抗n3pglu淀粉样蛋白
β
肽抗体及其用途
1.本发明涉及用抗n3pglu aβ抗体治疗疾病，其中所述疾病特征在于患者中淀粉样蛋白β (aβ)的沉积。更具体地，本发明涉及用n3pglu aβ抗体短期诱导治疗特征在于脑中aβ沉积的疾病，包括阿尔茨海默病(ad)、唐氏综合征和脑淀粉样血管病(caa)。
2.发现于人类患者的斑块中的沉积物由ab肽的异质混合物构成。n3pglu aβ，也称为n3pe aβ、aβ pe3-42或aβ
p3-42
，是aβ肽的截短形式且仅发现于斑块中。n3pglu aβ在人类aβ的n-末端处缺乏前两个氨基酸残基并在第三氨基酸位置处具有衍生自谷氨酸的焦谷氨酸(pyroglutamate)。尽管n3pglu aβ肽是在脑中沉积的aβ的次要组分，但研究已证明n3pglu aβ肽具有侵袭性聚集特性并在沉积级联中早期累积。
3.针对n3pglu aβ的抗体是本领域已知的。例如，美国专利号8,679,498公开了抗n3pglu aβ抗体和用所述抗体治疗疾病诸如阿尔茨海默病的方法。通过长期持续施用针对发现于沉积物中的aβ(包括n3pglu aβ)的抗体的被动免疫已在各种动物模型中显示破坏脑中的aβ聚集物且促进斑块的清除。然而，在人类中，长期持续施用aβ抗体已导致不良事件，其包括淀粉样蛋白相关的成像异常(aria)，暗示有血管源性水肿和脑沟积液(aria-e)、以及微出血和血铁黄素沉积(aria-h)；以及输注部位反应和免疫原性风险。参见piazza和winblad,
ꢀ“
amyloid-related imaging abnormalities (aria) in immunotherapy trials for alzheimer’s disease: need for prognostic biomarkers
”ꢀ
journal of alzheimer's disease, 52 (2016) 417-420。
4.本发明克服与长期持续施用相关的问题。申请人发现，用相对高剂量的抗n3pglu aβ抗体的短期诱导治疗促进具有aβ沉积物的患者的脑中斑块的显著清除，且该清除令人惊讶地维持延长的时间段。短期诱导治疗可以包括一次剂量的抗n3pglu抗体、两周一次剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月的时段，或每月一次剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。除了减少由长期持续给药针对aβ的抗体引起的不良事件以外，短期诱导治疗的额外益处包括改善的患者顺应性、降低的输注部位反应和免疫原性风险、显著的治疗成本节省以及减少的对患者和护理者生活的干扰。
5.因此，本发明提供了治疗特征在于aβ的沉积的疾病的方法，其包括向淀粉样蛋白沉积物阳性的患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了治疗特征在于aβ的沉积的疾病的方法，其包括向淀粉样蛋白沉积物阳性的患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了治疗特征在于人类患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向淀粉样蛋白沉积物阳性的患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、
20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。在另一个更优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
6.或者，本发明提供了治疗特征在于aβ的沉积的疾病的方法，其包括向淀粉样蛋白沉积物阳性的患者施用10至60 mg/kg的剂量的抗n3pglu aβ抗体，随后任选地施用一个或多个10至60 mg/kg的剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括在6个月或更少的时段中向所述患者施用10至60 mg/kg的1至12个单独剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的6个单独剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。或者，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的12个单独剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续12个月或更少的时段。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的6或12个单独剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg(例如，经6个月向患者施用20 mg/kg的6个单独剂量)。在另一个优选实施方案中，向患者施用的一次性剂量、6或12个单独剂量为每剂量10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在另一个优选实施方案中，6个单独剂量由每月时间间隔分隔开，且12个单独剂量由2周时间间隔分隔开。在一个优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
7.在一个实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个具体实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个具体实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在治疗或预防临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次(每两周)和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。在另一个更优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
8.在另一个实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床前ad、前驱性ad(有时也称为aβ相关的轻度认知障碍、mci或归因于ad的mci)、轻度ad、中度ad和重度ad的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或
更少的时段。具体地，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床前ad、前驱性ad、轻度ad、中度ad和重度ad的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床前ad、前驱性ad、轻度ad、中度ad和重度ad的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床前ad、前驱性ad、轻度ad、中度ad和重度ad的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床前ad、前驱性ad、轻度ad、中度ad和重度ad的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在治疗或预防临床前ad、前驱性ad、轻度ad、中度ad和重度ad的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次(每两周)和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。在另一个更优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
9.在另一个实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的方法，其每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知下降的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。在另一个更优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
10.在另一个实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病
或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的方法，其每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的功能下降的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
11.在另一个实施方案中，本发明提供了降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法，其每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在降低经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的脑aβ淀粉样蛋白斑块负荷的方法的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
12.在另一个实施方案中，本发明提供了预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法，其包括向患者施用10至60 mg/
kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在预防在脑脊髓液(csf)中具有低水平的aβ1-42和/或在脑中具有低水平的aβ沉积物的临床上无症状患者中的记忆丧失或认知下降的方法的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
