l.，英文名：evening primrose)、蔓金腰(学名：chrysosplenium flagelliferum f.schmidt，英文名：stolon golden saxifrage)、大文字草(学名：saxifraga fortunei var.incisolobata(engl.&irmsch.)nakai，英文名：serrate-petal rockfoil)、岛生野芝麻(学名：lamium takesimense nakai.，英文名：ulleungdo deadnettle)、岛生风箱果(学名：physocarpus insularis(nakai)nakai，英文名：island ninebark)、岛生延胡索(学名：corydalis ilistipes nakai，英文名：island corydalis)、岛生覆盆子(学名：rubus takesimensis nakai，英文名：ulleungdo raspberry)、郁陵芹(学名：dystaenia takeshimana(nakai)kitag，英文名：korea dystaenia)、岛生堇菜(学名：viola takeshimana nakai，英文名：ulleungdo violet)、冬青卫矛(学名：euonymus japonicus thunb.，英文名：spindle tree)、紫葛葡萄(学名：vitis coignetiae pulliat ex planch.，英文名：crimson grapevine)、长白楤木(学名：aralia cordata var.continentalis(kitag.)y.c.chu)、楤
木(学名：aralia elata(miq.)seem.，英文名：japanese angelica)、八角金盘(学名：fatsia japonica(thunb.)decne.&planch.，英文名：glossy-leaf paper plant)、女萎(学名：clematis apiifolia dc.，英文名：three-leaf clematis)、白英(学名：solanum lyratum thunb.，英文名：lyre-leaf nightshade)、打碗花(学名：calystegia hederacea wall.，英文名：ivy morning glory)、肾叶打碗花(学名：calystegia soldanella(l.)roem.&schult.，英文名：beach morning glory)、紫珠(学名：callicarpa japonica thunb.，英文名：east asian beautyberry)、藿香(学名：agastache rugosa(fisch.&c.a.mey.)kuntze，英文名：korean mint)、风轮菜(学名：clinopodium chinense var.parviflorum(kudo)h.hara，英文名：small-flower asian calamint)、宝盖草(学名：lamium amplexicaule l.，英文名：henbit deadnettle)、益母草(学名：leonurus japonicus houtt.，英文名：oriental motherwort)、长梗亚欧唐松草(学名：thalictrum kemense fr.，英文名：long-stalk low meadow-rue)、红蕾荚蒾(学名：viburnum carlesii hemsl.，英文名：korean spice viburnum)、白屈菜(学名：chelidonium majus var.asiaticum(h.hara)ohwi，英文名：asian greater celandine)、扫帚菊(学名：aster spathulifolius maxim.，英文名：seashore spatulate aster)、大吴风草(学名：farfugium japonicum(l.)kitam.，英文名：leopard plant)、旋覆花(学名：inula britannica var.japonica(thunb.)franch.&sav.，英文名：oriental yellowhead)、蜂斗菜(学名：petasites japonicus(siebold&zucc.)maxim.，英文名：giant butterbur)、狐尾薹草(学名：carex blepharicarpa franch.)、青绿薹草(学名：carex breviculmis r.br.，英文名：short-stem sedge)、紫芒(学名：miscanthus sinensis var.purpurascens(andersson)rendle，英文名：purple maiden silvergrass)、狼尾草(学名：pennisetum alopecuroides(l.)spreng.，英文名：foxtail fountaingrass)、矢竹(学名：pseudosasa japonica(siebold&zucc.ex steud.)makino ex nakai，英文名：arrow bamboo)、岛生箬竹(学名：sasa kurilensis(rupr.)makino&shibata，英文名：kuril bamboo)、苦参(学名：sophora flavescens aiton，英文名：shrubby sophora)、萱草(学名：hemerocallis fulva(l.)l.，英文名：orange daylily)、卷丹(学名：lilium lancifolium thunb.，英文名：tiger lily)、阔叶山麦冬(学名：liriope platyphylla f.t.wang&t.tang，英文名：big blue lilyturf)、北方舞鹤草(学名：maianthemum dilatatum(a.w.wood)a.nelson&j.f.macbr.，英文名：false lily of the valley)、日本柳杉(学名：cryptomeria japonica(thunb.ex l.f.)d.don，英文名：japanese cedar)、红楠(学名：machilus thunbergii siebold&zucc.，英文名：thunberg’s bay-tree)、日本五针松(学名：pinus parviflora siebold&zucc.，英文名：ulleungdo white pine)、铁杉(学名：tsuga sieboldii carriere，英文名：ulleungdo hemlock)、舟山新木姜子(学名：neolitsea sericea(blume)koidz.，英文名：sericeous newlitsea)、交让木(学名：daphniphyllum macropodum miq.，英文名：macropodous daphniphyllum)、糙叶树(学名：aphananthe aspera(thunb.)planch.，英文名：scabrous aphananthe)、狭叶朴(学名：celtis jessoensis koidz.，英文名：caudate-leaf hackberry)、裂叶榆(学名：ulmus laciniata(trautv.)mayr，英文名：manchurian elm)、深山桤木(学名：alnus maximowiczii callier，英文名：montane alder)、岛生椴(学名：tilia insularis nakai，英文名：
lyratum thunb.，英文名：lyre-leaf nightshade)、打碗花(学名：calystegia hederacea wall.，英文名：ivy morning glory)、肾叶打碗花(学名：calystegia soldanella(l.)roem.&schult.，英文名：beach morning glory)、紫珠(学名：callicarpa japonica thunb.，英文名：east asian beautyberry)、藿香(学名：agastache rugosa(fisch.&c.a.mey.)kuntze，英文名：korean mint)、风轮菜(学名：clinopodium chinense var.parviflorum(kudo)h.hara，英文名：small-flower asian calamint)、宝盖草(学名：lamium amplexicaule l.，英文名：henbit deadnettle)、益母草(学名：leonurus japonicus houtt.，英文名：oriental motherwort)、长梗亚欧唐松草(学名：thalictrum kemense fr.，英文名：long-stalk low meadow-rue)、红蕾荚蒾(学名：viburnum carlesii hemsl.