人抗TSLP抗体的配制品及治疗炎性疾病的方法与流程

人抗tslp抗体的配制品及治疗炎性疾病的方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求于2020年2月13日提交的美国临时专利申请号62/976,007和于2021年2月10日提交的美国临时专利申请号63/148,105的权益，这些申请的披露内容通过引用以其整体并入本文。
技术领域
3.本披露涉及人抗tslp单克隆抗体，包括泰派鲁单抗(tezepelumab)的高浓度水性配制品及其生物类似物(biosimilar)。
4.通过引用并入以电子方式提交的材料
5.通过引用整体并入的是与本文同时提交的计算机可读核苷酸/氨基酸序列表，其鉴定如下：9911字节ascii(文本)文件名称“54250_seqlisting.txt”；创建于2021年2月11日。


背景技术：

6.相关技术
7.在最近的2期、随机、双盲、安慰剂对照的临床试验中，将泰派鲁单抗(也称为amg 157和med9929)以范围为70mg至280mg的剂量施用于人。与接受安慰剂的受试者相比，接受泰派鲁单抗的受试者表现出更低的临床上显著的哮喘恶化率。
8.药物配制品中蛋白质浓度的增加会引起问题。例如，包含高浓度蛋白质的配制品可导致聚集，从而导致形成高分子量物质(hmws)。hmws在一些蛋白质配制品中可能特别令人关注。聚集还可能潜在地影响治疗性蛋白质的皮下生物利用度和药代动力学，并且还可能导致蛋白质的生物活性丧失和免疫原性增加。高浓度蛋白质配制品可能导致粘度升高，这可能会对药物产品的填充和施用产生不利影响。
9.因此，在本领域中需要具有降低的粘度、高稳定性和低聚集水平的泰派鲁单抗的高浓度配制品。


技术实现要素：

10.本文首次提供了证明某些赋形剂对高浓度抗体配制品的降低粘度作用的数据。数据支持碱性氨基酸或其盐以及钙盐或镁盐的降低粘度作用。数据也支持这种高浓度抗体配制品的稳定性。
11.因此，本披露提供了组合物，例如水性组合物，其包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种碱性氨基酸或其盐。还考虑了水性组合物，其包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种碱性氨基酸或其盐，其中该组合物包含约10mm至约200mm的碱性氨基酸或其盐。在示例性实例中，该碱性氨基酸是精氨酸。任选地，该盐是精氨酸的有机盐。在多个方面，该精氨酸盐是精氨酸乙酸盐、精氨酸天冬氨酸盐、精氨酸谷氨酸盐、精氨酸乙醇酸盐、精氨酸乳酸盐、精氨酸甲磺酸
盐、精氨酸丙酸盐、或其组合。在示例性实例中，该碱性氨基酸是组氨酸。任选地，该盐是组氨酸的有机盐。在示例性方面，该组氨酸盐是组氨酸乙酸盐、组氨酸天冬氨酸盐、组氨酸谷氨酸盐、组氨酸乙醇酸盐、组氨酸乳酸盐、组氨酸甲磺酸盐、组氨酸丙酸盐、或其组合。在不同情况下，该碱性氨基酸是赖氨酸。任选地，该盐是赖氨酸的有机盐。在多个方面，该赖氨酸盐是赖氨酸乙酸盐、赖氨酸天冬氨酸盐、赖氨酸谷氨酸盐、赖氨酸乙醇酸盐、赖氨酸乳酸盐、赖氨酸甲磺酸盐、赖氨酸丙酸盐、或其组合。
12.本披露还提供了组合物，例如水性组合物，其包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种钙盐或镁盐。还考虑了水性组合物，其包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种钙盐或镁盐，其中该组合物包含约15mm至约150mm的钙盐或镁盐。在示例性方面，该钙盐或镁盐包含缺失氯化物的反离子。任选地，该反离子是乙酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、丙酸盐、或其组合。在多个方面，该钙盐是乙酸钙、天冬氨酸钙、谷氨酸钙、乙醇酸钙、乳酸钙、甲磺酸钙、丙酸钙、或其组合。在示例性实例中，该镁盐是乙酸镁、天冬氨酸镁、谷氨酸镁、乙醇酸镁、乳酸镁、甲磺酸镁、丙酸镁或其组合。在不同情况下，本披露的组合物包含约50mm至约150mm碱性氨基酸或其盐或约50mm至约150mm钙盐或镁盐。
13.在多个方面，本披露的组合物进一步任选地以约50mm至约150mm、或约50mm至约250mm的量包含n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、或钙盐。在多个方面，本披露的组合物包含(i)精氨酸盐和(ii)nar和/或甲硫氨酸。在多个方面，该精氨酸盐是精氨酸谷氨酸盐。在不同情况下，本披露的组合物包含(i)钙盐和(ii)nar和/或甲硫氨酸。在示例性方面，该钙盐是谷氨酸钙。在示例性方面，本披露的组合物以约160mg/ml至约250mg/ml，任选地约160mg/ml至约225mg/ml，例如约170mg/ml至约200mg/ml，任选地约175mg/ml至约185mg/ml，例如180mg/ml的浓度包含抗tslp抗体。在示例性实例中，本披露的组合物具有约4.5至约6.75，任选地约4.8至约6.0的ph。在示例性方面，本披露的组合物在23℃、1000s-1
的粘度小于100cp，任选地，在23℃、1000s-1
小于75cp，例如小于60cp或小于50cp。
14.在示例性实例中，本披露的组合物包含两亲性的和/或非离子性的表面活性剂。在多个方面，该表面活性剂是聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80或其混合物。任选地，该表面活性剂以小于或约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)的浓度存在，任选地约0.010％(w/v)
±
0.0025％(w/v)的表面活性剂，例如约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)的表面活性剂。
15.在多种实施例中，该水性组合物包含25-190mm的精氨酸碱和25-200mm的谷氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含140mm精氨酸碱和150mm谷氨酸。在多种实施例中，包含精氨酸和谷氨酸盐的水性组合物包含从0至250mm的脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含80mm精氨酸碱、85mm谷氨酸和100mm l-脯氨酸。在多种实施例中，包含精氨酸和谷氨酸盐和任选地脯氨酸的水性组合物包含0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含140mm精氨酸碱、150mm谷氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含80mm精氨酸碱、85mm谷氨酸、100mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。
16.在多种实施例中，该水性组合物包含10-125mm的精氨酸碱和25-225mm的谷氨酸。
在多种实施例中，该水性组合物包含95mm精氨酸碱和170mm谷氨酸。在多种实施例中，包含精氨酸和谷氨酸盐的水性组合物包含从0至220mm的脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含50mm精氨酸碱、95mm谷氨酸和85mm l-脯氨酸。在多种实施例中，包含精氨酸和谷氨酸盐的水性组合物包含0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含95mm精氨酸碱、170mm谷氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含50mm精氨酸碱、95mm谷氨酸、85mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。
17.在多种实施例中，该水性组合物包含15-130mm的钙和30-300mm的谷氨酸盐。在多种实施例中，该水性组合物包含100mm钙和230mm谷氨酸盐。在多种实施例中，包含钙和谷氨酸盐的水性组合物包含从0至250mm的脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含60mm钙、140mm谷氨酸盐和70mm l-脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含15-195mm的钙和25-320mm的谷氨酸盐。在多种实施例中，该水性组合物包含110mm钙和240mm谷氨酸盐。在多种实施例中，该水性组合物包含从0至220mm的脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含70mm钙、145mm谷氨酸盐和60mm l-脯氨酸。在多种实施例中，包含钙和谷氨酸盐的水性组合物包含0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含100mm钙、230mm谷氨酸盐、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含60mm钙、140mm谷氨酸盐、70mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含110mm钙、240mm谷氨酸盐、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在多种实施例中，该水性组合物包含70mm钙、145mm谷氨酸盐、60mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。
18.在多种实施例中，本文所述的水性组合物具有约4.5至约6.75的ph。在多种实施例中，该水性组合物具有约4.7至约6.0的ph。在多种实施例中，该水性组合物具有约5.1至约5.7的ph。在多种实施例中，该水性组合物具有约4.7至约5.3的ph。在多种实施例中，本文所述的水性组合物具有约4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6或5.7的ph。
19.在不同情况下，该组合物是等渗的或者具有处于约200mosm/kg至约500mosm/kg、或约225mosm/kg至约400mosm/kg、或约250mosm/kg至约350mosm/kg范围内的渗透压。任选地，该组合物是等渗的或者具有大于约350mosm/kg的渗透压。
20.在示例性实例中，该组合物适合于在25℃、30℃、或在40℃下短期储存或者在约-30℃或约2℃至约8℃下长期储存。例如，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在2℃至8℃下储存6个月后，小于0.5％的治疗性蛋白质被降解，任选地，其中该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在不同情况下，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存至少或约12个月后，小于约5％的抗体被降解。在多个方面，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存约20个月至约26个月后，小于约5％的抗体被降解。在示例性实例中，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存约30至约40个月后，小于约5％的抗体被降解。在示例性实例中，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存约2年至约3年后，小于约5％的抗体被降解。还例如，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月后，小于5％的抗体被降解，任选地，其中在2℃至8℃下储存24个月或36个月后，小于2％的抗体被降解。在多个方面，如通过sec确定的，在约室温(例如25℃)下储存至少2周之后(任选地，至少1个月之后、至少2个月之后、至少3个月之后、至少4个月之后、至少5个月之后或至少6个月之后)，小于5％的抗体被降解。在不同情况下，如通过sec确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月，随后
在约室温(例如25℃)下储存至少2周或至少约1个月或至少约2个月之后，小于5％的抗体被降解。任选地，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在大于约20℃的温度下储存至少或约2周后，小于约5％的抗体被降解，任选地储存至少或约4周或约8周。在多个方面，该温度大于或为约25℃或者大于或为约30℃或者大于或为约40℃。
21.本文进一步提供了一种制品。在示例性实施例中，该制品包含本披露的组合物，任选地包含约1ml至约5ml(例如约1ml至约3ml)的水性组合物。
22.本文另外提供了一种预填充的注射器，该预填充的注射器包含本披露的组合物，任选地包含约1ml至约5ml(例如约1ml至约3ml)的组合物。
23.进一步提供了一种小瓶，该小瓶包含本披露的组合物，任选地包含约1ml至约5ml(例如约1ml至约3ml)的水性组合物。
24.还提供了含有本文所述的水性组合物的自动注射器。在多种实施例中，该自动注射器是ypsomed在多种实施例中，该自动注射器披露于wo 2018/226565、wo 2019/094138、wo 2019/178151、wo 20120/072577、wo 2020/081479、wo 2020/081480、pct/us 20/70590、pct/us 20/70591、pct/us 20/53180、pct/us 20/53179、pct/us 20/53178、或pct/us 20/53176。
25.本文提供了本披露的组合物在治疗炎性疾病中的用途。在示例性方面，该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(copd)、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)。任选地，该炎性疾病是特应性皮炎。任选地，该炎性疾病是copd。
26.本披露提供了用于治疗受试者炎性疾病的方法。在示例性实施例中，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本披露的组合物。在多个方面，该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(copd)、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)。任选地，该炎性疾病是特应性皮炎。任选地，该炎性疾病是copd。在不同情况下，通过皮下施用将本披露的组合物施用于受试者。在示例性实例中，将约1ml至约5ml(例如约1ml至约3ml)的水性组合物施用于受试者。
27.进一步提供了制备稳定的液体抗体组合物的方法，该组合物粘度小于约100cp并包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)碱性氨基酸或其盐、钙盐、镁盐、或其组合。在示例性实施例中，该方法包括：(i)将该抗体与水性溶液进行组合，该水性溶液包含约50mm至约150mm碱性氨基酸或其盐、钙盐、镁盐、或其组合，以及(ii)添加表面活性剂以达到约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)表面活性剂的终浓度。
28.根据以下详细描述的综述，结合附图，其他方面及优势对本领域普通技术人员将显而易见。尽管这些组合物、制品及方法易于应用于各种形式的实施例，但在理解本披露为说明性的而非意欲本发明受限于本文所述的特定实施例的情况下，以下描述包括特定实施例。关于本文所述的组合物、制品及方法，预期任选的特征，包括但不限于组分、其组成范围、取代基、条件及步骤，选自本文提供的各个方面、实施例及实例。
附图说明
29.图1是绘制了包含治疗性蛋白质的两种不同配制品的粘度(cp)随蛋白质浓度(mg/ml)变化的函数的图。
30.图2是包含指示的赋形剂(以100mm或150mm的指示的量)的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
31.图3是包含指示的赋形剂(以指示的量，60mm)的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约190mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
