PCSK9抑制剂及使用其的治疗方法与流程

背景技术：

技术实现思路

1、本披露提供了用于治疗与前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(pcsk9)相关的疾病的剂量和方法。

2、pcsk9是在脂蛋白代谢中具有重要作用的酶。pcsk9通过增加ldl受体的降解来增加循环ldl胆固醇(ldl-c)的水平。pcsk9中罕见的功能获得性突变导致高ldl-c水平和早发冠心病，然而功能缺失变体导致低ldl-c水平和降低的冠心病发病率(zhao等人，am.j.hum.genet.genet.[美国人类遗传学杂志]2006，79：514-523；horton等人，j.lipidres.[脂质研究杂志]2009，50：增刊：s172-s177)。因此，pcsk9是经充分验证用于降低ldl-胆固醇疗法的靶标(hooper等人，expert opin.biol.ther.[生物疗法的专家意见]2013，13：429-435)。

3、已经证明用于阻断pcsk9、阿利库单抗(alirocumab)和依洛尤单抗(evolocumab)的抗体降低循环的pcsk9水平并降低ldl-胆固醇水平，但具有短的作用持续时间，必须频繁的皮下注射(zhang等人，bmc med.[bmc医学]2015，13：123；navarese等人，ann.intern.med.[内科医学年鉴]2015，163：40-51)。

4、因为心血管疾病通常需要长期管理，所以易于给药和施用对于患者依从性很重要。仍然需要疗效增加和更易于施用的pcsk9抑制剂，用于治疗疾病，例如心血管疾病、血脂异常、混合性血脂异常和高胆固醇血症。

5、本披露提供了用于治疗与pcsk9相关的疾病的剂量和方法。

6、在一方面，提供了单位剂量，该单位剂量包括约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐。

7、在一方面，提供了单位剂量，该单位剂量包括约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，其中pcsk9反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

8、在一方面，单位剂量包括至少约10mg、约20mg、约30mg、约40mg或约50mg以及多达约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg或约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。在一方面，单位剂量包括约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg或约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。在一方面，单位剂量包括从约50mg至约100mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。在一方面，单位剂量包括约15mg、约50mg、约70mg、约90mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。在一方面，单位剂量包括约50mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。

9、在一方面，单位剂量被配制用于胃肠外施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用、肌内施用或静脉内施用。在一方面，单位剂量被配制用于皮下施用。

10、在一方面，药学上可接受的盐是钠盐。在一方面，药学上可接受的盐是钾盐。

11、在一方面，单位剂量包括药学上可接受的载剂、辅助剂或赋形剂。

12、在一方面，单位剂量被包含在预填充注射器中。在一方面，单位剂量被包含在单剂量预填充注射器中。

13、在一方面，提供了在受试者中降低低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平的方法。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。

14、在一方面，提供了在受试者中降低pcsk9水平的方法。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。

15、在一方面，提供了在受试者中降低心血管疾病的风险的方法。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。

16、在一方面，包含约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐的单位剂量用于制造用于降低低密度脂蛋白胆固醇的药物(ldl-c)水平的药物。在一方面，单位剂量用于制造用于治疗与pcsk9相关的疾病的药物。在一方面，与pcsk9相关的疾病选自：升高的低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平、高脂血症、血脂异常、动脉粥样硬化、心血管疾病、高胆固醇血症及其组合。在一方面，与pcsk9相关的疾病是血脂异常或高胆固醇血症。

17、在一方面，提供了在受试者中降低低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平的方法。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，其中所述pcsk9反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

18、在一方面，提供了在受试者中降低低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平的方法。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐。在一方面，pcsk9反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

