稳定的甘油二酯乳液和治疗器官损伤的方法

背景技术：

1、卒中是美国长期残疾的主要原因，也是死亡的第5大主要原因。迄今为止，组织型纤溶酶原激活物(t-pa)仍然是fda批准的唯一的用于急性缺血性卒中治疗的药。然而，它的使用受限于3到4.5小时的狭窄时间窗。

2、ω-3(n-3)脂肪酸(fa)是卒中后用于急性神经保护的候选者。有证据表明，n-3fa充当具有多效性的生物活性不饱和脂质，并在卒中动物模型中显示出神经保护特性。许多生物学机制可能会受到n-3fa的影响，包括(i)线粒体活性氧物种(ros)生成减少；(ii)线粒体ca2+摄取和稳态的保存；(iii)调节受体介导的信号转导和抑制凋亡途径；(iv)有效的n-3fa衍生的消退素和保护素的增加，以及(v)炎症响应的减少。单独或协同工作，这些机制可能有助于缺血性损伤中的n-3fa神经保护，减少细胞死亡，同时加速修复过程。

3、然而，为了对神经保护有效，必须将足够水平的n-3fa快速递送至处于细胞死亡或损伤风险的细胞。本公开在某些方面提供了用于急性递送n-3fa的组合物和方法，以治疗器官损伤，包括神经保护。本发明可用作治疗卒中、心肌梗死、创伤性脑损伤和缺血性器官损伤等的急救药物。

技术实现思路

1、本发明提供了用于急性疗法的涉及稳定的n-3甘油二酯(dg)水包油乳液的组合物和方法，以治疗和/或预防器官损伤。该组合物提供免于细胞死亡的保护，并且用于需要神经保护或器官保护的患者，包括用于缺血性卒中、心肌梗死和创伤性脑损伤等。组合物具有大的时间窗，通过该时间窗，在损伤发作后(例如，在卒中发作后)给药是有效的。组合物可以与其他疗法联合给药，并且组合物可以在恢复期给药以进一步改善结果。

2、在各种方面和实施方式中，组合物是稳定的乳液，其可以以稳定的形式储存以用于紧急情况。例如，在各种实施方式中，组合物将由急诊医学专业人员现场递送。本文所述的乳液至少六个月、或至少一年、或至少24个月基本上稳定。该组合物适用于肠胃外递送，诸如静脉内(i.v.)或动脉内递送，以及经由胃内或十二指肠管内，并且乳液的物理特性促进n-3fa的快速递送以被受损组织包括脑组织摄取。

3、根据本发明，dg的酯化fa可以主要是n-3fa。例如，在一些实施方式中，dg包括至少约50％的n-3fa、或至少约75％的n-3fa、或至少约90％的n-3fa、或约100％的n-3fa。在一些实施方式中，n-3fa是长链n-3fa，包括二十二碳六烯酸(dha)、二十碳五烯酸(epa)和二十二碳五烯酸(dpa)中的一种或多种。在一些实施方式中，n-3脂肪酸是dha和epa。

4、在各种实施方式中，稳定的乳液具有200nm或更小的平均粒度和约-30mv或比-30mv更负的ζ电位(zp)。在一些实施方式中，乳液的平均粒度为约190nm或更小、或约180nm或更小、或约160nm或更小、或约140nm或更小。在各种实施方式中，多分散性指数(pdi)为0.3或更小。在各种实施方式中，乳液的ζ电位至少为负约-45mv、或至少为负约-50mv、或至少为负约-55mv、或至少为负约-60mv。

5、稳定的乳液适用于肠胃外或肠内给药，例如，以将n-3fa快速递送至受损细胞和组织，包括在一些实施方式中的脑。乳液的脂质组分通常为组合物的按重量计约10％至约50％。在一些实施方式中，组合物的按重量计至少约20％是dg油，并且在一些实施方式中，组合物是按重量计约23％至约30％的dg油。组合物还将包括如本文所述的乳化剂和任选的助乳化剂。

6、组合物将包括一种或多种乳化剂以获得所需的物理特征。在各种实施方式中，乳化剂可以包括磷脂乳化剂、磷酸甘油酯乳化剂以及中和/或长链脂肪酸乳化剂中的一种或多种。在各种实施方式中，组合物包括小于按重量计约1％的乳化剂。

7、根据本公开的示例性组合物是适用于静脉内或动脉内注射的组合物，其中该组合物包括稳定的甘油二酯(dg)水包油乳液。乳液包括按重量计至少20％的dg油，该dg油的酯化脂肪酸是至少约90％的n-3脂肪酸并且包括dha和epa，并且其中该乳液具有200nm或更小的平均粒度、0.3或更小的多分散性指数以及约-40mv或比-40mv更负的ζ电位。

