一种化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物及其制备方法与流程

1.本发明涉及化妆品制备技术领域，特别涉及一种化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物及其制备方法。


背景技术：

2.皮肤角质层是皮肤的最外层，由无细胞核的死亡层状角质细胞组成，角质层的主要组分为结构蛋白、细胞间脂质、天然保湿因子和桥粒等。皮肤的屏障功能主要依赖于角质层。 他以屏障的形式提供物理保护，阻止水分流失；阻止可溶性有害物质从外部进入体内；阻止紫外线伤害皮肤组织等作用。破坏角质层细胞的有序分化是皮肤干燥的主要原因之一。角质层结构蛋白就是角蛋白，角蛋白有很高的机械强度，不溶于水，能够给皮肤提供屏障作用。角质层细胞间脂质主要由神经酰胺、脂肪酸和胆固醇组成，能够为皮肤的保湿起作用。神经酰胺主要是维持角质层的弹性。角质层中还含有天然保湿因子nmf，由氨基酸混合物、氨基酸衍生物及聚丝蛋白水解产物共同组成，这些高度水溶性的元素从外界环境和皮肤内部中吸收水分保持在角质层中，防止异常的皮肤皲裂和脱屑。桥粒是一种跨膜蛋白，使角质层细胞之间相互连接形成网状结构，帮助角质层支撑和抵御外界压力与刺激。
3.自由基的形成被广泛认为是皮肤衰老的关键机制。自由基是一种化学性质极为活泼的原子或原子团，具有高度的反应能力，可直接损伤各种细胞膜、脂质、蛋白质、rna和dna。uv暴露和环境污染等外界因素可通过在皮肤中产生自由基而加速皮肤衰老。抗氧化剂通过清除自由基和抑制后续氧化反应来保护细胞免于氧化应激损伤。随着皮肤的老化，细胞自身的抗氧化能力下降，需要额外的抗氧化补充剂来对抗在内部和外部产生的氧化应激。抗氧化剂的局部施用被广泛用于护肤品中以防止皮肤老化。
4.肌肽是一种二肽，由β-丙氨酸和l-组氨酸两种氨基酸组成。该二肽在生物体内可合成，存在于机体多种组织中。肌肽可以通过保护线粒体功能及减少活性氧自由基的产生达到抗细胞衰老的作用；还可以保护蛋白质不被糖基化，起到抗糖化的作用。作为一种自由基清除剂、抗氧化剂和抗糖剂，肌肽已在国内外化妆品领域得到广泛研究和应用。
5.d-生物素又名维生素b7，自然存在于动植物体内，并参与机体三大代谢，与人体正常生长发育、维生素c的合成、脂肪蛋白质代谢有密切关系。d-生物素应用广泛，可以用于治疗多种医学症状，如湿疹，痤疮等。将d-生物素应用于化妆品，可以影响角蛋白的组成并促进细胞间脂质层的形成，从而改善皮肤的天然屏障功能，还可以显着减少皮肤中的细纹；用作皮肤和头发的调理剂，d-生物素可以滋润皮肤，增加皮肤和头发的光泽；抑制油脂分泌过旺，作抗脂溢剂。亦可添加到祛痘类、发用、护肤类等产品中，具有广阔前景。
6.d-生物素25℃下100ml水中仅能溶解0.022g，且在低温下会析出晶体，生物利用度低且无法通过化妆品低温稳定性考察，使得d-生物素无法有效应用于化妆品配方。因此，需要通过增大其溶解度以便发挥其最大潜力。中国发明专利cn113768928a提供了一种通过混悬液乳化制备生物素微胶囊的方法，可以改善口服生物利用率较低的缺陷。然而，混悬液乳化应用只限于口服制剂，且未溶解的生物素颗粒无法均匀的附着在化妆品体系当中，故在
化妆品行业应用仍具有局限性。
7.鸟苷能参与各种细胞活动，是人体多种生化过程中的重要生化物质。外用可以直接快速的补充细胞的能量，促进皮肤胶原蛋白、弹性蛋白和纤维蛋白的生物合成，是细胞的活化剂，用于皮肤的多方面调理，并有抗炎作用。但鸟苷的水溶性很差，18℃时，1320ml水中仅能溶解1g，且在低温时溶解度更低，极易析出，并且在各种溶剂中也很难溶解，极大的限制了在化妆品中的应用。


技术实现要素：

8.本发明要解决的技术问题是，提供一种化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物，该组合物常温下同时含有高达10%生物素和0.1%鸟苷。本发明能同时解决生物素和鸟苷的溶解性问题，且制备过程简单，高效，制备成本低，可将生物素溶解度提升至10%以上，是现有生物素溶解度的400倍，可将鸟苷溶解度提高6倍以上，且在0~10℃下不析出，应用于化妆品中可通过低温测试。