，英文名：korean spice viburnum)、白屈菜(学名：chelidonium majus var.asiaticum(h.hara)ohwi，英文名：asian greater celandine)、扫帚菊(学名：aster spathulifolius maxim.，英文名：seashore spatulate aster)、大吴风草(学名：farfugium japonicum(l.)kitam.，英文名：leopard plant)、旋覆花(学名：inula britannica var.japonica(thunb.)franch.&sav.，英文名：oriental yellowhead)、蜂斗菜(学名：petasites japonicus(siebold&zucc.)maxim.，英文名：giant butterbur)、狐尾薹草(学名：carex blepharicarpa franch.)、青绿薹草(学名：carex breviculmis r.br.，英文名：short-stem sedge)、紫芒(学名：miscanthus sinensis var.purpurascens(andersson)rendle，英文名：purple maiden silvergrass)、狼尾草(学名：pennisetum alopecuroides(l.)spreng.，英文名：foxtail fountaingrass)、矢竹(学名：pseudosasa japonica(siebold&zucc.ex steud.)makino ex nakai，英文名：arrow bamboo)、岛生箬竹(学名：sasa kurilensis(rupr.)makino&shibata，英文名：kuril bamboo)、苦参(学名：sophora flavescens aiton，英文名：shrubby sophora)、萱草(学名：hemerocallis fulva(l.)l.，英文名：orange daylily)、卷丹(学名：lilium lancifolium thunb.，英文名：tiger lily)、阔叶山麦冬(学名：liriope platyphylla f.t.wang&t.tang，英文名：big blue lilyturf)、北方舞鹤草(学名：maianthemum dilatatum(a.w.wood)a.nelson&j.f.macbr.，英文名：false lily of the valley)、日本柳杉(学名：cryptomeria japonica(thunb.ex l.f.)d.don，英文名：japanese cedar)、红楠(学名：machilus thunbergii siebold&zucc.，英文名：thunberg’s bay-tree)、日本五针松(学名：pinus parviflora siebold&zucc.，英文名：ulleungdo white pine)、铁杉(学名：tsuga sieboldii carriere，英文名：ulleungdo hemlock)、舟山新木姜子(学名：neolitsea sericea(blume)koidz.，英文名：sericeous newlitsea)、交让木(学名：daphniphyllum macropodum miq.，英文名：macropodous daphniphyllum)、糙叶树(学名：aphananthe aspera(thunb.)planch.，英文名：scabrous aphananthe)、狭叶朴(学名：celtis jessoensis koidz.，英文名：caudate-leaf hackberry)、裂叶榆(学名：ulmus laciniata(trautv.)mayr，英文名：manchurian elm)、深山桤木(学名：alnus maximowiczii callier，英文名：montane alder)、岛生椴(学名：tilia insularis nakai，英文名：ulleungdo linden)、玉铃花(学名：styrax obassia siebold&zucc.，英文名：fragrant snowbell)、岛生樱(学名：prunus takesimensis nakai，英文名：ulleungdo flowering cherry)、洒金桃叶珊瑚(学名：aucuba japonica thunb.，英文名：spotted laurel)、岛生
槭(学名：acer takesimense nakai，英文名：ulleungdo maple)、岛生黄檗(学名：phellodendron insulare nakai)、樗叶花椒(学名：zanthoxylum ailanthoides siebold&zucc.，英文名：alianthus-like prickly-ash)、日本女贞(学名：ligustrum japonicum thunb.，英文名：wax-leaf privet)、岛生忍冬(学名：lonicera insularis nakai，英文名：ulleungdo honeysuckle)和粗齿绣球(学名：hydrangea serrata)组成的组中的一种以上的植物提取物作为有效成分。
41.根据本发明的包含植物提取物作为有效成分的组合物可以用作用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康以及改善男性更年期的组合物。
42.如本发明的实施例可以确认，本发明的包含植物提取物作为有效成分的组合物在低浓度下显示出非常优异的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善效果，因此可以用作用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康以及改善男性更年期的食品组合物和药学组合物的有效成分。
43.因此，本发明还提供上述植物提取物在制备用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康和/或改善男性更年期的食品组合物或药学组合物中的用途以及包括给药上述植物提取物在内的血液循环改善方法、胆固醇改善方法、抗肥胖方法、免疫功能改善方法、女性更年期方法、抗过敏方法、血糖调节方法、认知功能改善方法、肝健康改善方法和男性更年期改善方法。
44.在本发明中，植物不受种类的限制，并且可以不受其来源限制地使用，例如使用栽培的或使用市售的。
45.本发明的植物提取物可以通过本领域中公知的方法提取，其方法没有特别限制。或者，可以利用市售的提取物。
46.根据本发明的植物提取物可以具有血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善和/或男性更年期改善效果而与地区无关。优选地，从郁陵岛采集和提取的植物提取物可以具有更优异的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善和/或男性更年期改善效果。
47.上述植物提取物可以使用植物的所有部位，并且不受提取部位的限制。上述植物提取物的制备不受上述植物体形态的限制，上述植物体是指包括经过干燥等的加工过程的所有植物体。例如，植物可以是前述植物的全草、根、茎、叶、果实、花、芽、枝、树皮、树液、珠芽和/或籽(种子)。
48.本发明中使用的术语“提取物”包括通过提取前述植物而获得的提取液、上述提取液的稀释液或浓缩液、通过干燥上述提取液而获得的干燥物、上述提取液的粗精制物或精制物、提取液的发酵物或它们的混合物等，提取液本身以及可利用提取液而形成的所有剂型的提取物。另外，包括通过将植物直接压榨或粉碎后过滤而获得的榨汁液。上述植物可以按植物原样提取或者炮制(加工)而提取。上述“炮制”(匍制)是指根据韩方理论对药材进行加工处理从而改变药材原有性质的制药技术，例如，有对药材进行炒制的炒法、将药材与一
定量的液体辅助材料一起炒制从而使辅助材料渗入药物组织内的炙法、根据药材各品种的炮制规定加入液体辅助材料并混合后在适当的容器中加热并蒸煮或蒸煮至一定程度并晾干的蒸法等。
49.在本发明中，提取方法没有特别限制，可以根据本领域中通常使用的方法提取。作为上述提取方法的非限制性实例，有溶剂提取法、热水提取法、超声波提取法、过滤法、回流提取法等，这些可以单独进行或并用两种以上的方法进行。
50.在本发明中，用于提取的提取溶剂的种类没有特别限制，可以使用本领域中公知的任意溶剂。在本发明中，上述提取物可以通过用水、碳原子数为1至6的低级醇或它们的混合溶剂提取而获得。另外，作为上述提取溶剂的非限制性实例，可以使用水；甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等的碳原子数为1至6的低级醇；甘油、丁二醇、丙二醇等的多元醇；乙酸甲酯、乙酸乙酯、丙酮、苯、己烷、二乙醚、二氯甲烷等的烃类溶剂；或它们的混合物，具体地，可以单独使用水、低级醇、1,3-丁二醇、乙酸乙酯或混合两种以上使用。此时，当混合两种以上的溶剂使用时，溶剂之间的混合比例没有特别限制。
