一种上皮化人工仿真胆管制备方法及装置

1.本发明涉及人工胆管技术领域，具体是一种上皮化人工仿真胆管制备方法及装置。


背景技术：

2.pla、pcl均是获得美国fda批准的可降解生物材料，但却各有优缺点，如pla具有良好生物相容性和可降解性，但是它的降解速度很难控制。plc的结晶度偏高，使其降解速度比较好控制，但其降解性相对较差。采用复合材料技术是提高整体材料的力学性能和改善降解性能的有效途径。
3.所以本发明拟通过复合材料技术将pla和pcl共混，运用溶液浸溃法制备可降解人工胆管以及管状支撑支架。


技术实现要素：

4.为了弥补现有技术的不足，解决了pla降解速度很难控制，plc降解性相对较差的问题，本发明提出一种上皮化人工仿真胆管制备方法及装置。
5.本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种上皮化人工仿真胆管制备方法，该方法步骤如下：
6.s1：先采用二氯甲烷作为溶剂，将聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)的质量配比分别为100:0，90:10，70:30及50:50的比例提取，溶液的浓度为12wt％，倒入搅拌装置内进行混合；
7.s2：将所需聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)放入盛有ch2c12的称量瓶中，密封并磁力搅拌至溶质完全溶解，在使用超声波清洗仪脱泡20min后，静待溶液静置一天；
8.s3：然后将溶液浇铸到玻璃板上，进行刮膜，在室温下溶剂挥发后形成膜，最后在40℃下进行真空干燥，从而得到所需的复合人工胆管。
9.通过按照比例将聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)提取，并使用二氯甲烷作为溶剂进行制备，将其搅拌后使用超声波清洁仪进行脱泡并静置，才将静置好的溶液浇铸到玻璃板上进行刮膜，最后在40℃的真空环境下干燥，从而得到所需的复合人工胆管。
10.优选的，所述s3步骤所得到的复合人工胆管在高温蒸汽灭菌后，需要置于真空箱中保存；工作时，在经过高温蒸汽灭菌后，使得复合人工胆管可以更加干净，使用真空箱是便于长期保存。
11.本发明所述的一种上皮化人工仿真胆管制备装置，该装置适用于上述一种上皮化人工仿真胆管制备方法，所述超声波清洗仪的一侧固定安装有放置盒，所述放置盒的一侧固定安装有电推杆，所述电推杆的输出端固定安装有“u”字形的固定板，所述固定板的一端固定安装有压板，所述放置盒的内部固定安装有“u”字形的连接架，所述连接架的内部固定安装有空心弹性块，所述弹性块的一侧固定安装有导气管，所述导气管的底部开设有出气口；工作时，当物体从超声波清洗仪内取出后，物体的表面会存在水渍等杂物，此时将物体
放入放置盒内，并同时启动放置盒一侧的电推杆，让电推杆的输出端带着固定板和压板向连接架的空心弹性块处移动，使得压板挤压空心弹性块，此时弹性块内的气体被挤入导气管内，且物体处于导气管的下方，气体通过出气口吹出，此时吹出的气体正好吹到物体上，进而将物体表面的水渍和杂物吹掉，从而实现快速将物体清洁干净，去除表面水渍的作用。
12.优选的，所述压板远离固定板的一侧固定安装有推板，所述推板呈弧形；工作时，当压板在向弹性块的方向移动时，压板一侧的推板会先接触到弹性块，弧形的推板可以更好的适配弹性块和连接架，从而可以更好、更快速的挤压弹性块，使得弹性块快速的出气。
13.优选的，所述出气口的内部转动连接有空心转动球，所述转动球的底部固定连接有喷嘴；工作时，当需要改变出气口的出气方向时，通过转动转动球，转动球带着喷嘴一起转动，进而实现改变喷嘴的喷气方向，从而实现多方位的喷出的气体。
14.优选的，所述喷嘴的内部开设有滑槽，所述滑槽的内部滑动连接有滑块，所述滑块的底部固定连接有过滤网，所述滑槽的内部固定连接有弹性绳，所述弹性绳的另一端和滑块固定连接；工作时，当气体吹出时，气体吹动滑槽内的滑块，滑块带着过滤网和弹性绳向远离喷嘴的方向滑动，使得滑块和过滤网滑出喷嘴，进而方便喷嘴将气体喷出，当喷嘴不再喷出气体时，弹性绳恢复弹力，弹性绳带着滑块和过滤网复位，使得过滤网堵在喷嘴的端口内，进而实现不再使用喷嘴时，过滤网可以起到遮挡灰尘，避免灰尘进入喷嘴内，造成其堵塞的情况发生。
