技术特征：
1.一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其特征在于：包括温敏型水凝胶基质以及靶向载药纳米粒子，所述靶向载药纳米粒子包括抗菌剂以及载体，所述载体为叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子。2.根据权利要求1所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其特征在于：所述温敏型水凝胶基质包括壳聚糖接枝普朗尼克；所述抗菌剂为盐酸多西环素。3.一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下具体操作步骤：1)壳聚糖接枝普朗尼克的制备：将普朗尼克、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶、三乙胺溶解于干燥的二氧六环中，室温下搅拌24～26h；随后除去溶剂，并在乙醚中沉淀两次以提纯残留物，干燥后得到单羧基普朗尼克粉末；将壳聚糖溶解于ph 4.5的磷酸盐缓冲盐水中，室温搅拌1～2h；随后向混合液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，以500～800rpm的转速搅拌15～20min后，加入n羟基琥珀酰亚胺，继续搅拌15～20min后，加入单羧基普朗尼克粉末，室温下搅拌24～26h；将所得反应液置于透析袋中，在去离子水中透析3天以除去未反应的化合物；最后将反应液以9000～10000rpm的转速离心2～5min，收集上清液，-80℃冷冻后置于冷冻干燥机中，冻干，得到产物壳聚糖接枝普朗尼克，并将其置于-20℃保存备用；2)介孔生物活性玻璃纳米粒子的制备：将十六烷基三甲基溴化铵溶解于去离子水中，30℃以下搅拌至完全溶解后，加入乙酸乙酯，继续搅拌至形成微乳滴，加入浓度为5mol/l的氨水，搅拌15～20min后，每隔30min依次加入正硅酸四乙酯、磷酸三乙酯和四水合硝酸钙；强力搅拌4～5h，使溶液逐渐变为不透明，形成白色沉淀；离心收集白色沉淀，用无水乙醇和去离子水分别洗涤3次，并在60℃下干燥24～26h，最后焙烧除去有机物和硝酸盐，得到介孔生物活性玻璃纳米粒子；3)介孔生物活性玻璃纳米粒子的叶酸接枝改性：将步骤2)获得的介孔生物活性玻璃纳米粒子分散于无水甲苯中，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，80℃下搅拌回流12～14h；离心收集沉淀，并用甲苯洗涤若干次，80℃下真空干燥后得到氨基改性的介孔生物活性玻璃纳米粒子；将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶解于冰冷的叶酸水溶液中，然后再加入氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子，将上述反应液在室温下搅拌24～26h，离心收集沉淀，用去离子水洗涤若干次，最后冻干48h得到叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子；4)靶向载药纳米粒子的制备：将盐酸多西环素溶解于磷酸盐缓冲盐水中，随后将步骤3)获得的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子在盐酸多西环素的磷酸盐缓冲盐水溶液中浸泡，并在室温下搅拌24～26h；最后离心完全去除上清液，得到负载有负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子，即所述靶向载药纳米粒子。5)可注射凝胶的制备：将步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克溶解于磷酸盐缓冲盐水中，混合均匀后向溶液中加入步骤4)制得的负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子，混
合均匀后即得所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶。4.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤1)中为使用旋转蒸发仪除去溶剂二氧六环；所用透析袋的截留分子量为8000-14000da。5.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤1)中壳聚糖以及单羧基普朗尼克使用量的重量份数比为0.2～0.3。6.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤2)中为在空气下以1℃
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min-1
的升温速率升温至600℃后焙烧5h以除去有机物和硝酸盐。7.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤3)中每100mg介孔生物玻璃纳米粒子对应添加1ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷进行氨基改性。8.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤3)中叶酸水溶液的浓度为500μg/ml，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐为按照0.15mol/l的浓度溶解于叶酸水溶液中，氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子为按照9mg/ml的浓度溶解于叶酸水溶液中。9.根据权利要求3所述的具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤5)中壳聚糖接枝普朗尼克为按照20％的质量体积比溶解于磷酸盐缓冲盐水中，负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子为按照2mg/ml的浓度比例加入至溶液中。10.根据权利要求1所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶在控制牙周炎症、促进牙槽骨的修复和再生的应用。
技术总结
本发明涉及一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶及其制备方法和应用；所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶包括温敏型水凝胶基质以及靶向载药纳米粒子，所述靶向载药纳米粒子包括抗菌剂以及叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子。所述温敏型水凝胶基质处于低温时呈液体状态，可直接注射至所需使用区域的软组织，并随着温度升高在原位呈现凝胶状态，结合靶向载药纳米粒子实现精准给药及药物缓释作用；同时利用生物活性玻璃纳米粒子良好的生物相容性、骨传导性和骨再生性，应用于牙周可有效抑制牙槽骨的损伤并帮助牙槽骨的修复和再生，且叶酸修饰使其能够精准靶向牙周部位的巨噬细胞，进行免疫调节，从而改善牙周部位的炎症状况。部位的炎症状况。部位的炎症状况。
技术研发人员：冯龙宝 郭瑞
受保护的技术使用者：广州创赛生物医用材料有限公司
技术研发日：2022.04.02
技术公布日：2022/7/29