一种用于清热燥湿、杀虫止痒的妇科外用洗剂的制作方法

1.本发明涉及一种用于清热燥湿、杀虫止痒的妇科外用洗剂，属于制药技术领域。
技术背景
2.湿热下注所致的外阴瘙痒、白带量多是一种常见的妇科疾病。目前治疗妇女湿热下注所致的外阴瘙痒、白带量多的中成药洗剂很多，但大多治疗效果不够理想。现有技术专利检索：1、中国专利公报2005年3月9日公开了名称为“一种治疗妇科炎症的中药外用洗剂”公开号cn1589884a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：蛇床子15％-30％、白鲜皮15％-30％、黄柏15％-30％、荆芥6％-10％、防风6％-10％、苦参10％-16％、龙胆6％-10％。2、中国专利公报2006年10月4日公开了名称为“一种治疗妇科病的中药”公开号cn1840120a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：龙胆草6-9份、苦参9-15份、黄柏6-9份、白鲜皮10-15份、荆芥10-15份、防风6-9份、白芷10-15份、白蒺藜10-15份、扁蓄10-15份、生百部10-15份、蛇床子10-30份、仙鹤草15-30份、浙贝10-20份、连翘10-15份、金钱草15-30份、天花粉10-15份。3、中国专利公报2017年2月22日公开了名称为“一种治疗妇科疾病的内外兼用药物”公开号cn106421072a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：蛇床子50、花椒15、白矾15、青果15、野菊花50、金银花50、白头翁30、紫花地丁50、苦参30、地肤子50、黄柏30、百部15、龙胆草30、荆芥15、防风15、茵陈30、败将草30、黄连24、白鲜皮24、乌梅24、乳香10、没药10、鸦胆子10、鹤虱风20、雄黄15。在实际应用过程中，以上现有技术2和3中药组方含药味较多，成分复杂；现有技术2为内服药，现有技术3为内服兼外用。我们发现用以上现有技术1的组方配比制成的中成药外用妇科洗剂的效果不够理想；在近十年的时间里，我们在此组方的基础上，通过大量的实验摸索，对我公司产品“妇炎清洗剂”的处方进行二次开发，意外的发现将“蛇床子”改成“广藿香”、“防风”改成“丁香”，并对处方用量进行筛选，发现本发明中药配方制成的中成药，其临床药效学实验效果显著提高，且无任何毒副作用；我们按常规工艺制成妇科外用洗剂。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于：提供疗效更为显著的一种用于清热燥湿、杀虫止痒的妇科外用洗剂。其特点是，本发明妇科外用洗剂各原料药的用量配比为：
[0004][0005]
现有技术专利检索：1、中国专利公报2005年3月9日公开了名称为“一种治疗妇科炎症的中药外用洗剂”公开号cn1589884a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：蛇床子15％-30％、白鲜皮15％-30％、黄柏15％-30％、荆芥6％-10％、防风6％-10％、苦参10％-16％、龙胆6％-10％。2、中国专利公报2006年10月4日公开了名称为“一种治疗妇科病的中药”公开号cn1840120a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：龙胆草6-9份、苦参9-15份、黄柏6-9份、白鲜皮10-15份、荆芥10-15份、防风6-9份、白芷10-15份、白蒺藜10-15份、扁
蓄10-15份、生百部10-15份、蛇床子10-30份、仙鹤草15-30份、浙贝10-20份、连翘10-15份、金钱草15-30份、天花粉10-15份。3、中国专利公报2017年2月22日公开了名称为“一种治疗妇科疾病的内外兼用药物”公开号cn106421072a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：蛇床子50、花椒15、白矾15、青果15、野菊花50、金银花50、白头翁30、紫花地丁50、苦参30、地肤子50、黄柏30、百部15、龙胆草30、荆芥15、防风15、茵陈30、败将草30、黄连24、白鲜皮24、乌梅24、乳香10、没药10、鸦胆子10、鹤虱风20、雄黄15。
[0006]
在实际应用过程中，以上现有技术2含有16味药材，现有技术3含有25味药材，现有技术2和3中药组方含药味均较多，成分复杂，制成的制剂疗效一般；现有技术2为内服药，现有技术3为内服兼外用。我们发现用以上现有技术1的组方配比制成的中成药外用妇科洗剂的效果不够理想；在近十年的时间里，我们在此组方的基础上，通过大量的实验摸索，对我公司产品“妇炎清洗剂”的处方进行二次开发，意外的发现将“蛇床子”改成“广藿香”、“防风”改成“丁香”，并对处方用量进行筛选，发现本发明中药配方制成的中成药，其临床药效学实验效果显著提高，且无任何毒副作用；我们按常规工艺制成妇科外用洗剂。
[0007]
1、本发明妇科外用洗剂的制备方法如下：
[0008]
组方配比：
[0009][0010]
制备方法：
[0011]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0012]
本发明妇科外用洗剂具有清热燥湿，杀虫止痒的功效；主要用于湿热下注所致的外阴瘙痒，白带量多；外阴炎、阴道炎见以上证候者。
[0013]
药效学试验：
[0014]
