抗体-药物缀合物与抗SIRPα抗体的组合的制作方法

[]本发明涉及药物组合物，其中组合施用特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体，和/或治疗方法，所述方法包括将特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体组合施用于受试者。

背景技术：

0、[背景技术]

1、sirpα(shps-1)是属于骨髓细胞诸如巨噬细胞、树突细胞和中性粒细胞和神经胶质细胞中存在的ig超家族的单跨膜分子(非专利文献1)。其细胞外区域由单个igv结构域和两个igc结构域组成。据报道，作为与cd47的连接位置的igv结构域在人类中具有10种变体(非专利文献2)。另一方面，其细胞内区域含有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(itim)。当itim结合cd47时，诱导与酪氨酸去磷酸化酶shp-1和shp-2的结合，并传递抑制信号。

2、据报道，sirpα-cd47相互作用引起生理现象，即红细胞上的cd47结合巨噬细胞上的sirpα，以传递“别吃我”信号，其导致可以避免不想要的经红细胞的吞噬作用(非专利文献3)。同样，在肿瘤微环境下，表明当在肿瘤细胞上高度表达的cd47结合巨噬细胞和树突细胞上的sirpα时，抑制吞噬肿瘤细胞的吞噬活性。当抑制吞噬活性时，将抑制随后向t细胞的肿瘤抗原呈递以及再随后的肿瘤免疫应答。因此，一种免疫现象，即肿瘤细胞的吞噬作用，被认为是肿瘤抗原进入的检查点。

3、sirpα-cd47是目前验证的唯一一种吞噬作用抑制分子。预期针对这种分子的抑制性抗体有可能充当新型的检查点抑制剂，其针对除了t细胞以外的靶标，并在对常规免疫检查点抑制剂耐药的患者中是广泛有效的。

4、近来，关于抗sirpα抗体的专利已被各种公司接连报道(专利文献1、2和3)。在单个文献的实例中，公开了与各种变体和家族分子(例如sirpβ1、sirpγ)的结合活性的差异以及抗体igg亚类的差异。例如，作为igg4pro抗体的ose-172结合sirpα v1和sirpβ1，并且既不结合sirpα v2，也不结合sirpγ；作为igg1n279a抗体的kwar23结合所有10种类型的sirpα变体和家族分子，sirpβ1和sirpγ；并且作为igg2抗体的adu-1805结合所有10种类型的sirpα变体和sirpγ。所述抗体中哪一种作为药物最适合仍然未知。正在努力获得优异的抗体。作为这种努力的实例，可以例举专利文献4中描述的抗体。

5、具有与抗体(其能够结合在癌细胞的表面上表达的抗原并且能够细胞内化)缀合的具有细胞毒性的药物的抗体-药物缀合物(adc)可以将药物选择性递送至癌细胞，并因此可以预期其引起药物在癌细胞内积累并杀死癌细胞。

6、作为一种此类抗体-药物缀合物，已知包含抗体和依喜替康的衍生物(其为拓扑异构酶i抑制剂)作为其组分的抗体-药物缀合物(专利文献5至11，非专利文献4至7)。

7、专利文献5至11公开了如上所提及的抗体-药物缀合物可以与各种癌症治疗剂中的任一种组合施用。

8、然而，当上述抗体-药物缀合物与抗sirpα抗体组合使用时，既没有公开任何显示优异的组合作用的测试结果，也没有公开提出这种测试结果的任何科学基础。

9、[引文列表]

10、[专利文献]

11、[专利文献1]国际公开号wo 2017/178653

12、[专利文献2]国际公开号wo 2018/026600

13、[专利文献3]国际公开号wo 2018/190719

14、[专利文献4]国际公开号wo 2020/013170

15、[专利文献5]国际公开号wo 2014/057687

16、[专利文献6]国际公开号wo 2014/061277

17、[专利文献7]国际公开号wo 2015/098099

18、[专利文献8]国际公开号wo 2015/115091

19、[专利文献9]国际公开号wo 2015/146132

20、[专利文献10]国际公开号wo 2015/155976

21、[专利文献11]国际公开号wo 2015/155998

22、[非专利文献]

23、[非专利文献1]matozaki等人trends in cell biol.2009(19)2，72-80

24、[非专利文献2]takenaka等人nat immunol.2007(8)12，1313-1323

25、[非专利文献3]matozaki等人j.biochem.2014(155)6，335-344

26、[非专利文献4]ogitani y.等人，clinical cancer research(2016)22(20)，5097-5108.

27、[非专利文献5]ogitani y.等人，cancer science(2016)107，1039-1046.

28、[非专利文献6]doi t，等人，lancet oncol 2017；18：1512-22.

29、[非专利文献7]takegawa n，等人，int.j.cancer：141，1682-1689(2017)

30、[发明概述]

31、[技术问题]

32、已经证实本发明中使用的抗体-药物缀合物(含有依喜替康衍生物作为组分的抗体-药物缀合物)甚至作为单一药剂也发挥优异的抗肿瘤效果。然而，需要获得治疗方法，其可以以多种方式抑制癌细胞的生长并通过组合使用所述抗体-药物缀合物与另一种具有不同作用机制的抗癌剂来发挥更优异的抗肿瘤效果。

33、本发明的一个目的是提供药物组合物，其中组合施用特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体，和/或治疗方法，所述方法包括将特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体组合施用于受试者。

34、[问题的解决方案]

35、作为解决上述问题的辛勤研究的结果，本发明人已经发现特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体的组合施用表现出优异的组合作用，且完成了本发明。

36、也就是说，本发明提供了以下[1]至[232]

37、[1]

38、药物组合物，其中组合施用抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体，且所述抗体-药物缀合物是这样的抗体-药物缀合物，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合：

39、[式1]

40、

41、其中a代表与抗体的连接位置。

42、[2]

43、根据[1]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

44、[3]

45、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

46、[4]

47、根据[3]所述的药物组合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

48、[5]

49、根据[3]所述的药物组合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2代表的氨基酸序列组成。

50、[6]

51、根据[3]至[5]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

52、[7]

53、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

54、[8]

55、根据[7]所述的药物组合物，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

56、[9]

57、根据[8]所述的药物组合物，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

58、[10]

59、根据[7]至[9]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

60、[11]

61、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

62、[12]

63、根据[11]所述的药物组合物，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

64、[13]

65、根据[12]所述的药物组合物，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

66、[14]

67、根据[11]至[13]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

68、[15]

69、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

70、[16]

71、根据[15]所述的药物组合物，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

72、[17]

73、根据[16]所述的药物组合物，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

74、[18]

75、根据[15]至[17]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

76、[19]

77、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

78、[20]

79、根据[19]所述的药物组合物，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

80、[21]

81、根据[20]所述的药物组合物，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

82、[22]

83、根据[19]至[21]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

84、[23]

85、根据[2]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

86、[24]

87、根据[23]所述的药物组合物，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seqid no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

88、[25]

89、根据[24]所述的药物组合物，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

90、[26]

91、根据[23]至[25]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

92、[27]

93、根据[1]至[26]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

94、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

95、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

96、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

97、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

98、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

99、[28]

100、根据[1]至[27]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

101、[29]

102、根据[1]至[28]中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

103、[30]

104、药物组合物，其中组合施用抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体，且所述抗体-药物缀合物是由下式代表的抗体-药物缀合物：

105、[式2]

106、

107、其中药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合；且n代表每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数。

108、[31]

109、根据[30]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

110、[32]

111、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

112、[33]

113、根据[32]所述的药物组合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：2的氨基酸残基1至214代表的氨基酸序列组成。

114、[34]

115、根据[32]所述的药物组合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2代表的氨基酸序列组成。

116、[35]

117、根据[32]至[34]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

118、[36]

119、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

120、[37]

121、根据[36]所述的药物组合物，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

122、[38]

123、根据[37]所述的药物组合物，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

124、[39]

125、根据[36]至[38]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

126、[40]

127、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

128、[41]

129、根据[40]所述的药物组合物，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

130、[42]

131、根据[41]所述的药物组合物，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

132、[43]

133、根据[40]至[42]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

134、[44]

135、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

136、[45]

137、根据[44]所述的药物组合物，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

138、[46]

139、根据[45]所述的药物组合物，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

140、[47]

141、根据[44]至[46]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

142、[48]

143、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

144、[49]

145、根据[48]所述的药物组合物，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

146、[50]

147、根据[49]所述的药物组合物，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

148、[51]

149、根据[48]至[50]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

150、[52]

151、根据[31]所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

152、[53]

153、根据[52]所述的药物组合物，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seqid no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

154、[54]

155、根据[53]所述的药物组合物，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

156、[55]

157、根据[52]至[54]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

158、[56]

159、根据[30]至[55]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

160、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

161、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

162、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

163、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

164、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

165、[57]

166、根据[30]至[56]中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

167、[58]

168、根据[30]至[57]中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

169、[59]

170、治疗方法，其包括将抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体组合施用于需要治疗的受试者，其中所述抗体-药物缀合物是这样的抗体-药物缀合物，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合：

171、[式3]

172、

173、其中a代表与抗体的连接位置。

174、[60]

175、根据[59]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

176、[61]

177、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

178、[62]

179、根据[61]所述的治疗方法，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

180、[63]

181、根据[61]所述的治疗方法，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2代表的氨基酸序列组成。

182、[64]

183、根据[61]至[63]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

184、[65]

185、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

186、[66]

187、根据[65]所述的治疗方法，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

188、[67]

189、根据[66]所述的治疗方法，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

190、[68]

191、根据[65]至[67]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

192、[69]

193、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

194、[70]

195、根据[69]所述的治疗方法，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

196、[71]

197、根据[70]所述的治疗方法，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

198、[72]

199、根据[69]至[71]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

200、[73]

201、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

202、[74]

203、根据[73]所述的治疗方法，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

204、[75]

205、根据[74]所述的治疗方法，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

206、[76]

207、根据[73]至[75]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

208、[77]

209、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

210、[78]

211、根据[77]所述的治疗方法，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

212、[79]

213、根据[78]所述的治疗方法，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

214、[80]

215、根据[77]至[79]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

216、[81]

217、根据[60]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

218、[82]

219、根据[81]所述的治疗方法，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

220、[83]

221、根据[82]所述的治疗方法，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

222、[84]

223、根据[81]至[83]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

224、[85]

225、根据[59]至[84]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

226、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

227、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

228、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

229、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

230、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

231、[86]

232、根据[59]至[85]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

233、[87]

234、根据[59]至[86]中任一项所述的治疗方法，其中所述方法用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

235、[88]

236、治疗方法，其包括将抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体组合施用于需要治疗的受试者，其中所述抗体-药物缀合物是由下式代表的抗体-药物缀合物：

237、[式4]

238、

239、其中药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合；且n代表每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数。

240、[89]

241、根据[88]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

242、[90]

243、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

244、[91]

245、根据[90]所述的治疗方法，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

246、[92]

247、根据[90]所述的治疗方法，其中所述抗her2抗体是包含由seq id no：1代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：2代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体。

248、[93]

249、根据[90]至[92]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

250、[94]

251、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

252、[95]

253、根据[94]所述的治疗方法，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

254、[96]

255、根据[95]所述的治疗方法，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

256、[97]

257、根据[94]至[96]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

258、[98]

259、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

260、[99]

261、根据[98]所述的治疗方法，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

262、[100]

263、根据[99]所述的治疗方法，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

264、[101]

265、根据[98]或[100]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

266、[102]

267、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

268、[103]

269、根据[102]所述的治疗方法，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

270、[104]

271、根据[103]所述的治疗方法，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

272、[105]

273、根据[102]至[104]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

274、[106]

275、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

276、[107]

277、根据[106]所述的治疗方法，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

278、[108]

279、根据[107]所述的治疗方法，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

280、[109]

281、根据[106]至[108]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

282、[110]

283、根据[89]所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

284、[111]

285、根据[110]所述的治疗方法，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq idno：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

286、[112]

287、根据[111]所述的治疗方法，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

288、[113]

289、根据[110]至[112]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

290、[114]

291、根据[88]至[113]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

292、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

293、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

294、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

295、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

296、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

297、[115]

298、根据[88]至[114]中任一项所述的治疗方法，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

299、[116]

300、根据[88]至[115]中任一项所述的治疗方法，其中所述方法用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

301、[117]

302、抗体-药物缀合物，其用于通过与抗sirpα抗体组合施用来治疗疾病，其中在所述抗体-药物缀合物中，由下式代表的药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合：

303、[式5]

304、

305、其中a代表与抗体的连接位置。

306、[118]

307、根据[117]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

308、[119]

309、根据[118]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

310、[120]

311、根据[119]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

312、[121]

313、根据[119]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her2抗体是包含由seq id no：1代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：2代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体。

314、[122]

315、根据[119]至[121]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

316、[123]

317、根据[118]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

318、[124]

319、根据[123]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

320、[125]

321、根据[124]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

322、[126]

323、根据[123]至[125]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

324、[127]

325、根据[118]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

326、[128]

327、根据[127]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

328、[129]

329、根据[128]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

330、[130]

331、根据[127]至[129]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

332、[131]

333、根据[130]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

334、[132]

335、根据[131]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

336、[133]

337、根据[132]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

338、[134]

339、根据[131]至[133]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

340、[135]

341、根据[118]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

342、[136]

343、根据[135]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

344、[137]

345、根据[136]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

346、[138]

347、根据[135]至[137]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

348、[139]

349、根据[118]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

350、[140]

351、根据[139]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

352、[141]

353、根据[140]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

354、[142]

355、根据[139]至[141]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

356、[143]

357、根据[117]至[142]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

358、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

359、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

360、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

361、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

362、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

363、[144]

364、根据[117]至[143]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

365、[145]

366、根据[117]至[144]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述缀合物用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

367、[146]

368、抗体-药物缀合物，其用于通过与抗sirpα抗体组合施用来治疗疾病，且由下式代表：

369、[式6]

370、

371、其中药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合；且n代表每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数。

372、[147]

373、根据[146]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

374、[148]

375、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

376、[149]

377、根据[148]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

378、[150]

379、根据[148]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her2抗体是包含由seq id no：1代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：2代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体。

380、[151]

381、根据[148]至[150]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

382、[152]

383、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

384、[153]

385、根据[152]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

386、[154]

387、根据[153]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

388、[155]

389、根据[152]至[154]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

390、[156]

391、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

392、[157]

393、根据[156]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

394、[158]

395、根据[157]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

396、[159]

397、根据[156]至[158]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

398、[160]

399、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

400、[161]

401、根据[160]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

402、[162]

403、根据[161]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

404、[163]

405、根据[160]至[162]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

406、[164]

407、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

408、[165]

409、根据[164]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

410、[166]

411、根据[165]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

412、[167]

413、根据[164]至[166]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

414、[168]

415、根据[147]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

416、[169]

417、根据[168]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

418、[170]

419、根据[169]所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

420、[171]

421、根据[168]至[170]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

422、[172]

423、根据[146]至[171]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

424、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

425、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

426、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

427、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

428、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

429、[173]

430、根据[146]至[172]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

431、[174]

432、根据[146]至[173]中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述缀合物用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

433、[175]

434、抗体-药物缀合物用于制备药物的用途，所述药物用于通过与抗sirpα抗体组合施用来治疗疾病，其中在所述抗体-药物缀合物中，由下式代表的药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合：

435、[式7]

436、

437、其中a代表与抗体的连接位置。

438、[176]

439、根据[175]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

440、[177]

441、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

442、[178]

443、根据[177]所述的用途，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

444、[179]

445、根据[177]所述的用途，其中所述抗her2抗体是包含由seq id no：1代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：2代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体。

446、[180]

447、根据[177]至[179]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

448、[181]

449、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

450、[182]

451、根据[181]所述的用途，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

452、[183]

453、根据[182]所述的用途，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

454、[184]

455、根据[181]至[183]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

456、[185]

457、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

458、[186]

459、根据[185]所述的用途，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

460、[187]

461、根据[186]所述的用途，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

462、[188]

463、根据[185]至[187]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

464、[189]

465、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

466、[190]

467、根据[189]所述的用途，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

468、[191]

469、根据[190]所述的用途，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

470、[192]

471、根据[189]至[191]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

472、[193]

473、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

474、[194]

475、根据[193]所述的用途，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

476、[195]

477、根据[194]所述的用途，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

478、[196]

479、根据[193]至[195]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

480、[197]

481、根据[176]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

482、[198]

483、根据[197]所述的用途，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

484、[199]

485、根据[198]所述的用途，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

486、[200]

487、根据[197]至[199]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

488、[201]

489、根据[175]至[200]中任一项所述的用途，其中所述抗sirpα抗体是以下(1)至(5)中的任一者：

490、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

491、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

492、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

493、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

494、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

495、[202]

496、根据[175]至[201]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

497、[203]

498、根据[175]至[202]中任一项所述的用途，其中所述用途用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

499、[204]

500、抗体-药物缀合物用于制备药物的用途，所述药物用于通过与抗sirpα抗体组合施用来治疗疾病，且所述抗体-药物缀合物由下式代表：

501、[式8]

502、

503、其中药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合；且n代表每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数。

504、[205]

505、根据[204]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体或抗cdh6抗体。

506、[206]

507、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

508、[207]

509、根据[206]所述的用途，其中所述抗her2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成。

510、[208]

511、根据[206]所述的用途，其中所述抗her2抗体是包含由seq id no：1代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：2代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体。

512、[209]

513、根据[206]至[208]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

514、[210]

515、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

516、[211]

517、根据[210]所述的用途，其中所述抗her3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：4代表的氨基酸序列组成。

518、[212]

519、根据[211]所述的用途，其中所述抗her3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

520、[213]

521、根据[210]至[212]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

522、[214]

523、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

524、[215]

525、根据[214]所述的用途，其中所述抗trop2抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

526、[216]

527、根据[215]所述的用途，其中所述抗trop2抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

528、[217]

529、根据[214]至[216]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

530、[218]

531、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

532、[219]

533、根据[218]所述的用途，其中所述抗b7-h3抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：7的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

534、[220]

535、根据[219]所述的用途，其中所述抗b7-h3抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

536、[221]

537、根据[218]至[220]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在3.5至4.5的范围内。

538、[222]

539、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

540、[223]

541、根据[222]所述的用途，其中所述抗gpr20抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：9的氨基酸残基20至472组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成。

542、[224]

543、根据[223]所述的用途，其中所述抗gpr20抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

544、[225]

545、根据[222]至[224]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

546、[226]

547、根据[205]所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

548、[227]

549、根据[226]所述的用途，其中所述抗cdh6抗体是包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成。

550、[228]

551、根据[227]所述的用途，其中所述抗cdh6抗体在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

552、[229]

553、根据[226]至[228]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数在7至8的范围内。

554、[230]

555、根据[204]至[229]中任一项所述的用途，其中所述抗sirpα抗体是以下抗体(1)至(5)中的任一者：

556、(1)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

557、(2)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：17的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

558、(3)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：15的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；

559、(4)包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的氨基酸残基20至466组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：16的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成；和

560、(5)根据(1)至(4)中任一者的抗体，其在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基。

561、[231]

562、根据[204]至[230]中任一项所述的用途，其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体分别作为活性组分包含在不同制剂中，并且同时或不同时施用。

563、[232]

564、根据[204]至[231]中任一项所述的用途，其中所述用途用于治疗选自以下的至少一种：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌和子宫癌肉瘤、头颈癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、胶质瘤、眼部肿瘤、甲状腺癌、胸腺癌、胆囊癌、淋巴瘤、白血病和骨髓增生异常综合征。

565、[本发明的有利效果]

566、本发明可提供药物组合物，其中组合施用特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体，和/或治疗方法，所述方法包括将特定的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体组合施用于受试者。

567、[附图简述]

