柳兰和/或其提取物在制备抑菌产品中的用途及其组合物

1.本发明属于日化用品技术领域，特别是涉及柳兰和/或其提取物在制备抑菌产品中的用途及其组合物。


背景技术：

2.随着人们生活水平的提升以及对卫生意识的增强，我国居民对洗手液的需求量不断增加。目前，由于免洗手凝胶具有便利性的优势，其已经成为了人们日常生活的必备品，抗抑菌的洗手凝胶也日渐消费者的认可。现有技术中的抗抑菌洗手凝胶为了提高清洁力及去油能力，其配方通常选用碱性极强的表面活性剂、发泡剂、皂基等成分等为主要原料，再配以可以杀灭细菌、真菌的杀菌剂等化学试剂，这类配方的洗手凝胶虽有一定的去污力，但刺激性强，人体的皮肤是弱酸性的，化学配方洗手凝胶残留性强，长时间使用会刺激皮肤，更严重的是，皮肤的皮脂膜也会被破坏，一旦失去皮脂膜，皮肤很容易受到外界伤害。且人们在日常生活中，手部受伤的事情常有发生，在手部清洁过程中，如果使用普通免洗手凝胶，很有可能造成手部伤口感染。
3.因此，消费者更期待有一种能抑菌、清香、且无毒副作用的免洗手凝胶，在日常清洁过程中，能具有较好的抑菌效果，防止细菌病毒入侵身体，减少疾病的发生。