13.在另一个实施方案中，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。更具体地，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法，其向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在本发明中，“已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的临床上无症状患者”包括已知具有psen1 e280a引起阿尔茨海默病的基因突变(paisa突变)(一种凭借携带一个或两个apoe e4等位基因而引起常染色体显性阿尔茨海默病或发展ad的风险较高的基因突变)的患者，其包括向所述患者施用本发明的药物组合物。在治疗已知具有引起阿尔茨海默病的遗传突变的临床上无症状患者的方法的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
14.在一个进一步实施方案中，本发明提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患
者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。具体地，本发明提供了治疗特征在于aβ的沉积的疾病的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。更具体地，本发明提供了治疗特征在于人类患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
15.在一个实施方案中，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。具体地，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。更具体地，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在本发明的一个优选实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
16.在一个实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知和/或功能下降的方法，其包括向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知和/或功能下降的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉
积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。更具体地，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知和/或功能下降的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知和/或功能下降，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了减缓经诊断具有临床前阿尔茨海默病或临床阿尔茨海默病的患者中的认知和/或功能下降的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
17.在一个实施方案中，本发明提供了用抗n3pglu aβ抗体治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa持续6个月或更少的时段的方法，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%且在治疗后在减少的状态中维持2-10年的时段。更优选地，维持2-5年。甚至更优选地，维持5-10年。具体地，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%且在治疗后在减少的状态中维持2-10年的时段。更优选地，维持2-5年。甚至更优选地，维持5-10年。更具体地，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%且在治疗后在减少的状态中维持1-10年的时段。更优选地，维持2-5年。甚至更优选地，维持5-10年。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括每两周向所述患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%且在治疗后在减少的状态中维持2-10年的时段。更优选地，维持2-5年。甚至更优选地，维持5-10年。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的方法，其包括向所述患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内减少35-100%且在治疗后在减少的状态中维持2-10年的时段。更优选地，维持2-5年。甚至更优选地，维持5-10年。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
18.本发明还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括向患者施用诱
导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，随后在完成诱导治疗后，每1、2、3、5或10年施用维持剂量的抗n3pglu aβ抗体。具体地，本发明提供了治疗特征在于人类患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向淀粉样蛋白沉积物阳性的患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，随后在完成诱导治疗后，每1、2、3、5或10年施用维持剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括每两周向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，随后在完成诱导治疗后，每1、2、3、5或10年施用维持剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于淀粉样蛋白沉积物阳性的患者的脑中的aβ沉积物的疾病的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，随后在完成诱导治疗后，每1、2、3、5或10年施用维持剂量的抗n3pglu aβ抗体。在一个具体实施方案中，每年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每2年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每3年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每5年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每10年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每2至5年给予维持剂量的aβ抗体。在另一个具体实施方案中，每5至10年给予维持剂量的aβ抗体。在本发明的一个实施方案中，相同抗n3pglu aβ抗体用于诱导和维持剂量。在本发明的另一个实施方案中，不同抗n3pglu抗体用于诱导和维持剂量。在本发明的一个更具体实施方案中，以诱导和维持剂量施用的抗n3pglu aβ抗体选自表a。
19.在一个实施方案中，本发明还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的bace抑制剂同时、分开或依次组合向患者施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在一个具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的bace抑制剂同时、分开或依次组合向患者施用10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的bace抑制剂同时、分开或依次组合每两周向患者施用10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在另一个具体实施方案中，本发明提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的bace抑制剂同时、分开或依次组合向患者施用10至60 mg/kg的每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。
20.在本发明的一个更具体实施方案中，抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a，且bace抑制剂选自a) 下式的化合物
也由化合物名称n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺指代，或其药学上可接受的盐；b) n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的甲苯磺酸盐；c) 2 n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4a,5,6,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a(4h)-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式；和d) 下式的化合物也由化合物名称n-[3-[(5r)-3-氨基-5,6-二氢-2,5-二甲基-1,1-二氧代-2h-1,2,4-噻二嗪-5-基]-4-氟苯基]-5-氟-2-吡啶甲酰胺或通用名称verubecestat指代，或其药学上可接受的盐。
[0021]
在本发明的另一个更具体实施方案中，抗n3pglu aβ抗体优选为b12l，且bace抑制剂选自a) 下式的化合物也由化合物名称n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺指代，或其药学上可接受的盐；b) n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的甲苯磺酸盐；c) 2 n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4a,5,6,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a(4h)-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式；和d) 下式的化合物