568、[图1]图1是显示抗her2抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：1)的图。

569、[图2]图2是显示抗her2抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：2)的图。

570、[图3]图3是显示抗her3抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：3)的图。

571、[图4]图4是显示抗her3抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：4)的图。

572、[图5]图5是显示抗trop2抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：5)的图。

573、[图6]图6是显示抗trop2抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：6)的图。

574、[图7]图7是显示抗b7-h3抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：7)的图。

575、[图8]图8是显示抗b7-h3抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：8)的图。

576、[图9]图9是显示抗gpr20抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：9)的图。

577、[图10]图10是显示抗gpr20抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：10)的图。

578、[图11]图11是显示抗cdh6抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：11)的图。

579、[图12]图12是显示抗cdh6抗体的轻链的氨基酸序列(seq id no：12)的图。

580、[图13]图13是显示人源化抗sirpα抗体d13的hh1重链的氨基酸序列(seq id no：13)的图。

581、[图14]图14是显示人源化抗sirpα抗体d13的hh2重链的氨基酸序列(seq id no：14)的图。

582、[图15]图15是显示人源化抗sirpα抗体d13的hl2轻链的氨基酸序列(seq id no：15)的图。

583、[图16]图16是显示人源化抗sirpα抗体d13的hl3轻链的氨基酸序列(seq id no：16)的图。

584、[图17]图17是显示人源化抗sirpα抗体d13的hl4轻链的氨基酸序列(seq id no：17)的图。

585、[图18]图18是显示抗sirpα抗体cd1 3的cdr序列(seq id no：18至23)的图。

586、[图19]图19是显示ose-172抗体重链(ose-172_hg4pro)的氨基酸序列(seq idno：24)及其轻链(ose-172_hk)的氨基酸序列(seq id no：25)的图。

587、[图20]图20是显示kwar23抗体重链(kwar23_hg4pro)的氨基酸序列(seq id no：26)及其轻链(kwar23_hk)的氨基酸序列(seq id no：27)的图。

588、[图21]图21是显示adu-1805抗体重链(adu-1805_hg2)的氨基酸序列(seq id no：28)及其轻链(adu-1805_hk)的氨基酸序列(seq id no：29)的图。

589、[图22]图22是显示5c12抗小鼠sirpα抗体的重链的氨基酸序列(seq id no：30)及其轻链的氨基酸序列(seq id no：31)的图。

590、[图23]图23是显示yw243.55s70抗小鼠人抗pd-l1抗体重链(seq id no：32)及其轻链(seq id no：33)的氨基酸序列的图。

591、[图24]图24包括显示通过化合物(a)在体外icd诱导中释放atp和hmgb1的图。

592、[图25]图25是显示通过化合物(a)在体外icd诱导中在细胞表面上表达钙网蛋白(crt)的图。

593、[图26]图26是显示通过化合物(a)在体外icd诱导中释放hmgb1的图。在图27中所示的研究中，在小鼠中接种其中已经诱导icd的小鼠结肠直肠癌细胞。

594、[图27]图27包括显示通过经由化合物(a)的体内icd诱导形成对肿瘤的免疫记忆(接种疫苗效应)的视图。

595、[图28]图28是显示从小鼠中切除的脾脏中的产生ifnγ的脾细胞的数目的图，在图27中所示的研究中已经在所述小鼠中接种小鼠结肠直肠癌细胞。

596、[图29]图29包括显示从小鼠中切除的脾脏中的t细胞群体的分析结果的图，在图27中所示的研究中已经在所述小鼠中接种小鼠结肠直肠癌细胞并向其施用pbs。

597、[图30]图30包括显示从小鼠中切除的脾脏中的t细胞群体的分析结果的图，在图27中所示的研究中已经在所述小鼠中接种小鼠结肠直肠癌细胞。

598、[图31]

599、(图31a)图31a是显示抗sirpα抗体和/或抗体-药物缀合物(1)对人胃癌细胞的adcp活性的图。

600、(图31b)图31b是显示抗sirpα抗体和/或抗体-药物缀合物(2)对人胃癌细胞的adcp活性的图。

601、(图31c)图31c是显示抗sirpα抗体和抗体-药物缀合物(1)对人胃癌细胞的adcp活性以抗sirpα抗体浓度依赖性方式增强的图。

602、(图31d)图31d是显示抗sirpα抗体和抗体-药物缀合物(2)对人胃癌细胞的adcp活性以抗sirpα抗体浓度依赖性方式增强的图。

603、[图32]图32包括显示抗sirpα抗体、抗pd-l1抗体和/或抗体-药物缀合物(1)在其中已经接种表达her2的小鼠乳腺癌细胞的小鼠中的抗肿瘤作用的视图。

604、[图33]图33包括显示抗sirpα抗体和/或抗体-药物缀合物(2)在其中已经接种表达trop2的小鼠结肠直肠癌细胞的小鼠中的抗肿瘤作用的视图。

605、[图34]图34包括显示抗sirpα抗体和/或抗体-药物缀合物(3)在其中已经接种表达her3的小鼠结肠直肠癌细胞的小鼠中的抗肿瘤作用的视图。

606、[实施方案的描述]

607、在下文中，描述用于实施本发明的优选模式。给出下面描述的实施方案仅仅用于举例说明本发明的典型实施方案的一个实例，而非旨在限制本发明的范围。

608、1.抗体-药物缀合物

609、本发明中使用的抗体-药物缀合物是这样的抗体-药物缀合物，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与所述抗体缀合：

610、[式9]

611、

612、其中a代表与抗体的连接位置。

613、在本发明中，所述抗体-药物缀合物中的由接头和药物组成的部分结构被称为“药物-接头”。所述药物-接头与在所述抗体中的链间二硫键位点(重链之间的两个位点，重链和轻链之间的两个位点)形成的硫醇基(thiol group)(换句话说，半胱氨酸残基的硫原子)连接。

614、本发明的药物-接头包括作为拓扑异构酶i抑制剂的依喜替康(iupac名称：(1s,9s)-1-氨基-9-乙基-5-氟-1，2，3，9，12，15-六氢-9-羟基-4-甲基-10h,13h-苯并[de]吡喃并[3′，4′：6，7]吲哚嗪并[1，2-b]喹啉-10，13-二酮，(也表示为化学名：(1s，9s)-1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1h，12h-苯并[de]吡喃并[3′，4′：6,7]吲哚嗪并[1，2-b]喹啉-10，13(9h，15h)-二酮))作为组分。

615、依喜替康是一种具有抗肿瘤效果的喜树碱衍生物，其由下式代表：

616、[式10]

617、

618、本发明中使用的抗体-药物缀合物也可以由下式代表。

619、[式11]

620、

621、其中，所述药物-接头经由硫醚键与抗体缀合。n的含义与所谓的缀合的药物分子的平均数(dar；药物：抗体比)的含义相同，并且指示每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数。

622、在迁移至癌细胞中之后，本发明中使用的抗体-药物缀合物在接头部分处切割，以释放由下式代表的化合物

623、(在下文中被称为化合物(a))：

624、[式12]

625、

626、推测前面提及的化合物是本发明中使用的抗体-药物缀合物的抗肿瘤活性的原始来源，并且已经证实其具有拓扑异构酶i抑制作用(ogitani y.等人，clinical cancerresearch，2016，oct 15；22(20)：5097-5108，epub 2016mar 29.)。

627、拓扑异构酶i是一种这样的酶，其切割dna单链并重新连接切割的片段，由此变换dna的高阶结构以参与dna合成。因此，具有拓扑异构酶i抑制作用的药物在细胞周期的s期(dna合成期)期间抑制dna合成以终止细胞分裂，并诱导细胞凋亡(细胞死亡)以抑制癌细胞增殖。

628、还已知本发明中使用的抗体-药物缀合物具有旁观者作用(ogitani y.等人，cancer science(2016)107，1039-1046)。

629、通过一种方法发挥旁观者作用，使得本发明中使用的抗体-药物缀合物在表达靶标的癌细胞中内化，且前面提及的化合物被释放，然后也对存在于其周围且不表达靶标的癌细胞发挥抗肿瘤效果。

630、当根据本发明的抗体-药物缀合物与抗sirpα抗体组合使用时，旁观者作用也被发挥为优异的抗肿瘤效果。

631、2.抗体-药物缀合物中的抗体

632、本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体可以源自任何物种，并且优选是源自人、大鼠、小鼠或兔的抗体。在当抗体源自人物种以外的物种的情况下，其优选使用众所周知的技术进行嵌合或人源化。本发明的抗体可以是多克隆抗体或单克隆抗体，并且优选为单克隆抗体。

633、本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体是优选具有能够靶向癌细胞的特征的抗体，且优选为具有例如识别癌细胞的特性、结合癌细胞的特性、内化于癌细胞中的特性和/或针对癌细胞的杀细胞活性的抗体。

634、可以使用流式细胞术证实抗体针对癌细胞的结合活性。抗体至肿瘤细胞中的内化可以使用如下证实：(1)使用结合治疗性抗体的二抗(荧光标记的)在荧光显微镜下显现掺入细胞中的抗体的测定法(cell death and differentiation(2008)15，751-761)，(2)使用结合治疗性抗体的二抗(荧光标记的)测量掺入细胞的荧光强度的测定法(molecularbiology of the cell，vol.15，5268-5282，december 2004)，或(3)使用结合治疗性抗体的免疫毒素的mab-zap测定法，其中毒素在掺入细胞后释放以抑制细胞生长(bio techniques28：162-165，january 2000)。作为免疫毒素，可以使用白喉毒素催化结构域和蛋白g的重组复合蛋白。

635、可以通过测定针对细胞生长的抑制活性在体外证实抗体的抗肿瘤活性。例如，培养过表达抗体的靶蛋白的癌细胞系，并将抗体以不同浓度添加至培养系统中以测定针对病灶形成、集落形成和球状体生长的抑制活性。抗肿瘤活性可以例如通过如下在体内证实：将抗体施用于接种高度表达靶蛋白的癌细胞系的裸小鼠，并测定癌细胞中的变化。

636、由于在抗体-药物缀合物中缀合的化合物发挥抗肿瘤效果，所以优选但不是必需的是，抗体本身应当具有抗肿瘤效果。为了特异性和选择性发挥抗肿瘤化合物针对癌细胞的细胞毒性活性的目的，重要且还优选的是，抗体应当具有内化以迁移至癌细胞中的特性。

637、本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体可以通过本领域已知的程序获得。例如，可以使用本领域通常实施的方法获得本发明的抗体，所述方法涉及用抗原多肽免疫动物并收集和纯化体内产生的抗体。抗原的来源不限于人，并且可以用源自非人动物诸如小鼠、大鼠等的抗原免疫动物。在这种情况下，可以测试结合获得的异源抗原的抗体与人抗原的交叉反应性，以筛选适用于人类疾病的抗体。

638、或者，根据本领域已知的方法将产生针对抗原的抗体的抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合(例如，kohler和milstein，nature(1975)256，p.495-497；kennet，r.编，monoclonalantibodies，p.365-367，plenum press，n.y.(1980))以建立杂交瘤，从其中进而可以获得单克隆抗体。

639、可以通过基因工程改造宿主细胞以产生编码抗原蛋白的基因来获得抗原。具体地，制备允许抗原基因的表达的载体并将其转移至宿主细胞中，使得表达基因。可以纯化因此表达的抗原。还可以通过用上述基因工程改造的表达抗原的细胞或表达抗原的细胞系免疫动物的方法获得抗体。

640、本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体优选为通过出于降低对人的异源抗原性的目的而人工修饰获得的重组抗体，诸如嵌合抗体或人源化抗体，或者优选为仅具有源自人的抗体的基因序列的抗体，即人抗体。可以使用已知的方法产生这些抗体。

641、作为嵌合抗体，可以例举其中抗体可变区和恒定区源自不同物种的抗体，例如，其中小鼠或大鼠来源的抗体可变区与人来源的抗体恒定区连接的嵌合抗体(proc.natl.acad.sci.usa，81，6851-6855，(1984))。

642、作为人源化抗体，可以例举通过仅将异源抗体的互补决定区(cdr)整合至人来源的抗体中获得的抗体(nature(1986)321，pp.522-525)，通过经由cdr移植方法将异源抗体的框架的氨基酸残基的部分以及异源抗体的cdr序列移植至人抗体而获得的抗体(wo 90/07861)，以及使用基因转化诱变策略人源化的抗体(us专利号5821337)。

643、作为人抗体，可以例举通过使用具有包括人抗体的重链和轻链的基因的人染色体片段的产生人抗体的小鼠生成的抗体(参见tomizuka，k.等人，nature genetics(1997)16，p.133-143；kuroiwa，y.等人，nucl.acids res.(1998)26，p.3447-3448；yoshida，h等人，animal cell technology：basic and applied aspects vol.10，p.69-73(kitagawa，y.，matsuda，t.和iijima，s.编)，kluwer academic publishers，1999；tomizuka，k.等人，proc.natl.acad.sci.usa(2000)97，p.722-727，等)。作为替代方案，可以例举通过噬菌体展示获得的抗体，所述抗体选自人抗体文库(参见wormstone，i.m.等人，investigativeophthalmology&visual science.(2002)43(7)，p.2301-2308；carmen，s.等人，briefingsin functional genomics and proteomics(2002)，1(2)，p.189-203；siriwardena，d.等人，ophthalmology(2002)109(3)，p.427-431，等)。

644、在本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体中，还包括抗体的修饰变体。修饰的变体是指通过对根据本发明的抗体进行化学或生物修饰而获得的变体。化学修饰的变体的实例包括包含化学部分连接至氨基酸骨架的变体，包含化学部分连接至n-连接或o-连接的碳水化合物链的变体，等。生物学修饰的变体的实例包括通过翻译后修饰(诸如n-连接或o-连接的糖基化、n-或c-末端加工、脱酰胺、天冬氨酸的异构化或甲硫氨酸的氧化)获得的变体，以及其中通过在原核宿主细胞中表达而将甲硫氨酸残基添加至n末端的变体。进一步，修饰的变体的含义中还包括标记以便使得能够检测或分离根据本发明的抗体或抗原的抗体，例如酶标记的抗体、荧光标记的抗体和亲和标记的抗体。这种根据本发明的抗体的修饰变体可用于提高抗体的稳定性和血液保留，降低其抗原性，检测或分离抗体或抗原，等等。

645、进一步，通过调节与根据本发明的抗体连接的聚糖的修饰(糖基化、去岩藻糖基化等)，可以增强抗体依赖性的细胞的细胞毒性活性。作为用于调节抗体的聚糖的修饰的技术，国际公开号wo 99/54342、国际公开号wo 00/61739、国际公开号wo 02/31140、国际公开号wo 2007/133855和国际公开号wo 2013/120066等是已知的。然而，该技术不限于此。在根据本发明的抗体中，还包括其中调节聚糖的修饰的抗体。

646、已知将在培养的哺乳动物细胞中产生的抗体重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失(journal of chromatography a，705：129-134(1995))，并且还已知将在培养的哺乳动物细胞中产生的抗体重链的羧基末端的两个氨基酸残基(甘氨酸和赖氨酸)缺失并将新位于羧基末端的脯氨酸残基酰胺化(analytical biochemistry，360：75-83(2007))。然而，重链序列的这种缺失和修饰不影响抗体的抗原结合亲和力和效应子功能(补体活化，抗体依赖性细胞毒性等)。因此，在根据本发明的抗体中，还包括经受这种修饰的抗体和该抗体的功能片段，并且还包括其中在重链的羧基末端已缺失一个或两个氨基酸的缺失变体、具有酰胺化残基的缺失变体(例如，其中羧基末端脯氨酸残基已被酰胺化的重链)等。在根据本发明的抗体重链的羧基末端具有缺失的缺失变体的类型不限于上述变体，只要抗原结合亲和力和效应子功能是保守的。构成根据本发明的抗体的两条重链可以是选自全长重链和上述缺失变体的一种类型，或者可以是选自其中的两种类型的组合。每种缺失变体的量的比率可以受产生根据本发明的抗体的培养的哺乳动物细胞的类型和培养条件的影响；然而，可以优选例举其中在根据本发明的抗体中的两条重链的两者中已缺失在羧基末端的一个氨基酸残基的抗体。

647、作为根据本发明的抗体的同种型，例如，可以例举igg(igg1、igg2、igg3、igg4)，并且，可以优选地例举igg1或igg2。

648、本发明中使用的抗体-药物缀合物中的抗体的实例可以包括但不特别限于抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗cd3抗体、抗cd30抗体、抗cd33抗体、抗cd37抗体、抗cd56抗体、抗cd98抗体、抗dr5抗体、抗egfr抗体、抗epha2抗体、抗fgfr2抗体、抗fgfr4抗体、抗folr1抗体、抗vegf抗体、抗cd20抗体、抗cd22抗体、抗cd70抗体、抗psma抗体、抗cea抗体、抗间皮素抗体、抗a33抗体、抗canag抗体、抗cripto抗体、抗g250抗体、抗muc1抗体、抗gpnmb抗体、抗整联蛋白抗体、抗腱生蛋白-c抗体、抗slc44a4抗体、抗gpr20抗体和抗cdh6抗体，并且可以优选地例举抗her2抗体、抗her3抗体、抗trop2抗体、抗b7-h3抗体、抗gpr20抗体和抗cdh6抗体。

649、在本发明中，术语“抗her2抗体”是指特异性结合her2(人表皮生长因子受体2型；erbb-2)并且优选具有通过结合her2而在表达her2的细胞中内化的活性的抗体。

650、抗her2抗体的实例包括曲妥珠单抗(美国专利号5821337)和帕妥珠单抗(国际公开号wo 01/00245)，并且可以优选地例举曲妥珠单抗。

651、在本发明中，术语“抗her3抗体”是指特异性结合her3(人表皮生长因子受体3型；erbb-3)并且优选具有通过结合her3而在表达her3的细胞中内化的活性的抗体。

652、抗her3抗体的实例包括patritumab(u3-1287)、u1-59(国际公开号wo 2007/077028)、mm-121(seribantumab)、国际公开号wo 2008/100624中描述的抗erbb3抗体、rg-7116(lumretuzumab)和ljm-716(elgemtumab)，并且可以优选地例举patritumab和u1-59。

653、在本发明中，术语“抗trop2抗体”是指特异性结合trop2(tacstd2：肿瘤相关的钙信号转导物2；egp-1)并且优选具有通过结合trop2而在表达trop2的细胞中内化的活性的抗体。

654、抗trop2抗体的实例包括htina1-h1l1(国际公开号wo 2015/098099)。

655、在本发明中，术语“抗b7-h3抗体”是指特异性结合b7-h3(b细胞抗原#7同源物3；pd-l3；cd276)并且优选具有通过结合b7-h3而在表达b7-h3的细胞中内化的活性的抗体。

656、抗b7-h3抗体的实例包括m30-h1-l4(国际公开号wo2014/057687)。

657、在本发明中，术语“抗gpr20抗体”是指特异性结合gpr20(g蛋白偶联受体20)且优选具有通过结合gpr20而在表达gpr20的细胞中内化的活性的抗体。

658、所述抗gpr20抗体的实例包括h046-h4e/l7(国际公开号wo 2018/135501)。

659、在本发明中，术语“抗cdh6抗体”是指特异性结合cdh6(钙粘蛋白-6)且优选具有通过结合cdh6而在表达cdh6的细胞中内化的活性的抗体。

660、所述抗cdh6抗体的实例包括h01l02(国际公开号wo 2018/212136)。

661、3.抗体-药物缀合物的产生

662、用于产生根据本发明的抗体-药物缀合物的药物-接头中间体由下式代表。

663、[式13]