一、本发明处方筛选试验：本发明处方原料药配比是经过严格药理筛选试验，得出的最佳原料药配比。
[0015]
处方筛选实验药物的制备：
[0016]
a组：组方配比：
[0017][0018]
制备方法：
[0019]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度
为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0020]
b组：组方配比：
[0021][0022]
制备方法：
[0023]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0024]
c组：组方配比：
[0025][0026]
制备方法：
[0027]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0028]
d组：组方配比：
[0029][0030]
制备方法：
[0031]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0032]
e组：组方配比：
[0033][0034]
制备方法：
[0035]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0036]
实验目的：通过对a组、b组、c组、d组、e组的抗炎、镇痛、止痒、抗过敏和细胞免疫等药理实验研究，将a组、b组、c组、d组、e组进行对比，观察其药理作用的强弱。
[0037]
试验方法：a组、b组、c组、d组、e组对小鼠皮肤毛细血管渗透性的影响；对小鼠尾根加压所致疼痛的影响；对磷酸组织胺引起豚鼠致痒反应的影响；对二硝基氯苯诱发迟发型皮肤过敏反应的影响；对小鼠细胞免疫功能的影响。
[0038]
一、对小鼠皮肤毛细血管渗透性的影响
[0039]
实验材料
[0040]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0041]
2、药物：a组、b组、c组、d组、e组五个处方组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0042]
实验方法
[0043]
昆明种小鼠雌性60只，体重23～27g，随机分成6组，每组10只。实验各组小鼠皮下注射给药，对照组注射同体积的生理盐水；a组、b组、c组、d组、e组分别注射给药均为2.0g生药/kg，给药1h后，每尾静脉注射0.5％伊文思蓝0.2ml/10g，15min后在腹部脱毛处涂二甲苯0.04ml/只,15min后处死小鼠，取蓝染皮肤适当剪碎，置丙酮：生理盐水(7：3)液中，浸泡48h。离心后取上清液，于分光光度计波长61onm处比色测定吸收度(od)值。实验结果：见表1
[0044]
表1对小鼠皮肤毛细血管渗透性的影响
[0045][0046]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与a组比
△
p＜0.05。
[0047]
结果表明：a组、b组、c组、d组、e组对小鼠皮肤毛细血管通透性有显著抑制作用，明显抑制了水肿炎症的渗出，b组、c组、d组、e组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；a组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组与b组、c组、d组、e组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，a组比b组、c组、d组、e组的抗炎作用强。
[0048]
二、对小鼠尾根加压所致疼痛的影响
[0049]
实验材料
[0050]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0051]
2、药物：a组、b组、c组、d组、e组五个处方组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0052]
实验方法
[0053]
采用小鼠尾根压痛法，在离小鼠尾根1cm处，作为压痛点，用压痛仪测定痛阈值，以小鼠因尾部受压疼痛嘶叫为准，筛选痛阈值在10～45内的雌性小鼠60只，体重23～27g，随机分为6组，每组10只，测定痛阈两次，以均值作为药前值。各组分别给药，在压痛点处涂药，对照组涂抹同体积的生理盐水；a组、b组、c组、d组、e组分别涂抹给药均为2.0g生药/kg，在给药1h后，测定痛阈值。实验结果：见表2
[0054]
表2对小鼠尾根加压所致疼痛的影响
[0055][0056]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与a组比
△
p＜0.05。
[0057]
结果表明：a组、b组、c组、d组、e组均对小鼠尾根加压所致疼痛有明显的镇痛作用，可使压痛压力升高，b组、c组、d组、e组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；a组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组与b组、c组、d组、e组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，a组比b组、c组、d组、e组的镇痛作用强。
[0058]
三、对磷酸组织胺引起豚鼠致痒反应的影响