32.图4是包含一种或多种指示的赋形剂(以指示的量)的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。紧靠0.5％pvp的柱表示包含100mm乙酸钠和75mm精氨酸乙酸盐的配制品。说明的％是％(w/v)。
33.图5是包含一种或多种指示的赋形剂(以指示的量(mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
34.图6是包含指示的赋形剂(以指示的量(60mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约190mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
35.图7是包含指示的赋形剂(以指示的量(60mm))的两种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约190mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
36.图8是包含一种或多种指示的赋形剂(以指示的量(mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的蛋白质浓度、粘度、和ph的表。
37.图9a是包含指示的赋形剂(以指示的量(150mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
38.图9b是包含指示的赋形剂(以指示的量(90mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约195mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
39.图10是包含指示的赋形剂(以指示的量(mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
40.图11是包含指示的赋形剂(以指示的量(150mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
41.图12是包含指示的赋形剂(以指示的量(50mm-150mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
42.图13a是包含150mm精氨酸乙酸盐(以指示的ph(4.75-5.7))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照和包含150mm脯氨酸的配制品的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
43.图13b是包含60mm组氨酸乙酸盐(以指示的ph(5.5-6.5))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
44.图14是包含一种或多种指示的赋形剂(以指示的量(33mm-150mm))的几种不同的泰派鲁单抗配制品的粘度(cp)的图。还提供了不含赋形剂的对照物的粘度。每种配制品包含以约210mg/ml浓度的泰派鲁单抗。
45.图15a-15d显示了在应激条件下不同抗tslp配制品的尺寸排阻色谱(sec)分析：图15a，-30℃；图15b，5℃，图15c，25℃，图15d，40℃。
46.图16显示了在应激条件下不同抗tslp配制品的阳离子交换色谱(cex)分析(主峰％)。
47.图17显示了在6个月内各种存储条件下重链和轻链释放以及稳定性的rce-sds分析。
48.图18显示了在应激条件下不同抗tslp配制品的粘度。
具体实施方式
49.定义
50.提供以上描述仅为了清楚理解，而不应理解为无必要的限制，因为本发明范畴内的修改方案对本领域普通技术人员是显而易见的。
51.贯穿本说明书及以下权利要求书，除非上下文另有要求，否则单词“包含(comprise)”及变化形式如“包含(comprises和comprising)”应理解为隐含包括所陈述的整数或步骤或者整数或步骤的组，而不是排除任何其他整数或步骤或者整数或步骤的组。
52.贯穿本说明书，在组合物描述为包括组分或材料时，除非另外描述，否则预期这些组合物也可基本上由或由所叙述的组分或材料的任何组合组成。同样，在方法描述为包括特定步骤时，除非另外描述，否则预期这些方法也可基本上由或由所叙述的步骤的任何组合组成。本文中说明性地披露的本发明可在不存在本文中未明确披露的任何要素或步骤的情况下适当地实践。
53.本文中所披露的方法及其单个步骤的实践可人工和/或在电子设备辅助或由其提供的自动化下进行。虽然已参考特定实施例描述了诸多方法，但本领域普通技术人员应容易了解到，可使用执行与这些方法相关的动作的其他方式。例如，除非另外描述，否则可在不背离该方法的范畴或精神的情况下改变各步骤的顺序。另外，一些单个步骤可组合、省略或进一步再分成其他步骤。
54.除非另有说明，否则预期这些组合物和方法包括含有以下进一步描述的其他任选的要素、特征及步骤(包括附图中所示的那些)中的一或多种的任何组合的实施例。
55.在禁止对人体实施的方法赋予专利的管辖权方面，向人受试者“施用”组合物的含义应局限于规定人受试者将通过任何技术(例如经口、吸入、局部给予、注射、插入等)自我施用的受控物质。意欲最广泛的合理解释，其与限定可获得专利的主题的法律或法规一致。在不禁止对人体实施的方法赋予专利的管辖权方面，“施用”组合物包括对人体实施的方法
(ab)2、fv、单链抗体、双抗体)，包含前述各项的双互补位肽和重组肽(只要其展现所需生物活性即可)。
65.抗体片段包括抗体的抗原结合部分，尤其包括fab、fab'、f(ab')2、fv、域抗体(dab)、互补决定区(cdr)片段、cdr移植抗体、单链抗体(scfv)、单链抗体片段、嵌合抗体、双抗体、三抗体、四抗体、微型抗体、线性抗体；螯合重组抗体、三抗体或双抗体、胞内抗体、纳米抗体、小模块免疫药物(smip)、抗原结合域免疫球蛋白融合蛋白、单域抗体(包括骆驼化抗体)、含vhh抗体或其变体或衍生物，以及含有足够赋予对多肽的抗原特异性结合的免疫球蛋白的至少一部分(诸如一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr序列)的多肽，只要抗体保留所需生物活性即可。
[0066]“价数(valency)”是指靶向表位的各抗体或抗体片段上的抗原结合位点的数目。典型全长igg分子或f(ab)2是“二价”的，因为其具有两个相同的靶标结合位点。“单价”抗体片段，诸如f(ab)’或scfc，具有单个抗原结合位点。三价或四价抗原结合蛋白还可工程改造成多价。
[0067]
术语“单克隆抗体”是指自基本上均质的抗体群体(即构成该群体的个体抗体除可少量存在的天然存在的可能突变外均一致)获得的抗体。
[0068]
术语“抑制tslp活性”包括抑制以下任一者或多者：-[0069]-tslp结合其受体；
[0070]-在tslp存在下表达tslpr的细胞的增殖、活化或分化；
[0071]-在极化测定中在tslp存在下th2细胞因子产生的抑制；
[0072]-在tslp存在下树突状细胞活化或成熟；
[0073]-在tslp存在下肥大细胞细胞因子释放。
[0074]
参见，例如美国专利7982016b2的第6栏和实例8，以及us 2012/0020988 a1的实例7-10。
[0075]
术语“样品”或“生物样品”是指自受试者获得以用于本发明的方法中的样品，并且包括尿、全血、血浆、血清、唾液、痰液、组织切片、脑脊髓液、有活体外刺激的外周血单核细胞、无活体外刺激的外周血单核细胞、有活体外刺激的肠淋巴组织、无活体外刺激的肠淋巴组织、肠灌洗液、支气管肺泡灌洗液、鼻灌洗液和诱导的痰液。
[0076]
术语“治疗(treat、treating和treatment)”是指与本文所述的炎性病症有关的事件、疾病或病症的临床症状、表现或进展暂时或永久、部分或完全地消除、减少、压制或改善。如相关领域中所认识到，用作治疗剂的药物可降低既定疾病状态的严重度，但不必消除疾病的每种表现才被认为是有用治疗剂。类似地，预防性施用的治疗不必完全有效地预防病症发作才可成为可行的预防剂。仅仅降低疾病的影响(例如通过减少其症状的次数或降低其症状的严重度，或通过增加另一治疗的有效性，或通过产生另一有益作用)或降低疾病在受试者中发生或恶化的可能性即为足够。本披露的一个实施例涉及用于确定治疗功效的方法，该方法包括向患者施用治疗剂，该治疗剂施用的量和时间足以引起持续好转，超越反映特定病症的严重度的指示剂的基线。
[0077]
术语“治疗有效量”是指治疗剂有效改善或减轻与疾病或病症有关的症状或征象的量。
[0078]
如本文所用的术语“细胞因子”是指由细胞释放的一种或多种小(5-20kd)蛋白质，
其对细胞之间的相互作用和通信或对诸如免疫细胞增殖和分化的细胞行为具有特定作用。免疫系统中细胞因子的功能包括促进循环的白细胞和淋巴细胞流入免疫碰撞位点；刺激b细胞、t细胞、外周血单核细胞(pbmc)以及其他免疫细胞的发育和增殖；以及提供抗微生物活性。示例性免疫细胞因子包括但不限于il-1、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-9、il-10、il-12、il-13、il-15、il17a、il-17f、il-18、il-21、il-22、干扰素(包括ifnα、β和γ)、肿瘤坏死因子(包括tnfα、β)、转化生长因子(包括tgfα、β)、粒细胞集落刺激因子(gcsf)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gmcsf)和胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)。
[0079]“辅助性t细胞(th)1细胞因子”或“th1特异性细胞因子”是指由th1 t细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，并且包括ifn-g、tnf-a、il-12。“th2细胞因子”或“th2特异性细胞因子”是指由th2 t细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，包括il-4、il-5、il-13和il-10。“th17细胞因子”或“th17特异性细胞因子”是指由th17 t细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，包括il-17a、il-17f、il-22和il-21。除本文中所列出的th17细胞因子的外，th17细胞的某些群体还表达ifn-g和/或il-2。多功能ctl细胞因子包括ifn-g、tnf-a、il-2和il-17。
[0080]
低粘度抗tslp抗体组合物
[0081]
泰派鲁单抗在70mg至280mg的强度范围内已显示出效力，并且在一些情况下，该抗tslp抗体将以110mg/ml或140mg/ml的剂量配制。具有高蛋白质浓度的配制品可表现出增加的粘度，以至于可能会对用于向患者施用抗体的装置的功能造成负面影响。类似地，医疗保健提供者手动将药物注入患者的能力可能会受到影响。另外，高粘度在制造过程中可能会被禁止。从蛋白质稳定性的角度来看，具有高蛋白质浓度的配制品也具有挑战性。例如，导致形成高分子量物质(hmws)的聚集可发生在包含高蛋白质浓度的配制品中。因此，需要提供抗tslp抗体(诸如泰派鲁单抗)的低粘度、等渗、液体配制品，该抗体适合于肠胃外施用且可以在低温下(例如，2℃-8℃和-30℃)长期储存，或在室温下(例如，20℃-25℃，为了患者方便)短期储存。
[0082]
为了克服具有高蛋白质浓度的配制品的高粘度问题，本披露提供组合物，例如水性组合物，该组合物包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种碱性氨基酸或其盐。本披露还提供了组合物，例如水性组合物，其包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)至少一种钙盐或镁盐。至少部分地基于本文提供的数据，并且不受任何特定理论的束缚，本披露的组合物代表包含高浓度治疗性蛋白质的低粘度组合物，其可以施用于有需要的患者而不会由于高粘度引起任何并发症。至少部分基于本文提供的数据，并且不受任何特定理论的束缚，本披露的组合物是高度稳定的，因为本披露的组合物在低温下(例如2℃-8℃和-30℃)储存(短期和/或长期储存)或在室温下(例如大约20℃-25℃)短期储存后表现出最小的降解。
[0083]
碱性氨基酸
[0084]
在示例性实施例中，本披露的组合物包含碱性氨基酸或其盐。如本文所用的，术语“碱性氨基酸”是指在中性ph下具有碱性侧链的氨基酸。碱性氨基酸的pka足够高，以至于它们倾向于结合质子，从而在过程中获得正电荷。在示例性方面，该碱性氨基酸包括包含氮的侧链，该氮与质子结合(并且质子化)或释放与质子的结合(并且去质子化)。在示例性方面，该碱性氨基酸可以在nh2(去质子化)和nh3+(质子化)形式之间或在nh(去质子化)和nh2+
(质子化)形式之间或在n(去质子化)和nh+(质子化)形式之间平衡。对于生理ph下，例如约ph 7.0的碱性氨基酸，质子化形式占主导。在示例性方面，该碱性氨基酸是精氨酸(arg；r)或赖氨酸(lys，k)或组氨酸(his，h)。尽管该碱性氨基酸可以是d-异构体或者l-异构体，但是在示例性实例中，该碱性氨基酸是氨基酸的l-异构体，例如l-arg、l-lys、l-his。在示例性实例中，该碱性氨基酸是精氨酸。在示例性实例中，该碱性氨基酸是组氨酸。在不同情况下，该碱性氨基酸是赖氨酸。
[0085]
在示例性方面，该碱性氨基酸是精氨酸的衍生物，例如l-2-氨基-3-胍基丙酸、4-胍基丁酸。在示例性方面，该碱性氨基酸包含具有式i的结构：
[0086][0087]
其中n是1至16、或1至10、或1至7、或1至6、或2至6、或2或3或4或5。
[0088]
在示例性方面，该碱性氨基酸是赖氨酸的衍生物，例如5-羟赖氨酸、鸟氨酸、n-乙酰基-l-赖氨酸、2,4-二氨基丁酸。
[0089][0090]
其中n是1至16、或1至10、或1至7、或1至6、或2至6、或2或3或4或5，r1和r2各自独立地选自由以下组成的组：h、c
1-c
18
烷基、(c
1-c
18
烷基)oh、(c
1-c
18
烷基)nh2、(c
1-c
18
烷基)sh、(c
0-c4烷基)(c
3-c6)环烷基、(c
0-c4烷基)(c
2-c5杂环)、(c
0-c4烷基)(c
6-c
10
芳基)r7、和(c
1-c4烷基)(c
3-c9杂芳基)，其中r7是h或oh。
[0091]
在示例性方面，该碱性氨基酸是组氨酸的衍生物，例如去氨基组氨酸、羟基-组氨酸、乙酰基-组氨酸、均组氨酸(homo-histidine)、n-甲基组氨酸、α-甲基组氨酸、咪唑乙酸、或α,α-二甲基咪唑乙酸(dmia)。
[0092]
在多个方面，本披露的组合物包含碱性氨基酸的盐。在示例性实例中，该盐是药学上可接受的盐。如本文所用的术语“药学上可接受的盐”是指保留亲本化合物的生物学活性的化合物的盐并且其在生物学上或其他方面不是所不希望的。此类盐可在类似物的最终分离和纯化期间当场制备，或通过游离碱官能团与合适酸反应而分开制备。由于存在氨基和/
或羧基基团或与其类似的基团，很多本文披露的化合物能够形成酸式和/或碱式盐。
[0093]
药学上可接受的酸加成盐可由无机酸和有机酸制备。代表性酸加成盐包括(但不限于)乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐(异硫代硫酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一酸盐。衍生自无机酸的盐包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。衍生自有机酸的盐包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。可用以形成药学上可接受的酸加成盐的酸的实例包括例如无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸；和有机酸，例如草酸、马来酸、丁二酸和柠檬酸。
[0094]