664、

665、所述药物-接头中间体可以表示为化学名n-[6-(2，5-二氧代-2，5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]甘氨酰基甘氨酰基-l-苯丙氨酰基-n-[(2-{[(1s，9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10，13-二氧代-2,3，9，10，13，15-六氢-1h，12h-苯并[de]吡喃并[3′，4′：6，7]吲哚嗪并[1，2-b]喹啉-1-基]氨基}-2-氧代乙氧基)甲基]甘氨酰胺，并且可参考国际公开号wo2014/057687、国际公开号wo 2015/098099、国际公开号wo 2015/115091、国际公开号wo2015/155998和国际公开号wo 2019/044947的描述来产生。

666、本发明中使用的抗体-药物缀合物可以通过使上述药物-接头中间体和具有硫醇基(或者称为巯基)的抗体反应来产生。

667、具有巯基的抗体可通过本领域中众所周知的方法获得(hermanson，g.t，bioconjugate techniques，pp.56-136，pp.456-493，academic press(1996))。例如，在抗体内每个链间二硫化物使用0.3至3摩尔当量的还原剂诸如三(2-羧乙基)膦盐酸盐(tcep)并在含有螯合剂诸如乙二胺四乙酸(edta)的缓冲溶液中与抗体反应，可以获得在抗体内具有巯基的抗体，所述巯基具有部分或完全还原的链间二硫化物。

668、进一步，通过每个具有巯基的抗体使用2至20摩尔当量的药物-接头中间体，可以产生其中每个抗体分子缀合2至8个药物分子的抗体-药物缀合物。

669、产生的抗体-药物缀合物的每个抗体分子缀合的药物分子的平均数可以例如通过如下来测定：基于抗体-药物缀合物及其缀合前体在280nm和370nm的两个波长下的uv吸光度的测量值的计算方法(uv方法)，或基于对通过用还原剂处理抗体-药物缀合物获得的片段的hplc测量值定量的计算方法(hplc方法)。

670、抗体和药物-接头中间体之间的缀合和抗体-药物缀合物的每个抗体分子缀合的药物分子的平均数的计算可以参考国际公开号wo 2014/057687、国际公开号wo 2015/098099、国际公开号wo 2015/115091、国际公开号wo 2015/155998、国际公开号wo 2018/135501和国际公开号wo 2018/212136等等中的描述来进行。

671、在本发明中，“抗her2抗体-药物缀合物”代表这样的抗体-药物缀合物，其中根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗her2抗体。

672、所述抗her2抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含：由seq id no：1的氨基酸残基26至33组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：1的氨基酸残基51至58组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：1的氨基酸残基97至109组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链包含：由seq id no：2的氨基酸残基27至32组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：2的氨基酸残基50至52组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq idno：2的氨基酸残基89至97组成的氨基酸序列组成的cdrl3，并且更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：1的氨基酸残基1至120组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：2的氨基酸残基1至107组成的氨基酸序列组成的轻链可变区，且甚至更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成；或包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1代表的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2代表的氨基酸序列组成。

673、抗her2抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至8，甚至更优选为7至8，甚至更优选为7.5至8，且甚至更优选为约8。

674、抗her2抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2015/115091等等中的描述来产生。

675、在本发明中，术语“抗her3抗体-药物缀合物”是指这样的抗体-药物缀合物，使得根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗her3抗体。

676、所述抗her3抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由以下组成：由seq idno：3的氨基酸残基26至35组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：3的氨基酸残基50至65组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：3的氨基酸残基98至106组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链由以下组成：由seq id no：4的氨基酸残基24至39组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：4的氨基酸残基56至62组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq id no：4的氨基酸残基95至103组成的氨基酸序列组成的cdrl3；

677、更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：3的氨基酸残基1至117组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：4的氨基酸残基1至113组成的氨基酸序列组成的轻链可变区；且

678、甚至更优选为包含由seq id no：3代表的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：4代表的氨基酸序列组成的轻链的抗体，或其中所述重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失的所述抗体的变体。

679、抗her3抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至8，甚至更优选为7至8，甚至更优选为7.5至8，且甚至更优选为约8。

680、抗her3抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2015/155998等等中的描述来产生。

681、在本发明中，术语“抗trop2抗体-药物缀合物”是指这样的抗体-药物缀合物，使得根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗trop2抗体。

682、所述trop2抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由以下组成：由seq idno：5的氨基酸残基50至54组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：5的氨基酸残基69至85组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：5的氨基酸残基118至129组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链由以下组成：由seq id no：6的氨基酸残基44至54组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：6的氨基酸残基70至76组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq id no：6的氨基酸残基109至117组成的氨基酸序列组成的cdrl3；

683、更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：5的氨基酸残基20至140组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：6的氨基酸残基21至129组成的氨基酸序列组成的轻链可变区；且

684、甚至更优选为包含由seq id no：5的氨基酸残基20至470的氨基酸残基组成的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成的轻链的抗体，或其中所述重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失的所述抗体的变体。

685、抗trop2抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至5，甚至更优选为3.5至4.5，且甚至更优选为约4。

686、抗trop2抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2015/098099等等中的描述来产生。

687、在本发明中，术语“抗b7-h3抗体-药物缀合物”是指这样的抗体-药物缀合物，使得根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗b7-h3抗体。

688、所述b7-h3抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由以下组成：由seq idno：7的氨基酸残基50至54组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：7的氨基酸残基69至85组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：7的氨基酸残基118至130组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链由以下组成：由seq id no：8的氨基酸残基44至53组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：8的氨基酸残基69至75组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq id no：8的氨基酸残基108至116组成的氨基酸序列组成的cdrl3；

689、更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：7的氨基酸残基20至141组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：8的氨基酸残基21至128组成的氨基酸序列组成的轻链可变区；且

690、甚至更优选为包含由seq id no：7的氨基酸残基20至471的氨基酸残基组成的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：8的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成的轻链的抗体，或其中所述重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失的所述抗体的变体。

691、抗b7-h3抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至5，甚至更优选为3.5至4.5，且甚至更优选为约4。

692、本发明中使用的抗b7-h3抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2014/057687等等中的描述来产生。

693、在本发明中，术语“抗gpr20抗体-药物缀合物”是指抗体-药物缀合物，使得根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗gpr20抗体。

694、所述gpr20抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由以下组成：由seq idno：9的氨基酸残基45至54组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：9的氨基酸残基69至78组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：9的氨基酸残基118至131组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链由以下组成：由seq id no：10的氨基酸残基44至54组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：10的氨基酸残基70至76组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq id no：10的氨基酸残基109至117组成的氨基酸序列组成的cdrl3；

695、更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：9的氨基酸残基20至142组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：10的氨基酸残基21至129组成的氨基酸序列组成的轻链可变区；且

696、甚至更优选为包含由seq id no：9的氨基酸残基20至472的氨基酸残基组成的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：10的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成的轻链的抗体，或其中所述重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失的所述抗体的变体。

697、抗gpr20抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至8，甚至更优选为7至8，甚至更优选为7.5至8，且甚至更优选为约8。

698、抗gpr20抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2018/135501等等中的描述来产生。

699、在本发明中，术语″抗cdh6抗体-药物缀合物″是指抗体-药物缀合物，使得根据本发明的抗体-药物缀合物中的抗体是抗cdh6抗体。

700、所述cdh6抗体优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链由以下组成：由seq idno：11的氨基酸残基45至54组成的氨基酸序列组成的cdrh1，由seq no：11的氨基酸残基69至78组成的氨基酸序列组成的cdrh2，和由seq id no：11的氨基酸残基118至130组成的氨基酸序列组成的cdrh3，且所述轻链包含：由seq id no：12的氨基酸残基44至54组成的氨基酸序列组成的cdrl1，由seq id no：12的氨基酸残基70至76组成的氨基酸序列组成的cdrl2，和由seq id no：12的氨基酸残基109至116组成的氨基酸序列组成的cdrl3；

701、更优选为包含重链和轻链的抗体，所述重链包含由seq id no：11的氨基酸残基20至141组成的氨基酸序列组成的重链可变区，且所述轻链包含由seq id no：12的氨基酸残基21至128组成的氨基酸序列组成的轻链可变区；且

702、甚至更优选为包含由seq id no：11的氨基酸残基20至471组成的氨基酸序列组成的重链和由seq id no：12的氨基酸残基21至233组成的氨基酸序列组成的轻链的抗体，或其中所述重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失的所述抗体的变体。

703、所述抗cdh6抗体-药物缀合物中每个抗体分子缀合的药物-接头的单元的平均数优选为2至8，更优选为3至8，甚至更优选为7至8，甚至更优选为7.5至8，且甚至更优选为约8。

704、所述抗cdh6抗体-药物缀合物可以参考国际公开号wo 2018/212136等等中的描述来产生。

705、4.抗sirpα抗体

706、sirpα(信号调节蛋白α)是属于骨髓细胞诸如巨噬细胞、树突细胞和中性粒细胞和神经胶质细胞中存在的ig超家族的单跨膜分子。其细胞外区域由单个igv结构域和两个igc结构域组成。据报道，其中存在与cd47的连接位置的igv结构域在人类中具有10种变体v1至v10。sirpα蛋白的细胞外igv结构域是构成sirpα蛋白的三个细胞外ig样结构域之一。在所述结构域中，v1和v2是主要变体。本发明的抗sirpα抗体结合所有变体，包括主要变体v1和v2。在本发明中，“sirpα”有时将被称为“sirpa”。

707、人sirpα蛋白的氨基酸序列公开于genbank登录号：np_001035111中。

708、本发明中使用的抗sirpα抗体可以与如“2.抗体-药物缀合物中的抗体”描述的相同的方式获得。

709、本发明中使用的单克隆抗体可以通过如下获得：以用作免疫原的sirpα或其片段免疫哺乳动物、诸如小鼠、大鼠、兔、仓鼠、豚鼠、马、猴、狗、猪、牛、山羊或绵羊，将脾细胞和骨髓瘤细胞融合以获得杂交瘤并允许杂交瘤产生和分泌抗体。杂交瘤可以通过本领域中已知的方法产生。

710、充当免疫原的sirpα可以基于序列信息化学合成，或者可以作为重组蛋白获得，其基于编码蛋白的dna序列并根据本领域中已知的方法产生。

711、所述抗体可以以任何方法筛选；优选地，通过使用用编码sirpα的dna转染的动物细胞的细胞-elisa。

712、本发明中使用的抗sirpα抗体抑制sirpα和cd47之间的结合。

713、肿瘤细胞高度表达cd47。当在具有吞噬活性的吞噬细胞上表达的sirpα结合cd47并且它们相互作用时，“别吃我”信号被传递至吞噬细胞。以该方式，肿瘤细胞从吞噬细胞的吞噬作用逃逸。抗sirpα抗体抑制sirpα和cd47之间的结合，由此抑制“别吃我”信号从肿瘤细胞传递至吞噬细胞，由此增强吞噬细胞的吞噬作用以吞噬肿瘤细胞。作为结果，可以施加抗肿瘤效应。具有吞噬活性的吞噬细胞的实例包括巨噬细胞，诸如m1和m2巨噬细胞以及树突状细胞，诸如未成熟的树突细胞(imdc)。

714、在这种情况下，当具有效应功能的抗sirpα抗体结合fc受体(诸如效应细胞、诸如吞噬细胞(例如巨噬细胞)、天然杀伤细胞和t细胞的fcγ受体)时，抗sirpα抗体由于adcc(抗体依赖性细胞毒性)和adcp(抗体依赖性细胞吞噬作用)而攻击自体效应细胞、诸如pbmc(外周血单核细胞)和巨噬细胞。

715、为了避免攻击自体细胞，本发明中使用的抗sirpα抗体的效应功能降低。作为结果，本发明中使用的抗sirpα抗体仅具有抑制sirpα和cd47之间的结合的功能，并且不结合效应细胞的fc受体；也就是说，没有产生效应功能。

716、本发明中使用的抗sirpα抗体，由于其不攻击自体免疫细胞，因此可以安全地用作无副作用的药物。

717、然而，本发明中使用的抗sirpα抗体，由于其效应功能降低，所以如果其单独使用，则不产生足够的抗肿瘤效果。因此，抗sirpα抗体与另一种抗肿瘤剂组合使用。

718、为了降低效应功能，抗sirpα抗体的fc部分必需不结合巨噬细胞和t细胞的fc受体。由于该原因，本发明中使用的抗sirpα抗体的亚类被衍生自igg4的亚类替代。通常，在人igg亚类中，igg4已知为效应功能(诸如adcc活性、cdc活性和/或adcp活性)低的亚类(bruggemann等人，j.exp.med.，1351-1361，1987)。当使用治疗性抗体用于靶向健康器官中表达的分子(例如opdivo)时，igg4被用作用于避免由于经由效应功能的细胞损伤而导致的毒性的igg形式之一。注意，igg4亚类的效应功能低，但不是零。然后，在本发明中使用的抗sirpα抗体中，将突变、诸如可以进一步降低效应功能的突变，更具体地，突变、诸如用至少一个用于降低adcc和/或adcp活性的氨基酸的取代，引入重链恒定区。这种突变的实例包括根据kabat等人(kabat等人，sequences of proteins of immunological interest，1991第五版)的eu指数的在位置234用丙氨酸取代苯丙氨酸(f234a)以及在位置235用丙氨酸代替亮氨酸(l235a)(parekh等人，mabs，310-318，2012)。这种抗体的突变是指fala突变。

719、在igg4中，不会稳定形成抗体重链之间的s-s键。为了改进稳定性，引入用于促进抗体重链之间的s-s键的突变。该突变的实例包括根据kabat等人(angal等人，molecularimmunology，105-108，1993)的eu指数在位置228用脯氨酸取代丝氨酸(s228p)。抗体的突变被称为pro突变。

720、在本发明中使用的抗sirpα抗体的恒定区中，可以同时引入上述fala突变和pro突变(vafa等人，methods，65，114-126，2014)。具有fala突变和pro突变的igg4重链被称为“igg4profala”重链、“igg4pfala”重链或“igg4pf”重链。

721、在人igg亚类中，人igg1具有非常强的效应功能，诸如经由补体结合的cdc活性和抗体依赖性的细胞性细胞毒性活性(bruggemann等人，j.exp.med.，1351-1361，1987)，并且当使用治疗性抗体用于靶向癌症中高度表达的分子(例如曲妥珠单抗、利妥昔单抗)时，用作通过由于经由效应功能的细胞损伤而促进癌细胞的细胞死亡来发挥治疗作用的igg形式。当igg1用作本发明中使用的抗sirpα抗体的同种型时，可以通过取代恒定区的部分氨基酸残基来控制效应功能(参见，wo 88/007089、wo 94/28027、wo 94/29351)。效应功能减弱的igg1突变体的实例包括igg1 lala(igg1-l234a，l235a)和igg1 laga(igg1-l235a，g237a)。作为本发明中使用的抗sirpα抗体的恒定区，可以使用其中引入这些突变的igg1重链恒定区。

722、在人igg亚类中，人igg2具有非常弱的效应功能，诸如经由补体结合的cdc活性和抗体依赖性的细胞性细胞毒性活性(bruggemann等人，j.exp.med.，1351-1361，1987)，并且当使用治疗性抗体用于靶向健康器官中表达的分子(例如地诺单抗、依洛尤单抗、brodalumab)时，用作由于经由效应功能的细胞损伤而避免毒性的igg形式之一。作为本发明中使用的抗sirpα抗体的恒定区，可以使用igg2重链恒定区。

723、在本发明中使用的抗sirpα抗体中，还包括抗体的修饰变体。修饰变体是指通过对本发明中待使用的抗sirpα抗体进行化学或生物修饰而获得的变体。化学修饰变体的实例包括具有化学部分与氨基酸骨架的连接的变体，具有化学部分与n-连接或o-连接的碳水化合物链的连接的变体。生物修饰变体的实例包括通过翻译后修饰(诸如n-连接或o连接的糖基化，n-或c-末端加工，脱酰胺，天冬氨酸的异构化或甲硫氨酸的氧化)获得的变体以及其中已经通过使用原核宿主细胞表达将甲硫氨酸残基添加至n末端的变体。此外，经标记以便使得能够检测或分离本发明中使用的抗sirpα抗体或抗原的抗体，例如，酶标记的抗体，荧光标记的抗体以及亲和力标记的抗体，也包括在修饰变体的含义中。本发明中使用的抗sirpα抗体的这种修饰变体可用于，例如改进抗体的稳定性和血液保留，降低其抗原性，检测或分离抗体或抗原。

724、注意，已知在培养的哺乳动物细胞中产生的抗体的重链的羧基末端处的赖氨酸残基缺失(journal of chromatography a，705：129-134(1995))。还已知，在培养的哺乳动物细胞中产生的抗体的重链的羧基末端的两个氨基酸残基(甘氨酸和赖氨酸)缺失，并且新位于羧基末端的脯氨酸残基被酰胺化(analytical biochemistry，360：75-83(2007))。然而，重链序列的这种缺失和修饰不影响抗体的抗原-结合亲和力和效应功能(例如，补体的激活，抗体-依赖性细胞性细胞毒性)。因此，在本发明中使用的抗sirpα抗体中，还包括经历这种修饰的抗体及其功能片段，并且还包括其中在重链的羧基末端已经缺失一个或两个氨基酸的缺失变体，具有酰胺化残基的缺失变体(例如，其中羧基末端脯氨酸残基已经被酰胺化的重链)。注意，本发明中使用的抗sirpα抗体的重链的羧基末端处具有缺失的缺失变体的类型不限于上述变体，只要抗原-结合亲和力和效应功能是保守的。构成本发明中使用的抗sirpα抗体的两条重链可以是选自全长重链和上述具有缺失的重链，或者可以是选自其的组合的两种类型。每种缺失变体的量的比率可能受到产生本发明中使用的抗sirpα抗体的培养哺乳动物细胞的类型和培养条件影响；然而，可以优选地例举本发明中使用的抗sirpα抗体中的两条重链两者中已经缺失羧基末端的一个氨基酸残基的抗体。

725、本发明中使用的抗sirpα抗体包括经修饰以降低对人类的异质抗原性的嵌合抗体和人源化抗体。人源化抗体也被称为cdr移植抗体。

726、嵌合抗体是指由非人类动物的抗体的轻链可变区和重链可变区以及人类抗体的轻链恒定区和重链恒定区组成的抗体。嵌合抗体可以通过如下制备：从产生抗sirpα抗体的杂交瘤取编码轻链可变区的cdna和编码重链可变区的cdna，并将cdna插入具有编码人类抗体的轻链恒定区和重链恒定区的cdna的表达载体中以构建嵌合抗体表达载体，将嵌合抗体表达载体引入宿主细胞并允许表达抗体。

727、重链恒定区由三个结构域ch1、ch2和ch3形成。在本发明中使用的抗sirpα抗体中，嵌合抗体的人类重链恒定区是具有pro突变和fala突变的igg4-亚类重链恒定区，即重链恒定区igg4profala。如果轻链恒定区属于人ig并且是κ或λ恒定区，则其可以是足够的。

728、本发明中使用的抗sirpα抗体的嵌合抗体的实例包括专利文献4(国际公开号wo2020/013170)中所述的具有大鼠抗人sirpα单克隆抗体d13的可变区的嵌合抗体，即抗体cd13。抗体cd13是一种具有结合人类sirpα的高结合活性且针对sirpα和cd47之间的结合具有高抑制活性的抗体。

729、抗体cd13包含：作为轻链可变区的cdr(互补决定区)，由seq id no：21代表的氨基酸序列(gasksvrtymh)组成的cdrl1、由seq id no：22代表的氨基酸序列(sasnlea)组成的cdrl2和由seq id no：23代表的氨基酸序列(qqsneppyt)组成的cdrl3，和进一步，作为重链可变区的cdr，由seq id no：18代表的氨基酸序列(gftfsdygmi)组成的cdrh1、和由seq idno：19代表的氨基酸序列(sisssssyiy)组成的cdrh2、和由seq id no：20代表的氨基酸序列(ryygfnypfdy)组成的cdrh3(图18)。