也由化合物名称n-[3-[(5r)-3-氨基-5,6-二氢-2,5-二甲基-1,1-二氧代-2h-1,2,4-噻二嗪-5-基]-4-氟苯基]-5-氟-2-吡啶甲酰胺或通用名称verubecestat指代，或其药学上可接受的盐。
[0022]
在一个实施方案中，本发明还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的aβ抗体同时、分开或依次组合向患者施用一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。在一个具体实施方案中，本发明还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的aβ抗体同时、分开或依次组合向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中aβ抗体包含选自以下的氨基酸轻链(lc)和氨基酸重链(hc)：a) seq id no:65的lc和seq id no:66的hc (索拉珠单抗)；b) seq id no:61的lc和seq id no:62的hc (crenezumab)；c) seq id no:57的lc和seq id no:58的hc (aducunumab)；d) seq id no:63的lc和seq id no:64的hc (ban2401)；和e) seq id no:59的lc和seq id no:60的hc (gantenerumab)。
[0023]
在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
[0024]
在一个实施方案中，本发明还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的20 kd聚乙二醇化抗aβ fab抗体同时、分开或依次组合向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中抗aβ fab包含seq id no: 55的氨基酸轻链可变区和seq id no: 56的氨基酸重链可变区。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
[0025]
在本发明的另一个实施方案中，还提供了治疗特征在于脑中aβ的沉积的疾病的方法，其包括与有效量的治疗阿尔茨海默病的对症药剂同时、分开或依次组合向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段。对症药剂可以选自胆碱酯酶抑制剂(chei)和/或部分n-甲基-d-天冬氨酸(nmda)拮抗剂。在一个优选实施方案中，所述药剂是chei。在另一个优选实施方案中，所述药剂是nmda拮抗剂或包含chei和nmda拮抗剂的组合药剂。在本发明的一个更优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代更优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体优选地选自表a。
[0026]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病，其中将抗n3pglu aβ抗体以10至60 mg/kg的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu a
β抗体，其用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体施用于患者。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体每两周向患者施用持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量每月向患者施用持续6个月或更少的时段。在用于治疗或预防临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0027]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad，其中将抗n3pglu aβ抗体以10至60 mg/kg的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体施用于患者。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体每两周向患者施用持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量每月向患者施用持续6个月或更少的时段。在用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0028]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知或功能下降，其中将抗n3pglu aβ抗体以10至60 mg/kg的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体施用于患者。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病、中度ad或重度ad的病况的患者中的认知下降，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体每两周向患者施用持续6个月或更少的
时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量每月向患者施用持续6个月或更少的时段。在用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0029]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于降低经诊断具有临床前或临床阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的患者的脑中的aβ淀粉样蛋白斑块负荷，其中将抗n3pglu aβ抗体以10至60 mg/kg的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于降低经诊断具有临床前或临床阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的患者的脑中的aβ淀粉样蛋白斑块负荷，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体施用于患者。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于降低经诊断具有临床前或临床阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的患者的脑中的aβ淀粉样蛋白斑块负荷，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体每两周向患者施用持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于降低经诊断具有临床前或临床阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的患者的脑中的aβ淀粉样蛋白斑块负荷，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量每月向患者施用持续6个月或更少的时段。在用于降低经诊断具有临床前或临床阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的患者的脑中的aβ淀粉样蛋白斑块负荷的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0030]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的临床上无症状患者，其中将抗n3pglu aβ抗体以10至60 mg/kg的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体施用于患者。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者，其中将抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体每两周向患者施用持续6个月或更少的时段。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体，其用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者，其中将
抗n3pglu aβ抗体作为10至60 mg/kg的诱导剂量每月向患者施用持续6个月或更少的时段。在用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0031]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的药剂的用途，其中所述药剂包含每两周向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的药剂的用途，其中所述药剂包含每月向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0032]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad的药剂的用途，其中所述药剂包含每两周向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗前驱性ad、轻度ad、中度ad或重度ad的药剂的用途，其中所述药剂包含每月向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu a
β抗体选自表a。