碱加成盐还可在水杨酸来源的最终分离和纯化期间当场制备，或通过使含羧酸的部分与合适碱，诸如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，或与氨或有机伯胺、仲胺和叔胺反应来制备。药学上可接受的盐尤其包括(但不限于)基于碱金属或碱土金属的阳离子，诸如锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等；以及无毒季氨和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲铵、二甲铵、三甲铵、三乙铵、二乙铵和乙铵。可用于形成碱加成盐的其他代表性有机胺包括例如乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶、哌嗪等。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐。
[0095]
此外，碱性含氮基团可以与本披露的类似物季铵化为低级烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物，溴化物和碘化物；长链卤化物，例如癸基、月桂基、肉豆寇基、和硬脂酰氯化物，溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，例如苄基和苯乙基溴化物等。从而获得水溶性或油溶性或者水可分散性或油可分散性产物。
[0096]
在示例性方面，该碱性氨基酸是精氨酸并且本披露的组合物包含精氨酸盐。在多个方面，该精氨酸盐是精氨酸的有机盐。在多个方面，该精氨酸盐是精氨酸乙酸盐、精氨酸天冬氨酸盐、精氨酸谷氨酸盐、精氨酸乙醇酸盐、精氨酸乳酸盐、精氨酸甲磺酸盐、精氨酸丙酸盐、或其组合。
[0097]
在示例性方面，该碱性氨基酸是组氨酸并且本披露的组合物包含组氨酸盐。在多个方面，该组氨酸盐是组氨酸的有机盐。在示例性方面，该组氨酸盐是组氨酸乙酸盐、组氨酸天冬氨酸盐、组氨酸谷氨酸盐、组氨酸乙醇酸盐、组氨酸乳酸盐、组氨酸甲磺酸盐、组氨酸丙酸盐、或其组合。
[0098]
在示例性方面，该碱性氨基酸是赖氨酸并且本披露的组合物包含赖氨酸盐。在多个方面，该赖氨酸盐是赖氨酸的有机盐。在多个方面，该赖氨酸盐是赖氨酸乙酸盐、赖氨酸天冬氨酸盐、赖氨酸谷氨酸盐、赖氨酸乙醇酸盐、赖氨酸乳酸盐、赖氨酸甲磺酸盐、赖氨酸丙酸盐、或其组合。
[0099]
在不同情况下，本披露的组合物包含约10mm至约300mm，或约50mm至约300mm碱性氨基酸或其盐。在示例性方面，本披露的组合物包含约10mm至约200mm、约50mm至约250mm、约50mm至约200mm、约50mm至约150mm、约50mm至约100mm、约50mm至约90mm、约50mm至约80mm、约50mm至约70mm、约50mm至约60mm、约50mm至约55mm、约55mm至约200mm、约60mm至约
200mm、约70mm至约200mm、约80mm至约200mm、约90mm至约200mm、约100mm至约200mm、约150mm至约200mm、约160mm至约200mm、约170mm至约200mm、约180mm至约200mm、或约190mm至约200mm碱性氨基酸或其盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约50mm至约100mm(例如约50mm、约60mm、约70mm、约80mm、约90mm、约100mm)或约100mm至约200mm(例如约100mm、约110mm、约120mm、约130mm、约140mm、约150mm、约160mm、约170mm、约180mm、约190mm、约200mm)碱性氨基酸或其盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约50mm至约100mm或约50mm至约75mm或约75mm至约100mm碱性氨基酸或其盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约100mm至约200mm或约100mm至约150mm或约150mm至约200mm碱性氨基酸或其盐。在示例性方面，本披露的组合物包含约10mm至约200mm碱性氨基酸或其盐。
[0100]
在不同情况下，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约25mm至约190mm精氨酸和约25mm至约200mm谷氨酸盐一起配制。在多个方面，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与100mm至约180mm精氨酸(例如约100mm至约170mm、约100mm至约160mm、约100mm至约150mm、约100mm至约140mm、约100mm至约130mm、约100mm至约120mm、约100mm至约110mm、约110mm至约180mm、约120mm至约180mm、约130mm至约180mm、约140mm至约180mm、约150mm至约180mm、约160mm至约180mm、约170mm至约180mm、约120mm至约170mm、约130mm至约160mm、约135mm至约155mm)和约110mm至约240mm谷氨酸盐(例如约110mm至约180mm、约110mm至约170mm、约110mm至约160mm、约110mm至约150mm、约110mm至约140mm、约110mm至约130mm、约110mm至约120mm、约120mm至约180mm、约130mm至约180mm、约140mm至约180mm、约150mm至约180mm、约160mm至约180mm、约170mm至约180mm、约120mm至约170mm、约130mm至约160mm、约140mm至约160mm、约145mm至约155mm谷氨酸盐)一起配制。在不同情况下，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约135mm至约145mm精氨酸和约145mm至约155mm谷氨酸盐一起配制。在不同情况下，于约10mm至约125mm精氨酸和约25mm至约225mm谷氨酸盐中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在多个方面，于约55mm至约135mm精氨酸(例如约55mm至约125mm、约55mm至约115mm、约55mm至约105mm、约55mm至约95mm、约55mm至约85mm、约55mm至约75mm、约55mm至约65mm、约65mm至约135mm、约75mm至约135mm、约85mm至约135mm、约95mm至约135mm、约105mm至约135mm、约115mm至约145mm、约125mm至约135mm、约75mm至约115mm、约85mm至约105mm精氨酸)和约130mm至约210mm谷氨酸盐(例如约130mm至约200mm、约130mm至约240mm、约130mm至约180mm、约130mm至约170mm、约130mm至约160mm、约130mm至约150mm、约130mm至约140mm、约140mm至约210mm、约150mm至约210mm、约160mm至约210mm、约170mm至约210mm、约180mm至约210mm、约190mm至约210mm、约200mm至约210mm、约150mm至约190mm、约160mm至约180mm、约165mm至约175mm谷氨酸盐)中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在示例性实施例中，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗、约85.5mm至约104.5mm精氨酸、153mm至约187mm谷氨酸盐、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在示例性实施例中，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗、约95mm精氨酸、170mm谷氨酸盐、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。任选地，该ph是约5.4
±
0.2，或约5.4
±
0.1。
[0101]
钙盐和镁盐
[0102]
在示例性实施例中，本披露的组合物包含钙盐或镁盐。在多个方面，该钙盐或该镁盐包含任何反离子。在示例性方面，该钙盐或镁盐包含缺失氯化物的反离子。在示例性实例中，该反离子是乙酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、丙酸盐、或其
组合。在多个方面，该钙盐是乙酸钙、天冬氨酸钙、谷氨酸钙、乙醇酸钙、乳酸钙、甲磺酸钙、丙酸钙、或其组合。在示例性实例中，该镁盐是乙酸镁、天冬氨酸镁、谷氨酸镁、乙醇酸镁、乳酸镁、甲磺酸镁、丙酸镁或其组合。
[0103]
在不同情况下，本披露的组合物包含约15mm至约300mm、约15mm至约200mm、或约50mm至约150mm钙盐或镁盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约15mm至约300mm、或约50mm至约300mm钙盐或镁盐。在示例性方面，本披露的组合物包含约15mm至约200mm、约15至约150mm、约50mm至约250mm、约50mm至约200mm、约50mm至约150mm、约50mm至约100mm、约50mm至约90mm、约50mm至约80mm、约50mm至约70mm、约50mm至约60mm、约50mm至约55mm、约55mm至约200mm、约60mm至约200mm、约70mm至约200mm、约80mm至约200mm、约90mm至约200mm、约100mm至约200mm、约150mm至约200mm、约160mm至约200mm、约170mm至约200mm、约180mm至约200mm、或约190mm至约200mm钙盐或镁盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约50mm至约100mm(例如约50mm、约60mm、约70mm、约80mm、约90mm、约100mm)或约100mm至约200mm(例如约100mm、约110mm、约120mm、约130mm、约140mm、约150mm、约160mm、约170mm、约180mm、约190mm、约200mm)钙盐或镁盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约15mm至约130mm、约50mm至约100mm或约50mm至约75mm或约75mm至约100mm钙盐或镁盐。在不同情况下，本披露的组合物包含约100mm至约200mm或约100mm至约150mm或约150mm至约200mm钙盐或镁盐。
[0104]
在不同情况下，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约15mm至约130mm钙和约30mm至约300mm谷氨酸盐一起配制。在多个方面，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约70mm至约130mm钙(例如约80mm至约130mm、约90mm至约130mm、约100mm至约130mm、约110mm至约130mm、约120mm至约130mm、约70mm至约120mm、约70mm至约110mm、约70mm至约100mm、约70mm至约90mm、约70mm至约80mm、约80mm至约110mm、约90mm至约110mm、约95mm至约105mm钙)和约190mm至约270mm谷氨酸盐(例如约190mm至约260mm、约190mm至约250mm、约190mm至约240mm、约190mm至约230mm、约190mm至约220mm、约190mm至约210mm、约190mm至约200mm、约200mm至约270mm、约210mm至约270mm、约220mm至约270mm、约230mm至约270mm、约240mm至约270mm、约250mm至约270mm、约260mm至约270mm、约210mm至约250mm、约220mm至约240mm、约230mm至约240mm、约225mm至约235mm、或约235至245mm谷氨酸盐)一起配制。在示例性方面，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约95mm至约105mm钙和约225mm至约235mm谷氨酸盐、或约235至245mm谷氨酸盐一起配制。在不同情况下，于约15mm至约195mm钙和约25mm至约320mm谷氨酸盐中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在多个方面，于约70mm至约150mm钙(例如约80mm至约150mm、约90mm至约150mm、约100mm至约150mm、约110mm至约150mm、约120mm至约150mm、约130mm至约150mm、约140mm至约150mm、约70mm至约140mm、约70mm至约130mm、约70mm至约120mm、约70mm至约110mm、约70mm至约100mm、约70mm至约90mm、约70mm至约80mm、约90mm至约130mm、约100mm至约120mm、约105mm至约115mm钙)和约150mm至约230mm谷氨酸盐(例如约150mm至约220mm、约150mm至约210mm、约150mm至约200mm、约150mm至约190mm、约150mm至约180mm、约150mm至约170mm、约150mm至约160mm、约160mm至约230mm、约170mm至约230mm、约180mm至约230mm、约190mm至约230mm、约200mm至约230mm、约210mm至约230mm、约220mm至约230mm、约170mm至约210mm、约180mm至约200mm、约185mm至约195mm谷氨酸盐)中，配制tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在示例性方面，于约105mm至约115mm钙和约225mm至约
235mm谷氨酸盐、或约235至245mm谷氨酸盐中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在示例性实施例中，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗、约99mm至约121mm钙、171mm至约209mm谷氨酸盐、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。在示例性实施例中，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗、约110mm钙、240mm谷氨酸盐、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80。任选地，该ph是约5.0
±
0.2，或约5.0
±
0.1。
[0105]
组合的赋形剂
[0106]
在多个方面，本披露的组合物包含降低高蛋白质浓度配制品的粘度的超过一种赋形剂。在多个方面，本披露的组合物进一步包含以下一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、或钙盐。在多个方面，本披露的组合物包含(i)精氨酸盐和(ii)nar和/或甲硫氨酸。在多个方面，该精氨酸盐是精氨酸谷氨酸盐。在不同情况下，本披露的组合物包含(i)钙盐和(ii)nar和/或甲硫氨酸。在示例性方面，该钙盐是谷氨酸钙。
[0107]
在多个方面，n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、和钙盐中的一种或多种以约15mm至约300mm、或约50mm至约300mm的量存在于该组合物中。在示例性方面，本披露的组合物包含以下的一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、和钙盐，它们以约15mm至约200mm、约15至约150mm、约50mm至约250mm、约50mm至约200mm、约50mm至约150mm、约50mm至约100mm、约50mm至约90mm、约50mm至约80mm、约50mm至约70mm、约50mm至约60mm、约50mm至约55mm、约55mm至约200mm、约60mm至约200mm、约70mm至约200mm、约80mm至约200mm、约90mm至约200mm、约100mm至约200mm、约150mm至约200mm、约160mm至约200mm、约170mm至约200mm、约180mm至约200mm、或约190mm至约200mm的量存在于该组合物中。在不同情况下，本披露的组合物包含以下的一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、和钙盐，它们以约50mm至约100mm(例如约50mm、约60mm、约70mm、约80mm、约90mm、约100mm)或约100mm至约200mm(例如约100mm、约110mm、约120mm、约130mm、约140mm、约150mm、约160mm、约170mm、约180mm、约190mm、约200mm)的量存在于该组合物中。在不同情况下，本披露的组合物包含以下的一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、和钙盐，它们以约15mm至约200mm、约50mm至约100mm或约50mm至约75mm或约75mm至约100mm的量存在于该组合物中。在不同情况下，本披露的组合物包含以下的一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、和钙盐，它们以约100mm至约200mm或约100mm至约150mm或约150mm至约200mm的量存在于该组合物中。