730、更具体地，本发明中使用的抗sirpα抗体是这样的抗体，其包含：由seq id no：21代表的氨基酸序列组成的cdrl1、由seq id no：22代表的氨基酸序列组成的cdrl2和由seqid no：23代表的氨基酸序列组成的cdrl3，和作为重链可变区的cdr，由seq id no：18代表的氨基酸序列组成的cdrh1、由seq id no：19代表的氨基酸序列组成的cdrh2和由seq idno：20代表的氨基酸序列组成的cdrh3。

731、上述cdr包括由在cdr的每个氨基酸序列中具有一个或几个氨基酸、优选一个或两个氨基酸和进一步优选单个氨基酸的缺失、取代和/或添加的氨基酸序列组成的cdr。

732、人源化抗体(cdr-移植抗体)是指通过如下制备的抗体：将非人类动物的抗体的轻链可变区和重链可变区的cdr的氨基酸序列移植至人类抗体的轻链可变区和重链可变区的适当位置。

733、本发明的人源化抗sirpα抗体可以通过如下产生：构建编码可变区的cdna，所述可变区通过将非人动物的抗体的轻链可变区和重链可变区的cdr的氨基酸序列移植至人类抗体的轻链可变区和和重链恒定区的框架(fr)区而获得，所述非人动物的抗体由产生结合人sirpα以抑制sirpα和cd47之间的结合、由此增强巨噬细胞吞噬作用的单克隆抗体的杂交瘤产生；将cdna插入具有编码人类抗体的轻链恒定区和重链恒定区的基因的动物细胞表达载体，以构建人源化抗体表达载体；将载体引入动物细胞；和表达cdna。

734、更具体地，可以合成经设计以使得抗体cd13的cdr与人类抗体的框架区连接的dna序列。选择待经由cdr连接的人类抗体框架区，使得cdr形成令人满意的抗原连接位置。如果必要，可以取代抗体的可变区中框架区的氨基酸，使得人源化抗体的cdr形成适当的抗原连接位置。可以通过根据本领域中已知的cdr嫁接技术移植cdr来制备人源化抗体。

735、作为具有抗体cd13的重链和轻链可变区的cdr(由seq id no：18至23代表的氨基酸形成的6个cdr)的人源化抗体的重链(其根据根据上述方法制备且在可变区的框架区中具有部分氨基酸的取代)，可以例举专利文献4(国际公开号wo 2020/013170)中描述的人源化抗体重链hh1和人源化抗体重链hh2。作为具有抗体d13的轻链可变区的cdr且在可变区的框架区中具有部分氨基酸的取代的人源化抗体的轻链，可以例举专利文献4(国际公开号wo2020/013170)中描述的人源化抗体轻链hl2、人源化抗体轻链hl3和人源化抗体轻链hl4。

736、人源化抗体重链hh1的全长氨基酸序列由seq id no：13代表。人源化抗体重链hh2的全长氨基酸序列由seq id no：14代表。在seq id no：13和14，由第1至19个氨基酸残基组成的氨基酸序列是信号序列的氨基酸序列；由第20至139个氨基酸残基组成的氨基酸序列是可变区的氨基酸序列；且由第140至466个氨基酸残基组成的氨基酸序列是恒定区的氨基酸序列。

737、本发明中使用的抗sirpα抗体包括具有重链可变区和重链恒定区的抗体，所述重链可变区由seq id no：13或14的第20至139个氨基酸残基组成，且所述重链恒定区由其第140至466个氨基酸残基组成。

738、人源化抗体轻链hl2的全长氨基酸序列由seq id no：15代表。人源化抗体轻链hl3的全长氨基酸序列由seq id no：16代表。人源化抗体轻链hl4的全长氨基酸序列由seq idno：17代表。在seq id no：15、16和17中，由第1至20个氨基酸残基组成的氨基酸序列是信号序列的氨基酸序列；由第21至127个氨基酸残基组成的氨基酸序列是可变区的氨基酸序列；且由第128至234个氨基酸残基组成的氨基酸序列是恒定区的氨基酸序列。

739、本发明中使用的抗sirpα抗体包括具有轻链可变区和轻链恒定区的抗体，所述轻链可变区由seq id no：15、16或17的第21至127个氨基酸残基组成，且所述轻链恒定区由其第128至234个氨基酸残基组成。

740、人源化抗体的重链恒定区是igg4亚类的重链恒定区，更具体地，具有pro突变和fala突变的重链恒定区igg4profala。

741、具有对人sirpα的高结合活性和针对sirpα和cd47之间的结合的高抑制活性的抗体的实例包括由人源化抗体重链hh1和人源化抗体轻链hl3组成的抗体(hd13_h1l3抗体)；由人源化抗体重链hh1和人源化抗体轻链hl4组成的抗体(hd13_h1l4抗体)；由人源化抗体重链hh2和人源化抗体轻链hl2组成的抗体(hd13_h2l2抗体)；和由人源化抗体重链hh2和人源化抗体轻链hl3组成的抗体(hd13_h2l3抗体)。

742、hd13_h1l3抗体是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的第20至466个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：16的第21至234个氨基酸残基组成。

743、hd13_h1l4抗体是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：13的第20至466个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：17的第21至234个氨基酸残基组成。

744、hd13_h2l2抗体是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的第20至466个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：15的第21至234个氨基酸残基组成。

745、hd13_h2l3抗体是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：14的第20至466个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：16的第21至234个氨基酸残基组成。

746、作为本发明中使用的其他抗sirpα抗体，可以例举专利文献1至3中描述的抗体。

747、作为专利文献1(国际公开号wo 2017/178653)中描述的抗体之一，可以例举ose-172。ose-172的重链氨基酸序列显示于序列表的seq id no：24中；而ose-172的轻链氨基酸序列显示于seq id no：25中。ose-172是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：24的第20至466个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：25的第21至239个氨基酸残基组成。

748、作为专利文献2(国际公开号wo 2018/026600)中描述的抗体之一，可以例举kwar23。kwar23的重链氨基酸序列显示于seq id no：26中；而kwar23的轻链氨基酸序列显示于seq id no：27中。kwar23是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：26的第20至459个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：27的第21至235个氨基酸残基组成。

749、作为专利文献3(国际公开号wo 2018/190719)中描述的抗体之一，可以例举adu-1805。adu-1805的重链氨基酸序列显示于seq id no：28中；而adu-1805的轻链氨基酸序列显示于seq id no：29中。adu-1805是具有重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：28的第20至467个氨基酸残基组成，且所述轻链由seq id no：29的第21至234个氨基酸残基组成。

750、注意，在培养的哺乳动物细胞中产生的抗体中，已知缺失重链的羧基末端的赖氨酸残基(tsubaki等人，int.j.biol.macromol，139-147，2013)。然而，重链序列的缺失不影响抗体的抗原-结合亲和力和效应功能(例如，补体的活化和抗体依赖性的细胞性细胞毒性)。因此，在本发明中，包括在重链的羧基末端缺乏赖氨酸残基的抗体。

751、本发明中使用的癌症治疗剂可以含有治疗有效量的抗sirpα抗体和药学上可接受的载体、稀释剂、增溶剂、乳化剂、防腐剂、助剂等。可以根据目标疾病的类型和药物的剂型从广泛范围适当地选择“药学上可接受的载体”等。可以适当地选择用于施用根据本发明的抗肿瘤剂的方法，例如，可以选择通过注射施用。可以采用的注射的实例包括局部注射、腹膜内注射、选择性静脉内注射、静脉内注射、皮下注射和器官灌注注射。可以通过使用由盐溶液、葡萄糖溶液或盐溶液和葡萄糖溶液的混合物以及各种缓冲液组成的载体来配制注射溶液。或者，可以通过配制粉末制品并在使用时将粉末制品与上述液体载体混合来制备注射溶液。

752、可以适当地选择其他施用方法，连同制剂的开发。例如，对于口服施用，可以应用口服液体、粉末、药丸、胶囊和片剂。在口服液体的情况下，可以通过使用水；糖、诸如蔗糖、山梨糖醇和果糖；乙二醇、诸如聚乙二醇；油、诸如芝麻油和大豆油；防腐剂、诸如对羟基苯甲酸烷基酯；和香料、诸如草莓香料和薄荷香料产生口服液体制品、诸如悬浮液和糖浆。可以通过使用例如赋形剂、诸如乳糖、葡萄糖、蔗糖和甘露醇；崩解剂、诸如淀粉和苏打海藻酸盐；润滑剂、诸如硬脂酸镁和滑石粉；粘合剂、诸如聚乙烯醇、羟丙基纤维素和明胶；表面活性剂、诸如脂肪酸酯；和增塑剂、诸如甘油来配制粉末、药丸、胶囊和片剂。可以容易地施用片剂和胶囊。在这方面，它们是本发明组合物的优选单位剂量。在生产片剂和胶囊时，使用固体生产载体。

753、5.免疫原性细胞死亡和抗sirpα抗体之间的关系

754、免疫原性细胞死亡(icd)是特征在于细胞内分子(诸如atp和hmgb1(高迁移率组box1蛋白)的大量释放和细胞表面上钙网蛋白(crt)的暴露的细胞死亡。这些是活化免疫细胞的危险信号。据报道，atp负责募集和活化树突细胞(dc)和巨噬细胞；hmgb1负责增强炎性细胞因子(诸如i型ifn)的产生；并且crt充当“吃我信号”，并增强来自死细胞的抗原摄取(nature reviews immunology.2017，17，97-111)。简而言之，当发生癌细胞的icd时，可以诱导针对癌细胞的免疫(抗肿瘤免疫)。作为诱导icd的抗癌剂，例如蒽环类药物、奥沙利铂和环磷酰胺是已知的；然而，例如，多西他赛和丝裂霉素c未被证实诱导icd。icd效应的存在或不存在不仅可以基于是否通过添加药剂检测到危险信号而在体外评估，而且可以基于接种疫苗测定法而在体内评估。在后一种情况中，癌细胞用药剂处理并在免疫活性的小鼠中接种。一周后，将未用药剂处理的癌细胞接种至另一侧。此时，如果癌细胞已经形成免疫记忆(其引起icd)，接种的癌细胞的植入和增殖被抑制(cancer research，2017，77，2686-2698)。

755、为了通过icd形成免疫记忆，对髓样细胞(诸如树突细胞和巨噬细胞)摄取癌抗原是重要的。此时，假定sirpα-cd47在髓样细胞和癌细胞之间传递“别吃我信号”。如果施用抗sirpα抗体，则可以抑制信号传递并增强吞噬作用。作为结果，可以增强癌抗原的摄取。树突细胞和/或巨噬细胞摄取的癌抗原被细胞内处理成8-30聚体肽片段，其被呈递在mhc上。mhc具有两种类别，i类和ii类。呈递至mhc-i类的约9聚体抗原肽活化cd8+t细胞；而呈递至mhc-ii类的约15聚体抗原肽活化cd4+t。通常，外来抗原在髓样细胞中处理并呈递至mhc-ii类；然而，部分dc子集将外来抗原呈递至mhc-i类，并活化对癌细胞发挥细胞毒性活性的cd8+t；简而言之，部分dc子集具有交叉呈递能力。

756、dc具有cdc1和cdc2的子集。cdc1是sirpα阴性的，并且具有交叉呈递能力；而cdc2是sirpα阳性的，并且没有交叉呈递能力。近来，已经在科学研讨会上报道，在使用小鼠同系模型的抗肿瘤研究中，通过施用抗sirpα抗体而增加cdc1子集的数目，并且通过将抗sirpα抗体添加至癌细胞与dc和t细胞的共培养系统中而增强对cd8+t细胞的交叉呈递能力。从以上来看，抗sirpα抗体的施用不仅促进癌细胞的吞噬作用和癌抗原的摄取，而且还增强交叉呈递能力，其导致可以增强cd8+t细胞的诱导，所述cd8+t细胞在肿瘤免疫中发挥关键作用。

757、在过去，在其中整合微管蛋白裂解素(tubulysin)、吡咯并苯并二氮杂卓(pbd)和mmae的抗体-药物缀合物的情况下，已经报道了其中整合具有杀细胞活性的药物的抗体-药物缀合物和icd诱导之间的关系(cancer research，2017，77，2686-2698或oncoimmunology，2019，8(4)，e1565859)。关于本发明中使用的含有tpoi抑制剂、化合物(a)作为有效载荷的抗体-药物缀合物，仅报道了hmgb1从用化合物(a)处理的细胞中释放，并且通过接种处理的细胞发挥有限的抗肿瘤效果(clin.invest.2020：130(1)：374-388)。这次，发现了以下内容：1)化合物(a)不仅诱导hmgb1的释放，而且诱导来自死亡中的癌细胞的其他危险信号；2)化合物(a)活化在癌症的微环境下存在的免疫细胞，并增强癌抗原特异性t细胞群体以诱导抗肿瘤免疫；和3)抗sirpα抗体增强化合物(a)诱导的免疫应答。

758、6.药物

759、现在将描述根据本发明的药物组合物和治疗方法，其中组合施用抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体。

760、本发明的药物组合物和治疗方法可以是其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体作为活性组分分别包含在不同的制剂中并且同时或不同时施用的那些，或者可以是其中所述抗体-药物缀合物和所述抗sirpα抗体作为活性组分包含在单一制剂中并施用的那些。

761、本发明的药物组合物和治疗方法可用于治疗癌症，优选用于治疗选自以下的至少一种疾病：乳腺癌、胃癌(也称为胃腺癌)、结肠直肠癌(也称为结肠和直肠癌，并且包括结肠癌和直肠癌)、肺癌(包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、食管癌、头颈癌(包括唾液腺癌和咽癌)、胃食管连接部腺癌、胆道癌(包括胆管癌)、胆囊癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、子宫癌肉瘤、尿路上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、胃肠道基质肿瘤、子宫颈癌、鳞状细胞癌、腹膜癌、肝癌、肝细胞癌、子宫内膜癌、肾癌、外阴癌、甲状腺癌、胸腺癌、阴茎癌、白血病、淋巴癌、恶性淋巴瘤、浆细胞瘤、骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、脑肿瘤、神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、骨肉瘤和黑色素瘤；更优选地用于治疗选自以下的至少一种癌症：乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、食管癌、唾液腺癌、胃食管连接部腺癌、胆道癌、佩吉特氏病、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌和子宫癌肉瘤；并且甚至更优选地用于治疗选自以下的至少一种癌症：脑肿瘤、胃癌、肺癌和卵巢癌。

762、在本发明中使用的抗体-药物缀合物中，可以通过检查癌症和肿瘤标志物的类型来确定抗体-药物缀合物中优选使用的抗体的种类。例如，如果在癌症中发现her2表达，则可以优选使用抗her2抗体-药物缀合物；如果在癌症中发现her3表达，则可以优选使用抗her3抗体-药物缀合物；如果在癌症中发现trop2表达，则可以优选使用抗trop2抗体-药物缀合物；如果在癌症中发现b7-h3表达，则可以优选使用抗b7-h3抗体-药物缀合物；如果在癌症中发现gpr20表达，则可以优选使用抗gpr20抗体-药物缀合物；如果在癌症中发现cdh6表达，则可以优选使用抗cdh6抗体-药物缀合物。

763、her2、her3、trop2、b7-h3、gpr20和cdh6以及其他肿瘤标志物的存在或不存在可以通过例如如下来检查：从癌症患者收集肿瘤组织，并使福尔马林固定石蜡包埋样本(ffpe)进行基因产物(蛋白)水平的检查，诸如免疫组织化学(ihc)方法、流式细胞术、或western印迹方法，或基因翻译水平的检查，诸如原位杂交方法(ish)、定量pcr方法(q-pcr)、或微阵列分析；或者可选地也可以通过如下来检查：从癌症患者收集无细胞血液循环肿瘤dna(ctdna)并对其进行检查，所述检查使用诸如下一代测序(ngs)的方法。

764、本发明的药物组合物和治疗方法可以优选地用于哺乳动物，并且可以更优选地用于人。

765、本发明的药物组合物和治疗方法的抗肿瘤效果可以通过例如如下证实：生成其中将癌细胞接种至测试动物中的模型，和测量由于应用本发明的药物组合物和治疗方法导致的肿瘤体积的减少，延长生命的作用。此外，与本发明中使用的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体各自的单一施用的抗肿瘤效果的比较可以证实本发明中使用的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体的组合作用。

766、另外，本发明的药物组合物和治疗方法的抗肿瘤效果可以在临床研究中用实体瘤应答评估标准(recist)评估方法、who的评估方法、macdonald的评估方法、体重的测量和其他方法来证实；并且可以通过指标、诸如完全应答(cr)、部分应答(pr)、进行性疾病(pd)、客观应答率(orr)、应答持续时间(dor)、无进展存活(pfs)和总体存活(os)来确定。

767、前述方法可以证实本发明的药物组合物和治疗方法与现有的用于癌症疗法的药物组合物和治疗方法相比在抗肿瘤效果方面的优越性。

768、本发明的药物组合物和治疗方法可以延迟癌细胞生长，抑制其增殖，并且进一步可以杀死癌细胞。这些作用可以使癌症患者没有由癌症引起的症状，或者可以实现癌症患者的qol的改善，并通过维持癌症患者的生命来达到治疗效果。即使本发明的药物组合物和治疗方法并不实现癌细胞的杀死，它们也可以通过抑制或控制癌细胞的生长而在实现长期存活的同时实现癌症患者的更高qol。

769、本发明的药物组合物可以通过作为全身疗法应用于患者并且额外通过局部应用于癌组织来发挥治疗效果。

770、可以施用本发明的药物组合物作为含有至少一种药学上合适的成分的药物组合物。药学上合适的成分可以鉴于本发明中使用的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体的剂量、施用浓度等合适地选择并从本领域中通常使用的配制添加剂等应用。例如，本发明中使用的抗体-药物缀合物可以作为含有缓冲剂诸如组氨酸缓冲剂、赋形剂诸如蔗糖或海藻糖和表面活性剂诸如聚山梨酯80或20的药物组合物施用。本发明中使用的含有抗体-药物缀合物的药物组合物优选可以用作注射剂，可以更优选用作水性注射剂或冻干注射剂，并且甚至可以更优选用作冻干注射剂。

771、在本发明中使用的含有抗体-药物缀合物的药物组合物是水性注射剂的情况下，其可以优选地用合适的稀释剂稀释，且然后作为静脉内输注给予。对于稀释剂，可以例举葡萄糖溶液、生理盐水等，并且可以优选地例举葡萄糖溶液，并且可以更优选地例举5％葡萄糖溶液。

772、在本发明中使用的含有抗体-药物缀合物的药物组合物是冻干注射剂的情况下，可以优选将其溶解于注射用水中，随后可以将所需量用合适的稀释剂稀释，且然后作为静脉内输注给予。对于稀释剂，可以例举葡萄糖溶液、生理盐水等，并且可以优选地例举葡萄糖溶液，并且可以更优选地例举5％葡萄糖溶液。

773、可用于施用本发明的药物组合物的施用途径的实例包括静脉内、皮内、皮下、肌肉内和腹膜内途径；并且优选地包括静脉内途径。

774、本发明中使用的抗体-药物缀合物可以以1至180天的间隔向人施用一次，并且可以优选地每周一次、每2周一次、每3周一次或每4周一次施用，并且甚至可以更优选地每3周一次施用。而且，本发明中使用的抗体-药物缀合物可以约0.001至100mg/kg的剂量施用，并且优选可以以0.8至12.4mg/kg的剂量施用。在本发明中使用的抗体-药物缀合物是抗her2抗体-药物缀合物的情况下，其可以优选地以0.8mg/kg、1.6mg/kg、3.2mg/kg、5.4mg/kg、6.4mg/kg、7.4mg/kg或8mg/kg的剂量每3周一次施用。在本发明中使用的抗体-药物缀合物是抗her3抗体-药物缀合物的情况下，其可以优选地以1.6mg/kg、3.2mg/kg、4.8mg/kg、5.6mg/kg、6.4mg/kg、8.0mg/kg、9.6mg/kg或12.8mg/kg的剂量每3周一次施用。在本发明中使用的抗体-药物缀合物是抗trop2抗体-药物缀合物的情况下，其可以优选地以0.27mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、4.0mg/kg、6.0mg/kg、8.0mg/kg或10.0mg/kg的剂量每3周一次施用。根据本发明的抗sirpα抗体可以以1至180天的间隔向人施用一次，并且可以优选地每周一次、每2周一次、每3周一次或每4周一次施用。而且，根据本发明的抗sirpα抗体可以以每剂量约0.001至100mg/kg的剂量施用。