51.在本发明中，提取可以应用以上述植物干燥物重量为基准利用1至100倍重量、具体地1至50倍重量、更具体地达到2至20倍的重量的溶剂在10至80℃、具体地15至50℃的提取温度下提取2小时至30天、具体地12小时至18天的提取时间的方法，并且可以包括通过包含上述干燥和粉碎物连续提取1次至5次而获得液态的粗提取物的过程。
52.在本发明中，对于上述提取物，为了去除悬浮的固体颗粒进行过滤，例如利用尼龙、滤纸等过滤颗粒或者利用冷冻过滤法等过滤后，可以直接使用或者将其利用冻结干燥、热风干燥、喷雾干燥等干燥而使用。
53.上述液态的粗提取物通过减压过滤等的方法与植物的干燥粉碎物分离后，可以经过浓缩或干燥的过程。例如，可以是使用真空旋转浓缩器将上述液态的粗提取物在20至100℃、优选地30至70℃下减压浓缩的浓缩液，也可以通过干燥上述液态的提取物而获得粉末化的提取物。如此浓缩或粉末化的提取物可以根据需要溶于水、醇、dmso(二甲基亚砜，dimethyl sulfoxide)或它们的混合溶剂而使用。
54.在本发明中，上述有效成分可以是植物提取物的馏分(fraction)。
55.本发明中使用的术语“馏分”是指为了从包含多种构成成分的混合物中分离特定成分或特定成分组而进行分馏获得的产物。
56.在本发明中获得上述馏分的分馏方法没有特别限制，可以根据本领域中通常使用的方法进行。作为上述分馏方法的非限制性实例，可以列举将预定的溶剂处理于通过提取植物而获得的植物提取物而从上述提取物中获得馏分的方法。
57.在本发明中，用于获得上述馏分的溶剂的种类没有特别限制，可以使用本领域中公知的任意溶剂。作为上述分馏溶剂的非限制性实例，可以列举水、醇等的极性溶剂；己烷、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、丁醇等的非极性溶剂等。这些可以单独使用或混合两种以上使用。当使用上述分馏溶剂中的醇时，可以使用碳原子数为1至6的醇。
58.在本发明中，“血液循环改善效果”是指通过舒张血管或抑制血小板凝集来显示出血液循环改善效果。
59.在本发明中，“胆固醇改善效果”是指抑制胆固醇合成的效果。
60.在本发明中，“抗肥胖改善效果”是指有助于减少体脂。
61.在本发明中，“免疫功能改善效果”是指改善免疫超敏反应，或者改善或增强免疫功能。
62.在本发明中，术语“更年期改善效果”是指有助于更年期女性的健康，或者有助于更年期男性的健康。
63.在本发明中，“抗过敏效果”是指有助于改善免疫超敏反应、或者有助于改善因免疫超敏反应引起的鼻子状态、或者有助于改善因免疫超敏反应引起的皮肤状态的效果。
64.在本发明中，“认知功能改善效果”是指改善因老化而下降的认知功能。
65.在本发明中，“肝健康改善效果”是指有助于肝健康或者保护肝免受酒精性损伤的效果。
66.在本发明中，术语“血糖调节效果”是指包括通过促进糖向细胞内的吸收来帮助抑制餐后血液中的葡萄糖上升在内的血糖调节效果。
67.在本发明中，“有效量”或“作为有效成分包含”是指显示出血液循环改善效果，或者抑制胆固醇合成，或者显示出抗肥胖效果，或者改善免疫功能，或者显示出女性更年期改善效果，或者显示出抗过敏效果，或者显示出血糖调节效果，或者显示出认知功能改善效果，或者显示出肝健康改善效果，或者另外具有男性更年期改善效果的提取物的量。当本发明的组合物包含有效量的上述植物提取物时，可以提供优选的血液循环改善效果、胆固醇调节效果、抗肥胖效果、免疫功能改善效果、女性更年期改善效果、抗过敏效果、血糖调节效果、肝健康改善效果以及男性更年期改善效果。
68.在根据本发明的食品组合物和药学组合物中，相对于食品组合物和药学组合物的总重量，植物提取物的含量优选为0.0001至10重量份。
69.本发明提供了一种用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康和/或改善男性更年期的药学组合物，其包含植物提取物作为有效成分。
70.本发明中使用的术语“药学组合物”可以用作包括“医药外品”或“医药品”含义的概念。
71.上述药学组合物可以是油或水性介质中的溶液、悬浮液或乳化液的形式，或者提取剂、粉末剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂的形式。
72.另外，上述组合物可以进一步含有一种以上的显示出相同或相似功能的有效成分。例如，可以包含公知的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善成分。如果包含额外的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善成分，则本发明的组合物的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善效果可得到进一步增强。在添加上述成分时，可考虑复合使用导致的安全性、剂型化的容易性、有效成分的稳定性。在本发明的一个具体例中，上述组合物可以进一步包含本领域中公知的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善成分。相对于组合物的总重量，附加的成分的含量可以为0.0001至10重量份，上述含量范围可以根据安全性、上述植物提取物在剂型化时的容易性等的条件进行调节。
73.另外，本发明的组合物还可以包含药学上可允许的载体。
74.药学上可允许的载体可以含有各种成分，例如缓冲液、注射用无菌水、普通食盐水或磷酸盐缓冲食盐水、蔗糖、组氨酸、盐和聚山梨酯等。
75.本发明的组合物可以口服或非口服给药，可以以一般药学制剂的形式、例如临床给药时口服和非口服的各种剂型给药，在制剂化的情况下，可以使用通常使用的填充剂、增量剂、结合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等的稀释剂或赋形剂来调制。
76.用于口服给药的固体制剂中包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这些固体制剂可以通过在本发明的医药组合物中混合至少一种以上的赋形剂，例如淀粉、碳酸钙(calcium carbonate)、蔗糖(sucrose)或乳糖(lactose)、明胶等来调制。
77.除了简单的赋形剂之外，还使用硬脂酸镁滑石等润滑剂。作为用于口服的液态制剂，包括悬浮剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂等，除了通常使用的作为简单稀释剂的水、液体石蜡之外，还可以包括各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等。
78.用于非口服给药的制剂中包括无菌水溶液、非水性溶剂、悬浮剂、乳剂、冻干制剂、栓剂。作为非水性溶剂、悬浮用剂，可以使用丙二醇(propylene glycol)、聚乙二醇、诸如橄榄油等植物油、诸如油酸乙酯等可注射的酯等。作为栓剂的基剂，可以使用维特普索(witepsol)、聚乙二醇、吐温(tween)61、可可脂、月桂酸甘油酯(laurinum)、甘油明胶等。
79.本发明的组合物中包含的植物提取物的有效量可以根据组合物产品化的形式、上述化合物应用于皮肤的方法以及停留在皮肤的时间等而变化。例如，当上述组合物被产品化为药学剂型时，与被产品化为日常应用于皮肤的化妆品时相比，可以以较高浓度包含上述植物提取物。因此，基于上述植物提取物的量，每日给药量为0.1至100mg/kg，优选为30至80mg/kg，更优选为50至60mg/kg，每天可以给药1～6次。
80.本发明的组合物可以单独使用或与手术、放射线治疗、激素治疗、化学治疗和使用生物反应调节剂的方法并用而使用。
81.另外，本发明的包含植物提取物作为有效成分的用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康和/或改善男性更年期的组合物可以作为医药外品提供。
82.在本发明中，“医药外品”除了包含上述植物提取物作为有效成分之外，还可以根据需要进一步包含药学上可允许的载体、赋形剂或稀释剂。上述药学上可允许的载体、赋形剂或稀释剂没有限制，只要其不损害本发明的效果即可，例如，可以包括填充剂、增量剂、结合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、甜味剂、芳香剂或保存剂，但不限于此。
83.上述医药外品可以是例如消毒清洁剂、沐浴泡沫、软膏液、湿纸巾、涂剂等，并且优选地可以制备成诸如外用软膏、露等半固体制剂，但不限于此。上述医药外品的制剂化方法、用量、利用方法、构成成分等可以从技术领域中公知的常规技术中进行适当选择。
84.另外，提供了本发明的包含植物提取物作为有效成分的用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康和/或改善男性更年期的皮肤外用剂。