[0059]
实验材料
[0060]
1、动物：雌性豚鼠，体重250～290g。
[0061]
2、药物：a组、b组、c组、d组、e组五个处方组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0062]
实验方法
[0063]
健康雌性豚鼠60只，体重250～290g，随机分成6组，每组10只。实验前将每只豚鼠右后足背刮毛，在刮毛处各组动物分别涂抹药物，对照组涂抹同体积的生理盐水；a组、b组、c组、d组、e组分别涂抹给药均为0.8g生药/kg，每天2次，连续给药5d，末次给药后2h，在每只豚鼠右后足背刮毛处用粗砂纸擦伤脱毛处表皮，面积约1cm2，10min后开始在创面处滴0.01％磷酸组织胺0.05ml/只，此后每隔3min依0.02％、0.03％、0.04％
……
递增浓度，每次均为0.05ml/只。直至出现豚鼠回头舔擦伤处，豚鼠出现回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺总量即为致痒阈。实验结果：见表3
[0064]
表3对磷酸组胺引起豚鼠致痒反应的影响
[0065]
[0066][0067]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与a组比
△
p＜0.05。
[0068]
结果表明：a组、b组、c组、d组、e组能明显提高磷酸组织胺引起豚鼠瘙痒的致痒阈，b组、c组、d组、e组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；a组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组与b组、c组、d组、e组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，a组比b组、c组、d组、e组的止痒作用强。
[0069]
四、对二硝基氯苯诱发迟发型皮肤过敏反应的影响
[0070]
实验材料
[0071]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0072]
2、药物：a组、b组、c组、d组、e组五个处方组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0073]
实验方法
[0074]
昆明种雌性小鼠60只，体重23～27g，随机分成6组，每组10只。各组小鼠颈部去毛，用1％的二硝基氯苯丙酮溶液100μl/只均匀涂抹致敏，然后各组小鼠腹部去毛，范围为3cm
×
3cm，致敏当日开始腹部涂抹给药，对照组涂抹等体积的生理盐水；a组、b组、c组、d组、e组分别涂抹给药均为2.0g生药/kg，连续给药12d，每日1次，末次给药后，将1％的二硝基氯苯丙酮溶液10μl/只均匀涂抹于小鼠腹部皮肤进行攻击，攻击24h后，每鼠尾静脉注射1％伊文思蓝10ml/kg，30min后处死小鼠，取下腹部蓝染皮肤，剪碎，置试管中，用1：1丙酮生理盐水混合液5ml浸泡24h，离心取上清液，用721型分光光度计610nm测定吸光度。
[0075]
实验结果：见表4
[0076]
表4对小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响
[0077][0078][0079]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与a组比
△
p＜0.05。
[0080]
结果表明：a组、b组、c组、d组、e组可显著增强二硝基氯苯所致小鼠迟发型皮肤过敏反应，吸光度明显增加，b组、c组、d组、e组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；a组
与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组与b组、c组、d组、e组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，a组比b组、c组、d组、e组抗皮肤过敏的免疫作用强。
[0081]
五、对小鼠细胞免疫功能的影响
[0082]
实验材料
[0083]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0084]
2、药物：a组、b组、c组、d组、e组五个处方组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0085]
实验方法
[0086]
昆明种雌性小鼠60只，体重23～27g，随机分成6组，每组10只。每鼠每天肌肉注射植物血凝素10mg/kg，共注射3d，同时实验各组小鼠每日皮下注射给药，对照组注射等体积的生理盐水；a组、b组、c组、d组、e组分别注射给药均为2.0g生药/kg，共8d，第8d剪尾，取血推片，瑞氏染色，油镜下计数200个淋巴细胞中过渡性细胞的数量，计算所占百分率。实验结果：见表5
[0087]
表5对小鼠细胞免疫功能的影响
[0088][0089]
与对照组相比**p＜0.01；*p＜0.05；与a组比
△
p＜0.05。
[0090]