8、在各种实施方式中，组合物与人血大致等渗，并且任选地包括一种或多种多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、木糖醇和/或葡萄糖。在一些实施方式中，组合物包括一种或多种抗氧化剂，诸如α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和抗坏血酸酯中的一种或多种。在示例性实施方式中，抗氧化剂包括α-生育酚和/或抗坏血酸酯，其任选地为抗坏血酸棕榈酸酯。在一些实施方式中，组合物包括金属螯合剂，其任选地为乙二胺四乙酸(edta)或乙二醇-双-(β-氨基乙基醚)-n,n,n',n'-四乙酸(egta)。

9、乳液还可以与其他亲脂活性剂共同配制，以增强这些否则难以递送的疗法的递送，并且其可以提供与其他作用机制的协同结果。例如，在一些实施方式中，乳液与格列本脲或他汀共同配制。dg组合物可以与一种或多种额外的神经保护剂一起给药。在其他实施方式中，这些额外的剂与乳液分开给药作为联合疗法。

10、在其他方面，本发明提供了一种治疗需要免于细胞死亡的患者的方法，所述细胞死亡包括对各种器官或组织诸如脑、脊髓和新移植的器官等的急性和慢性损伤。在一些实施方式中，患者需要治疗缺血性器官损伤，或需要免于缺血性器官损伤的损害的保护。

11、因此，在一些实施方式中，患者正在经历卒中。本文所述的组合物可在卒中发作后给药以提供神经保护，即抑制导致细胞死亡的细胞过程。乳液的物理和化学特性使它们有效，即使在卒中发作后递送的晚于所需的。例如，在各种实施方式中，在卒中发作约十二小时内向患者给药所述组合物。

12、组合物可用于治疗缺血性和出血性卒中，并因此可以由急救人员给药，即在脑成像之前以检测或可视化凝块或潜在出血。在没有出血的情况下，患者可以接受溶栓疗法以溶解凝块(例如，t-pa)。虽然通常在卒中发生后的约前4.5小时内向卒中受害者给药t-pa，但根据本公开，患者在卒中发作约4.5小时后接受这种溶栓疗法。通过在紧急情况下尽快给药乳液组合物，可以获得更多时间来确定溶栓疗法是否合适。在其他实施方式中，进行血栓切除术。本文所述的组合物可以扩大血栓切除术成功的治疗窗。

13、在一些实施方式中，在缺血性卒中的情况下，受试者可以在卒中发作后尽快接受一剂量的dg乳液，并且通常在约24小时内、或约12小时内、或约10小时内、或约8小时内、或约6小时内。患者可以在接下来的几天、几周或几个月内接受后续剂量的dg乳液和/或口服补充n-3dg和/或n-3甘油三酯(tg)以帮助恢复。

14、在其他实施方式中，患者患有创伤性脑损伤(tbi)或处于创伤性脑损伤的风险中。例如，可以在脑损伤后1至24小时内向患者给药组合物，以减少来自tbi的长期组织损害。在一些实施方式中，在初始给药后，以约每四小时一次至约每周一次的频率向患者给药组合物以帮助恢复。患者可以任选地在接下来的几天、几周或几个月内接受口服补充n-3dg和/或n-3tg以帮助恢复。

15、在其他实施方式中，患者患有创伤后应激障碍(ptsd)。例如，可以在一段时间内以至少约每周一次的频率向患者给药组合物以促进恢复。患者可以任选地接受口服补充n-3dg和/或n-3tg以支持恢复。

16、本发明提供保护其他器官或组织，包括缺血性和创伤性组织损伤，包括脊髓损伤(sci)。在这种实施方式中，可以在紧急情况下在损伤后不久向患者给药组合物。在一些实施方式中，在初始给药后，以至少每天一次至每周一次的频率向患者给药组合物。患者可以任选地在接下来的几周或几个月内接受口服补充n-3dg和/或n-3tg以帮助恢复。例如，患者可以每天至少一次接受口服补充。

17、此外，在一些实施方式中，患者是器官移植诸如肝、肾、心脏、肠或肺移植的接受者。在一些实施方式中，在围手术期期间向患者给药组合物至少一次。在围手术期之后，可以以约每四小时一次至每周一次的频率向患者给药组合物以帮助恢复。在其他实施方式中，治疗患者的急性器官衰竭，包括急性肾、肝或心力衰竭。患者可以任选地在移植后接受口服补充n-3dg和/或n-3tg持续一周或多周至一个月或多个月以支持恢复。

18、在一些实施方式中，患者患有神经退行性疾病。例如，每周至少一次向有神经退行性疾病的患者给药组合物以减缓疾病进展，和/或在疾病复发后给药组合物。

19、本发明的其他方面和实施方式将从以下实施例中显而易见。