[0108]
在多个方面，当碱性氨基酸或其盐或钙盐或镁盐彼此组合或与另一种降低粘度的赋形剂组合时，可以减少碱性氨基酸或其盐或钙盐或镁盐的量。在多个方面，与不包含另一个降低粘度的赋形剂(例如脯氨酸)的配制品相比，当碱性氨基酸或其盐或钙盐或镁盐与彼此或另一种降低粘度的赋形剂组合时，碱性氨基酸或其盐或钙盐或镁盐的量减少约50％。在示例性实例中，组合物中存在的降低粘度的赋形剂以约0mm至约250mm、约0mm至约220mm、约50mm至约250mm、约50mm至约200mm、约50mm至约150mm、约50mm至约100mm、约50mm至约90mm、约50mm至约80mm、约50mm至约70mm、约50mm至约60mm、约50mm至约55mm、约55mm至约
200mm、约60mm至约200mm、约70mm至约200mm、约80mm至约200mm、约90mm至约200mm、约100mm至约200mm、约150mm至约200mm、约160mm至约200mm、约170mm至约200mm、约180mm至约200mm、或约190mm至约200mm的总量存在。
[0109]
任选地，本披露的组合物包含一种或多种碱性氨基酸或其盐、和/或钙盐和/或镁盐和/或以下的一种或多种：n-乙酰基精氨酸(nar)、n-乙酰基赖氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、脯氨酸、乙酸钠、tris乙酸盐、组氨酸盐、或钙盐，并以约50mm至约250mm、约50mm至约200mm、约50mm至约150mm、约50mm至约100mm、约50mm至约90mm、约50mm至约80mm、约50mm至约70mm、约50mm至约60mm、约50mm至约55mm、约55mm至约200mm、约60mm至约200mm、约70mm至约200mm、约80mm至约200mm、约90mm至约200mm、约100mm至约200mm、约150mm至约200mm、约160mm至约200mm、约170mm至约200mm、约180mm至约200mm、或约190mm至约200mm的总量存在。在多种实施例中，本文所述的组合物包含脯氨酸(例如l-脯氨酸)，任选地以从约0mm至约250mm、约0mm至约220mm、约25mm至约200mm、约50mm至约150mm、或约50mm至约100mm的总量存在。在多种实施例中，脯氨酸以约40mm、约50mm、约60mm、约65mm、约70mm、约75mm、约80mm、约85mm、约90mm、约95mm、约100mm、约105mm、约110mm、约115mm、约120mm、约125mm、约130mm、约135mm、约140mm、约145mm、约150mm、约160mm、约170mm、约180mm、约190mm、约200mm、约210mm、约220mm、约230mm、约240mm、或约250mm的量存在。
[0110]
在不同情况下，本披露的组合物包含大于140mg/ml抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)、表面活性剂、碱性氨基酸或其盐、和脯氨酸。在不同情况下，大于140mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)与约10mm至200mm、或约50mm至约150mm碱性氨基酸或其盐、和约50mm至约250mm脯氨酸、或约50mm至约150mm脯氨酸一起配制。任选地，大于140mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)与约50mm至约100mm碱性氨基酸或其盐、和约90mm至约150mm脯氨酸一起配制。在多个方面，该碱性氨基酸的盐是精氨酸谷氨酸盐，并且添加一定量的精氨酸，并且添加一定量的谷氨酸盐以得到包含精氨酸谷氨酸盐的溶液。在多个方面，大于140mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)与约40mm至约120mm精氨酸和约45mm至约125mm谷氨酸盐和约60mm至约140mm脯氨酸一起配制。任选地，抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约50mm至约110mm、约60mm至约100mm、约70mm至约90mm、或约75mm至约85mm精氨酸，和约55mm至约115mm、约65mm至约105mm、约75mm至约95mm、约80mm至或约90mm谷氨酸盐，和约70mm至约130mm、约80mm至约120mm、约90mm至约110mm、或约95mm至约105mm脯氨酸一起配制。在多个方面，于约10mm至约90mm精氨酸和约55mm至约135mm谷氨酸盐和约45mm至约125mm脯氨酸中，配制抗tslp抗体。任选地，于约20mm至约80mm、约30mm至约70mm、约40mm至约60mm、约45mm至约55mm精氨酸，和约65mm至约125mm、约75mm至约115mm、约85mm至约105mm、约90mm至约100mm谷氨酸盐，和约55mm至约115mm、约65mm至约105mm、约75mm至约95mm、约80mm至约90mm、或约85mm脯氨酸中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在多个方面，该组合物包含大于140mg/ml抗tslp抗体、约10mm至约90mm精氨酸和约55mm至约135mm谷氨酸盐和约45mm至约125mm脯氨酸。任选地，该组合物包含抗tslp抗体，例如泰派鲁单抗，约20mm至约80mm、约30mm至约70mm、约40mm至约60mm、约45mm至约55mm精氨酸，和约65mm至约125mm、约75mm至约115mm、约85mm至约105mm、约90mm至约100mm谷氨酸盐，和约55mm至约115mm、约65mm至约105mm、约75mm至约95mm、约80mm至约90mm、约85mm脯氨酸。在不同情况下，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗和约45mm至约55mm精氨酸和约85.5mm至约104.5mm谷氨酸盐
和约76.5mm至约93.5mm脯氨酸。
[0111]
在不同情况下，本披露的组合物包含大于140mg/ml抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)、表面活性剂、钙盐或镁盐、和脯氨酸(例如l-脯氨酸)。在不同情况下，大于140mg/ml抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)与约15mm至约150mm钙盐或镁盐、和约50mm至约150mm脯氨酸一起配制。任选地，大于140mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)与约50mm至约100mm碱性氨基酸或其盐、和约90mm至约150mm脯氨酸一起配制。在多个方面，该钙是谷氨酸钙，并且添加一定量的钙并且添加一定量的谷氨酸盐以得到包含谷氨酸钙的溶液。在不同情况下，该抗tslp抗体是与20mm至约100mm钙和约100mm至约180mm谷氨酸盐和约30mm至约110mm脯氨酸一起配制。任选地，该抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)与约30mm至约90mm、约40mm至约80mm、约50mm至约70mm、约55mm至约65mm、或约60mm钙，和约110mm至约170mm、约120mm至约160mm、约130mm至约150mm、约135mm至约145mm、或约140mm谷氨酸盐，和约40mm至约100mm、约50mm至约90mm、约60mm至约80mm、约65mm至约75mm、或约70mm脯氨酸一起配制。在不同情况下，于约30mm至约110mm钙、约105mm至约185mm谷氨酸盐、和约20mm至约100mm脯氨酸中，配制抗tslp抗体。任选地，于约40mm至约100mm、约50mm至约90mm、约60mm至约80mm、约65mm至约75mm、或约75mm钙，和约115mm至约175mm、约125mm至约165mm、约135mm至约155mm、约140mm至约150mm、或约145mm谷氨酸盐，和约30mm至约90mm、约40mm至约80mm、约50mm至约70mm、约55mm至约65mm、或约60mm脯氨酸中，配制抗tslp抗体(例如，泰派鲁单抗)。在不同情况下，该组合物包含大于140mg/ml抗tslp抗体、约30mm至约110mm钙、约105mm至约185mm谷氨酸盐、和约20mm至约100mm脯氨酸。任选地，该组合物包含抗tslp抗体，例如泰派鲁单抗，约40mm至约100mm、约50mm至约90mm、约60mm至约80mm、约65mm至约75mm，或约75mm钙，和约115mm至约175mm、约125mm至约165mm、约135mm至约155mm、约140mm至约150mm、或约145mm谷氨酸盐，和约30mm至约90mm、约40mm至约80mm、约50mm至约70mm、约55mm至约65mm、或约60mm脯氨酸。在不同情况下，本披露的组合物包含大于140mg/ml泰派鲁单抗和约63mm至约77mm钙和约130.5mm至约159.5mm谷氨酸盐和约54mm至约66mm脯氨酸。
[0112]
表面活性剂
[0113]
在多个方面，本披露的组合物包含表面活性剂。表面活性剂是两亲性的(具有极性头部和疏水性尾部)表面活性剂。表面活性剂优先积聚在界面处，从而减小界面张力。使用表面活性剂也可有助于缓解大蛋白质颗粒的形成。在一些方面，存在于本披露的组合物中的表面活性剂是两亲性表面活性剂和/或非离子性表面活性剂。示例性表面活性剂包括聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(例如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80)，烷基芳基聚醚，例如氧乙基化烷基酚(例如triton
tm x-100)，和泊洛沙姆(例如例如f68)，以及属于一个表面活性剂类别或属于多个表面活性剂类别的上述中的任一者的组合。尤其预期聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80(及其任选的混合物)。在示例性实例中，表面活性剂以小于或约0.015％(w/v)
±
0.005％(w/v)的浓度存在于该组合物中。例如，配制品可包含约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)表面活性剂，例如约0.005％(w/v)、约0.006％(w/v)、约0.007％(w/v)、约0.008％(w/v)、约0.009％(w/v)、约0.010％(w/v)、约0.011％(w/v)、约0.012％(w/v)、约0.013％(w/v)、约0.014％(w/v)、约0.015％(w/v)。在示例性方面，配制品包含约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)表面活性剂。在多个方面，该表面活性剂是聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80或其混合物。任选地，该表面活性剂
以小于或约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)的浓度存在，任选地约0.010％(w/v)
±
0.0025％(w/v)的表面活性剂，例如约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)的表面活性剂。
[0114]
抗体浓度
[0115]
在示例性方面，本披露的组合物以大于约100mg/ml和小于约300mg/ml或小于约250mg/ml，任选地以约160mg/ml至约250mg/ml，例如约180mg/ml至约225mg/ml、或约180mg/ml至约200mg/ml的浓度包含抗tslp抗体。在一些方面，抗tslp抗体以约160mg/ml至约250mg/ml、约160mg/ml至约240mg/ml、约160mg/ml至约230mg/ml、约160mg/ml至约220mg/ml、约160mg/ml至约210mg/ml、约160mg/ml至约200mg/ml、约160mg/ml至约190mg/ml、约160mg/ml至约180mg/ml、约160mg/ml至约170mg/ml、约160mg/ml至约165mg/ml、约165mg/ml至约250mg/ml、约170mg/ml至约250mg/ml、约180mg/ml至约250mg/ml、约190mg/ml至约200mg/ml、约210mg/ml至约250mg/ml、约220mg/ml至约250mg/ml、约230mg/ml至约250mg/ml、约240mg/ml至约250mg/ml的浓度存在于组合物中。在一些方面，抗tslp抗体以约180mg/ml或约190mg/ml、约200mg/ml或约210mg/ml的浓度存在于组合物中。
[0116]
在示例性方面，该组合物包含约160mg/ml至约250mg/ml的抗tslp抗体，任选地约160mg/ml至约225mg/ml或约160mg/ml至约200mg/ml。在多个方面，该组合物包含约175mg/ml至约185mg/ml的抗tslp抗体，任选地约175mg/ml、约176mg/ml、约177mg/ml、约178mg/ml、约179mg/ml、约180mg/ml、约181mg/ml、约182mg/ml、约183mg/ml、约184mg/ml、约185mg/ml。在多个方面，该组合物包含约180mg/ml的抗tslp抗体。在不同情况下，抗tslp抗体的浓度是约189mg/ml或约190mg/ml至约230mg/ml或约231mg/ml。任选地，抗tslp抗体的浓度是约205mg/ml至约215mg/ml，任选地约210mg/ml或约205mg/ml、约206mg/ml、约207mg/ml、约208mg/ml、约209mg/ml、约210mg/ml、约211mg/ml、约212mg/ml、约213mg/ml、约214mg/ml、约215mg/ml。
[0117]
在示例性方面，抗tslp抗体以约140mg/ml至约210mg/ml，例如约180mg/ml
±
10％、约200mg/ml
±
10％、约210mg/ml
±
10％的浓度存在于组合物中。
[0118]
另外的赋形剂
[0119]
在示例性方面，本披露的组合物可以包含另外的组分。在多个方面，该组合物包含任何药学上可接受的成分，包括例如酸化剂、添加剂、吸附剂、气溶胶推进剂、空气置换剂、碱化剂、抗结块剂、抗凝血剂、抗微生物防腐剂、抗氧化剂、抗菌剂、碱、粘合剂、缓冲剂、螯合剂、包衣剂、着色剂、干燥剂、洗涤剂、稀释剂、消毒剂、崩解剂、分散剂、溶解增强剂、染料、润肤剂、乳化剂、乳化稳定剂、填充剂、成膜剂、增味剂、调味剂、流动增强剂、胶凝剂、造粒剂、保湿剂、润滑剂、粘膜粘合剂、软膏基质、软膏、油质运载体、有机碱、锭剂基质、色素、增塑剂、抛光剂、防腐剂、多价螯合剂、皮肤渗透剂、增溶剂、溶剂、稳定剂、栓剂基质、表面活性剂(surface active agent)、表面活性剂(surfactant)、悬浮剂、甜味剂、治疗剂、增稠剂、张力剂、毒性剂、粘度增加剂、吸水剂、水混溶性助溶剂、水软化剂或润湿剂。参见例如handbook of pharmaceutical excipients[药物赋形剂手册],第三版,a.h.kibbe(pharmaceutical press[医药出版社],london,uk[英国伦敦],2000)，将其通过引用以其全文并入。remington’s pharmaceutical sciences[雷明顿药物科学],第十六版,e.w.martin(mack publishing co.[麦克出版公司],easton,pa.[宾夕法尼亚州伊斯顿],