技术实现要素：

4.针对上述问题，本发明提供了柳兰和/或其提取物在制备抑菌产品中的用途及其组合物。
5.为了实现上述目的，本发明提供了柳兰和/或其提取物在制备抑菌产品中的用途。
6.所述产品包括但不限于药品、日用品等；所述日用品包括但不限于洗手液、洗手凝胶、免洗手凝胶、沐浴液、香皂、化妆品等。
7.进一步地，所述菌选自革兰式阳性菌、革兰式阴性菌、白色念珠球菌；
8.进一步地，所述菌选自大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠球菌。
9.本发明所述柳兰和/或其提取物作为抑菌产品的活性组分，本发明所述活性组份，是指在产品中发挥治疗作用的部分。
10.本发明提供的柳兰和/或其提取物与黄柏的用途，具体是将柳兰和/或其提取物与黄柏，和黄柏提取物，或黄柏提取物，在制备用于抑菌产品中的应用。
11.本发明还提供了一种抑菌组合物，其活性成分含有柳兰和/或其提取物。
12.进一步地，所述柳兰和/或其提取物的质量体积比为0.1～0.4：1。
13.进一步地，所述中药组合物还含有黄柏和/或其提取物；
14.进一步地，所述黄柏和/或其提取物的质量体积比为0.5～2：1。
15.本发明所述质量体积比的单位为g:ml。
16.在本发明的具体实施方式中，所述黄柏提取物的制备方法包括以下步骤：将原料用水煎煮，将得到的提取液进行浓缩沉降、干燥，即得。
17.在本发明的具体实施方式中，所述柳兰提取物的制备方法包括以下步骤：将柳兰进行水提醇沉或醇提后浓缩、干燥得干浸膏粉。
18.本发明所述制备方法中所用的溶剂，根据药材的量确定，只要能够满足提取需要即可，具体没有限制。上述制备方法所得到的提取液可以经过过滤、干燥后得到干粉，即中药提取物。
19.本发明还提供了一种抑菌中药组合物的制备方法，包括：(1)选取前述抑菌中药组合物的各组分；(2)研磨；(3)混合。
20.所述制备方法中，“(2)研磨；(3)混合”的顺序可以调整，可以是先(2)后(3)，也可以是先(3)后(2)，即，可以是先将中药提取物分别研磨后再混合，也可以是先将各中药提取物混合后再研磨。
21.本发明还提供了一种免洗手凝胶，每100g洗手凝胶包括：前述抑菌组合物0.1～15g、凝胶基质0.1～3.0g、乙醇30～80g、甘油1～5g、水1～70g。
22.进一步地，每100g洗手凝胶包括：前述抑菌中药组合物5～15g、凝胶基质0.5～1.5g、乙醇30～80g、甘油2～4g、余量为水；
23.所述凝胶基质选自卡波姆940、卡波姆u21、卡波姆u20、西黄芪胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或以上；在本发明的具体实施方式中，所述凝胶基质为卡波姆940。
24.进一步地，所述免洗手凝胶还包括香精0.01～5g。
25.在本发明中根据实际需要，还可以添加其他原料，如防腐剂(卡松、ecocide ith2防腐剂)、香精、颜料等，其他原料加入基本实现其各自的功能，通常不会影响本发明的基本性能。本领域技术人员无需付出创造性劳动即可实施。
26.有益效果：
27.(1)本发明提供了柳兰和/或其提取物用于制备抑菌的产品，特别是与黄柏提取物组合后对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠球菌等具有更好的抑菌效果。
28.(2)本发明提供的抑菌中药组合物，包括柳兰提取物和/或黄柏提取物，抑菌成分均为中药提取物，将其制备成免洗手凝胶后能够清洁肌肤，并有效抑菌，刺激性小，安全健康。
具体实施方式
29.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
30.需指出的是，以下若有未特别详细说明之过程，均是本领域技术人员可参照现有技术实现或理解的，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
31.实施例1提取物的制备
32.黄柏提取物、芸香提取物的制备方法包括以下步骤：将粉碎的黄柏原料放进提取罐中，用水煎煮3次，每次放水的比例为4:3:3，每次提取2～3h，过滤，将得到的提取液放到储存罐中进行浓缩沉降，干燥，干燥方式可采用烘干会80～100目过滤或喷雾干燥后粉碎，将检测合格的干燥提取物进行包装。
33.柳兰提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将拣选的药材用水浸泡、洗药后粉碎，炒制，进入提取工序；(2)将炒制后的药材进行水提、三效浓缩，将得到浓缩液用乙醇进行醇沉、浓缩、干燥，得到干浸膏粉；
34.或者采用如下制备方法制备柳兰提取物：(2)将炒制后的药材用乙醇提取，真空浓缩提取液后进行喷雾干燥得到干浸膏粉。
35.无患子提取物的制备方法包括以下步骤：将原料清洗净制后进行干燥、粉碎，用水加热回流提取，过滤、浓缩提取物，喷雾干燥后进行检验包装。
36.蜀葵提取物的制备方法包括以下步骤：将原料清洗净制后进行提取、浓缩、纯化、干燥提取物，粉碎后进行检验包装。
37.实施例2
38.抑菌实验一
39.1.抑菌中药组合物的预处理
40.将原料提取物粉末进行研磨处理后得到提取物细粉。
41.2.供试品的制备
42.分别取1g黄柏提取物、柳兰提取物、无患子提取物、蜀葵提取物、芸香提取物加入适量的去离子水充分溶解制备成同等浓度或剂量的供试品。
43.3.混悬液的制备：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌分别于37℃生化培养箱中培养1d，加入4m l肉汤培养基。将菌悬液转入10m l离心管中，于摇床摇晃4h得到菌悬液，静置10min。
44.4.抑菌片的制备：取无菌干燥滤纸片(直径5mm)，浸泡在样品供试品中。取无菌干燥滤纸片，浸泡在去离子水中,制备阴性对照样片。
45.5.实验方法
46.1)抑菌环实验一
