一种脑脱细胞基质的制备方法

文档序号:29316022发布日期:2022-03-19 21:44阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种脑脱细胞基质的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:i)提取小鼠的脑作为脱细胞基质的原材料;ii)采用物理法、化学法和生物法对小鼠的脑进行脱细胞处理得到脑脱细胞基质。2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述物理法为对材料进行冻融、加压和/或机械搅拌;所述化学法为采用酸碱、非离子型除垢剂和/或离子型除垢剂处理材料;所述生物法为使用核酸酶、脂肪酶、螯合剂和/或毒素处理材料。3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括对步骤ii)所得的脑脱细胞基质进行冷冻干燥。4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤i)包括以下步骤:提取小鼠的脑后去除小脑并延冠状面切成两半,用pbs溶液清洗后作为原材料。5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤ii)中脱细胞处理包括以下步骤:a)用液氮反复冻融原材料2-5次;b)在20-30℃下用dh2o清洗5-15h;c)用2-6w/v%的脱氧胆酸钠溶液处理10-20h,用pbs溶液清洗20-60min;d)在35-38℃下用30-50ku/ml的dna酶ⅰ溶液处理0.5-2.5h,在20-30℃下用pbs溶液清洗20-60min,再用dh2o清洗3-5h;e)在20-30℃下用2-5v/v%的triton-x100溶液处理1-5h,再用pbs溶液清洗20-60min;f)在35-38℃下用30-50ku/ml的dna酶ⅰ溶液处理0.5-2.5h,在20-30℃下用pbs溶液清洗20-60min。6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤a)中冻融是指在液氮中冷冻5-15min,融化升温至室温,用pbs溶液清洗5-30min。7.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤b)-f)进行两到四次。8.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述dh2o、sdc溶液、pbs、dna酶ⅰ溶液、triton-x100溶液中包含0.5-2.5v/v%的青霉素-链霉素溶液。9.一种脑脱细胞基质,采用权利要求1-8任一项所述的制备方法获得。10.如权利要求9所述的脑脱细胞基质的用途,其特征在于,用于制备治疗创伤性脑损伤的基质材料或用于制备组织工程支架。

技术总结
本发明公开了一种脑脱细胞基质的制备方法,包括以下步骤:i)提取小鼠的脑作为脱细胞基质的原材料;ii)采用物理法、化学法和生物法对小鼠的脑进行脱细胞处理得到脑脱细胞基质。本发明的方法能够较好地保持生物组织的生物活性和完整性,保留了多种关键蛋白和因子,而且去细胞率高。基于此方法制备的脑脱细胞基质可用于构建复合生物支架、培养干细胞,并应用在创伤性脑损伤的修复与再生方面。在创伤性脑损伤的修复与再生方面。


技术研发人员:刘昌胜 陈曦 张雪薇 王碧雪
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:2022.01.07
技术公布日:2022/3/18
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