抗体疗法的制作方法

本发明涉及癌症疗法，该癌症疗法将包含至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物与包含结合cd3的抗原结合区以及结合肿瘤细胞上的靶抗原的抗原结合区的结合剂的治疗联合。

背景技术：

1、免疫疗法的进步已改变了癌症疗法领域。除了经典的化疗和照射之外，各种各样的癌症类型的患者还获得了如单克隆抗体(mab)治疗和过继细胞转移(act)的治疗选项。单特异性单克隆抗体可特异性和双价地结合到细胞上表达的抗原，例如肿瘤相关抗原或t细胞特异性靶标。然而，双特异性抗体(bsab)可单价地结合到两个不同的靶标上，从而允许靶向一个细胞上的两个表位或者不同细胞上的两个抗原。在后一情况下，bsab本质上使两个细胞紧密靠近，例如t细胞与肿瘤细胞。含有t细胞特异性臂和肿瘤相关抗原特异性臂的bsab(也称为t细胞接合bsab或cd3 bsab)可以使t细胞与肿瘤细胞交联，由此诱导t细胞介导的肿瘤细胞杀伤，而不管t细胞的tcr特异性如何。act包括免疫细胞(最常见地t细胞)向癌症患者中的过继转移。特别地，使用嵌合抗原受体(car)t细胞的两种疗法已被fda批准用于治疗血液学癌症，它们经遗传工程化成表达人工高亲和力t细胞受体(schuster等人,nengl j med 2019；380:45-56，neelapu等人,n engl j med2017；377:2531-2544)。预防性疫苗通常旨在诱导针对传染原的抗体反应(antibody response)以预防疾病。另一方面，治疗性癌症疫苗可被用于加强现有肿瘤特异性t细胞，例如通过注射具有肿瘤特异性序列的肽(zwaveling等人,j immunol.2002；169(1):350-8)。

2、这些疗法的实施在许多癌症类型中导致了更好的总生存率，尽管并非所有的癌症患者均能从免疫疗法中获益。值得注意的是，虽然t细胞接合性bsab在血液瘤中显示出有前景性的临床结果，但cd3 bsab尚未被批准用于治疗实体瘤，因为临床功效迄今尚未得到证实(yu等人,j hematol oncol.2017；10:155)。免疫疗法在所谓的“冷性”肿瘤(即没有任何(功能性)免疫浸润物的肿瘤)中明显不那么有效。而且，以抑制性免疫细胞如调节性t细胞(treg)、髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells，mdsc)和/或m2型巨噬细胞的存在为特征的免疫抑制肿瘤微环境(xiong等人,adv biol2021；5(3):e1900311)可能会阻止t细胞浸润或者局部抑制t细胞功能。为了转化这种抑制环境，对于瘤内注射(无佐剂)季节性流感疫苗(newman等人,pnas 2020)、遗传工程化鼠巨细胞病毒(erkes等人,molecular therapy2016)、或灭活改良型痘苗病毒安卡拉株(ankara)(dai等人,scienceimmunol2017)进行了研究，这些均导致鼠肿瘤模型的抗肿瘤疗效增强。从机制上讲，假定此类疗法经由触发肿瘤驻留型抗原呈递细胞所表达的模式识别受体起作用，导致免疫抑制肿瘤微环境转化为支持免疫浸润和t细胞活化的环境。卡介苗(bacillus calmette-guérin，bcg)免疫疗法用于治疗非肌层侵入性膀胱癌的i临床用途也归因于肿瘤中局部炎症和免疫细胞浸润的触发(redelman-sidi等人,nat rev urol 2014；11(3):153-62)。

3、增加肿瘤浸润性t细胞的数量一直是许多治疗性疫苗接种研究的目标。然而，虽然治疗性疫苗接种在恶性前病变中显示出有前景性的结果，但此类疫苗接种并未在癌症患者中显示出有效的临床功效。因此，联合疗法可能更有效(melief等人,j clin invest.2015；125(9):3401-3412)。benonisson等人也得出了这一结论，他们展示，用小鼠t细胞接合性bsab治疗具有鼠黑素瘤(b16f10)的小鼠导致肿瘤t细胞浸润和活化增强，尽管未建立t细胞免疫(benonisson等人,mol cancer ther.2019feb；18(2):312-322)。us2015095811和us20190382490均描述了由癌症特异性疫苗和通过单克隆抗体的免疫检查点抑制组成的联合疗法。此外，ly等人探索了一种由act、肿瘤特异性肽疫苗接种、佐剂toll样受体配体(tlr-l)7和il-2组成的联合疗法，并且发现了可介导肿瘤清除的t细胞数量明显增加(ly等人,cancer res.2010；70(21):8339-46)。

4、仍然需要使实体瘤中肿瘤浸润性t细胞数量增加的方法，该方法可后续用于与t细胞接合性bsab抗体治疗的联合疗法。特别地，仍然需要包含t细胞接合性bsab和肿瘤非特异性疫苗的疗法，这将允许向患者给药通用疫苗，而不管他们的特定癌症类型。

技术实现思路

1、本发明的一个目的是提供一种用于在有此需要的受试者中预防或减少肿瘤生长或者治疗癌症的方法，该方法包括向受试者提供：

2、i)结合剂，该结合剂包含结合cd3(如人cd3)的抗原结合区，以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶抗原的抗原结合区；以及

3、ii)免疫原性组合物，该免疫原性组合物包含至少一种疫苗抗原。

4、在第2方面，本发明涉及一种用于在有此需要的受试者中预防或减少肿瘤生长或者治疗癌症的方法，该方法包括向受试者提供：

5、i)编码结合剂的核酸构建体，该结合剂包含结合cd3的第1结合区，以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶抗原的第2结合区；以及

6、ii)免疫原性组合物，该免疫原性组合物包含至少一种疫苗抗原。

7、在第3方面，本发明涉及一种在受试者中预防或减少肿瘤生长或者治疗癌症的用途的结合剂，该结合剂包含结合cd3的结合区以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶标的结合区，其中该用途包括将抗体与包含至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物组合提供给受试者。

8、在第4方面，本发明涉及一种包含至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物，用于在受试者中预防或减少肿瘤长出(outgrowth)或者治疗癌症的用途，其中免疫原性组合物与结合剂组合提供给受试者，所述结合剂包含结合cd3的结合区以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶标的结合区。

9、在第5方面，本发明涉及结合剂在制造用于治疗受试者的癌症的药物中的用途，该结合剂包含结合cd3的结合区以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶标的结合区，其中该治疗包括将所述结合剂与包含至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物组合提供给受试者。

10、在第6方面，本发明提供了包含至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物在制造用于治疗受试者的癌症的药物中的用途，其中免疫原性组合物与结合区的结合剂组合提供给受试者，所述结合剂包含结合cd3的结合区以及结合所述肿瘤或癌症的细胞上的靶标。

11、最终，本发明还提供了一种试剂盒，该试剂盒包含结合剂，以及含有至少一种疫苗抗原的免疫原性组合物，所述结合剂含有结合cd3的结合区以及结合肿瘤或癌症的细胞上的靶标的结合区。

12、这些以及其它方面和实施方案将在以下部分中更详细地描述。