IL-2融合多肽组合物以及其制备和使用方法与流程

发明领域本公开涉及包含多肽的组合物，所述多肽包含与il-2rα链的细胞外部分融合的环状排列的白细胞介素-2(il-2)，以及制备和使用此类组合物的方法。

背景技术：

1、包含与il-2rα链白细胞介素-2(il-2)白细胞介素-2受体α(il-2rα)的细胞外部分融合的环状排列的白细胞介素-2(il-2)的多肽作为抗癌剂具有很大的前景。这些多肽保留了通过在记忆cd8+t细胞和自然杀伤(nk)细胞上表达的中等亲和力il-2r复合物发出信号的全部能力，但在空间上被阻止与优先在cd4+foxp3+调节性t细胞(cd4+tregs)和内皮细胞上表达的高亲和力il-2r复合物结合。由于这种选择性il-2r结合，多肽选择性地活化cd8+t细胞和nk细胞，从而促进肿瘤细胞杀伤。无法活化内皮细胞上的高亲和力il-2r也可能降低由毛细血管渗漏综合征(il-2疗法的已知风险)所致的毒性风险。

2、当用于治疗人受试者时，前述多肽必须在使用前储存并运输至施用地点。在受试者中可重复地达到多肽的所需水平需要将多肽储存在保持多肽生物活性的配制物中。因此，本领域需要多肽的稳定组合物。优选地，此类组合物将表现出长保质期，并且在储存和运输时是稳定的。

技术实现思路

1、本公开提供包含多肽的组合物，所述多肽包含与il-2rα链的细胞外部分融合的环状排列的il-2，以及制备和使用此类组合物的方法。这些组合物经过专门配制以提高其中所含多肽的稳定性和保质期。

2、在一个方面，本公开提供了一种组合物，所述组合物包含：

3、a)约1mg至约50mg包含与il-2rα链的细胞外部分融合的环状排列的il-2的多肽；

4、b)蔗糖；

5、c)柠檬酸盐缓冲剂；和

6、d)聚山梨醇酯20。

7、在某些实施方案中，多肽包含与seq id no:1具有至少95％同一性的氨基酸。在某些实施方案中，多肽包含seq id no:1的氨基酸序列。在某些实施方案中，多肽由seq idno:1的氨基酸序列组成。

8、在某些实施方案中，组合物包含约100mg至约120mg蔗糖。在某些实施方案中，组合物包含约110mg蔗糖。

9、在某些实施方案中，组合物包含约4.0mg至约6.0mg柠檬酸盐。在某些实施方案中，组合物包含约5.0mg柠檬酸盐。在某些实施方案中，柠檬酸盐缓冲剂由含2.03mg/ml柠檬酸三钠二水合物和0.97mg/ml柠檬酸一水合物的组合的水溶液形成。在某些实施方案中，柠檬酸盐缓冲剂由含2.91mg/ml柠檬酸三钠二水合物和0.34mg/ml柠檬酸一水合物的组合的水溶液形成。

10、在某些实施方案中，所述组合物包含柠檬酸:柠檬酸三钠二水合物的质量比为约1:10至约1:2(即约1:10、约1:9、约1:8、约1:7、约1:6、约1:5、约1:4、约1:3和约1:2)的柠檬酸和柠檬酸三钠二水合物。在某些实施方案中，所述组合物包含柠檬酸:柠檬酸三钠二水合物的质量比为约1:9的柠檬酸和柠檬酸三钠二水合物。在某些实施方案中，组合物包含柠檬酸:柠檬酸钠二水合物的质量比为约1:2的柠檬酸和柠檬酸三钠二水合物。

11、在某些实施方案中，组合物包含约0.20mg至约0.24mg聚山梨醇酯20。在某些实施方案中，组合物包含约0.22mg聚山梨醇酯20。

12、在某些实施方案中，组合物包含约2.2mg多肽。在某些实施方案中，组合物包含约11mg多肽。在某些实施方案中，组合物包含约33mg多肽。

13、在某些实施方案中，组合物为冻干饼。在某些实施方案中，冻干饼在水中的溶解产生具有约5.5至约6.5的ph的水溶液。在某些实施方案中，冻干饼在水中的溶解产生具有约6.1的ph的水溶液。

