CLK2作为靶标在制备用于增强固有免疫的药物和/或抗病毒药物中的应用

本发明涉及生物医学，特别涉及clk2作为靶标在制备用于增强固有免疫的药物和/或抗病毒药物中的应用。

背景技术：

1、天然免疫系统是区别于适应性免疫系统的能够感知自我和非我的一种免疫系统。它在抵抗微生物的感染，抑制肿瘤的发生以及自免疫疾病中起着至关重要的作用。通过模式识别受体识别病原体，机体会开启信号调集各种免疫细胞来杀灭病原体。由于天然免疫在抵抗病原体外来入侵中起着重要的作用，这条信号通路的调节也非常精密，在应答完成后则会被负反馈调节机制关闭。转录因子nf-κb是免疫和炎症反应的关键调节因子。在哺乳动物中，nf-κb/rel家族由五个成员组成：p50、p52、p65(rel-a)、c-rel和rel-b，它们会形成同型或异二聚体，并在静息细胞中与称为iκb蛋白的抑制分子保持非活性复合物。nf-κb信号通路主要有两种：一是由病原体和炎症介质激活的规范通路，二是主要由发育线索激活的非规范通路。病理刺激通过典型途径激活的nf-κb最丰富的形式是p65:p50异二聚体。活化p65的过度增加和随后效应分子的反式激活是许多慢性疾病发病机制的组成部分，如类风湿性关节炎、炎症性肠病、多发性硬化甚至神经退行性病变。

2、固有免疫是机体在种系发育和进化过程中形成的天然免疫防御功能,即出生后就已具备的非特异性防御功能,也称为非特异性免疫。固有免疫涉及多种细胞和分子，例如巨噬细胞、自然杀伤细胞、补体、细胞因子(il、csf、ifn、tnf、tgf-β)、趋化因子(包括cc趋化因子，例如ccl1、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl6、ccl7、ccl8、ccl9、ccl10、ccl11、ccl12等，cxc趋化因子，例如cxcl1、cxcl2、cxcl3、cxcl4、cxcl5、cxcl6、cxcl7、cxcl8、cxcl9等，c趋化因子，cx3c趋化因子)、溶菌酶等等。增强固有免疫，有利于提高机体的抗病毒及抗肿瘤能力。

3、因此，有必要开发一种用于增强固有免疫的药物。

技术实现思路

1、本发明目的是提供clk2作为靶标在制备用于增强固有免疫的药物和/或抗病毒药物中的应用，本发明发掘出clk2的抑制剂tg003用于抗病毒的用途，提供了clk2蛋白作为靶点在开发或筛选或制备用于调节固有免疫的用途，提高机体的抗病毒及抗肿瘤能力。

2、在本发明的第一方面，提供了clk2作为靶标在制备用于增强固有免疫的药物和/或抗病毒药物中的应用。

3、进一步地，所述用于增强固有免疫的药物包括用于抑制clk2蛋白对p65蛋白的磷酸化小分子抑制剂或药物。所述clk2蛋白通过磷酸化p65蛋白导致p65蛋白的出核来调节固有免疫，尤其是通过nf-κb的转录来调节固有免疫。

4、进一步地，所述用于增强固有免疫的药物包括clk2的抑制剂tg003。

5、所述小分子抑制剂tg003，其化学式为c13h15no2s，分子量为249.33。所述抑制剂是非天然的，是由人工合成的。所述抑制剂能够结合clk2并且抑制其激酶活性，从而抑制其对p65的磷酸化以及p65的出核，进而上调p65对下游基因的转录，例如上调ifn-β的转录。

6、进一步地，所述tg003通过与atp竞争性结合clk2蛋白从而抑制clk2蛋白的激酶活性，最终抑制clk2蛋白对p65蛋白的磷酸化从而介导的p65的核输出，通过p65调控i型干扰素和趋化因子的转录来调节固有免疫。clk2的抑制剂tg003能够抑制clk2的激酶活性，从而阻断clk2对p65的磷酸化，增强固有免疫，提高机体的抗病毒及抗肿瘤能力。

