用于人类基因疗法的ELOVL2构建体的制作方法

本公开涉及生物化学和医学领域。更特别地，本公开涉及用于治疗眼部疾病的elovl2基因疗法的方法和组合物。

背景技术：

1、长链和极长链多不饱和脂肪酸(分别为lc-pufa和vlc-pufa)已被证明在多种生物过程中至关重要。它们被广泛认为在多种组织中用作：1)能量来源，2)结构膜组分，以及3)信号转导途径中的关键介质。

2、lc-pufa不能由人类从头合成，并且较短链脂肪酸前体的饮食来源对于lc-pufa组织生物合成是必要的。较短链脂肪酸在一个过程中被“延长”，在该过程中，通过各种延长酶的作用，以逐步的方式添加2个碳。一种这样的延长酶elovl2已被证明在将二十二碳五烯酸(dpa)(22:5n-3)转化为dha(22:6n-3)中发挥重要作用。

3、序列表引用

4、本技术以电子格式与序列表一起提交。序列表作为名为vgenx003_seqlist.txt的文件提供，创建于2021年10月19日，其大小约为57kb。电子格式的序列表信息通过引用整体并入本文中。

技术实现思路

1、本公开提供了调整、维持或增加对象中elovl2酶的组织水平的方法。在一些实施方案中，方法包括向对象给予包含增加elovl2的组织水平的优化的多核苷酸序列的组合物。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq id no:2或与seq id no:2表现至少95％同一性的序列的优化的密码子。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq idno:3或与seq id no:3表现至少95％同一性的序列的优化的密码子。在一些实施方案中，多核苷酸序列还包含启动子、增强子、反向末端重复序列(itr)、聚腺苷酸化信号、信号序列，或以上的组合，其可以包括但不限于seq id no:4、5、6、7、8、9、11、12和15。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳或囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳和囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，病毒衣壳和囊膜独立地选自基于腺相关病毒的(aav)、基于腺病毒的、基于α病毒的、基于疱疹病毒的、基于逆转录病毒的、基于慢病毒的或基于痘苗病毒的。在一些实施方案中，病毒衣壳和囊膜可以包括但不限于seq id no:19、20、21和22。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列在非病毒递送系统中，其中多核苷酸序列可以与合成的聚合微颗粒结合或封装在合成的聚合微颗粒中。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列以dna小环形式。在一些实施方案中，方法还包括给予另外的治疗剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是抗补体剂或抗vegf剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是皮质类固醇、抗炎剂、脱甲基化剂，或以上的组合。在一些实施方案中，脱甲基化剂是地西他滨。在一些实施方案中，对象是人类。

2、本公开还提供了减少或慢化有需要的对象中的老化表型的方法。在一些实施方案中，方法包括向对象给予包含增加elovl2酶的组织水平的优化的多核苷酸序列的组合物。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq id no:2或与seq id no:2表现至少95％同一性的多核苷酸序列的序列。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq id no:3或与seq id no:3表现至少95％同一性的序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中，多核苷酸序列还包含启动子、增强子、反向末端重复序列(itr)、聚腺苷酸化信号、信号序列，或以上的组合，其可以包括但不限于seq id no:4、5、6、7、8、9、11、12和15。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳或囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳和囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，病毒衣壳和囊膜各自独立地选自基于腺相关病毒的(aav)、基于腺病毒的、基于α病毒的、基于疱疹病毒的、基于逆转录病毒的、基于慢病毒的或基于痘苗病毒的。在一些实施方案中，病毒衣壳和囊膜可以包括但不限于seq id no:19、20、21和22。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列在非病毒递送系统中，其中多核苷酸序列可以与合成的聚合微颗粒结合或封装在合成的聚合微颗粒中。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列为dna小环形式。

3、本公开还提供了治疗、减轻或预防年龄相关的眼部疾病或病况的方法。在一些实施方案中，方法包括向对象给予包含增加elovl2的组织水平的优化的多核苷酸序列的组合物。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq id no:2或与seq id no:2表现至少95％同一性的序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列包含seq idno:3或与seq id no:3表现至少95％同一性的序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列在载体中。在一些实施方案中，多核苷酸序列还包含启动子、增强子、反向末端重复序列(itr)、聚腺苷酸化信号、信号序列，或以上的组合，其可以包括但不限于seq id no:4、5、6、7、8、9、11、12和15。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳或囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含病毒衣壳和囊膜或非病毒递送系统。在一些实施方案中，病毒衣壳或囊膜各自独立地选自基于腺相关病毒的(aav)、基于腺病毒的、基于α病毒的、基于疱疹病毒的、基于逆转录病毒的、基于慢病毒的或基于痘苗病毒的。在一些实施方案中，病毒衣壳和囊膜可以包括但不限于seq idno:19、20、21和22。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列在非病毒递送系统中，其中多核苷酸序列可以与合成的聚合微颗粒结合或封装在合成的聚合微颗粒中。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列为dna小环形式。在一些实施方案中，组合物通过玻璃体内、视网膜下、结膜下、筋膜下或后部巩膜旁途径给予至眼睛。在一些实施方案中，年龄相关的眼部疾病是年龄相关的黄斑变性(amd)、糖尿病眼病、青光眼、低视力或干眼。

4、本公开还提供了组合物，其包含seq id no:2或与seq id no:2表现至少95％同一性的序列的优化的多核苷酸序列和载体。本公开还提供了组合物，其包含seq id no:3或与seq id no:3表现至少95％同一性的序列的优化的多核苷酸序列和载体。在一些实施方案中，组合物还包含seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12和seq id no 15中的至少一种。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列为小环形式。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含衣壳或囊膜，其各自独立地选自基于腺相关病毒、腺病毒、α病毒、疱疹病毒、逆转录病毒、慢病毒的载体或痘苗病毒。在一些实施方案中，衣壳和囊膜来自腺相关病毒(aav)。在一些实施方案中，优化的多核苷酸序列还包含启动子、增强子、内含子、反向末端重复序列(itr)、衣壳、囊膜、聚腺苷酸化信号、信号序列，或以上的组合。在一些实施方案中，组合物还包含另外的治疗剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是抗补体剂或抗vegf剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是地西他滨。在一些实施方案中，组合物配制用于玻璃体内给予。