[0033]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知或功能下降的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降的用途，其中所述药剂包含每两周向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于预防或减缓经诊断具有选自临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前脑淀粉样血管病的病况的患者中的认知下降的用途，其中所述药剂包含每月向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0034]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的药剂的用途，其中将所述药剂以10至60 mg/kg的抗n3pglu aβ抗体的剂量向患者施用持续6个月或更少的时段。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的用途，其中所述药剂包含每两周向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于治疗已知具有引起阿尔茨海默病的基因突变的无症状患者的用途，其中所述药剂包含每月向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0035]
在另一个实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于减少患者的脑中的aβ沉积物的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，且其中患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量
治疗后6个月内减少35-100%。具体地，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于减少患者的脑中的aβ沉积物的药剂的用途，其中所述药剂包含向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的一次诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，且其中患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于减少患者的脑中的aβ沉积物的药剂的用途，其中所述药剂包含每两周向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，且其中患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在另一个更具体实施方案中，本发明提供了抗n3pglu aβ抗体用于制备用于减少患者的脑中的aβ沉积物的药剂的用途，其中所述药剂包含每月向患者施用持续6个月或更少的时段的10至60 mg/kg的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，且其中患者的脑中的aβ沉积物在诱导剂量治疗后6个月内减少35-100%。在本发明的一个优选实施方案中，向患者施用的一次、两周一次和每月一次的诱导剂量为20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。在本发明的另一个优选实施方案中，向患者施用的一次诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg。在本发明的一个替代优选实施方案中，向患者施用的两周一次和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg或40mg/kg，持续6个月的时段。甚至更优选地，所述抗n3pglu aβ抗体选自表a。
[0036]
如本文所用，“抗n3pglu aβ抗体”是指相比于aβ
1-40
或aβ
1-42
优先结合n3pglu aβ的抗体。n3pglu aβ的序列是seq id no: 31的氨基酸序列。在具体实施方案中，抗n3pglu aβ抗体包含表a中列出的氨基酸序列。更具体地，本发明的抗n3pglu aβ抗体包含轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)，其中所述lcvr包含lcdr1、lcdr2和lcdr3，且hcvr包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，其选自：a) lcdr1是seq id. no: 17，lcdr2是seq id. no: 18，lcdr3是seq id. no: 19，hcdr1是seq id. no: 20，hcdr2是seq id: no: 22，且hcdr3是seq id. no: 23；且b) lcdr1是seq id. no: 17，lcdr2是seq id. no: 18，lcdr3是seq id. no: 19，hcdr1是seq id. no: 21，hcdr2是seq id. no: 22，且hcdr3是seq id. no: 24；c) lcdr1是seq id. no: 17，lcdr2是seq id. no: 18，lcdr3是seq id. no: 19，hcdr1是seq id. no: 36，hcdr2是seq id. no: 22，且hcdr3是seq id. no: 37；d) lcdr1是seq id. no: 4，lcdr2是seq id. no: 6，lcdr3是seq id. no: 7，hcdr1是seq id. no: 1，hcdr2是seq id. no: 2，且hcdr3是seq id. no: 3；且e) lcdr1是seq id. no: 4，lcdr2是seq id. no: 5，lcdr3是seq id. no: 7，hcdr1是seq id. no: 1，hcdr2是seq id. no: 2，且hcdr3是seq id. no: 3。
[0037]
在其他实施方案中，本发明的抗n3pglu aβ抗体包含轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)，其中所述lcvr和hcvr选自：a) seq id no:25的lcvr和seq id no:26的hcvr；b) seq id no:25的lcvr和seq id no:27的hcvr；c) seq id no:32的lcvr和seq id no:34的hcvr；d) seq id no:9的lcvr和seq id no:8的hcvr；和e) seq id no:10的lcvr和seq id no:8的hcvr。
[0038]
在进一步实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含轻链(lc)和重链(hc)，其中所述lc和hc选自：
a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0039]
在其他实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含两条轻链(lc)和两条重链(hc)，其中每条lc和每条hc选自a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0040]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体i，其具有分别seq id no:12和11的轻链(lc)和重链(hc)。抗体i进一步具有分别seq id no:9和8的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。抗体i的hcvr进一步包含seq id no:1的hcdr1、seq id no:2的hcdr2和seq id no:3的hcdr3。抗体i的lcvr进一步包含分别seq id no:4的lcdr1、seq id no:6的lcdr2和seq id no:7的lcdr3。
[0041]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体ii，其具有分别seq id no:13和11的轻链(lc)和重链(hc)。抗体ii进一步具有分别seq id no:10和8的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。抗体ii的hcvr进一步包含seq id no:1的hcdr1、seq id no:2的hcdr2和seq id no:3的hcdr3。抗体ii的lcvr进一步包含分别seq id no:4的lcdr1、seq id no:5的lcdr2和seq id no:7的lcdr3。
[0042]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含b12l，其具有分别seq id no:28和29的轻链(lc)和重链(hc)。b12l进一步具有分别seq id no:25和26的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。b12l的hcvr进一步包含seq id no:20的hcdr1、seq id no:22的hcdr2和seq id no:23的hcdr3。b12l的lcvr进一步包含分别seq id no:17的lcdr1、seq id no:18的lcdr2和seq id no:19的lcdr3。
[0043]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含r17l，其具有分别seq id no:28和30的轻链(lc)和重链(hc)。r17l进一步具有分别seq id no:25和27的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。r17l的hcvr进一步包含seq id no:21的hcdr1、seq id no:22的hcdr2和seq id no:24的hcdr3。r17l的lcvr进一步包含分别seq id no:17的lcdr1、seq id no:18的lcdr2和seq id no:19的lcdr3。
[0044]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含he8l，其具有分别seq id no:33和35的轻链(lc)和重链(hc)。he8l进一步具有分别seq id no:32和34的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。he8l的hcvr进一步包含seq id no:36的hcdr1、seq id no:22的hcdr2和seq id no:37的hcdr3。he8l的lcvr进一步包含分别seq id no:17的lcdr1、seq id no:18的lcdr2和seq id no:19的lcdr3。