775、本发明的药物组合物和治疗方法可以进一步包含除了根据本发明的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体以外的癌症治疗剂。本发明的药物组合物和治疗方法也可以与另一种癌症治疗剂组合施用，由此增强抗肿瘤效果。可以将待用于这种目的的其他癌症治疗剂与本发明的药物组合物同时、分开或依次施用于受试者，或者可以改变每个剂量间隔来施用。此类癌症治疗剂不受限制，只要它们是具有抗肿瘤活性的药剂即可，并且可以通过选自以下的至少一种来例举：伊立替康(cpt-11)、顺铂、卡铂、奥沙利铂、氟尿嘧啶(5-fu)、吉西他滨、卡培他滨、多柔比星、表柔比星、环磷酰胺、丝裂霉素c、替加氟-吉美拉西-奥替拉西组合、帕尼单抗、贝伐单抗、雷莫芦单抗、瑞戈非尼、三氟尿苷-地匹福林组合、吉非替尼、埃罗替尼、阿法替尼、甲氨蝶呤、培美曲塞、他莫昔芬、托瑞米芬、氟维司群、亮丙瑞林、戈舍瑞林、来曲唑、阿那曲唑、孕酮制剂和拉帕替尼。

776、在本发明的药物组合物和治疗方法中，除了根据本发明的抗体-药物缀合物和抗sirpα抗体外，可以进一步含有免疫检查点抑制剂和特异性结合癌抗原并具有adcc和/或adcp活性的抗体药物作为待组合使用的癌症治疗剂。作为免疫检查点抑制剂，例举pd-1与其配体pd-l1之间的结合的抑制剂或ctla4抑制剂。其具体实例包括抗pd-l1抗体(尼沃单抗、派姆单抗、cemiplimab、spartalizumab、pdr-001或bi 754091)、抗pd-l1抗体(阿特珠单抗、avelumab或durbarumab)和抗ctla4抗体(伊匹单抗或曲美木单抗)。特异性结合癌抗原并具有adcc和/或adcp活性的抗体药物的实例包括抗cd20抗体(利妥昔单抗)、抗her2抗体(曲妥珠单抗或帕妥珠单抗)、抗egfr抗体(西妥昔单抗)和抗cd52抗体(阿仑妥珠单抗)。

777、adcc是指一种细胞介导的反应，其中表达fcγ受体的非特异性细胞毒性细胞(如nk细胞、中性粒细胞和巨噬细胞)识别与靶细胞结合的抗体，且然后引起靶细胞的裂解。在作为负责adcc的原代细胞的nk细胞中，表达fcγriic和fcγriiia。在单核细胞中，表达fcγri、fcγriia、fcγriic和fcγriiia。另一方面，adcp是指细胞介导的反应，其中表达fc受体的吞噬细胞(例如巨噬细胞、中性粒细胞)识别与靶细胞结合的抗体，且然后在细胞内吞噬靶细胞。在作为负责adcp的原代细胞的单核细胞中，表达fcγri、fcγriia、fcγriic和fcγriiia。

778、本发明的药物组合物和治疗方法也可以与放射疗法组合使用。例如，癌症患者在接受用本发明的药物组合物进行的疗法之前和/或之后或同时接受放射疗法。

779、本发明的药物组合物和治疗方法还可以作为辅助化学疗法与手术程序组合使用。本发明的药物组合物可以在手术程序之前施用以用于减小肿瘤大小的目的(称为手术前辅助化学疗法或新辅助疗法)，或者可以在手术程序之后施用以用于预防肿瘤复发的目的(称为手术后辅助化学疗法或辅助疗法)。

780、[实施例]

781、鉴于以下所示的实施例具体描述了本发明。然而，本发明不限于这些。进一步，其决不应以限制的方式进行解释。

782、产生实施例1：抗体-药物缀合物(1)的产生

783、根据国际公开号wo 2015/115091中所述的产生方法并使用人源化抗her2抗体(包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：1的氨基酸残基1至449组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：2的氨基酸残基1至214组成的氨基酸序列组成，在下文中将“被称为人源化抗her2抗体(1)”)，产生抗体-药物缀合物(在下文中被称为“抗体-药物缀合物(1)”)，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与抗her2抗体缀合：

784、[式14]

785、

786、其中a代表与抗体的连接位置。抗体-药物缀合物(1)的dar为7.7或7.8。

787、产生实施例2：抗体-药物缀合物(2)的产生

788、根据国际公开号wo 2015/098099和2017/002776中所述的产生方法并使用人源化抗trop2抗体(包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：5的氨基酸残基20至470组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seq id no：6的氨基酸残基21至234组成的氨基酸序列组成，在下文中将被称为人源化抗trop2抗体(1))，产生抗体-药物缀合物(在下文中被称为“抗体-药物缀合物(2)”)，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与抗trop2抗体缀合：

789、[式15]

790、

791、其中a代表与抗体的连接位置。尽管抗体-药物缀合物(2)的dar可以被控制在0至8的范围内，但本文产生具有3.5至4.5的缀合药物的平均数目的抗体-药物缀合物。

792、产生实施例3：化合物(a)的制备

793、根据国际公开号wo 2014/057687中描述的产生方法，产生由下式代表的化合物(化合物(a))：

794、[式16]

795、

796、产生实施例4：抗小鼠sirpα抗体(克隆：5c12)的制备

797、通过以下方法建立抗小鼠sirpα抗体5c12。对于免疫，使用wky/izm或雌性wister大鼠(japan slc，inc.)。将小鼠sirpα蛋白(由sino biological inc.制造)和弗氏完全佐剂(由wako pure chemical industries，ltd.制造)混合并皮下施用至大鼠的尾根部。取大鼠的淋巴结并用于产生杂交瘤。

798、根据聚乙二醇方法融合淋巴结细胞和小鼠骨髓瘤sp2/0-ag14细胞(atcc：crl-1581)。将融合细胞悬浮于hat选择性培养基中，并根据有限稀释方法进行培养。收集杂交瘤集落。以这种方式，制备单克隆杂交瘤。培养收集的杂交瘤集落。使用所得的杂交瘤培养物上清液，基于与小鼠sirpα蛋白的结合活性作为指数筛选产生抗体的杂交瘤。以这种方式，筛选了克隆：5c12。

799、为了扩增编码5c12的可变区的cdna，通过使用trizol试剂(ambion，inc.)从产生5c12的杂交瘤制备总rna。基于总rna，通过使用smarter race 5′/3′试剂盒(clontech，inc.)扩增编码重链和轻链可变区的cdna。将通过5′-race pcr扩增的编码重链和轻链可变区的cdna克隆至质粒。随后，分析编码重链和轻链可变区的cdna的核苷酸序列。5c12重链和轻链的氨基酸序列分别显示于seq id no：30和31。

800、人sirpα和小鼠sirpα之间的同源性低至60％。据报道，人类在sirpα的igv结构域(这是与cd47的相互作用位点)中具有10种类型的变体；并且由于遗传背景差异，小鼠具有至少4种类型的变体。因此，据推测难以获得与人和小鼠的直系同源物具有交叉反应性的功能抗体，在此可以抑制sirpα-cd47相互作用。实际上，在用人抗原免疫的大鼠中尚未发现对小鼠具有交叉反应性的功能抗体。

801、sirpα是存在于髓样细胞、诸如巨噬细胞和树突细胞中的分子。在直接产生对癌症的抗癌作用的药物的情况下，通常可以通过使用通过将人癌细胞系接种至免疫缺陷小鼠中制备的异种移植模型来评估药物。然而，为了评估在宿主免疫细胞中表达的靶分子如sirpα的抗肿瘤效应，必须采用以下方法中的任何一种：(1)使用通过将具有相容遗传背景的小鼠癌细胞系接种至免疫活性小鼠来制备的模型，和对小鼠sirpα具有交叉反应性的替代抗体；(2)使用通过将人sirpα基因引入免疫缺陷小鼠并向其接种人癌细胞系而制备的模型，和抗人sirpα抗体；(3)使用通过向其中引入sirpα靶基因的免疫活性小鼠中接种具有其中表达人cd47基因的小鼠癌细胞系而制备的小鼠模型，和抗人sirpα抗体。在其中，方法(2)有问题，因为使用t细胞缺陷的免疫缺陷小鼠，因此无法评估当抑制sirpα时对获得的免疫系统(主要通过t细胞的免疫应答)的影响；并且方法(3)有问题，因为花费长时间来制备，并且不容易估计例如sirpα基因表达水平的控制对抗肿瘤效应的影响。另一方面，在使用替代抗体的方法(1)的情况下，可以在一般小鼠模型中进行评估；此外，已经报道，当它在克隆、诸如my-1和p84中与抗癌抗体和免疫检查点抗体组合使用时，获得组合效果(国际公开号wo2017/178653，或yanagita等人，jci insight，2017(2)1，1-15)。由此，在该实验中，获得5c12克隆作为抗小鼠sirpα抗体，并评估抗肿瘤效应。5c12对小鼠sirpα抗原具有高结合亲和力。经证实，该结合亲和力与抗人sirpα抗体hd13_h1l3对人sirpα抗原的结合亲和力的水平相同。注意，通过在非临床药理学研究中使用替代抗体来评估已经销售的多种pd-1抗体，且其后在临床上证实了抗体的作用。从上述可以预期能够将使用抗sirpα替代抗体的免疫评估结果和抗肿瘤研究的评估结果外推至人类中的结果。

802、产生实施例5：人源化抗sirpα抗体(克隆：hd13_h1l3)的制备

803、根据国际公开号wo 2020/013170中描述的产生方法，产生人源化抗sirpα抗体(克隆：hd13_h1l3)。

804、产生实施例6：抗体-药物缀合物(3)的产生

805、根据国际公开号wo 2015/155998中所述的产生方法并使用人源化抗her3抗体(包含重链和轻链的抗体，所述重链由seq id no：3组成的氨基酸序列组成，且所述轻链由seqid no：4组成的氨基酸序列组成，在下文中将“被称为人源化抗her3抗体(1)”)，产生抗体-药物缀合物(在下文中被称为“抗体-药物缀合物(3)”)，其中由下式代表的药物-接头经由硫醚键与抗her3抗体缀合：

806、[式16]

807、

808、其中a代表与抗体的连接位置。抗体-药物缀合物(3)的dar为7.7或7.8。

809、实施例1：icd诱导评估(体外)：培养上清液中atp/hmgb1的测量

810、在用不同化合物处理的癌细胞中，测量充当免疫原性细胞死亡(icd)的指数的atp水平和hmgb1的表达水平。将小鼠结肠直肠癌细胞系ct26.wt的细胞接种在6孔板中，并培养过夜。除去上清液后，用pbs洗涤细胞两次。将化合物(a)溶解于含有10％fbs的rpmi1640培养溶液(r10)中，以制备具有0、1、4和16μm的最终浓度的溶液。作为阳性对照，将米托蒽醌(mtx)溶解于dmso中，并以最终浓度为0.4、1.5和6μm添加。向本文的对照(0μm)中添加dmso，其量与化合物(a)的量相同(r10-dmso)。二十四小时后，收集培养上清液，并测量atp和hmgb1的水平。atp的水平通过如下测量：在96孔白板中添加培养上清液，添加相同量的backtiter-glo(由promega corporation制造)并通过板读取器测定发光量。通过hmgb1elisa-试剂盒(由shino-test corporation制造)根据夹心elisa方法检测hmgb1的水平。在试剂盒中提供的板中，添加测试缓冲液，并且其后，向其中添加用测试缓冲液稀释的hmgb1标准溶液和培养上清液。允许在37℃静置24小时。除去上清液并用pbs/tween 20(200μl/孔)将细胞洗涤五次后，以100μl/孔的量添加试剂盒中提供的二抗溶液。允许在室温下静置2小时。除去上清液后，用pbs/tween 20(200μl/孔)将细胞洗涤五次。其后，以100μl/孔的量添加试剂盒中提供的产色溶液。将板在室温下静置30分钟。添加终止溶液(100μl/孔)并搅拌。通过板读取器测量405nm处的吸光度。根据dunnett氏检验比较对照组和化合物(a)组的结果。p值表示到小数点后4位。满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

811、结果显示于图24a-d中。在mtx处理组中，证实atp的释放最大为对照(0μm)的约4倍；并且在24小时后，在培养上清液中证实hmgb1的释放最大为对照(0μm)的约3倍(p＜0.0001)。另一方面，在化合物(a)处理组中，证实atp和hmgb1的释放最大为r10或r10-dmso的约4.6倍(p＜0.0001)。

812、从以上提出，化合物(a)在体外显著增加atp和hmgb1从癌细胞的释放，所述atp和hmgb1充当icd诱导的指数。

813、实施例2：icd诱导评估(体外)：细胞表面上钙网蛋白(crt)的测量

814、在用不同化合物处理的癌细胞中，测量充当免疫原性细胞死亡(icd)的指数的钙网蛋白(crt)的表达水平。将小鼠结肠直肠癌细胞系ct26.wt的细胞接种在6孔板中，并培养过夜。除去上清液后，用pbs将细胞洗涤两次。在含有10％fbs的rpmi1640培养溶液(r10)中，添加化合物(a)(4μm)或米托蒽醌(mtx)(1μm)。作为对照，添加dmso，其量与化合物(a)的量相同(r10-dmso)。药物处理完成后，收集ct26.wt细胞并悬浮于pbs中，且然后，以1×106个细胞/孔接种于96孔(圆底)板中。在以1200rpm离心3分钟后，除去上清液，且然后live/deadfixable violet dead cell stain kit(由thermo fisher scientific inc.制造)和mouse fcγr blocker(由biolegend，inc.制造)用pbs分别稀释至1/1000和1/50，并以100μl/孔添加。在室温下静置30分钟后，以1200rpm进行离心3分钟。除去上清液，以100μl/孔的量添加mildform(由wako pure chemical industries，ltd.制造)，并允许在37℃下静置10分钟。离心后，除去上清液。用facs缓冲液(1mm edta，5％fbs)(200μl/孔)将细胞洗涤一次。离心后，除去上清液。以50μl/孔的量添加用facs缓冲液稀释的一抗溶液(用pe或af647标记的抗crt：两者均由abcam plc.制造)。在4℃在暗处静置25分钟后，以1200rpm进行离心3分钟。除去上清液。用facs缓冲液(200μl/孔)将细胞洗涤两次，并进行离心。除去上清液后，将细胞悬浮于stabilizing fixative(由becton，dickinson and company制造)中，并使其在室温下静置10分钟。通过流式细胞仪(facs cantoii：由becton，dickinson and company制造)测量癌细胞上crt的表达水平。通过flowjo(由treestar inc制造)分析数据。注意，live/dead fixable violet-阳性细胞被确定为死细胞，并将其排除在分析之外。计算crt的平均荧光强度(mfi)。通过从染色细胞的mfi减去用同种型对照处理的细胞的mfi获得的值被确定为经调整mfi。注意，实验一式三份进行。根据dunnett氏检验比较对照组(0μm)和药物组的结果。p值表示到小数点后4位。满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的(***：p＜0.001，**：p＜0.01)。

815、结果显示于图25中。在24小时后，在ct26.wt细胞的表面中，证实crt表达的显著增加。用mtx处理的样品的crt表达为对照组crt表达的约2.6倍(p＜0.0001)。用化合物(a)处理样品的crt表达为对照组crt表达的约12.7倍(p＜0.0001)。

816、从以上表明，基于细胞表面上crt的暴露，化合物(a)在体外显著促进癌细胞的icd诱导。

817、实施例3：体内icd诱导的评估

818、将小鼠结肠直肠癌细胞系ct26.wt的细胞接种在细胞培养瓶中，并培养过夜。除去上清液，用pbs将细胞洗涤两次。为了诱导icd，在含有10％fbs的rpmi1640培养溶液(r10)中添加化合物(a)(4μm)或mtx(1μm)。二十四小时后，根据实施例1中所示的方法测量培养上清液中的hmgb1，以证实icd诱导。

819、如图26中所示，证实24小时后在药物处理组中在培养上清液中释放hmgb1。

820、为了评估体内icd，从用药物处理的每个培养瓶中除去培养上清液，并用pbs将细胞洗涤两次，且然后收集细胞。除去上清液，并用pbs将细胞洗涤一次，以制备含有5.0×106个细胞/ml的悬浮液。作为对照，以与上述相同的方式，通过以5.0×106个细胞/ml的量添加ct26.wt细胞来制备悬浮液，所述ct26.wt细胞在没有药物的含有10％fbs的rpmi1640培养溶液中培养。离心后，除去上清液。将细胞重复进行冻-融过程三次，并再次悬浮于pbs中以获得坏死细胞死亡(ncd)细胞。

821、将上面提到的每组的细胞(5.0×106个细胞)皮下接种于每只雌性6周龄balb/c小鼠(balb/c anncrlcrlj)(由charles river laboratories japan，inc.培育)的右腋窝中(接种，第0天)。在第1天和第5天(总共两次)以10mg/kg的剂量腹膜内施用抗sirpα抗体(克隆：5c12)或抗cd47抗体(克隆：miap410，由bio x cell，inc.制造)。作为对照，施用相同量的pbs。七天后，将未用药物处理的ct26.wt细胞(3.0×106个细胞)皮下接种至每只小鼠的左腋窝(再攻击，第0天)。在第14天，测量肿瘤体积以评估接种疫苗效果。注意，每组小鼠的数目为6只。根据dunnett氏检验比较ncd-pbs组和单独组的结果，p值表示到小数点后4位。满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

822、图27a显示对体内icd诱导的评估的概览。在图27b的图表中，纵轴代表肿瘤体积(mm3)，并且横轴代表单独组的名称。mtx处理组是阳性对照，并且ncd处理组是阴性对照。图27c显示单独处理组的一般信息和cr个体的数目。如图27b中所示，在其中再攻击ct26.wt细胞的每个ncd组中，都观察到肿瘤生长。另一方面，在其中再攻击ct26.wt细胞的mtx-pbs施用组中，肿瘤的植入在2/6个病例(cr)中被排斥。在mtx-抗sirpα抗体施用组中，与ncd相比，cr个体的数目显著增加至4/6(p＝0.0486)。在其中再攻击ct26.wt细胞的化合物(a)-pbs组中，与ncd相比，5/6个病例显示cr(p＝0.0362)。在化合物(a)-抗sirpα抗体施用组或抗cd47抗体施用组中，所有病例都显示cr(两者均p＝0.0325)。cr个体的数目显著增加。

823、如上所述，通过用化合物(a)或mtx处理细胞，从ct26.wt细胞中释放出充当icd的指标的hmgb1。此外，已经表明，通过向小鼠接种细胞(所述细胞被这些药物诱导为icd)产生接种疫苗效应(形成肿瘤的免疫记忆)，并通过施用抗sirpα抗体或抗cd47抗体增强接种疫苗效应。