14、在某些实施方案中，冻干饼在水中的溶解产生具有约160至约230mosm/kg的渗透压的水溶液。在某些实施方案中，冻干饼在水中的溶解产生具有约179mosm/kg的渗透压的水溶液。

15、在某些实施方案中，冻干饼在氯化钠溶液中的溶解产生具有约240至约340mosm/kg的渗透压的水溶液。

16、在某些实施方案中，水溶液进一步用水或氯化钠溶液稀释。

17、在某些实施方案中，水溶液包含约0.03mg/ml多肽至约0.2mg/ml多肽。

18、在某些实施方案中，组合物为水溶液。

19、在某些实施方案中，组合物为包含2.2mg多肽的2.2ml水溶液。在某些实施方案中，组合物为包含11mg多肽的2.2ml水溶液。在某些实施方案中，组合物为包含33mg多肽的2.2ml水溶液。在某些实施方案中，组合物为包含44mg多肽的2.2ml水溶液。

20、在某些实施方案中，溶液的ph为约6.1。

21、在某些实施方案中，组合物为单一单位剂量的多肽。

22、在一个方面，本公开提供了一种组合物，其包含：

23、a)约1mg至约50mg(例如约2、11或33mg)包含与il-2rα链的细胞外部分融合的环状排列的il-2的多肽；

24、b)约100mg至约120mg蔗糖；

25、c)约4.0mg至约6.0mg柠檬酸根阴离子；和

26、d)约0.20mg至约0.24mg聚山梨醇酯20。

27、在某些实施方案中，多肽包含与seq id no:1具有至少95％同一性的氨基酸。在某些实施方案中，多肽包含seq id no:1的氨基酸序列。

28、在某些实施方案中，组合物包含约110mg蔗糖。在某些实施方案中，组合物包含约5.0mg柠檬酸根阴离子。在某些实施方案中，组合物包含约0.22mg聚山梨醇酯20。

29、在某些实施方案中，组合物包含约2.2mg多肽。在某些实施方案中，组合物包含约11mg多肽。在某些实施方案中，组合物包含约33mg多肽。在某些实施方案中，组合物包含约44mg多肽。