[0045]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体vi，其具有分别seq id no: 39和40的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0046]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体vii，其具有分别seq id no: 41和42的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0047]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体viii，其具有分别seq id no: 43和44的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0048]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体ix，其具有分别seq id no: 45和46的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0049]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体x，其具有分别seq id no: 47和48的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0050]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体xi，其具有分别seq id no: 49和50的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0051]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体xii，其具有分别seq id no: 51和52的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0052]
在一些实施方案中，所述抗n3pglu aβ抗体包含抗体xiii，其具有分别seq id no: 53和54的轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)。
[0053]
本领域技术人员将认识到，本发明的一个实施方案提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)，其中所述lcvr和hcvr选自：a) seq id no:25的lcvr和seq id no:26的hcvr；b) seq id no:25的lcvr和seq id no:27的hcvr；c) seq id no:32的lcvr和seq id no:34的hcvr；d) seq id no:9的lcvr和seq id no:8的hcvr；和e) seq id no:10的lcvr和seq id no:8的hcvr。
[0054]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含seq id no: 25的lcvr和seq id no: 26的hcvr。更优选地，一次或两周一次施用抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0055]
在另一个具体实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含轻链(lc)和重链(hc)，其中所述lc和hc选自：a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0056]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含seq id no:28的lc和seq id no:29的hc。更优选地，一次或两周一次施用抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0057]
一个进一步实施方案提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含两条轻链(lc)和两条重链(hc)，其中每条lc和hc选自：a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0058]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含两条seq id no:28的lc和两条seq id no:29的hc。更优选地，一次或两周一次施用抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0059]
本发明还提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含轻链可变区(lcvr)和重链可变区(hcvr)，其中所述lcvr和hcvr选自：a) seq id no:25的lcvr和seq id no:26的hcvr；b) seq id no:25的lcvr和seq id no:27的hcvr；c) seq id no:32的lcvr和seq id no:34的hcvr；d) seq id no:9的lcvr和seq id no:8的hcvr；和e) seq id no:10的lcvr和seq id no:8的hcvr。
[0060]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含seq id no: 25的lcvr和seq id no: 26的hcvr。更优选地，向患者施用的一次、两周一次(每两周)和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。甚至更优选地，一次或两周一次施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0061]
在一个实施方案中，本发明提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含轻链(lc)和重链(hc)，其中所述lc和hc选自：a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0062]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含seq id no:28的lc和seq id no:29的hc。更优选地，向患者施用的一次、两周一次(每两周)和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。甚至更优选地，一次或两周一次施用诱
导剂量的抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0063]
本发明还提供了治疗或预防淀粉样蛋白沉积物阳性的患者中的临床或临床前阿尔茨海默病、唐氏综合征和临床或临床前caa的方法，其包括向患者施用10至60 mg/kg的一次、两周一次或每月一次的诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体，持续6个月或更少的时段，其中所述抗n3pglu aβ抗体包含两条轻链(lc)和两条重链(hc)，其中每条lc和hc选自：a) seq id no:28的lc和seq id no:29的hc；b) seq id no:28的lc和seq id no:30的hc；c) seq id no:33的lc和seq id no:35的hc；d) seq id no:12的lc和seq id no:11的hc；和e) seq id no:13的lc和seq id no:11的hc。
[0064]
优选地，所述抗n3pglu aβ抗体包含两条seq id no:28的lc和两条seq id no:29的hc。更优选地，向患者施用的一次、两周一次(每两周)和每月一次的诱导剂量为10mg/kg、15 mg/kg、20mg/kg、40mg/kg、20至40 mg/kg或15至30 mg/kg。甚至更优选地，一次或两周一次施用诱导剂量的抗n3pglu aβ抗体。甚至更优选地，一次或两周一次的剂量导致患者的脑中的aβ沉积物在施用诱导剂量的6个月内减少35-100%。
[0065]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“抗n3pglu aβ抗体”和具体抗体“he8l”、“b12l”和“r17l”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2014年3月25日公告的题为“anti-n3pglu amyloid beta peptide antibodies and uses thereof”的美国专利号8,679,498 b2(美国系列号13/810,895)中所述。参见，例如，美国专利号8,679,498 b2的表1。这三种抗体(例如，“he8l”、“b12l”和“r17l”)各自均可用作本发明的抗n3pglu aβ抗体。本领域普通技术人员将理解和认识到，“抗n3pglu aβ抗体”和具体抗体“抗体vi”、“抗体vii”、“抗体viii”和“抗体ix”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如题为“diagnosed antibody assay”的wo2010/009987a2中所述。这四种抗体(例如，“抗体vi”、“抗体vii”、“抗体viii”和“抗体ix”)各自可用作本发明的抗n3pglu aβ抗体。
[0066]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“抗n3pglu aβ抗体”和具体抗体“抗体x”和“抗体xi”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如题为“monoclonal antibodies targeting aβ monoclonal antibodies”的wo 2011/151076 a2中所述。这两种抗体(例如，“抗体x”和“抗体xi”)各自可用作本发明的抗n3pglu aβ抗体。
[0067]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“抗n3pglu aβ抗体”和具体抗体“抗体xii”和“抗体xiii”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如题为“antibodies specific to pyroglutamated aβ”的wo 2012/136552a1中所述。这两种抗体(例如，“抗体xii”和“抗体xiii”)各自可用作本发明的抗n3pglu aβ抗体。