1980)，将其通过引用以其全文并入。
[0120]
ph、黏度、和渗透压
[0121]
在可替代的方面，本披露的组合物是液体。在某些方面，该液体具有小于约6.0，任选地，小于约5.7，或小于约5.5的ph。在一些方面，ph是约4.5至约5.7、约4.5至约5.5、约4.7至约5.3、约4.8至约5.4、或约5.0至约5.7，例如，约4.7、约4.8、约4.9、约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7。在一些方面，ph是约4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6或5.7。在示例性实例中，本披露的组合物具有约4.5至约6.75，任选地约4.8至约6.0的ph。
[0122]
在一些方面，该组合物的特征在于相对于不包含脯氨酸的液体组合物，粘度降低。在示例性实例中，该组合物的特征在于当抗tslp抗体的浓度小于155mg/ml时，在23℃下的粘度小于约24厘泊(cp)，任选地，当抗tslp抗体的浓度是约110mg/ml时，粘度是约6cp，或者当抗tslp抗体的浓度是约140mg/ml时，粘度是约15cp。在某些方面，当抗tslp抗体的浓度小于155mg/ml(例如约110mg/ml、约140mg/ml)时，该组合物的特征在于粘度是约5cp至约20cp，例如约5cp至约15cp、约5cp至约10cp、约10cp至约20cp、约15cp至约20cp、或约5cp、约6cp、约7cp、约8cp、约9cp、约10cp、约11cp、约12cp、约13cp、约14cp、约15cp、约16cp、约17cp、约18cp、约19cp、约20cp、约21cp、约22cp。
[0123]
在某些方面，当抗tslp抗体的浓度是180mg/ml或更大(例如约180mg/ml、约210mg/ml、约240mg/ml)时，该组合物的特征在于粘度是约5cp至约25cp，例如约5cp至约20cp、约5cp至约15cp、约5cp至约10cp、约10cp至约25cp、约15cp至约20cp、或约5cp、约6cp、约7cp、约8cp、约9cp、约10cp、约11cp、约12cp、约13cp、约14cp、约15cp、约16cp、约17cp、约18cp、约19cp、约20cp、约21cp、约22cp、约23cp、约24cp、约25cp。在示例性方面，当抗体的浓度是约100mg/ml至约180mg/ml时，该组合物具有约15cp
±
5cp或约20cp
±
5cp的粘度。除非另有说明，否则本文披露的所有粘度是指使用旋转粘度计在23℃和约1000l/s的剪切速率下测量的粘度。
[0124]
在示例性方面，本披露的组合物在23℃、1000s-1
的粘度小于100cp，任选地，在23℃、1000s-1
小于75cp，例如小于60cp或小于50cp。
[0125]
在示例性方面，该组合物意欲用于皮下施用于受试者，因此该组合物与预期的施用部位是等渗的。例如，在一些方面，该组合物的渗透压处于约270至约350mosm/kg、或约285至约345mosm/kg、或约300至约315mosm/kg的范围内。例如，若该溶液呈意欲用于经肠胃外施用的形式，则可使其与血液等渗(约300mosm/kg渗透压)。在示例性方面，该水性药物配制品具有处于约200mosm/kg至约500mosm/kg、或约225mosm/kg至约400mosm/kg、或约250mosm/kg至约350mosm/kg的范围内的渗透压。任选地，该组合物是等渗的或者具有大于约350mosm/kg的渗透压。
[0126]
稳定性
[0127]
在不同情况下，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存至少或约12个月后，小于约5％的抗体被降解。在多个方面，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存约20个月至约26个月后，小于约5％的抗体被降解。在示例性实例中，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至约8℃下储存约30至约40个月后，小于约5％的抗体被降解。在示例性实例中，如通过尺寸排阻色谱法(sec)确定的，在约2℃至
20/53178、和pct/us 20/53176中，这些文献通过引用并入本文。
[0131]
本披露的组合物可适合于通过任何可接受的途径，包括肠胃外，并且特别地皮下施用。例如，皮下施用可施用于上臂、大腿或腹部。其他途径包括例如静脉内、皮内、肌肉内、腹膜内、结节内及脾内。皮下途径是优选的。
[0132]
若该组合物呈意欲施用于受试者的形式，则可使其与预期的施用部位等渗。例如，若该溶液呈意欲用于经肠胃外施用的形式，则可使其与血液等渗。该组合物通常是无菌的。在某些实施例中，此可通过无菌过滤膜进行过滤来实现。在某些实施例中，一般将肠胃外组合物置于具有无菌接取口的容器，例如静脉内溶液袋，或具有可通过皮下注射针刺穿的塞子的小瓶，或预填充注射器中。在某些实施例中，该组合物能以即用形式储存。
[0133]
抗tslp抗体
[0134]
本披露的组合物包含抗tslp抗体。在示例性实施例中，该抗tslp抗体与seq id no:2的氨基酸29-159中所示的tslp多肽特异性结合。胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)是上皮细胞衍生的细胞因子，其是对促炎性刺激起反应而产生，且主要经由其在树突状细胞(gilliet,j exp med.[实验医学杂志]197:1059-1067,2003；soumelis,nat immunol.[自然免疫学]3:673-680,2002；reche,j immunol.[免疫学杂志]167:336-343,2001)、肥大细胞(allakhverdi,j exp med.[实验医学杂志]204:253-258,2007)、和cd34+祖细胞上的活性而驱动过敏性炎性反应。swedin等人,pharmacol ther[药理学与治疗学]169:13-34(2017)。tslp通过由白细胞介素(il)-7受体α(il-7rα)链和常见γ链样受体(tslpr)组成的异二聚体受体发信号(pandey,nat immunol.[自然免疫学]1:59-64,2000；park,j exp med.[实验医学杂志]192:659-669,2000)。
[0135]
与对照相比，哮喘个体气道中人tslp mrna(brightling等人,j allergy clin immunol[过敏与临床免疫杂志]121:5-10quiz 1-2(2008)；ortega等人,nejm[新英格兰医学杂志]371:1198-1207(2014))和蛋白质水平(ortega等人,(2014),同上)有所增加，并且此表达程度与疾病严重度相关。brightling等人,(2008),同上。最近的研究已证明，人tslp基因座中的单核苷酸多态性与预防哮喘、特应性哮喘、和气道过度反应有关，这表明tslp基因表达的差别调节可影响疾病易感性。(to等人,bmc public health[bmc公共健康]12:204(2012)；(奥马珠单抗(omalizumab))：highlights of prescribing information[处方信息要点]2016。(在https://www.gene.com/download/pdf/xolair_prescribing.pdf.)；bleecker等人,the lancet[柳叶刀]388:2115-2127(2016)。这些数据表明靶向tslp可抑制与哮喘有关的多个生物途径。
[0136]
tslp的早期非临床研究表明在自气道上皮细胞或基质细胞释放tslp之后，其活化肥大细胞、树突状细胞及t细胞，从而释放th2细胞因子(例如il-4/13/5)。最近公开的人类资料证明在重度哮喘中在组织tslp基因与蛋白质表达、th2基因特征评分和组织嗜酸细胞之间存在良好相关性。因此，抗tslp靶标疗法可在具有th2型炎症的哮喘患者中为有效的(shikotra等人,j allergy clin immunol.[过敏与临床免疫杂志]129(1):104-11,2012)。
[0137]
来自其他研究的数据表明tslp可经由与th2无关的途径，诸如气道平滑肌与肥大细胞之间的串扰，引起气道炎症(allakhverdi等人,j allergy clin immunol.[过敏与临床免疫杂志]123(4):958-60,2009；shikotra等人,同上)。tslp还可促进诱导t细胞分化成产生th-17-细胞因子的细胞，从而在更重度哮喘中常见到嗜中性细胞炎症增加(tanaka等
人,clin exp allergy.[临床和实验过敏]39(1):89-100,2009)。这些数据和其他出现的证据表明阻断tslp可用于压制多个生物途径，包括但不限于涉及th2细胞因子(il-4/13/5)的途径。
[0138]
预期对tslp具有特异性的抗体可用于治疗哮喘，包括重度哮喘、嗜酸细胞性哮喘、非嗜酸细胞性/低嗜酸细胞性哮喘和本文所述的其他形式哮喘。
[0139]
诸如结合靶标抗原(例如tslp)的特异性结合剂(诸如抗体和抗体变体或片段)可用于本披露的方法中。在一个实施例中，该特异性结合剂是抗体。这些抗体可以是单克隆的(mab)；重组的；嵌合的；人源化的，诸如互补决定区(cdr)移植的；人的；抗体变体，包括单链；和/或双特异性的；以及其片段；变体；或其衍生物。抗体片段包括抗体的结合目的多肽上的表位的那些部分。此类片段的实例包括由全长抗体的酶促裂解产生的fab和f(ab')片段。其他结合片段包括由重组dna技术产生的片段，这些技术诸如表达含有编码抗体可变区的核酸序列的重组质粒。
[0140]
单克隆抗体可经修饰用作治疗剂或诊断剂。一个实施例为“嵌合”抗体，其中一部分重链(h)和/或轻链(l)与来源于特定物种或属于特定抗体类别或子类的抗体中的对应序列相同或同源，而链的剩余部分与来源于另一物种或属于另一抗体类别或子类的抗体中的对应序列相同或同源。还包括此类抗体的片段，只要其展现所需生物活性即可。参见美国专利号4,816,567；morrison等人,1985,proc.natl.acad.sci.[美国国家科学院院刊]81:6851-55。
[0141]
在另一个实施例中，单克隆抗体是“人源化”抗体。用于将非人抗体人源化的方法为本领域中所熟知。参见美国专利号5,585,089和5,693,762。通常，人源化抗体具有一个或多个自非人类来源引入其中的氨基酸残基。可例如使用本领域中所述的方法(jones等人,1986,nature[自然]321:522-25；riechmann等人,1998,nature[自然]332:323-27；verhoeyen等人,1988,science[科学]239:1534-36)，通过用啮齿类动物互补决定区的至少一部分代替人抗体的对应区域来进行人源化。
[0142]
本披露还涵盖结合tslp的人抗体和抗体变体(包括抗体片段)。使用在缺少内源性免疫球蛋白产生时能够产生人抗体谱的转基因动物(例如小鼠)，通过用多肽抗原(即具有至少6个相邻氨基酸)进行免疫接种，任选地结合载体，来产生此类抗体。参见，例如jakobovits等人,1993,proc.natl.acad.sci.[美国国家科学院院刊]90:2551-55；jakobovits等人,1993,nature[自然]362:255-58；bruggermann等人,1993,year in immuno.[年度免疫学]7:33。还参见pct申请号pct/us 96/05928和pct/us93/06926。其他方法描述于美国专利号5,545,807、pct申请号pct/us 91/245和pct/gb 89/01207、以及欧洲专利号546073b1和546073a1中。人抗体还可通过在宿主细胞中表达重组dna或通过在如本文所述的杂交瘤细胞中表达来产生。
[0143]
嵌合的、cdr移植的以及人源化抗体和/或抗体变体通常通过重组方法产生。将编码抗体的核酸引入宿主细胞中并且使用本文所述的材料和程序表达。在优选的实施例中，在诸如cho细胞的哺乳动物宿主细胞中产生抗体。单克隆(例如人)抗体可通过在宿主细胞中表达重组dna或通过在如本文所述的杂交瘤细胞中表达来产生。
[0144]
可用于本发明的方法中的抗体和抗体变体(包括抗体片段)包含含有以下的抗tslp抗体：(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨
基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。
[0145]
还预期包含以下的抗体或抗体变体：(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与seq id no:12具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的氨基酸序列；(ii)由与seq id no:11具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由seq id no:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与seq id no:10具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的氨基酸序列；(ii)由与seq id no:9具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由seq id no:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者(c)(a)的轻链可变结构域和(a)的重链可变结构域，其中该抗体或抗体变体与seq id no:2的氨基酸29-159中所示的tslp多肽特异性结合。
[0146]
在示例性实例中，该抗tslp抗体包含含有seq id no:13的氨基酸序列的重链、含有seq id no:14的氨基酸序列的轻链、或者含有seq id no:13的氨基酸序列的重链、和含有seq id no:14的氨基酸序列的轻链。
[0147]
泰派鲁单抗是具有以下的示例性抗tslp抗体：(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。
[0148]
泰派鲁单抗还包含：
[0149]
(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：
[0150]
(i)与seq id no:12具有至少80％同一性的氨基酸序列；
[0151]
(ii)由与seq id no:11具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；
[0152]
(iii)由在中等严格条件下与由seq id no:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；以及
[0153]
(b)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：
[0154]
(i)与seq id no:10具有至少80％同一性的氨基酸序列；
[0155]
(ii)由与seq id no:9具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；
[0156]
(iii)由在中等严格条件下与由seq id no:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者
[0157]
(c)(a)的轻链可变结构域和(b)的重链可变结构域。
[0158]
其他示例性抗tslp抗体是本领域已知的。参见，例如国际专利申请公开号wo2017/042701、wo 2016/142426、wo 2010/017468，美国专利申请公开号us2012/0020988，以及美
国专利号8,637,019。在示例性方面，该抗tslp抗体是在这些出版物之一中披露的抗体。
[0159]
在多个实施例中，该抗tslp抗体或其抗体变体是二价的并且选自由以下组成的组：人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体、重组抗体、抗原结合抗体片段、单链抗体、单体抗体、双抗体、三抗体、四抗体、fab片段、igg1抗体、igg2抗体、igg3抗体和igg4抗体。在示例性方面，该抗tslp抗体是igg2抗体。
