高浓度抗Aβ初原纤维抗体配制品及其使用方法与流程

高浓度抗a
β
初原纤维抗体配制品及其使用方法
1.本技术要求于2020年3月20日提交的美国临时申请号62/992,746和2020年5月19日提交的美国临时申请号63/027,263的优先权；通过引用将这二者的全部内容并入本文。
2.阿尔茨海默病(ad)为不明病因的进行性、神经退化性障碍且为老年人中最常见的痴呆形式。在2006年，全世界有2660万例ad(范围：1140-5940万)(brookmeyer,r.等人,forecasting the global burden of alzheimer’s disease.[预测阿尔茨海默病的全球负担]alzheimer dement.[阿尔茨海默病与痴呆]2007；3:186-91)，同时据报道，美国有超过500万人患有ad(2010alzheimer’s disease facts and figures.[2010年阿尔兹海默病的事实和数据]alzheimer dement.[阿尔茨海默病与痴呆]2010；6:158-94)。到2050年，经预测，ad在世界范围内的发病率将增长到1.068亿(范围：4720万-2.212亿)，而仅在美国发病率经估计为1100万到1600万。(brookmeyer,见上文,及2010alzheimer's disease facts and figures[2010年阿尔茨海默病的事实和数据],见上文)。
[0003]
该疾病通常涉及认知功能的整体衰退，其缓慢地进展并使末期受试者卧床不起。ad受试者在症状发作之后通常仅存活3至10年，尽管已知极端为2年与20年。(hebert,l.e.等人,alzheimer disease in the u.s.population:prevalence estimates using the 2000census.[美国人群中的阿尔茨海默病：使用2000年人口普查进行的发病率估算]arch neurol.[神经学档案]2003；60:1119-1122。)尽管事实为由于死亡证明很少将死因归咎于ad，由ad所致的死亡因此被大大低估，但ad在美国仍为所有死亡的第七主因，且在高于65岁的美国人中为死亡的第五主因。(2010alzheimer's disease facts and figures[2010年阿尔茨海默病的事实和数据],见上文。)
[0004]
从组织学上讲，该疾病的特征是神经炎性斑块，其主要在联合皮质、边缘系统和基底神经节中发现。这些斑块的主要成分是淀粉样蛋白β肽(aβ)。aβ以各种构象状态存在：单体、低聚物、初原纤维和不溶性纤丝。阿尔茨海默病发病与aβ产生之间的机制关系细节尚不清楚。然而，一些抗aβ抗体目前正在作为阿尔茨海默病的潜在治疗剂进行临床研究。
[0005]
可以将抗aβ抗体和其他蛋白质经由静脉内、皮下、肌内和其他方式施用给受试者。抗体的剂量和/或剂型可能对开发合适的药物配制品提出许多挑战。例如，在高抗体浓度下，由于蛋白质-蛋白质聚集体的形成或片段化，抗体的稳定性可能成问题。通常，聚集随着抗体浓度的增加而增加。此外，高浓度抗体配制品需要高浓度的稳定剂和其他赋形剂，以实现长期的蛋白质稳定性和保质期。高浓度抗体配制品也常常是粘性的，这可能使药物配制品的制造和施用复杂化。
[0006]
本文提供了药物配制品，这些药物配制品包含治疗有效量的至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段。本文还提供了药物配制品，这些药物配制品包含80-300mg/ml的与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，其中该抗体是ban2401(也称为lecanemab)。已经发现本文提供的药物配制品是有利的。例如，尽管抗aβ初原纤维抗体的浓度很高(例如100mg/ml或200mg/ml)，但蛋白质-蛋白质聚集率却出乎意料地低，且类似于在低得多的抗体浓度(例如，10mg/ml)下通常观察到的聚集率。在一些实施例中，与具有显著较低浓度的抗aβ初原纤维抗体的配制品相比，当前披露的药物配制品
表现出较低的聚集体初始速率(例如，100mg/ml的抗aβ初原纤维抗体的聚集体初始水平为约0.3％，而10mg/ml的抗aβ初原纤维抗体的聚集体初始水平为约0.8％)。在一些实施例中，与具有显著较低浓度的抗aβ初原纤维抗体的配制品相比，当前披露的药物配制品表现出较低的亚可见颗粒产生率(例如，对于100mg/ml的抗aβ初原纤维抗体为10.6个颗粒/ml，而对于10mg/ml的抗aβ初原纤维抗体为12.6个颗粒/ml)。在一些实施例中，与具有显著较低浓度的抗aβ初原纤维抗体的配制品相比，当前披露的药物配制品表现出降低的聚集率、降低的初始聚集水平、降低的蛋白质片段化率、和/或亚可见颗粒形成减少。低的聚集率、初始聚集水平、蛋白质片段化率、和/或亚可见颗粒产生可允许稳定性增加和/或产品保质期延长。此外，与目前市售的静脉内产品相比，当前披露的药物配制品中的赋形剂可以以较低的量存在。在一些实施例中，在静脉注射液中稀释后，当前披露的药物配制品的ph和渗透压摩尔浓度对于静脉内施用是可接受的。
[0007]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。
[0008]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含含有seq id no:5(hcdr1)、seq id no:6(hcdr2)和seq id no:7(hcdr3)的氨基酸序列的三个重链互补决定区(hcdr1、hcdr2和hcdr3)；以及含有seq id no:8(lcdr1)、seq id no:9(lcdr2)和seq id no:10(lcdr3)的氨基酸序列的三个轻链互补决定区(lcdr1、lcdr2和lcdr3)。
[0009]
对各结构域的氨基酸的指配通常根据免疫学感兴趣的蛋白质的序列(sequences of proteins of immunological interest)(kabat等人,第5版,u.s.department ofhealth and human services[美国卫生与公众服务部],nih公开案第91-3242号,1991,下文称作“kabat报告”)的定义。
[0010]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含人恒定区。在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体的人恒定区包含重链恒定区，其选自igg1、igg2、igg3、igg4、igm、iga、ige及如kabat报告所披露的其任何等位基因变异体。此类序列中的任何一个或多个均可用于本披露中。在一些实施例中，该重链恒定区选自igg1及其等位基因变异体。人igg1恒定区的氨基酸序列为本领域中已知的且示于seq id no:3中。
[0011]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ抗体的人恒定区包含轻链恒定区，其选自κ-λ链恒定区及如kabat报告所论述的其任何等位基因变异体。此类序列中的任何一个或多个均可用于本披露中。在一些实施例中，该轻链恒定区选自κ及其等位基因变异体。人κ链恒定区的氨基酸序列为本领域中已知的且示于seq id no:4中。
[0012]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含人重链和轻链可变区框架。在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含seq id no:1的氨基酸序列，该轻链可变区包含seq id no:2的氨基酸序列。在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含人igg1重链恒定区和人igκ轻链恒定区。在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体包含重链恒定区和轻链恒定区，该重链恒定区包含seq id no:3的氨基酸序列，该轻链恒定区包含seq id no:4的氨基酸序列。
[0013]
在一些实施例中，该至少一种抗aβ初原纤维抗体为ban2401，也被称为lecanemab。ban2401为mab158的人源化igg1单克隆形式，该mab158为经产生以靶向初原纤维且披露于wo2007/108756以及journal of alzheimer's disease[阿尔茨海默病杂志]43:575-588
(2015)中的鼠类单克隆抗体。ban2401为至少一种抗aβ初原纤维抗体，其展现对aβ单体的低亲和力，同时以高选择率结合可溶性aβ聚集体物质。例如，已报导ban2401展现出分别比对aβ单体或aβ不溶性纤丝的选择率高大约1000倍及5倍至10倍的对可溶性aβ初原纤维的选择率。
[0014]
ban2401包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。ban2401重链和轻链的全长序列示于seq id no:11和12中，且描述于wo 2007/108756中以及journal of alzheimer's disease[阿尔茨海默病杂志]43:575-588(2015)中。
[0015]
适用作本披露中的至少一种抗aβ初原纤维抗体的抗体的其他非限制性实例包括wo 2002/003911、wo 2005/123775、wo2007/108756、wo 2011/001366、wo 2011/104696及wo 2016/005466中所披露的抗体。
[0016]
在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以至少80mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以至少100mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以至少200mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以至少250mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以范围为80mg/ml至300mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以范围为85mg/ml至275mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以范围为90mg/ml至250mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以范围为95mg/ml至225mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体以范围为100mg/ml至200mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、110mg/ml、120mg/ml、130mg/ml、140mg/ml、150mg/ml、160mg/ml、170mg/ml、180mg/ml、190mg/ml、200mg/ml、210mg/ml、220mg/ml、230mg/ml、240mg/ml、250mg/ml、260mg/ml、270mg/ml、280mg/ml、290mg/ml、或300mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以100mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以200mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以250mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段以300mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段是ban2401。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。在一些实施例中，该分离的抗体或其片段包含含有seq id no:5(hcdr1)、seq id no:6(hcdr2)和seq id no:7(hcdr3)的氨基酸序列的三个重链互补决定区(hcdr1、hcdr2和hcdr3)；以及含有seq id no:8(lcdr1)、seq id no:9(lcdr2)和seq id no:10(lcdr3)的氨基酸序列的三个轻链互补决定区(lcdr1、lcdr2和lcdr3)。