85.当将上述植物提取物用作皮肤外用剂时，可以进一步含有皮肤科学领域中通常使用的辅助剂，例如脂肪物质、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂和胶凝剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foaming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、
填充剂、金属离子封锁剂和螯合剂、保存剂、维生素、阻断剂、润湿剂、必需油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质小囊或皮肤用外用剂中通常使用的任意其他成分。另外，上述成分可以以皮肤科学领域中通常使用的量导入。
86.当上述植物提取物作为皮肤外用剂剂型提供时，虽然不限于此，但可以具有诸如软膏、贴片、凝胶、霜或喷雾剂等剂型。
87.本发明还涉及包含上述植物提取物的用于改善血液循环、改善胆固醇、抗肥胖、改善免疫功能、改善女性更年期、抗过敏、调节血糖、改善认知功能、改善肝健康以及改善男性更年期的食品组合物。
88.当本发明的植物提取物作为食品组合物提供时，上述组合物除了有效成分之外还可以包含食品学上可允许的食品辅助添加剂。
89.上述食品辅助添加剂是指可以保存性地添加到食品中的构成要素，是在制备各剂型的健康功能食品时添加的，本领域技术人员可以适当选择并使用。作为食品辅助添加剂的实例，包括各种营养剂、维生素、矿物质(电解质)、合成风味剂和天然风味剂等的风味剂、着色剂和填充剂、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、ph调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等，但其种类不限于此。
90.另外，上述食品组合物中可以包括健康功能食品。在本说明书中，“健康功能食品”是指利用物理、生化、生物工程手段方法等在食品中赋予附加价值以使该食品的功能作用、表达于特定目的的食品群或者设计加工以使对生物体充分表达食品组成所具有的生物体防御节律调节、疾病防止和恢复等相关的体调节功能的食品。与一般食品相比，具有积极的健康维持或增强效果，健康辅助食品(health supplement food)是指健康辅助目的的食品。根据情况，功能性食品、健康食品、健康辅助食品的术语混用。
91.具体地，上述健康功能食品作为将上述植物提取物添加到饮料、茶类、香辛料、口香糖、饼干类等的食品材料中或制备成胶囊化、粉末化、悬浮液等的食品，是指摄取它时对健康具有特定效果的食品，但与一般药品不同，以食品为原料，从而具有没有长期服用药品时可能出现的副作用等的优点。
92.上述食品中可以包含食品学上可允许的食品辅助添加剂，可以进一步包含在健康功能食品的制备中通常使用的适当的载体、赋形剂和稀释剂。
93.根据本发明的食品组合物中包含的上述成分各自可以在不超过按各国的食品安全规范中规定的最大使用量的范围内包含在本发明的食品组合物中。
94.上述组合物可以包含通常可以用于食品组合物中以提高气味、味道、视觉等的附加成分。例如，可以包括维生素a、c、d、e、b1、b2、b6、b12、烟酸(niacin)、生物素(biotin)、叶酸(folate)、泛酸(panthotenic acid)等。另外，可以包括锌(zn)、铁(fe)、钙(ca)、铬(cr)、镁(mg)、锰(mn)、铜(cu)、铬(cr)等的矿物质。另外，可以包括赖氨酸、色氨酸、半胱氨酸、缬氨酸等的氨基酸。本发明的健康功能食品可以采取的形式没有限制，可以包括通常意义的所有食品，并且可以与功能性食品等本领域中已知的术语混用。
95.而且，本发明的健康功能食品可以根据本领域技术人员的选择混合可以包含在食品中的适当的其他辅助成分和公知的添加剂来制备。作为可以添加的食品的实例，有肉类、肠、面包、巧克力、糖果类、小吃类、饼干类、比萨、方便面、其他面类、口香糖类、包括冰淇淋类的乳制品、各种汤、饮料、茶、口服液、酒精饮料和维生素复合剂等，可以添加于以本发明
的食品提取物为主成分制备的汁、茶、软糖(jelly)和果汁等中来制备。另外，还包括作为给动物的饲料利用的食品。
96.当食品剂型为饮料时，像常规饮料一样可以含有各种香味剂或天然碳水化合物等作为附加成分。上述天然碳水化合物是单糖如葡萄糖、果糖，二糖如麦芽糖、蔗糖，以及多糖如糊精、环糊精，木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等糖醇。作为甜味剂，可以使用诸如索马甜(thaumatin)、甜叶菊(stevia)提取物等天然甜味剂或诸如糖精、阿斯巴甜等合成甜味剂等。上述天然碳水化合物的比例通常为每100ml本发明的组合物约0.01～0.04g，优选约0.02～0.03g。
97.除了上述以外，食品剂型还可以含有各种营养剂、维生素、电解质、风味剂、着色剂、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、ph调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。除此以外，食品剂型可以含有用于制备天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些成分可以单独使用或混合而使用。这些添加剂的比例并不重要，但通常在每100重量份本发明的组合物0.01～0.1重量份的范围内选择。
98.由于由此获得的本发明的健康功能食品可以日常摄取，因此可以期待高的血液循环改善、胆固醇改善、抗肥胖、免疫功能改善、女性更年期改善、抗过敏、血糖调节、认知功能改善、肝健康改善以及男性更年期改善效果，因而非常有用。
99.当将上述植物提取物用作食品添加物时，可以将上述植物提取物直接添加或与其他食品或食品成分一起使用，可以根据常规方法适当地使用。有效成分的混合量可以根据其使用目的(预防、健康或治疗性处置)适当地确定。一般来说，在制备食品或饮料时，本发明的组合物以相对于原料的15重量份以下、优选10重量份以下的量添加。然而，在以健康和卫生为目的或以调节健康为目的而长时间摄取的情况下，上述量可以是上述范围以下，并且由于在安全性方面不存在任何问题，因此有效成分也可以以上述范围以上的量使用。
100.以下，通过实施例详细说明本发明。但，下述实施例只是例示本发明，本发明的内容不限于下述实施例。
101.制备例1：植物提取物的制备
102.向1-111的植物(从郁陵岛各地采集或购买)的全草、根、茎、叶、果实、花、芽、枝、树皮、树液、珠芽或籽(种子)添加相当于质量20倍的70％乙醇水溶液并在室温下提取3天，然后减压过滤。将过滤后的提取物用旋转蒸发器(rotary evaporator)(buchi,switzerland)浓缩、干燥以制备植物提取物。
103.实验例1：血液循环改善效果-oxldl诱导氧化氮的减少恢复量测量
104.为了确认根据植物提取物的血液循环改善效果，测量了由氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxldl)诱导的氧化氮的减少恢复量。首先，将huvec细胞悬浮在ham's f-12k(kaighn的改性，kaighn's modification)培养基中并分株于培养板。然后，将按浓度稀释的植物提取物(试料)分株于细胞。此时，作为阳性对照群，使用了oxldl 200ppm。将处理有试料的细胞放入37℃、5％co2培养器中，培养24至48小时，然后取上清液用作分析试料。
105.为了分析氧化氮，将等量的成分a和成分b混合，制备了格里斯试剂(griess reagent)。然后，将250μl试料(培养基)和50μl格里斯试剂放入板中并充分混合。其次，为了准备亚硝酸钠(sodium nitrite)溶液，用蒸馏水稀释亚硝酸标准溶液以使达到1至100mm之
间的浓度(参考试料)。将试料和格里斯试剂的混合物在室温下以阻断光的状态孵育30分钟。之后，在548nm处测量相对于参考试料的含亚硝酸盐试料的吸光度(o.d)。此时，作为阳性对照群，处理了0.1μm的瑞舒伐他汀，阳性对照群显示出100％恢复的结果。
106.本实验例是确认植物提取物恢复多少因oxldl而减少的氧化氮的实验，实验结果是对氧化氮的量进行定量的。由于氧化氮会扩张血管，因此氧化氮分泌越多，意味着血液循环改善效果越好。
107.对各试料的实验结果示于下表中，如果吸光度数值根据试料的浓度而增加，则显示氧化氮(no)生成量增加，因此，如果通过试料处理恢复因oxldl而减少的氧化氮的量，则可以确认有助于生物体内血管扩张。
108.实验例2.脂质-胆固醇改善效果-hepg2细胞中胆固醇合成测量
109.为了确认根据植物提取物的脂质胆固醇改善效果，将hepg2细胞以适当的数分株并用imem(含有10％fcs、4.5g/l葡萄糖、4mm谷氨酰胺、10μg/ml胰岛素、50μg/ml青霉素、50μg/ml链霉素、1％非必需氨基酸)培养。此时，培养液每2天更换一次，细胞在分株12天后用于实验。