[0160]
在多个实施例中，该抗tslp抗体变体选自由以下组成的组：双抗体、三抗体、四抗体、fab片段、单域抗体、scfv，其中该剂量经调整，使得这些结合位点相对于给予二价抗体的结合位点是等摩尔的。在示例性方面，该抗体的两个结合位点具有与tslp相同的结合。
[0161]
预期该抗体或抗体变体是igg2抗体。人igg2恒定区的示例性序列能以uniprot编号p01859自uniprot数据库获得，该uniprot数据库通过引用并入本文。包括关于其他抗体重链及轻链恒定区的序列信息的信息还可经由uniprot数据库以及在抗体工程改造及产生领域熟知的其他数据库公开获得。
[0162]
在某些实施例中，抗体衍生物包括四聚体糖基化抗体，其中与亲本多肽的氨基酸序列相比，糖基化位点的数目和/或类型改变。在某些实施例中，变体包含比天然蛋白质更多或更少数目的n连接的糖基化位点。可替代地，消除此序列的取代将移除已存在的n连接的碳水化合物链。还提供n连接的碳水化合物链的重排，其中消除一个或多个n连接的糖基化位点(通常天然存在的n连接的糖基化位点)且创造一个或多个新的n连接的位点。另外的优选的抗体变体包括半胱氨酸变体，其中与亲本氨基酸序列相比，一个或多个半胱氨酸残基缺失或取代另一个氨基酸(例如丝氨酸)。当抗体必须重新折叠成生物学上活性构象时，诸如在分离不溶性包涵体之后，半胱氨酸变体可为有用的。半胱氨酸变体一般具有比天然蛋白质少的半胱氨酸残基，且通常具有偶数个，以使由未配对的半胱氨酸引起的相互作用最小。
[0163]
所需氨基酸取代(无论保守或非保守)可由本领域技术人员在需要此类取代时来确定。在某些实施例中，氨基酸取代可用于鉴别人tslp的抗体的重要残基，或增加或减少抗体对本文所述的人tslp的亲和力。
[0164]
根据某些实施例，优选的氨基酸取代为以下那些：(1)降低对蛋白质水解的敏感性；(2)降低对氧化的敏感性；(3)改变用于形成蛋白质复合物的结合亲和力；(4)改变结合亲和力和/或(4)赋予或改变此类多肽上的其他生理化学特性或功能特性。根据某些实施例，可在天然存在的序列中(在某些实施例中，在形成分子间接触的结构域外的多肽部分中)进行单个或多个氨基酸取代(在某些实施例中为保守氨基酸取代)。在某些实施例中，保守氨基酸取代通常基本上不能改变亲本序列的结构特性(例如替换氨基酸不应倾向于使亲本序列中存在的螺旋断裂，或破坏亲本序列特征性的其他类型二级结构)。技术公认的多肽二级和三级结构的实例描述于proteins,structures and molecular principles[蛋白质/结构和分子原理](creighton编辑,w.h.freeman and company[w.h.弗里曼公司],纽约(1984))；introduction to protein structure[蛋白质结构简介](c.branden和j.tooze编辑,garland publishing[加兰出版社],纽约,纽约州(1991))；以及thornton等人nature[自然]354:105(1991)，将这些文献各自通过引用并入本文。
[0165]
与前述一致，在一些方面，本披露的组合物包含约110mg/ml至约140mg/ml抗tslp抗体、约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、大于约2.5％(w/v)且小于约3.0％(w/
v)l-脯氨酸、以及约20mm至约30mm乙酸盐，其中该组合物的粘度在23℃下小于约20cp(例如15cp)，并且ph小于约5.5，任选地，约5.2。任选地，抗tslp抗体包含(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在示例性实例中，该组合物包含约110mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.5％(w/v)至约3.0％(w/v)l-脯氨酸、以及约20mm至约22mm乙酸盐，其中该组合物的ph是约5.2，其中该抗tslp抗体任选地包含：(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在可替代的实例中，该组合物包含约140mg/ml的抗tslp抗体(例如泰派鲁单抗)、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.6％(w/v)至约2.7％(w/v)l-脯氨酸、以及约23mm至约25mm乙酸盐，其中该组合物的ph是约5.2，其中该抗tslp抗体任选地包含：(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。
[0166]
与前述一致，在一些方面，本披露的组合物包含约180mg/ml至约210mg/ml抗tslp抗体、约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、15-190mm精氨酸碱、25-200mm谷氨酸和0-250mm脯氨酸，其中该组合物的粘度在23℃下小于约22cp(例如15、17或20cp)，并且ph小于约5.7，任选地，约5.4。任选地，抗tslp抗体包含(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在多种实施例中，该水性组合物包含140mm精氨酸碱和150mm谷氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含140mm精氨酸碱、150mm谷氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.4。在多种实施例中，该水性组合物包含80mm精氨酸碱、85mm谷氨酸和100mm l-脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含80mm精氨酸碱、85mm谷氨酸、100mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.4。
[0167]
与前述一致，在一些方面，本披露的组合物包含约180mg/ml至约210mg/ml抗tslp抗体、约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、10-125mm精氨酸碱、25-225mm谷氨酸和0-250mm脯氨酸，其中该组合物的粘度在23℃下小于约22cp(例如15、17或20cp)，并且ph
小于约5.7，任选地，约5.4。任选地，抗tslp抗体包含(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在多种实施例中，该水性组合物包含95mm精氨酸碱和170mm谷氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含50mm精氨酸碱、95mm谷氨酸和85mm l-脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含95mm精氨酸碱、170mm谷氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.4。在多种实施例中，该水性组合物包含50mm精氨酸碱、95mm谷氨酸和85mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.4。
[0168]
与前述一致，在一些方面，本披露的组合物包含约180mg/ml至约210mg/ml抗tslp抗体、约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)聚山梨醇酯80，包含15-130mm钙、30-300mm谷氨酸盐和0-250mm脯氨酸，其中该组合物的粘度在23℃下小于约20cp(例如15或17cp)，并且ph小于约5.5，任选地，约5.0。任选地，抗tslp抗体包含(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在多种实施例中，该水性组合物包含100mm钙和230mm谷氨酸盐。在多种实施例中，该水性组合物包含60mm钙、140mm谷氨酸盐和70mm l-脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含100mm钙、230mm谷氨酸盐、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph5.0。在多种实施例中，该水性组合物包含60mm钙、140mm谷氨酸盐、70mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.0。
[0169]
与前述一致，在一些方面，本披露的组合物包含约180mg/ml至约210mg/ml抗tslp抗体、约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、15-195mm钙和25-320mm和0-220mm脯氨酸，其中该组合物的粘度在23℃下小于约20cp(例如15或17cp)，并且ph小于约5.5，任选地，约5.0。任选地，抗tslp抗体包含(a)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有seq id no:3中所示的氨基酸序列的轻链cdr1序列；(ii)含有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链cdr2序列；和(iii)含有seq id no:5中所示的氨基酸序列的轻链cdr3序列；和(b)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有seq id no:6中所示的氨基酸序列的重链cdr1序列；(ii)含有seq id no:7中所示的氨基酸序列的重链cdr2序列，和(iii)含有seq id no:8中所示的氨基酸序列的重链cdr3序列。在多种实施例中，该水性组合物包含110mm钙和240mm谷氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含70mm钙、145mm谷氨酸盐和60mm l-脯氨酸。在多种实施例中，该水性组合物包含110mm钙、240mm谷氨酸盐、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.0。在多种实施例中，该水性组合物包含70mm钙、145mm谷氨酸盐、60mm l-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，ph 5.0。
[0170]
使用方法
[0171]
不受特定理论的束缚并且至少部分地基于本文提供的数据，本披露的组合物特别适合于治疗患有炎性疾病的患者。如本文所用的，“炎性疾病”是指涉及由免疫系统攻击人
体自身的细胞或组织引起的异常炎症的医学病症，这可能导致慢性疼痛、发红、肿胀、僵硬、以及对正常组织的损害。炎性疾病包括，例如哮喘、慢性消化性溃疡、结核病、牙周炎、鼻窦炎、活动性肝炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病(copd)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、系统性红斑狼疮、特应性皮炎、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)等。在示例性方面，该炎性疾病是哮喘、特应性皮炎、copd、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉和慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)。在示例性方面，该炎性疾病是特应性皮炎(ad)。在多个方面，该炎性疾病是哮喘。在多个方面，该炎性疾病是copd。
[0172]
因此，本文提供了本披露的组合物用于治疗炎性疾病的用途。在示例性方面，该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(copd)、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)。任选地，该炎性疾病是特应性皮炎。在多个方面，该炎性疾病是哮喘。在多个方面，该炎性疾病是copd。本披露还提供了用于治疗受试者的炎性疾病的方法。在示例性实施例中，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本披露的组合物。在多个方面，该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(copd)、嗜酸细胞性食管炎(eoe)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、ig驱动的疾病(例如iga肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(ipf)。任选地，该炎性疾病是特应性皮炎。在不同情况下，通过皮下施用将本披露的组合物施用于受试者。在示例性实例中，将约1ml至约5ml(例如约1ml至约3ml)的水性组合物施用于受试者。
[0173]
哮喘
[0174]
如本文所用的术语“哮喘”是指过敏性哮喘、非过敏性哮喘、嗜酸细胞性哮喘和非嗜酸细胞性哮喘。
[0175]
如本文所用的术语“过敏性哮喘”是指由一种或多种吸入性过敏原引发的哮喘。此类患者对引发哮喘反应的一种或多种过敏原具有阳性的ige荧光酶免疫测定(feia)水平。
[0176]
通常，大部分过敏性哮喘与th2型炎症有关。
[0177]
术语“非过敏性哮喘”是指在诊断时具有低嗜酸细胞、低th2或低ige的患者。通常，在ige荧光酶免疫测定(feia)中，患有“非过敏性哮喘”的患者对包括地区特异性过敏原的一组过敏原的反应呈阴性。除低ige的外，那些患者经常在诊断时具有低嗜酸细胞计数或无嗜酸细胞计数和低th2计数。
[0178]
如本文所用的术语“重度哮喘”是指需要高强度治疗(例如gina步骤4和步骤5)来维持良好控制或尽管进行高强度治疗但仍未实现良好控制的哮喘(gina,global strategy for asthma management and prevention[全球哮喘管理和预防战略].global initiative for asthma[全球哮喘防治创议](gina)2012年12月)。
[0179]
如本文所用的术语“嗜酸细胞性哮喘”是指具有≥250个细胞/μl的筛选血液嗜酸细胞计数的哮喘患者。“低嗜酸细胞性”哮喘是指具有小于250个细胞/ul血液或血清的哮喘患者。
[0180]
如本文所用的术语“th2型炎症”是指具有≥140个细胞/μl的筛选血液嗜酸细胞计数和》100iu/ml的筛选总血清ige水平的受试者(corren等人,n engl j med.[新英格兰医学杂志]22；365(12):1088-98,2011)。“th2高”哮喘群体或概况是指ige》100iu/ml且血液嗜酸细胞计数≥140个细胞/μl的受试者。“th2低”哮喘群体是指ige《100iu/ml且血液嗜酸细胞计数≤140个细胞/μl的受试者
[0181]
特应性皮炎
[0182]
在不同情况下，该炎性疾病是特应性皮炎(ad)，其是常见的过敏性炎性皮肤病，也称为湿疹。ad是儿童中最常见的皮肤疾病，并且其特征在于皮肤严重发痒和发炎，以及慢性苔藓状、多鳞状斑块。虽然ad的病因尚不清楚，但目前的理论认为ad是一种主要技能障碍存在缺陷而导致其他特应性病症的病症。在kapur等人，atopic dermatitis.[特应性皮炎]allergy asthma clin immunol[过敏性哮喘与临床免疫学]14,52(2018)doi:10.1186/s13223-018-0281-6中综述了ad。与哮喘和过敏性鼻炎一样，ad也涉及t辅助2型(th2)细胞介导的过敏性炎症，其由cd4+t细胞分泌il-4、il-5、il-13和tnfα引起。这些细胞因子导致b细胞产生ige抗体，而igg与肥大细胞结合，促进过敏反应的启动并驱动白细胞进入皮肤真皮。indra,exper rev proteomics[蛋白质组学专家综述]10(4):309-311(2013)。在示例性方面，ad的特征在于tslp的更高表达。在多个方面，ad的特征在于表皮角质形成细胞的tslp分泌，其触发th2细胞因子相关的炎症。
[0183]
在示例性方面，ad是慢性的并且可以周期性地发作。在多个方面，该患者经历以下一种或多种ad症状：