[0017]
在一些实施例中，包含治疗有效量的至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的药物配制品还包含至少一种额外组分。在一些实施例中，该药物配制品中的至少一种额外组分选自缓冲剂。在一些实施例中，该缓冲剂为柠檬酸盐缓冲剂。在一些实施例中，该缓冲剂是组氨酸缓冲剂。在一些实施例中，该药物配制品中的至少一种额外组分选自乳化剂。在一些实施例中，该药物配制品中的至少一种额外组分选自柠檬酸(或柠檬酸一水合物)、氯化钠、组氨酸(和/或组氨酸盐酸盐)、精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品中的至少一种额外组分选自柠檬酸(和/或柠
檬酸一水合物)、精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品中的至少一种额外组分选自组氨酸(和/或组氨酸盐酸盐)、精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)和聚山梨酯80。
[0018]
在一些实施例中，该药物配制品包含精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度范围为约100mm至约400mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度范围为约110mm至约380mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度范围为约120mm至约360mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度范围为约125mm至约350mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度为125mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度为200mm。在一些实施例中，该药物配制品中精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)的浓度为350mm。
[0019]
在一些实施例中，该药物配制品包含组氨酸。在一些实施例中，该药物配制品中组氨酸的浓度范围为约10mm至约100mm。在一些实施例中，该药物配制品中组氨酸的浓度范围为10mm至100mm、12mm至80mm、14mm至60mm、15mm至55mm、15mm至35mm、或15mm至25mm。在一些实施例中，组氨酸的浓度为25mm。在一些实施例中，组氨酸的浓度为50mm。
[0020]
在一些实施例中，该药物配制品包含聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品中聚山梨酯80的浓度范围为约0.01％w/v至0.1％w/v、0.01％w/v至0.08％w/v、0.02％w/v至0.08％w/v、0.03％w/v至0.07％w/v、或0.04％w/v至0.06％w/v。在一些实施例中，该聚山梨酯80以0.01％w/v、0.02％w/v、0.03％w/v、0.04％w/v、0.05％w/v、0.06％w/v、0.07％w/v、或0.08％w/v的浓度存在于该药物配制品中。在一些实施例中，该聚山梨酯80以0.02％w/v的浓度存在于该药物配制品中。在一些实施例中，该聚山梨酯80以0.05％w/v的浓度存在于该药物配制品中。
[0021]
在一些实施例中，该药物配制品包含柠檬酸一水合物。在一些实施例中，该药物配制品中柠檬酸一水合物的浓度范围为约10mm至100mm。在一些实施例中，该药物配制品中柠檬酸一水合物的浓度范围为10mm至100mm、10mm至90mm、15mm至85mm、20mm至80mm、25mm至75mm、30mm至70mm、30mm至60mm、或30mm至50mm。在一些实施例中，该药物配制品中柠檬酸一水合物的浓度为50mm。
[0022]
在一些实施例中，本披露提供了具有4.5至5.5范围的ph的药物配制品。在一些实施例中，该药物配制品中ph的范围为4.0至6.0、4.2至5.8、4.3至5.7、4.4至5.6、或4.5至5.5。在一些实施例中，ph是4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4或5.5。在一些实施例中，ph是5.0。
[0023]
在一些实施例中，本文披露的药物配制品可以是本领域普通技术人员认为合适的溶液和/或任何其他合适的液体配制品的形式。本披露的组合物的施用途径可以是静脉内或皮下施用。在一些实施例中，该药物配制品被配制为用于静脉内施用的无菌无热原液体。在一些实施例中，该药物配制品被配制为用于皮下施用的无菌无热原液体。在一些实施例中，该药物组合物为盐溶液。
[0024]
在一些实施例中，该药物配制品是液体剂型，其包含至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)，并且进一步包含例如柠檬酸一水合物、精氨酸、精氨酸盐酸盐、和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品包含100mg/ml的
至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)、50mm的柠檬酸一水合物、110mm的精氨酸、240mm的精氨酸盐酸盐、和0.05％(w/v)的聚山梨酯80，且ph为5.0
±
0.4。
[0025]
在一些实施例中，该药物配制品是液体剂型，其包含至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)，并且进一步包含例如组氨酸、组氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐、和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品包含100mg/ml或200mg/ml的至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)、25mm的组氨酸和组氨酸盐酸盐、200mm的精氨酸盐酸盐、和0.05％(w/v)的聚山梨酯80，且ph为5.0
±
0.4。
[0026]
在一些实施例中，该药物配制品是液体剂型，其包含至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)，并且进一步包含例如组氨酸、组氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐、和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品包含200mg/ml的至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)、50mm的组氨酸和组氨酸盐酸盐、125mm的精氨酸盐酸盐、和0.02％(w/v)的聚山梨酯80，且ph为5.0
±
0.4。
[0027]
在一些实施例中，该药物配制品是液体剂型，其包含至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)，并且进一步包含例如组氨酸、组氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐、和聚山梨酯80。在一些实施例中，该药物配制品包含200mg/ml的至少一种与aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段(例如ban2401)、50mm的柠檬酸(和/或柠檬酸一水合物)、125mm的精氨酸(和/或精氨酸盐酸盐)、和0.02％(w/v)的聚山梨酯80，且ph为5.0
±
0.4。
[0028]
ban2401和包括使用ban2401的方法披露于美国临时申请号62/749,614和pct国际申请号pct/us 2019/043067中，将其全部内容通过引用并入本文。
附图说明
[0029]
图1描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0030]
图2描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0031]
图3描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的单体百分比。
[0032]
图4描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0033]
图5描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0034]
图6描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的单体百分比。
[0035]
图7描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0036]
图8描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0037]
图9描述了在5℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的单体百分比。
[0038]
图10描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0039]
图11描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0040]
图12描述了在25℃在0、1、2、和3个月的时间点，ph值为4.5、5.0、5.5、6.0、和6.5的ban2401的配制品中的单体百分比。
[0041]
图13描述了在25℃在0、1、和2个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0042]
图14描述了在25℃在0、1、和2个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0043]
图15描述了在25℃在0、1、和2个月的时间点，10mg/ml、100mg/ml、和200mg/ml的ban2401的配制品中的单体百分比。
[0044]
图16描述了ban2401的配制品中单体的聚集百分比随精氨酸浓度的变化。
[0045]
图17描述了制造ban2401的10mg/ml注射剂的过程的流程图。
[0046]
图18描述了制造ban2401的100mg/ml注射剂的过程的流程图。
[0047]
图19描述了在5℃在0和12个月的时间点，在ph值下的ban2401的配制品的ph值。
[0048]
图20描述了在25℃在0、1、和3个月的时间点，在ph值下的ban2401的配制品的ph值。
[0049]
图21描述了在5℃一个月后和在25℃搅动下，在ph值下的ban2401的配制品的ph值。
[0050]
图22描述了在5℃在0、1、3、6、9、和12个月的时间点，ban2401的配制品在405nm处的吸光度。
[0051]
图23描述了在25℃在0、1、和3个月的时间点，ban2401的配制品在405nm处的吸光度。
[0052]
图24描述了在5℃一个月和在25℃搅动下，ban2401的配制品在405nm处的吸光度。
[0053]
图25描述了在5℃在0、1、3、6、9、和12个月的时间点，ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0054]
图26描述了在5℃在0、1、3、6、9、和12个月的时间点，ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0055]
图27描述了在5℃在0、1、3、6、9、和12个月的时间点，ban2401的配制品中的单体百分比。
[0056]
图28描述了在25℃在0、1、和3个月的时间点，ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0057]
图29描述了在25℃在0、1、和3个月的时间点，ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0058]
图30描述了在25℃在0、1、和3个月的时间点，ban2401的配制品中的单体百分比。
[0059]
图31描述了在5℃一个月和在25℃搅动下，ban2401的配制品中的聚集百分比。