110.在细胞中添加1ml标记的乙酸盐([
14
c]乙酸钠，[
14
c]sodium acetate)溶液并在co2培养器中培养。培养1小时后，丢弃培养液，用冰冷的pbs(ice-cold pbs)充分洗涤细胞，添加2m的naoh并在95℃下培养1小时以使细胞脱落，发生脂质皂化。然后，添加[3h]胆固醇(cholesterol)(约20,000dpm/试料)作为回收标记物(recovery marker)，并用氯仿-甲醇2:1(v/v)提取脂质。之后，从tlc(薄层色谱，thin layer chromatohrapy)中分离脂质后，刮下相当于游离胆固醇的条带并放入闪烁瓶(scintillation vial)中进行测量。对上述实验的结果以每蛋白质掺入的乙酸盐的量(掺入的乙酸盐(纳摩尔)/蛋白质(mg)，nmoles acetate incorporated/mg protein)显示。此时，作为阳性对照群，使用了辛伐他汀(simvastatin)和阿托伐他汀(atorvastatin)，ic50分别为31.8nm和70.4nm。
[0111]
本实验例是确认植物提取物抑制多少胆固醇合成的实验，实验结果是对胆固醇的量进行定量的。胆固醇数值越低，意味着胆固醇改善效果越好。
[0112]
对各试料的实验结果示于下表中，试验物质对细胞内胆固醇含量产生的影响、对酯化产生的影响以将对照群(仅处理dmso(二甲基亚砜，dimethyl sulfoxide)的群)设为100％时的相对比显示或者以掺入的乙酸盐的量(掺入的[
14
c]-乙酸盐(纳摩尔)/4h/孔，nmoles[
14
c]-acetate incorporated/4h/well)显示。上述测量值越大，解释为胆固醇合成越多，并且如果显示胆固醇合成较少，则可以确认有助于胆固醇改善。
[0113]
实验例3.抗肥胖效果-3t3-l1成纤维细胞培养液中甘油含量测量
[0114]
为了确认根据植物提取物的抗肥胖效果，测量了3t3-l1成纤维细胞培养液中甘油的含量。
[0115]
首先，使用包含10％牛血清(bovine serum)的dmem培养基(增殖用培养基)培养3t3-l1成纤维细胞，然后在板中以适当的细胞数培养。然后，使细胞在包含10％fbs的dmem(分化用培养基)板中没有空隙地生长，然后再培养2-3天。将培养基更换为包含分化诱导物质即胰岛素(5μg/ml)、地塞米松(dexamethasone)(0.25μm)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine)(0.5mm)的培养基，然后培养2-3天。将细胞培养基交换为只包含胰岛素(5μg/ml)的培养基，然后培养2至3天，并且交换为10％的fbs/dmem，再培养6至8
天(直至观察到细胞内充满脂肪的时间点)。抗肥胖效果物质在分化诱导前或分化诱导后根据实验目的进行了处理。将细胞培养基在10,000rpm下离心分离10分钟，用巴斯德吸管(pasteur pipette)获得上清液。将获得的上清液转移至板，在65℃下加热8分钟，使从细胞中释放的酶失活。最后，将甘油探针(glycerol probe)在220μl dmso中，将甘油酶混合物(glycerol enzyme mix)(cayman chemical,usa；item no.10010962)在分析用缓冲溶液(assay buffer)中溶解，然后遮光，在-20℃下保管至实验前。用990μl分析用缓冲溶液稀释10μl甘油标准溶液以制成1mm的甘油标准溶液，然后均匀混合，对每个孔各添加0、2、4、6、8、10μl，然后对每个孔添加分析用缓冲溶液并调至50μl。此处，对每个孔各添加50μl的试料(使酶失活的培养基)。对每个孔准备了包含46μl分析用缓冲溶液、2μl甘油探针、2μl甘油酶混合物的共50μl的反应混合液(reaction mix)。在包含标准溶液和试料的孔中各添加50μl反应混合液，均匀混合，然后遮光，在室温下放置30分钟。之后，在570nm处测量吸光度。此时，作为阳性对照群，处理了0.5ppm奥利司他(orlistat)，阳性对照群结果比阴性对照群增加160％。
[0116]
本实验是确认植物提取物激活多少中性脂肪分解的实验，实验结果是对甘油的量进行定量的。由于甘油是脂肪分解的副产物，因此甘油的数值越高，意味着抗肥胖效果越好。
[0117]
对各试料的实验结果示于下表中，当试验物质促进脂肪分解时，脂肪细胞中积累的中性脂质的量减少，甘油的释放量增加，因此甘油的释放量增加意味着中性脂质被分解那么多，并且可以确认试验物质具有抗肥胖效果。
[0118]
实验例4.免疫功能改善效果-脾脏细胞/巨噬细胞的γ干扰素(ifn-γ)生成测量
[0119]
为了确认根据植物提取物的免疫功能改善效果，测量了脾脏细胞和巨噬细胞中的干扰素-γ生成程度。首先，将巨噬细胞即thp-1细胞和自然杀伤细胞即nk-92细胞分别悬浮在rpmi(罗斯威尔公园纪念研究所，roswell park memorial institute)-1640培养基(thp-1细胞用)和mema(最低必需培养基α，minimum essential media alpha)培养基(nk-92细胞用)中并分株于培养板(24孔/96孔，24well/96well)。将按浓度稀释的植物提取物(试料)分株于分株的细胞。此时，作为阳性对照群，使用了lps(脂多糖，lipopolysaccharide)(0.1-1μg/ml)。然后，将处理有试料的细胞放入37℃、5％co2培养器中，培养24至48小时，然后取上清液用作分析试料。
[0120]
实验利用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immumosorbent assay,elisa)方法进行分析。在96孔板中放入ifn-γ一抗并进行包被(coating)，然后放入1％的bsa(牛血清白蛋白，bovine serum albumin)，对剩余空间进行封闭(blocking)。之后，将蒸馏水(空白，blank)、ifn-γ标准液、试料分别各放入100μl，在室温下反应2小时。各放入100μl与生物素结合的ifn-γ二抗，在室温下反应2小时。各放入100μl与抗生物素蛋白结合的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，hrp)并在室温或37℃下反应30分钟。各放入100μl tmb底物溶液并在室温下反应4-14分钟。各放入50μl终止溶液(stop solution)(硫酸)终止反应。利用酶联免疫检测仪(elisa reader)在450nm波长处测量吸光度。与标准液的吸光度进行比较，计算试料的ifn-γ含量。
[0121]
本实验是确认植物提取物增加多少γ干扰素的实验，实验结果是对γ干扰素的量进行定量的。γ干扰素的数值越高，意味着免疫功能改善效果越好。
[0122]
对各试料的实验结果示于下表中，由于吸光度越高意味着ifn-γ含量越高，因此
如果ifn-γ生成增加，则可以解释为对增强免疫力有效果，例如增强t淋巴细胞的分化、激活巨噬细胞、促进b细胞中的igg抗体生成。
[0123]
实验例5.女性更年期改善效果-竞争性雌激素受体配体结合分析
[0124]
为了确认根据植物提取物的女性更年期改善效果，分析了配体对雌激素受体(er)的竞争性结合程度。首先，将10μl[3h]-e2(17β-雌二醇)与50μl大鼠子宫胞液(rat uterine cytosol)和230μl 50mm的tris缓冲液(ph 7.4)混合，然后在筒辊(drum roller)中与10μl按浓度稀释的植物提取物反应(在4℃下孵育20小时)。反应结束后，放入750μl冷的60％羟基磷灰石(hydroxylapatite,hap)，每隔5分钟涡旋(vortexing)10秒，同时置于冰上20分钟，然后在4℃下以600g离心分离5分钟以分离游离配体(free ligand)和结合配体(bound ligand)。此时，游离配体是指不与[3h]-e2或植物提取物结合的er，结合配体是指与[3h]-e2或植物提取物结合的er，hap吸附于上述结合配体并用于分离游离配体和结合配体。然后，将分离出的结合配体(团粒，pellet)用2ml 50mm的tris缓冲液洗涤(washing)三次，放入2ml 4℃的乙醇，每隔5分钟涡旋10秒，同时置于冰上15分钟，然后在4℃下以600g离心分离10分钟。通过上述过程，[3h]-e2溶于乙醇中，其余全部沉淀成团粒(pellet)，从而提取由放射线同位素标记(radiolabeled)的e2([3h]-e2)。然后，将上清液内提取的[3h]-e2(上清液)倒入装有10ml闪烁液(scintillation cocktail)的小瓶中。之后，用β-计数器测量小瓶中包含的放射能(radioactivity)，可以确认植物提取物妨碍由放射性同位素标记的e2([3h]-e2)的雌激素受体结合力的程度，由此可以确认植物提取物与雌激素受体的结合能力。将代替植物提取物而放入0.03nm、0.1nm、0.33nm、1nm、10nm和100nm的未标记的e2(雌二醇)的群的结果作为标准曲线使用。