[0184]
·
皮肤干燥、瘙痒(可能很严重，尤其是在晚上)，
[0185]
·
红色到棕色或灰色的斑点(例如，位于手、脚、脚踝、腕部、颈部、上胸部、眼睑、肘或膝内侧、脸部或头皮上)，
[0186]
·
小的、凸起的肿块，
[0187]
·
增厚、破裂的鳞状皮肤，和
[0188]
·
因刮擦而擦伤、敏感肿胀的皮肤。
[0189]
(来自mayoclinic.org/diseases-conditions/atopic-dermatitis-eczema/symptoms-causes/syc-20353273)
[0190]
在多个方面，ad与哮喘、花粉症、慢性瘙痒、鳞状皮肤、皮肤感染、刺激性手皮炎、过敏性鼻炎、过敏性接触性皮炎或睡眠问题中的一种或多种共同存在。
[0191]
在多种实施例中，使用本披露的组合物消除了对用于治疗ad的皮质类固醇疗法或其他药物的需要。
[0192]
在替代性实施例中，该方法包括与另外的抗炎或抗ad治疗组合施用本披露的组合物。例如，在多个方面，该方法进一步包含施用皮质类固醇(例如强的松)或钙调磷酸酶抑制剂(例如他克莫司、匹美莫司)、抗生素或生物品(例如度匹鲁单抗)。在示例性方面，该方法进一步包含光疗法治疗，例如用日光、uva或uvb的光线疗法。
[0193]
受试者
[0194]
预期受试者是人。受试者可以是成人、青少年或儿童。
[0195]
在多个方面，受试者显示出例如ad或copd的炎性疾病的体征或症状，例如上述的任何一种或多种。在多个方面，受试者还患有哮喘、花粉症、慢性瘙痒、鳞状皮肤、皮肤感染、
刺激性手皮炎、过敏性接触性皮炎或睡眠问题中的一种或多种。在多个方面，受试者先前已经或正在用抗ad或抗炎治疗(例如，皮质类固醇(例如强的松)或钙调神经磷酸酶抑制剂(例如他克莫司、匹美莫司)、抗生素或生物品(例如度匹鲁单抗))进行治疗。在示例性方面，该方法进一步包含光疗法治疗，例如用日光、uva或uvb的光线疗法。任选地，受试者从未接受过以下任何一种的治疗：皮质类固醇(例如强的松)或钙调磷酸酶抑制剂(例如他克莫司、匹美莫司)、抗生素或生物品(例如度匹鲁单抗)。在示例性方面，该方法进一步包含光疗法治疗，例如用日光、uva或uvb的光线疗法。
[0196]
治疗方案、剂量和施用途径
[0197]
治疗抗体(或抗体变体)组合物可在多个部位递送至患者。多次施用可同时进行或可在一段时间内施用。在某些情况下，提供治疗组合物的连续流动为有益的。可周期性施用其他疗法，例如每小时、每日、每周、每2周、每3周、每月或以更长时间间隔。
[0198]
在多个实施例中，既定剂量的治疗剂(诸如具有两个tslp结合位点的二价抗体)的量可根据疗法施用的个体的体型以及所治疗的病症的特征而变化。
[0199]
在示例性治疗中，该组合物提供的抗tslp抗体或抗体变体的剂量是在每日剂量约210mg至约420mg的范围内。例如，该剂量能以约210mg、280mg、或420mg提供。在多种实施例中，包含抗tslp抗体或抗体变体的组合物以约210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410或420mg每剂量的剂量施用。这些浓度能以单个剂型或多个剂量施用。以上剂量每两周或每四周给予。在多个实施例中，该抗tslp抗体或抗体变体以280mg或420mg每两周或每四周的单次剂量施用。在多个实施例中，该抗tslp抗体或抗体变体以210mg每两周或每四周的单次剂量施用。在多种实施例中，将包含大于约100mg/ml、或大于约140mg/ml如本文所述的抗tslp抗体的组合物以每两周或每四周的间隔施用于受试者。
[0200]
对于抗体变体，抗体变体的量应使剂量中的tslp结合位点的数目与上述标准二价抗体的tslp结合位点数目是等摩尔的。
[0201]
预期该包含抗tslp抗体或抗体变体的本披露的组合物以每2周或每4周施用于少4个月、6个月、9个月、1年或更长时间的时期。在多个实施例中，该施用为皮下或静脉内。
[0202]
制造方法
[0203]
本文进一步提供了制备本披露的组合物的方法。因此，进一步提供了制备粘度小于约100cp的稳定的液体抗体组合物的方法，该组合物包含(a)浓度大于约140mg/ml的抗tslp抗体、(b)表面活性剂、和(c)碱性氨基酸或其盐、钙盐、镁盐、或其组合。在示例性实施例中，该方法包括：(i)将该抗体与包含约10mm至约200mm或约50mm至约150mm碱性氨基酸或其盐、钙盐、镁盐、或其组合的水性溶液组合以及(ii)添加表面活性剂以达到约0.01％(w/v)
±
0.005％(w/v)表面活性剂的终浓度。
[0204]
在示例性方面，该组合物包含约160mg/ml至约250mg/ml的抗tslp抗体，任选地约180mg/ml至约225mg/ml或约180mg/ml至约200mg/ml。任选地，该组合物包含约160mg/ml至约250mg/ml的抗tslp抗体，任选地约165mg/ml至约225mg/ml或约165mg/ml至约200mg/ml。在多个方面，该组合物包含约175mg/ml至约185mg/ml的抗tslp抗体，任选地约175mg/ml、约176mg/ml、约177mg/ml、约178mg/ml、约179mg/ml、约180mg/ml、约181mg/ml、约182mg/ml、约183mg/ml、约184mg/ml、约185mg/ml。在多个方面，该组合物包含约180mg/ml的抗tslp抗体。
在不同情况下，抗tslp抗体的浓度是约189mg/ml或约190mg/ml至约230mg/ml或约231mg/ml。任选地，抗tslp抗体的浓度是约205mg/ml至约215mg/ml，任选地约210mg/ml或约205mg/ml、约206mg/ml、约207mg/ml、约208mg/ml、约209mg/ml、约210mg/ml、约211mg/ml、约212mg/ml、约213mg/ml、约214mg/ml、约215mg/ml。在示例性方面，该水性溶液包含精氨酸、赖氨酸、或组氨酸的有机盐。在示例性方面，该水性溶液包含精氨酸乙酸盐、精氨酸天冬氨酸盐、精氨酸谷氨酸盐、精氨酸乙醇酸盐、精氨酸乳酸盐、精氨酸甲磺酸盐、精氨酸丙酸盐、组氨酸乙酸盐、组氨酸天冬氨酸盐、组氨酸谷氨酸盐、组氨酸乙醇酸盐、组氨酸乳酸盐、组氨酸甲磺酸盐、组氨酸丙酸盐、赖氨酸乙酸盐、赖氨酸天冬氨酸盐、赖氨酸谷氨酸盐、赖氨酸乙醇酸盐、赖氨酸乳酸盐、赖氨酸甲磺酸盐、赖氨酸丙酸盐、乙酸钙、天冬氨酸钙、谷氨酸钙、乙醇酸钙、乳酸钙、甲磺酸钙、丙酸钙、乙酸镁、天冬氨酸镁、谷氨酸镁、乙醇酸镁、乳酸镁、甲磺酸镁、丙酸镁、或其组合。在多个方面，该水性溶液包含约15mm至约200mm或约50mm至约150mm盐(碱性氨基酸盐、钙盐、镁盐)。在一些方面，该表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在示例性实例中，该表面活性剂是聚山梨醇酯80，并且ps80的最终浓度是约0.01％(w/v)。在示例性实施例中，该抗tslp抗体是泰派鲁单抗。
[0205]
试剂盒
[0206]
本披露还提供了试剂盒，该试剂盒包括本文所述的组合物以及包装插页、包装标签、说明书或者指导或披露本文中所披露的任何方法或实施例的其他标记。在某些实施例中，本披露提供了用于产生单次剂量施用单位的试剂盒。在本披露的某些实施例中，包括含有单腔室和多腔室预填充式注射器(例如液体注射器)的试剂盒。
[0207]
给出以下实例仅用于说明本发明，而不以任何方式限制其范围。
[0208]
实例
[0209]
贯穿本文中所提供的实例，使用以下缩写：df，渗滤；ps80，聚山梨醇酯80；sec，尺寸排阻色谱法，f#，配制品编号。另外，贯穿这些实例，提供了用于制造包含泰派鲁单抗的最终配制品的df缓冲剂的组成以及最终配制品的组分的估计浓度。
[0210]
所分析的(例如，任选地在储存后，针对稳定性、粘度)最终配制品的某些组分的最终浓度与df或透析缓冲剂的浓度不同，视存在或不存在反离子而定。不存在反离子时，配制品具有低离子强度。在这种情况下，乙酸盐与泰派鲁单抗共浓缩，使得最终配制品包含相对于df或透析缓冲剂的浓度而言更高的乙酸盐浓度。例如，当df缓冲剂或最终配制品都不包含盐(例如精氨酸hcl)且因而具有低离子强度时，使用包含10mm乙酸盐的df缓冲剂导致包含110mg/ml泰派鲁单抗的配制品(ph5.2)中存在约20mm至约22mm乙酸盐。类似地，不存在盐(例如精氨酸hcl)时，包含10mm乙酸盐的df缓冲剂导致包含140mg/ml泰派鲁单抗的配制品(ph 5.2)中存在约23mm至约25mm乙酸盐。当存在盐(例如精氨酸hcl)时，乙酸盐不与泰派鲁单抗共浓缩，并且因此df缓冲剂的乙酸盐浓度和最终组合物的乙酸盐浓度一般相等。另外，赋形剂可受到体积排阻，或可受到非特异性相互作用影响。例如，在110mg/ml泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低多达约16.67％，并且在140mg/ml泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低多达约10％至约13.3％。根据上文，贯穿以下实例，在考虑以上所描述的赋形剂排阻和乙酸盐共浓缩效应的情况下，提供了最终配制品的组分的浓度。
[0211]
实例1
[0212]
此实例表明了产生高浓度泰派鲁单抗配制品的示例性方法。
[0213]
进行了一系列研究以开发含有高浓度(例如，》70mg/ml)的泰派鲁单抗的配制品。因为该配制品意欲用于皮下施用，所以该配制品需要是等渗的并显示出适合于该施用途径的粘度。例如，泰派鲁单抗(110mg/ml)的配制品需要在23℃下具有约15cp的粘度。还期望该配制品在2℃至8℃下储存超过1年(例如，至少2或3年)之后是稳定的。
[0214]
为了制备高浓度的泰派鲁单抗配制品，将乙酸盐中(ph 5.2)的含有泰派鲁单抗(70mg/ml)的初始溶液针对渗滤(df)缓冲液进行透析。使用总计10次缓冲剂更换以实现完全缓冲剂交换。使用离心机-浓缩器，将该经缓冲剂交换的泰派鲁单抗溶液过度浓缩至泰派鲁单抗浓度，该泰派鲁单抗浓度是目标泰派鲁单抗浓度的约110％。例如，将缓冲液交换的泰派鲁单抗溶液过度浓缩至约200mg/ml以使目标泰派鲁单抗浓度达到180mg/ml。使用在缓冲剂交换步骤中使用的相同df缓冲液，将该过度浓缩的溶液稀释至目标泰派鲁单抗浓度。
[0215]
遵循上述程序，制备了一系列具有不同泰派鲁单抗浓度(范围从约150mg/ml至约250mg/ml)的泰派鲁单抗配制品用于粘度研究。在以下这些配制品种使用两种df缓冲液：包含精氨酸盐(精氨酸谷氨酸盐)的第一df缓冲液和包含脯氨酸的第二df缓冲液。精氨酸以150mm的浓度存在于df缓冲液中，脯氨酸以3％(w/v)的浓度存在于df缓冲液中。使用旋转粘度计在23℃下测试每种配制品的样品的粘度。报告的粘度值是在1000s-1
的剪切速率下。
[0216]
图1提供了该测定的图形结果。图1是绘制了每种配制品的粘度随泰派鲁单抗浓度而变化的图。如该图所示，无论使用何种df缓冲液，随着泰派鲁单抗浓度的增加，粘度也会增加。对于使用第一df缓冲液制备的配制品，粘度总体较低，这支持在泰派鲁单抗的低粘度配制品中使用精氨酸盐。
[0217]
由于赖氨酸在结构上与精氨酸相似(因为两者都是碱性氨基酸)，因此将赖氨酸谷氨酸盐作为降低粘度的赋形剂进行了测试，并与包含精氨酸谷氨酸盐的配制品进行了比较。每种配制品包含约195mg/ml的泰派鲁单抗，用于制备最终配制品的df缓冲液包含100mm精氨酸谷氨酸盐或100mm赖氨酸谷氨酸盐。使用旋转粘度计在23℃下测试每种配制品的样品的粘度。报告的粘度值是在1000s-1
的剪切速率下。包含赖氨酸谷氨酸盐的配制品的粘度为48.9cp，而包含精氨酸谷氨酸盐的配制品的粘度为35.3cp。这些数据表明，两种碱性氨基酸或其盐在降低包含高浓度泰派鲁单抗的配制品的粘度方面表现良好。
[0218]
实例2
[0219]
此实例表明了不同赋形剂对泰派鲁单抗配制品的降低粘度的作用。
[0220]
由于精氨酸和赖氨酸能很好地降低包含高浓度泰派鲁单抗的配制品的粘度，因此使用各种精氨酸盐和赖氨酸类似物来掺入泰派鲁单抗样品，然后测试这些样品的粘度。在这项研究中使用的精氨酸盐是精氨酸盐酸盐、精氨酸乙酸盐、精氨酸谷氨酸盐。将赖氨酸类似物(n-乙酰基赖氨酸(nak))与含赖氨酸的样品一起进行了测试。还测试了钙盐和钠盐对粘度的影响。特别地，使用氯化钙、乙酸钙和氯化钠。
[0221]
通过将包含一种赋形剂的浓缩(5x或10x)储备溶液精确掺入等份的浓缩泰派鲁单抗溶液中，生成包含上述赋形剂之一的样品。通过使用截留分子量为10,000的透析管将包含110mg/ml泰派鲁单抗的水溶液相对于10mm乙酸钠(ph 4.4)进行透析，然后使用amicon ultra离心浓缩仪将透析液进行浓缩以提供包含≥230mg/ml泰派鲁单抗的水性组合物来制备浓缩泰派鲁单抗溶液。该方法创建了具有匹配浓度的样品集。
[0222]
在进行粘度测试之前，在5倍重量稀释后，使用solo-vpe(c技术公司(c-technologies))通过uv吸收斜率光谱法确认每个样品的浓度。确定每个样品的泰派鲁单抗浓度约为210mg/ml。样品中每种赋形剂的浓度为约100mm或约150mm。图2显示了每种赋形剂的浓度。使用seven easy ph计(mettler toledo)确定样品的最终ph。
[0223]
基本上如实例1中所述测试每个样品的粘度，并将其与不含赋形剂或包含脯氨酸或蔗糖的对照样品进行比较。
[0224]
结果显示于图2中。如图2所示，所有包含精氨酸盐、赖氨酸或nak的样品都表现出比对照更低的粘度。尽管含乙酸钙的样品显示了相比于对照较低的粘度，但含氯化钙的样品显示出与对照之一(脯氨酸对照)相同的粘度。氯化钠和精氨酸hcl仅能稍微降低粘度的性能。尽管具有含氯化物的赋形剂的样品的粘度低于对照，但这些样品的性能不如不含氯化物的赋形剂的好。
[0225]
实例3
[0226]
此实例表明了不同赋形剂对高浓度泰派鲁单抗配制品的降低粘度的作用。
[0227]
进行了另一项研究，以测试另外的精氨酸盐的降低粘度作用。在这项研究中，确定每个样品的泰派鲁单抗浓度约为190mg/ml，并且这些样品包含60mm的以下赋形剂中的一种：精氨酸盐酸盐、精氨酸乙酸盐、精氨酸谷氨酸盐、精氨酸丙酸盐、精氨酸天冬氨酸盐、精氨酸甲磺酸盐、精氨酸乙醇酸盐、或精氨酸磷酸盐。在这项研究中，制备并测试了不含赋形剂的对照样品。基本上如实例1和2中所述制备样品并测试粘度。
[0228]
结果于图3中提供。如图3所示，所有包含精氨酸盐的样品都表现出相比于对照更低的粘度。在含精氨酸盐的样品中，包含精氨酸盐酸盐的样品表现出最高的粘度，与图2的数据一致，这表明包含含氯化物的赋形剂的样品通常不能很好地用作降低粘度的赋形剂。
[0229]
实例4
[0230]
此实例表明了组合的赋形剂对粘度的作用。
[0231]
由于精氨酸乙酸盐和乙酸钙在降低高浓度泰派鲁单抗样品的粘度方面效果很好(图2)，因此测定了将这些赋形剂相互组合或与另一种赋形剂组合的效果。将nak、乙酸钠和脯氨酸分别与精氨酸乙酸盐在三个不同的泰派鲁单抗样品中组合，在另一个样品中，将乙酸钙与脯氨酸组合。作为对照，使用不包含赋形剂的样品或包含乙酸钠或脯氨酸的样品。另外，在这项研究中，测试聚乙烯吡咯烷酮(pvp)的含量为从0.5％(w/v)到3％(w/v)不等。每个样品包含约210mg/ml泰派鲁单抗并按照实例2中所述的程序制备。表1中描述出了样品的汇总。
[0232]
表1
[0233]
样品#样品中的赋形剂1无赋形剂-对照2脯氨酸(150mm)3乙酸na(150mm)4arg乙酸盐(75mm)+脯氨酸(75mm)5arg乙酸盐(75mm)+nak(75mm)6arg乙酸盐(75mm)+乙酸ca(75mm)7arg乙酸盐(75mm)+乙酸na(100mm)
8pvp(0.5％(w/v))9pvp(1.0％(w/v))10pvp(2.0％(w/v))11pvp(3.0％(w/v))
[0234]
基本上如实例1所述测定粘度。
[0235]
结果显示于图4中。如图4所示，相对于包含脯氨酸作为唯一赋形剂或乙酸钠作为唯一赋形剂的样品，脯氨酸或乙酸钠与精氨酸乙酸盐的组合导致更低的粘度。与仅包含脯氨酸的样品相比，脯氨酸与乙酸钙的组合也导致粘度降低。乙酸钠仅在与精氨酸乙酸盐结合时才表现出降低粘度的作用。包含精氨酸乙酸盐和乙酸钙两者的样品在该研究中测试的所有样品中显示出最低的粘度。任何测试浓度的pvp都根本无法降低泰派鲁单抗样品的粘度。
[0236]
进行了针对测试精氨酸盐与第二种赋形剂组合的另外的研究。在这项研究中，在有或没有精氨酸乙酸盐的情况下测试了甘氨酸和tris乙酸盐。作为对照，这项研究中使用不包含赋形剂的样品或包含脯氨酸或tris盐酸盐的样品。另外，测试了包含其他精氨酸盐、精氨酸丙酸盐和精氨酸甲磺酸盐的样品。此外，制备并测试了包含tris盐酸盐的样品。每个样品包含约210mg/ml泰派鲁单抗并按照实例2中所述的程序制备。表2提供了每种样品中赋形剂及其浓度的汇总。
