用于预防和治疗微生态失调的组合物的制作方法

1.本发明涉及微生物组及其与健康和疾病的相关领域。特别是涉及用于预防和治疗微生态失调的组合物。


背景技术：

2.微生物组(microbiome)和微生物群(microbiota)有时被作为类似的术语使用。微生物群是指生活在我们体内或身体上的由细菌、真菌、古细菌、病毒和寄生虫组成的一组微生物。而微生物组是一个更广泛的术语，指的是整个栖息地，不仅包括微生物，还包括其基因、代谢产物及其生态系统。这种肉眼不可见的3d体系结构依赖于细胞外基质，该基质充当生物膜的物理化学支架，并且，在本发明人看来，是发生微生态失调(dysbiosis)和恢复健康(微生态平衡(eubiosis))的关键。这种支架结构不仅具有化学特性，而且在物理上也有助于形成能够提供免受环境侵害(湿度变化、ph值变化、温度波动、防腐剂、抗菌剂、以及其他因素的应激作用)的保护的体系(universe)。理想情况下，它还应容纳细胞生命所必需的物质，即水、营养物质，并限制有害物质的渗透。
3.生物膜被理解为生活在身体不同部位的特定微生物群及其生态系统，附着在三维组织的特定表面。生物膜的示例有口腔、牙齿、皮肤和阴道生物膜。
4.微生物群在出生时即逐渐在体内或机体上定居，具体取决于分娩途径(阴道或剖宫产)、母亲的微生物组、营养类型、地理环境、习惯、心理状态和生活方式。它赋予宿主不同的个性，在宿主和微生物群之间建立双向影响，反之亦然。已知生活方式、压力、教育、性格、年龄、地理环境、气候会改变微生物群及其生态系统，同时，微生物群也可能改变生态系统，最终改变个体。药物、烟草和酒精、应激、伤口、口腔呼吸、睡眠呼吸暂停、进食障碍和其他全身性疾病，如癌症和糖尿病，会对口腔、肺、肠、阴道和皮肤等不同部位的身体粘膜微生物组产生负面影响，从而产生一系列新发现和新出现的各种严重程度的微生态失调。
5.粘膜是体腔和通向外部(主要是呼吸道、消化道和泌尿生殖道)的管道的粘膜衬里。其中包括口、鼻、眼睑、气管、肺、胃、肠、输尿管、尿道、阴道以及不同部位之间的连接。身体粘膜排列在所有导管和管道上，具有共同的组织学特征和粘液分泌物，起屏障作用并适应不同部位(乳头、微绒毛等)。皮肤在全身也表现出共同的组织学特征，并且还具有屏障功能，根据部位(毛发、汗腺等)具有一些适应性特性。粘膜和皮肤是最广泛的微生物组栖息地，也是最容易受到连接不同部位的微生物组的失衡或微生态失调的影响。
6.微生态失调与一般健康之间的关系已通过几项研究进行了描述，这些研究产生了不同的思想流派，主张不同微生物组之间的联系，这些不同微生物组起源于今天所知的口-肠轴、口-肝轴、口-肺轴、口-肠-肝轴、口-脑轴、口-心血管轴、肠-肺轴、肠-皮肤轴、口-关节轴、口-胸轴(lira-junior&2018)以及本文中首次描述的口-皮肤轴(见下文)。
7.关于口-肺轴，牙周炎微生态失调作为炎性介质的来源与肺部疾病的恶化有关(paju&scannapieco,2007)。在肺炎、感冒、流感、囊性纤维化、肺纤维化、慢性阻塞性肺病(copd)等不同人群中，已有越来越多关于肺微生物组的作用及其对肺部疾病进展和严重程
度影响的证据的研究。
8.迄今为止，通过与肠道微生物组失衡相关的皮肤炎症性疾病的肠-皮肤轴证据已转化为对益生菌通过肠道微生物组改善皮肤状况的潜在益处的认可(atarashi,wataru,&change,2017)。最近出现了移植措施，试图将这个亚体系从健康个体(供体)复制到患病受试者(受体)。同样，一些临床医生主张对健康受试者进行皮肤微生物群移植，以改善特应性皮炎的症状和临床病程，而不是使用针对病原体金黄色葡萄球菌的抗生素。不幸的是，微生物组移植疗法需要进一步开发，该疗法费用可能较高，到目前为止，几乎没有实际应用于临床，而且离成为常规疗法仍需很长时间。
9.到目前为止，通过替代或移植(益生菌科学)或根除(抗生素治疗)的方式纠正不良有害微生物组的尝试已证明存在不确定的安全性和有效性问题。因此，仍然需要用于预防和治疗微生态失调的改进疗法。


技术实现要素：

10.本发明的第一方面涉及用于预防和/或治疗微生态失调的组合物，所述组合物包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
11.本发明的第二方面涉及包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物在制备用于预防和/或治疗微生态失调的药物中的用途，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
12.本发明的第三方面涉及治疗有此需要的受试者的微生态失调的方法，所述方法包括施用有效治疗量的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
13.本发明的第四方面涉及一种预防受试者中微生态失调的方法，所述方法包括向受试者施用有效预防量的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
14.本发明的第五方面涉及包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物在口腔、鼻腔、阴道和/或皮肤卫生中的用途，以及在维持人体粘膜和/或皮肤天然保湿作用中的用途，其中橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
15.根据以下描述和所附权利要求，本技术的其他目的、特征、优点和方面对于本领域技术人员来说将变得显而易见。
附图说明
16.图1为皮肤和黏膜(口腔黏膜)的结构示意图，突出皮肤与黏膜的相似性和对应性。
17.图2为微生态平衡和微生态失调的微生物组动力学模型。生态系统是微生物组自我修复循环的一部分，旨在促进共生(健康)和预防微生态失调(疾病)，但也是微生物组恶性循环中延续微生态失调的因素。
18.图3示出了本发明组合物的微生物组动力学。本发明的组合物增强了生态系统的恢复力，促进了健康的环境和微生物群的平衡及微生态平调。
具体实施方式
19.如本文所用，除非上下文另有明确说明，单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”包括它们相应的复数形式。除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的技术人员通常理解的含义相同。为了便于理解和阐明本发明上下文中特定术语的含义，提供了适用于本发明不同方面的所有实施方案的以下定义及其特定的和优选的实施方案：
20.如本文所用，“微生物组”是指在人体内和人体上持续和短暂地生活的微生物及其遗传物质，包括真核生物、古细菌、细菌和病毒(包括细菌病毒(即噬菌体))。“遗传物质”包括基因组dna、rna如核糖体rna、表观基因组、质粒和所有其他类型的遗传信息。健康的微生物组为宿主提供多种益处，包括对广谱病原体的定植抗性、必需的营养生物合成和吸收以及维持健康上皮和适当控制的全身免疫的免疫刺激。微生物组的特征可能存在于健康个体和患病个体中。在健康个体中，微生物组被定义为正常的。
21.与微生态平衡相反，微生态失衡是由于微生物组内的平衡丧失而发生的，这种平衡丧失是由于微生物群的转变或微生物组生态系统的变化所致。
[0022]“微生态失调”指身体任何部位的微生物组状态，包括粘膜和皮肤表面，其中生态网络的正常多样性或功能被破坏。因此，在一个特定的实施方案中，微生态失调是粘膜微生态失调、皮肤微生态失调或其组合。微生物群的优选(例如，理想、正常)状态的任何破坏均可被视为微生态失调，即使此类微生态失调不会导致可检测到的健康状况变差。这种生微生态失调状态可能不健康，可能仅在某些条件下不健康，或者可能妨碍受试者变得更健康。微生态失调可以同时是疾病的原因或后果，也可能使病程恶化和/或加重病程。微生态失调可能是由于多样性下降、一种或多种病原体或致病生物、仅在患者体内存在某些遗传或环境条件时才可能导致疾病的共生生物的过度生长，或向不再为宿主提供有益功能因而不再促进健康的生态网络转移。微生态失调可能由疾病(糖尿病、癌症、感染、肥胖、抑郁症)、药物治疗(如药物滥用)(如抗生素，如减少共生菌群的抗生素)或其他环境因素(ph值变化、炎症、饮食、药物)引起。
[0023]
在“微生态失调”或共生关系被破坏的情况下，微生物组功能可能丧失或紊乱，导致对病原体的易感性增加、代谢特征改变或促炎信号诱导，从而导致局部或全身炎症或自身免疫。
[0024]
在根据本发明任一方面的特定实施方案中，所述微生态失调选自粘膜微生态失调、皮肤微生态失调或其组合。
[0025]
在根据本发明任一方面的另一特定实施方案中，所述微生态失调选自口腔微生态失调、肺微生态失调、皮肤微生态失调和/或阴道微生态失调。
[0026]“口腔微生态失调”是指影响受试者部分或全部口腔粘膜和/或牙齿的微生态失调。
[0027]“皮肤微生态失调”指影响受试者部分或全部皮肤的微生态失调。
[0028]“阴道微生态失调”指阴道疾病。
[0029]“肺微生态失调”指影响肺和/或其附近部位(如气管)的全部或部分粘膜的微生态失调。
[0030]
术语“预防”或“防止”是指预防、延缓和/或降低疾病和/或与疾病相关的体征和/
或症状的严重程度。
[0031]“有效预防量”是指当递送时预防、延缓和/或降低疾病和/或与疾病相关的体征和/或症状的严重程度的量。
[0032]“治疗”指疾病和/或与疾病相关的体征和/或症状的减轻或消除。