[0060]
图32描述了在5℃一个月和在25℃搅动下，ban2401的配制品中的片段化百分比。
[0061]
图33描述了在5℃一个月和在25℃搅动下，ban2401的配制品中的单体百分比。定义
[0062]
以下为本技术中所用的术语的定义。
[0063]
除非上下文另外明确指示，否则如本文所用，单数术语“一个/一种(a/an)”和“该(the)”包括复数引用。
[0064]
如本文所用，词组“和/或”意指如此结合的要素的“任一者或两者”，即，一些情况中结合存在且在其他情况中不结合存在的要素。因此，作为非限制性实例，“a和/或b”在与诸如“包括”之类的开放式语言结合使用时，在一些实施例中可以仅指a(任选地包括除b以外的要素)；在其他实施例中，仅指b(任选地包括除a以外的要素)；在又其他实施例中，指a和b两者(任选地包括其他要素)；等等。
[0065]
如本文所用，“至少一个”意指要素清单中的一个或多个要素，但并非必需包括要素清单中具体列举的每个要素中的至少一者，且不排除要素清单中的要素的任何组合。此定义还允许可任选地存在除词组“至少一个”所指的要素清单内具体鉴别的要素以外的要素，而无论与具体鉴别的那些要素相关抑或不相关。因此，作为非限制性实例，“a和b中的至少一个”(或等效地，“a或b中的至少一个”，或等效地“a和/或b中的至少一个”)可以在一个实施例中指至少一个(任选地包括多于一个)a而不存在b(并且任选地包括除b以外的要素)；在另一个实施例中，指至少一个(任选地包括多于一个)b而不存在a(以及任选地包括除a以外的要素)；在又另一个实施例中，指至少一个(任选地包括多于一个)a，以及至少一个(任选地包括多于一个)b(以及任选地包括其他要素)；等等。
[0066]
当单独或作为数值范围的一部分来叙述数字时，应当理解，该数值可以在高于或低于所述值发生一个对于所述值而言合理的变化，如本领域技术人员所认识的那样。
[0067]
如本文所用，抗体的“片段”包含抗体的一部分，例如包含抗原结合区或其可变区。片段的非限制性实例包括fab片段、fab'片段、f(ab')2片段、fv片段、双抗体、线性抗体、和单链抗体分子。
[0068]
如本文所用，“片段化”或“片段形成”是指当其在配制品中或添加到配制品中时抗体或其片段的降解。通过片段化或片段形成而产生的片段可能能够或可能不能够与抗体或其片段结合的抗原结合。
[0069]
如本文所用，“组氨酸缓冲剂”可以包含组氨酸、组氨酸盐酸盐或其组合，其中组氨酸盐酸盐可为组氨酸盐酸盐一水合物。
[0070]
如本文所用，“柠檬酸盐缓冲剂”可以包含柠檬酸、其盐、或其组合，其中柠檬酸可以是柠檬酸一水合物或无水柠檬酸。本披露的非限制性实施例：
[0071]
本披露的某些实施例涉及水性药物配制品。
[0072]
在一些实施例中，提供了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80-300mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，其包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域；和
(b)100mm至400mm的精氨酸，其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合；该水性药物配制品任选地包含以下中的任何一种或多种：a.0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80；b.药学上可接受的缓冲剂，任选地其中该缓冲剂是组氨酸缓冲剂或柠檬酸盐缓冲剂；和c.4.5至5.5的ph。
[0073]
在一些实施例中，提供了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80-300mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，其包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域；和(b)药学上可接受的缓冲剂，其中该缓冲剂是组氨酸缓冲剂，任选地其中该组氨酸缓冲剂的浓度为约25mm；该水性药物配制品任选地包含以下中的任何一种或多种：a.0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80；b.100mm至400mm的精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合；和c.4.5至5.5的ph。
[0074]
一些实施例涉及水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，其浓度为80mg/ml至300mg/ml，(b)100mm至400mm的精氨酸，(c)0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80，和(d)药学上可接受的缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，且其中该抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，并且其中精氨酸是精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0075]
抗体浓度
[0076]
对于本文所述的任何水性药物配制品，该抗体可以以下浓度存在。
[0077]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以100mg/ml或更高的浓度存在。在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以100mg/ml的浓度存在。
[0078]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以200mg/ml或更高的浓度存在。在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以200mg/ml的浓度存在。
[0079]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以80mg/ml至300mg/ml的浓度范围存在。在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以80mg/ml至240mg/ml的浓度范围存在。
[0080]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以100mg/ml至200mg/ml的浓度范围存在。
[0081]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以80mg/
ml至300mg/ml、85mg/ml至275mg/ml、90mg/ml至250mg/ml、95mg/ml至225mg/ml、100至200mg/ml的浓度范围存在。在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以90mg/ml至220mg/ml、100mg/ml至210mg/ml、或110mg/ml至200mg/ml的浓度范围存在。
[0082]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、110mg/ml、120mg/ml、180mg/ml、190mg/ml、200mg/ml、210mg/ml、220mg/ml、230mg/ml、240mg/ml、250mg/ml、260mg/ml、270mg/ml、280mg/ml、290mg/ml、或300mg/ml的浓度存在。
[0083]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以100mg/ml的浓度存在。
[0084]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以200mg/ml的浓度存在。
[0085]
在该药物配制品的一些实施例中，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段是ban2401。
[0086]
精氨酸
[0087]
对于本文所述的任何水性药物配制品，该配制品可以包含如下的精氨酸。
[0088]
在一些实施例中，该药物配制品包含精氨酸。在一些实施例中，该精氨酸是精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0089]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度范围为约100mm至约400mm。
[0090]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度范围为100mm至400mm、110mm至380mm、120mm至360mm、125mm至350mm、100mm至200mm、125mm至200mm或150mm至200mm。在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度范围为150mm至250mm、160mm至240mm、170mm至230mm、180mm至220mm、190mm至210mm的精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0091]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度为125mm。
[0092]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度为200mm。
[0093]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度范围为200mm至400mm、210mm至390mm、220mm至380mm、230mm至370mm、240mm至360mm、240mm至350mm或250mm至350mm。
[0094]
在该药物配制品的一些实施例中，该精氨酸的浓度为350mm。
[0095]
聚山梨酯80(ps80)
[0096]
对于本文所述的任何水性药物配制品，该配制品可以包含如下的聚山梨酯80。
[0097]
在该药物配制品的一些实施例中，该聚山梨酯80的浓度范围为约0.01％w/v至0.1％w/v、0.01％w/v至0.08％w/v、0.02％w/v至0.08％w/v、0.03％w/v至0.07％w/v、或0.04％w/v至0.06％w/v。
[0098]
在该药物配制品的一些实施例中，该聚山梨酯80以0.01％w/v、0.02％w/v、0.03％w/v、0.04％w/v、0.05％w/v、0.06％w/v、0.07％w/v、或0.08％w/v的浓度存在。
[0099]
在该药物配制品的一些实施例中，该聚山梨酯80以0.02％w/v的浓度存在。
[0100]
在该药物配制品的一些实施例中，该聚山梨酯80以0.05％w/v的浓度存在。
[0101]
缓冲剂
[0102]
对于本文所述的任何水性药物配制品，该配制品可以包含如下的药学上可接受的
缓冲剂。
[0103]
在该药物配制品的一些实施例中，该药学上可接受的缓冲剂为柠檬酸盐缓冲剂。
[0104]
在该药物配制品的一些实施例中，该柠檬酸盐缓冲剂以约10mm至约100mm的浓度存在。
[0105]
在该药物配制品的一些实施例中，该柠檬酸盐缓冲剂的浓度范围为10mm至100mm、10mm至90mm、15mm至85mm、20mm至80mm、25mm至75mm、30mm至70mm、30mm至60mm、或30mm至50mm。
[0106]
在该药物配制品的一些实施例中，该柠檬酸盐缓冲剂以50mm的浓度存在。
[0107]
在该药物配制品的一些实施例中，该药学上可接受的缓冲剂为组氨酸缓冲剂。
[0108]
在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂以约10mm至约100mm的浓度存在。
[0109]
在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂的浓度范围为10mm至100mm、12mm至80mm、14mm至60mm、或15mm至55mm、15mm至35mm、或15mm至25mm。
[0110]
在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂以25mm的浓度存在。