[0237]
表2
[0238]
样品#样品中的赋形剂12无赋形剂-对照13脯氨酸(150mm)14甘氨酸(150mm)15tris hcl(150mm)16tris乙酸盐(150mm)17精氨酸丙酸盐(150mm)18精氨酸天冬氨酸盐(150mm)19精氨酸甲磺酸盐(150mm)20精氨酸天冬氨酸盐(75mm)+tris乙酸盐(75mm)21精氨酸天冬氨酸盐(75mm)+甘氨酸(75mm)
[0239]
测试配制品的粘度并将其与不包含赋形剂或包含150mm脯氨酸的对照配制品进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0240]
图5提供了每种配制品的粘度结果。如图所示，相对于仅包含tris乙酸盐或仅包含甘氨酸的样品，将精氨酸乙酸盐与tris乙酸盐或甘氨酸组合导致较低的粘度。tris盐酸盐作为降低粘度剂的性能不佳，这与先前的研究一致，该研究表明含氯化物的赋形剂不能很好地降低高浓度泰派鲁单抗样品的粘度。
[0241]
实例5
[0242]
此实例表明了几种赋形剂对包含高浓度泰派鲁单抗的样品的降低粘度的作用。
[0243]
碱性氨基酸、精氨酸和赖氨酸在降低包含高浓度泰派鲁单抗的配制品的粘度方面表现良好。在一项研究中，使用了包含组氨酸的样品，并将其与包含精氨酸盐的样品进行了
比较。特别地，按照实例2中所述的程序制备包含约190mg/ml泰派鲁单抗的样品。样品包含60mm组氨酸、或60mm精氨酸盐(精氨酸盐酸盐、精氨酸谷氨酸盐、精氨酸丙酸盐、精氨酸天冬氨酸盐、精氨酸甲磺酸盐、精氨酸乙醇酸盐、精氨酸磷酸盐)。还制备了包含60mm n-乙酰基精氨酸(nar)或60mm甲硫氨酸的样品。基本上如实例1中所述测试配制品的粘度，并将其与不含赋形剂的对照配制品进行比较。
[0244]
结果显示于图6中。如图6所示，除精氨酸盐酸盐外，所有精氨酸盐均能很好地降低高浓度泰派鲁单抗样品的粘度。组氨酸样品与大多数精氨酸盐一样有效。含nar和met的样品与精氨酸盐酸盐在降低粘度的方面一样有效。
[0245]
实例6
[0246]
此实例表明了包含精氨酸盐或钙盐的赋形剂的几种组合对包含高浓度泰派鲁单抗的样品的降低粘度的作用。
[0247]
在初步研究中，制备了包含约190mg/ml泰派鲁单抗和60mm nar的样品以及包含约190mg/ml泰派鲁单抗和60mm甲硫氨酸的样品。基本上如实例1所述测量每个样品的粘度。如图7所示，nar和甲硫氨酸将粘度降低到低于60cp。
[0248]
由于精氨酸乙酸盐和乙酸钙在降低高浓度泰派鲁单抗配制品的粘度方面效果很好(图2)，因此测定了将这些赋形剂与nar或甲硫氨酸组合的作用。为此，通过超滤/渗滤(uf/df)制备了一系列包含约180mg/ml或约210mg/ml泰派鲁单抗和精氨酸谷氨酸盐或谷氨酸钙(单独或与nar或甲硫氨酸组合，在一些情况下与nar和甲硫氨酸两者组合)的样品。每个样品的ph在5.1至5.3之间的范围内。图8提供了每个样品中每种上述赋形剂的浓度以及每个样品的ph和粘度。
[0249]
如图8所示，包含较低泰派鲁单抗浓度的样品的粘度低于包含较高泰派鲁单抗浓度的样品的粘度。较低泰派鲁单抗浓度样品的粘度范围为约22cp至约30cp，而较高泰派鲁单抗浓度样品的粘度范围为约48cp至约64cp。通常，包含谷氨酸钙的样品的粘度低于包含精氨酸谷氨酸盐的样品的粘度。对于较低的泰派鲁单抗浓度，添加nar、甲硫氨酸或两者均会进一步降低样品的粘度。
[0250]
实例7
[0251]
此实例表明了几种赋形剂对包含高浓度泰派鲁单抗的配制品的降低粘度的作用。
[0252]
按照实例2中所述的程序制备了包含约210mg/ml泰派鲁单抗和精氨酸盐或已知用于降低粘度的其他赋形剂(即β-丙氨酸、肌氨酸和l-丝氨酸)的样品。每个样本包含150mm的以下之一：β-丙氨酸、肌氨酸、l-丝氨酸、脯氨酸、或精氨酸盐(精氨酸丙酸盐、精氨酸天冬氨酸、精氨酸甲磺酸盐、精氨酸乙醇酸盐、磷酸盐)。测试样品的粘度并将其与不含赋形剂或含150mm脯氨酸的对照样品进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0253]
结果显示于图9a中。与先前的研究一致，精氨酸盐可以很好地降低包含高浓度泰派鲁单抗的样品的粘度(图9a)。粘度范围从约45cp至约65cp。β-丙氨酸、肌氨酸和l-丝氨酸均不能很好地降低泰派鲁单抗配制品的粘度(图9a)。
[0254]
在另一项研究中，按照实例2中所述的程序制备了包含约195mg/ml泰派鲁单抗和甜菜碱、牛磺酸、或脯氨酸的配制品。测试样品的粘度并将其与不含赋形剂的对照样品进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0255]
结果显示于图9b中。与先前的研究一致，包含精氨酸盐的样品最大程度地降低了
粘度。包含牛磺酸的样品对粘度具有适度的影响；该粘度略低于包含脯氨酸的样品的粘度(图9b)。包含甜菜碱的样品对粘度没有影响(图9b)。
[0256]
实例8
[0257]
此实例表明了镁盐对高泰派鲁单抗浓度样品粘度的作用。
[0258]
按照实例2中所述的程序制备了包含约210mg/ml泰派鲁单抗和150mm乙酸镁的样品。测试该样品的粘度并将其与不含赋形剂或含150mm脯氨酸的对照样品进行比较。另外，作为阳性对照，制备包含150mm精氨酸乙酸盐的样品并测试粘度。为了确定较高量的脯氨酸是否能很好地降低高泰派鲁单抗浓度样品的粘度，制备并测试了包含300mm脯氨酸的配制品。基本上如实例1所述测定粘度。
[0259]
结果显示于图10中。如图所示，乙酸镁和精氨酸乙酸盐一样有效，可以将泰派鲁单抗样品的粘度降低到刚好低于60cp。任一浓度(150mm或300mm)的脯氨酸都不会降低样品的粘度(以及精氨酸乙酸盐和乙酸镁)，但两种含脯氨酸的样品的粘度均低于不含赋形剂的对照的粘度。这些数据表明镁盐对泰派鲁单抗配制品具有降低粘度的作用。
[0260]
实例9
[0261]
此实例表明了组氨酸盐对高泰派鲁单抗浓度的粘度的作用。
[0262]
按照实例2中所述的程序制备了包含约210mg/ml泰派鲁单抗和精氨酸盐、组氨酸盐、钙盐或其组合的样品。在这项研究中使用的精氨酸盐是精氨酸乙醇酸盐和精氨酸谷氨酸盐。在这项研究中使用的组氨酸盐是组氨酸乙醇酸盐和组氨酸谷氨酸盐。在这项研究中使用的钙盐是乙酸钙。表3中描述出了每种样品的赋形剂的汇总。
[0263]
表3
[0264][0265]
[0266]
测试样品的粘度并将其与不含赋形剂或含150mm脯氨酸的对照配制品进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0267]
结果显示于图11中。如该图所示，包含精氨酸盐、组氨酸盐、钙盐或其组合的所有样品将粘度降低至低于75cp，而对照显示出高于100cp的粘度。
[0268]
实例10
[0269]
此实例表明了精氨酸乙醇酸盐和精氨酸天冬氨酸盐对高泰派鲁单抗浓度配制品的粘度的作用。
[0270]
按照实例2中所述的程序制备了包含约210mg/ml泰派鲁单抗和精氨酸乙醇酸盐(浓度为50mm、75mm、125mm、或150mm)或精氨酸天冬氨酸盐(浓度为50mm、75mm、125mm、或150mm)的样品。测试样品的粘度并将其与不含赋形剂或含150mm脯氨酸的对照进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0271]
结果显示于图12中。如该图所示，所有包含任何浓度的精氨酸盐的样品均将粘度降低至低于100cp，而对照显示出高于110cp的粘度。尽管精氨酸乙醇酸盐的作用更大，但是增加精氨酸盐的量会降低粘度。
[0272]
此实例表明了精氨酸盐的剂量-粘度-降低的作用。
[0273]
实例11
[0274]
此实例表明了ph对高泰派鲁单抗浓度配制品的粘度的作用。
[0275]
按照实例2中所述的程序制备了包含约210mg/ml泰派鲁单抗和150mm精氨酸天冬氨酸盐或150mm组氨酸乙酸盐的样品。对于精氨酸天冬氨酸盐样品，ph在4.75至5.7之间变化，对于组氨酸乙酸盐样品，ph在5.5至6.5之间变化。测试样品的粘度并将其与不含赋形剂或含150mm脯氨酸的对照进行比较。基本上如实例1所述测定粘度。
[0276]
结果显示于图13a和13b中。如这些图所示，这些盐将粘度降低至低于50cp(对于组氨酸盐)或低于60cp(对于精氨酸盐)，并且变化的ph对降低粘度的作用没有负面影响。
[0277]
这些数据支持包含高浓度的泰派鲁单抗和精氨酸盐或组氨酸盐且ph为约4.75至约6.5的配制品显示出降低的粘度。
[0278]
实例12
[0279]
此实例表明了在40℃下储存1周后，包含精氨酸盐的泰派鲁单抗配制品的稳定性。
[0280]
按照实例2中所述的程序制备了一系列样品，每个样品包含约195mg/ml泰派鲁单抗和150mm精氨酸盐。测试样品的稳定性，并与不包含赋形剂或包含150mm脯氨酸的对照进行比较。为了进行稳定性测试，将样品填充至容器中，然后在40℃下储存长达1周。通过尺寸排阻色谱法(sec)测试样品，以确定样品在多个储存时间点的稳定性。报告了样品中高分子量(hmw)物质的百分比，并且反映了储存期后形成的hmw物质的量。将稳定性测定的结果显示在下表4中。显示了每个样品的高分子量(hmw)物质的百分比。hmw％越低表明配制品的稳定性越高。
[0281]
表4
[0282]
赋形剂％hmw对照(无赋形剂)3.42脯氨酸3.25arg hcl10.61
arg乙酸盐7.93arg谷氨酸盐4.37arg乙醇酸盐6.39arg丙酸盐16.55arg甲磺酸盐8.33arg天冬氨酸盐4.47arg磷酸盐3.14
[0283]
这些数据表明反离子的身份影响hmw的形成，从而影响泰派鲁单抗的稳定性。
[0284]
实例13
[0285]
此实例表明了示例性的本披露的泰派鲁单抗配制品在-30℃、5℃和25℃下储存长达6个月后的粘度和稳定性。
[0286]
为了研究高泰派鲁单抗浓度配制品在不同温度和不同时间储存后对粘度和稳定性的影响，以及评估配制品在经受药品制造过程和相关过程应激时的坚固性，制备了四种包含碱性氨基酸或其盐、钙盐或镁盐和约180mg/ml泰派鲁单抗的配制品，然后储存和/或经受一种或多种药品制造过程和相关过程应激，这些应激包括来自一种或多种冷冻/解冻、配制品合并/混合、减少生物负荷过滤、药品保存、无菌过滤、填充、检查、模拟标签/包装和模拟运输的应激。
[0287]
对于每种配制品，使用特有的渗滤(df)缓冲液对包含泰派鲁单抗的初始溶液进行uf/df处理。在uf/df之后添加表面活性剂。表5列出了用于获得四种配制品的每种df缓冲液的组分以及uf/df后添加的表面活性剂的量。作为对照，使用包含10mm乙酸盐、261mm(3.0％(w/v))l-脯氨酸(ph 5.2)的df缓冲液制备第五配制品(a5)，并在uf/df之后添加表面活性剂0.010％(w/v)聚山梨醇酯80(ps 80)。
[0288]
表5
[0289][0290]
通过将氢氧化钙与谷氨酸盐组合来制备谷氨酸钙，并且通过将精氨酸碱与谷氨酸(谷氨酸盐)组合来制备精氨酸谷氨酸盐。通过用谷氨酸滴定达到最终ph，并使用seven easy ph计(mettler toledo)进行测定。在5倍重量稀释后，使用solo-vpe(c技术公司)通过uv吸收斜率光谱法确认每种配制品的泰派鲁单抗浓度。
[0291]
所分析的(例如，任选地在储存后，针对稳定性、粘度)最终配制品的某些组分的最终浓度与df缓冲液的浓度不同。在这种情况下，组分(例如乙酸盐、谷氨酸盐和钙)与泰派鲁单抗共浓缩，使得相对于df缓冲液中组分的浓度，最终配制品包含较高浓度的组分(例如乙酸盐、谷氨酸盐、钙)。例如，在包含180mg/ml泰派鲁单抗的最终配制品中，df缓冲液中的谷氨酸盐浓度增加至15％，并且在包含180mg/ml泰派鲁单抗的最终配制品中，df缓冲液中的钙浓度增加至50％。
[0292]
另外，赋形剂可受到体积排阻，或可受到非特异性相互作用影响。例如，在110mg/ml泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低多达约16.67％，并且在140mg/ml泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低多达约10％至约13.3％。还例如，在180mg/ml泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低约15％，并且精氨酸浓度可比df缓冲剂中指示的浓度低约40％-45％。
[0293]
通过用于评估产品质量的一系列测定测试了表5中的配制品的粘度、储存后的稳定性。使用ar-g2锥板流变仪(ta仪器公司(tainstruments))在23℃下以1000 1/sec的剪切速率测量粘度。除非另有说明，否则粘度是在没有表面活性剂的情况下测量的。为了测量稳定性，将每种配制品的样品填充到容器中，然后在约-30℃至约40℃的温度下(例如-30℃、5℃、25℃、40℃)储存长达6个月(例如1周、2周、4周、3个月、6个月)。通过尺寸排阻色谱法(sec)测试样品，以确定配制品在多个储存时间点的稳定性。报告了每种配制品的高分子量
(hmw)物质的百分比和主峰的百分比。主峰百分比反映了在指定的储存时间后剩余的泰派鲁单抗(单体形式)的量。
[0294]
如图15a-15d和图16所示，精氨酸谷氨酸盐(argglu)和精氨酸谷氨酸盐脯氨酸(argglupro)配制品在保持降低的粘度的同时提供了最佳的稳定性。在-30℃、5℃和25℃的温度下进行的六个月的研究证实，argglu和argglupro配制品显示出最少的蛋白质聚集。argglu和argglupro配制品40℃高应激下在4周后也比谷氨酸钙(caglu)或谷氨酸钙脯氨酸(caglupro)配制品更稳定。
[0295]
毛细管电泳-十二烷基硫酸钠(ce-sds)用于在非还原(nr)或还原条件(rce-sds)下分离变性的蛋白质大小变体。在rce-sds下，测量了重链和轻链的释放和稳定性。在测试条件下，重链+轻链释放≥98％，而重链+轻链稳定性≥96％(图17)。
[0296]
粘度分析表明，argglu和argglupro配制品的粘度保持在低于25cp，并保持在约20-22cp或更低(图18)。
[0297]
在-30℃、5℃和25℃的温度下在六个月时间点的稳定性分析证实，argglu和argglupro配制品显示出最少的蛋白质聚集。总体而言，这些条件表明精氨酸谷氨酸盐和精氨酸谷氨酸盐脯氨酸配制品在降低抗tslp抗体配制品中的粘度和蛋白质聚集方面均有效。
[0298]
基于结果，表6中列出了示例性预期的赋形剂范围。如表5中的那些预期的表面活性剂的量。“与
……
一起配制”是指渗滤(df)缓冲液中赋形剂的量。“于
……
中，配制”是指混合后赋形剂的最终估计浓度，并考虑到混合物产生的任何排斥特性或共浓效应。
[0299]
表6
[0300][0301][0302]
在此所引用的所有参考文献(包括出版物、专利申请、和专利)均通过引用在此并
入，引用的程度如同每个参考文献被个别地并且明确地指示通过引用结合并且以其全部内容在此阐述。
[0303]
除非本文中另外指示或上下文明显相矛盾，否则在描述本披露内容的上下文中(特别是在以下权利要求的上下文中)使用术语“一个/一种(a/an)”和“该(the)”以及类似指示物将视为涵盖单数与复数两者。除非另作描述，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”将视为开放性术语(还即意指“包括(但不限于)”)。
[0304]
在本文引证数值的范围仅旨在用作单独地提及每个单独的数值落在该范围内和每个端点的速记的方法，除非本文另外说明，并且每个单独的数值和端点被结合到本说明书中就像它被单独地在本文引证一样。
[0305]
除非本文中另外指示或与上下文另外明显相矛盾，否则本文所述的所有方法均可按任何合适的顺序进行。除非另外要求保护，否则关于本文提供的任何和所有实例或示例性语言(例如“诸如”)的使用仅旨在更好地描述本披露内容，而非对本披露内容的范围施加限制。说明书中的语言不应当被解释为指示任何未要求保护的要素为实践本披露所必需的。
[0306]
本文描述了本披露内容的优选实施例，包括诸位发明人已知用于实施本披露内容的最优选地方式。在阅读以上描述后，那些优选实施例的变化对于本领域中普通技术人员是显而易见的。诸位发明人预期熟练技术人员视情况采用此类变化，且诸位发明人旨在以除本文特别描述外的方式实施本披露内容。因此，本披露内容包括所附权利要求中叙述的主题的为适用法律所允许的所有修改和等同物。此外，除非本文中另外指示或上下文另外明显相矛盾，否则本披露内容涵盖上述要素呈所有可能变化的任何组合。