[0033]“有效治疗量”是指有效减少或消除疾病和/或与疾病相关的体征和/或症状的量。
[0034]
特别地，在本发明中，所述疾病是微生态失调或由于微生态失调而加重或恶化的病变。
[0035]
人类口腔微生物组数据库(homd)已描述了口腔分类群和门、株，达到近620个分类群，其中65％迄今已被培养，而在身体的其他部位仅培养了1％。厚壁菌、拟杆菌、变形菌、放线菌、螺旋菌和梭杆菌占95％。在皮肤中，四个优势门是放线菌、变形菌、厚壁菌和拟杆菌。皮肤和口腔都表现出与不同微环境相关的不同的局部解剖种群(topographic populations)。在口腔中，牙齿的上颚和舌面要求与龈下或颊或舌不同的门，与身体上部的皮脂腺环境类似，而与身体皮肤层和下部的皮肤中具有较高多样性的门相对。皮肤和口腔都具有高度的局部解剖多样性(topographical diversity)，如前所述由环境决定，在个体中具有高度的时间可变性，但在每个个体的整个生命周期中相当稳定。在过去几年中，许多研究人员关注的丰度在今天仅被视为疾病的相对标志物，因为当涉及到口腔时，所有个体谈到皮肤时都会涉及葡萄球菌、丙酸杆菌和棒状杆菌，而谈到口腔时会涉及变形链球菌和牙龈卟啉单胞菌。目前的研究认为按压皮肤(表皮链球菌)或口腔(变异链球菌)的典型的厚壁菌门使得葡萄球菌门的另一个厚壁菌门利用炎症条件穿透皮肤成为可能。在口腔中，通过施用减少变异链球菌数量的防龋剂产生的变化将导致这些细菌的酸性代谢产物减少，并增强ph值的增加，而ph值的增加将被偏好较高ph值和较低氧梯度(即导致牙周炎的厌氧龈下革兰氏阴性菌)的溶糖细菌所利用。牙周炎通常与口腔扁平苔藓(olp)患者皮肤中的葡萄球菌渗透有关。口腔扁平苔藓是一种常见的慢性自身免疫性皮肤粘膜疾病，据报道仅次于口腔溃疡，是第二常见的口腔粘膜疾病。20％至35％的olp患者的皮肤、头皮和/或阴道也有病变。
[0036]
口腔中最常见的微生物群为链球菌、乳酸杆菌和普雷沃氏菌。对有吸入风险的肺炎患者进行的呼吸道细菌分析显示，口腔链球菌是在支气管和肺中检测到的最常见细菌门。
[0037]
在平衡的非炎性健康条件下，皮肤和粘膜都表现出屏障样特性，因为微生物组和人细胞在每个组织的整个延伸部分的不同区域。共生的双重宿主-微生物相互作用需要微生物群和宿主上皮细胞之间的原子分离。当皮肤或粘膜被破坏时，如在伤口或炎性病症中所见，机制导致宿主和微生物组之间的关系改变，这不仅导致炎性微生态失调疾病的环境，而且最终导致癌症发生。目前，对口腔的研究与以下发现一致：口腔微生态失调和微生态失调生物膜是龋齿和牙周炎等常见高度流行疾病的原因。在目前的研究人员看来，牙齿有自己的微生物组，只要符合共生关系，就能保护它们免受挑战。同时，健康的牙齿本身在萌出时，从穿透口腔粘膜的一刻起，就是上颌骨的屏障。当牙齿最终脱落时，由于屏障功能是人类生存所必需的，因而粘膜取代了它的位置并封闭了间隙。如前所述，对于皮肤和粘膜，牙齿及其微生物组处于物理化学上彼此连接的不同隔室中，并且两个隔室的完整性对于健康和屏障功能是必不可少的。当微生物组受损时，例如由于两个隔室的分离和完整性丧失、破
坏或消失，宿主和微生物组之间新的异常关系导致非共生炎性疾病(牙周炎微生态失调)或/和牙齿通透性增加(超敏反应、脱矿质和牙齿结构损坏)。当这种微生物组丧失、破坏或损坏时，牙齿的屏障也会消失。发生过敏、脱矿质、龋齿和物理、化学或混合来源的牙齿磨损(磨牙症、侵蚀、脱落、磨损)。被破坏的微生物组屏障不再充当亲脂性屏障，牙齿开始溶解在酸性或极酸性介质中。每张嘴都不一样。牙齿的矿物质含量和牙釉质厚度也因人而异。唾液流量和唾液中的矿物质饱和度等其他变量共同解释了为什么有些牙齿会比其他牙齿抵抗力更强，称之为临界ph值(dawes,2003)。体外条件忽视了活的微生物及其生态系统，它们很可能是矿物质、水、肽和专属代谢的主要储库，会阻止和防止人类牙齿溶解。这一理论得到以下事实的支持：如果没有牙菌斑，即使刺激唾液，也无法促进矿物质沉积。鉴于目前的发明人，如一些作者开始研究的那样，异常微生物组通过刺激唾液或通过补充矿物质或再矿化剂来使牙齿再矿化的努力徒劳无功(lussi&carvalho，the future offluorides，2015)。当牙齿被物理研磨和磨损时，随着最初隐藏的牙本质的暴露，生境发生了变化，为微生物组的改变提供了支持。
[0038]
牙齿磨损和牙齿结构损坏越多，对口腔微生物群的挑战就越大，因为口腔微生物群会寻找更平坦和改变的牙齿表面附着。在牙齿磨损的晚期病例中，邻间区域会随着所有咬合面的消失而消失，同时特定微生物群生境也会消失。咀嚼功能最终受损，向更软的饮食转变，导致牙齿进一步脱落和更严重的口腔微生态失调，这是本发明人描述的微生态失调恶性循环的一个例子。
[0039]
通过杀菌剂、消毒剂、化学或物理清创术对抗任何形式的牙菌斑或牙生物膜，尚未被证明在根除如牙龈炎或牙周炎等牙周疾病以及过早牙齿脱落后的龋齿方面有效。越来越多的患者接受种植牙治疗，这导致了一种新的疾病，称为种植体周围炎。放置在非角质化牙龈部位的植入物缺乏厚粘膜屏障，表现出无法预防或使用抗生素治疗的特定种植体周围炎微生态失调的可能性。由于人工材料造成的生境变化而导致的微生物组失衡，佩戴假体或牙齿修复体的患者以及接受正畸治疗的快速增长的患者群体也可能遭受口腔微生态失调。
[0040]
与在口腔中一样，皮肤是多种微生物组的家园，具有针对不同皮肤类型和部位的特定微生物群。皮肤像粘膜一样表现出高脱屑率和细胞更新率。根据皮脂或水的分泌程度，我们可以发现3种不同类型的皮肤:
[0041]-皮脂腺区域包括头皮、前额、背部、耳后皱褶和鼻翼皱褶。
[0042]-潮湿区域包括腋窝、腹股沟皱褶、臀肌皱褶、足底、腘窝和肘前窝。
[0043]-干燥区域包括前臂、臀部和手的各个部位。
[0044]
不同程度的炎症和溃疡是皮肤病最常见的体征。当皮肤不再处于健康状态时，表现为屏障功能受损，出现开裂和发红。
[0045]
在日常对皮肤的挑战中，肥皂和面霜中的酒精和去污剂可破坏表皮屏障的完整性，除其他机制外，通过去除促进几种有害细菌(金黄色葡萄球菌)定植的脂质。特应性皮炎就是这种情况，在皮炎发作期间，细菌定植引发向与健康皮肤不相容的多样性低的物种的转移。类似的情况也适用于银屑病。
[0046]
某些疾病与粘膜和皮肤微生物组之间存在联系，如慢性炎性疾病和癌症。在慢性炎性疾病(如ii型糖尿病)中，口腔和皮肤微生物组不仅参与了这种复杂代谢疾病的发病机制和病程，而且糖尿病改变了口腔、皮肤和肠道微生物组的环境，越来越多的证据表明存在
糖尿病微生态失调。糖尿病口腔菌群失调病程伴有较高的龋齿风险、较高的牙周炎患病率和严重程度，而糖尿病皮肤微生态失调病程伴有足溃疡、皮肤弹性减弱、皮脂腺活性降低和脂质减少。
[0047]
此外，皮肤和口腔微生物组与导致黑色素瘤和口腔癌的癌变有关。从另一个角度来看，癌症微生态失调由于患有癌症而发生。这种癌症微生态失调将一组发病率低但对生活质量有较大负面影响的体征和症状重新组合在一起。癌症口腔微生态失调的病程或特征在于下述症状、或为下述症状中的一种、一些或全部：口腔溃疡、味觉异常(改变的口味)、高骨折率、高龋齿率、唇炎(唇角裂痕)、口腔疼痛，甚至高度相似的进食障碍和皮肤受损。癌症皮肤微生态失调的病程特征在于下述症状、或为下述症状中的一种、一些或全部：皮肤疼痛、触感改变、高裂率、舌炎(ungueitis)、疼痛以及与身体远端部分(主要是手和脚)皮肤以及背部、腿部和躯干皮肤相关的功能损伤。
[0048]
口腔粘膜与身体的任何粘膜一样，在许多方面与皮肤相似。口腔粘膜由两个不同的层组成：复层鳞状上皮和固有层。在口腔的某些地方，口腔粘膜通过松散的结缔组织成(粘膜下层)附着于下层结构。这三层类似于皮肤的表皮层、真皮层和皮下层(见图1)。事实上，扁平苔藓和天疱疮等病理改变会影响皮肤和口腔粘膜。因此，在本发明中，它们是口腔微生态失调和皮肤微生态失调两者的示例。
[0049]
肺微生态失调是指肺微生物组破坏后失去体内平衡，开始出现微生态失调。肺部微生态失调最常见的诱因是环境变化，如脱水、氧疗干燥、温度变化、ph变化、烟草、烟草替代品(电子烟)、生活习惯、酒精、饮食、污染、辐射、氧气梯度、药物摄入、疾病(如癌症、感染和糖尿病)、肥胖和衰老等。有趣的是，在老年群体中发现体内不同微环境微生物组的多样性和特异性下降，这解释了与物种丰富性丧失相关的衰老脆弱性增加。
[0050]
肺部微生态失调也可能是细菌、病毒或真菌侵入粘膜的结果，这些细菌、病毒或真菌与多样性下降的微生物群相遇。例如，微生物组的变化仅仅是肺炎发生的原因或后果，还是与疾病状态一致或相关，仍是一个有争议的问题。然而，鉴于目前的研究人员，本发明中的微生物组恶性循环以及疾病中的微生态失调和微生态失调中的疾病的持续存在被描述为微生态平衡(eubiosis)和微生态失调(dybiosis)的微生物组动力学模型，解释了为什么肺健康是宿主和微生物群之间复杂相互作用的结果。
[0051]
鉴于上述内容，在本发明任何方面的特定实施方案中，“口腔微生态失调”包括但不限于口臭微生态失调、龋齿微生态失调、牙周微生态失调、口疮微生态失调、种植体周围炎微生态失调、扁平苔藓微生态失调、天疱疮微生态失调、睡眠呼吸暂停微生态失调、应激微生态失调、牙齿磨损微生态失调、糖尿病口腔微生态失调、癌症口腔微生态失调及其组合。优选地，口腔微生态失调选自龋齿微生态失调、牙齿磨损微生态失调、牙周微生态失调、口疮微生态失调、种植体周围炎微生态失调、睡眠呼吸暂停微生态失调、糖尿病口腔微生态失调、癌症口腔微生态失调及其组合。
[0052]