[0111]
在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂以50mm的浓度存在。
[0112]
在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂包含组氨酸和组氨酸盐酸盐一水合物。在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂包含组氨酸和组氨酸盐酸盐一水合物，其中该组氨酸的浓度为约0.1至0.3mg/ml，且该组氨酸盐酸盐一水合物的浓度为约4至6mg/ml。在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂包含组氨酸和组氨酸盐酸盐一水合物，其中该组氨酸的浓度为约0.26mg/ml，且该组氨酸盐酸盐一水合物的浓度为约4.89mg/ml。在该药物配制品的一些实施例中，该组氨酸缓冲剂包含组氨酸和组氨酸盐酸盐一水合物，其中该组氨酸包含0.2-0.3mg/ml的组氨酸和4.4至4.9mg/ml的组氨酸盐酸盐，任选地其中该组氨酸盐酸盐是一水合物。
[0113]
ph
[0114]
对于本文所述的任何水性药物配制品，该配制品可以具有如下的ph。
[0115]
在该药物配制品的一些实施例中，ph的范围为4.0至6.0、4.2至5.8、4.3至5.7、4.4至5.6、或4.5至5.5。
[0116]
在该药物配制品的一些实施例中，ph为4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4或5.5。
[0117]
在该药物配制品的一些实施例中，ph为4.5至5.5。
[0118]
在该药物配制品的一些实施例中，ph为5.0。
[0119]
在该药物配制品的一些实施例中，该药物配制品适合于静脉内注射。
[0120]
在该药物配制品的一些实施例中，该药物配制品适合于皮下注射。
[0121]
在该药物配制品的一些实施例中，该药物配制品包含甲硫氨酸。
[0122]
在一些实施例中，披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至240mg/ml的ban2401，(b)140mm至260mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80，和(d)15mm至35mm的组氨酸缓冲剂，
其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0123]
在一些实施例中，披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至240mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)140mm至260mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80，和(d)15mm至35mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0124]
在一些实施例中，披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至240mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)140mm至260mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80，和(d)15mm至35mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0125]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至120mg/ml的ban2401，(b)240mm至360mm的精氨酸，(c)0.03％w/v至0.08％w/v的聚山梨酯80，和(d)30mm至70mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0126]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至120mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)240mm至360mm的精氨酸，(c)0.03％w/v至0.08％w/v的聚山梨酯80，和(d)30mm至70mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0127]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)80mg/ml至120mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)240mm至360mm的精氨酸，(c)0.03％w/v至0.08％w/v的聚山梨酯80，和
(d)30mm至70mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0128]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的ban2401，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0129]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0130]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0131]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)200mg/ml的ban2401，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0132]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)200mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0133]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)200mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)200mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0134]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的ban2401，(b)350mm的精氨酸，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)50mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0135]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)350mm的精氨酸，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)50mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0136]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)100mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)350mm的精氨酸，(c)0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)50mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸为精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。
[0137]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)150mg/ml至250mg/ml的ban2401，(b)100mm至150mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)35mm至65mm的组氨酸缓冲剂，
[0138]
其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。在一些实施例中，本文披露了水性
药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)150mg/ml至250mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，(b)100mm至150mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)35mm至65mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0139]
在一些实施例中，本文披露了水性药物配制品，该水性药物配制品包含：(a)150mg/ml至250mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:11的氨基酸序列的重链，和(ii)包含seq id no:12的氨基酸序列的轻链，(b)100mm至150mm的精氨酸盐酸盐，(c)0.01％w/v至0.05％w/v的聚山梨酯80，和(d)35mm至65mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。
[0140]
在一些实施例中，该水性药物配制品的ph为5.0。减少聚集体形成的方法
[0141]
在一些实施例中，本文披露了减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的聚集体形成的方法，该方法包括：(a)提供药物配制品，该药物配制品包含50mg/ml或更高浓度的与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，任选地其中该浓度为80mg/ml至300mg/ml，任选地其中该浓度为100mg/ml至200mg/ml，以及(b)添加精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合，并任选地提供药学上可接受的缓冲剂，其中该缓冲剂任选地是组氨酸缓冲剂，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。
[0142]
在减少聚集体形成的方法的一些实施例中，该药物配制品的ph的范围是4.5至5.5。在该方法的一些实施例中，该药物配制品的ph是5.0。
[0143]
在减少聚集体形成的方法的一些实施例中，该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以150mm至250mm的浓度存在。
[0144]
在一些实施例中，本文披露了减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的片段化的方法，该方法包括：(a)提供药物配制品，该药物配制品包含50mg/ml或更高浓度的与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，任选地其中该浓度为80mg/ml至300mg/ml，任选地其中该浓度为100mg/ml至200mg/ml，以及(b)添加组氨酸缓冲剂，并任选地进一步提供精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。
[0145]
在减少片段化的方法的一些实施例中，该药物配制品的ph的范围是4.5至5.5。在该方法的一些实施例中，该药物配制品的ph是5.0。
[0146]
在减少片段化的方法的一些实施例中，该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以100mm至400mm的浓度存在。
[0147]
在减少片段化的方法的一些实施例中，该药物配制品进一步包含0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80。
[0148]