19、在一方面，与单位剂量的施用前受试者中的ldl-c水平相比，在单位剂量的施用后，受试者中的ldl-c水平降低约10％至约90％。在一方面，与单位剂量施用前受试者中的ldl-c水平相比，在单位剂量施用后，受试者中的ldl-c水平降低至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％，以及多达约80％或约90％。在一方面，与单位剂量施用前受试者中的ldl-c水平相比，单位剂量施用后，受试者中的ldl-c水平降低约20％至约80％、约30％至约70％、约40％至约70％、或约50％至约70％。

20、在一方面，与单位剂量施用前受试者中的ldl-c水平相比，单位剂量施用后受试者中的ldl-c水平降低持续至少约2周。在一方面，与单位剂量施用前受试者中的ldl-c水平相比，单位剂量施用后受试者中的ldl-c水平降低至少约3周、约4周、约5周以及多达约6周。

21、在一方面，受试者的ldl-c的血浆水平降低。在一方面，受试者的ldl-c的血清水平降低。

22、在一方面，在单位剂量的施用前，受试者具有至少约100mg/dl、至少约110mg/dl、至少约120mg/dl、至少约130mg/dl、至少约140mg/dl、至少约150mg/dl、至少约160mg/dl、至少约170mg/dl、至少约180mg/dl、至少约190mg/dl、至少约200mg/dl、至少约300mg/dl或至少约400mg/dl的血清低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平。

23、在一方面，提供了在受试者中治疗与pcsk9相关的疾病的方法。在一方面，方法包括向受试者施用从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐。在一方面，方法包括向受试者施用单位剂量，该单位剂量包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

24、在一方面，与pcsk9相关的疾病选自：升高的低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平、高脂血症、血脂异常、动脉粥样硬化、心血管疾病、高胆固醇血症及其组合。在一方面，与pcsk9相关的疾病是血脂异常或高胆固醇血症。

25、在一方面，受试者中的pcsk9水平降低。在一方面，与单位剂量的施用前受试者中的pcsk9水平相比，在单位剂量的施用后，受试者中的pcsk9水平降低约10％至约95％。在一方面，与单位剂量施用前受试者中的ldl-c水平相比，在单位剂量施用后，受试者中的pcsk9水平降低至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％，至少约70％，以及多达约80％或约90％。在一方面，与单位剂量施用前受试者中的pcsk9水平相比，单位剂量施用后，受试者中的pcsk9水平降低约10％至约95％、约20％至约80％、约30％至约70％、约40％至约70％、或约50％至约70％。

26、在一方面，与pcsk9反义寡核苷酸的施用前受试者中的pcsk9水平相比，在施用pcsk9反义寡核苷酸后，受试者中的pcsk9水平降低持续至少约2周。在一方面，与pcsk9反义寡核苷酸施用前受试者中的pcsk9水平相比，pcsk9反义寡核苷酸施用后受试者中的pcsk9水平降低至少约3周、至少约4周、至少约5周以及多达约6周。在一方面，受试者中的pcsk9的血浆水平降低。在一方面，受试者中的pcsk9的血清水平降低。在一方面，pcsk9表达降低。

27、在一方面，将单位剂量约每2周至约每6周施用至受试者。在一方面，将单位剂量约每2周、约每3周、约每4周、约每5周或约每6周施用一次至受试者，持续至少约6周、至少约12周、至少约26周，或至少约52周。在一方面，将单位剂量每月一次施用至受试者，持续至少约3个月。在一方面，将单位剂量每月一次施用至受试者，持续至少约6个月、至少约9个月、至少约12个月、至少约15个月或至少约24个月。在一方面，将单位剂量每隔一个月一次施用至受试者，持续至少约4个月。在一方面，将单位剂量每隔一个月一次施用至受试者，持续至少约6个月、至少约12个月、至少约18个月、至少约24个月或至少约30个月、或至少约36个月。

28、在一方面，将单位剂量约每21天、约每28天、或约每30天施用至受试者，持续至少约90天、至少约120天、至少约180天，或至少约365天。

29、在一方面，单位剂量通过胃肠外施用进行施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用、静脉内施用或肌内施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用。