同样，在本发明任何方面的特定实施方案中，“皮肤微生态失调”包括但不限于特应性皮炎微生态失调、寻常痤疮微生态失调、银屑病微生态失调、皮肤干燥症微生态失调、皮肤过敏微生态失调、放射性皮炎微生态失调、日光性皮炎微生态失调、接触性皮炎微生态失调、脂溢性皮炎微生态失调、头皮微生态失调(头皮屑、脱发)、体臭微生态失调(腋窝、脚)、皮肤过早老化微生态失调、扁平苔藓微生态失调、天疱疮微生态失调及其组合。优选
地，皮肤微生态失调选自特应性皮炎微生态失调、寻常痤疮微生态失调、银屑病微生态失调、皮肤干燥症微生态失调、体臭微生态失调、皮肤过早老化微生态失调、头皮微生态失调及其组合。
[0053]
在本发明任何方面的特定实施方案中，“肺微生态失调”包括但不限于慢性肺微生态失调、慢性阻塞性肺(copd)微生态失调、囊性纤维化微生态失调、哮喘微生态失调、气管炎微生态失调、支气管炎微生态失调和呼吸道感染性微生态失调。
[0054]
在一个特定的实施方案中，呼吸道感染是由于细菌定植(例如链球菌)、病毒定植(例如流感、副流感、冠状病毒、新型冠状病毒(sars-cov-2)、合胞体呼吸道病毒)或真菌定植(例如念珠菌、肺孢子虫)引起的下呼吸道感染。更具体地，所述呼吸道感染选自感冒、肺炎、流感和sars-cov-2(新冠肺炎，covid-19)。因此，在根据本发明的特定实施方案中，肺微生态失调是感冒微生态失调、肺炎微生态失调、流感微生态失调或sars-cov-2微生态失调。
[0055]
在本发明的一个特定实施方案中，通过临床参数(体征和症状)评估口腔微生态失调，例如：刷牙时的牙龈出血、牙齿过敏、牙龈发炎或舌乳头发炎、与微生态失调相关的恶臭、牙齿变色、牙齿磨损(侵蚀、磨损、磨牙症)和/或龋齿、粘膜脱屑、粘膜脱水、溃疡、口疮性溃疡、疼痛、味觉异常(味觉改变或消失)、缺乏弹性、种植体周围炎。同样，通过临床参数评估皮肤微生态失调，如：皮肤干燥、瘙痒、发红、脱屑、溃疡、疼痛、出血、缺乏弹性、缺乏触觉敏感性(触觉改变或触觉消失)、日晒后的小泡或安瓿(ampules)。
[0056]
在本发明的另一个特定实施方案中，通过临床参数评估肺微生态失调，所述临床参数例如痰、流涕、充血、结膜炎、头痛、肌痛、疼痛、咳嗽、干燥、喉咙痛、粗糙、声音粗哑、味觉障碍-味觉丧失、嗅觉丧失、氧合水平受损、胸痛或胸闷、呼吸短促、呼吸困难或/和发热。
[0057]
复杂的新冠肺炎无论是在起源还是在治疗方面仍是一个未知的对象。然而，越来越多的证据表明微生物组改变在疾病过程中的作用，这为预防和治疗提供了一个新的视角。与健康受试者相比，新冠肺炎患者的细菌多样性下降，以及在大多数轻度新冠肺炎患者中类似的和同时重建上呼吸道和肠道微生物组的事实，支持了与冠状病毒疾病相关的微生态失调影响肺外的理论。此外，衰老所固有的老年人大多数微生物组环境多样性的下降可能最终解释了新冠肺炎迅速且严重的进程和高致死率的原因。目前的研究人员认为，冠状病毒微生态失调利用微生物组的破坏，侵入肺粘膜至其他粘膜如消化道，也侵入皮肤，是口-肺-肠-皮肤轴的一个特殊例子。事实上，与冠状病毒代谢异常相关的症状和体征出现在口腔、肺和上呼吸道、消化系统及皮肤中，作为不断更新的症状和体征列表。在任何情况下，在本发明中，新冠肺炎微生态失调被认为是肺微生态失调的特定实施方案，因为最初它被描述为呼吸道感染。
[0058]
按照前面列出的顺序，冠状病毒微生态失调的体征和症状为口腔、粘膜干燥(口干)、味觉丧失或缺失(味觉改变或丧失)、水疱性病变、口疮样病变、嗅觉丧失或缺失(嗅觉丧失)。在上呼吸道及肺部为呼吸道黏膜干燥(干咳)、声音改变、喉咙痛、呼吸困难及呼吸急促。在肠道为腹泻，在皮肤为皮肤潮红(skin rush)、手指和脚趾变色。
[0059]
在第一方面，本发明涉及用于预防和/或治疗微生态失调的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物(以下称为本发明的组合物)。根据实施例7，其还指本发明的组合物用作预防和/或治疗微生态失调的佐剂。
[0060]
包括橄榄产品(例如橄榄油)、甜菜碱和木糖醇的组合物在本领域中是已知的，参
见例如ep 2119477 a1和wo 2019/025366 a1，但是用于其它不相关的用途。特别地，ep 2119477中所述的组合物可用于治疗口干燥症。现有技术中没有任何内容表明适当的唾液功能可防止微生态失调的发生，无口干症患者也不会出现微生态失调风险。唾液分泌充足并不能保证微生态平衡，否则正常的唾液流动则可以预防龋齿、牙周炎和其他口腔微生态失调。事实上，没有任何关于唾液流动在最普遍的口腔微生态失调(即牙周炎)中的预防作用的记载，相反，口腔干燥症患者并未表现出更高的牙周炎风险。同样，患有进食障碍或胃食管反流障碍的患者会出现代偿性唾液溢出，但仍会出现易于识别的牙齿磨损口腔微生态失调，包括牙齿生物膜的破坏(首先是牙齿的舌面，其次是咬合面(咀嚼面)，最后是颊面)。牙齿最终会失去所有亲脂性内容物，从而失去该牙齿生物膜应发挥的屏障作用，并破坏无法通过任何类型的护齿器挽救的牙齿。
[0061]
wo 2019/025366 a1的组合物可用于治疗肿瘤治疗诱导的口腔胃肠道粘膜炎(otiom)，这是一种危及正在接受化疗和/或放疗治疗的癌症患者生命的疾病。这种otiom与口腔和皮肤微生态失调的不同之处在于，它是自限性的，不影响皮肤或牙齿，与微生物组无关，且与任何来源的病原体无关。这是一种急性毒性口腔胃肠粘膜损伤，是癌症治疗中最令人担忧的并发症，没有抗生素、益生菌或益生元进行治疗。事实上，由于otiom的高风险，在otiom期间绝对禁止使用益生菌。
[0062]
有趣的是，如实施例中所示，由于包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的本发明组合物对预防和/或治疗微生态失调有效而具有新的医药用途。令人惊讶的是，与仅包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇中的一种成分的组合物或包括橄榄产品和甜菜碱的组合物相比，包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物显示出预料不到的协同效应(参见实施例1、3、4和8)。此外，不同的实施例示出了本发明的组合物用于治疗和/或预防粘膜微生态失调和皮肤微生态失调的效用。
[0063]
上述实施例是微生态失调的特定实施例和优选实施例，且适用于本发明的所有方面。
[0064]
在根据本发明第一方面的特定实施方案中，橄榄产品选自橄榄油、橄榄果实提取物及其混合物。橄榄果实提取物可以是橄榄果实液体提取物(也称橄榄果实液体提取物)、橄榄果实干提取物(也称橄榄果实干粉提取物)或其混合物。优选地，橄榄果实提取物是橄榄果实液体提取物和橄榄果实干提取物。
[0065]
橄榄果实提取物是本领域技术人员已知的并且可商购获得。同样，从橄榄果实中提取的方法也是众所周知的。所述方法的实例公开在wo2008142178a1和es2051238a1中。在一个特定的实施方案中，橄榄果实提取物是富含羟基酪醇的橄榄果实提取物。更具体地，橄榄果实提取物包括至少20％(w/w)的羟基酪醇。nutexa公司和natac等公司提供了这些提取物的示例。
[0066]
优选地，橄榄产品是橄榄油，更优选橄榄油选自特级初榨橄榄油、初榨橄榄油，并且更优选的，橄榄油是特级初榨橄榄油(evoo)，如实施例中所示，其在治疗和预防微生态失调方面具有显著效果。
[0067]
甜菜碱可以以任何形式使用，无论是水溶液还是粉末。在根据前述实施方案中任一个的特定实施方案中，甜菜碱选自三甲基甘氨酸(tmg)、椰油酰胺丙基甜菜碱、二甲胺甜菜碱、烷基(c
12-c
18
)酰胺基甜菜碱、烷基(c
8-c
18
)甜菜碱、酰胺基甜菜碱(amidobetaines)、
烷基酰胺基甜菜碱、磺基羟基甜菜碱及其组合，优选甜菜碱是三甲基甘氨酸，如实施例中所示，其在治疗和预防微生态失调方面具有显著效果。更优选地，选择三甲基甘氨酸用于粘膜和皮肤的制剂。
[0068]
橄榄油因其抗菌、抗真菌和抗病毒的特性而被用于食品工业中作为防腐剂。已公布其具有刺激性气味，在特应性皮炎和非特应性皮炎受试者的皮肤局部施用后，通过增加经表皮失水(tewl)对角质层完整性产生屏障破坏作用。在皮肤中，橄榄油据称会引起接触性皮炎，具有抗炎作用，但也具有刺激性副作用，会破坏屏障。通常用于漱口水的甜菜碱由于其防腐活性，在使用超过2周时有扰乱生物膜健康平衡的风险。
[0069]
木糖醇是一种众所周知的防龋成分，越来越多地被介绍给消费者。木糖醇已证明具有抗链球菌活性，特别是当其本身用作再矿化剂时。然而，一项利用rrna基因测序从最新计算科学中获益的最新研究调查了木糖醇对口腔微生物群组成的影响，结果显示，在使用木糖醇或山梨醇后，没有证据证实其为先前记载的龋齿相关的或龋齿保护品种。这是关于木糖醇对牙齿有益的新争议。有趣的是，当包含在口腔清洁组合物中时，如果联用其他具有再矿化潜力的矿物质和盐，则发现，木糖醇被证实其抗牙菌斑作用下降。尽管当以高百分比或长时间口服木糖醇时，木糖醇可能对人类有有益作用(对动物有高毒性)，但随后的消化改变(腹胀、腹泻)可能是不良肠道微生物组失衡的标志，在停止摄入后会恢复稳态(storey，lee和bornet，2007)。在皮肤微生态失调和/或阴道微生态失调(阴道病)中，高浓度的木糖醇也是不可取的，因为它会改变杆菌(乳杆菌)、链球菌以及葡萄球菌的种类。令人惊讶的是，本发明的组合物没有表现出任何这些有害作用。事实上，本发明的组合物保留了亲水性细菌和亲脂性细菌，而没有单独发挥橄榄油、甜菜碱和木糖醇的抗微生物特性。