在减少片段化的方法的一些实施例中，该药物配制品进一步包含药学上可接受的缓冲剂，其中该缓冲剂是组氨酸缓冲剂，任选地，其中组氨酸缓冲剂的范围为10mm至100mm、12mm至80mm、14mm至60mm、或15mm至55mm、15mm至35mm、或15mm至25mm。
[0149]
在一些实施例中，本文披露了减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的聚集体形成和/或片段化的方法，该方法包括：(a)提供药物配制品，该药物配制品包含50mg/ml或更高浓度的与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，任选地其中该浓度为80mg/ml至300mg/ml，任选地其中该浓度为100mg/ml至200mg/ml，(b)添加精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合，和(c)提供药学上可接受的组氨酸缓冲剂，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。
[0150]
在一些实施例中，本文披露了减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的聚集体形成和/或片段化的方法，该方法包括：(a)提供药物配制品，该药物配制品包含50mg/ml或更高浓度的与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，任选地其中该浓度为80mg/ml至300mg/ml，任选地其中该浓度为100mg/ml至200mg/ml，(b)提供组氨酸缓冲剂，和(c)提供精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合，其中该配制品的ph为4.5-5.5，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域。
[0151]
本文还提供了以下实施例：[实施例01]一种水性药物配制品，该水性药物配制品包含：a.与人aβ初原纤维结合的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，其浓度为80mg/ml至300mg/ml，b.100mm至400mm的精氨酸，c.0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80，和d.药学上可接受的缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，并且其中该精氨酸是精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。[实施例02]根据权利要求1所述的药物配制品，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体
或其片段以100mg/ml至200mg/ml的浓度存在。[实施例03]根据权利要求1所述的药物配制品，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以100mg/ml的浓度存在。[实施例04]根据权利要求1所述的药物配制品，其中该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段以200mg/ml的浓度存在。[实施例05]根据权利要求1-4中任一项所述的药物配制品，该药物配制品进一步包含甲硫氨酸。[实施例06]根据权利要求1-5中任一项所述的药物配制品，其中该药学上可接受的缓冲剂为柠檬酸盐缓冲剂或组氨酸缓冲剂。[实施例07]根据权利要求1-6中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含10至100mm的柠檬酸盐缓冲剂或10至100mm的组氨酸缓冲剂。[实施例08]根据权利要求1-7中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含125至350mm的精氨酸。[实施例09]根据权利要求1-8中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含200mm的精氨酸，其中该精氨酸为精氨酸盐酸盐。[实施例10]根据权利要求1-9中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含200mm的精氨酸和25mm的组氨酸缓冲剂，其中该精氨酸为精氨酸盐酸盐。[实施例11]一种水性药物配制品，该水性药物配制品包含：a.80mg/ml至240mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，b.140mm至260mm的精氨酸盐酸盐，c.0.02％w/v至0.08％w/v的聚山梨酯80，和d.15mm至35mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。[实施例12]一种水性药物配制品，该水性药物配制品包含：a.80mg/ml至120mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，b.240mm至360mm的精氨酸，c.0.02％w/v至0.08％w/v的聚山梨酯80，和d.30mm至50mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph，并且其中该精氨酸是精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。[实施例13]一种减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的聚集体形成的方法，该方法包括：提供包含分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的水性药物配制品，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段
的浓度为80mg/ml至300mg/ml，以及添加精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合至所述水性药物配制品中，其中该药物配制品的ph范围为从4.5至5.5。[实施例14]根据权利要求13所述的方法，其中该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以150至250mm的浓度存在。[实施例15]根据权利要求14所述的方法，其中该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以200mm的浓度存在。[实施例16]根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中该药物配制品进一步包含药学上可接受的缓冲剂。[实施例17]根据权利要求16所述的方法，其中该药学上可接受的缓冲剂为组氨酸缓冲剂或柠檬酸盐缓冲剂。[实施例18]一种减少分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的片段化的方法，该方法包括：提供包含分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的水性药物配制品，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的浓度为80mg/ml至300mg/ml，以及添加组氨酸缓冲剂至所述水性药物组合物中，其中该药物配制品的ph范围为从4.5至5.5。[实施例19]根据权利要求18所述的方法，该方法包括15至35mm的组氨酸缓冲剂。[实施例20]根据权利要求13-19中任一项所述的方法，其中该药物配制品进一步包含0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80。[实施例21]一种水性药物配制品，该水性药物配制品包含：a.80mg/ml至240mg/ml的分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域；b.140mm至260mm的精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合；c.0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80；和d.15mm至35mm的组氨酸缓冲剂或30mm至50mm的柠檬酸盐缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。[实施例22]根据实施例21所述的药物配制品，该药物配制品包含100mg/ml的该抗体。[实施例23]根据实施例21所述的药物配制品，该药物配制品包含200mg/ml的该抗体。[实施例24]根据实施例21所述的药物配制品，该药物配制品包含90mg/ml至220mg/ml、100mg/ml至210mg/ml、或110mg/ml至200mg/ml的该抗体。[实施例25]根据实施例21-24中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含组氨酸缓冲剂，其中该组氨酸缓冲剂包含15mm至30mm、15mm至25mm、或20mm至30mm的组氨酸。[实施例26]根据实施例21-25中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含组
氨酸缓冲剂，其中该组氨酸缓冲剂包含0.2-0.3mg/ml的组氨酸和4.4至4.9mg/ml的组氨酸盐酸盐，任选地该组氨酸盐酸盐是一水合物。[实施例27]根据实施例21-26中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含150mm至250mm、160mm至240mm、170mm至230mm、180mm至220mm、190mm至210mm的精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合。[实施例28]根据实施例21-27中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含0.02％w/v至0.05％、或0.04％w/v至0.04％w/v的聚山梨酯80。[实施例29]根据实施例21-28中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含柠檬酸盐缓冲剂。[实施例30]根据实施例21-29中任一项所述的药物配制品，该药物配制品包含组氨酸缓冲剂。[实施例31]根据实施例21-30中任一项所述的药物配制品，该药物配制品进一步包含甲硫氨酸。[实施例32]一种水性药物配制品，该水性药物配制品包含：a.100mg/ml至200mg/ml的抗体，该抗体包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域；b.200mm的精氨酸盐酸盐；c.0.05％w/v的聚山梨酯80；和d.25mm的组氨酸缓冲剂，其中该药物配制品具有范围为4.5至5.5的ph。[实施例33]根据实施例32所述的药物配制品，该药物配制品包含100mg/ml的该抗体。[实施例34]根据实施例32所述的药物配制品，该药物配制品包含200mg/ml的该抗体。[实施例35]一种减少抗体的聚集体形成和/或片段化的方法，该方法包括：a.提供包含分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的水性药物配制品，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段包含：(i)包含seq id no:1的氨基酸序列的重链可变结构域，和(ii)包含seq id no:2的氨基酸序列的轻链可变结构域，该分离的抗aβ初原纤维抗体或其片段的浓度为80mg/ml至300mg/ml，以及b.向所述水性药物组合物中添加1)精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合，或2)组氨酸缓冲剂。[实施例36]根据实施例35所述的方法，其中该药物配制品的ph范围为从4.5至5.5。[实施例37]根据实施例35所述的方法，其中该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以150-250mm的浓度存在。[实施例38]根据实施例37所述的方法，其中该精氨酸、精氨酸盐酸盐、或其组合以200mm的浓度存在。[实施例39]根据实施例38所述的方法，该方法包含15至25mm的组氨酸缓冲剂。[实施例40]根据实施例35-39中任一项所述的方法，其中该药物配制品进一步包