824、实施例4：elispot分析

825、小鼠脾细胞中ct26.wt-反应性t细胞的数目通过鼠ifnγ单色酶促elispot测定(由cellular technology limited制造)测定，更具体地，计数由单个脾细胞产生的ifnγ斑点的数目。从实施例3中使用的每只小鼠中收获脾脏，并通过使用ctl测试培养基将脾细胞的数量调节至1.0×106个细胞/ml。ct26.wt细胞用10μg/ml丝裂霉素c处理2小时并洗涤。其后，收集细胞，通过ctl测试培养基调整为1.0×106个细胞/ml，并用作抗原。将脾细胞和抗原各自以100μl/孔的量添加在用抗ifnγ抗体预包被的pvdf-膜板中，并在37℃下共培养24小时。其后，使用附着的抗体和显色试剂进行显色，并测定产生ifnγ的脾细胞的数目。根据wilcoxon秩和检验进行ncd细胞接种组与化合物(a)或mtx处理组之间的比较。p值表示到小数点后4位，且满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

826、结果显示于图28中。与ncd细胞接种-pbs施用组[ncd_pbs]的相比，在作为“化合物(a)处理的ct26.wt细胞接种-pbs施用组”的[化合物(a)_pbs]的小鼠的脾细胞中，产生ifnγ的脾细胞的数目显示增加的趋势。与ncd_pbs施用组的脾细胞的相比，在化合物(a)_抗sirpα抗体小鼠的脾细胞中，产生ifnγ的脾细胞的数目显著增加(p＝0.0043)。当将化合物(a)_pbs与化合物(a)_αsirpα组进行比较时，产生ifnγ的脾细胞的数目显著增加(p＝0.013)。

827、从结果来看，在用化合物(a)处理的小鼠中，表明诱导了识别ct26.wt细胞衍生的抗原的t细胞。用抗sirpα抗体施用显著增加t细胞的数目。与mtx处理组相比，在化合物(a)处理组中，抗原特异性t细胞诱导显示进一步增强的趋势。

828、实施例5：脾细胞的fcm分析

829、从实施例3中使用的每只小鼠中切除脾脏，并通过使用pbs制备脾细胞，并以1×106个细胞/孔接种在96孔(圆底)板中。在以1200rpm离心3分钟后，除去上清液。添加用pbs稀释至1/20的人fcγr blocker(由biolegend，inc.制造)直至100μl/孔。在室温下静置30分钟后，以1200rpm进行离心3分钟。除去上清液，并且一抗溶液(fitc抗cd3ε抗体、percp抗cd4抗体、pe/cy7抗cd8α抗体、apc抗cd62l抗体和apc/cy7抗cd44抗体：全部由biolegend，inc.制造)用facs缓冲液(1mm edta，5％fbs)稀释，并以50μl/孔的量添加。在4℃下在暗处静置25分钟后，以1200rpm进行离心3分钟，且然后除去上清液。用facs缓冲液(200μl/孔)进行洗涤两次。离心后，除去上清液。用stabilizing fixative(由becton，dickinson andcompany制造)进行悬浮，并允许在室温下静置10分钟。通过流式细胞仪(facs cantoii：由becton，dickinson and company制造)进行测量。通过使用flowjo(由treestar inc制造)分析数据。根据dunnett氏多重比较法进行ncd组和每个药物处理组之间的比较，或每个细胞处理组中的pbs施用组、抗sirpα抗体组和抗cd47抗体组间的比较。p值表示到小数点后4位，并且满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

830、注意，在以下条件下鉴定cd4-阳性t细胞和cd8-阳性t细胞中的个体群体。tcm：中央记忆t细胞[cd44(+)cd62l(+)]

831、结果显示于图29和30中。如图29a中所示，与ncd处理组中的相比，mtx处理组(p＝0.0005)或化合物(a)处理组(p＜0.0001)中的cd4-阳性t细胞中tcm占据的比率显著增加。

832、如图29b中所示，与ncd处理组中的相比，mtx处理组(p＝0.0004)或化合物(a)处理组(p＜0.0001)中的cd8-阳性t细胞中tcm占据的比率显著增加。

833、如图30a中所示，与mtx_pbs组相比，在mtx_抗sirpα抗体组或mtx_抗cd47抗体组中，cd4-阳性t细胞中tcm占据的比率显示增加的趋势。与化合物(a)_pbs组相比，化合物(a)_抗sirpα抗体组中的比率显示增加的趋势；而化合物(a)_抗cd47抗体组中的比率显著降低(p＝0.0002)。

834、如图30b中所示，与mtx_pbs组相比，cd8-阳性t细胞中tcm占据的比率在mtx_抗sirpα抗体组中显著增加，并在mtx_抗cd47抗体组中显示增加的趋势(p＝0.035)。与化合物(a)_pbs组相比，化合物(a)_抗sirpα抗体组中的比率显示基本上相同的值；而化合物(a)_抗cd47抗体组中的比率显著降低(p＝0.0017)。

835、如图30c中所示，完整细胞中cd8-阳性t细胞占据的比率在mtx处理的抗sirpα抗体施用组中显著增加(p＝0.015)；而化合物(a)_抗sirpα抗体施用组中的比率显示增加的趋势。完整细胞中cd4-阳性t细胞占据的比率在mtx处理的抗sirpα抗体施用组中显示增加的趋势；而该比率在化合物(a)处理的抗sirpα抗体施用组中显著增加(p＝0.029)。

836、当未处理cd4-阳性t细胞/cd8-阳性t细胞以抗原特异性方式识别癌细胞时，t细胞被活化以分化为cd4-阳性teff细胞(其充当各种各样的免疫应答的控制塔)或cd8-阳性teff细胞(其对靶细胞具有细胞毒性作用)。tcm细胞是cd4/cd8-阳性t细胞，其中teff细胞部分维持对靶细胞应答的能力并获得长期存活的能力。这些细胞保留曾经遇到的抗原的记忆，并且当这些暴露于相同的抗原时，快速且有效地诱导免疫应答。

837、从结果表明，通过用mtx或化合物(a)处理，长期存活的cd4/cd8-阳性tcm细胞的数目显著增加(图29)；并且可以诱导可以长期维持体内抗肿瘤免疫的t细胞群体。

838、可以通过施用抗sirpα抗体来增强这些效应。由此表明，如果与化合物(a)组合使用，抗sirpα抗体有利于诱导抗肿瘤免疫。

839、从实施例3、4和5的结果表明，本发明中使用的化合物(a)作用于肿瘤细胞，以促进例如hmgb1和atp的产生，诱导icd并在细胞表面表达crt后，并通过icd分子诱导在体内加速免疫记忆形成。还表明，这些效应通过施用抗cd47抗体和抗sirpα抗体而得到增强，并且特别地通过施用抗sirpα抗体而得到显著增强。由此表明，如果与化合物(a)组合使用，抗sirpα抗体有利于诱导抗肿瘤免疫。

840、实施例6：化合物(a)的抗体-药物缀合物和抗人sirpα抗体对癌细胞系的的adcp活性

841、6-1制备靶细胞

842、收集cd47、her2和trop2阳性人胃癌细胞系ags细胞，用pbs洗涤两次，并重悬浮于pbs中。根据台盼蓝颜料排除测试对活细胞的数目进行计数。根据1×106个细胞/ml以1μl的体积添加celltrace far red(由thermo fisher scientific inc.制造)溶液。使混合物在室温下静置10分钟。向其中添加20ml含有10％fbs的rpmi1640培养基(r10/由thermofisher scientific inc.制造)。使混合物静置5分钟。然后，添加20ml r10，并进行洗涤两次。重悬浮细胞以达到1×106个细胞/ml，并用作靶细胞。

843、6-2制备效应细胞

844、向sepmate-50管(由stemcell technologies inc.制造)中以15ml/管的量分配ficoll-paque plus(由ge制造)。以17ml/管的量覆盖用含有2％fbs的pbs稀释两倍的全血。以1200g在室温下进行离心10分钟。通过倾析将含有pbmc的上清液收集在新鲜的50ml管中，并在室温下以1200rpm进行离心8分钟。除去上清液后，添加25ml含有2％fbs的pbs。在室温下以300g进行离心8分钟以进行洗涤。用1ml robosep缓冲液(stemcell technologiesinc.)进行悬浮，且然后根据台盼蓝颜料排除测试对pbmc活细胞的数目进行计数。用robosep缓冲液(由stemcell technologies inc.制造)进行制备，以便为5×107个细胞/ml，并且以50μl/ml pbmc细胞悬浮液的量添加human monocyte enrichment kit withoutcd16depletion (由stemcell technologies inc.制造)中提供的easysep人单核细胞富集鸡尾酒。在4℃反应10分钟后，以50μl/ml的量在pbmc细胞悬浮液中添加easysep磁性颗粒。在4℃反应5分钟后，添加robosep缓冲液(由stemcell technologies inc.制造)直至2.5ml，随后在easysep magnet上设置。2分30秒后，收集上清液。以1200rpm进行离心5分钟，且然后收集单核细胞级分。添加r10；并且进行洗涤一次；添加含有20ng/ml m-csf的r10(由peprotec，inc.制造)。在悬浮的225em2烧瓶(由sumitomo bakelite co.，ltd.制造)中进行接种。在37℃和5％co2的条件下进行培养11天。除去培养上清液，添加含有20ng/ml il-10和20ng/ml m-csf的r10(由peprotec，inc.制造)。再进行培养两天。十三天后，将trypleexpress(曲life technology制造)添加至通过分化诱导的巨噬细胞中。在37℃下进行反应15分钟，除去巨噬细胞。添加r10(25ml)并进行收集。用pbs进行洗涤两次，并用pbs进行重悬浮以达到1×106个细胞/ml。作为标准溶液，添加1μl/106个细胞/ml cfse溶液(由thermofisher scientific inc.制造)，随后在室温下允许静置10分钟。添加r10(20ml)，并进行洗涤两次。重悬浮细胞以达到1×106个细胞/ml并用作效应细胞。

845、6-3评估adcp活性

846、将根据步骤6-1的方法制备的靶细胞(50μl/孔)添加至具有超低粘性表面的96孔(u型底)微孔板(由sumitomo bakelite co.，ltd.制造)中。以50μl/孔的量向板中添加抗体-药物缀合物(1)或(2)、人源化抗her2(1)抗体或人源化抗trop2抗体(1)或用r10稀释的每种不同的对照抗体以达到0至1000ng/ml的最终浓度。在单一处理组中，以50μl/孔的量添加r10；而在组合施用组中，以50μl/孔的量添加用r10稀释的人源化抗sirpα抗体(克隆：hd13_h1l3)(作为2000ng/ml的最终浓度)。在另一项实验中，以50μl/孔的量添加抗体-药物缀合物(1)或(2)、抗her2抗体或抗trop2抗体以及用r10稀释的每种不同的对照抗体以达到1000ng/ml的最终浓度。在单一施用组中，以50μl/孔的量添加r10；而在组合施用组中，以50μl/孔的量添加用r10稀释的抗sirpα抗体(作为0至2000ng/ml的最终浓度)。向孔中以50μl/孔的量添加步骤6-2中制备的效应细胞(1×106个细胞/ml)，随后允许在37℃和5％co2的条件下进行静置4小时。以4℃和1200rpm离心5分钟后，除去上清液。用facs缓冲液(200μl/孔)洗涤细胞并用50μl/孔1×bd stabilizing fixative(由becton，dickinson and company制造)悬浮，随后允许在室温下进行静置10分钟。通过流式细胞仪(attunenxt：由thermofisher scientific inc.制造)进行测量。通过使用flowjo(由treestar inc.制造)分析数据。通过fsc(正向散射光)/ssc(侧向散射光)进行开发后，计算apc-阳性细胞(a)和apc-和fitc-共阳性细胞(b)的数目。将apc-和fitc-共阳性细胞(b)被确定为被效应细胞吞噬的靶细胞。根据下式计算由于adcp活性而通过吞噬作用吞噬的细胞比：

847、吞噬的细胞比率(％)＝b/(a+b)×100

848、如图31a-d中所示，抗体-药物缀合物(1)或(2)显示以抗体-(向其中添加的)浓度依赖性方式的对cd47、her2和trop2阳性人胃癌细胞ags细胞的adcp活性(图31a、b)，并且当组合使用人源化抗sirpα抗体hd13_h1l3时，显示较高的adcp活性(图31a、b)。由于在对照_抗体-药物缀合物中未观察到这些效果，因此两者都被表明为以靶标特异性方式诱导的效应。注意，这些在与母体抗体(即人源化抗her2抗体(1)或人源化抗trop2抗体(1)，其未与药物缀合)相比相同或更高的水平上施加adcp活性。由此提出，与药物缀合不产生不利影响。另一方面，如图31c和d中所示，当检查人源化抗sirpα抗体hd13_h1l3的浓度、同时抗体-药物缀合物(1)或(2)的浓度维持恒定时，adcp活性以抗sirpα抗体浓度依赖性方式增加。

849、实施例7：抗肿瘤研究(1)

850、小鼠：对雌性6周龄balb/c小鼠(balb/c anncrlcrlj)(由charles riverlaboratories japan，inc.培育)进行实验。

851、测量和计算式：用电子数字卡尺(cd15-cx，由mitutoyo corporation制造)每周两次测量肿瘤的长轴和短轴，并计算肿瘤体积(mm3)。下面显示计算式：

852、肿瘤体积(mm3)＝0.5×长轴(mm)×[短轴(mm)]2

853、从伦理观点来看，将肿瘤体积超过3000mm3的个体人道地杀死用于动物实验。

854、抗体-药物缀合物(1)(药物∶抗体比：7.6)用pbs稀释，并将10ml/kg的剂量静脉内施用至尾静脉。将抗小鼠sirpα抗体(克隆：5c12)和抗pd-l1抗体(克隆：yw243.55s70，根据美国专利公开us 2013/0045201a1制备)用pbs稀释，并且腹膜内施用10ml/kg的剂量。

855、通过使用慢病毒载体将人/小鼠嵌合her2基因转染至购自美国培养物保藏中心的小鼠乳腺癌细胞系4t1(crl-2539)以制备4t1-hmher2细胞，并将其投入使用。所述细胞在细胞膜上表达人/小鼠嵌合her2蛋白。然后，将4t1-hmher2细胞悬浮于pbs中，并将1.0×106个细胞皮下接种至每只balb/c小鼠的右腋窝中(第0天)。4天后，将小鼠随机分组(第4天)。在第4天和第11天(总共两次)，将抗体-药物缀合物(1)以10mg/kg的剂量静脉内施用至尾静脉。在第5、8和12天(总共三次)，以10mg/kg的剂量腹膜内施用抗sirpα抗体(克隆：5c12)或抗pd-l1抗体(克隆：yw243.55s70)。设置抗体-药物缀合物(1)、抗sirpα抗体和抗pd-l1抗体的组合施用组；并且设置pbs施用组作为对照组。每组小鼠数目为5只。继续测量肿瘤体积直至第21天。根据dunnett氏多重比较，进行对照组、各单一施用组和组合施用组间的比较，或抗体-药物缀合物(1)组和各组合施用组间的比较。p值表示到小数点后4位，并且满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

856、结果显示于图32中。图32a显示抗肿瘤研究的概览。图32b显示单独施用组的肿瘤生长曲线。纵轴代表肿瘤体积(mm3)，且横轴代表肿瘤接种后的天数。图32c显示治疗组的一般数据、肿瘤生长抑制率(tgi/％)和cr个体的数目。在第21天，抗体-药物缀合物(1)组(p＜0.0001)和抗sirpα抗体组(p＝0.0087)显示比对照组显著更强的抗肿瘤效果。抗体-药物缀合物(1)-抗sirpα抗体组合组或三药组合组显示比对照组显著更强的抗肿瘤效果(两者均p＜0.0001)。抗体-药物缀合物(1)-抗sirpα抗体组合组(p＝0.0497)或三药组合组(p＝0.0237)显示比抗体-药物缀合物(1)组显著更强的抗肿瘤效果。在实验的所有组中，没有观察到小鼠重量减轻。从上述证实了抗肿瘤效果由抗体-药物缀合物(1)或抗sirpα抗体各自的单独施用产生，并且被这些的组合施用显著增强。

857、实施例8：抗肿瘤研究(2)

858、小鼠：对雌性6周龄balb/c小鼠(balb/c anncrlcrlj)(由charles riverlaboratories japan，inc.培育)进行实验。

859、测量和计算式：用电子数字卡尺(cd15-cx，由mitutoyo corporation制造)每周两次测量肿瘤的长轴和短轴，并计算肿瘤体积(mm3)。下面显示计算式：

860、肿瘤体积(mm3)＝0.5×长轴(mm)×[短轴(mm)]2

861、从伦理观点来看，将肿瘤体积超过3000mm3的个体人道地杀死用于动物实验。

862、抗体-药物缀合物(2)(药物∶抗体比：4)用pbs稀释，并将10ml/kg的剂量静脉内施用至尾静脉。将抗sirpα抗体(克隆：5c12)用pbs稀释，并且腹膜内施用10ml/kg的剂量。

863、通过使用慢病毒载体将人trop2基因转染至购自美国培养物保藏中心的小鼠结肠直肠癌细胞系ct26.wt(crl2638)以制备ct26.wt-htrop2细胞，并将其投入使用。所述细胞在细胞膜上表达人trop2蛋白。将ct26.wt-htrop2细胞悬浮于盐水中，并将2.0×106个细胞皮下接种至每只balb/c小鼠的右腋窝中(第0天)。7天后，将小鼠随机分组(第7天)。在第7天和第12天(总共两次)，将抗体-药物缀合物(2)以10mg/kg的剂量静脉内施用至尾静脉。在第8、11和13天(总共三次)，以10mg/kg的剂量腹膜内施用抗sirpα抗体(克隆：5c12)。设置抗体-药物缀合物(2)和抗sirpα抗体的组合施用组，并且设置pbs施用组作为对照组。每组小鼠数目为6只。继续测量肿瘤体积直至第18天。根据dunnett氏多重比较，进行对照组、各单一施用组和组合施用组间的比较。p值表示到小数点后4位，并且满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

864、结果显示于图33中。图33a显示抗肿瘤研究的概览。图33b显示单独施用组的肿瘤生长曲线。纵轴代表肿瘤体积(mm3)，且横轴代表肿瘤接种后的天数。图33c显示治疗组的一般数据和肿瘤生长抑制率(tgi/％)。纵轴代表肿瘤体积(mm3)，且横轴代表从肿瘤接种的第一天起的天数。在第18天，与对照组相比，抗体-药物缀合物(2)组和抗sirpα抗体组显示部分抗肿瘤效果。组合施用组显示显著更强的抗肿瘤效果(p＝0.0007)。在实验的所有组中，没有观察到小鼠重量减轻。从上述证实了抗肿瘤效果由药物各自的单独施用产生，并且被这些的组合施用增强。

865、实施例9：抗肿瘤研究(3)

866、小鼠：对雌性6周龄balb/c小鼠(balb/c anncrlcrlj)(由charles riverlaboratories japan，inc.培育)进行实验。

867、测量和计算式：用电子数字卡尺(cd15-cx，由mitutoyo corporation制造)每周两次测量肿瘤的长轴和短轴，并计算肿瘤体积(mm3)。下面显示计算式：

868、肿瘤体积(mm3)＝0.5×长轴(mm)×[短轴(mm)]2

869、从伦理观点来看，将肿瘤体积超过3000mm3的个体人道地杀死用于动物实验。

870、抗体-药物缀合物(3)(药物∶抗体比：8)和抗sirpα抗体(克隆：5c12)用pbs稀释，并用于施用。

871、通过使用慢病毒载体将人her3基因转染至购自美国培养物保藏中心的小鼠结肠直肠癌细胞系ct26.wt(crl2638)以制备ct26.wt-her3细胞，并将其投入使用。所述细胞在细胞膜上表达人her3蛋白。将ct26.wt-her3细胞悬浮于盐水中，并将2.0×106个细胞皮下接种至每只balb/c小鼠的右腋窝中(第0天)。7天后，将小鼠随机分组(第7天)。在第7天和第14天(总共两次)，经由尾静脉以10mg/kg的剂量静脉内施用抗体-药物缀合物(3)。在第8、11和15天(总共三次)，以10mg/kg的剂量腹膜内施用抗sirpα抗体(克隆：5c12)。设置抗体-药物缀合物(3)和抗sirpα抗体的组合施用组，并且设置pbs施用组作为对照组。每组小鼠数目为6只。继续测量肿瘤体积直至第18天。根据dunnett氏多重比较，进行对照组、各单一施用组和组合施用组间的比较。p值表示到小数点后4位，并且满足p＜0.05(双侧检验)的结果被确定为显著的。