[0070]
当局部施用时，本发明的组合物已被证明通过形成在出现危险时有助于维持专有微生物群的3d结构，在预防粘膜和皮肤中的微生态失调方面是有效的。
[0071]
本发明的组合物提供了一种三维两亲性支架，其结合了来自大气的水，所述大气润湿了微生物组的生态系统，同时润湿了人类的皮肤和粘膜，最终提供了保护以免受外部侵害(干燥、ph变化、温度波动、防腐剂、去污剂、辐射等)、限制有害试剂的渗透和保留细胞生命所必需的物质(即水和营养物)。
[0072]
微生物组生态系统通过本发明的组合物得到增强，因为它通过橄榄油的疏水性、甜菜碱的保湿性和木糖醇的保湿作用(其从大气中捕获水分)得到改善以使常驻微生物群更好地附着，木糖醇是比单纯的水溶液或双相溶液维持时间更久的保湿剂。事实上，不含甜菜碱和木糖醇的橄榄油乳液不能在皮肤和粘膜中提供所需的湿润剂保湿效果。
[0073]
上皮稳态的概念解释了伴有更表层细胞的脱落存在细胞的连续置换，具有限制微生物定植的积极作用，以及由于常驻微生物群部分丧失的消极作用。
[0074]
然而，这些活的微生物需要它们的生态系统来安置它们自己。
[0075]
研究人员试图找出健康背后的有益细菌，与之相反的，找出疾病背后的群体。不幸的是，这种简单想法被证明是错误的，因为在患病者和对照中发现了相同的细菌类型，但比例不同。目前尚未能得出结论，微生物群的转移是疾病本身的源头。推测认为关联关系多于因果关系，而后者在传染病中占优势。换句话说，疾病的某个微生物群似乎与其相关联，而不仅仅由此类疾病引起。
[0076]
在自然界中，生态变化始于生境，然后发生某些物种的适应或消失。迄今为止，通
过微生物群来维持稳定的微生物组的尝试已经产生了有争议的结果。本发明的发明人认为生态系统是破坏的第一接受者。从长远来看，这是微生物群变化的原因，而微生物群变化本身就是环境变化的原因。这体现在发明人定义的微生态平衡(eubiosis)和微生态失调(dybiosis)的微生物组动力学模型中(图2)。
[0077]
人类进化已经导致了与日常健康的初级共生或生态平衡。然而，当出现微生态失调时，非共生微生物群与改变的生态系统一起延续了恶性循环，就像肥胖或抑郁症一样，这两种疾病今天都被理解为与微生态失调的微生物组相关，并且对饮食和心理治疗都有令人沮丧的依从性。
[0078]
我们的身体每天都面临着各种问题，尤其是应激、污染、超级连接(hyper connectivity)、wifi、化学品、防腐剂、抗生素、药物、洗涤剂、辐射、氧化应激、传染性病原体、快餐、口腔和皮肤卫生、洗发剂、女性卫生、伤口、进食障碍、口腔呼吸、睡眠呼吸暂停、对我们的微生物组有影响的全身性和慢性疾病。
[0079]
某些个体缺乏修复微生物群所需的内部或外部条件，因此会患上疾病。一旦微生物群发生了改变，健康细菌群的恢复就需要一种能够直接作用于微生物群或间接作用于环境的健康启动子。令人惊讶的是，本发明的组合物能够通过增强对健康环境的生态系统的支持来恢复和促进健康的微生物群及其生态系统。当前发明者的方法是改善环境条件和生态系统，以利于健康微生物群的维持和重建，无论是在哪个地点。该组合物增强了常驻微生物群的隔室，因为目前还不可能鉴定出一种或几种与迄今为止研究的大多数病症和疾病有因果关系的微生物。如实施例所示，通过生态系统隔室改善人类微生物组的具有较低的局部解剖特异性。图3的示意图示出了这种机制。
[0080]
在根据前述实施方案中任一个的特定实施方案中，所述组合物不包括任何其它植物油，更具体地，其不包括欧芹油。这样，就避免了使用质量较低的油，如棕榈油。然而，所述组合物可包括精油，因此，在特定实施方案中，所述组合物不包括除精油之外的任何其它植物油。
[0081]
在根据前述实施方案中任一个的特定实施方案中，所述组合物包括按重量计0.05％-5.1％的橄榄产品，优选0.05％-4.1％，更优选0.05-2.6％的橄榄产品。优选地，当橄榄产品包括或为橄榄果实提取物时，所述组合物包括0.05％-0.1％的橄榄果实提取物，并且当橄榄产品包括或为橄榄油时，所述组合物包括0.1％-5％，更优选0.1％-4％，甚至更优选0.2％-2.5％的橄榄油。
[0082]
根据前述实施方案中任一特定实施方案中的另一个，组合物包括按重量计0.1％-10％的甜菜碱，优选1.0％-6％，更优选1.20％-5％。
[0083]
根据前述实施方案中任一特定实施方案中的另一个，组合物包括木糖醇，按重量计优选1％-20％的木糖醇，更优选1％-15％。有利的是，在较小的浓度(如≤20％)下，木糖醇可作为保湿剂和清新剂，有助于改善微生态失调的预防和治疗。
[0084]
除非另有说明，本发明中给出的所有百分比均以总组合物的重量(w/w)计。
[0085]
如实施例中所示，在上述定义的范围内包括一定量的橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物在治疗和预防微生态失调方面是非常有效的。在另一个优选的实施方案中，本发明的组合物包括在实施例中描述的任一制剂中定义的量的橄榄产品、甜菜碱和木糖醇。
[0086]
根据前述实施方案中任一个的特定实施方案，组合物包括抗氧化剂和/或维生素。
优选地，抗氧化剂是天然抗氧化剂，更优选来自油橄榄(olea europeae)的抗氧化剂。优选地，抗氧化剂选自羟基酪醇、酪醇、橄榄苦苷及其混合物。有趣的是，羟基酪醇、酪醇和橄榄苦苷增强了橄榄油的抗炎和抗氧化活性，并且似乎能够稳定组合物(即减少或甚至消除对进一步防腐剂的需要，这将使制剂更容易被受试者耐受)。因此，在优选的实施方案中，组合物包括羟基酪醇和/或酪醇和/或橄榄苦苷，优选其包括羟基酪醇、酪醇和橄榄苦苷。
[0087]
根据所需的外观/配方，组合物包括提供所需的感官和流变形式所必需的所有组分。因此，根据前述实施方案中任一特定实施方案，组合物还包括一种或多种选自以下的组分：再矿化剂、粘度控制剂、保湿剂、防腐剂、着色剂、ph调节剂(缓冲剂)、甜味剂、乳化剂、蛋白水解酶、增白剂、益生菌、研磨剂、精油、愈合剂、芳香剂、动物或植物明胶、流变剂、溶剂、赋形剂及其组合。
[0088]
本发明组合物的这些其它组分是本领域技术人员公知的，所述化合物的非限制性实例在下文给出。根据前述实施方案中任一特定实施方案，这些化合物选自以下实施例。再矿化剂可选自氟化物阴离子、磷酸盐阴离子、钙阳离子、钾阳离子及其混合物。流变剂可选自阿拉伯胶、黄蓍胶、黄原胶、羧甲基纤维素、卡波姆型聚合物、果胶、粘蛋白及其混合物。保湿剂可选自甘油、丙二醇、山梨醇及其混合物，优选甘油。防腐剂可选自苯甲酸钠、山梨酸钾、苯甲酸、重氮烷基脲、咪唑啉基脲、对羟基苯甲酸甲酯钠、对羟基苯甲酸丙酯钠及其混合物。甜味剂可选自麦芽糖醇、异麦芽糖醇、甘露醇、乳糖醇、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、甜蜜素、索马甜(thaumatin)、三氯蔗糖、甜叶菊、新橙皮苷dc及其混合物。乳化剂可选自聚乙二醇(peg)40氢化蓖麻油、卵磷脂及其混合物。
[0089]
最近的研究已经证明了在一般用途牙膏中使用杀菌剂与对身体远端部位的多重的和严重的直接副作用之间的关系。一项多中心大学动物研究证明，广泛用于口腔护理产品的三氯生在口腔应用时会在血液中检测到，并与结肠炎、肠道炎症变化等多种病理状况以及最常见的癌症形式结肠癌直接相关(yang,wang和romano，2018年)。本研究的作者认识到动物-人类转化的特殊性，但提醒医疗卫生当局和专业人员注意，他们概述了本研究中获得的结果是在少量接触三氯生后获得的，人类广泛将其用于口腔卫生，每天三次，持续较长时间。
[0090]
抗真菌剂，尽管已被证明可有效治疗头皮屑，但在数周后仍无法阻止酵母的再定殖。然而，本发明的组合物能够通过为头皮微生境提供必要的条件来增强微生物平衡，所述条件将有助于阻止来自病原微生物如来自马拉色菌属的酵母的主要定殖。
[0091]
因此，在根据任何前述实施方案的特定实施方案中，本发明的组合物不包括任何额外的活性成分(例如抗生素、抗真菌剂)。特别是，它不含三氯生。
[0092]
本发明的组合物提供了理想的物理化学条件(ph、屏障完整性和营养物质)，有助于皮肤和粘膜中维持和恢复健康平衡的微生物群。每个生态位都有自己的条件，由ph(表1)定义。根据身体部位，将根据体内的特殊性调整ph。ph值将通过缓冲液进行调节。因此，在特定实施方案中，本发明的组合物包括缓冲剂。在本发明的组合物中，可以使用本领域已知的任何缓冲剂。特别地，缓冲剂可选自乳酸、乳酸盐、柠檬酸、柠檬酸盐、苹果酸及其盐、氢氧化钠、磷酸钾、磷酸钠、焦磷酸钾、焦磷酸钠及其混合物。
[0093]
表1
[0094]
部位ph
阴道3.8-4.5前臂掌侧皮肤4.7头皮4.80额4.80嘴唇6.61舌头6.65口的6.68腭7.23肺6.6
[0095]
令人惊讶的是，无论不同皮肤和/或粘膜部位所需的ph如何，本发明的组合物仍能保持其有益效果。
[0096]
本领域技术人员可以以允许简单地用于预防和/或治疗微生态失调用途的任何合适的形式配制本发明的组合物。根据前述实施方案中任一特定实施方案，组合物被配制成面部和/或身体保湿剂、除臭霜、再生隔离霜、身体凝胶、洗发剂、护发素、发露(hair lotion)、皮肤精华素(skin ampoules)、滋补剂、胶囊、片剂、喷雾剂、凝胶、润滑剂凝胶、局部外阴凝胶、鼻吸入剂、鼻喷雾剂、气雾剂溶液、气溶胶喷雾、气雾剂胶囊、牙膏、漱口水、口香糖、咀嚼片、可吮吸胶囊、可吮吸锭剂、口香片(palate sheets)、糖果、浸渍口腔拭子、浸渍口腔纱布、唇膏、香膏(balm)。