含0.01％w/v至0.1％w/v的聚山梨酯80。[实施例41]根据实施例35-40中任一项所述的方法，其中该药物配制品进一步包含药学上可接受的缓冲剂。[实施例42]根据实施例41所述的方法，其中该药学上可接受的缓冲剂为组氨酸缓冲剂或柠檬酸盐缓冲剂。实例实例1：蛋白质浓度研究
[0152]
制备具有三种蛋白质浓度(10、100、200mg/ml)的样品并在浓度研究中检验。10mg/ml的材料是ban2401纯原料药(pds)，100和200mg/ml的材料是使用amicon ultra-15旋转过滤器从ban2401 pds生产的。所有样品均在相同的配制品缓冲剂(25mm柠檬酸钠，125mm氯化钠，ph 5.7)中，但每个样品具有不同的ps80水平。10、100、200mg/ml样品中的ps80百分比分别为0.02％、0.16％和0.32％。将所有样品进行0.2gm过滤，并等分到无菌聚丙烯(pp)管中进行稳定性测试。(注意：进行浓度研究时，ps80去除过程尚不可用。)
[0153]
使用非变性hplc-sec、ph和dls在两个温度(5℃和25℃)下进行3个月的样品稳定性评估。在t＝0的样品上进行了额外的表征测定，例如ps80检定。表1显示了测试样品的详细信息。表1.测试时间表(浓度研究)表1.测试时间表(浓度研究)
[0154]
使用带有微探针的ph计测量ph。在测量之前，使用ph 4.0和7.0标准液进行校准。
[0155]
通过对储存在5℃和25℃的稳定性样品进行非变性hplc-sec来评估浓缩的ban2401的聚集和物理降解。
[0156]
使用tsk g3000 swxl色谱柱(流动相为0.2m磷酸钠，ph 7.0，流速1.0ml/min)进行hplc-sec(非变性)分析。对于10、100或200mg/ml的蛋白质浓度，样品注射体积分别为15、1.5或0.8pi。这样可确保在整个研究过程中将约150pg的蛋白质注射到色谱柱上。单体、聚集体和片段的相对峰面积(％)的结果报告在图1-6中。
[0157]
在两种温度(5℃和25℃)下，随着蛋白质浓度的增加，可看到聚集体百分比和聚集率都升高。对于100和200mg/ml样品，起始聚集百分比几乎是10mg/ml样品的两倍。这表明浓缩过程单独导致蛋白质聚集。在5℃和25℃储存期间，发生额外的聚集。对于100mg/ml，在5℃经3个月的平均聚集率为每月0.17％，对于200mg/ml为每月0.20％。为了进行比较，在相同条件下，10mg/ml样品表现出每月仅0.07％的聚集率。总之，100mg/ml或更高的ban2401似
乎在配制品中是物理上不稳定的。
[0158]
通过uv通过在beckman du-800分光光度计上测量280和320mu处的吸光度，评估蛋白质浓度。将样品稀释500倍，并以一式两份进行制备。使用以下公式，使用消光系数ε为1.32计算蛋白质浓度：浓度＝(a280-a320)/εx稀释因子
[0159]
使用uv-vis分光光度计测量蛋白质浓度。结果在表2中列出。总体而言，在两个温度下，整个3个月的浓度均保持不变。表2.蛋白质浓度结果(浓度研究)实例2：ph筛选研究
[0160]
在五个不同的ph值下评估了200mg/ml的ban2401的稳定性。为了制备样品，将去除ps80的ban2401 pds浓缩并渗滤到含有50mm柠檬酸钠、100mm氯化钠的缓冲剂(ph 4.5)中。经由稀释进行最终浓度调节，以达到200mg/ml蛋白质和0.02％ps80的浓度。将所得材料分成5个等分试样；用10n氢氧化钠滴定等分试样中的四个，以产生不同ph值(即ph 5.0、5.5、6.0和6.5)的样品。将所得样品进行0.2-μm过滤，再等分到无菌聚丙烯(pp)管中以进行稳定性评估。
[0161]
使用非变性hplc-sec、ph和dls在两个温度(5℃和25℃)下经3个月的时间评估样品稳定性。另外，在1个月的时间点进行了搅动研究，其中在25℃的培养箱中以250rpm水平搅动5℃样品的子集，持续3天。表3显示了测试样品的详细信息。表3.测试时间表(ph研究)表3.测试时间表(ph研究)
[0162]
使用tsk g3000 swxl色谱柱(流动相为0.2m磷酸钠，ph 7.0，流速1.0ml/min)进行sec-hplc分析。对于10、100或200mg/ml的蛋白质浓度，样品注射体积分别为15、1.5或0.8μl。这样可确保在整个研究过程中将约150μg的蛋白质注射到色谱柱上。报告了单体、聚集体和片段的相对峰面积(％)的结果。
[0163]
通过对储存在5℃和25℃的稳定性样品进行非变性hplc-sec来评估浓缩的ban2401的聚集和物理降解。结果示于图7-12中。ph较低时，ban2401似乎在两个温度(5℃和25℃)下更稳定。ph值为4.5和5.0的配制品开始时的聚集体百分比较低，并且表现出聚集体形成的增长较慢，在5℃的比率为每月约0.07％。除了聚集以外，还分析了蛋白质的片段化。结果表明，在较低ph值的ban2401配制品中，ban2401的片段化更为明显。基于这些考虑，认为ph 5.0的ban2401配制品是最稳定的(即，相对于在不同ph值下的其他配制品，其表现出ban2401的较少聚集和/或物理降解)。实例3：赋形剂筛选研究
[0164]
在这项研究中筛选了十二种赋形剂。为了制备含200mg/ml ban2401的样品，经由tff步骤浓缩去除ps80的ban2401，然后用基础缓冲剂(50mm柠檬酸盐，0.02％ps80，ph 6.0)进行渗滤步骤。将浓缩的材料等分成二十四个部分。将每个部分掺有含有特定赋形剂的储备溶液。对于大多数赋形剂，检查两个浓度，氯化钠和抗坏血酸除外，对于氯化钠，制备了具有三个浓度水平的样品；对于抗坏血酸，制备了具有一个浓度水平的样品。表4示出了所用的赋形剂及其浓度的列表。表4.赋形剂及对应浓度列表
[0165]
将所有样品，包括对照(即在不含赋形剂的基础缓冲剂中的样品)，进行0.2gm过滤，然后使用手动加塞工具无菌填充到bd注射器中。对照样品也填充到玻璃小瓶中。将小瓶和bd注射器置于5℃和25℃。使用非变性hplc-sec和ph进行2个月的样品稳定性评估。
[0166]
在次优缓冲剂(50mm柠檬酸盐，0.02％ps80，ph 6.0)条件下制备赋形剂筛选研究的样品，以扩大赋形剂在防止聚集体形成方面的积极作用。通过进行非变性hplc-sec评估每种配制品在25℃经2个月的稳定性特征(聚集)。
[0167]
如图13-15所示，在这些配制品中，含有160mm精氨酸的配制品(f14)产生了最低的聚集率。作为比较，160mm精氨酸配制品在25℃在2个月后仅表现出1.4％的聚集体，而对照(即，在不含赋形剂的基础缓冲剂中的配制品—f0)在相同条件下在同一时间表现出2.4％的聚集体。
[0168]
另外，具有精氨酸的配制品具有最低的起始聚集百分比，这表明精氨酸能够抑制蛋白质浓缩步骤中聚集体的形成。与对照品(f0)相比，精氨酸配制品(f14)的片段化程度略高。然而，该差异可能在测定可变性之内。
[0169]
该研究中第二好的赋形剂是具有400mm脯氨酸的配制品(f10)，尽管它在控制聚集方面的作用不如精氨酸配制品(f14)有效。
[0170]
与对照样品相比，含氯化钠的配制品(f16-f18)对稳定性没有影响。对于含ps80的配制品(f19和f20)进行了相同的观察：通过改变ps80含量没有观察到稳定性作用。含抗坏血酸的配制品(f15)从研究开始，就显示出了增加聚集体和片段百分比的显著作用。
[0171]
测量两种精氨酸配制品(f13和f14)的ph以验证配制品中精氨酸的存在不会引起ph随时间改变。如表4所示，未观察到ph的变化。还测量了这两种配制品的渗透压摩尔浓度。在将这些样品同时解冻以进行测量之前，将它们储存在-20℃下。表5.精氨酸配制品(f13和f14)的ph和渗透压摩尔浓度表5.精氨酸配制品(f13和f14)的ph和渗透压摩尔浓度实例4：精氨酸浓度研究
[0172]
配制品中精氨酸浓度与聚集体之间的关系由design7.0进行研究。下表6中显示了研究选择的因素，以及每个因素的探索水平。表6.实例4中研究的因素
[0173]
通过d-最优设计在design7.0中引起样品随机化。获得的样品集含有25个数据点，其中包括4个重复品，如表7所示。制备并评估每种配制品。表7.为实例4制备的配制品
[0174]
通过design7.0评估了含有0.02％聚山梨酯80的100mg/ml的ban2401配制品(ph 5.0)中精氨酸浓度与聚集体水平之间的关系。估计结果示于图16中。实例5：ps80研究
[0175]
为了评估在应力条件下的药物产品质量变化，使用配制品缓冲剂(ph 5.0、350mm精氨酸、50mm柠檬酸)进行搅动和冻融研究。在该实验中，研究了具有变化的聚山梨酯80浓度的配制品，以确认聚山梨酯80在此类应力条件下对亚可见颗粒形成的作用。表8示出了研究的配制品和施加的应力条件。表8.搅动所研究的配制品和冻融应力研究
[0176]
以与实例4中所述相同的方式制备样品。添加10％ps80溶液以达到配制品中的目标ps80浓度，并经由用配制品缓冲剂稀释进行最终蛋白质浓度调节。使配制品通过0.2gm的过滤器，并以1.3ml的填充体积填充到2ml的小瓶中。将样品水平放置(小瓶侧放)在定轨振荡器上，然后将其放置在冰箱中或实验室工作台上。将样品以250rpm振动3天。通过将其他样品放在-20℃的室内而冷冻2小时，然后将其取出并在室温下放置2小时以解冻。重复三次冻融循环。通过sec-hplc评估搅动和冻融研究的样品的可视外观、聚集体和片段水平，并通过微流成像(micro flow imaging，mfi)评估亚可见颗粒。
[0177]
以下总结了含不同水平的ps80的ban2401配制品的搅动和冻融研究结果。sec-hplc分析
[0178]
使用tsk g3000 swxl色谱柱(流动相为0.2m磷酸钠，ph 7.0，流速1.0ml/min)进行sec-hplc分析。对于50或100mg/ml的蛋白质浓度，样品注射体积分别为5.0μl或2.5μl。这样可确保在整个研究过程中将约250μg的蛋白质注射到色谱柱上。报告了单体、聚集体和片段的相对峰面积(％)的结果。
[0179]
在具有变化的聚山梨酯80浓度、在25℃储存3个月的ph为5的配制品中的聚集体水平方面，当ps80的浓度从0％增加到0.06％、配制品ph为5.0时，聚集体水平没有显著差异。可以得出结论，在ban2401配制品在25℃储存期间，ps80不会影响聚集体(即，如通过sec-hplc测量的二聚体和三聚体)的形成。
[0180]
在聚山梨酯80浓度对ph 5的配制品中的片段水平的影响方面，聚山梨酯80浓度不会影响ban2401中的片段水平。
[0181]
在环境温度以250rpm振动3天后的配制品外观方面，不含ps80的样品是浑浊的，有沉淀的蛋白质，而其他样品(0.02％、0.05％和0.1％的聚山梨酯80)是明显透明的、无颗粒溶液。在5℃以250rpm振动3天的所有样品都是透明的并且没有沉淀物。所有经受冻/融循环的样品也都是透明的并且没有沉淀物。
[0182]
表9显示了经受搅动和冻融的ban2401配制品中的聚集体和片段水平。引起最大不稳定性的应力条件是在环境条件下搅动。在这些条件下，不含ps80的样品表现出最多的高分子量物质形成，并且单体损失最大。随着ps80浓度的增加，该作用失去效力。表9.搅动和冻融研究的聚集体和片段水平的结果
(a)
高分子量物质；
(b)
低分子量物质；以及
(c)
样品是浑浊的亚可见颗粒分析
[0183]
使用微流成像(dpa4100流动成像显微镜和bp-4100-fc-400-un流动池)进行亚可见颗粒分析。总样品量为0.9ml，报告了针对2.25-100μm、5-100μm、10-100μm范围和25-100μm范围的结果。
[0184]
在经受振动和冻融的不含ps80的样品中观察到亚可见颗粒(2到10pm)的增加。随着配制品中ps80浓度的增加，亚可见颗粒的产生越来越受到抑制。在研究的所有尺寸范围内均观察到了这种作用。含有0.05％和0.1％聚山梨酯80的配制品中的亚可见颗粒没有明显变化。因此，选择0.05％的ps80浓度作为配制品的最佳选择。
[0185]
数据表明，如通过sec-hplc测量的，ps80对ban2401聚集体(二聚体和三聚体)和片段的形成没有影响。因此，基于搅动和冻融研究的结果选择ps80浓度。选择0.05％的ps80浓度，以防止在运输过程中可能的沉淀，并最小化亚可见颗粒的形成。实例6：ban2401的静脉内(iv)配制品的制备a.ban2401 10mg/ml配制品
[0186]
通过用于制备无菌水性配制品的常规cgmp无菌方法制造了用于静脉内注射的ban2401 10mg/ml配制品(“10mg/ml注射剂”)。由下面相应的ban2401原料药配方(不添加任