15.优选的，所述放置盒的内部固定连接有放置板，所述放置板的一侧滑动连接有滑杆，所述滑杆的一端固定连接有夹板，所述滑杆的另一端固定连接有矩形板，所述矩形板靠近滑杆的一侧固定连接有弹簧，所述弹簧的另一端和放置板固定连接；工作时，当将物体放置在放置板上前，先将两组滑杆向彼此远离的方向滑动，滑杆带着夹板一起移动，进而增大两组夹板之间的空间，此时将物体放入两组夹板之间，再松开两组滑杆，使得放置板两侧的弹簧恢复弹力，弹簧通过矩形板带着滑杆和夹板复位，使得两组夹板将物体夹住，进而方便对物体进行吹气，也防止物体被吹跑。
16.优选的，所述夹板远离滑杆的一侧固定连接有缓冲垫，所述缓冲垫为橡胶材质制成；工作时，当两组夹板复位时，夹板一侧的缓冲垫先和物体接触，橡胶材质的缓冲垫起到缓冲和保护物体的作用，防止夹板直接夹击物体，导致力度过大，损坏物体的情况发生。
17.本发明的有益之处在于：
18.1.本发明通过按照比例将聚乳酸(pla)与聚已内酯提取，并使用二氯甲烷作为溶剂进行制备，将其搅拌后使用超声波清洁仪进行脱泡并静置，才将静置好的溶液浇铸到玻璃板上进行刮膜，最后在40℃的真空环境下干燥，从而得到所需的复合人工胆管。
19.2.本发明当物体从超声波清洗仪内取出后，物体的表面会存在水渍等杂物，此时将物体放入放置盒内，并同时启动放置盒一侧的电推杆，让电推杆的输出端带着固定板和压板向连接架的空心弹性块处移动，使得压板挤压空心弹性块，此时弹性块内的气体被挤入导气管内，且物体处于导气管的下方，气体通过出气口吹出，此时吹出的气体正好吹到物体上，进而将物体表面的水渍和杂物吹掉，从而实现快速将物体清洁干净，去除表面水渍的作用。
附图说明
20.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
21.图1为实施例一中一种上皮化人工仿真胆管制备方法的流程结构示意图；
22.图2为实施例一中超声波清洗仪的结构示意图；
23.图3为实施例一中放置盒的结构示意图；
24.图4为实施例一中图2的a处结构示意图；
25.图5为实施例一中出气口的结构示意图；
26.图6为实施例一中喷嘴的局部结构示意图；
27.图7为实施例二中盖板的结构示意图。
28.图中：1、超声波清洗仪；2、放置盒；3、电推杆；4、固定板；5、压板；6、连接架；7、弹性块；8、导气管；9、出气口；10、推板；11、喷嘴；12、滑槽；13、滑块；14、过滤网；15、弹性绳；16、放置板；17、滑杆；18、夹板；19、矩形板；20、弹簧；21、缓冲垫；22、盖板；23、磁铁；24、转动球。
具体实施方式
29.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
30.请参阅图1所示，一种上皮化人工仿真胆管制备方法，该方法步骤如下：
31.s1：先采用二氯甲烷作为溶剂，将聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)的质量配比分别为100:0，90:10，70:30及50:50的比例提取，溶液的浓度为12wt％，倒入搅拌装置内进行混合；
32.s2：将所需聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)放入盛有ch2c12的称量瓶中，密封并磁力搅拌至溶质完全溶解，在使用超声波清洗仪1脱泡20min后，静待溶液静置一天；
33.s3：然后将溶液浇铸到玻璃板上，进行刮膜，在室温下溶剂挥发后形成膜，最后在40℃下进行真空干燥，从而得到所需的复合人工胆管。
34.工作时，通过按照比例将聚乳酸(pla)与聚已内酯(pcl)提取，并使用二氯甲烷作为溶剂进行制备，将其搅拌后使用超声波清洁仪进行脱泡并静置，才将静置好的溶液浇铸到玻璃板上进行刮膜，最后在40℃的真空环境下干燥，从而得到所需的复合人工胆管。
35.个体化、多功能复合型人工仿真胆管的表征：
36.共混试样的sem测试，采用日立s-3000n型扫描电子显微镜对断面进行扫描。
37.共混膜的傅里叶红外光谱测试，采用nicolet8700型傅里叶红外光谱仪进行atr-ftir表征。
38.共混膜的热重测试，采用tg209f1iris型热重分析仪测试不同质量比的pla/pcl共混物试样的热分解温度。
39.共混纤维的差示扫描量热仪测试，采用美国ta公司生产的q20型差示扫描量热仪，