[0097]
在一个优选的实施方案中，通过使用胶凝剂如琼脂、藻酸盐、角叉菜胶、瓜尔胶、果胶酸盐、黄蓍胶、卡波姆、聚合物和二氧化硅形成凝胶。
[0098]
干橄榄果实提取物优选用于锭剂或糖果锭剂(pastilles)的制剂，而橄榄油，优选evoo，和液体或干果实提取物是用于凝胶、牙膏、漱口水、洗发剂、护发素、发露、霜剂、面膜、唇膏、喷雾剂、精华素、除臭剂、胶囊、胚珠(ovules)、沐浴露的制剂的橄榄产品的优选来源。口疮性口腔微生态失调的治疗具有凝胶形式的优选的实施方案，其中evoo是橄榄产品的来源，羟基酪醇具有强效抗氧化作用，具有橄榄水果风味(无刺痛感)。复发性口疮(rau)受益于使用相同方法的牙膏形式的预防性卫生，也可以含有再矿化剂，天然无刺激性的芳香剂、维生素、和舒适卫生所必需的成分。炎性肠病(ibd)或局限性肠炎(crohn)或麸质不耐症(gluten intolerance)患者也患有口疮性微生态失调，是进行相同措施的候选人。在应激和牙齿磨损口腔微生态失调、睡眠呼吸暂停口腔微生态失调以及与进食障碍或胃反流相关的口腔微生态失调中，理想的凝胶配方是每天数次，在口腔卫生后，特别是睡前和醒来时，局部应用于口腔组织。
[0099]
用于预防或治疗肺微生态失调的本发明组合物可以通过任何已知的给药途径施用。非限制性实例为鼻吸入剂、鼻喷雾剂、鼻气雾剂、鼻凝胶、口咽糖浆和口咽凝胶的液体形式以及气雾剂胶囊的固体形式。
[0100]
本发明的组合物可以包含在用于不同皮肤和粘膜区域的护理和卫生产品中。
[0101]“护理”是指当危险危及天然和健康的微生物组时(即，使用腐蚀性产品或酒精、洗涤剂等进行卫生)，对粘膜和皮肤微生物群的必要的恢复、改善或保护。
[0102]“卫生”是指我们通过消除多余的残留细胞和其他天然产生的易对自然健康的微生物组产生干扰的物质的行为。
[0103]
应根据施用组合物的身体部位使用不同的制剂和载体和/或辅料。本领域技术人员知道如何根据组织的ph和组织的其他特定物理化学性质等来调整每种组合物使其适应不同身体部位。
[0104]
例如，皮肤的某些部位比其他部位皮脂腺更多、更潮湿或更干燥。护理和卫生产品将适用于该属性。
[0105]
同理，不同的产品会适应不同的粘膜，如口腔中的产品和阴道中的产品彼此非常不同。在一个特定的实施方案中，当包括洗涤剂以用于卫生时，如实施例中所见，本发明的组合物继续为生态系统提供有益效果并恢复微生态平衡。在包括用于牙齿或皮肤的美白成分的展示中，本发明的组合物还发挥其有益于微生物组的活性，减少美白原理可能带来的刺激性、脱皮性或敏感性作用。
[0106]
沿着人体，微生物群适应了具有某些特殊性的不同生境。根据人类微生物组项目，消化道内10个不同特定部位之间存在不同的微生物群，例如颊部、牙龈和硬腭(第1组)以及唾液、舌头、扁桃体和喉咙(第2组)(segata，kinder haake和mannon,2012)。这种部位差异出人意料地高于不同个体之间的差异。同样，皮肤有皮脂腺部位(头皮、背部、前臂)和具有部位特异性微生物群的潮湿部位，这些部位以及口腔粘膜也有时间变化，但在大部分时间内长时间保持稳定。目前正在研究部位和时间行为以及丰富度或丰度。已发现口腔中的亲脂性细菌主要存在于硬腭、牙齿的舌侧、角质化牙龈和颊粘膜中这一事实的相似之处。如本发明的作者所见，不仅这些细菌显示出对消化酸和食团(blous)通道的更多抗性，而且它们还通过代谢甘油三酯产生脂肪酸，所述甘油三酯用脂质清洁口腔的其余部分，所述脂质用作保护、润滑并有助于使口腔生物膜的脂质成分永久化。以相同的方式，本发明的发明人提出用当前组合物积极增强这种天然亲脂性保护。
[0107]
无论是多样性高(口腔粘膜)还是低(头皮、背部和前臂或阴道)，当以共生方式(健康)进行时，这种生物膜似乎发挥了有价值的功能，如免疫防御、营养、代谢、甚至旁观者(beholder)的生长和个性化。目前仍不清楚何时以及为何会根据尚未发现的触发因素转变为微生态失调(疾病)，这可能是因为关键病原体，也可能是应激等重大环境挑战，或者更明显的是如前所述的卫生问题。
[0108]
微生物群在不断运动和更新，同时显示出对变化的适应能力。尽管下一代测序技术的出现提供了比以前基于培养的技术更少的偏差，但识别某个解剖部位的核心微生物组或特定微生态失调的关键病原体仍然是一项非凡的任务。牙周炎就是这种情况，牙周炎是一种口腔微生态失调，是世界人口中发病率最高的疾病。多年来，牙周病学家从认为革兰氏阴性菌是牙周炎的原因演变为接受革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌是从最初的牙龈炎转变为进化的牙周炎的原因，其发生不是真正的病因，而是与适应于缺氧(厌氧)和血液依赖(“红色复合物”细菌)；齿垢密螺旋体、福赛斯坦纳菌和牙龈卟啉单胞菌)的细菌相关，其最初被认为是继发性炎症。更复杂的是，人们还忽略了被广泛认为是牙周炎的标志性病原体的牙龈卟啉单胞菌是否会通过改变正常的共生微生物群(随后称为菌群失调)来启动炎性反应，或者即使在低丰度条件下，这种病原体是否与休眠的最近才被鉴定出来的所谓苛养菌(fastidious microbes)具有共生的有害行为。龈沟产线菌(filifactor alocis)就是这种情况，它似乎与严重的口腔微生态失调有关，因为在健康个体中很少发现。令人惊讶的是，龈沟产线菌是一种革兰氏阳性菌，为解糖厌氧菌，定植在氧梯度较低的龈下区域，能够
以短链脂肪酸为生，代谢后会释放铵并将ph值升高至中性范围。这就排除了具有酸性代谢的革兰氏阳性氧依赖性细菌，如变异链球菌。这就是患者表现出牙周易感性而非龋齿风险的原因，反之亦然。目前尚不清楚龈沟产线菌在高氧化条件下茁壮成长的能力是否会导致进一步的氧化应激环境变化，从而可能导致其他微生态失调(如olp病)或致癌变化。
[0109]
在微生态失调的不平衡情况下，改变的微生物群在改变的环境气氛(温度、ph、湿度和氧气条件)中与人体相互作用，这往往会使微生物的转变永久化。
[0110]
不仅微生物被取代，生态系统也同时改变，这种双重改变在临床上是通过炎症、屏障破坏、出血、脱屑、刺激、脱水、有时甚至是身体感染或最终导致癌变等负面情况检测到的。
[0111]
人类微生物组在皮肤和口腔微生态失调(如本文所述疾病)中的作用如今已通过研究得到证实，但之前由于许多来源不明的负面状况通过抗生素(ab)得到改善，因此曾对此有过怀疑。不幸的是，ab耐药性和副作用是常见的缺点。如实施例中所示，本发明的组合物能够通过生态系统增强来恢复这些负面状况并改善健康，最终实现微生态平衡。因此，在根据任一前述实施方案中的本发明的特定实施方案中，所述组合物不包括抗生素。
[0112]
通过微生物组增进健康的尝试主要是通过尝试改变微生物群来完成的，通常会添加被认为有益的微生物，即所谓的益生菌，但结果存在争议。在任何情况下，本发明与益生元和益生菌相容。因此，根据前述实施方案中任一特定实施方案，组合物还包括益生元和/或益生菌。在一个优选的实施方案中，所述组合物是包括橄榄干果实提取物、甜菜碱、木糖醇和益生菌的可吸食锭剂，更优选地，它还包括将其配制成干燥制剂所必需的成分。
[0113]
本发明的组合物包括附着于组织较长时间以防止蒸发的脂质-亲脂性部分(橄榄产品)和吸引该支架(scaffold)内的湿度以使微生物群能够与宿主及其生态系统相互作用的亲水性部分(甜菜碱和木糖醇)。微生物组生态系统通过这种组合物得到增强，因为它被改善以更好地附着常驻微生物群。
[0114]
如实施例中所示，本发明的组合物具有前所未有的有益特性，其不仅抵消了局部使用的橄榄油或甜菜碱的负面影响，而且当直接施用于皮肤和粘膜时，还增强了对口腔和皮肤微生物组的意外益处。
[0115]
皮肤和粘膜为抵御病原体和水分流失提供了有效屏障。皮肤和粘膜屏障破坏会导致炎症性发红，表明血管扩张和血流量增加。本发明的组合物的使用已经证明减少炎症并且同时使受损组织再生。重要的是，其它炎性抑制剂不能使组织再生，这使得该组合物具有独特性，因为其他任何组合物的人体中尚未获得这种特性(van dyke,2017)(参见，例如，实施例4)。
[0116]
皮肤或粘膜改变会导致细菌筛选。牙龈炎症会增加胶原蛋白肽、血浆蛋白和血红蛋白，从而选择以必需氨基酸和血红素作为营养物质为特征的特定细菌。
[0117]
本发明的组合物降低了渗透性并使组织再生，避免了促进微生态失调的营养物质(胶原蛋白肽、血浆蛋白和血红蛋白)的释放，从而获得了在组织中定居的细菌的天然和健康的平衡。同时，避免释放这些分子有助于保持粘膜、牙齿和皮肤的自然健康颜色。
[0118]
在本发明中，所述组合物增强而不消除足够的口腔和皮肤生物膜，以促进平衡和多样的微生物群，并维持和恢复与下层组织相关的专有微生物组。
[0119]
此外，治疗和预防口腔和皮肤微生态失调以及增强口腔和皮肤稳态的本发明组合
物的发现为口腔和皮肤微生物组提供了适当的环境，而不会对可能触发或传播微生态失调刺激的共生微生物施加任何应激作用。
[0120]
本发明的组合物具有附着于组织较长时间以防止蒸发的脂质-亲脂性部分(橄榄产品)且具有吸引该支架(scaffold)内的湿度以使微生物群能够与宿主及其生态系统相互作用的亲水性部分(甜菜碱和木糖醇)。微生物组生态系统通过这种组合物得到增强，因为它被改善以更好地附着常驻微生物群。
[0121]