7、进一步地，所述的i型干扰素和趋化因子的转录是由rna病毒和/或dna病毒诱导的i型干扰素和趋化因子的转录；

8、所述rna病毒选自艾滋病病毒、烟草花叶病毒、sars病毒、mers病毒、埃博拉病毒(ebola virus)、西班牙流感病毒、甲型h1n1流感病毒和禽流感病毒中的至少一种；

9、所述dna病毒选自乙肝病毒、天花病毒、水痘-带状疱疹病毒、eb病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒中的至少一种。

10、进一步地，所述用于增强固有免疫的药物包括用于治疗选自病毒感染、细菌感染、寄生虫和癌症之疾病的药物。

11、进一步地，所述病毒包括rna病毒和dna病毒。优选地所述病毒选自：疱疹病毒科、弹状病毒科、丝状病毒科、正粘病毒科、副粘病毒科、冠状病毒科、小rna病毒科、嗜肝dna病毒科、黄病毒科、乳头瘤病毒科、痘病毒科、和逆转录病毒科，更优选地所述病毒选自：艾滋病病毒、烟草花叶病毒、sars病毒、mers病毒、埃博拉病毒(ebola virus)、西班牙流感病毒、甲型h1n1流感病毒和禽流感病毒。

12、所述细菌选自革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。优选地，所述细菌选自肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、沙门氏菌(salmonella)、脑膜炎双球菌(meningococcus)、表皮葡萄球菌(staphylococcusepidermidis)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、大肠杆菌(escherichiacoli)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)、产酸克雷伯氏菌(klebsiellaoxytoca)、阴沟肠杆菌(enterobacter cloacae)、弗氏柠檬酸杆菌(citrobacterfreundii)、绿脓假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)和波美不动杆菌(acinetobacterbaumanni)。

13、所述寄生虫是细胞内寄生虫，优选地选自疟原虫、弓形虫、锥虫、血吸虫、丝虫和利什曼原虫。

14、所述所述癌症选自卵巢癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌、恶性黑色素瘤、头颈癌、肉瘤、胆管癌、膀胱癌、肾癌、结肠癌、胎盘绒毛膜癌、子宫颈癌、睾丸癌、子宫癌和白血病。

15、在本发明的第二方面，提供了一种用于增强固有免疫的药物，所述药物包含有效量的clk2的抑制剂tg003，以及任选地药学上可接受的载体。

16、所述药物可以与其它治疗药物联合使用。向有此需要的对象施用所述的tg003或者所述的药物组合物，增强固有免疫。其中所述施用选自肌肉注射、皮内注射、皮下注射、静脉注射、粘膜施用及其任意组合。

17、所述“药学上可接受的载体”可选自：水、缓冲水溶液、、等渗盐溶液如pbs(磷酸盐缓冲液)、葡萄糖、甘露醇、右旋葡萄糖、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、0.3％甘油、透明质酸、乙醇或聚亚烷基二醇如聚丙二醇、甘油三酯等。所用可药用载体的类型尤其依赖于根据本发明的组合物是否配制为用于经口、鼻、皮内、皮下、肌内或静脉施用。根据本发明的组合物可包含润滑剂、防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、着色物质、矫味物质和/或芳香物质等作为添加剂。

18、本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：

19、本发明提供clk2作为靶标在制备用于增强固有免疫的药物和/或抗病毒药物中的应用，本技术的发明人在研究中出乎意料的发现clk2(cdc like kinase 2)能够在核内结合激活的p65并对其进行磷酸化，导致p65的转录激活终止，并且被运送出核，从而负调控机体的固有免疫。发明人还意外发现clk2的抑制剂tg003能够抑制clk2的激酶活性，从而阻断clk2对p65的磷酸化，增强固有免疫，提高机体的抗病毒及抗肿瘤能力。