30、在一方面，受试者是人类。

31、在一方面，提供了用于在受试者中降低低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平的给药方案。在一方面，方法包括向受试者施用负荷剂量，该负荷剂量包括：包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐的单位剂量。在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中的ldl-c水平降低约10％至约90％，以提供受试者中降低的ldl-c水平。在一方面，给药方案包括施用一个或多个维持剂量，该维持剂量包括：包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐的单位剂量。

32、在一方面，方法包括向受试者施用负荷剂量，该负荷剂量包括：包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐的单位剂量，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

33、在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中的ldl-c水平降低约10％至约90％，以提供受试者中降低的ldl-c水平。在一方面，给药方案包括施用一个或多个维持剂量，该维持剂量包括：包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐的单位剂量，其中该pcsk9反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团，其中经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。

34、在一方面，负荷剂量包括比维持剂量更大量的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq idno：1)或其药学上可接受的盐。在一方面，负荷剂量包括与维持剂量相同量的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)或其药学上可接受的盐。

35、在一方面，负荷剂量包括比维持剂量更大量的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间；与维持剂量相比。在一方面，负荷剂量包括与维持剂量相同量的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。

36、在一方面，将维持剂量约每2周至约每6周施用至受试者。在一方面，将维持剂量约每2周、约每3周、约每4周、约每5周或约每6周施用至受试者，持续至少约6周、至少约12周、至少约26周，或至少约52周。在一方面，将维持剂量至少每月一次施用至受试者，持续至少约3个月。在一方面，将维持剂量约每月一次施用至受试者，持续至少约6个月、至少约9个月、至少约12个月、至少约15个月或至少约24个月。在一方面，将维持剂量约每21天、约每28天、或约每30天施用至受试者，持续至少约90天、至少约120天、至少约180天，或至少约365天。

37、在一方面，负荷剂量、维持剂量或两者通过胃肠外施用进行施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用、静脉内施用或肌内施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用。

38、在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中的ldl-c水平降低至少约20％、约30％、约40％、约50％、约60％或约70％，以及多达约80％或约90％。在一方面，在负荷剂量施用后，受试者中的ldl-c水平降低约20％至约80％、约30％至约70％、约40％至约70％、或约50％至约70％。

39、在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中降低的ldl-c水平增加小于约10％，持续至少约2周。在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中降低的ldl-c水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％，持续至少约2周、至少约3周、至少约4周、至少约5周，以及多达约6周。在一方面，在施用维持剂量后，受试者中降低的ldl-c水平增加小于约10％，持续至少约2周。在一方面，在施用维持剂量后，受试者中降低的ldl-c水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％，持续至少约2周、至少约3周、至少约4周，或至少约5周，以及多达约6周。在一方面，受试者中的ldl-c血浆水平降低。在一方面，受试者中的ldl-c血清水平降低。

40、在一方面，在负荷剂量的施用前，受试者具有至少约100mg/dl、至少约110mg/dl、至少约120mg/dl、至少约130mg/dl、至少约140mg/dl、至少约150mg/dl、至少约160mg/dl、至少约170mg/dl、至少约180mg/dl、至少约190mg/dl、至少约200mg/dl、至少约300mg/dl或至少约400mg/dl的血清低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平。

41、在一方面，受试者是人类。

42、在一方面，提供了用于在受试者中降低pcsk9水平的给药方案。在一方面，给药方案包括：向受试者施用负荷剂量，该负荷剂量包括约从10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐。在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中的pcsk9水平降低约10％至约95％，以提供受试者中降低的pcsk9水平。在一方面，给药方案包括施用一个或多个维持剂量，该维持剂量包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)(如图1-3所示)或其药学上可接受的盐。在一方面，负荷剂量包括比维持剂量更大量的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)或其药学上可接受的盐。在一方面，负荷剂量包括与维持剂量相同量的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)或其药学上可接受的盐。