结果表明：a组、b组、c组、d组、e组均可使小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞转化反应增强，过渡性细胞的百分率增大，b组、c组、d组、e组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；a组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组与b组、c组、d组、e组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，a组比b组、c组、d组、e组的提高细胞免疫功能强。
[0091]
实验结果：a组、b组、c组、d组、e组对小鼠皮肤毛细血管通透性有显著抑制作用；对小鼠尾根加压所致疼痛有明显的镇痛作用；能明显提高磷酸组胺引起豚鼠瘙痒的致痒阈；可显著增强二硝基氯苯所致小鼠迟发型过敏反应，抗皮肤过敏的免疫作用增强；可使小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞转化反应增强，提高细胞免疫功能。
[0092]
结论：a组比b组、c组、d组、e组的抗炎、镇痛、止痒、抗皮肤过敏和提高细胞免疫力等药理作用强，因此，a组比b组、c组、d组、e组临床用于清热燥湿、杀虫止痒的治疗效果好，确定a组的处方为本发明组的处方。
[0093]
二、本发明药效学试验：本发明妇科外用洗剂与现有技术相比，药效学试验效果显著提高。
[0094]
经专利检索，现有技术对比文件如下：
[0095]
对比文件1：中国专利公报2005年3月9日公开了名称为“一种治疗妇科炎症的中药外用洗剂”公开号cn1589884a的专利申请，组成此发明原料药的配比为：蛇床子15％-30％、
白鲜皮15％-30％、黄柏15％-30％、荆芥6％-10％、防风6％-10％、苦参10％-16％、龙胆6％-10％。
[0096]
主要药效学试验证明：
[0097]
本发明妇科外用洗剂组各原料药重量配比“广藿香100g、白鲜皮100g、黄柏100g、荆芥30g、丁香30g、苦参60g、龙胆30g。”[0098]
同对比文件1重量配比1组(实施例1)：“蛇床子22.2％、白鲜皮22.2％、黄柏22.2％、荆芥6.7％、防风6.7％、苦参13.3％、龙胆6.7％。”及同对比文件1重量配比2组(实施例2)：“蛇床子18％、白鲜皮18％、黄柏18％、荆芥10％、防风10％、苦参16％、龙胆10％。”及同对比文件1重量配比3组(实施例3)：“蛇床子24％、白鲜皮24％、黄柏24％、荆芥6％、防风6％、苦参10％、龙胆6％。”相比，药效学试验结果有显著提高。主要药效学试验如下：
[0099]
(一)实验药物的制备：
[0100]
1、原料：
[0101]
本发明妇科外用洗剂组：由广藿香100g、白鲜皮100g、黄柏100g、荆芥30g、丁香30g、苦参60g、龙胆30g制备(按本发明：广藿香100g、白鲜皮100g、黄柏100g、荆芥30g、丁香30g、苦参60g、龙胆30g配比)。
[0102]
a组为对比文件1重量配比1组：由蛇床子100g、白鲜皮100g、黄柏100g、荆芥30g、防风30g、苦参60g、龙胆30g配比制备(按对比文件1重量配比1组(实施例1)：蛇床子22.2％、白鲜皮22.2％、黄柏22.2％、荆芥6.7％、防风6.7％、苦参13.3％、龙胆6.7％配比)。
[0103]
b组为对比文件1重量配比2组：由蛇床子81g、白鲜皮81g、黄柏81g、荆芥45g、防风45g、苦参72g、龙胆45g配比制备(按对比文件1重量配比2组(实施例2)：蛇床子18％、白鲜皮18％、黄柏18％、荆芥10％、防风10％、苦参16％、龙胆10％配比)。
[0104]
c组为对比文件1重量配比3组：由蛇床子108g、白鲜皮108g、黄柏108g、荆芥27g、防风27g、苦参45g、龙胆27g配比制备(按对比文件1重量配比3组(实施例3)：蛇床子24％、白鲜皮24％、黄柏24％、荆芥6％、防风6％、苦参10％、龙胆6％配比)。
[0105]
2、本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组的制法相同，具体如下：
[0106]
本发明妇科外用洗剂组制法：
[0107]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0108]
a组、b组、c组制法：
[0109]
以上蛇床子、白鲜皮、黄柏、荆芥、防风、苦参、龙胆共七味药材，取蛇床子、荆芥、防风，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。
[0110]
(二)药效学实验过程：
[0111]
实验目的：通过对本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组的抗炎、镇痛、止痒、抗过敏和细胞免疫等药理实验研究，将本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组进行对比，观察其药理作用的强弱。
[0112]
试验方法：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组对大鼠棉球肉芽肿的影响；对小鼠尾根加压所致疼痛的影响；对磷酸组织胺引起豚鼠致痒反应的影响；对二硝基氯苯诱发迟发型皮肤过敏反应的影响；对小鼠细胞免疫功能的影响。
[0113]
一、对大鼠棉球肉芽肿的影响
[0114]
实验材料
[0115]
1、动物：wistar雌性大鼠，体重180～220g。
[0116]