何赋形剂和稀释液)产生ban2401 10mg/ml注射剂。表10显示了含有10mg/ml ban2401的示例性iv配制品。表10.包含ban2401的对比性10mg/ml iv配制品。组分组成ban240110mg/ml柠檬酸钠/柠檬酸缓冲剂25mm氯化钠125mm聚山梨酯800.02％(w/v)注射用水qsph5.7
[0187]
如图17所示，将经过滤的ban2401原料药溶液无菌填充到小瓶中(在图17中称为“配制品a”)。将合并的原料药通过0.2-pm过滤器进行减少生物负荷的过滤步骤。通过串联的两个0.2-pm过滤器进行最终的无菌过滤，并进行过滤前和过滤后的过滤器完整性测试。将无菌的散装药物产品无菌地填充到小瓶中。在填充过程中，通过测量小瓶填充重量来确认填充精度。塞住已填充的小瓶，然后用铝制顶封进行密封。卷边封盖后，将产品储存在5℃
±
3℃。
[0188]
根据usp 788，使用方法1(光阻法)对小瓶进行分析。结果示于表11和表12中。表11. 10mg/ml注射剂小瓶的粒径分布(颗粒数/容器)10mg/ml注射剂小瓶的粒径分布(颗粒数/容器)表12. 10mg/ml注射剂小瓶的粒径分布(颗粒数/ml)实例7：ban2401的静脉内(iv)和皮下(sc)配制品的制备a.ban2401 100mg/ml配制品
[0189]
通过用于制备无菌水性配制品的常规cgmp无菌方法制造ban2401 100mg/ml配制
品(“100mg/ml注射剂”)。由相应的ban2401原料药(不添加任何赋形剂和稀释液)产生ban2401 100mg/ml(表13)。表13.包含ban2401的示例性100mg/ml iv配制品。iv配制品。
[0190]
如图18所示，将经过滤的ban2401原料药(100mg/ml注射剂)溶液无菌填充到小瓶中(在图18中称为“配制品b”)。将原料药通过0.2-pm过滤器进行减少生物负荷的过滤步骤。通过串联的两个0.2-pm过滤器进行最终的无菌过滤，并进行过滤前和过滤后的过滤器完整性测试。将无菌的散装药物产品无菌地填充到小瓶中。在填充过程中，通过测量小瓶填充重量来确认填充精度。塞住已填充的小瓶，然后用铝制顶封进行密封。卷边封盖后，将产品储存在5℃
±
3℃。
[0191]
根据usp 788，使用方法1(光阻法)对小瓶进行分析。结果示于表14和表15中。表14. 100mg/ml注射剂小瓶的粒径分布(颗粒数/小瓶)批号b1b2b3b425μm001010μm538995μm6317251602μm1954321249267表15. 100mg/ml注射剂小瓶的粒径分布(颗粒数/ml)批号b1b2b3b425μm000.2010μm10.61.61.81.85μm126.214.410.2122μm390.864.249.853.4
[0192]
制造另一ban2401 100mg/ml注射剂。如表16所示，以下材料可用于含有100mg/ml ban2401的第二示例性配制品中。表16.包含ban2401的另一示例性100mg/ml iv配制品。
b.ban2401 200mg/ml配制品
[0193]
如表17所示，以下材料可用于含有200mg/ml ban2401的示例性sc配制品中。结合以下三个容器密封件的材料稳定性评估，评估了这些配制品(fsc1、fsc2和fsc3)中ban2401的稳定性：i)becton-dickinson hypak biotech玻璃预填充注射器(pfs)和塞子ii)west crystal zenith塑料pfs和塞子iii)west 5ml玻璃小瓶和塞子表17.包含ban2401的示例性200mg/ml sc配制品。sc配制品。1组氨酸的总浓度
[0194]
经由tff按如下所述制备目标蛋白质浓度为200mg/ml的ban2401。除fsc1a和fsc1b
外，在每个配制品缓冲剂中进行单独的tff操作以制备ban2401材料。对于这两种配制品，进行一次tff操作，并将得到的浓缩材料分成两个半批次。每种最终配制品缓冲剂中的少量无菌过滤材料在零时未填充，而是在-20℃冷冻储存，以填充到适当的容器密封件中进行注射器测试。(a)ban2401的制备
[0195]
可以将经由tff进行的蛋白质浓缩/渗滤过程分为3个阶段：1.材料浓缩至100-150mg/ml2.针对配制品缓冲剂的渗滤(5x)3.浓缩至》200mg/ml
[0196]
使用设置有0.02m2膜面积的颇尔公司(pall)centramate lv系统进行浓缩/渗滤步骤。将ban2401材料(在添加ps80之前从gmp批次制造中取出)装入tff系统，并进行10-15倍的浓缩(阶段1)。然后，将材料针对多达5倍渗滤量的配制品缓冲剂进行渗滤(阶段2)，并通过渗透液的ph和电导率检查来监测渗滤。渗滤后，将材料进一步浓缩至210至250mg/ml的目标蛋白质浓度(阶段3)。收集渗余物并取样以确定蛋白质浓度。
[0197]
在制备该配制品时，由于tff系统中的高压，未达到210至250mg/ml的目标蛋白质浓度。因此，通过使用密理博公司(millipore)离心1gal过滤装置(30,000mwco)达到目标蛋白质浓度。为了执行此浓缩步骤，使用ban2401配制品缓冲剂平衡过滤装置，然后在20℃以3600rpm(约3000x g)将ban2401材料离心30分钟，直到预期渗余物中的蛋白质浓度达到大于200mg/ml。从过滤装置中回收渗余物并合并。充分混合后，将合并的渗余物取样以进行蛋白质浓度测量。
[0198]
浓缩蛋白质后，从池中取出样品并用适当的配制品缓冲剂稀释500倍。相对于空白缓冲剂，测量了经稀释的样品在280nm和320nm的吸光度。经由用适当的配制品缓冲剂稀释来进行最终的蛋白质浓度调节。最后，将10％ps80溶液添加到ban2401中，以使最终溶液中的ps80达到0.02％，并经由上下颠倒旋转将蛋白质溶液充分混合。
[0199]
使用0.2μm注射器式过滤器过滤最终的ban2401配制材料，然后填充到小瓶或pfs中。该步骤在生物安全柜中无菌进行。将所得的小瓶或pfs置于-20℃的冷冻箱中。小瓶倒置储存，pfs水平储存，以模拟最坏情况条件。c.针对包含ban2401的示例性200mg/ml sc配制品的稳定性实验。
[0200]
使用针对ph(图19-21)、在405nm处的吸光度(图22-24)(以检测变黄程度的增加)、尺寸排阻色谱法(sec)(图25-33)的测定评估在5℃(3m、6m、9m、12m)和25℃(1m、3m)以及之后的5℃的样品稳定性。示例性配制品fsc1-fsc4参见表17；注意，在图19-33中，“f1a”是指fsc1a，“f1b”是指fsc1b，“f2”是指fsc2，“f3”是指fsc3。在t＝0的样品上进行了额外的表征测定，包括蛋白质浓度、差示扫描量热法(dsc)、ps80和渗透压摩尔浓度。在t＝0和t＝6个月的样品上进行了亚可见颗粒测试。对在5℃储存1个月的样品进行了为期3天的搅动研究。将用于搅动研究的样品在5℃储存1个月后转移到25℃，伴随以250rpm搅动3天。
[0201]
测试结果表明，所有fsc1a-fsc3配制品中的200mg/ml ban2401在2℃-8℃储存12个月后具有相似的聚集体和片段水平。评估了三种fsc1a-fsc3配制品中200mg/ml ban2401的稳定性。总体而言，ban2401在每种测试配制品中的稳定性均相似，并且在5℃储存12个月后，无论测试的容器密封件如何，均保持多于98.2％的单体。另外，在5℃储存12个月后，ph
保持稳定，通过a405检测的变黄程度没有明显增加。(a)蛋白质浓度(t＝0样品)
[0202]
使用uv-vis分光光度计测量蛋白质浓度。结果在表18中列出。表18.蛋白质浓度结果样品id蛋白质浓度(mg/ml)fsc1a206fsc1b204fsc2201fsc3189
[0203]
通过使用1cm石英比色杯在beckman du-800分光光度计上测量280和320nm处的吸光度，评估蛋白质浓度。将样品稀释500倍，并以一式三份进行制备。使用以下公式，使用消光系数ε为1.32计算蛋白质浓度：浓度＝(a280-a320)/εx稀释因子(b)聚山梨酯80(t＝0样品)
[0204]
经由油酸定量来测量样品的ps80含量。结果示于表19中。表19.聚山梨酯80结果样品id聚山梨酯80(％)fsc1a0.016fsc1b0.022fsc20.019fsc30.019
[0205]
通过定量油酸(ps80的水解产物)进行测量。使用碱水解，ps80以1:1的摩尔比释放油酸。然后可以使用反相hplc将油酸与其他ps80水解产物和基质分离。使用195nm处的吸光度监测没有衍生化的油酸。[j.chromatography b[色谱b杂志],878(2010)1865-1870]。实验上，将样品与氢氧化钠混合以释放油酸，随后将其用乙腈萃取。萃取液用磷酸钾溶液稀释，并将100μl的样品量注入waters symmetry c18色谱柱中。使用含有80％有机相a(乙腈)和20％水相b(20mm磷酸二氢钾，ph 2.8)的等度洗脱液进行分离。使用标准曲线，从峰面积计算出样品中的ps80浓度。(c)渗透压摩尔浓度(t＝0样品)
[0206]
使用冰点渗透压计确定样品的渗透压摩尔浓度。结果示于表20中。表20.渗透压摩尔浓度结果
[0207]
使用普西工业公司(precision systems)osmette iii冰点渗透压计测量渗透压摩尔浓度。用wfi将样品稀释3倍，然后取出10μl的稀释的样品量，并使用渗透压计移液器加载到仪器上。校正所得的渗透压摩尔浓度测量值以进行样品稀释。(d)亚可见颗粒
[0208]
使用流体技术公司(fluid technologies)flowcarn仪器进行亚可见颗粒分析。表21中列出了t＝o结果。当材料在5℃储存时，总颗粒浓度和大于10μm的颗粒数量似乎会随时间增加。变化增加的程度大小按以下顺序排列，fsc1a《fsc1b《fsc2《fsc3。表21.亚可见颗粒结果
[0209]
使用具有20倍物镜和50um流动池的流体成像技术公司(fluid imaging technologies)flowcam进行亚可见颗粒分析。在运行ban2401样品之前，用di h2o冲洗流动池，并对di h2o进行测量以确保流动池是干净的。如果每0.2ml的di h2o的计数颗粒总数≦2，则认为流动池可供使用。将样品平衡至室温，然后用去离子水稀释20倍。使用0.2ml的样品量和0.02ml/min的样品流速分析重复的稀释样品。自动成像率为14，效率为19.6％，运行时间为10min。校正所得的颗粒浓度以进行样品稀释。(e)ph
[0210]
在整个稳定性测试过程中，对每种配制品的ph值进行监测。如图19-21所示，在任一测试的储存条件下，样品均未观察到明显变化。(f)hplc-sec
[0211]
使用tsk 03000swxl色谱柱(流动相为0.2m磷酸钠，ph 7.0，流速为1.0ml/min)进
行高效液相色谱尺寸排阻色谱(hplc-sec)分析。对于200mg/ml的蛋白质浓度，样品注射体积为0.8μl。这样可确保在整个研究过程中将约150μg的蛋白质注射到色谱柱上。报告了单体、聚集体和片段的相对峰面积(％)的结果，如图25-33所示。
[0212]
通过对储存在5℃和25℃的稳定性样品进行hplc-sec来评估ban2401的物理降解。在5℃储存12个月后，3种配制品的聚集体百分比相似，约为1.1％。所有测试配制品产生的片段的百分比在0.4％-0.5％的范围内。对于所有测试的配制品和容器密封件，在5℃储存12个月后的单体含量在98.4％-98.6％的范围内。以目前的降解速度，在5℃储存长达24个月后，所有测试配制品中的ban2401可能具有超过97％的单体。
[0213]
在25℃储存长达3个月后，3个月后的片段产生在0.4％-0.8％的范围内。除fsc3外，所有配制品的单体含量均略高于98％，而fsc3在25℃储存3个月后具有略低于98％的单体。实例8：蛋白质、精氨酸和聚山梨酯80浓度的选择a.样品制备
[0214]
如下制备每种候选配制品(f1-f12)。将原料药(ds)加工中间体进行浓缩，并通过离心过滤装置用相应的配制品缓冲剂(表22)进行平衡。在浓缩和平衡后，添加溶解在配制品缓冲剂中的ps80以达到预定浓度，并将蛋白质浓度调节至最终浓度。将每种候选配制品填充到小瓶中，填充体积为0.5ml。候选配制品(f1-f12)示于表22中。评估作为对照的配制品f0。表22配制品(f0)和候选配制品f1-f12
a：f2和f10是相同的配制品，制备用于不同的研究。b：在选择聚山梨酯80的浓度时，从药物产品中取出药物溶液，并用0.5ml填充，以使填充体积与容器密封件系统匹配。b.稳定性方案
[0215]
稳定性方案显示在表23、表24和表25中。一旦从储存中取出，就将小瓶储存在5℃直至测试。储存条件如下：
·
长期条件：储存在5℃
±
3℃，直立放置