据本发明人所知，没有任何现有技术可以预期口-皮肤轴。牙龈炎经常发生于患有寻常痤疮的患者。在痤疮皮肤发作时，患者有时甚至在皮肤破裂前也会出现牙龈出血和肿胀。这两种情况通常发生在青少年中，也发生在儿童中，在成人中并不少见。这两种情况都与西式饮食、压力有关，也是就诊的最常见原因。严重程度介于开放性或闭合性粉刺(黑头和白头)到痤疮中明显的炎性病变(脓疱甚至囊肿)，牙龈炎症到出血和溃疡(溃疡性病变)之间。目前的趋势是将寻常痤疮视为一种皮肤微生态失调，伴有痤疮丙酸杆菌作为结合剂的定植，皮肤环境条件的变化促进了这种定植。在牙龈炎中也发现了革兰氏阳性菌。然而，到目前为止，尚未鉴定出病原体，但与痤疮相似，来自宿主的反应增加，破坏了屏障并允许定植。如实施例所示，牙龈的改善与痤疮的改善有关，这与新描述的口-皮肤轴一致。
[0122]
最后，没有任何现有技术将牙齿磨损与口腔微生态失调联系起来，然而，鉴于本发明，当处于平衡状态时，通过恢复口腔微生物群的适当屏障功能，可以防止在侵蚀性损伤中矿物质损失背后的矿物质交换的不平衡。如实施例中所示和在前面的论点中所解释的，有利的生态系统中的平衡的微生物群抵消酸性挑战，并且在使用本发明的组合物之后发生牙齿过敏的间接改善。使用本发明的组合物，特别是以牙膏和漱口水的形式使用，可预防微生态失调和恢复体内平衡。如果存在微生态失调，则所有这些情况都受益于理想的以凝胶或喷雾的形式局部应用所述组合物，以在微生态失调的早期发作中恢复至微生态平衡。
[0123]
皮肤-肠轴是当今各大学的研究重点，旨在解释和描述肠道微生物组与皮肤健康之间的关系，以及这些明显不相连的身体部位之间迄今难以捉摸的相互作用，以及改善肠道微生物组和皮肤治疗的转化潜力。(salem,ramser,isham和ghannoum,2018)(lee,byun和kim,2019)(vaughn,notay,clark和sivamani,2017)(sz
á
nt
ó
,d
ó
zsa和antal,2019)。
[0124]
据本发明的作者所知，在现有技术中还没有关于口腔微生物组和称为睡眠呼吸暂停或阻塞性睡眠呼吸暂停(osa)的睡眠期间作为口腔功能障碍发生的全身效应的声明，并且被作者认为是一种微生态失调。睡眠呼吸暂停从打鼾到真正的呼吸中断不等，其严重形式会对睡眠质量产生负面影响，包括夜间频繁醒来和睡眠不佳。患者会经历日间烦躁、注意力不集中、日间睡眠、抑郁和焦虑以及较高的心血管风险，医生会将患者转诊至颌面外科医生和进行下颌前移治疗(侵入性或非侵入性(可拆卸口腔夹板))的牙医处，该下颌前移治疗作为睡眠替代方案，连接至机械式持续气道正压通气(称为cpap)。关于口腔微生物组在osa中的作用，无论是作为问题的根源还是结果，都没有任何文献记载。本发明认为睡眠呼吸暂停微生态失调开始于与经口呼吸者发生的改变的环境类似的环境中。粘膜湿度条件的强烈和持续变化会损害粘膜结构构造，还会损害微生物组隔室，其通道塌陷对osa中空气流入至关重要。通过在醒来时饮水的润湿作用只是一种短期解决方案，会导致夜尿症。osa的发生会反复造成睡眠中断、夜间休息不佳以及对个人的社会、心理和健康方面造成日间后果。口-大脑轴连接已如前所述进行了描述，这很可能是此类连接的另一个示例。使用本发明组
合物的患者在就寝前和夜间醒来时以喷雾形式施用，显示出与睡眠呼吸暂停微生态失调相关的体征和症状的显著改善，例如夜间休息的质量、日间烦躁、夜间频繁醒来、夜间频繁饮水。与液体喷雾相比，使用cpap的患者施用该组合物的依从性更好。
[0125]
最后，如上所述，本发明的组合物用于预防和/或治疗微生态失调。有利地，如实施例5中所示，其还用于预防因微生态失调加重或恶化的病症。此外，其可用于治疗，特别是作为所述病状的辅助治疗。所述病状可因微生态失调而恶化，因为微生态失调增加所述病状的发作次数或因为微生态失调加重所述病状的体征和/或症状。微生态失调会使体征和/或症状的种类、强度和/或持续时间加重。因此，本发明的第一方面还涉及如上述实施方案中任一所述的本发明的组合物，用于预防和/或作为辅助治疗因微生态失调加重或恶化的病症。
[0126]
最近的研究一致认为头皮微生物组的失衡是导致头皮屑或脂溢性皮炎等疾病的主要因素。某些疾病与粘膜和皮肤微生物组都有联系，如慢性炎性疾病和癌症。事实上，皮肤和口腔微生物组与导致皮肤癌(如黑色素瘤)和口腔癌的癌变相关。
[0127]
在肺中，与任何微生态失调中发生的情况相似，有益共生细菌的丧失意味着对机会性病原体(如细菌、真菌和病毒)的保护减弱，这些病原体一旦定植将使微生态失调长期存在。此外，与此同时，肺微生态失调(如果存在)可能会加重不同性质的疾病或病症，这些疾病或病症在其他方面具有相同的病程。人类的肺已经进化到可以防止空气传播的颗粒和病原体的渗透，正常微生态平衡的情况下，只要不存在微生态失调，年轻人和其他年龄组的人都可以享受健康。这是暴露于冠状病毒的年轻人群的情况，他们经历无症状病程或轻度感冒症状，作为感冒微生态失调的一部分，并在数天内恢复稳态。当面对新冠肺炎时，这一年轻群体通常受益于微生态平衡，因为大多数病例未引起重症，表现为轻度或甚至无症状病程，并且未进展为真正的冠状病毒疾病，然而，如果存在微生态失调，如在老年群体中发生的，冠状病毒穿透将由于微生态失调引起的恶化而以表现出更严重的病程(例如，更严重的呼吸困难，需要经常住院以及使用氧气和/或通气)。冠状病毒是一个大的病毒家族，众所周知会导致从普通感冒到更严重的疾病，如中东呼吸综合征(mers)和严重急性呼吸综合征(sars)。
[0128]
口腔、皮肤和阴道卫生会损坏甚至破坏降解微生物组隔室的生物膜。被忽视的300多种不同兼性厌氧菌群(唾液链球菌、缓症链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、棒状杆菌等)生活在舌背腺管中，具有将饮食中的硝酸盐还原为亚硝酸盐的独特特性，亚硝酸盐是人体的天然血管扩张剂和胃保护促进剂。令人惊讶的是，口腔微生物组在血压、血小板功能和骨髓生理学以及脑血流量和外周动脉疾病中的作用是毫无疑问的，但出乎意料的是，当使用抗菌漱口水时，所有这些有益作用都会消失。引人注目的是，摄入较少绿色食品的健康受试者使用抗菌漱口水后，与血浆亚硝酸盐减少明显相关的收缩压和舒张压显著增加，但尚未在强制性研究中发现回声，以证明如果长期使用抗菌漱口水会导致血压升高，从而导致更高的心血管风险。此外，牙周炎微生态失调和心血管疾病通常发生在可能在口腔中使用抗菌药物的同一患者中(hezel和weitzberg，2015)。
[0129]
因此，其中，因微生态失调加重或恶化的病症可选自头皮屑、脂溢性皮炎、慢性炎性病变、皮肤癌(例如黑素瘤)、口腔癌和呼吸道感染。后者可以是细菌感染(例如由链球菌引起)、病毒感染(例如由流感病毒、副流感病毒、冠状病毒、新型冠状病毒、合胞体呼吸道病
毒引起)或真菌感染(例如由念珠菌、肺孢子虫引起)。
[0130]
在一个优选的实施方案中，因微生态失调加重或恶化的病症是呼吸道感染。更优选地，呼吸道感染是感冒、新冠肺炎或肺炎。如实施例5所示，本发明组合物的使用减少感冒发作的次数，在预防感冒方面取得了预料不到的效果。
[0131]
本发明的第二方面涉及包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物在制备用于预防和/或治疗微生态失调的药物中的用途，其中橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。同样地，其涉及包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物在制备用于预防因微生态失调加重或恶化的病症的药物中的用途，或在制备用于治疗因微生态失调加重或恶化的病症的佐剂中的用途。
[0132]
本发明的第三方面涉及一种治疗有此需要的受试者中的微生态失调或因微生态失调加重或恶化的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
[0133]
本发明的第四方面涉及一种预防受试者中微生态失调的方法，所述方法包括向受试者施用预防有效量的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。同样，本发明涉及预防受试者中因微生态失调加重或恶化的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用预防有效量的包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的组合物，其中所述橄榄产品是橄榄油和/或橄榄果实提取物。
[0134]
最后，最近的出版物已宣布口腔卫生是口腔微生物菌组失调的首要原因(sudhakara、gupta和bhardwaj，2018)。皮肤研究人员也对皮肤卫生和皮肤微生态失调做出了同样的陈述，他们使用生物多样性的减少作为皮肤健康被剥夺的标志，并证明了合成成分在日常化妆品中的作用(wallen-russell，2019)。因此，本发明的第五方面涉及本发明第一方面的任一实施方案中所定义的组合物用于人体口腔、鼻腔、阴道和/或皮肤卫生的用途，并且涉及本发明第一方面的任一实施方案中所定义的组合物用于人体口腔、鼻腔、阴道和/或皮肤卫生，和/或用于维持人体粘膜或皮肤的天然保湿作用。同样，它还涉及一种用于对人体的口腔、鼻腔、阴道和/或皮肤进行卫生处理的方法，所述方法包括施用如本发明第一方面的任何实施方案中所定义的组合物。同样，本发明的另一个目的是本发明第一方面的任一实施方案中所定义的组合物在维持人体粘膜和/或皮肤天然保湿作用中的用途，以及本发明第一方面的任一实施方案中所定义的组合物用于维持人体粘膜和/或皮肤天然保湿作用。同样，本发明的目的也是提供一种维持人体粘膜和/或皮肤天然保湿的方法，所述方法包括施用本发明第一方面的任何实施方案中所定义的组合物。优选局部给药。优选地，所述粘膜是口腔粘膜。
