一种用于治疗慢性前列腺炎／慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于中药技术领域，具体涉及一种用于治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.前列腺炎一直是一种常见且令人困惑的疾病。该病多见于成年人，青春期较少发生，关于该病的发病率，lipsky(1989)报道在1977～1978年间约为25％。慢性前列腺炎的发病率更高一些。前列腺炎是成年男性常见病。可发生于各年龄段的成年男性，几乎50％的男性在一生中的某个时期曾受前列腺炎的影响。前列腺炎患者占泌尿外科门诊患者的8％～25％。对于该病的治疗效果，大多数病人不满意，并且许多医生在治疗前列腺炎过程中感到不顺利。目前，已经认识到前列腺炎不是一个病，而是具有各自独特形式的综合征，这种综合征各有独特的原因、临床特点和结果。因此只有对它们进行准确的诊断并给予合适的治疗措施，才有可能收到较好的效果。
3.drach根据mearea-stamey提出的下尿路细菌感染定位诊断的“四杯法”，检测前列腺按摩前初始尿10ml(voided bladder one，vb1)，中段尿液10ml(voided t bladdm two，vb2)，前列腺按摩液10ml(expressed prostatic secretion，eps)，前列腺按摩后尿液10ml(voided bladder three，vb3)。根据四个标本中的白细胞数和细菌培养结果，将前列腺炎分为：急性细菌性前列腺炎(actute bacterial prostatitis， abp)，慢性细菌性前列腺炎(chronic bacterial prostatitis，cbp)，慢性非细菌性前列腺炎(chronic nonbacterial prostatitis，cnbp)，前列腺痛(prostato dynia，pd)。 drach分类法体现了以感染为前列腺炎主要病因的认识，是第一个规范的前列腺炎分类法，称为传统分类法。但前列腺痛是一个比较模糊的概念，前列腺痛还有尚未认识或未被查出的相关疾病，这种分类法不够准确。
4.美国国立卫生研究院(national institutes of health，nih)于1995年根据前列腺炎的基础和临床研究制定了一种新的分类法：ⅰ型相当于传统分类法中的abp，ⅱ型相当于传统分类法中cbp，ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征 (chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes，cp/cpps)相当于传统分类法中的cnbp(慢性非细菌性前列腺炎，chronic nonbacterial prostatitis)，ⅲ型分为炎症性ⅲa和非炎症性ⅲb两个亚型。ⅳ型，无症状性前列腺炎(asymptomaticinflammatory prostatitis，aip)。1998年国际前列腺炎合作网络(internationalprostatitis collaborative network，ipcn)对nih分类法经过3年的临床研究和应用后正式批准了nih新分类法。这是目前临床上公认的前列腺炎的分类方法。其中的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(cp/cpps，ⅲ型)是前列腺炎中最常见的类型，约占慢性前列腺炎的90％以上。主要表现为长期、反复的骨盆区域疼痛或不适，持续时间超过3个月，可伴有不同程度的排尿症状和性功能障碍，严重影响患者的生活质量。该型又可再分为ⅲa(炎症性cpps)和ⅲb(非炎症性cpps) 两种亚型。
5.cp/cpps病因比较复杂，发病机制迄今为止尚未完全阐明，因此还没有明确的治疗
方案，多为经验性治疗。治疗目标主要是缓解疼痛、改善排尿症状和提高生活质量。临床最常用的三种药物是抗生素、α受体阻滞剂和非甾体类抗炎镇痛药，其他治疗方法有m受体阻滞剂、植物制剂、中医中药、抗抑郁药、抗焦虑药、前列腺按摩、生物反馈以及热疗。单一治疗方法效果不理想，多采用一种治疗方法为主，同时辅以其他治疗方法的综合治疗。ⅲa型推荐先应用抗生素2～4周，同时应用α受体阻滞剂、非甾体抗炎镇痛药，也可应用m受体阻滞剂以及植物制剂。选用中医中药、前列腺按摩等手段为辅助治疗。ⅲb推荐以α受体阻滞剂为主(12 周)、非甾体抗炎镇痛药、植物制剂、m受体阻滞剂及前列腺按摩为辅，必要时进行心理治疗以及抗抑郁药和抗焦虑药。
6.中医学典籍中，虽无本病的专篇记载，但观其表现，以少腹、会阴、腰骶等部位的疼痛及排尿异常为特征，故可大致归属于“腰痛”、“腹痛”、“淋证”、“癃证”等范畴。结合历代医家的认识，一般认为本病发病机理多责之于湿、热、寒、瘀、郁、虚等六个方面，且多寒热、虚实夹杂为患。
7.鉴于当前中西医在治疗cp/cpps的不足之处，当前市面上用于治疗cp/ cpps的中成药基本上都是上市于本病病名确定之前，说明书适应症描述并非明确针对于本病。而真实世界的治疗中很多临床有效的汤剂处方因成药性问题又无法开发成为中药新药。因此，目前亟需一种疗效显著、不良反应低的治疗cp/cpps的药物。