2、药物：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0117]
实验方法
[0118]
wistar雌性大鼠50只，体重180～220g，随机分成5组，每组10只。给大鼠腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，将动物固定，下腹部皮肤消毒,行正中切口，向两侧腹股沟皮下各放入1个10mg灭菌棉球，缝合皮肤切口。术后大鼠注射青霉素钾盐每日1次，共2次。各组均于术后次日开始在伤口外涂抹给药，对照组涂抹同体积的生理盐水；本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组分别涂抹给药1.0g生药/kg。连续15d，每日1次，末次给药后1h，将动物处死，取出棉球肉芽肿，置60℃烘箱中干燥12h后称重，各自减去原棉球重量,即为肉芽肿重量。
[0119]
实验结果：见表1
[0120]
表1对大鼠棉球肉芽肿的影响
[0121][0122]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与本发明妇科外用洗剂组比
△
p＜0.05。
[0123]
结果表明：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组可明显抑制大鼠棉球肉芽的增生，本发明妇科外用洗剂组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组、b组、c组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组的抗炎作用强。
[0124]
二、对小鼠尾根加压所致疼痛的影响
[0125]
实验材料
[0126]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0127]
2、药物：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0128]
实验方法
[0129]
采用小鼠尾根压痛法，在离小鼠尾根1cm处，作为压痛点，用压痛仪测定痛阈值，以小鼠因尾部受压疼痛嘶叫为准，筛选痛阈值在10～45内的雌性小鼠50只，体重23～27g，随机分为5组，每组10只，测定痛阈两次，以均值作为药前值。各组分别给药，在压痛点处涂药，对照组涂抹同体积的生理盐水；本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组分别涂抹给药均为2.0g生药/kg，在给药1h后，测定痛阈值。实验结果：见表2
[0130]
表2对小鼠尾根加压所致疼痛的影响
[0131][0132][0133]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与本发明妇科外用洗剂组比
△
p＜0.05。
[0134]
结果表明：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组均对小鼠尾根加压所致疼痛有明显的镇痛作用，可使压痛压力升高，本发明妇科外用洗剂组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组、b组、c组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组的镇痛作用强。
[0135]
三、对磷酸组织胺引起豚鼠致痒反应的影响
[0136]
实验材料
[0137]
1、动物：雌性豚鼠，体重250～290g。
[0138]
2、药物：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0139]
实验方法
[0140]
健康雌性豚鼠50只，体重250～290g，随机分成5组，每组10只。实验前将每只豚鼠右后足背刮毛，在刮毛处各组动物分别涂抹药物，对照组涂抹同体积的生理盐水；本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组分别涂抹给药均为0.8g生药/kg，每天2次，连续给药5d，末次给药后2h，在每只豚鼠右后足背刮毛处用粗砂纸擦伤脱毛处表皮，面积约1cm2，10min后开始在创面处滴0.01％磷酸组织胺0.05ml/只，此后每隔3min依0.02％、0.03％、0.04％
……
递增浓度，每次均为0.05ml/只。直至出现豚鼠回头舔擦伤处，豚鼠出现回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺总量即为致痒阈。实验结果：见表3
[0141]
表3对磷酸组胺引起豚鼠致痒反应的影响
[0142][0143]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与本发明妇科外用洗剂组比
△
p＜0.05。
[0144]
结果表明：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组能明显提高磷酸组织胺引起豚鼠瘙痒的致痒阈，本发明妇科外用洗剂组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组、b组、c组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组的止痒作用强。四、对二硝基氯苯诱发迟发型皮肤过敏反应的影响
[0145]