43、在一方面，提供了用于在受试者中降低pcsk9水平的给药方案。在一方面，给药方案包括：向受试者施用负荷剂量，该负荷剂量包括：包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐的单位剂量，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中的pcsk9水平降低约10％至约95％，以提供受试者中降低的pcsk9水平。在一方面，给药方案包括：施用一个或多个维持剂量，该维持剂量包括：包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐的单位剂量，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。在一方面，负荷剂量包括比维持剂量更大量的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，负荷剂量包括与维持剂量相同量的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。

44、在一方面，将维持剂量约每2周至约每6周施用至受试者。在一方面，维持剂量约每2周、约每3周、约每4周、约每5周或每6周施用至受试者，持续至少约6周、至少约12周、至少约26周，或至少约52周。在一方面，维持剂量每月一次施用至受试者，持续至少约3个月。在一方面，维持剂量每月一次施用至受试者，持续至少约6个月、至少约9个月、至少约12个月、或至少约15个月。在一方面，维持剂量约每21天、约每28天、或约每30天施用至受试者，持续至少约90天、至少约120天、至少约180天，或至少约365天。

45、在一方面，负荷剂量、维持剂量或两者通过胃肠外施用进行施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用、静脉内施用或肌内施用。在一方面，胃肠外施用包括皮下施用。

46、在一方面，在负荷剂量施用后，受试者中的pcsk9水平降低至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％，至少约70％，以及多达约80％或约90％。在一方面，在负荷剂量施用后，受试者中的pcsk9水平降低约10％至约95％、约20％至约80％、约30％至约70％、约40％至约70％、或约50％至约70％。在一方面，在施用负荷剂量后，受试者中降低的pcsk9水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％，持续至少约2周、至少约3周、至少约4周、或至少约5周，以及多达约6周。在一方面，在维持剂量的施用后，受试者中降低的pcsk9水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％，持续至少约2周、至少约3周、至少约4周、或至少约5周，以及多达约6周。在一方面，受试者中的pcsk9的血浆水平降低。在一方面，受试者中的pcsk9的血清水平降低。在一方面，pcsk9表达降低。

47、在一方面，给药方案包括施用2个或更多个维持剂量。在一方面，给药方案包括：施用3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、9个或更多个、12个或更多个、或15个或更多个维持剂量。在一方面，在先前剂量后每个维持剂量约每3周至约每6周施用一次。在一方面，先前剂量是负荷剂量。在一方面，维持剂量是先前维持剂量。在一方面，维持剂量施用持续至少约3个月、约6个月或约1年。

48、在一方面，在施用维持剂量后多达约6周、约9周或约12周，受试者中降低的ldl-c水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％。在一方面，在施用维持剂量后多达约6周、约9周或约12周，受试者中降低的pcsk9水平增加小于约10％、小于约5％或小于约2％。

49、在一方面，受试者是人类。

50、在一方面，提供了单剂量容器，该单剂量容器包括从约10mg至约120mg的式i的pcsk9反义寡核苷酸(seq id no：1)或其药学上可接受的盐。

51、在一方面，提供了单剂量容器，该单剂量容器包括从约10mg至约120mg的pcsk9反义寡核苷酸或其药学上可接受的盐，该反义寡核苷酸包括经修饰的寡核苷酸和缀合物基团。在一方面，经修饰的寡核苷酸由seq id no：1组成并包括：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口区段；由三个连接的核苷组成的5’翼区段；和由三个连接的核苷组成的3’翼区段。在一方面，该缺口区段位于该5′翼区段与该3′翼区段之间。在一方面，每个翼区段的每个核苷包括2′-o-乙基(cet)糖。在一方面，每个核苷间键联是硫代磷酸酯键联。在一方面，每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在一方面，该缀合物基团包括与经修饰的寡核苷酸的5′端连接的5′-三己基氨基-(tha)-c6galnac3。在一方面，单剂量容器包括单剂量预填充注射器。