872、结果显示于图34中。图34a显示抗肿瘤研究的概览。图34b显示单独施用组的肿瘤生长曲线。纵轴代表肿瘤体积(mm3)，且横轴代表肿瘤接种后的天数。图34c显示治疗组的一般数据和肿瘤生长抑制率(tgi/％)。在第18天，与对照组相比，抗sirpα抗体单药组没有显示治疗效果，并且抗体-药物缀合物(3)组显示部分抗肿瘤效果。此外，组合施用组显示比抗sirpα抗体单药组显著更强的抗肿瘤效果(p＝0.046)，并且表现出抗肿瘤效力与抗体-药物缀合物(3)组相比增强的趋势。在实验的所有组中，没有观察到小鼠重量减轻。

873、[产业实用性]

874、从上述实验结果发现，如果与抗sirpα抗体组合施用，根据本发明的抗体-药物缀合物显示优异的抗肿瘤效果。

875、[序列表的自由文本]

876、seq id no：1-抗her2抗体的重链的氨基酸序列

877、seq id no：2-抗her2抗体的轻链的氨基酸序列

878、seq id no：3-抗her3抗体的重链的氨基酸序列

879、seq id no：4-抗her3抗体的轻链的氨基酸序列

880、seq id no：5-抗trop2抗体的重链的氨基酸序列

881、seq id no：6-抗trop2抗体的轻链的氨基酸序列

882、seq id no：7-抗b7-h3抗体的重链的氨基酸序列

883、seq id no：8-抗b7-h3抗体的轻链的氨基酸序列

884、seq id no：9-抗gpr20抗体的重链的氨基酸序列

885、seq id no：10-抗gpr20抗体的轻链的氨基酸序列

886、seq id no：11-抗cdh6抗体的重链的氨基酸序列

887、seq id no：12-抗cdh6抗体的轻链的氨基酸序列

888、seq id no：13-人源化抗sirpα抗体hd13的hh1重链的氨基酸序列

889、seq id no：14-人源化抗sirpα抗体hd13的hh2重链的氨基酸序列

890、seq id no：15-人源化抗sirpα抗体hd13的hl2轻链的氨基酸序列

891、seq id no：16-人源化抗sirpα抗体hd13的hl3轻链的氨基酸序列

892、seq id no：17-人源化抗sirpα抗体hd13的hl4轻链的氨基酸序列

893、seq id no：18-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-h1的氨基酸序列

894、seq id no：19-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-h2的氨基酸序列

895、seq id no：20-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-h3的氨基酸序列

896、seq id no：21-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-l1的氨基酸序列

897、seq id no：22-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-l2的氨基酸序列

898、seq id no：23-嵌合sirpα抗体cd13 cdr-l3的氨基酸序列

899、seq id no：24-ose-172抗体的重链(ose-172_hg4pro)的氨基酸序列

900、seq id no：25-ose-172抗体的轻链(ose-172_hk)的氨基酸序列

901、seq id no：26-kwar23抗体的重链(kwar23_hg4pro)的氨基酸序列

902、seq id no：27-kwar23抗体的轻链(kwar23_hk)的氨基酸序列

903、seq id no：28-adu-1805抗体的重链(adu-1805_hg2)的氨基酸序列

904、seq id no：29-adu-1805抗体的轻链(adu-1805_hk)的氨基酸序列

905、seq id no：30-5c12抗小鼠sirpα抗体的重链的氨基酸序列

906、seq id no：31-5c12抗小鼠sirpα抗体的轻链的氨基酸序列

907、seq id no：32-yw243.55s70抗小鼠人抗pd-l1抗体的重链的氨基酸序列

908、seq id no：33-yw243.55s70抗小鼠人抗pd-l1抗体的轻链的氨基酸序列

909、                        序列表

910、<110>  daiichi sankyo company, ltd.

911、<120>  抗体-药物缀合物与抗sirpα抗体的组合

912、<130>  dsfp2130wo

913、<150>  jp2020-188084

914、<151>  2020-11-11

915、<160>  33

916、<170>  patentin version 3.5

917、<210>  1

918、<211>  450

919、<212>  prt

920、<213>  人工的

921、<220>

922、<223>  抗her2抗体重链的氨基酸序列

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925、1               5                   10                  15

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937、            100                 105                 110

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944、trp asn ser gly ala leu thr ser gly val his thr phe pro ala val

945、                165                 170                 175

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974、leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser lys leu thr val asp

975、                405                 410                 415

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980、gly lys

981、    450

982、<210>  2

983、<211>  214

984、<212>  prt

985、<213>  人工的

986、<220>

987、<223>  抗her2抗体轻链的氨基酸序列

988、<400>  2

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994、        35                  40                  45

995、tyr ser ala ser phe leu tyr ser gly val pro ser arg phe ser gly

996、    50                  55                  60

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1021、<400>  3

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1029、    50                  55                  60

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1057、        275                 280                 285

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1087、ser ser asn arg asn tyr leu ala trp tyr gln gln asn pro gly gln

1088、        35                  40                  45

1089、pro pro lys leu leu ile tyr trp ala ser thr arg glu ser gly val

1090、    50                  55                  60

1091、pro asp arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr

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1093、ile ser ser leu gln ala glu asp val ala val tyr tyr cys gln gln

1094、                85                  90                  95

1095、tyr tyr ser thr pro arg thr phe gly gln gly thr lys val glu ile

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1097、lys arg thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro pro ser asp

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1101、phe tyr pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu

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1103、gln ser gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp

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1105、ser thr tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr

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1110、    210                 215                 220

1111、<210>  5

1112、<211>  470

1113、<212>  prt

1114、<213>  人工的

1115、<220>

1116、<223>  抗trop2抗体重链的氨基酸序列

1117、<400>  5

1118、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

1119、1               5                   10                  15

1120、val leu ser gln val gln leu val gln ser gly ala glu val lys lys

1121、            20                  25                  30

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1126、glu trp met gly trp ile asn thr his ser gly val pro lys tyr ala

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1128、glu asp phe lys gly arg val thr ile ser ala asp thr ser thr ser

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1134、val trp gly gln gly thr leu val thr val ser ser ala ser thr lys

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1138、gly thr ala ala leu gly cys leu val lys asp tyr phe pro glu pro

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1143、        195                 200                 205

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1158、ser thr tyr arg val val ser val leu thr val leu his gln asp trp

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1162、ala pro ile glu lys thr ile ser lys ala lys gly gln pro arg glu

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1174、ser val met his glu ala leu his asn his tyr thr gln lys ser leu

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1181、<213>  人工的

1182、<220>

1183、<223>  抗trop2抗体轻链的氨基酸序列

1184、<400>  6

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1186、1               5                   10                  15

1187、gly ala tyr gly asp ile gln met thr gln ser pro ser ser leu ser

1188、            20                  25                  30

1189、ala ser val gly asp arg val thr ile thr cys lys ala ser gln asp

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1191、val ser thr ala val ala trp tyr gln gln lys pro gly lys ala pro

1192、    50                  55                  60

1193、lys leu leu ile tyr ser ala ser tyr arg tyr thr gly val pro ser

1194、65                  70                  75                  80

1195、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

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1199、ile thr pro leu thr phe gly gln gly thr lys leu glu ile lys arg

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1205、pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser

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1207、gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr

1208、            180                 185                 190

1209、tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys

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1218、<213>  人工的

1219、<220>

1220、<223>  抗b7-h3抗体重链的氨基酸序列

1221、<400>  7

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1224、val leu ser gln val gln leu val gln ser gly ala glu val lys lys

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1228、thr asn tyr val met his trp val arg gln ala pro gly gln gly leu

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1230、glu trp met gly tyr ile asn pro tyr asn asp asp val lys tyr asn

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1236、tyr tyr cys ala arg trp gly tyr tyr gly ser pro leu tyr tyr phe

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1247、        195                 200                 205

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1266、pro ala pro ile glu lys thr ile ser lys ala lys gly gln pro arg

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1274、thr thr pro pro val leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser

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1285、<213>  人工的

1286、<220>

1287、<223>  抗b7-h3抗体轻链的氨基酸序列

1288、<400>  8

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1291、gly ala tyr gly glu ile val leu thr gln ser pro ala thr leu ser

1292、            20                  25                  30

1293、leu ser pro gly glu arg ala thr leu ser cys arg ala ser ser arg

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1301、leu glu pro glu asp phe ala val tyr tyr cys gln gln trp asn ser

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1309、arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser gly

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1311、asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr tyr

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1313、ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys his

1314、        195                 200                 205

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1322、<213>  人工的

1323、<220>

1324、<223>  抗gpr20抗体重链的氨基酸序列

1325、<400>  9

1326、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

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1586、leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser arg leu thr val asp

1587、            420                 425                 430

1588、lys ser arg trp gln glu gly asn val phe ser cys ser val met his

1589、        435                 440                 445

1590、glu ala leu his asn his tyr thr gln lys ser leu ser leu ser leu

1591、    450                 455                 460

1592、gly lys

1593、465

1594、<210>  14

1595、<211>  466

1596、<212>  prt

1597、<213>  人工的

1598、<220>

1599、<223>  人源化抗sirpα抗体hd13的hh2重链的氨基酸序列

1600、<400>  14

1601、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

1602、1               5                   10                  15

1603、val leu ser glu val gln leu val glu ser gly gly gly val val gln

1604、            20                  25                  30

1605、pro gly arg ser leu arg leu ser cys ala ala ser gly phe thr phe

1606、        35                  40                  45

1607、ser asp tyr gly met ile trp val arg gln ala pro gly lys gly leu

1608、    50                  55                  60

1609、glu trp val ala ser ile ser ser ser ser ser tyr ile tyr tyr ala

1610、65                  70                  75                  80

1611、asp ser val lys gly arg phe thr ile ser arg asp asn ser lys asn

1612、                85                  90                  95

1613、thr leu tyr leu gln met asn ser leu arg ala glu asp thr ala val

1614、            100                 105                 110

1615、tyr tyr cys ala arg arg tyr tyr gly phe asn tyr pro phe asp tyr

1616、        115                 120                 125

1617、trp gly gln gly thr met val thr val ser ser ala ser thr lys gly

1618、    130                 135                 140

1619、pro ser val phe pro leu ala pro cys ser arg ser thr ser glu ser

1620、145                 150                 155                 160

1621、thr ala ala leu gly cys leu val lys asp tyr phe pro glu pro val

1622、                165                 170                 175

1623、thr val ser trp asn ser gly ala leu thr ser gly val his thr phe

1624、            180                 185                 190

1625、pro ala val leu gln ser ser gly leu tyr ser leu ser ser val val

1626、        195                 200                 205

1627、thr val pro ser ser ser leu gly thr lys thr tyr thr cys asn val

1628、    210                 215                 220

1629、asp his lys pro ser asn thr lys val asp lys arg val glu ser lys

1630、225                 230                 235                 240

1631、tyr gly pro pro cys pro pro cys pro ala pro glu ala ala gly gly

1632、                245                 250                 255

1633、pro ser val phe leu phe pro pro lys pro lys asp thr leu met ile

1634、            260                 265                 270

1635、ser arg thr pro glu val thr cys val val val asp val ser gln glu

1636、        275                 280                 285

1637、asp pro glu val gln phe asn trp tyr val asp gly val glu val his

1638、    290                 295                 300

1639、asn ala lys thr lys pro arg glu glu gln phe asn ser thr tyr arg

1640、305                 310                 315                 320

1641、val val ser val leu thr val leu his gln asp trp leu asn gly lys

1642、                325                 330                 335

1643、glu tyr lys cys lys val ser asn lys gly leu pro ser ser ile glu

1644、            340                 345                 350

1645、lys thr ile ser lys ala lys gly gln pro arg glu pro gln val tyr

1646、        355                 360                 365

1647、thr leu pro pro ser gln glu glu met thr lys asn gln val ser leu

1648、    370                 375                 380

1649、thr cys leu val lys gly phe tyr pro ser asp ile ala val glu trp

1650、385                 390                 395                 400

1651、glu ser asn gly gln pro glu asn asn tyr lys thr thr pro pro val

1652、                405                 410                 415

1653、leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser arg leu thr val asp

1654、            420                 425                 430

1655、lys ser arg trp gln glu gly asn val phe ser cys ser val met his

1656、        435                 440                 445

1657、glu ala leu his asn his tyr thr gln lys ser leu ser leu ser leu

1658、    450                 455                 460

1659、gly lys

1660、465

1661、<210>  15

1662、<211>  234

1663、<212>  prt

1664、<213>  人工的

1665、<220>

1666、<223>  人源化抗sirpα抗体hd13的hl2轻链的氨基酸序列

1667、<400>  15

1668、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

1669、1               5                   10                  15

1670、gly ala tyr gly ala ile gln leu thr gln ser pro ser ser leu ser

1671、            20                  25                  30

1672、ala ser val gly gln arg val thr ile thr cys gly ala ser lys ser

1673、        35                  40                  45

1674、val arg thr tyr met his trp tyr gln gln lys pro gly lys ala pro

1675、    50                  55                  60

1676、lys leu leu ile tyr ser ala ser asn leu glu ala gly val pro ser

1677、65                  70                  75                  80

1678、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

1679、                85                  90                  95

1680、ser leu gln pro glu asp phe ala thr tyr tyr cys gln gln ser asn

1681、            100                 105                 110

1682、glu pro pro tyr thr phe gly gln gly thr lys leu glu ile lys arg

1683、        115                 120                 125

1684、thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro pro ser asp glu gln

1685、    130                 135                 140

1686、leu lys ser gly thr ala ser val val cys leu leu asn asn phe tyr

1687、145                 150                 155                 160

1688、pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser

1689、                165                 170                 175

1690、gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr

1691、            180                 185                 190

1692、tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys

1693、        195                 200                 205

1694、his lys val tyr ala cys glu val thr his gln gly leu ser ser pro

1695、    210                 215                 220

1696、val thr lys ser phe asn arg gly glu cys

1697、225                 230

1698、<210>  16

1699、<211>  234

1700、<212>  prt

1701、<213>  人工的

1702、<220>

1703、<223>  人源化抗sirpα抗体hd13的hl3轻链的氨基酸序列

1704、<400>  16

1705、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

1706、1               5                   10                  15

1707、gly ala tyr gly asp thr gln leu thr gln ser pro ser ser leu ser

1708、            20                  25                  30

1709、ala ser val gly gln arg val thr ile thr cys gly ala ser lys ser

1710、        35                  40                  45

1711、val arg thr tyr met his trp tyr gln gln lys pro gly lys gln pro

1712、    50                  55                  60

1713、lys leu leu ile tyr ser ala ser asn leu glu ala gly val pro ser

1714、65                  70                  75                  80

1715、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

1716、                85                  90                  95

1717、ser leu gln pro glu asp phe ala thr tyr tyr cys gln gln ser asn

1718、            100                 105                 110

1719、glu pro pro tyr thr phe gly gln gly thr lys leu glu ile lys arg

1720、        115                 120                 125

1721、thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro pro ser asp glu gln

1722、    130                 135                 140

1723、leu lys ser gly thr ala ser val val cys leu leu asn asn phe tyr

1724、145                 150                 155                 160

1725、pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser

1726、                165                 170                 175

1727、gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr

1728、            180                 185                 190

1729、tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys

1730、        195                 200                 205

1731、his lys val tyr ala cys glu val thr his gln gly leu ser ser pro

1732、    210                 215                 220

1733、val thr lys ser phe asn arg gly glu cys

1734、225                 230

1735、<210>  17

1736、<211>  234

1737、<212>  prt

1738、<213>  人工的

1739、<220>

1740、<223>  人源化抗sirpα抗体hd13的hl4轻链的氨基酸序列

1741、<400>  17

1742、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

1743、1               5                   10                  15

1744、gly ala tyr gly asp thr val leu thr gln ser pro asp ser leu ala

1745、            20                  25                  30

1746、val ser leu gly gln arg ala thr ile asn cys gly ala ser lys ser

1747、        35                  40                  45

1748、val arg thr tyr met his trp tyr gln gln lys pro gly gln gln pro

1749、    50                  55                  60

1750、lys leu leu ile tyr ser ala ser asn leu glu ala gly val pro ser

1751、65                  70                  75                  80

1752、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

1753、                85                  90                  95

1754、ser leu gln ala glu asp val ala val tyr tyr cys gln gln ser asn

1755、            100                 105                 110

1756、glu pro pro tyr thr phe gly gln gly thr lys val glu ile lys arg

1757、        115                 120                 125

1758、thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro pro ser asp glu gln

1759、    130                 135                 140

1760、leu lys ser gly thr ala ser val val cys leu leu asn asn phe tyr

1761、145                 150                 155                 160

1762、pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser

1763、                165                 170                 175

1764、gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr

1765、            180                 185                 190

1766、tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys

1767、        195                 200                 205

1768、his lys val tyr ala cys glu val thr his gln gly leu ser ser pro

1769、    210                 215                 220

1770、val thr lys ser phe asn arg gly glu cys

1771、225                 230

1772、<210>  18

1773、<211>  10

1774、<212>  prt

1775、<213>  人工的

1776、<220>

1777、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-h1的氨基酸序列

1778、<400>  18

1779、gly phe thr phe ser asp tyr gly met ile

1780、1               5                   10

1781、<210>  19

1782、<211>  10

1783、<212>  prt

1784、<213>  人工的

1785、<220>

1786、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-h2的氨基酸序列

1787、<400>  19

1788、ser ile ser ser ser ser ser tyr ile tyr

1789、1               5                   10

1790、<210>  20

1791、<211>  11

1792、<212>  prt

1793、<213>  人工的

1794、<220>

1795、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-h3的氨基酸序列

1796、<400>  20

1797、arg tyr tyr gly phe asn tyr pro phe asp tyr

1798、1               5                   10

1799、<210>  21

1800、<211>  11

1801、<212>  prt

1802、<213>  人工的

1803、<220>

1804、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-l1的氨基酸序列

1805、<400>  21

1806、gly ala ser lys ser val arg thr tyr met his

1807、1               5                   10

1808、<210>  22

1809、<211>  7

1810、<212>  prt

1811、<213>  人工的

1812、<220>

1813、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-l2的氨基酸序列

1814、<400>  22

1815、ser ala ser asn leu glu ala

1816、1               5

1817、<210>  23

1818、<211>  9

1819、<212>  prt

1820、<213>  人工的

1821、<220>

1822、<223>  嵌合sirpα抗体cd13的cdr-l3的氨基酸序列

1823、<400>  23

1824、gln gln ser asn glu pro pro tyr thr

1825、1               5

1826、<210>  24

1827、<211>  466

1828、<212>  prt

1829、<213>  人工的

1830、<220>

1831、<223>  ose-172抗体重链(ose-172-hg4pro)的氨基酸序列

1832、<400>  24

1833、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

1834、1               5                   10                  15

1835、val leu ser glu val gln leu val gln ser gly ala glu val lys lys

1836、            20                  25                  30

1837、pro gly glu ser leu arg ile ser cys lys ala ser gly tyr ser phe

1838、        35                  40                  45

1839、thr ser tyr trp val his trp val arg gln met pro gly lys gly leu

1840、    50                  55                  60

1841、glu trp met gly asn ile asp pro ser asp ser asp thr his tyr ser

1842、65                  70                  75                  80

1843、pro ser phe gln gly his val thr leu ser val asp lys ser ile ser

1844、                85                  90                  95

1845、thr ala tyr leu gln leu ser ser leu lys ala ser asp thr ala met

1846、            100                 105                 110

1847、tyr tyr cys val arg gly gly thr gly thr leu ala tyr phe ala tyr

1848、        115                 120                 125

1849、trp gly gln gly thr leu val thr val ser ser ala ser thr lys gly

1850、    130                 135                 140

1851、pro ser val phe pro leu ala pro cys ser arg ser thr ser glu ser

1852、145                 150                 155                 160

1853、thr ala ala leu gly cys leu val lys asp tyr phe pro glu pro val

1854、                165                 170                 175

1855、thr val ser trp asn ser gly ala leu thr ser gly val his thr phe

1856、            180                 185                 190

1857、pro ala val leu gln ser ser gly leu tyr ser leu ser ser val val

1858、        195                 200                 205

1859、thr val pro ser ser ser leu gly thr lys thr tyr thr cys asn val

1860、    210                 215                 220

1861、asp his lys pro ser asn thr lys val asp lys arg val glu ser lys

1862、225                 230                 235                 240

1863、tyr gly pro pro cys pro pro cys pro ala pro glu phe leu gly gly

1864、                245                 250                 255

1865、pro ser val phe leu phe pro pro lys pro lys asp thr leu met ile

1866、            260                 265                 270

1867、ser arg thr pro glu val thr cys val val val asp val ser gln glu

1868、        275                 280                 285

1869、asp pro glu val gln phe asn trp tyr val asp gly val glu val his

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1873、val val ser val leu thr val leu his gln asp trp leu asn gly lys