·
加速条件：储存在25℃
±
2℃，60％rh
±
5％rh，直立放置
·
应力条件(冻融)：在-30℃冷冻并在室温解冻，直立放置
·
应力条件(搅动)：5℃，水平放置，以250rpm在往复式摇荡器上振动，振动幅度为50mm表23稳定性方案(长期和加速条件)
n/a：不适用。表24稳定性方案(应力条件：f0-f7)n/a：不适用。表25稳定性方案(应力条件：f0、f8-f12)
n/a：不适用。
[0216]
由于已知溶液的粘度在高浓度的蛋白质溶液中呈指数增加，因此使用含有0.05(w/v)％ps80的配制品缓冲剂将每种候选配制品(f1-f5)的蛋白质浓度调节至200
±
10mg/ml用于分析。在测量之前，未稀释其他配制品。c.结果和讨论(a)精氨酸浓度的选择
[0217]
为了选择配制品中的目标精氨酸浓度，对物理特性进行了评估，并对比于配制品f0，对具有不同精氨酸浓度(150至350mmol/l，f1至f5)的候选配制品进行了冻融、长期和加速稳定性研究(参见表22)。物理特性和冻融研究的结果示于表26中。长期和加速稳定性研究的结果示于表27和表28中。
(b)物理特性
[0218]
如表26所示，渗透压摩尔浓度值随着精氨酸浓度的增加而增加。与f4和f5相比，
f1、f2和f3显示较低的渗透压摩尔浓度值。因此，精氨酸浓度被限制在250mmol/l或更低。f1-f5的粘度值在较窄范围内(7.3-8.1cp)，并与在150至350mmol/l内的精氨酸浓度不相关。ps80以及蛋白质的外观、ph和浓度的结果几乎都达到了目标。(c)冻融稳定性研究
[0219]
如表26所示，三个循环的冻融测试后，所有测试项目均未观察到显著变化。(d)长期稳定性研究
[0220]
如表27所示，储存三个月后，除尺寸排阻hplc(sec)外，所有测试项目均未观察到显著变化。在候选配制品f1-f5中，通过sec测量的聚集体和片段的量均略有增加。各增加率均与配制品f0相似。(e)加速稳定性研究
[0221]
如表28所示，除sec和离子排斥hplc(iex)外，所有测试项目均未观察到显著变化。尽管所有候选物(f1-f5，ban2401 200mg/ml)中通过sec测量的聚集体的量均增加，且正如预期的，速率快于配制品f0，但考虑到长期条件下的结果和长保质期的f0的稳定性，仍认为所有候选物都可行。较高的精氨酸浓度导致聚集体形成略慢，这与实例4中所述的结果一致。在所有候选物中，通过sec测量的片段的量也增加，但速率与配制品f0中的相似。至于iex，在所有候选物中，酸性峰的量均增加，但速率与f0中的相似。(f)精氨酸浓度
[0222]
如表26所示，就渗透压摩尔浓度而言，认为f4和f5(精氨酸浓度为300和350mmol/l)不可行。在可行的候选物f1、f2和f3(精氨酸浓度分别为150、200和250mmol/l)中，f1最接近等渗。如表28所示，在加速稳定性研究中，具有较高精氨酸浓度的配制品显示出较低的聚集体形成率，但是在所评估的精氨酸浓度范围内，该速率差异并不显著。考虑到等渗性和聚集体形成率，基于f2配制品选择200mmol/l作为目标精氨酸浓度。(g)蛋白质浓度的选择
[0223]
为了选择配制品中的目标蛋白质浓度，对物理特性进行了评估，并对具有不同蛋白质浓度(200至300mg/ml，f2、f6、f7)的候选配制品和配制品f0进行了冻融、长期和加速稳定性研究。物理特性和冻融研究的结果示于表29中。长期和加速稳定性研究的结果示于表27和表28中。
(h)物理特性
[0224]
如表29所示，与f7相比，f2和f6显示较低的渗透压摩尔浓度值。f2、f6和f7中的粘
度值分别为7.8、21和48cp。超过20cp的高粘度会通过在超滤和渗滤步骤中增加泵的背压并降低跨膜通量而导致制造ds困难。此外，较高浓度的溶液会通过堵塞填充针导致填充重量变化，而使dp填充过程更加困难。由于所希望的粘度据报道不超过20cp3，因此f2是可行的。外观、ph以及ps80和蛋白质的浓度的结果几乎达到了目标。(i)冻融研究
[0225]
如表29所示，三个循环的冻融测试后，所有测试项目均未观察到显著变化。(j)长期稳定性研究
[0226]
如表27所示，储存三个月后，除尺寸排阻hplc(sec)外，均未观察到显著变化。在候选配制品f2、f6和f7中，通过sec测量的聚集体的量略有增加，但增加率与f0中的相似。(k)加速稳定性研究
[0227]
如表28所示，除sec和离子排斥hplc(iex)外，均未观察到显著变化。在三个月的时间点，在所有候选物(f2、f6和f7)中，通过sec测量的聚集体的量均以相似速率增加(增加0.7％-0.8％)。因此，所有候选物都被认为是可行的。在所有候选物中，通过sec测量的片段的量也增加，但速率与f0中的相似。至于iex，在所有候选物中，通过iex所得的酸性峰的量均增加，但速率与f0中的相似。(l)蛋白质浓度
[0228]
考虑到表29所示的渗透压摩尔浓度和粘度的结果以及表27和表28所示的总体稳定性结果，选择了200mg/ml的蛋白质浓度。(m)ps80浓度的选择
[0229]
为了选择配制品中的目标ps80浓度，对具有不同ps80浓度[0至0.10(w/v)％，f8-f12]的候选配制品和配制品f0进行了冻融和搅动研究。冻融和搅动研究的结果分别显示在表30和表31中。
(n)冻融研究
[0230]
如表30所示，三个循环的冻融测试后，所有测试项目均未观察到显著变化。在f8
(无ps80)中，通过mfi得到的颗粒计数相对较高。(o)搅动研究
[0231]
如表31所示，搅动后，含有0.02(w/v)％至0.10(w/v)％的ps80的配制品(f9至f12)是稳定的。搅动后，通过sec观察到f8(无ps80)的外观、蛋白质浓度和聚集体的量的变化。外观从澄清淡黄色液体变为乳白色液体。蛋白质浓度从206略微降低至195mg/ml。聚集体的量从1.1％增加到3.8％。因此，f8(无ps80)被认为是不可行的。(p)ps80浓度
[0232]
基于表30(冻融研究)和表31(搅动研究)中显示的结果，含有0.02(w/v)％至0.10(w/v)％的ps80的配制品在三个冻融循环并搅动长达三天之后是稳定的。因此，选择0.05(w/v)％的ps80浓度作为目标。(q)结论
[0233]
综上，选择ban2401配制品的以下配制品进行后续研究。表32用于后续研究的配制品实例9：不同ph值的200mg/ml ban2401配制品的稳定性研究
[0234]
进行稳定性研究，以测试不同ph值的200mg/ml ban2401配制品的稳定性。此外，测试了添加甲硫氨酸对药物产品(dp)稳定性的影响。a.样品制备
[0235]
如下制备每种候选配制品(表33)。通过离心过滤装置用相应的配制品缓冲剂平衡配制品。仅对于f20的制备，使用ph值为3.5的配制品缓冲剂，直到滤液的ph达到4.0，因为质子被半透膜附近的浓缩带电蛋白质排斥，这被称为道南(donnan)效应。浓缩并平衡后，添加溶解在配制品缓冲剂中的ps80以达到预定浓度，然后将蛋白质浓度调节至最终浓度。将每种候选配制品填充到小瓶中，填充体积为0.5ml。评估作为对照的配制品f0(参见表33)。表33原料药和候选sc配制品的组成
arg：精氨酸，met：甲硫氨酸a：为了调节ph，对于f0，将精氨酸和精氨酸盐酸盐组合；对于f13至f22，添加盐酸盐。b：f21是与f15相同的配制品b.储存方案
[0236]
储存方案显示在表34、表35和表36中。一旦从储存中取出，就将小瓶储存在5℃直至测试开始。储存条件如下：
·
长期条件：储存在5℃
±
3℃，直立放置
·
加速条件：储存在25℃
±
2℃，60％rh
±
5％rh，直立放置
·
应力条件(冻融)：在-30℃冷冻并在室温解冻，直立放置1000lx：25℃
±
2℃，60％rh
±
5％rh，在1000lx的曝光量下，平放黑暗：25℃
±
2℃，60％rh
±
5％rh，通过用铝箔覆盖而不曝光，平放
[0237]
为了确认三个月或更长时间的储存后的聚集体水平，额外评估了九个月的延长储存样品的尺寸排阻hplc用于长期稳定性研究，以及三个月的延长储存样品的尺寸排阻hplc用于加速稳定性研究。将后者样品在冰箱中储存六个月后进行测试。
c.结果和讨论
[0238]
对物理特性进行了评估，并针对包括ph变化(ph 4.0至ph 6.0)和甲硫氨酸添加的
候选配制品进行了长期和加速研究。还进行了冻融和光稳定性研究，以评估甲硫氨酸添加的功效。d.ph变化
[0239]
如表37、表38a和38b、表39、和表40所示，除尺寸排阻hplc(sec)以外，对于任何测试项目，未观察到候选配制品(f13、f15、f17以及f20至f22)之间的显著差异。配制品f20(即ph为4.0的较低ph配制品)在初始时间点显示通过sec测量的聚集体的量较少。此外，在加速稳定性研究中观察到略低的聚集体形成率和较高的片段形成率。ph值为4.5至5.5的配制品的结果被证实是类似的。
e.甲硫氨酸的添加
[0240]
如表41a和41b以及表42至表46所示，在含有或不含有甲硫氨酸的配制品(f18和f15)之间未观察到显著差异。在延长的长期稳定性研究、加速稳定性研究、和光稳定性研究
中，含有甲硫氨酸的配制品(f18)显示出略低的聚集体形成率。f18在1000lux曝光长达七天下，还显示出甲硫氨酸残基(例如，在重链中的位置259处)的氧化程度略低。冻融研究没有显示任何差异。10mmol/l的甲硫氨酸作为稳定剂的作用受到限制。
f.结论
[0241]
在具有ph 4.5到ph 5.5的ph变化的ban2401配制品中，质量属性是类似的。ph为
4.0的s显示较低的聚集体形成率，相反，在储存过程中片段形成率较快。基于质量评估，包括长期、加速、冻融和光的稳定性研究，我们发现浓度为10mmol/l的含有或不含有甲硫氨酸的配制品之间没有显著差异。尽管观察到略慢的聚集体形成率和较小的氨基酸残基氧化抑制作用，但差异并不显著。总之，确定由200mg/ml的ban2401、25mmol/l的l-组氨酸/组氨酸盐酸盐、200mmol/l的l-精氨酸、0.05(w/v)％的聚山梨酯80组成的ph为5.0
±
0.5的f15和f21是用于进一步开发的良好原料药候选物。实例10：精氨酸浓度对ban2401配制品稳定性的影响的研究
[0242]
评估了精氨酸浓度(0、50、100和200mmol/l)对200mg/ml ban2401稳定性的影响。每种精氨酸浓度水平的样品均在加速条件(25℃/60％rh)下储存，并在0、1、2个月进行测试。a.样品制备
[0243]
通过利用超滤对浓缩的ban2401原料药加工中间体进行缓冲剂交换来制备样品(f1-f4)。无菌过滤后，将每个0.4ml样品填充到小瓶中。样品信息示于表47中。表47样品信息表47样品信息b.结果
[0244]
表48至51中显示了样品f1至f4的稳定性研究结果。样品之间的ph和蛋白质浓度没有差异，精氨酸浓度水平与初始样品的目标一致。
[0245]
含有精氨酸的样品(f2至f4)的聚集体％低于不含精氨酸的样品(f1)的聚集体％。表48样品f1的测试结果(针对精氨酸0mmol/l)
表49样品f2的测试结果(针对精氨酸50mmol/l)表50样品f3的测试结果(针对精氨酸100mmol/l)表51样品f4的测试结果(针对精氨酸200mmol/l)
c.讨论与结论
[0246]
这项研究的结果表明，50至200mmol/l的精氨酸浓度可以防止ban2401 200mg/ml配制品中蛋白质聚集体的增加。批次之间精氨酸浓度的变化可能会导致批次之间聚集体％的变化。此外，在稳定性研究中，精氨酸浓度可能会影响聚集体％的增加趋势。
[0247]
通过比较样品f1中的片段化百分比与实例2中图11所示的片段化百分比，包含组氨酸缓冲剂的配制品似乎表现出减少ban2401片段化的作用，其中使用包含200mg/ml的ban2401、50mm的柠檬酸钠和100mm的氯化钠的样品。序列表表52.mab可变区的氨基酸序列表53.mab恒定区的氨基酸序列
表54.mab cdr的氨基酸序列
重链(seq id no:11)：evqlvesggglvqpggslrlscsasgftfssfgmhwvrqapgkglewvayissgsstiyygdtvkgrftisrdnaknslflqmsslraedtavyycareggyyygrsyytmdywgqgttvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk轻链(seq id no:12)：dvvmtqsplslpvtpgapasiscrssqsivhsngntylewylqkpgqspklliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlrisrveaedvgiyycfqgshvpptfgpgtkleikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec