用于预防和改善老年痴呆的中药组合物、其制备方法及其应用

1.本发明涉及医药学技术领域，具体而言，涉及用于预防和改善老年痴呆的中药组合物、其制备方法及其应用。


背景技术：

2.阿尔茨海默病(ad)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征，病因迄今未明，且其多发于老年人。由于中药治疗老年痴呆症有比较悠久且丰富的经验，中药治疗是有效缓解老年痴呆症的有效方法之一，但是真正有效且安全的中药极少。
3.鉴于此，特提出本发明。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供用于预防和改善老年痴呆的中药组合物、其制备方法及其应用。本发明实施例提供的中药组合物对aβ
25-35
诱导损伤的pc12细胞发挥保护作用，降低pc12细胞的凋亡水平，增加ad模型大鼠在水迷宫中穿越平台次数，显著改善ad大鼠的认知功能，可以用于预防和显著改善老年痴呆。
5.本发明是这样实现的：
6.第一方面，本发明提供一种用于预防和改善老年痴呆的中药组合物，以重量份计，形成所述中药组合物的活性成分的原料包括：3.5-4份人参、1.5-2份甘草、0.5-1份肉桂、5-5.5份杏仁以及2.8-3.2份生姜。
7.在可选的实施方式中，形成所述中药组合物的活性成分的原料为3.5-4份所述人参、1.5-2份所述甘草、0.5-1份所述肉桂、5-5.5份所述杏仁以及2.8-3.2份所述生姜；
8.优选地，形成所述中药组合物的活性成分的原料为3.73份所述人参、1.86份所述甘草、0.75份所述肉桂、5.33份所述杏仁以及3份所述生姜。
9.第二方面，本发明提供一种前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物的制备方法，包括：对人参、甘草、肉桂、杏仁和生姜进行提取形成含有活性成分的所述中药组合物。
10.在可选的实施方式中，包括：将所述人参、所述甘草、所述肉桂、所述杏仁、所述生姜和水混合进行浸泡，而后进行煎煮，合并煎煮液后依次进行浓缩和粉碎。
11.在可选的实施方式中，浸泡的条件包括：水用量为总药量3-12倍体积，浸泡时间为1-2小时，浸泡温度25-35℃；
12.优选地，煎煮的条件包括：煎煮次数2次以上，每次煎煮时间为1-1.5h，每次煎煮水的用量为总药量3-12倍体积；
13.优选地，浓缩的条件包括：真空度为-0.05～-0.08mpa，浓缩温度为50～70℃；浓缩
后得到的稠膏的相对密度为1.25～1.28；
14.优选地，粉碎后的粒径为0.005mm-0.02mm。
15.第三方面，本发明提供一种中药药剂，其包括药学上可接受的辅料和前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物。
16.在可选的实施方式中，所述辅料包括填充剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、成膜材料、矫味剂和注射用溶剂中的至少一种。
17.在可选的实施方式中，所述中药药剂的剂型为口服制剂；
18.优选地，所述口服制剂包括散剂、普通片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂、微丸剂、颗粒剂、口腔崩解片和口腔速溶膜剂中的至少一种。
19.第四方面，本发明提供一种前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物在制备预防和改善老年痴呆的药剂中的应用。
20.在可选的实施方式中，所述药剂包括对pc12细胞进行保护的药物；
21.优选地，所述药剂包括降低pc12细胞的凋亡水平的药物；
22.优选地，所述药剂包括增加改善ad大鼠的认知功能的药物。
23.本发明具有以下有益效果：本发明实施例提供的中药组合物通过采用特定配比的人参、甘草、肉桂、杏仁和生姜进行配合对aβ
25-35
诱导损伤的pc12细胞发挥保护作用，降低pc12细胞的凋亡水平，增加ad模型大鼠在水迷宫中穿越平台次数，显著改善ad大鼠的认知功能，可以用于预防和显著改善老年痴呆。
附图说明
24.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
25.图1为本发明实验例1提供的对pc12细胞的保护作用结果图；图中，
*
p《0.05,
**
p《0.01vs.aβ
25-35
组；
##
p＜0.01vs.ctl组；
26.图2为本发明实验例2提供的老年痴呆模型大鼠的认知功能的作用结果图；图中，
***
p《0.001，
**
p《0.01vs.模型组；
###
p＜0.001vs.对照组；
27.图3为本发明实验例3提供的pc12细胞的保护作用结果图；图中，
**
p《0.01vs.aβ
25-35
组；
##
p＜0.01vs.ctl组；
28.图4为本发明实验例4提供的老年痴呆模型大鼠的认知功能的作用结果图；图中，
**
p《0.01vs.模型组；
##
p＜0.01vs.对照组。
具体实施方式
29.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
30.本发明实施例提供一种用于预防和改善老年痴呆的中药组合物，以重量份计，形
成所述中药组合物的活性成分的原料包括：3.5-4份人参、1.5-2份甘草、0.5-1份肉桂、5-5.5份杏仁以及2.8-3.2份生姜。
31.本发明实施例提供的中药组合物通过采用特定配比的人参、甘草、肉桂、杏仁和生姜进行配合对aβ
25-35
诱导损伤的pc12细胞发挥保护作用，降低pc12细胞的凋亡水平，增加ad模型大鼠在水迷宫中穿越平台次数，显著改善ad大鼠的认知功能，可以用于预防和显著改善老年痴呆。
32.具体地，该中药组合物中以人参为君药，人参甘温，大补元气；以杏仁为臣药，杏仁苦温，化瘀通络；以肉桂为佐药，肉桂辛甘，温补肾元；以生姜和甘草为使药，甘草和生姜甘温，和中而调诸药，诸药合用，共奏益气通窍之功。
33.进一步地，形成所述中药组合物的活性成分的原料为3.5-4份所述人参、1.5-2份所述甘草、0.5-1份所述肉桂、5-5.5份所述杏仁以及2.8-3.2份所述生姜；例如，形成所述中药组合物的活性成分的原料为3.73份所述人参、1.86份所述甘草、0.75份所述肉桂、5.33份所述杏仁以及3份所述生姜。或者原料为3.5份所述人参、1.5份所述甘草、0.5份所述肉桂、5份所述杏仁以及2.8份所述生姜。或者原料为4份所述人参、2份所述甘草、1份所述肉桂、5.5份所述杏仁以及3.2份所述生姜。或者原料为3.5份所述人参、2份所述甘草、0.5份所述肉桂、5.5份所述杏仁以及3.2份所述生姜。或者原料为3.8份所述人参、1.5份所述甘草、0.75份所述肉桂、5份所述杏仁以及2.9份所述生姜。
34.第二方面，本发明实施例提供一种前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物的制备方法，包括：对人参、甘草、肉桂、杏仁和生姜进行提取形成含有活性成分的所述中药组合物。具体地：
35.将人参、所述甘草、所述肉桂、所述杏仁、所述生姜和水混合进行浸泡；其中，浸泡的条件包括：水用量为总药量3-12倍体积，浸泡时间为1-2小时，浸泡温度25-35℃。
36.需要说明的是，进行浸泡可以是单独的原料药材与水进行浸泡，也可以是将上述原料药材混合后再与水进行浸泡。
37.而后进行煎煮，煎煮的条件包括：煎煮次数2次以上，每次煎煮时间为1-1.5h，每次煎煮水的用量为总药量3-12倍体积。
38.合并每次煎煮得到的煎煮液，而后依次进行浓缩和粉碎，浓缩的条件包括：真空度为-0.05～-0.08mpa，浓缩温度为50～70℃；浓缩后得到的稠膏的相对密度为1.25～1.28；粉碎后的粒径为0.005mm-0.02mm。
39.采用上述制备方法和制备条件有利于提升中药组合物的效果。
40.第三方面，本发明提供一种中药药剂，其包括药学上可接受的辅料和前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物。其中，辅料包括填充剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、成膜材料、矫味剂和注射用溶剂中的至少一种。辅料也可以包括其他现有技术中的用于制备药剂或者药学上可以接受的其他辅料。
41.进一步地，填充剂包括但不限于淀粉、糊精、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、葡萄糖和羧甲基纤维素钠中的一种或多种。
42.稀释剂包括但不限于淀粉、糊精、预胶化淀粉、乳糖、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙、氧化镁、碳酸镁、氢氧化铝凝胶、β-环糊精、甘露醇、山梨醇、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和羟甲基纤维素钠中的一种或多种。
43.粘合剂包括但不限于蒸馏水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素和乙基纤维素和羟丙甲纤维素中的一种或多种。
44.润滑剂包括但不限于十二烷基硫酸镁、聚乙二醇、微粉硅胶、硬脂酸镁和滑石粉中的一种或多种。