1874、                325                 330                 335

1875、glu tyr lys cys lys val ser asn lys gly leu pro ser ser ile glu

1876、            340                 345                 350

1877、lys thr ile ser lys ala lys gly gln pro arg glu pro gln val tyr

1878、        355                 360                 365

1879、thr leu pro pro ser gln glu glu met thr lys asn gln val ser leu

1880、    370                 375                 380

1881、thr cys leu val lys gly phe tyr pro ser asp ile ala val glu trp

1882、385                 390                 395                 400

1883、glu ser asn gly gln pro glu asn asn tyr lys thr thr pro pro val

1884、                405                 410                 415

1885、leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser arg leu thr val asp

1886、            420                 425                 430

1887、lys ser arg trp gln glu gly asn val phe ser cys ser val met his

1888、        435                 440                 445

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1891、gly lys

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1893、<210>  25

1894、<211>  239

1895、<212>  prt

1896、<213>  人工的

1897、<220>

1898、<223>  ose-172抗体轻链(ose-172-hk)的氨基酸序列

1899、<400>  25

1900、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

1901、1               5                   10                  15

1902、gly ala tyr gly asp val val met thr gln ser pro leu ser leu pro

1903、            20                  25                  30

1904、val thr leu gly gln pro ala ser ile ser cys arg ser ser gln ser

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1908、pro gly gln ser pro arg leu leu ile tyr arg val ser asn arg phe

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1915、        115                 120                 125

1916、val glu ile lys arg thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro

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1920、leu asn asn phe tyr pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp

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1922、asn ala leu gln ser gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp

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1926、ala asp tyr glu lys his lys val tyr ala cys glu val thr his gln

1927、    210                 215                 220

1928、gly leu ser ser pro val thr lys ser phe asn arg gly glu cys

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1931、<211>  459

1932、<212>  prt

1933、<213>  人工的

1934、<220>

1935、<223>  kwar23抗体重链(kwar23_hg4pro)的氨基酸序列

1936、<400>  26

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1941、pro gly ala ser val lys leu ser cys thr ala ser gly phe asn ile

1942、        35                  40                  45

1943、lys asp tyr tyr ile his trp val gln gln arg thr glu gln gly leu

1944、    50                  55                  60

1945、glu trp ile gly arg ile asp pro glu asp gly glu thr lys tyr ala

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1947、pro lys phe gln asp lys ala thr ile thr ala asp thr ser ser asn

1948、                85                  90                  95

1949、thr ala tyr leu his leu ser ser leu thr ser glu asp thr ala val

1950、            100                 105                 110

1951、tyr tyr cys ala arg trp gly ala tyr trp gly gln gly thr leu val

1952、        115                 120                 125

1953、thr val ser ala ala ser thr lys gly pro ser val phe pro leu ala

1954、    130                 135                 140

1955、pro cys ser arg ser thr ser glu ser thr ala ala leu gly cys leu

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1957、val lys asp tyr phe pro glu pro val thr val ser trp asn ser gly

1958、                165                 170                 175

1959、ala leu thr ser gly val his thr phe pro ala val leu gln ser ser

1960、            180                 185                 190

1961、gly leu tyr ser leu ser ser val val thr val pro ser ser ser leu

1962、        195                 200                 205

1963、gly thr lys thr tyr thr cys asn val asp his lys pro ser asn thr

1964、    210                 215                 220

1965、lys val asp lys arg val glu ser lys tyr gly pro pro cys pro pro

1966、225                 230                 235                 240

1967、cys pro ala pro glu phe leu gly gly pro ser val phe leu phe pro

1968、                245                 250                 255

1969、pro lys pro lys asp thr leu met ile ser arg thr pro glu val thr

1970、            260                 265                 270

1971、cys val val val asp val ser gln glu asp pro glu val gln phe asn

1972、        275                 280                 285

1973、trp tyr val asp gly val glu val his asn ala lys thr lys pro arg

1974、    290                 295                 300

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1981、gly gln pro arg glu pro gln val tyr thr leu pro pro ser gln glu

1982、        355                 360                 365

1983、glu met thr lys asn gln val ser leu thr cys leu val lys gly phe

1984、    370                 375                 380

1985、tyr pro ser asp ile ala val glu trp glu ser asn gly gln pro glu

1986、385                 390                 395                 400

1987、asn asn tyr lys thr thr pro pro val leu asp ser asp gly ser phe

1988、                405                 410                 415

1989、phe leu tyr ser arg leu thr val asp lys ser arg trp gln glu gly

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1995、<210>  27

1996、<211>  235

1997、<212>  prt

1998、<213>  人工的

1999、<220>

2000、<223>  kwar23抗体轻链(kwar23_hk)的氨基酸序列

2001、<400>  27

2002、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

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2034、<212>  prt

2035、<213>  人工的

2036、<220>

2037、<223>  adu-1805抗体重链(adu-1805-hg2)的氨基酸序列

2038、<400>  28

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2057、lys gly pro ser val phe pro leu ala pro cys ser arg ser thr ser

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2059、glu ser thr ala ala leu gly cys leu val lys asp tyr phe pro glu

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2061、pro val thr val ser trp asn ser gly ala leu thr ser gly val his

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2064、        195                 200                 205

2065、val val thr val pro ser ser asn phe gly thr gln thr tyr thr cys

2066、    210                 215                 220

2067、asn val asp his lys pro ser asn thr lys val asp lys thr val glu

2068、225                 230                 235                 240

2069、arg lys cys cys val glu cys pro pro cys pro ala pro pro val ala

2070、                245                 250                 255

2071、gly pro ser val phe leu phe pro pro lys pro lys asp thr leu met

2072、            260                 265                 270

2073、ile ser arg thr pro glu val thr cys val val val asp val ser his

2074、        275                 280                 285

2075、glu asp pro glu val gln phe asn trp tyr val asp gly val glu val

2076、    290                 295                 300

2077、his asn ala lys thr lys pro arg glu glu gln phe asn ser thr phe

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2079、arg val val ser val leu thr val val his gln asp trp leu asn gly

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2081、lys glu tyr lys cys lys val ser asn lys gly leu pro ala pro ile

2082、            340                 345                 350

2083、glu lys thr ile ser lys thr lys gly gln pro arg glu pro gln val

2084、        355                 360                 365

2085、tyr thr leu pro pro ser arg glu glu met thr lys asn gln val ser

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2087、leu thr cys leu val lys gly phe tyr pro ser asp ile ala val glu

2088、385                 390                 395                 400

2089、trp glu ser asn gly gln pro glu asn asn tyr lys thr thr pro pro

2090、                405                 410                 415

2091、met leu asp ser asp gly ser phe phe leu tyr ser lys leu thr val

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2093、asp lys ser arg trp gln gln gly asn val phe ser cys ser val met

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2095、his glu ala leu his asn his tyr thr gln lys ser leu ser leu ser

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2097、pro gly lys

2098、465

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2100、<211>  234

2101、<212>  prt

2102、<213>  人工的

2103、<220>

2104、<223>  adu-1805抗体轻链(adu-1805-hk)的氨基酸序列

2105、<400>  29

2106、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

2107、1               5                   10                  15

2108、gly ala tyr gly asp ile gln met thr gln ser pro ser ser leu ser

2109、            20                  25                  30

2110、ala ser val gly asp arg val thr ile thr cys arg ala ser gln asp

2111、        35                  40                  45

2112、ile gly ser arg leu asn trp leu gln gln lys pro gly lys ala pro

2113、    50                  55                  60

2114、lys arg leu ile tyr ala thr ser ser leu asp ser gly val pro ser

2115、65                  70                  75                  80

2116、arg phe ser gly ser gly ser gly thr glu phe thr leu thr ile ser

2117、                85                  90                  95

2118、ser leu gln pro glu asp phe ala thr tyr tyr cys leu gln tyr ala

2119、            100                 105                 110

2120、ser ser pro phe thr phe gly gly gly thr lys val glu ile lys arg

2121、        115                 120                 125

2122、thr val ala ala pro ser val phe ile phe pro pro ser asp glu gln

2123、    130                 135                 140

2124、leu lys ser gly thr ala ser val val cys leu leu asn asn phe tyr

2125、145                 150                 155                 160

2126、pro arg glu ala lys val gln trp lys val asp asn ala leu gln ser

2127、                165                 170                 175

2128、gly asn ser gln glu ser val thr glu gln asp ser lys asp ser thr

2129、            180                 185                 190

2130、tyr ser leu ser ser thr leu thr leu ser lys ala asp tyr glu lys

2131、        195                 200                 205

2132、his lys val tyr ala cys glu val thr his gln gly leu ser ser pro

2133、    210                 215                 220

2134、val thr lys ser phe asn arg gly glu cys

2135、225                 230

2136、<210>  30

2137、<211>  460

2138、<212>  prt

2139、<213>  小家鼠

2140、<400>  30

2141、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

2142、1               5                   10                  15

2143、val leu ser glu val gln leu val glu ser gly gly gly leu val gln

2144、            20                  25                  30

2145、pro gly gly ser leu lys leu ser cys ala ala ser gly phe thr phe

2146、        35                  40                  45

2147、ser asn tyr asp met ala trp val arg gln ala pro thr lys gly leu

2148、    50                  55                  60

2149、glu trp val ala ser ile ser thr arg gly gly ser ser tyr tyr arg

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2151、asp ser val lys gly arg phe thr val ser arg asp asn ala lys ser

2152、                85                  90                  95

2153、thr leu tyr leu gln met asp ser leu arg ser glu asp thr ala thr

2154、            100                 105                 110

2155、tyr tyr cys ala arg his pro gly asp tyr phe asp tyr trp gly gln

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2157、gly val met val thr val ser ser ala lys thr thr pro pro ser val

2158、    130                 135                 140

2159、tyr pro leu ala pro gly ser ala ala gln thr asn ser met val thr

2160、145                 150                 155                 160

2161、leu gly cys leu val lys gly tyr phe pro glu pro val thr val thr

2162、                165                 170                 175

2163、trp asn ser gly ser leu ser ser gly val his thr phe pro ala val

2164、            180                 185                 190

2165、leu gln ser asp leu tyr thr leu ser ser ser val thr val pro ser

2166、        195                 200                 205

2167、ser thr trp pro ser glu thr val thr cys asn val ala his pro ala

2168、    210                 215                 220

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2171、lys pro cys ile cys thr val pro glu val ser ser val phe ile phe

2172、                245                 250                 255

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2176、        275                 280                 285

2177、ser trp phe val asp asp val glu val his thr ala gln thr gln pro

2178、    290                 295                 300

2179、arg glu glu gln phe asn ser thr phe arg ser val ser glu leu pro

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2181、ile met his gln asp trp leu asn gly lys glu phe lys cys arg val

2182、                325                 330                 335

2183、asn ser ala ala phe pro ala pro ile glu lys thr ile ser lys thr

2184、            340                 345                 350

2185、lys gly arg pro lys ala pro gln val tyr thr ile pro pro pro lys

2186、        355                 360                 365

2187、glu gln met ala lys asp lys val ser leu thr cys met ile thr asp

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2189、phe phe pro glu asp ile thr val glu trp gln trp asn gly gln pro

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2191、ala glu asn tyr lys asn thr gln pro ile met asp thr asp gly ser

2192、                405                 410                 415

2193、tyr phe val tyr ser lys leu asn val gln lys ser asn trp glu ala

2194、            420                 425                 430

2195、gly asn thr phe thr cys ser val leu his glu gly leu his asn his

2196、        435                 440                 445

2197、his thr glu lys ser leu ser his ser pro gly lys

2198、    450                 455                 460

2199、<210>  31

2200、<211>  233

2201、<212>  prt

2202、<213>  小家鼠

2203、<400>  31

2204、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

2205、1               5                   10                  15

2206、gly ala tyr gly asp thr val leu thr gln ser pro ala leu ala val

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2208、ser pro gly glu arg val thr ile ser cys arg ala ser glu ser val

2209、        35                  40                  45

2210、ser thr leu ile his trp tyr gln gln lys pro gly gln gln pro lys

2211、    50                  55                  60

2212、leu leu ile tyr leu thr ser his leu glu ser gly val pro ala arg

2213、65                  70                  75                  80

2214、phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile asp pro

2215、                85                  90                  95

2216、val glu ala asp asp thr ala thr tyr tyr cys gln gln ser trp thr

2217、            100                 105                 110

2218、his pro trp thr phe gly gly gly thr lys leu glu leu lys arg ala

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2221、    130                 135                 140

2222、thr ser gly gly ala ser val val cys phe leu asn asn phe tyr pro

2223、145                 150                 155                 160

2224、lys asp ile asn val lys trp lys ile asp gly ser glu arg gln asn

2225、                165                 170                 175

2226、gly val leu asn ser trp thr asp gln asp ser lys asp ser thr tyr

2227、            180                 185                 190

2228、ser met ser ser thr leu thr leu thr lys asp glu tyr glu arg his

2229、        195                 200                 205

2230、asn ser tyr thr cys glu ala thr his lys thr ser thr ser pro ile

2231、    210                 215                 220

2232、val lys ser phe asn arg asn glu cys

2233、225                 230

2234、<210>  32

2235、<211>  461

2236、<212>  prt

2237、<213>  小家鼠

2238、<400>  32

2239、met lys his leu trp phe phe leu leu leu val ala ala pro arg trp

2240、1               5                   10                  15

2241、val leu ser glu val gln leu val glu ser gly gly gly leu val gln

2242、            20                  25                  30

2243、pro gly gly ser leu arg leu ser cys ala ala ser gly phe thr phe

2244、        35                  40                  45

2245、ser asp ser trp ile his trp val arg gln ala pro gly lys gly leu

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2247、glu trp val ala trp ile ser pro tyr gly gly ser thr tyr tyr ala

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2249、asp ser val lys gly arg phe thr ile ser ala asp thr ser lys asn

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2252、            100                 105                 110

2253、tyr tyr cys ala arg arg his trp pro gly gly phe asp tyr trp gly

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2255、gln gly thr leu val thr val ser ala ala lys thr thr pro pro ser

2256、    130                 135                 140

2257、val tyr pro leu ala pro gly ser ala ala gln thr asn ser met val

2258、145                 150                 155                 160

2259、thr leu gly cys leu val lys gly tyr phe pro glu pro val thr val

2260、                165                 170                 175

2261、thr trp asn ser gly ser leu ser ser gly val his thr phe pro ala

2262、            180                 185                 190

2263、val leu gln ser asp leu tyr thr leu ser ser ser val thr val pro

2264、        195                 200                 205

2265、ser ser thr trp pro ser glu thr val thr cys asn val ala his pro

2266、    210                 215                 220

2267、ala ser ser thr lys val asp lys lys ile val pro arg asp cys gly

2268、225                 230                 235                 240

2269、cys lys pro cys ile cys thr val pro glu val ser ser val phe ile

2270、                245                 250                 255

2271、phe pro pro lys pro lys asp val leu thr ile thr leu thr pro lys

2272、            260                 265                 270

2273、val thr cys val val val asp ile ser lys asp asp pro glu val gln

2274、        275                 280                 285

2275、phe ser trp phe val asp asp val glu val his thr ala gln thr gln

2276、    290                 295                 300

2277、pro arg glu glu gln phe asn ser thr phe arg ser val ser glu leu

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2279、pro ile met his gln asp trp leu asn gly lys glu phe lys cys arg

2280、                325                 330                 335

2281、val asn ser ala ala phe pro ala pro ile glu lys thr ile ser lys

2282、            340                 345                 350

2283、thr lys gly arg pro lys ala pro gln val tyr thr ile pro pro pro

2284、        355                 360                 365

2285、lys glu gln met ala lys asp lys val ser leu thr cys met ile thr

2286、    370                 375                 380

2287、asp phe phe pro glu asp ile thr val glu trp gln trp asn gly gln

2288、385                 390                 395                 400

2289、pro ala glu asn tyr lys asn thr gln pro ile met asp thr asp gly

2290、                405                 410                 415

2291、ser tyr phe val tyr ser lys leu asn val gln lys ser asn trp glu

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2293、ala gly asn thr phe thr cys ser val leu his glu gly leu his asn

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2296、    450                 455                 460

2297、<210>  33

2298、<211>  234

2299、<212>  prt

2300、<213>  小家鼠

2301、<400>  33

2302、met val leu gln thr gln val phe ile ser leu leu leu trp ile ser

2303、1               5                   10                  15

2304、gly ala tyr gly asp ile gln met thr gln ser pro ser ser leu ser

2305、            20                  25                  30

2306、ala ser val gly asp arg val thr ile thr cys arg ala ser gln asp

2307、        35                  40                  45

2308、val ser thr ala val ala trp tyr gln gln lys pro gly lys ala pro

2309、    50                  55                  60

2310、lys leu leu ile tyr ser ala ser phe leu tyr ser gly val pro ser

2311、65                  70                  75                  80

2312、arg phe ser gly ser gly ser gly thr asp phe thr leu thr ile ser

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2314、ser leu gln pro glu asp phe ala thr tyr tyr cys gln gln tyr leu

2315、            100                 105                 110

2316、tyr his pro ala thr phe gly gln gly thr lys val glu ile lys arg

2317、        115                 120                 125

2318、ala asp ala ala pro thr val ser ile phe pro pro ser ser glu gln

2319、    130                 135                 140

2320、leu thr ser gly gly ala ser val val cys phe leu asn asn phe tyr

2321、145                 150                 155                 160

2322、pro lys asp ile asn val lys trp lys ile asp gly ser glu arg gln

2323、                165                 170                 175

2324、asn gly val leu asn ser trp thr asp gln asp ser lys asp ser thr

2325、            180                 185                 190

2326、tyr ser met ser ser thr leu thr leu thr lys asp glu tyr glu arg

2327、        195                 200                 205

2328、his asn ser tyr thr cys glu ala thr his lys thr ser thr ser pro

2329、    210                 215                 220

2330、ile val lys ser phe asn arg asn glu cys

2331、225                 230

技术实现思路