[0125]
本实验是确认植物提取物激活多少女性荷尔蒙即雌激素信号的实验，实验结果是对与雌激素受体的结合能力进行定量的。与雌激素结合得越好，意味着女性更年期改善效果越好。
[0126]
对各试料的实验结果示于下表中，由测量的放射能值计算雌激素受体(er)的浓度。
[0127]
实验例6.抗过敏效果-ige分泌测量
[0128]
为了确认根据植物提取物的抗过敏效果，测量了免疫球蛋白e的分泌量。首先，将u266细胞在10％的fbs rpmi1640培养基中培养3天，同时处理试验物质。试验物质处理3天后，回收培养基(细胞培养液)。将ige捕获抗体放入板中并放置一天。用2％的bsa对板进行封闭。将回收的培养基(细胞培养液)放入板中并摇晃混合。将ige检测抗体放入板中并摇晃混合。将链霉亲和素(streptavidin)-hrp放入板中，遮光后摇晃混合。将底物放入板中，遮光后摇晃混合至变成蓝色。确认颜色发生变化后，将2n的硫酸溶液放入板中，摇晃混合至变成黄色。在450nm和570nm处测量吸光度，然后用从450nm吸光度减去570nm吸光度的值对结果进行分析。此时，作为阳性对照群，处理了地塞米松1μm，其结果显示出32％的抑制效果，处理0.1μm氢化可的松(hydrocortisone)的结果，显示出35％的抑制效果。
[0129]
本实验是确认植物提取物抑制多少引起过敏的ige的实验，实验结果是对ige的量进行定量的。ige的数值越低，意味着抗过敏效果越好。
[0130]
对各试料的实验结果示于下表中，由于ige引起免疫超敏症，因此如果ige分泌量减少，则可以确认过敏得到改善。
[0131]
实验例7.血糖调节效果-葡萄糖吸收(glucose uptake)测量(2-nbdg法)
[0132]
为了确认根据植物提取物的血糖调节效果，测量了处理植物提取物的细胞的葡萄糖吸收能力。首先，将c2c12细胞以1
×
104个细胞/孔浓度铺在96孔培养板上，然后如果在24小时内达到亚汇合(subconfluence)状态，则开始实验。
[0133]
[注意事项]
[0134]
实验应在细胞接种后48小时内进行。当孵育时间增加而细胞填满，或者细胞数太少时，难以获得准确的数据。
[0135]
如果达到亚汇合状态，则去除培养基，然后将各孔更换为包含或(对照群用)不包含10μm的2-nbdg的100μl的新鲜培养基。此时，将要评价的试验物质一起放入并处理于细胞。处理1小时后，用预冷的pbs(pre-cold pbs)洗涤孔2次，收集各孔的细胞，重悬在200μl预冷的培养基中，用1μg/ml的pi(碘化丙啶，propidium iodine)对核进行染色。
[0136]
[注意事项]
[0137]
核染色后，必须在4℃下保管至通过荧光活化细胞分选(facs)进行测量，并且最好在30分钟内开始测量。
[0138]
通过facs测量20秒左右，收集2000个左右的单个细胞事件(event)结果并进行统计分析。此时，作为阳性对照群，处理了1mm二甲双胍，其结果显示出180％增加效果。
[0139]
本实验是确认植物提取物增加多少细胞内葡萄糖吸收的实验，实验结果是对向细胞内的葡萄糖吸收量进行定量的。即，向细胞内的葡萄糖吸收越增加，意味着血糖调节效果越好。
[0140]
对各试料的实验结果示于下表中，测量荧光强度(fluorescence intensity)，判断数值越增加，葡萄糖吸收(glucose uptake)越增加，并且如果葡萄糖吸收增加，则血液中的葡萄糖数值减少，因此可以确认糖尿病得到改善。
[0141]
实验例8.认知功能改善效果-β-分泌酶(β-secretase)活性测量
[0142]
为了确认根据植物提取物的认知功能改善效果，测量了处理植物提取物的β-分泌酶的活性。首先，准备了实验所需的试剂和溶剂：
[0143]
1)bace(β-分泌酶裂解酶)分析缓冲液(50mm的乙酸钠，ph 4.5)
[0144]
2)bace1酶(1单位/ml)
[0145]
3)bace1底物(750nm的rh-evnldaefk-quencher)：40μl+bace1分析缓冲液3960μl，制备后24小时内使用
[0146]
4)终止溶液(2.5m的乙酸钠)
[0147]
2.将10μl分析缓冲液、10μl bace1底物、β-分泌酶(β-secretase)酶(1单位/ml)、10μl试验物质放入black 96-微孔板中。
[0148]
[注意事项]
[0149]
试验物质按浓度制备并使用。此时，使用了分析缓冲液。
[0150]
在ex 545nm/ex 585nm处测量荧光强度，然后在室温下反应1小时。
[0151]
[注意事项]
[0152]
为了阻断光，用箔包裹板。
[0153]
添加10μl终止溶液停止反应。用ex 545/em 585nm波长测量荧光强度。测量的荧光强度用下面的一般式计算。
[0154]
[一般式]
[0155]
抑制率(inhibition)(％)＝[1-{(s-s0)/(c-c0)}x100
[0156]
c＝对照群(control)处理60分钟后的荧光强度，
[0157]
c0＝对照群处理前(处理第0分钟)的荧光强度，
[0158]
s＝试料(sample)处理60分钟后的荧光强度，
[0159]
s0＝试料处理前(处理第0分钟)的荧光强度
[0160]
本实验是确认植物提取物抑制多少β分泌酶活性的实验，实验结果是对β分泌酶的活性进行定量的。β分泌酶的活性越低，意味着认知功能改善效果越好。
[0161]
对各试料的实验结果示于下表中，β-分泌酶通过切断app氨基酸末端生成降低认知功能的β-淀粉样蛋白，因此如果其活性减少，则可以确认认知功能得到改善。
[0162]
实验例9.肝健康改善效果-肝细胞存活率测量
[0163]
为了确认根据植物提取物的肝健康改善效果，测量了处理植物提取物的肝细胞的存活率。首先，利用10％的fbs dmem培养基，在37℃、5％co2大气的条件下培养hepg2细胞。然后，将hepg2细胞以3x105个细胞/孔分取到24-孔板中并培养一天。按浓度处理试验物质后，培养24小时。
[0164]
[注意事项]
[0165]
处理试验物质时，在孔中必须汇合(confluence)有70％至80％左右的细胞。
[0166]
将以5mg/ml溶于pbs中的mtt溶液稀释使得达到培养液的10％。在24-孔板中分株使得达到0.5至1.0ml。在培养器中培养4小时。
[0167]
[注意事项]
[0168]
mtt溶液对光敏感，因此板用箔包裹并孵育。
[0169]
孵育4小时后，去除包含mtt溶液的培养液，放入1ml dmso，摇晃混合10分钟。然后，在540nm处测量吸光度。此时，作为阳性对照群，分别处理了
①
乙醇100mm和
②
乙醇100mm+水飞蓟素100ppm，处理
①
乙醇100mm的结果肝细胞存活率减少31％，处理
②
乙醇100mm+水飞蓟素100ppm的结果肝细胞存活率恢复86％。
[0170]
本实验是确认植物提取物恢复多少因酒精(乙醇)处理而减少的肝细胞存活率的实验，实验结果是对肝细胞存活率进行定量的。即，肝细胞存活率越高，意味着肝健康改善效果越好。
[0171]
对各试料的实验结果示于下表中，吸光度值越高，肝细胞存活率越高，因此可以认为对改善肝健康带来积极效果。
[0172]
实验例10.男性更年期改善效果-雄激素受体(androgen receptor)转录活性测量
[0173]
为了确认根据植物提取物的男性更年期改善效果，测量了雄激素受体的转录活性。具体地，利用插入有are报告基因质粒的lncap细胞株进行实验。首先，利用10％的fbs dmem培养基在37℃、5％co2大气的条件下培养细胞。其后，将细胞转移至板并培养2天，然后处理试验物质。试验物质处理一天后，放入底物以测量荧光素酶的活性。
[0174]
本实验是确认植物提取物激活多少男性荷尔蒙即雄激素信号的实验，实验结果是对雄激素受体的转录活性进行定量的。即，雄激素受体的转录活性越高，意味着男性更年期改善效果越好。
[0175]
对各试料的实验结果示于下表中，雄激素受体对男性荷尔蒙的作用起重要作用，因此如果该受体的活性提高，则可以确认可以缓解男性更年期症状。
[0176]
实施例1.岛蓟
[0177]
[表1]
[0178][0179]
[表2]
[0180]
[0181]
实施例2.沙参
[0182]
[表3]
[0183][0184]
[表4]
[0185]
[0186]
实施例3.毛果一枝黄花
[0187]
[表5]
[0188][0189]
[表6]
[0190][0191]
实施例4.假升麻
[0192]
[表7]
[0193][0194]
[表8]
[0195][0196]
实施例5.格兰尼紫菀
[0197]
[表9]
[0198][0199]
[表10]
[0200][0201]
实施例6.茖葱
[0202]