实验材料
[0146]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0147]
2、药物：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0148]
实验方法
[0149]
昆明种雌性小鼠50只，体重23～27g，随机分成5组，每组10只。各组小鼠颈部去毛，用1％的二硝基氯苯丙酮溶液100μl/只均匀涂抹致敏，然后各组小鼠腹部去毛，范围为3cm
×
3cm，致敏当日开始腹部涂抹给药，对照组涂抹等体积的生理盐水；本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组分别涂抹给药均为2.0g生药/kg，连续给药12d，每日1次。末次给药后，将1％的二硝基氯苯丙酮溶液10μl/只均匀涂抹于小鼠腹部皮肤进行攻击，攻击24h后，每鼠尾静脉注射1％伊文思蓝10ml/kg，30min后处死小鼠，取下腹部蓝染皮肤，剪碎，置试管中，用1：1丙酮生理盐水混合液5ml浸泡24h，离心取上清液，用721型分光光度计610nm测定吸光度。实验结果：见表4
[0150]
表4对小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响
[0151][0152]
与对照组相比**p＜0.01，*p＜0.05；与本发明妇科外用洗剂组比
△
p＜0.05。
[0153]
结果表明：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组可显著增强二硝基氯苯所致小鼠迟发型过敏反应，吸光度明显增加，本发明妇科外用洗剂组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组、b组、c组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c
组抗皮肤过敏的免疫作用强。
[0154]
五、对小鼠细胞免疫功能的影响
[0155]
实验材料
[0156]
1、动物：昆明种雌性小鼠，体重23～27g。
[0157]
2、药物：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组。药物在实验前按含生药材量为45％的浓度配制。
[0158]
实验方法
[0159]
昆明种雌性小鼠50只，体重23～27g，随机分成5组，每组10只。每鼠每天肌肉注射植物血凝素10mg/kg，共注射3d，同时实验各组小鼠每日皮下注射给药，对照组注射等体积的生理盐水；本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组分别注射给药均为2.0g生药/kg，共8d，第8d剪尾，取血推片，瑞氏染色，油镜下计数200个淋巴细胞中过渡性细胞的数量，计算所占百分率。实验结果：见表5
[0160]
表5对小鼠细胞免疫功能的影响
[0161][0162]
与对照组相比**p＜0.01；*p＜0.05；与本发明妇科外用洗剂组比
△
p＜0.05。
[0163]
结果表明：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组均可使小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞转化反应增强，过渡性细胞的百分率增大，本发明妇科外用洗剂组与对照组相比有极显著性差异(p＜0.01)；a组、b组、c组与对照组相比较有显著性差异(p＜0.05)；本发明妇科外用洗剂组与a组、b组、c组比较有显著性差异(p＜0.05)。可见，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组的提高细胞免疫功能强。
[0164]
实验结果：本发明妇科外用洗剂组和a组、b组、c组可明显抑制大鼠棉球肉芽的增生；对小鼠尾根加压所致疼痛有明显的镇痛作用；能明显提高磷酸组胺引起豚鼠瘙痒的致痒阈；可显著增强二硝基氯苯所致小鼠迟发型过敏反应，抗皮肤过敏的免疫作用增强；可使小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞转化反应增强，提高细胞免疫功能。
[0165]
结论：本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组的抗炎、镇痛、止痒、抗皮肤过敏和提高细胞免疫力等药理作用强，因此，本发明妇科外用洗剂组比a组、b组、c组治疗清热燥湿、杀虫止痒的临床疗效好。
具体实施方式
[0166]
实施例1：本发明妇科外用洗剂的制备：
[0167]
组方配比：
[0168][0169]
制备方法：
[0170]
以上广藿香、白鲜皮、黄柏、荆芥、丁香、苦参、龙胆共七味药材，取荆芥、丁香、广藿香，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液与挥发油混合，加聚山梨酯807.8ml，使成均匀澄清的药液，备用；药渣与其余黄柏、白鲜皮、苦参、龙胆四味药材加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时测得相对密度为1.10～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，与上述药液混匀，加苯甲酸钠1.5g，再加水至1000ml，混匀，即得洗剂。