9.为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物，其特征在于： 由以下质量百分比的组分组成：59.5~94.9%水和5.1~40.5%活性成分，所述活性成分由助溶剂、生物素、鸟苷按质量比1.5~3:1:0.01~0.05组成；所述助溶剂为肌肽、脱羧肌肽、赖氨酸、精氨酸、组氨酸中的一种或他们的任意比混合物，所述生物素为d-生物素，所述d-生物素又名维生素b7。
10.作为本发明的进一步优选，所述助溶剂优选为肌肽，cas号：305-84-0，在已使用化妆品原料目录（2021版）上序号是03150，纯度＞90%。
11.所述生物素，cas号：58-85-5，在已使用化妆品原料目录（2021版）上序号是06024，纯度＞90%。
12.所述鸟苷，cas号118-00-3，在已使用化妆品原料目录（2021版）上序号是04819，纯度＞90%。
13.本发明还提供一种化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，其特征在于采用以下步骤：a、按如下质量百分比称取59.5~74.9%水和25.1~40.5%活性成分，所述活性成分由助溶剂、生物素、鸟苷按质量比1.5~3:1:0.01~0.05组成；所述助溶剂为肌肽、脱羧肌肽、赖氨酸、精氨酸、组氨酸中的一种或他们的任意比混合物；所述生物素为d-生物素；b、将步骤a称取的助溶剂和水进行混合，在20~70℃下搅拌2~5min至完全溶解，得助溶剂水溶液；c、将步骤a称取的生物素加入步骤b所得助溶剂水溶液中，20~70℃下搅拌至完全溶解，得生物素溶液；d、将步骤a称取的鸟苷加入到步骤c所得生物素溶液中，20~70℃下搅拌5~10min至完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
14.上述制备步骤不能颠倒顺序，否则不能得到均匀溶液，即使高温溶解，低温下也会析出。
15.本发明所得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物，可与水任意比例互溶，且在0~10℃环境下无析出。
16.本发明采用的助溶剂能够在水中形成电离环境，形成有利于d-生物素溶解的分子构态，可通过键合作用将d-生物素分子分散化，通过自组装的形式构成助溶生物素组合物，从而提升d-生物素在水溶液中的溶解度。助溶剂和d-生物素组成的两亲性环境，可以提升鸟苷的溶解度，从而方便将鸟苷与生物素一起溶解于水中，且能保证低温不析出。
17.本发明的有益效果在于：1）同时解决了生物素和鸟苷的溶解问题；2）形成的组合物可在水中任意比例稀释，不会析出；3）制备过程简单，高效，制备成本低，不使用其他有机溶剂；4）形成的组合物具有协同增效作用，具有优异的提亮抗皱、舒缓修复效果。
18.为证明本发明的有益效果，进行了如下实验。
19.、稳定性实验按表1所示组分及加料顺序，制备实施例1~6待测样品，以及编号为a~z及α的待测样品。加料顺序123即为先向水中加入序号1的助溶剂，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号2的d-生物素，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号3的鸟苷，20~70℃下搅拌至完全溶解。不能完全溶解的，搅拌30分钟后停止搅拌，记录实验结果。加料顺序为132即为先向水中加入序号1的助溶剂，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号3的鸟苷，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号2的d-生物素，20~70℃下搅拌至完全溶解。不能完全溶解的，搅拌30分钟后停止搅拌，记录实验结果。加料顺序为213即为先向水中加入序号2的d-生物素，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号1的助溶剂，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号3的鸟苷，20~70℃下搅拌至完全溶解。不能完全溶解的，搅拌30分钟后停止搅拌，记录实验结果。加料顺序为321即为先向水中加入序号3的鸟苷，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号2的d-生物素，20~70℃下搅拌至完全溶解，再加入序号1的助溶剂，20~70℃下搅拌至完全溶解。不能完全溶解的，搅拌30分钟后停止搅拌，记录实验结果。依此类推。