45.崩解剂包括但不限于淀粉(玉米、马铃薯)、微晶纤维素、海藻酸、海藻酸钠、离子交换树脂、泡腾酸-碱系统、羟丙基淀粉、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、低取代羟丙基纤维素、部分α化淀粉和微晶纤维素中的一种或多种。
46.成膜材料包括但不限于明胶、虫胶、阿拉伯胶、琼脂、淀粉、糊精、pva05-88、pva17-88和乙烯-醋酸乙烯共聚物(eva)中的一种或多种。
47.矫味剂包括但不限于糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、甜菊苷以及香精类中的一种或多种。
48.注射用溶剂包括但不限于注射用水、麻油、茶油、花生油、玉米油、橄榄油、棉籽油、豆油、蓖麻油及桃仁油、油酸乙酯、苯甲酸苄酯、丙二醇、聚乙二醇400、二甲基乙酰胺(dma)、乙醇和甘油中的一种或多种。
49.上述具体选择填充剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、成膜材料、矫味剂和注射用溶剂的类型仅为本发明实施例的举例，上述辅料并不限于上述物质，可以采用现有技术中能够实现其功效的对应的辅料。
50.进一步地，该中药药剂的剂型为口服制剂；例如，散剂、普通片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂、微丸剂、颗粒剂、口腔崩解片和口腔速溶膜剂中的至少一种。
51.但是可以理解的是，该中药药剂也可以为非口服制剂，只是优选为口服制剂而已，且上述口服制剂的具体制剂类型仅为本发明实施例的举例，也可以采用现有技术中的其他口服制剂。
52.第四方面，本发明提供一种前述实施方式所述的用于预防和改善老年痴呆的中药组合物在制备预防和改善老年痴呆的药剂中的应用。具体地，药剂包括对pc12细胞进行保护的药物、降低pc12细胞的凋亡水平的药物；或者增加改善ad大鼠的认知功能的药物。
53.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
54.实施例1
55.本实施例提供一种中药组合物的制备方法，包括：
56.取人参3730g、甘草1860g、肉桂750g、杏仁5330g和生姜1000片约3000g，置入恒温水浴锅中，加入6倍量的蒸馏水，浸泡1小时，浸泡温度为28℃。而后进行煎煮，总共加蒸馏水煎煮两次，煎煮温度为100℃。第一次加入蒸馏水6倍量体积，煎煮1小时，第一次煎煮完成后进行过滤，得到药液1；第二次加入蒸馏水6倍量体积，煎煮1小时，第二次煎煮完成后进行过滤，得到药液2。待两次煎煮完成后，将药液1与药液2充分混匀后得到药液3，将药液3置于多功能浓缩罐中，进行减压浓缩，设置真空度为-0.06mpa，浓缩温度为60℃，浓缩至相对密度为1.25(60℃)的稠膏，真空干燥，用粉碎机粉碎，选择粉碎后粒径为0.005mm-0.02mm的干膏粉末即为中药组合物。
57.实施例2-实施例8
58.实施例2-实施例8分别提供一种中药组合物的制备方法，其与实施例1提供的中药
组合物的制备方法操作基本相同，区别仅在于部分条件不同，具体条件参见下表：
[0059][0060]
实验例1
[0061]
对aβ
25-35
诱导pc12细胞凋亡模型的保护作用
[0062]
方法：
[0063]
收集处于对数生长期的pc12细胞，以1
×
105/ml的密度接种到96孔板中，空白组不加细胞。每孔均加入200μl的细胞混悬液，每组6个复孔，置于37℃、5％co2的培养箱中培养。观察细胞生长情况，待细胞铺满瓶底70％左右时，弃去旧培养液，弃去旧培养液，加入含不同制备方法制得的中药组合物提取物即实施例1-8制备得到的中药提取(采用pbs溶解，剂量为20μg/ml)处理4小时，加入浓度为20μm的aβ
25-35
新鲜培养液，200μl/孔，孵育24h后检测细胞存活率。
[0064]
结果参见表1和图1，图1中横坐标的1-8，分别表示实施例1-8。
[0065]
表1细胞存活率
[0066][0067]
根据表1和图1可知，不同条件制备得到的中药组合物对aβ
25-35
诱导pc12细胞均具有一定的保护作用。其中，经统计分析，与aβ
25-35
组相比，实施例1(均值：79.67)、实施例4(均值：78.50)和实施例5(均值：78.17)制备得到的中药组合物对pc细胞的保护作用更明显，统计学差异更大(p＜0.01)。提示：实施例1、实施例4和实施例5制备得到的中药组合物对pc12的保护作用最佳。
[0068]
实验例2
[0069]
中药组合物对老年痴呆模型大鼠的认知功能的作用
[0070]