[0068]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“aducanumab”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2014年6月12日公开的题为“a method of reducing brain amyloid plaques using anti-aβ antibodies”的wo14089500a1中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0069]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“gantenerumab”以及
制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2007年6月21日公开的题为“antibodies against amyloid beta 4 with glycosylated in the variable region”的wo2007068429中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0070]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“crenezumab”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2015年8月13日公开的题为“methods of treating alzheimer's disease”的2015120280a1中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0071]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“ban 2401”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2011年9月27日公告的题为“protofibril selective antibodies and the use thereof”的us 8025878 b2中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0072]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“索拉珠单抗”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2007年3月27日公告的题为“humanized antibodies that sequester abeta peptide”的美国专利号 7,195,761 b2中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0073]
本领域普通技术人员将理解和认识到，“aβ抗体”和具体抗体“抗体xiv”以及制备和使用所述抗体的方法由本领域普通技术人员鉴定和公开，如2011年11月29日公告的题为“pegylated aβ fab”的美国专利号 8,066,999 b1(美国申请号12/521,309)中所述。这可用作本发明的aβ抗体。
[0074]
下式的化合物：或其药学上可接受的盐被公开为bace抑制剂，且可由本领域普通技术人员如2014年9月23日公告的题为“tetrahydropyrrolothiazine compounds”的美国专利号8,841,293 b1(美国申请号14/195,897)中所述来制备；具体而言，参见实施例4，n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺。n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的甲苯磺酸盐可由本领域普通技术人员如pct/us2016/014423中所述来制备。n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式可由本领域普通技术人员如题为“a tetrahydropyrrolo[3,4-d][1,3] thiazine-derivative as bace inhibitor”的wo 2016/043996中所述来制备。
[0075]
下式的化合物：
或其药学上可接受的盐被公开为bace抑制剂，且可由本领域普通技术人员如2014年5月20日公告的题为“iminothiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions and their use”的美国专利号8,729,071 b1中所述来制备。公开了n-[3-[(5r)-3-氨基-5,6-二氢-2,5-二甲基-1,1-二氧代-2h-1,2,4-噻二嗪-5-基]-4-氟苯基]-5-氟-2-吡啶甲酰胺（verubecestat）的甲苯磺酸盐的结晶形式，且其可由本领域普通技术人员如题为“novel crystalline forms of a bace inhibitor, compositions, and their use”的wo2016/053767中所述来制备。
[0076]
此外，本发明中使用的某些抗n3pglu aβ抗体的氨基酸序列提供于下表a中：表a-抗体氨基酸序列抗n3pglu抗体lcvrhcvrlchc抗体i981211抗体ii1081311抗体iii(b12l)25262829抗体iv(r17l)25272830抗体v(he8l)32343335抗体vi(5-5-6)3940
ꢀꢀ
抗体vii(6-1-6)4142
ꢀꢀ
抗体viii(17-4-3)4344
ꢀꢀ
抗体ix(24-2-3)4546
ꢀꢀ
抗体x(9d5h6)4748
ꢀꢀ
抗体xi(8c4)4950
ꢀꢀ
抗体xii(5c9(luab1h)5152
ꢀꢀ
抗体xiii(2e83(luab2h)5354
ꢀꢀ
[0077]
关于“抗体i”、“抗体ii”、“抗体iii”、“抗体iv”和“抗体v”，此类抗体的额外氨基酸序列提供于表b中：表b-抗体cdr氨基酸序列
[0078]
如本文所用，“抗体”是包含通过二硫键互连的两条重链(hc)和两条轻链(lc)的免疫球蛋白分子。每一lc和hc的氨基末端部分均包括经由其中含有的互补决定区(cdr)负责抗原识别的可变区。cdr散布有称为框架区的更保守的区域。氨基酸至本发明抗体的lcvr和hcvr区内的cdr结构域的分配基于以下编号惯例：kabat编号惯例 (kabat, 等人, ann. ny acad. sci. 190:382-93 (1971); kabat 等人, sequences of proteins of immunological interest，第五版，u.s. department of health and human services, nih公开号91-3242 (1991))，和north编号惯例 (north 等人, a new clustering of antibody cdr loop conformations, journal of molecular biology, 406:228-256 (2011))。遵循以上方法，确定本发明的cdr(表b)。
[0079]
本发明的抗n3pglu aβ抗体包括κ lc和igg hc。在一个具体实施方案中，本发明的抗n3pglu aβ抗体具有人类igg1同种型。
[0080]
本发明的抗体是单克隆抗体(“mab”)。单克隆抗体可以例如由杂交瘤技术、重组技术、噬菌体展示技术、合成技术(例如，cdr移植)或此类或本领域已知的其他技术的组合产生。本发明的单克隆抗体是人或人源化的。人源化抗体可经工程改造，以含有一个或多个包围衍生自非人类抗体的cdr的人类构架区(或实质上人类构架区)。人类构架种系序列可以从imunogenetics (ingt)经由其网站http://imgt.cines.fr获得，或从marie-paule lefranc和gerard lefranc的the immunoglobulin factsbook, academic 25 press, 2001, isbn 012441351获得。用于产生人或人源化抗体的技术是本领域众所周知的。在本发明的另一个实施方案中，提供了分离形式的抗体或编码其的核酸。如本文所用，术语“分离的”是指在自然界中未发现且不含或基本上不含在细胞环境中发现的其他大分子种类的蛋白、肽或核酸。如本文所用，“基本上不含”意指感兴趣的蛋白、肽或核酸占存在的大分子种类的大于80%(在摩尔基础上)，优选地大于90%且更优选地大于95%。
[0081]
将本发明的抗n3pglu aβ抗体作为药物组合物施用。可以将包含本发明的抗体的药物组合物通过肠胃外途径(例如，皮下、静脉内、腹膜内、肌内)施用于处于如本文所述的疾病或病症的风险或表现出如本文所述的疾病或病症的患者。皮下和静脉内途径是优选的。
[0082]
术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”或“治疗(to treat)”等包括限制、减缓或停止患者的现有症状、病况、疾病或病症的进展或严重程度。术语“患者”是指人。
[0083]
术语“预防”意味着将本发明的抗体预防性施用于无症状患者或具有临床前阿尔
茨海默病的患者以预防疾病的发作或进展。
[0084]
术语“特征在于aβ的沉积的疾病”或“特征在于aβ沉积物的疾病”可互换使用，并且是指在病理学上特征在于脑中或脑血管系统中的aβ沉积物的疾病。这包括疾病诸如阿尔茨海默病、唐氏综合征和脑淀粉样血管病。阿尔茨海默病的临床诊断、分期或进展可由作为本领域技术人员的主治诊断医生或健康护理专业人员通过使用已知技术并通过观察结果容易地确定。这通常包括一些形式的脑斑成像、精神或认知评估(例如临床痴呆评定-方框汇总(clinical dementia rating
‑ꢀ
summary of boxes, cdr-sb)、小型精神状态检查(mini-mental state exam, mmse)或阿尔茨海默病评估量表-认知(alzheimer's disease assessment scale-cognitive, adas-cog))或功能评估(例如阿尔茨海默病合作研究-日常生活活动(alzheimer's disease cooperative study-activities of daily living, adcs-adl))。认知和功能评估可用于确定患者认知(例如，认知下降)和功能(例如，功能下降)的变化。如本文所用，“临床阿尔茨海默病”是阿尔茨海默病的诊断阶段。其包括诊断为前驱性阿尔茨海默病、轻度阿尔茨海默病、中度阿尔茨海默病和重度阿尔茨海默病的病况。术语“临床前阿尔茨海默病”是在临床阿尔茨海默病之前的阶段，其中生物标志物(诸如csf aβ42水平或通过淀粉样蛋白pet的沉积的脑斑)的可测量变化指示具有阿尔茨海默病理学的患者进展至临床阿尔茨海默病的最早体征。这通常在症状诸如记忆丧失和混淆变得显著之前。临床前阿尔茨海默病还包括症状前常染色体显性携带者以及凭借携带一个或两个apoe e4等位基因而发展ad风险较高的患者。