30、在某些实施方案中，组合物为冻干饼。在某些实施方案中，冻干饼包含：

31、a)约2.2mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

32、b)约110mg蔗糖；

33、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

34、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

35、在某些实施方案中，冻干饼包含：

36、a)约11mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

37、b)约110mg蔗糖；

38、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

39、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

40、在某些实施方案中，冻干饼包含：

41、a)约33mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

42、b)约110mg蔗糖；

43、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

44、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

45、在某些实施方案中，组合物为水溶液。在某些实施方案中，组合物为2.2ml水溶液，其包含：

46、a)约2.2mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

47、b)约110mg蔗糖；

48、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

49、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

50、在某些实施方案中，组合物为2.2ml水溶液，其包含：

51、a)约11mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

52、b)约110mg蔗糖；

53、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

54、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

55、在某些实施方案中，组合物为2.2ml水溶液，其包含：

56、a)约33mg包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

57、b)约110mg蔗糖；

58、c)约5.0mg柠檬酸根阴离子；和

59、d)约0.22mg聚山梨醇酯20。

60、在某些实施例中，水溶液的ph为约6.1。

61、在某些实施方案中，组合物为单一单位剂量的多肽。

62、在另一方面，本公开提供了一种水性组合物，其包含：

63、a)约1mg/ml至约20mg/ml包含与il-2rα链的细胞外部分融合的环状排列的il-2的多肽；

64、b)约45mg/ml至约55mg/ml蔗糖；

65、c)约10mm至约20mm(例如约10mm至约13mm)柠檬酸盐；和

66、d)约0.09mg/ml至约1.1mg/ml聚山梨醇酯20，

67、其中溶液的ph为约5.5至约6.5。

68、在某些实施方案中，多肽包含与seq id no:1具有至少95％同一性的氨基酸序列。在某些实施方案中，多肽包含seq id no:1的氨基酸序列。

69、在某些实施方案中，水性组合物包含约50mg/ml蔗糖。在某些实施方案中，水性组合物包含约12mm柠檬酸盐。

70、在某些实施方案中，水性组合物包含约0.1mg/ml聚山梨醇酯20。在某些实施方案中，水性组合物具有约6.1的ph。

71、在某些实施方案中，组合物包含约1mg/ml多肽。在某些实施方案中，组合物包含约5mg/ml多肽。在某些实施方案中，组合物包含约15mg/ml多肽。在某些实施方案中，组合物包含约20mg/ml多肽。

72、在另一方面，本公开提供了一种水性组合物，其包含：

73、a)约1、5或15mg/ml包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

74、b)约50mg/ml至约55mg/ml蔗糖；

75、c)约12mm柠檬酸盐缓冲剂；和

76、d)约0.1mg/ml聚山梨醇酯20，

77、其中组合物的ph为约6.1。

78、在某些实施方案中，水性组合物包含：

79、a)约1mg/ml包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

80、b)约50mg/ml蔗糖；

81、c)约12mm(例如11.95mm)柠檬酸盐；和

82、d)约0.1mg/ml聚山梨醇酯20，

83、其中溶液的ph为约6.1。

84、在某些实施方案中，水性组合物包含：

85、a)约5mg/ml包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

86、b)约50mg/ml蔗糖；

87、c)约12mm(例如11.95mm)柠檬酸盐；和

88、d)约0.1mg/ml聚山梨醇酯20，

89、其中溶液的ph为约6.1。

90、在某些实施方案中，水性组合物包含：

91、a)约15mg/ml包含seq id no:1的氨基酸序列的多肽；

92、b)约50mg/ml蔗糖；

93、c)约12mm(例如11.95mm)柠檬酸盐；和

94、d)约0.1mg/ml聚山梨醇酯20，

95、其中溶液的ph为约6.1。

96、在另一方面，本公开提供了包含任何前述组合物的制品。在某些实施方案中，所述制品是玻璃小瓶。

97、在另一方面，本公开提供了一种通过冻干任何前述水溶液制备的冻干组合物。

98、在另一方面，本公开提供了一种制备冻干组合物的方法，所述方法包括冻干任何前述水溶液。

99、在另一方面，本公开提供了一种制备水性组合物的方法，所述方法包括将任何前述冻干组合物溶解在水性溶剂中。

100、在某些实施方案中，水性溶剂是注射用水。在某些实施方案中，水性溶剂是氯化钠溶液。在某些实施方案中，氯化钠溶液包含约0.1％nacl至约0.5％ nacl。在某些实施方案中，氯化钠溶液包含约0.12％nacl至约0.41％ nacl。在某些实施方案中，氯化钠溶液包含约0.02mnacl至约0.07m nacl。在某些实施方案中，水性组合物包含约240至约340mosm/kg的渗透压。

101、在某些实施方案中，将水性组合物的ph调节至约6.1。在某些实施方案中，用碱将水性组合物的ph调节至约6.1。在某些实施方案中，碱为氢氧化钠。

102、在某些实施方案中，水性组合物进一步用包含约1％(w/w)表面活性剂的水溶液稀释。在某些实施方案中，表面活性剂为聚山梨醇酯20。在某些实施方案中，水溶液进一步包含约0.1％(w/w)柠檬酸一水合物、0.2％(w/w)柠檬酸三钠二水合物和98.7％(w/w)注射用水。

103、在某些实施方案中，组合物包含药物组合物。

104、在另一方面，本公开提供了一种活化受试者的自然杀伤细胞(nk)细胞的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的任何前述组合物。

105、在另一方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的任何前述组合物。在某些实施方案中，癌症为肾细胞癌、黑色素瘤、卵巢癌或肺癌。在某些实施方案中，癌症包含难治性实体瘤。