方法：
[0071]
通过侧脑室注射aβ
25-35
构建大鼠老年痴呆模型，选择上述实验例1中细胞实验中保
护作用最佳的3种制备方法制得的中药组合物进行动物实验。具体地，将大鼠随机分为对照组、模型组、实验组1(即实施例1制备得到的中药组合物)、实验组2(即实施例4制备得到的中药组合物)、实验组3(即实施例1制备得到的中药组合物)以及吡拉西坦组为阳性对照组，每组8只。除对照组外，其余各组大鼠均于侧脑室注入10μg/μl的aβ
25-35 5μl，对照组使用同样的方法注入同样量的生理盐水。大鼠注射aβ
25-35
后的第2天，放入水迷宫里评估其学习记忆能力，检测老年痴呆模型的制备成功与否。随后，实验组均口服给予中药组合物提取物，对照组、模型组于相同的时间点口服同样剂量的生理盐水。疗程为28天，在服药后第21天再次将所有大鼠放入水迷宫里评估其学习记忆能力，实验共经历6天时间，前5天时间评估研究对象自进水至站上平台的用时长短，也称逃避潜伏期，在每1天的时间中，所有的大鼠均从水迷宫的4处地点投入水中。记录并平均出第1、3、5天的数值，第6天把水迷宫中的平台撤去后，分别将实验对象从相同的地点投入水中，记录2min内每一只大鼠穿越平台所在地点的次数。
[0072]
结果参见表2和图2。
[0073]
表2穿越平台次数
[0074]
组别对照组模型组实验组1实验组2实验组3吡拉西坦均值15.695.1011.5610.389.7513.08标准差2.582.002.892.182.073.72
[0075]
根据结果可知，本发明实施例提供的中药组合物具有增加ad模型大鼠穿越平台次数，改善认知功能的作用，其中，经统计分析后确定与模型组相比，实验组1即实施例1制备得到的中药组合物的效果最佳(均值：11.56，p＜0.001，优于实验组2(均值：10.38，p＜0.01)和实验组3(均值：9.75，p＜0.01))，与阳性药吡拉西坦相当(p＞0.05)。
[0076]
实验例3
[0077]
参照实验例1的方法对下述提取物进行实验，具体提取物包括：
[0078]
实施例1制备得到的中药组合物(即图3中的组合物)；
[0079]
对比例1即组合物2：甘草1860g、肉桂750g、杏仁5330g和生姜1000片约3000g，参照实施1的制备方法制备得到中药组合物；
[0080]
对比例3即组合物3：肉桂750g、杏仁5330g和生姜1000片约3000g参照实施1的制备方法制备得到中药组合物；
[0081]
人参、甘草、肉桂、杏仁、生姜各自分别采用实施例1的制备方法得到对应的中药提取物。
[0082]
表3细胞存活率
[0083][0084]
结果参见表3和图3，根据表3和图3可知，经统计分析，与aβ
25-35
组相比，组合物即实
施例1制备得到的中药组合物具有明显的保护pc12细胞的作用(p＜0.01)，与aβ
25-35
组相比，组合物2(p＞0.05)、组合物3(p＞0.05)、人参(p＞0.05)、甘草(p＞0.05)、肉桂(p＞0.05)、杏仁(p＞0.05)和生姜(p＞0.05)均无法增加细胞的存活率，即上述组分药物均无保护作用，说明更改本发明实施例药物的配方会导致其制备得到的中药组合物不能预防或改善老年痴呆。
[0085]
实验例4
[0086]
参照实验例2的方法对下述提取物进行实验，具体提取物包括：
[0087]
实施例1制备得到的中药组合物(即图3中的组合物)；
[0088]
对比例1即组合物2：甘草1860g、肉桂750g、杏仁5330g和生姜1000片约3000g，参照实施1的制备方法制备得到中药组合物；
[0089]
对比例3即组合物3：肉桂750g、杏仁5330g和生姜1000片约3000g参照实施1的制备方法制备得到中药组合物；
[0090]
人参、甘草、肉桂、杏仁、生姜各自分别采用实施例1的制备方法得到对应的中药提取物。
[0091]
结果参见表4和图4。
[0092]
表4穿越平台次数
[0093][0094]
根据表4和图4可知，经统计分析后确定与模型组相比，组合物即实施例1制备得到的中药组合物具有增加ad模型大鼠穿越平台次数，改善认知功能的作用(p＜0.01)，与阳性药吡拉西坦相当(p＞0.05)。而与模型组相比，组合物2(p＞0.05)、组合物3(p＞0.05)、人参(p＞0.05)、甘草(p＞0.05)、肉桂(p＞0.05)、杏仁(p＞0.05)、生姜(p＞0.05)单药均无统计学差异，即上述药物无明显的改善认知功能的作用，说明更改本发明实施例药物的配方会导致其制备得到的中药组合物不能预防或改善老年痴呆。
[0095]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。