[0135]
针对本发明第一方面描述的本发明组合物的特定和优选实施方案，微生态失调和因微生态失调加重或恶化的病症适用于本发明第二、第三、第四和第五方面。
[0136]
在本发明的特定实施方案中，根据本发明所有方面的任一实施方案，本发明组合物的给药方案是下面实施例中所述的方案。
[0137]
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[0152]
实施例
[0153]
下文详细描述了用于说明本发明而不限制其范围的本发明的具体实施例。
[0154]
实施例1-牙周炎微生态失调
[0155]
在口腔中，牙周炎是口腔微生态失调的晚期结果，通常伴有炎症和其他变化，由于其高出现率，已被认为是常见症状。我们指的是牙龈出血、口臭、牙齿过敏等症状。
[0156]
在以下研究中，对有牙周炎微生态失调病史的门诊患者进行了牙周炎微生态失调体征和症状研究。受试者在开始时和15天后使用指定的组合物，以0至10的等级对主诉强度进行评分。
[0157]
配制成牙膏的几种组合物(表2)作为通常的常规卫生每天施用三次，通过用牙刷刷牙2分钟，然后用水冲洗。在研究期间，除齿间刷牙外，未采取其他口腔卫生措施。
[0158]
表2示出了每种组合物(comp)的定性和定量组成。
[0159]
通过评估以下体征/症状分析了微生态失调:
[0160]
牙龈、乳头炎症(g、pi)。
[0161]
发红或斑点(r、b)。
[0162]
刷牙时出血(bb)。
[0163]
齿间刷牙时出血(bib)。
[0164]
敏感性(s)。
[0165]
第三人呼气时存在可检测到的恶臭(h)。
[0166]
牙齿脱色(td)。
[0167]
表2
[0168][0169]
在研究开始时(t＝0)和15天后(t＝15)，每组5名患者的牙龈、乳头炎症(g、pi)、发红或斑点(r、b)、刷牙时出血(bb)、齿间刷牙时出血(bib)、敏感性(s)、口臭的存在(h)、牙齿脱色(td)评分为0至10，结果见表3。
[0170]
表3示出了研究开始时(t＝0)和15天后(t＝15)每组5名患者在0至10级不同体征/症状的平均主诉强度结果。
[0171]
表3
[0172][0173]
表4示出了在t＝0和t＝15天之间对每种组合物评估的主诉强度变化的结果。
[0174]
表4
[0175][0176]
当将所有体征/症状综合考虑时，组合物1.a的平均主诉减少量为4.97，组合物1.b为1.34，组合物1.c为0.46，组合物1.d为0.09。
[0177]
因此，当比较每种组合物在使用15天后所获得的与口腔微生态失调相关的体征和症状的主诉减少时，本发明的组合物显示出具有统计学意义的效果，所述组合物包括橄榄油、甜菜碱和木糖醇。令人惊讶的是，与其它组合物(1.b-1.d)相比，本发明组合物(1.a)获得了意想不到的协同效应。
[0178]
体征或症状的改善意味着微生物组的平衡恢复，从而从微生态失调转变为微生态平衡。因此，本发明的组合物能够治疗微生态失调并将微生态失调转化为微生态平衡。
[0179]
此外，为了测量可检测到的牙周炎病原体牙龈卟啉单胞菌存在的相关性，要求1.a组和1.d组的患者继续使用指定的牙膏15天。在此期间结束时，按照制造商的说明(由
genspeed biotech提供的)进行牙周探查，并使用商业化的测试来检测牙龈卟啉单胞菌。
[0180]
还再次要求患者回答与之前相同的问题(牙龈强度、乳头炎症、发红或斑点、刷牙时出血、齿间刷牙时出血、敏感性、口臭的存在、牙齿脱色)，以检测是否有任何可能的微生态失调复发，并作为微生态平衡维持的评估。牙龈卟啉单胞菌的筛选结果见表5。
[0181]
表5
[0182][0183]
关于微生态失调的症状和体征，在使用本发明组合物的组中没有发现微生态平衡向微生态失调复发，而对照组没有任何症状改善。
[0184]
在口腔牙周微生态失调中持续使用本发明的组合物的结果被发现在治疗微生态失调和维持微生态平衡方面是有效的，而在对照组中，尽管刷牙可能有益处，但微生态失调的状态使症状持续存在。
[0185]
实施例2-特应性皮炎微生态失调
[0186]
为了评估本发明的组合物改善与皮肤中的微生态失调相关的体征和/或症状的能力，将本发明的组合物应用于7名被诊断为特应性皮炎的6至14岁患者的皮肤。患者在使用本产品之前(t＝0天)和之后15天评估体征和症状。受试者在100mm水平线上画一条垂直线，以表示主诉的强度(视觉模拟评分(vas))。
[0187]
将该组合物配制成保湿凝胶(表6)，作为常规保湿程序，每天通过用手轻轻涂抹施用三次。在研究期间，没有使用其他保湿霜或美容霜。
[0188]
待分析的体征/症状：
[0189]
皮肤干燥感
[0190]
瘙痒
[0191]
发红
[0192]
脱屑
[0193]
表6
[0194][0195]
结果：7例患者在研究开始时(t＝0)和15天后(t＝15)的平均主诉强度见表7，变化百分比见表8。
[0196]
表7
[0197][0198]
表8
[0199] 15天后的变化％p干燥-57.14p《0.01瘙痒-34.78p《0.1发红-39.29p＝0.1脱屑-31.43p《0.1
[0200]
如表8所示，使用含有本发明组合物的保湿凝胶15天后，所有测试的体征和症状显著改善。所有测试的体征和症状均与皮肤微生物组直接或间接相关。体征或症状的减轻意味着微生物组的平衡恢复，因此皮肤从菌群失调转变为菌群失调。因此，本发明的组合物能够治疗皮肤微生态失调并将微生态失调转化为微生态平衡。
[0201]
实施例3-皮肤干燥症微生态失调
[0202]
在皮肤中，脱屑、干燥和其他皮肤微生态失调体征由于其高出现率，已被认为是常见症状。我们所说的是干燥、瘙痒、发红、脱皮和过敏等症状。
[0203]
在以下研究中，对有皮肤干燥症微生态失调病史的受试者人群进行了体征和症状研究。受试者在开始时和15天后使用指定的组合物，以0至10的等级对主诉强度进行评分。
[0204]
几种配制成保湿凝胶的组合物(表9)在淋浴后和睡觉前每天使用两次。
[0205]
待分析的体征/症状:
[0206]
皮肤干燥感(ds)
[0207]
瘙痒(i)
[0208]
发红(r)
[0209]
脱皮(dq)
[0210]
过敏(ir)
[0211]
皮肤皲裂(cs)
[0212]
舒缓感(ss)
[0213]
弹性增强(e)
[0214]
保湿作用(h)
[0215]
表9
[0216][0217][0218]
结果：研究开始时(t＝0)和15天后(t＝15)，各组上述体征/症状的平均强度结果见表10。
[0219]
表10
[0220][0221]
表11示出了针对每种组合物评估的主诉强度降低(表中的int)和每种组合物的有益效果增加。
[0222]
表11
[0223][0224][0225]
最后，表12中列出了使用凝胶15天后所有组的所有主诉平均减少量和所有有益效果平均增加量。
[0226]
表12
[0227] 组合物3.a组合物3.b组合物3.c组合物3.d组合物3.e
主诉平均减少量5.770.001.471.430.10有益效果平均增加量7.530.472.001.900.07
[0228]
结论
[0229]
当使用包括橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的本发明组合物15天时，包括皮肤微生态失调的体征和症状在内的主诉显著减少。使用含有橄榄产品、甜菜碱和木糖醇的凝胶15天后，有益效果得到了更显著的改善。当比较每种组合物在使用15天后获得的主诉减少和有益改善时，可以看到本发明组合物的协同效果。
[0230]
实施例4-口腔口疮微生态失调
[0231]
在一组有口腔口疮相关的疼痛和溃疡等症状的患者中检测了口腔口疮微生态失调。检测疼痛和口疮或溃疡愈合情况，并在使用不同组合物的4组之间进行比较(表13)。
[0232]
将产品配制成凝胶，在每次正餐前和睡前涂抹，直至口疮缓解。如果白天疼痛，还允许额外应用。
[0233]
表13
[0234][0235]
16名患者被纳入研究，随机分为4组。
[0236]
记录了三个参数：
[0237]
缓解时间
[0238]
进行口腔卫生时疼痛
[0239]
说话时疼痛
[0240]
表14示出了4组口疮缓解所需平均天数的结果。如表中所示，使用包括橄榄油、甜菜碱和木糖醇的组合物的患者经历了2.25天的平均溃疡/口疮愈合时间，相比之下，使用包括橄榄油和甜菜碱的组合物的组为3.25天，使用包括木糖醇的组合物的组为5天。对照组溃疡愈合平均需要7天以上。这些发现与在研究开始时(t＝0)和使用本产品24小时后(t＝24)检测的口腔卫生和说话过程中的平均疼痛强度测量值相关，如表15中的4组所示。
[0241]
表14
[0242][0243][0244]
表15
[0245][0246]
本发明的组合物在口腔微生态失调如口疮性口腔疾病中具有协同作用，与其它组合物相比，在溃疡愈合和疼痛控制方面具有显著的统计学意义的改善。
[0247]
口疮性微生态失调的传统治疗方法是使用局部镇痛药和消毒剂。透明质酸或/和芦荟制剂据称对溃疡有屏障保护作用，但与高浓度的酒精等防腐剂结合使用。本发明的组合物能够在没有防腐剂的情况下恢复粘膜屏障功能，并立即缓解疼痛。
[0248]