20.表1 组合物情况
将实施例1~6的待测样品以及编号为a~ z及α的待测样品分别进行5℃，25℃，45℃及光照条件下进行稳定性实验，看是否有不溶和析出现象，以及样品颜色和气味稳定性情况，并于1，2，4周观察样品溶液稳定性情况，结果如表2。
21.表2稳定性试验测试结果
注：
“○”
表示稳定性较好，无颜色变化，无气味变化，无析出。“/”表示不溶解或有析出或颜色气味有异常。
22.从表2所示的测试结果来看，严格按照本发明所述步骤制备的组合物可同时满足低温、高温稳定性需求，而改变顺序或缺少任意成分会导致不溶物的析出，影响应用。
23.、温和性实验(1)将实施例1含有生物素和鸟苷的组合物稀释至3%水溶液，测定其ph值为6.94。
24.使用斑马鱼系统养殖水将受试助溶组合物稀释成质量浓度为0.01、0.1、1、10、100 %实验浓度，混匀，放置4℃保存备用。配制十二烷基硫酸钠（sds）标准溶液（5、1和0.1mg/ml）为阳性对照。
25.随机挑选46~56 hpf 健康、无畸形、正常发育的鱼胚。使用6孔细胞培养板为实验载体，每孔加入鱼胚20枚，实验溶液5 ml。另设空白对照和阳性对照组，每个浓度设置3个平行组。在体式显微镜下观察，并记录鱼胚的刺激摆动，死亡（凝结）数量。跟据终点反应对刺激性等级进行评分分类如表3。
26.表3 刺激性等级评分
从测试情况来看，实施例1所得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物，在质量浓度为10%及10%以下应用均无刺激性。
27.(2)选择志愿者45名，年龄18-60岁，参照《化妆品安全技术规范2015版》-人体皮肤斑贴试验进行刺激性测试。受试者排除条件符合gb171492-1997《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》；无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病；无活动性过敏性疾病；对护肤类化妆品无过敏史；1个月内未曾全身使用激素类药物及免疫抑制剂；非妊娠或哺乳期；无伦理学禁忌。
28.选取实施例1~6按质量百分比5%分别加入面霜中，面霜配方组成如表4所示。将上述样品加入斑试器内，然后将加有样品的斑试器用无刺激胶带贴敷于受试者的背部，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h；去除受试物斑试器，用湿润的脱脂棉球轻轻擦去测试部位的受试物残留，0.5h后，待压痕消失后观察皮肤反应。如结果为阴性，于揭去斑贴后24h再观察一次。按分级标准记录反应结果，根据结果对其进行打分，如表5所示，按4分法进行评分（0分为无刺痛感，1分为几乎无刺痛感，2分为轻度刺痛感，3分为中度刺痛感，5分为重度刺痛感），作为评价温和性的标准。
29.表4样品面霜组成表4样品面霜组成 表5 刺激性实验测试结果
由表5可知，在面霜中的组合物添加量为5%的情况下，实施例1~6在斑贴实验中的受试者刺激性分数都较低，表明本发明制备的富含生物素和鸟苷的组合物具有温和性好的特点。
30.、人体功效测试为证明本专利活性组合物功效，进行志愿者人体功效测试：招募30名年龄在35~55岁，左右眼角皱纹等级较为一致且均大于1的非备孕，哺乳及妊娠期志愿者，随机分为实验组和对照组，连续28天早晚各一次在左右脸颊使用上述按5%比例添加实施例3的表4配方面霜，对照组使用表4不添加实施例的空白面霜(使用量保持一致，约为0.5g/次)，并要求志愿者测试期间每日涂抹防晒霜。选取志愿者眼角为测试部位，分别于使用前和使用28天后进行洁面后测试，由同一工作人员采用皱纹测量仪测定皱纹数量，总皱纹平均深度与皱纹面积占比，另外使用皮肤水分测试仪检测皮肤光泽度值，结果如表6所示。