[0085]
对于经历脑斑块成像的患者，当通过诸如用放射性标记的pet化合物的淀粉样蛋白成像的方法在脑中检测到淀粉样蛋白时，患者对淀粉样蛋白沉积物呈阳性。一种这种淀粉样蛋白pet成像化合物的一个实例是florbetapir f 18，其以高特异性结合淀粉样蛋白斑块。florbetapir f 18的化学式为c
20h2518
fn2o3。用放射性标记的pet化合物的淀粉样蛋白成像可用于确定人类患者的脑中的aβ沉积物在诱导治疗后6个月内是否减少35-100%。本领域技术人员可将获得自淀粉样蛋白成像(用放射性标记的pet化合物)的标准化的摄取值比(suvr)值关联以计算治疗前和治疗后患者脑中aβ沉积物的减少%。suvr值可转化为标准化的百分制(centiloid)单位，其中100是ad的平均值，且0是年轻对照的平均值，使淀粉样蛋白pet示踪剂中具有可比性，且根据百分制单位计算减少(klunk等人, alzheimers dement, 2015;11:1-15)。如本文所用，“6个月或更少的时段”是指6个月或少于6个完全连续历月的时间段，且其中各月具有28-31天。该时段至少包括以单次施用给予的一次诱导剂量。
[0086]
认知下降的减少或减缓可通过认知评估、诸如临床痴呆评定
ꢀ‑ꢀ
方框汇总(cdr-sb)、小型精神状态检查(mmse)或阿尔茨海默病评估量表-认知(adas-cog))来测量。功能下降的减少或减缓可通过功能评估、诸如阿尔茨海默病合作研究-日常生活活动(adcs-adl)来测量。
[0087]“诱导剂量”是在6个月的治疗内引起人类患者的脑中的aβ沉积物的急剧减少的抗n3pglu aβ抗体的剂量。“一次”剂量是向患者施用一次的诱导剂量。如果需要这种剂量，则“一次”剂量也可以是各剂量之间以延长的时间段(诸如2-10年)向患者施用一次的剂量。患者是否需要超过一个“一次”诱导剂量可由诊断医师或健康护理专业人员通过使用已知技术和通过观察结果来确定。“两周一次”的剂量是每两周向患者施用的剂量。
[0088]“维持剂量”是在诱导剂量治疗之后向患者施用的剂量。维持剂量是为了维持期望的治疗反应(包括人类患者的脑中aβ沉积物减少)而施用的抗体或药物的量。维持剂量可以是与诱导剂量相比抗体或药物的量相同或更低的剂量。
[0089]
如本文所用，“mg/kg”意指基于他或她的体重(以千克计)向患者施用的抗体或药物的量(以毫克计)。一次给予一个剂量。例如，10 mg/kg剂量的抗体对于体重为70 kg的患者而言将是单次施用中给予的单次700 mg剂量的抗体。类似地，40 mg/kg剂量的抗体对于体重为80 kg的患者而言将是单次施用时给予的3200 mg剂量的抗体。
[0090]
如本文所用，短语“与
……
组合”是指本发明的抗n3pglu aβ抗体与另一种分子(“组合分子”，诸如bace抑制剂、对症药剂或aβ抗体)同时或以任一顺序依次或其任一组合来施用。所述两种分子可作为同一药物组合物的一部分或在分开药物组合物中施用。抗n3pglu aβ抗体可在施用组合分子之前、与其同时或在其之后或以其一定组合来施用。在组合分子以重复间隔施用的情况下(例如在标准治疗过程期间)，则抗n3pglu aβ抗体可在组合分子的每一施用之前、与其同时或在其之后或以其一定组合进行施用，或相对于用组合分子的疗法以不同间隔进行施用，或在用组合分子的治疗过程之前、在其期间的任一时间或在其之后以单一剂量或一系列剂量进行施用。本领域普通技术人员将认识到，bace抑制剂是指治疗剂，优选抑制β-分泌酶1酶的小分子，且可预防淀粉样蛋白斑块的形成。本文公开了bace抑制剂的实例。
[0091]
如本文所用的“对症药剂”是指用于根据症状治疗阿尔茨海默病的认知表现的治疗剂，且未显示对阿尔茨海默病疾病进展具有任何影响。这些包括乙酰基胆碱酯酶抑制剂和nmda受体拮抗剂。经批准用于管控ad症状的胆碱酯酶抑制剂包括：多奈哌齐(donepezil)(商标名称aricept
™
)、加兰他敏(galantamine)(razadyne
™
)和利斯的明(rivastigmine)(以exelon和exelon
™ꢀ
patch为商标)。美金刚(memantine)(也称为nameda
®
)是经批准的nmda受体拮抗剂。namzaric
®
是包含乙酰胆碱酯酶抑制剂和nmda受体拮抗剂的组合药剂。
[0092]
以下实施例和测定证明本发明的抗体可用于治疗特征在于aβ的沉积的疾病，诸如阿尔茨海默病、唐氏综合征和caa。然而，应理解以下实施例通过说明而非限制的方式陈述，且本领域普通技术人员可进行各种修改。
实施例
[0093]
实施例1：在年老转基因小鼠中的单次剂量效力鼠的单次剂量纵向影响代表在年老pdapp转基因小鼠(18.5至20个月龄)中观察到的me8c抗n3pglu抗体(igg2a)(美国专利号8,679,498 b1)。为了模拟具有阿尔茨海默病的人类中的aβ沉积速率和状况，在接受生物素化的me8c抗体或相同同种型的生物素化的对照抗体的单次腹膜内注射之前四天，将小鼠置于含有bace抑制剂ly2811376 (0.015%)的饮食，并在研究持续时间保持该饮食。在用饮食中的bace抑制剂处理的年老pdapp小鼠中展现的先前4个月研究产生bace抑制水平，其导致在4个月的时间间隔内沉积的aβ无变化(即，无进一步沉积且未出现沉积aβ的清除)。将动物在单次注射生物素化的me8c抗体(20 mg/kg或100 mg/kg)或生物素化的对照抗体(100 mg/kg)之后4、8、12或16周处死。将另一对照组的转基因小鼠在研究起始(时间零群组)和在4、8、12或16周时(年龄匹配的对照群组)处死。通过酸性尿素凝胶分析海马体组织以经由变性状况来测量aβ1-42。
[0094]
在基本上如上文所述的程序之后，相比于时间零群组，在4、8、12或16周 (年龄匹配的对照群组)注射的同种型对照之间aβ1-42的水平无显著差异。因此，将对照动物合并成一个对照组用于与用生物素化的me8c抗体注射的动物进行比较。相比于4周(-6%)、8周(-32%；dunnett多重比较，p = 0.0091)、12周(-17%)和16周(-19%)的对照动物，接受20 mg/kg生物素化的me8c抗体的单次注射的小鼠的海马aβ1-42的水平降低。相比于4周(-23%)、8周(-28%；dunnett多重比较，p = 0.0252)、12周(-14%)和16周(-17%)的对照动物，接受100 mg/kg生物素化的me8c抗体的单次注射的年老pdapp小鼠的海马aβ1-42的水平降低。
[0095]
实施例2：年老转基因小鼠中的单次剂量靶标接合为了测定在单次剂量的n3pglu抗体之后沉积斑块的体内靶标接合，组织学分析来自实施例1中所述的单次剂量抗体研究的冷冻半脑，以测定在单次剂量的抗体之后0、4、8、12和16周时展现结合至斑块的抗体的海马体的面积百分比。
[0096]
将脑切片，且对姊妹切片用抗人类抗体(以检测结合的n3pglu抗体)和3d6(以检测切片中沉积的靶标的总量)进行免疫组织化学。将n3pglu抗体结合的面积百分比针对切片中沉积的靶标的总量归一化。
[0097]
在基本上如上文所述的程序之后，由沉积aβ覆盖的总面积在所有组中无显著差异，且由染料覆盖的平均海马体面积从27至39%变化。对于对照动物观察到几乎没有至没有靶标接合。在20 mg/kg(分别为2.8% (p ＜0.0001)、1.9% (p ＜0.0001)、1.1% (p=0.003)、0.6% (p=0.0323))或100 mg/kg(分别为5.5% (p ＜0.0001)、4.0% (p ＜0.0001)、2.6% (p ＜0.0001)、1.5% (p=0.0002))的单次剂量的生物素化的me8c抗体之后4、8、12和16周(相比于对照)观察到显著靶标接合。dunn非参数分析法用于测定p值。注射me8c的动物中的靶标接合的平均面积在处理4周之后最高，且平均靶标接合在随后的8、12和16周时间点纵向减少(对于20 mg/kg me8c组分别为1.9%、1.1%、0.6%，且对于100 mg/kg me8c组分别为4.0%、2.6%和1.5%)。由于高可变性水平，在除了第12周和第16周以外的匹配时间点在20和100 mg/kg me8c单次剂量注射的动物之间未观察到显著差异(p值=0.0465、0.0432未调整的wilcoxon)。
[0098]
实施例3：阿尔茨海默病的单次剂量和多次剂量、剂量递增临床试验在具有归因于ad的mci或轻度至中度ad的患者中进行i期、双盲、随机化、安慰剂对照、平行组、单次剂量研究，随后进行多次剂量、剂量递增研究，以评价单次和多次iv剂量的ly3002813 (抗体iii)的安全性、耐受性和pk。将ad患者登记入单次递增剂量(sad)阶段，且向其各自施用单次静脉内(iv)剂量的抗体iii (0.1 mg/kg iv至10 mg/kg iv的5个给药群组)或安慰剂，随后对各剂量水平进行12周随访期。在随访期之后，相同患者进入多次递增剂量(mad)阶段(5个群组)，且根据初始剂量约每月一次向其施用iv剂量的抗体iii (0.3 mg/kg iv至10 mg/kg iv)或安慰剂，最多达4次剂量。该阶段随着12周随访期结束。
[0099]
单次剂量研究(其中在单次剂量之后最多达84天评价抗体iii的pk)的结果显示，平均最终消除半衰期为单次剂量施用0.1 mg/kg至3.0 mg/kg之后约4天，并在10 mg/kg剂量水平下增加至约10天(243小时)。各剂量水平下的平均清除值范围为26.3 ml/h (10 mg/kg)至35.6 ml/h (1.0 mg/kg)。
[0100]
多次剂量研究(其中患者在sad阶段中接受单次剂量之后12周进入多次剂量阶段)的结果显示，抗体iii浓度在多次剂量抗体iii之后相比于在第一单次剂量之后显著更低。
相比于其他剂量水平，在10 mg/kg剂量水平下，抗体iii浓度通常与单次剂量施用之后观察到的那些类似。在剂量水平≤3 mg/kg时大多数患者给药之后28天的血清抗体iii浓度低于检测限值。接受10 mg/kg的患者在给药之后28天维持可定量浓度。
[0101]
大于90%的具有ad的患者在所有剂量组下的第一剂量之后3个月具有治疗中出现的抗药物抗体(ada)；滴度到mad阶段结束时趋向于增加，并在最后剂量之后持续3个月。在多次剂量施用之后抗体iii浓度的快速下降可至少部分地与ada的存在相关。治疗组还在多次给药后经历增加的输注相关的反应。
[0102]