涂抹24小时后测得疼痛立即停止，可以刷牙和说话。当与含有橄榄产品和甜菜碱的组合物相比时，甚至当与仅含有木糖醇作为活性成分的组合物相比时，本发明的组合物立即缓解疼痛，显示出具有统计学意义的即时疼痛缓解的积极效应(表16)。
[0249]
表16
[0250][0251]
实施例5-感冒
[0252]
肺粘膜与处于微生态平衡状态并受益于微生物组稳态的任何其他粘膜一样，享有
微生物组吸湿作用以及微生物组防御保护屏障效应，以抵抗有害物质渗透、体验舒适湿润感、无疼痛且不咳嗽，而相反，脱水感、干咳的存在和感冒发作的症状与微生态失调存在和微生物组改变有关，从而增加感染或感染恶化的风险。年龄是微生态失调的始作俑者，因为微生物组失去特异性，使老年患者更容易受到感染。
[0253]
一组患者通过测试使用本发明的组合物的粘膜保湿作用的主观感觉和呼吸发作(感冒)的次数来测试本发明的组合物的预防效果。记录了19名平均年龄为77岁的绝经修女(closure nuns)在研究期间通过鼻、口和喉使用本发明组合物的局部凝胶后感冒发作次数(表17)，并与前一年的发作次数进行比较。他们还回答了“您是否感觉您的粘膜现在湿润程度更高了，是或否”(表18)。
[0254]
表17
[0255][0256]
表18
[0257][0258]
表19示出了与前一年相比，研究期间19名修女感冒发作次数。
[0259]
表19
[0260]
前一年的感冒发作研究期间的感冒发作减少％p322037.50.037
[0261]
如表19所示，发作次数的差异具有统计学意义。
[0262]
该研究的结果证明，使用本发明的组合物可显著预防微生态失调并有助于减少感冒次数。
[0263]
实施例6-copd微生态失调
[0264]
在以下研究中，研究了一组8名诊断为慢性阻塞性肺病(copd)(一种常见的肺微生态失调)的患者进行了味觉变化或丧失(味觉异常或味觉丧失)的演变。将患者分为2组，每组各服用2片不同的片剂；一种包括含有橄榄果实干提取物、甜菜碱和木糖醇的本发明组合物，一种是含有木糖醇的市售可吮吸片剂(表20a和20b)。
[0265]
表20a
[0266][0267]
表20b
[0268]
含有木糖醇的市售可吮吸片剂(数据来自互联网生产商页面)甜味剂(木糖醇(87％)、阿斯巴甜)、芳香剂、完全氢化棉籽油
[0269]
在服用药片之前和服用药片5天后，受试者回答了“你感觉到食物的味道吗？”这个问题。
[0270]
在开始(t＝0)和每天吮吸3片药片5天后(t＝5)，作为问题答案的结果见表21。
[0271]
表21
[0272][0273]
味觉障碍或味觉丧失(粘膜微生态失调，特别是肺微生态失调的常见症状)患者通常吮吸糖果和/或锭剂以掩盖味觉变化或改善味觉。这些药片通常是增味的且是甜的。在本研究中，使用市售片剂，与高浓度木糖醇在5天后没有帮助恢复食物味觉。相比之下，具有本发明组合物的片剂在味觉恢复方面具有令人惊讶的积极结果，这与copd微生态失调有关。
[0274]
实施例7-olp微生态失调
[0275]
口腔扁平苔藓(olp)是一种可以影响皮肤、口腔或两者的微生态失调。采用皮质类固醇治疗。患病期间进行口腔卫生令人疼痛，olp患者的牙周炎顽固且严重。olp斑会损害进食和卫生。
[0276]
在该研究中，分析了本发明的组合物在用于治疗olp病时，是否能够增强皮质类固醇的功效。
[0277]
20例olp患者被纳入本研究。
[0278]
分为两组，每组10例，具体如下：
[0279]
第一组：使用皮质类固醇和特殊卫生措施将本发明组合物用作牙膏(表22中的组合物7.a)治疗的患者。
[0280]
第2组：接受皮质类固醇治疗并采取卫生措施但未使用本发明组合物的患者(表22
中的组合物7.b)。
[0281]
表22
[0282][0283][0284]
治疗持续30天，在研究开始时(t0)、治疗15天后(t15)和治疗30天后(t30)疼痛恢复的1至10级评分。结果见表23。
[0285]
表23
[0286] t0t15t30皮质类固醇+组合物7.a6.473.22.14皮质类固醇+组合物7.b6.454.844.26
[0287]
如表23所示，将皮质类固醇与包括本发明组合物的牙膏联合治疗，在治疗15天和30天后增强了皮质类固醇的功效，因为用本发明组合物治疗的患者所记录的疼痛更少。
[0288]
实施例8-口臭微生态失调
[0289]
口臭微生态失调是由于口腔微生物组向厌氧菌改变而引起的，如牙龈卟啉单胞菌、齿垢密螺旋体和福赛斯坦纳菌等。微生物组随着导致炎症和挥发性硫化合物(vsc)的环境(蛋白质分解的结果)而变化。已知的一些vsc是硫化氢、甲硫醇和二甲基硫醚。
[0290]
据报道，牙周炎微生态失调患者体内的vsc水平是非牙周炎微生态失调患者的8倍。然而，在饮食限制中也发现了口臭微生态失调，并且与其他口腔微生态失调相关。
[0291]
本研究探讨了不同组合物在使用4周后对口臭微生态失调的影响。
[0292]
材料和方法
[0293]
将20名诊断为口臭的患者分为4组。各组以口腔喷雾剂的形式使用四种组合物中的一种(表24)，每天使用3次，每次向口腔中喷雾2次。
[0294]
表24
[0295][0296][0297]
方法
[0298]
用检测硫化合物含量的仪器在口腔中检测vsc。
[0299]
vsc结果解释
[0300]
正常值(无口臭微生态失调)：0至100ppb
[0301]
弱口臭微生态失调：101至150ppb
[0302]
强烈的口臭微生态失调：151到300ppb
[0303]
非常强烈的口臭微生态失调：300ppb以上
[0304]
受试者人数和检测
[0305]
本研究共纳入20名患者。测量初始基线vsc评分，分为4个组，将评分分发给患者，组间不得存在统计学差异。指导所有患者使用指定产品4周。在研究结束时测量最终评分，并进行组间比较。先后进行了两次检测，并计算两次检测的平均值。
[0306]
结果
[0307]
表25示出了研究开始和结束时各组的vsc(ppb)平均值。
[0308]
表25
[0309][0310][0311]
(*)具有统计学意义。
[0312]
使用测试组合物4周后，观察到组合物8.a(122.2ppb)、组合物8.b(30ppb)和组合物8.c(39ppb)的vsc降低，而组合物8.d(10ppb)轻微增加。
[0313]
结论
[0314]
结果显示，包括木糖醇、橄榄油和甜菜碱的本发明组合物(组合物8.a)对口臭微生态失调具有有益效果。令人惊讶的是，与分别不含木糖醇和橄榄油的组合物8.b和8.c相比，本发明的组合物具有协同作用。
[0315]
实施例9-睡眠呼吸暂停和牙齿磨损微生态失调
[0316]
如在本发明的描述中所解释的，微生物组保护牙齿免受共生条件下的挑战。在应激、牙齿磨损和睡眠呼吸暂停口腔微生态失调以及与进食障碍或胃反流相关的口腔微生态失调中，微生物防患的破坏或改变会导致牙齿过敏和脱矿质。当微生物组被改变或破坏时，会发生过敏、脱矿质、龋齿和/或牙齿磨损(例如，由于磨牙症、侵蚀、脆裂、磨损)，并且牙齿开始溶解在酸性或极酸性介质中，过敏是这些微生态失调的第一个症状。
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材料和方法
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招募了8名被诊断为睡眠呼吸暂停微生态失调并表现出牙齿磨损和超敏反应的患者，将其分为两组。
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第一组使用传统的市售过敏凝胶和含有氟化物(氟化钠)和硝酸钾的漱口水进行治疗。所述成分的含量已知，但定量组成的其余部分未知，因此未在表26中记载。
[0320]
第二组用应用含本发明组合物的漱口水和凝胶进行治疗。两组的组合物如表26所示。组合物9.a是具有本发明组合物的漱口水，组合物9.b是具有本发明组合物的凝胶，组合物9.c是市售漱口水，组合物9.d是市售凝胶。
[0321]
患者刷牙后，每天使用漱口水3次，每次2分钟。早上漱口后和睡前将凝胶局部涂抹在口腔上。
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两组疗程均为15天。
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表26
[0324]
[0325][0326]
方法
[0327]-记录了对以下问题的自我回答的答案：-你能喝冷水吗？
[0328]-你能吃冰箱里的水果吗？
[0329]-刷牙时你感觉敏感吗？
[0330]-你觉得你的口腔湿润吗？
[0331]-你晚上磨牙吗？
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结果
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两组患者在治疗前和治疗15天后的问题答案见表27，其中示出了回答“是”或“否”的受试者人数。
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表27
[0335][0336]
结论
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使用本发明组合物的组的症状100％得到改善，但使用市售产品的组没有任何改善(湿润感)或仅25至50％得到改善(其余症状)。