1)茖葱(allium victoriallis)
[0203]
[表11]
[0204][0205]
[表12]
[0206][0207]
2)山葱(allium ulleungense)
[0208]
[表13]
[0209][0210]
[表14]
[0211][0212]
实施例7.山韭
[0213]
[表15]
[0214][0215]
[表16]
[0216][0217]
实施例8.七灶花楸
[0218]
[表17]
[0219][0220]
[表18]
[0221][0222]
实施例9.日本地椒
[0223]
[表19]
[0224][0225]
[表20]
[0226][0227]
实施例10.峨参
[0228]
[表21]
[0229][0230]
[表22]
[0231][0232]
实施例11.虎杖根
[0233]
[表23]
[0234][0235]
[表24]
[0236][0237]
实施例12.色木槭
[0238]
[表25]
[0239][0240]
[表26]
[0241]
[0242]
实施例13.尖头蹄盖蕨
[0243]
[表27]
[0244][0245]
[表28]
[0246]
[0247]
实施例14.山嵛菜
[0248]
[表29]
[0249][0250]
[表30]
[0251]
[0252]
实施例15.黄栝楼
[0253]
[表31]
[0254][0255]
[表32]
[0256]
[0257]
实施例16.丰岛玉竹
[0258]
[表33]
[0259][0260]
[表34]
[0261]
[0262]
实施例17.菱叶常春藤
[0263]
[表35]
[0264][0265]
[表36]
[0266]
[0267]
实施例18.于山堇菜
[0268]
[表37]
[0269][0270]
[表38]
[0271]
[0272]
实施例19.韩国风铃草
[0273]
[表39]
[0274][0275]
[表40]
[0276]
[0277]
实施例20.竹叶百合
[0278]
[表41]
[0279][0280]
[表42]
[0281]
[0282]
实施例21.岛生穗花
[0283]
[表43]
[0284][0285]
[表44]
[0286]
[0287]
实施例22.大唐米
[0288]
[表45]
[0289][0290]
[表46]
[0291]
[0292]
实施例23.牛繁缕
[0293]
[表47]
[0294][0295]
[表48]
[0296]
[0297]
实施例24.鱼腥草
[0298]
[表49]
[0299][0300]
[表50]
[0301]
[0302]
实施例25.岛生獐耳细辛
[0303]
[表51]
[0304][0305]
[表52]
[0306]
[0307]
实施例26.钩柱毛茛
[0308]
[表53]
[0309][0310]
[表54]
[0311]
[0312]
实施例27.悬铃叶苎麻
[0313]
[表55]
[0314][0315]
[表56]
[0316]
[0317]
实施例28.长萼瞿麦
[0318]
[表57]
[0319][0320]
[表58]
[0321]
[0322]
实施例29.皱叶酸模
[0323]
[表59]
[0324][0325]
[表60]
[0326]
[0327]
实施例30.小连翘
[0328]
[表61]
[0329][0330]
[表62]
[0331]
[0332]
实施例31.绞股蓝
[0333]
[表63]
[0334][0335]
[表64]
[0336]
[0337]
实施例32.老鼠拉冬瓜
[0338]
[表65]
[0339][0340]
[表66]
[0341]
[0342]
实施例33.岛生筷子芥
[0343]
[表67]
[0344][0345]
[表68]
[0346]
[0347]
实施例34.钻果大蒜芥
[0348]
[表69]
[0349][0350]
[表70]
[0351]
[0352]
实施例35.杜鹃
[0353]
[表71]
[0354][0355]
[表72]
[0356]
[0357]
实施例36.喜冬草
[0358]
[表73]
[0359][0360]
[表74]
[0361]
[0362]
实施例37.紫金牛
[0363]
[表75]
[0364][0365]
[表76]
[0366]
[0367]
实施例38.滨海珍珠菜
[0368]
[表77]
[0369][0370]
[表78]
[0371]
[0372]
实施例39.藤绣球
[0373]
[表79]
[0374][0375]
[表80]
[0376]
[0377]
实施例40.垂盆草
[0378]
[表81]
[0379][0380]
[表82]
[0381]
[0382]
实施例41.竹岛景天
[0383]
[表83]
[0384][0385]
[表84]
[0386]
[0387]
实施例42.黄水枝
[0388]
[表85]
[0389][0390]
[表86]
[0391]
[0392]
实施例43.委陵菜
[0393]
[表87]
[0394][0395]
[表88]
[0396]
[0397]
实施例44.紫穗槐
[0398]
[表89]
[0399][0400]
[表90]
[0401]
[0402]
实施例45.截叶铁扫帚
[0403]
[表91]
[0404][0405]
[表92]
[0406]
[0407]
实施例46.紫花苜蓿
[0408]
[表93]
[0409][0410]
[表94]
[0411]
[0412]
实施例47.黑龙江野豌豆
[0413]
[表95]
[0414][0415]
[表96]
[0416]
[0417]
实施例48.千屈菜
[0418]
[表97]
[0419][0420]
[表98]
[0421][0422]
实施例49.南方露珠草
[0423]
[表99]
[0424][0425]
[表100]
[0426][0427]
实施例50.长籽柳叶菜
[0428]
[表101]
[0429][0430]
[表102]
[0431][0432]
实施例51.月见草
[0433]
[表103]
[0434][0435]
[表104]
[0436][0437]
实施例52.蔓金腰
[0438]
[表105]
[0439][0440]
[表106]
[0441][0442]
实施例53.大文字草
[0443]
[表107]
[0444][0445]
[表108]
[0446][0447]
实施例54.岛生野芝麻
[0448]
[表109]
[0449][0450]
[表110]
[0451][0452]
实施例55.岛生风箱果
[0453]
[表111]
[0454][0455]
[表112]
[0456][0457]
实施例56.岛生延胡索
[0458]
[表113]
[0459][0460]
[表114]
[0461][0462]
实施例57.岛生覆盆子
[0463]
[表115]
[0464][0465]
[表116]
[0466][0467]
实施例58.郁陵芹
[0468]
[表117]
[0469][0470]
[表118]
[0471][0472]
实施例59.岛生堇菜
[0473]
[表119]
[0474][0475]
[表120]
[0476][0477]
实施例60.冬青卫矛
[0478]
[表121]
[0479][0480]
[表122]
[0481][0482]
实施例61.紫葛葡萄
[0483]
[表123]
[0484][0485]
[表124]
[0486][0487]
实施例62.长白楤木
[0488]
[表125]
[0489][0490]
[表126]
[0491][0492]
实施例63.楤木
[0493]
[表127]
[0494][0495]
[表128]
[0496][0497]
实施例64.八角金盘
[0498]
[表129]
[0499][0500]
[表130]
[0501][0502]
实施例65.女萎
[0503]
[表131]
[0504][0505]
[表132]
[0506][0507]
实施例66.白英
[0508]
[表133]
[0509][0510]
[表134]
[0511][0512]
实施例67.打碗花
[0513]
[表135]
[0514][0515]
[表136]
[0516][0517]
实施例68.肾叶打碗花
[0518]
[表137]
[0519][0520]
[表138]
[0521][0522]
实施例69.紫珠
[0523]
[表139]
[0524][0525]
[表140]
[0526][0527]
实施例70.藿香
[0528]
[表141]
[0529][0530]
[表142]
[0531][0532]
实施例71.风轮菜
[0533]
[表143]
[0534][0535]
[表144]
[0536][0537]
实施例72.宝盖草
[0538]
[表145]
[0539][0540]