在氮气气氛中测定。
40.共混膜的xrd结晶性能分析，使用dmax-2550pc型x射线衍射仪对共混膜进行xrd测试和计算。
41.共混试样的力学性能测试，用游标卡尺测量每个试样的厚度，选取厚度基本相同的试样进行测试，使用通用材料实验机，对样条进行拉伸测试，采用微控电子万能试验机2tb(wtw3020)来表征共混纤维的力学性能。
42.纤维管状支架的机械性能，采用径向支撑力测试装置，测试并得到支架的抗压缩性能曲线。
43.人工胆管的上皮化：
44.hamscs的分离、培养
45.(1)取材：经剖宫产产妇知情同意，在无菌条件下取健康(产前排除乙肝、hbv、hiv、梅毒等传染病)足月剖宫产新鲜剥离胎盘胎儿面羊膜，pbs液反复冲洗、玻片刮净羊膜表面血渍。
46.(2)消化羊膜分离出hamscs并培养、传代：将洗净的羊膜剪成约1mm
×
1mm
×
1mm大小的碎片，依次用0.05％胰蛋白酶(含edta)消化、300目细胞筛过滤，得悬液，终止培养基终止消化，离心、去上清液，收集细胞沉淀，完全培养基重悬细胞、培养。待细胞融合率达80％～90％时进行传代。
47.hamscs的鉴定：
48.按上述传代方法将细胞培养至第3代，进行流式细胞术检测hamscs表型(检测细胞表面抗原cd73、cd44、cd90、cd105、cd34、cd45、cd19、cd11b及hla-dr的阳性表达率)以及免疫荧光法检测hamscs的波形蛋白及ck-19表达。
49.诱导hamscs向肝干细胞分化及鉴定：
50.将上述分离鉴定后的第三代hamscs细胞加入成肝干细胞培养基(bfgf10ng/ml、5μg肝细胞生长因子的全培养基)，待细胞出现卵圆形或多角形改变后，取细胞培养液性生化检测碱性磷酸酶、甲胎蛋白及白蛋白水平。
51.诱导肝干细胞向胆管上皮细胞分化及鉴定：
52.(1)成胆管上皮细胞的诱导：待上述六孔板的细胞呈卵圆形或多角形改变，培养基更换成胆管上皮细胞培养基(1％肝细胞生长因子、2％干细胞生长因子及5％表皮细胞生长因子的全培养基)。
53.(2)免疫荧光法检测诱导后细胞ck-19的表达：待细胞呈类似铺路石样
54.上皮细胞形态，并出现胞突使细胞呈现树枝状胆管上皮细胞形态改变，取出爬片；
55.进行细胞爬片染色实验。rt-pcr检测胆管上皮细胞ck-19基因mrna表达。
56.所述s3步骤所得到的复合人工胆管在高温蒸汽灭菌后，需要置于真空箱中保存；工作时，在经过高温蒸汽灭菌后，使得复合人工胆管可以更加干净，使用真空箱是便于长期保存。
57.实施例一
58.如图2-图6所示，本发明所述的一种上皮化人工仿真胆管制备装置，该装置适用于上述一种上皮化人工仿真胆管制备方法，所述超声波清洗仪1的一侧固定安装有放置盒2，所述放置盒2的一侧固定安装有电推杆3，所述电推杆3的输出端固定安装有“u”字形的固定
板4，所述固定板4的一端固定安装有压板5，所述放置盒2的内部固定安装有“u”字形的连接架6，所述连接架6的内部固定安装有空心弹性块7，所述弹性块7的一侧固定安装有导气管8，所述导气管8的底部开设有出气口9；工作时，当物体从超声波清洗仪1内取出后，物体的表面会存在水渍等杂物，此时将物体放入放置盒2内，并同时启动放置盒2一侧的电推杆3，让电推杆3的输出端带着固定板4和压板5向连接架6的空心弹性块7处移动，使得压板5挤压空心弹性块7，此时弹性块7内的气体被挤入导气管8内，且物体处于导气管8的下方，气体通过出气口9吹出，此时吹出的气体正好吹到物体上，进而将物体表面的水渍和杂物吹掉，从而实现快速将物体清洁干净，去除表面水渍的作用。
59.所述压板5远离固定板4的一侧固定安装有推板10，所述推板10呈弧形；工作时，当压板5在向弹性块7的方向移动时，压板5一侧的推板10会先接触到弹性块7，弧形的推板10可以更好的适配弹性块7和连接架6，从而可以更好、更快速的挤压弹性块7，使得弹性块7快速的出气。
60.所述出气口9的内部转动连接有空心转动球24，所述转动球24的底部固定连接有喷嘴11；工作时，当需要改变出气口9的出气方向时，通过转动转动球24，转动球24带着喷嘴11一起转动，进而实现改变喷嘴11的喷气方向，从而实现多方位的喷出的气体。