31.表6 抗皱人体功效实验结果
由表6可见，相对于对照组，实验组的皱纹数量和总皱纹平均深度减少显著，皮肤光泽度提升。说明本发明制备的组合物具有较好的抗皱、提亮作用。
32.为进一步证明活性组合物的舒缓功效，进行志愿者招募测试：招募30名25~40岁近期进行过医美项目或敏感肌肤的非备孕，哺乳及妊娠期志愿者，随机分为实验组和对照组，连续28天早晚各一次在左右脸颊使用上述按5%比例添加实施例4的表4配方面霜，对照组使用表4不添加实施例的空白面霜(使用量保持一致，约为0.5g/次)，并要求志愿者测试期间每日涂抹防晒霜。随机选取面颊8处为测试部位，分别于使用前和使用28天后进行洁面后测试，由同一工作人员采用visia分析其泛红面积及泛红深浅度。如表7显示。
33.表7抗泛红人体功效实验结果由表7可见，相对于对照组，添加了富含生物素和鸟苷的组合物的实验组，皮肤泛红面积减少，泛红程度明显减轻，说明本发明的组合物具有舒缓修复效果。
34.综上所述，本发明制备的化妆品用途的富含生物素和鸟苷的组合物，解决了生物素和鸟苷的溶解性问题，可将生物素溶解度提升至10%以上，是现有生物素溶解度的400倍，可将鸟苷溶解度提高6倍以上，且在0~10℃下不析出，应用于化妆品中可通过低温测试，同时具有提亮抗皱、舒缓修复的效果。
具体实施方式
35.实施例1： 化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在烧杯中称取去离子水57.5g和赖氨酸30g，70℃下搅拌至均匀澄清；加入12g生物素，搅拌3mins至溶解完全，再称取0.5g鸟苷加入至溶液，加热至70℃搅拌 8mins至完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
36.实施例2：化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在烧杯中称取去离子水69.6g和肌肽20g，60℃下搅拌至均匀澄清；加入10g生物素，搅拌5mins至溶解完全，再称取0.4g鸟苷加入至溶液，60℃搅拌6mins至完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
37.实施例3：化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在烧杯中称取去离子水76.7g和精氨酸15g，50℃下搅拌至均匀澄清；加入8g生物素，搅拌5mins至溶解完全，再称取0.3g鸟苷加入至溶液，50℃搅拌5mins至完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
38.实施例4：化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在
烧杯中称取去离子水81.8g，赖氨酸4g和精氨酸8g，40℃下搅拌至均匀澄清；加入6g生物素，搅拌5mins至溶解完全，再称取0.2g鸟苷加入至溶液，40℃搅拌5mins至完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
39.实施例5：化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在烧杯中称取去离子水85.85g和肌肽5g和赖氨酸5g，20℃下搅拌至均匀澄清；加入4g生物素，搅拌5mins至溶解完全，再称取0.15g鸟苷加入至溶液，20℃搅拌至5mins完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。
40.实施例6：化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物的制备方法，采用以下步骤：在烧杯中称取去离子水89.9g和精氨酸7g，30℃下搅拌至均匀澄清；加入3g生物素，搅拌5mins至溶解完全，再称取0.1g鸟苷加入至溶液，30℃搅拌至5mins完全溶解，得化妆品用的富含生物素和鸟苷的组合物。