[表146]
[0541][0542]
实施例73.益母草
[0543]
[表147]
[0544][0545]
[表148]
[0546][0547]
实施例74.长梗亚欧唐松草
[0548]
[表149]
[0549][0550]
[表150]
[0551][0552]
实施例75.红蕾荚蒾
[0553]
[表151]
[0554][0555]
[表152]
[0556][0557]
实施例76.白屈菜
[0558]
[表153]
[0559][0560]
[表154]
[0561][0562]
实施例77.扫帚菊
[0563]
[表155]
[0564][0565]
[表156]
[0566][0567]
实施例78.大吴风草
[0568]
[表157]
[0569][0570]
[表158]
[0571][0572]
实施例79.旋覆花
[0573]
[表159]
[0574][0575]
[表160]
[0576][0577]
实施例80.蜂斗菜
[0578]
[表161]
[0579][0580]
[表162]
[0581][0582]
实施例81.狐尾薹草
[0583]
[表163]
[0584][0585]
[表164]
[0586][0587]
实施例82.青绿薹草
[0588]
[表165]
[0589][0590]
[表166]
[0591][0592]
实施例83.紫芒
[0593]
[表167]
[0594][0595]
[表168]
[0596][0597]
实施例84.狼尾草
[0598]
[表169]
[0599][0600]
[表170]
[0601][0602]
实施例85.矢竹
[0603]
[表171]
[0604][0605]
[表172]
[0606][0607]
实施例86.岛生箬竹
[0608]
[表173]
[0609][0610]
[表174]
[0611][0612]
实施例87.苦参
[0613]
[表175]
[0614][0615]
[表176]
[0616][0617]
实施例88.萱草
[0618]
[表177]
[0619][0620]
[表178]
[0621][0622]
实施例89.卷丹
[0623]
[表179]
[0624][0625]
[表180]
[0626][0627]
实施例90.阔叶山麦冬
[0628]
[表181]
[0629][0630]
[表182]
[0631][0632]
实施例91.北方舞鹤草
[0633]
[表183]
[0634][0635]
[表184]
[0636][0637]
实施例92.日本柳杉
[0638]
[表185]
[0639][0640]
[表186]
[0641][0642]
实施例93.红楠
[0643]
[表187]
[0644][0645]
[表188]
[0646][0647]
实施例94.日本五针松
[0648]
[表189]
[0649][0650]
[表190]
[0651][0652]
实施例95.铁杉
[0653]
[表191]
[0654][0655]
[表192]
[0656][0657]
实施例96.舟山新木姜子
[0658]
[表193]
[0659][0660]
[表194]
[0661][0662]
实施例97.交让木
[0663]
[表195]
[0664][0665]
[表196]
[0666][0667]
实施例98.糙叶树
[0668]
[表197]
[0669][0670]
[表198]
[0671][0672]
实施例99.狭叶朴
[0673]
[表199]
[0674][0675]
[表200]
[0676][0677]
实施例100.裂叶榆
[0678]
[表201]
[0679][0680]
[表202]
[0681][0682]
实施例101.深山桤木
[0683]
[表203]
[0684][0685]
[表204]
[0686][0687]
实施例102.岛生椴
[0688]
[表205]
[0689][0690]
[表206]
[0691][0692]
实施例103.玉铃花
[0693]
[表207]
[0694][0695]
[表208]
[0696][0697]
实施例104.岛生樱
[0698]
[表209]
[0699][0700]
[表210]
[0701][0702]
实施例105.洒金桃叶珊瑚
[0703]
[表211]
[0704][0705]
[表212]
[0706][0707]
实施例106.岛生槭
[0708]
[表213]
[0709][0710]
[表214]
[0711][0712]
实施例107.岛生黄檗
[0713]
[表215]
[0714][0715]
[表216]
[0716][0717]
实施例108.樗叶花椒
[0718]
[表217]
[0719][0720]
[表218]
[0721][0722]
实施例109.日本女贞
[0723]
[表219]
[0724][0725]
[表220]
[0726][0727]
实施例110.岛生忍冬
[0728]
[表221]
[0729][0730]
[表222]
[0731][0732]
实施例111.粗齿绣球
[0733]
[表223]
[0734][0735]
[表224]
[0736][0737]
制剂例1：药学制剂的制备
[0738]
1.散剂的制备
[0739]
植物提取物0.001g
[0740]
乳糖1g
[0741]
将上述成分混合并填充在气密布中以制备散剂。
[0742]
2.片剂的制备
[0743]
植物提取物0.2mg
[0744]
玉米淀粉100mg
[0745]
乳糖100mg
[0746]
硬脂酸镁2mg
[0747]
将上述成分混合后，根据常规的片剂的制备方法进行打锭以制备片剂。
[0748]
3.胶囊剂的制备
[0749]
植物提取物0.2mg
[0750]
玉米淀粉100mg
[0751]
乳糖100mg
[0752]
硬脂酸镁2mg
[0753]
将上述成分混合后，根据常规的胶囊剂的制备方法填充在明胶胶囊中以制备胶囊剂。
[0754]
4.丸的制备
[0755]
植物提取物0.003g
[0756]
乳糖1.5g
[0757]
甘油1g
[0758]
木糖醇0.5g
[0759]
将上述成分混合后，根据常规的方法制备成每1个丸4g。
[0760]
5.颗粒的制备
[0761]
植物提取物2mg
[0762]
大豆提取物50mg
[0763]
葡萄糖200mg
[0764]
淀粉600mg
[0765]
将上述成分混合后，添加100mg 30％乙醇，在60℃下干燥并形成颗粒，然后填充在布中。
[0766]
制剂例2：食品的制备
[0767]
如下制备本发明的包含植物提取物的食品。
[0768]
1.面粉食品的制备
[0769]
将0.05～1.0重量份的上述植物提取物添加到面粉中，利用该混合物制备面包、蛋糕、饼干、薄脆饼干和面类，从而制备健康食品。
[0770]
2.乳制品(dairy products)的制备
[0771]
将0.2重量份的上述植物提取物添加到牛奶中，利用上述牛奶制备诸如黄油和冰淇淋等多种乳制品。
[0772]
3.禅食的制备
[0773]
将玄米、大麦、糯米、薏米通过公知的方法α化并干燥，然后用粉碎机制备成粒度60
目(mesh)的粉末。将黑豆、黑芝麻、紫苏也通过公知的方法蒸煮并干燥，然后用粉碎机制备成粒度60目的粉末。将上述植物提取物在真空浓缩器中减压浓缩，用喷雾、热风干燥机干燥以获得干燥物，将该干燥物用粉碎机粉碎成粒度60目，从而获得干燥粉末。
[0774]
将上述制备的谷物类、种实类和植物提取物的干燥粉末相对于100重量份的混合粉末按以下比例配制来制备。
[0775]
谷物类(玄米30重量份、薏米15重量份、大麦20重量份)，
[0776]
种实类(紫苏7重量份、黑豆8重量份、黑芝麻7重量份)，
[0777]
植物提取物(0.1重量份)，
[0778]
灵芝(0.5重量份)，
[0779]
地黄(0.5重量份)
[0780]
制剂例3：饮料的制备
[0781]
1.健康饮料的制备
[0782]
植物提取物0.1mg
[0783]
柠檬酸1000mg
[0784]
低聚糖100g
[0785]
梅子浓缩液2g
[0786]
牛磺酸1g
[0787]
添加纯化水，总体900ml
[0788]
根据常规的健康饮料制备方法，将上述成分混合后，在85℃下搅拌加热约1小时，然后将制得的溶液过滤并获取在无菌2l容器中，密封灭菌后冷藏保管，然后用于制备本发明的健康饮料组合物。
[0789]
虽然上述组成比以比较适合于喜好饮料的成分为优选实施例混合组成，但是根据需求阶层、需求国家、使用用途等地区性、民族性喜好度，对其配制比实施任意变形也无妨。
[0790]
2.蔬菜汁的制备
[0791]
将1g本发明的植物提取物添加到1,000ml番茄或胡萝卜汁中以制备用于增强健康的蔬菜汁。
[0792]
3.果汁的制备
[0793]
将1g植物提取物添加到1,000ml苹果或葡萄汁中以制备用于增强健康的果汁。