61.所述喷嘴11的内部开设有滑槽12，所述滑槽12的内部滑动连接有滑块13，所述滑块13的底部固定连接有过滤网14，所述滑槽12的内部固定连接有弹性绳15，所述弹性绳15的另一端和滑块13固定连接；工作时，当气体吹出时，气体吹动滑槽12内的滑块13，滑块13带着过滤网14和弹性绳15向远离喷嘴11的方向滑动，使得滑块13和过滤网14滑出喷嘴11，进而方便喷嘴11将气体喷出，当喷嘴11不再喷出气体时，弹性绳15恢复弹力，弹性绳15带着滑块13和过滤网14复位，使得过滤网14堵在喷嘴11的端口内，进而实现不再使用喷嘴11时，过滤网14可以起到遮挡灰尘，避免灰尘进入喷嘴11内，造成其堵塞的情况发生。
62.所述放置盒2的内部固定连接有放置板16，所述放置板16的一侧滑动连接有滑杆17，所述滑杆17的一端固定连接有夹板18，所述滑杆17的另一端固定连接有矩形板19，所述矩形板19靠近滑杆17的一侧固定连接有弹簧20，所述弹簧20的另一端和放置板16固定连接；工作时，当将物体放置在放置板16上前，先将两组滑杆17向彼此远离的方向滑动，滑杆17带着夹板18一起移动，进而增大两组夹板18之间的空间，此时将物体放入两组夹板18之间，再松开两组滑杆17，使得放置板16两侧的弹簧20恢复弹力，弹簧20通过矩形板19带着滑杆17和夹板18复位，使得两组夹板18将物体夹住，进而方便对物体进行吹气，也防止物体被吹跑。
63.所述夹板18远离滑杆17的一侧固定连接有缓冲垫21，所述缓冲垫21为橡胶材质制成；工作时，当两组夹板18复位时，夹板18一侧的缓冲垫21先和物体接触，橡胶材质的缓冲垫21起到缓冲和保护物体的作用，防止夹板18直接夹击物体，导致力度过大，损坏物体的情况发生。
64.实施例二
65.请参阅图7所示，对比实施例一，作为本发明的另一种实施方式，所述超声波清洗仪1的外壁为金属材质，所述放置盒2的顶部铰接有盖板22，所述盖板22的一侧固定安装有磁铁23；工作时，当需要使用放置盒2时，通过转动放置盒2顶部的盖板22，使得盖板22带着磁铁23向超声波清洗仪1的方向转动，进而让磁铁23和金属材质的超声波清洗仪1相互吸附
固定，从而方便将物品放入放置盒2内，当不使用放置盒2时，通过转动盖板22，将盖板22向放置盒2的地方转动，进而将放置盒2关闭，从而减少灰尘和杂物进入放置盒2内。
66.工作原理，当物体从超声波清洗仪1内取出后，物体的表面会存在水渍等杂物，此时将物体放入放置盒2内，并同时启动放置盒2一侧的电推杆3，让电推杆3的输出端带着固定板4和压板5向连接架6的空心弹性块7处移动，使得压板5挤压空心弹性块7，此时弹性块7内的气体被挤入导气管8内，且物体处于导气管8的下方，气体通过出气口9吹出，此时吹出的气体正好吹到物体上，进而将物体表面的水渍和杂物吹掉，从而实现快速将物体清洁干净，去除表面水渍的作用，当压板5在向弹性块7的方向移动时，压板5一侧的推板10会先接触到弹性块7，弧形的推板10可以更好的适配弹性块7和连接架6，从而可以更好、更快速的挤压弹性块7，使得弹性块7快速的出气，当需要改变出气口9的出气方向时，通过转动转动球24，转动球24带着喷嘴11一起转动，进而实现改变喷嘴11的喷气方向，从而实现多方位的喷出的气体，当气体吹出时，气体吹动滑槽12内的滑块13，滑块13带着过滤网14和弹性绳15向远离喷嘴11的方向滑动，使得滑块13和过滤网14滑出喷嘴11，进而方便喷嘴11将气体喷出，当喷嘴11不再喷出气体时，弹性绳15恢复弹力，弹性绳15带着滑块13和过滤网14复位，使得过滤网14堵在喷嘴11的端口内，进而实现不再使用喷嘴11时，过滤网14可以起到遮挡灰尘，避免灰尘进入喷嘴11内，造成其堵塞的情况发生，当将物体放置在放置板16上前，先将两组滑杆17向彼此远离的方向滑动，滑杆17带着夹板18一起移动，进而增大两组夹板18之间的空间，此时将物体放入两组夹板18之间，再松开两组滑杆17，使得放置板16两侧的弹簧20恢复弹力，弹簧20通过矩形板19带着滑杆17和夹板18复位，使得两组夹板18将物体夹住，进而方便对物体进行吹气，也防止物体被吹跑，当两组夹板18复位时，夹板18一侧的缓冲垫21先和物体接触，橡胶材质的缓冲垫21起到缓冲和保护物体的作用，防止夹板18直接夹击物体，导致力度过大，损坏物体的情况发生。
67.在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
68.以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。