47.用涂布棒分别将200μl金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的菌悬液均匀涂布于固体平板上，晾干。将平板分为5个区域并标记(4个试验样片，1片阴性对照样片)，用镊子将含药滤纸铺于平板标记区域，将平板倒置，于37℃生化培养箱中培养，每天观察抑菌效果，测定抑菌圈，根据抑菌圈结果得出不同中药提取物的抑菌效果，筛选1-2味抑菌效果好的中药提取物作为黄柏的辅药。重复试验3次，表格中的数据均为平均值。
48.表1五种单一中药提取物对不同细菌的抑菌圈直径(cm)
49.细菌黄柏柳兰蜀葵芸香无患子金黄色葡萄球菌2.271.050.700.800.75白色念珠菌1.470.771.130.781.55大肠杆菌0.750.73
‑‑‑
50.注：
“‑”
表示无抑菌圈。
51.2)抑菌环实验二
52.用涂布棒分别将200μl金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的菌悬液均匀涂布于固体平板上，晾干。将平板分为5个区域并标记，用镊子将含药滤纸铺于平板标记区域，将平板倒置，于37℃生化培养箱中培养，每天观察抑菌效果，测定抑菌圈。重复试验3次。
53.实验设置了5个不同浓度，目的是筛选黄柏与柳兰最佳抑菌浓度，为后期两药配伍
实验筛选合适的浓度。
54.表2黄柏提取物抑菌圈直径(cm)
[0055][0056]
注：
“‑”
表示抑菌圈直径《0.7cm
[0057]
3)药材提取物配伍配比研究
[0058]
依据中药方剂配伍原则和四味中药提取物对不同菌落的抑菌能力，结合前期实验选取柳兰一味药材与黄柏配伍进行抑菌实验。同时设置单味中药提取物进行抑菌试验(同等浓度下进行实验)。
[0059]
所有试验平行3次，所得数据采用spss21.0软件进行统计处理，用平均数
±
标准差(x
±
sd)表示。根据实验结果得出最佳配比。
[0060]
表3中药复方中不同浓度提取物抑菌的试验结果
[0061][0062]
注：
“‑”
表示抑菌圈直径《0.7cm
[0063]
结果分析：由上表可知，中药提取物混合物中，黄柏和柳兰的质量浓度分别为0.125g/ml,1g/ml时，对大肠杆菌体外抑菌活性最优。黄柏与柳兰提取物的混合药液对大肠杆菌体外抑菌活性优于相同浓度的黄柏提取物药液，说明柳兰能够协同黄柏增加其抑制大肠杆菌的能力。
[0064]
中药提取物混合物中黄柏和柳兰的质量浓度分别为0.25g/ml,2g/ml，对金黄色葡萄球菌体外抑菌活性最优。但黄柏与柳兰提取物的混合药液对金黄色葡萄球菌体外抑菌活性却低于相同浓度的黄柏提取物药液。
[0065]
中药提取物混合物中黄柏和柳兰的质量浓度分别为0.125g/ml,1g/ml，对白色念珠菌体外抑菌活性最优。黄柏与柳兰提取物的混合药液对白色念珠菌体外抑菌活性优于相同浓度的黄柏提取物药液，说明柳兰能够协同黄柏增加其抑制白色念珠菌的能力。
[0066]
4)mic实验步骤及结果
[0067]
取12支无菌试管，依次编号，1-10号每管加入1ml无菌培养液，然后向1号管中加1ml样品(黄柏以及柳兰供试品各做3组平行试验)，混匀后，吸取1ml加入2号管，按上述步骤依次稀释，到10号管时，从中吸取1ml丢弃。11号管为生长对照，加入1ml无菌培养液，接着，1-11号每管中加入0.2ml浓度为106cfu/ml的受试菌液。另外12号纯培养基做空白对照。在37℃条件下摇床培养24h后平行取100μl混悬液3次于96孔板中ttc染色，观察孔板，有2-3个孔板颜色变红的最大浓度即为最小抑菌浓度(mic)。
[0068]
表5中药提取物抑金黄色葡萄球菌的mic
[0069][0070][0071]
注：
“‑”
表示ttc染色结果为红色；hb-黄柏，ll-柳兰，下同。
[0072]
实验结果显示，黄柏提取物对金黄色葡萄球菌的mic值为2.02mg/ml,柳兰对金黄色葡萄球菌的mic值为4.03mg/ml。
[0073]
黄柏提取物对大肠杆菌的mic值为4.03mg/ml,柳兰对大肠杆菌的mic值为4.03mg/ml。
[0074]
黄柏提取物对白色念珠菌的mic值为16.13mg/ml,柳兰对白色念珠菌的mic值2.02mg/ml。
[0075]
表6中药提取物组合1抑菌的mic
[0076]
[0077][0078]
注：
“‑”
表示ttc染色结果为红色。
[0079]
实验结果显示，生长对照组呈现红色，空白对照为培养液，无颜色变化。
[0080]
中药提取物组合中，黄柏提取物0.125g/ml，柳兰提取物1g/ml，对金黄色葡萄球菌的mic值为1.10mg/ml，小于黄柏(2.02mg/ml)和柳兰(4.03mg/ml)对金黄色葡萄球菌的mic值；
[0081]
对大肠杆菌的mic值为2.20mg/ml，小于黄柏(4.03mg/ml)和柳兰(4.03mg/ml)对大肠杆菌的mic值；
[0082]
对白色念珠菌的mic值为0.55mg/ml，小于黄柏(16.13mg/ml)和柳兰(2.02mg/ml)对白色念珠菌的mic值。
[0083]
表7中药提取物组合2抑菌的mic
[0084]
[0085]
[0086][0087]
注：
“‑”
表示ttc染色结果为红色。
[0088]
实验结果显示，生长对照组呈现红色，空白对照为培养液，无颜色变化。
[0089]
中药提取物组合中，黄柏提取物0.25g/ml，柳兰提取物2g/ml，对金黄色葡萄球菌的mic值为1.10mg/ml，小于黄柏(2.20mg/ml)和柳兰(4.03mg/ml)对金黄色葡萄球菌的mic值；
[0090]
对大肠杆菌的mic值为4.39mg/ml，大于黄柏(4.03mg/ml)和柳兰(4.03mg/ml)对大肠杆菌的mic值；
[0091]
对白色念珠菌的mic值为1.10mg/ml，小于黄柏(16.13mg/ml)和柳兰对白色念珠菌(2.02mg/ml)的mic值。
[0092]
由表6、表7可以看出，中药提取物组合中，黄柏提取物0.125g/ml，柳兰提取物1g/ml时，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的mic值最小。
[0093]
实施例3一种抑菌免洗手凝胶
[0094]
每100g洗手凝胶包括柳兰提取物和黄柏提取物5～15g、凝胶基质0.5～1.5g、乙醇30～80g、甘油2～4g、香精0.01～5g、余量为水。