间隔约7个月，在基线和在最后mad剂量之后进行florbetapir扫描。在剂量群组中以小脑作为参考区域比较整个灰质标准化的摄取值比(suvr)的变化，并将suvr值转化为标准化的百分制(cl)单位。经6个月静脉内接受3至5个剂量的10 mg/kg的抗体iii的6名患者的脑淀粉样蛋白显著减少(如通过florbetapir pet成像所评价)，且该剂量组中无脑血管性水肿或微出血并发症。44 cl单位的平均减少对应于脑淀粉样蛋白的平均40-50%减少。
[0103]
在延长的随访中，来自用3至5个剂量的10 mg/kg iv的抗体iii (相对于2次安慰剂)治疗的三名主体的florbetapir扫描展现在最后剂量之后18个月的持续的淀粉样蛋白移除。数据表明，短期(且可能单次)剂量的抗n3pglu aβ抗体(诸如抗体iii)足以使得淀粉样蛋白持续移除。不需要持续给药抗n3pglu aβ抗体以维持脑淀粉样蛋白的清除。
[0104]
实施例4：阿尔茨海默病的单次剂量和多次剂量临床试验由于经6个月静脉内给予3至5个剂量的10 mg/kg的ly3002813 (抗体iii)之后鉴定的显著靶标接合(通过florbetapir pet的淀粉样蛋白减少)，1b期研究正在进行中以证实不同给药方案(单次剂量、短期“诱导”给药与更高、更频繁的给药；和为了最大pd效应的持续给药)可以缓解免疫原性和免疫安全性问题，且产生持续的淀粉样蛋白减少。在具有归因于ad的mci或轻度至中度ad的患者中进行ib期、双盲、群组内随机化、安慰剂对照、平行组、单次和多次剂量研究，以评价单次和多次iv剂量的抗体iii的安全性、耐受性和pk。研究将在至少七个群组中进行，包括在10 mg/kg、20 mg/kg或40 mg/kg下的单次iv剂量(分别为群组1、2和3)，在10 mg/kg或20 mg/kg下持续24周的每两周的iv剂量(分别为群组4和5)，和在10 mg/kg或20 mg/kg下持续最多达72周的每四周的iv剂量(分别为群组6和7)。
[0105]
主要靶标接合结果是脑淀粉样蛋白的减少，如通过在基线和在开始治疗之后12周、24周、36周、48周和72周时评价的定量淀粉样蛋白pet成像(florbetapir cl)所测量。
[0106]
结果表明，10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg单次剂量和10 mg/kg多次剂量的抗体iii可以在12周时减少淀粉样蛋白(通过florbetapir pet迄今为止群组内平均减少范围为-12至-39 cl)。对于在12周之外已进行额外扫描的患者，淀粉样蛋白清除在单次剂量群组中是持续的，且随着在多次剂量群组中给药观察到进一步的淀粉样蛋白清除。
[0107]
实施例5：工程改造的n3pgluaβ抗体的表达和纯化本发明的抗n3pglu aβ抗体可基本如下表达和纯化。使用最佳预定hc:lc载体比或编码hc和lc两者的单一载体系统，用分泌抗体的表达系统瞬时或稳定地转染适当宿主细胞，诸如hek 293 ebna或cho。使用多种常用技术中的任一种纯化抗体已分泌于其中的澄清培养基。例如，将培养基方便地施加至已用相容性缓冲液(诸如磷酸盐缓冲盐水，ph 7.4)平衡的蛋白a或g sepharose ff柱。洗涤柱以移除非特异性结合组分。例如通过ph梯度(诸如0.1 m磷酸钠缓冲液(ph 6.8)至0.1 m柠檬酸钠缓冲液(ph 2.5))洗脱结合的抗体。检测抗
体级分，诸如通过sds-page，随后将其合并。进一步纯化根据预期用途而任选。可使用常见技术浓缩和/或无菌过滤抗体。可通过常见技术(包括尺寸排阻、疏水性相互作用、离子交换或羟基磷灰石色谱)有效移除可溶性聚集体和多聚体。在这些色谱步骤之后抗体的纯度大于99%。可立即在-70℃下冷冻产物或可将其冻干。抗n3pglu aβ抗体的氨基酸序列提供于表a中。
[0108]
实施例6：结合亲和力和动力学使用biacore
®ꢀ
3000 (ge healthcare)通过表面等离子共振来测量本发明的抗n3pglu aβ抗体(抗体i或抗体ii)与pe3-42 aβ肽或与aβ 1-40肽的结合亲和力和动力学。通过如下测量结合亲和力：经由biacore
®ꢀ
cms芯片上的固定化的蛋白a捕获抗n3pglu aβ抗体，并使pe3-42 aβ肽或aβ 1-40肽从100 nm开始以2倍连续稀释至3.125 nm流过。所述实验在25℃下在hbs-ep缓冲液(ge healthcare br100669；10 mm hepes，150 mm nacl，3 mm edta，0.05%表面活性剂p20，ph 7.4)中实施。
[0109]
对于每个循环，用5 μl浓度为10 μg/ml的抗体溶液的注射液以10 μl/min流速捕获抗体。使肽以50 μl/min与250 μl注射液结合，且然后解离10分钟。将芯片表面用5 μl甘氨酸缓冲液的注射液(ph 1.5)以10 μl/ml流速再生。将数据拟合至1: 1 langmiur结合模型(langmiur binding model)以推导k
on
、k
off
并计算kd。在基本上如上文所述的程序之后，观察以下参数(显示于表c中)。
[0110]
表c.结合亲和力和动力学.抗体k
on
(x1051/ms)k
off
(x10-4
1/s)kd(nm)i1.391.310.71ii3.631.280.35iii3.622.70.75iv4.033.720.92v5.783.210.55
[0111]
未检测到与aβ 1-40的可评估的结合，指示与aβ 1-40相比，抗体i-v优先结合pe3-42 aβ肽。
[0112]
实施例7：离体靶标接合为了测定来自固定的pdapp脑的脑切片上的离体靶标接合，用外源添加的本发明的抗n3pglu aβ抗体(he8l、b12l、r17l、抗体i或抗体ii)进行免疫组织化学分析。将来自衰老的pdapp小鼠(25月龄)的低温恒温器连续冠状切片与20 μg/ml示例性的本发明的n3pglu aβ抗体一起孵育。采用对于人igg特异性的二级hrp试剂并将沉积的斑用dab-plus (dako)进行可视化。使用生物素化的鼠3d6抗体和随后的二级step-hrp作为阳性对照。阳性对照抗体(生物素化的3d6)在pdapp海马体中标记显著量的沉积的aβ，且抗n3pglu aβ抗体(he8l、b12l、r17l、抗体i或抗体ii)标记沉积物的子集。这些组织学研究证明本发明的抗n3pglu aβ抗体离体接合沉积的aβ靶标。
[0113]
实施例8：n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺；甲苯磺酸的合成
将水合的2 n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺(149.15 mg)的结晶形式添加至至乙酸乙酯(2 ml)中。将样品在80℃的温度下以1000 rpm搅拌。将对甲苯磺酸(70 mg溶解于乙酸乙酯(1 ml)中)添加至搅拌溶液中，并将其在80℃下搅拌过夜，以产生白色固体的浆液，其通过真空过滤分离以提供标题化合物。
[0114]
n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺；甲苯磺酸的替代性制备a将n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺(9.5 g，19 mmol)和对甲苯磺酸(3.80 g，19.8 mmol)添加至四氢呋喃(31 ml)、水(7.9 ml)和2-丙醇(8.6 ml)中。将溶液加热至40℃。经约3小时向温热溶液中添加2-丙醇(200.0 ml)。在开始添加2-丙醇之后立即用一部分的标题化合物(500 mg，0.75 mmol)接种混合物。在完成溶剂添加之后，经1-3小时将混合物冷却至约20℃。经2小时的目标时间将混合物从约20℃加热至约55℃。将温度在55℃下保持1小时，且然后经约4小时冷却至约20℃。将浆液在约20℃下搅拌至少10小时。将浆液过滤，并将湿滤饼用水(57 ml)洗涤。将产物在真空中在45℃下干燥至少10小时，以得到标题化合物(10.4 g，81%)。es/ms (m/z): 500 (m+h)。
[0115]
n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺；甲苯磺酸的替代性制备b将水合的n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺(20.7 g)在配备有氮气鼓泡器、具有teflon
®
香蕉叶片的连接至玻璃轴的ika
®
机械马达/搅拌器和连接至可编程的j-kem
®
温度控制器的热电偶的500 ml 3-颈圆底烧瓶中在60:40 thf:h2o (85 ml)中以170 rpm成浆。将对甲苯磺酸单水合物(7.6 g，1.03 eq)溶解于60:40 thf:h2o的混合物(20 ml)中，并在23℃下将溶液一次都添加至搅拌中的n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺浆液中，几乎立即产生透明淡红褐色溶液。然后经15分钟将搅拌速率增加至200 rpm，将水(22 ml)添加至溶液中，然后将其用n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺甲苯磺酸(750 mg，3重量%接种负荷)接种，且然后在23℃下再搅拌15分钟。经6小时，添加水(226 ml，353 ml的总溶剂；或13.6体积，17.5:82.5 thf:h2o的最终溶剂比)至浆液中，然后将其在23℃下搅拌过夜(22小时)。将浆液经由真空过滤，用15:85 thf:h2o (2
×
20 ml)冲洗，然后在真空中保持20分钟，同时将在产物湿滤饼中形成的裂纹手动按压闭合。将湿固体在40℃下在真空下干燥约72小时，以得到作为白色结晶固体的标题化合物(24.07 g，90.0重量%)。
[0116]
结晶的n-[3-[(4ar,7as)-2-氨基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氢吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺；甲苯磺酸通过xrd图谱使用cuka辐射表征为具有如下表d中所述的衍射峰(2θ值)，且具体具有在5.0
°
的衍射角2θ处的峰，以及选自19.6
°
、13.8
°
和18.5
°
的峰中的一种或多种；其中衍射角的公差为0.2
°
。
[0117]
表d：结晶实施例8的x射线粉末衍射峰峰角度(2-θ
°
)+/-0.2
°
相对强度(强度最高峰的%)15.0100.0213.422.9313.837.3414.420.2515.328.8617.525.9718.530.7819.645.8920.417.71025.630.1
[0118]
序列