技术实现要素：

8.为了克服现有技术中治疗效果不佳、耐药的缺陷，以及弥补现有技术治则配伍的不足，本发明人特地根据新药成药性优化性研究的结果，给出了适合于开发为中药新药的方剂以解决长期以来未有专职用于cp/cpps的中药新药上市的问题，为此，本发明提供一种用于治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物及其制备方法和应用。
9.本发明的一个目的在于，提供一种用于治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，该中药组合物针对男性生殖健康的发病机理进行组方的辩证配伍，起到清热凉血、活血祛瘀、行气止痛的作用。本发明的另一个目的在于，提供上述用于治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物的制备方法。本发明的再一个目的在于，提供上述用于预防和/或治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物的制药用途。
10.为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案。
11.一方面，本发明提供一种用于治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，该中药组合物由包括以下的原料制备而成：柴胡，天花粉，当归，桃仁，红花，红藤，败酱草，乌药，元胡，虎杖。
12.优选地，该中药组合物由包括以下重量份的原料制备而成：柴胡2～100份、天花粉2～100份、当归1～80份、桃仁1～80份、红花2～120份、红藤3～80份、败酱草2～80份、乌药2～80份、元胡2～70份、虎杖4～80份。
13.优选地，该中药组合物由包括以下重量份的原料制备而成：柴胡3～80份、天花粉3～80份、当归2～50份、桃仁2～50份、红花2～60份、红藤3～60份、败酱草4～60份、乌药2～50份、元胡2～60份、虎杖4～60份。
14.更优选地，所述中药组合物由包括以下重量份的原料制备而成：柴胡5份、天花粉5份、当归2份、桃仁2份、红花2份、红藤4份、败酱草5份、乌药2份、元胡4份、虎杖4份。
15.本发明针对慢性前列腺炎盆腔疼痛综合征肝络瘀阻的病机特点，治从清热凉血、活血祛瘀、行气止痛立法。方中柴胡为引，疏肝理气，气行则血行；天花粉具有清热泻火，滋阴润燥的效果；两药合用具一升一降，以攻散淤滞，共为君药。当归、桃仁、红花活血祛瘀，消肿止痛，同为臣药。红藤清热解毒，祛风活血止痛，散瘀散结。败酱草清热解毒，消痈排脓，瘀祛止痛。乌药温肾、散寒、行气、止痛、消肿，能通理上下诸气。元胡是活血化瘀、行气止痛之妙品，尤以止痛之功效而著称于世。李时珍在《本草纲目》中归纳元胡有“活血，理气，止痛，通小便”四大功效，并推崇元胡“能行血中气滞，气中血滞，故专治一身上下诸痛”。虎杖具有清热解毒，活血行瘀等功效，并有抗菌、消炎、利尿等作用。红藤祛风活血止痛，败酱草瘀祛止痛，乌药理气止痛，元胡行气止痛，虎杖配桃仁、当归以润血燥，防气血久瘀化火化热之变，共为佐药。气血各有所归，痛自去矣。诸药合用，既能活血化瘀，又可通络止痛；共奏疏肝行气又兼清热祛浊之功。组方药材出处及炮制要求：均符合中国药典2020年版要求。
16.另一方面，本发明提供上述中药组合物的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
17.(1)取柴胡、天花粉、桃仁、红花、败酱草、乌药、元胡、虎杖，以药材质量10～20倍的60v/v％-80v/v％乙醇分2～3次进行连续回流提取，每次30～ 90min，合并提取液，过滤；
18.(2)取步骤(1)的药渣，以药材质量8～15倍的水1～2次提取，每次30～ 60min，合并提取液，过滤，弃药渣；
19.(3)取红藤、当归，以药材质量10～20倍的水分2～3次提取，每次30～ 60min，合并提取液，减压过滤，弃药渣，并将提取液与步骤(2)所得提取液合并，浓缩10～20倍；
20.(4)将步骤(1)所得乙醇提取液也步骤(3)所得浓缩液合并，调整乙醇浓度不低于60v/v％，静置8-10h以上，分别收集上清液和沉淀；
21.(5)将步骤(4)所得的上清液浓缩回收乙醇至无乙醇味，过弱极性大孔吸附树脂，先水洗，再以60～80v/v％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩回收乙醇；
22.(6)取步骤(4)所得的沉淀，与步骤(5)的浓缩液合并，过200目筛，浓缩滤液至相对密度1.0-1.3；添加辅料，混合均匀，喷雾干燥或真空干燥即得，制备成所述中药组合物。
23.根据上述的制备方法，在步骤(6)中，当所述中药组合物为粉末剂时，所述辅料为麦芽糊精，经过常规喷雾干燥后，即得粉末剂。
24.根据上述的制备方法，在步骤(6)中，当所述中药组合物为酒剂时，所述辅料为基酒(白酒含乙醇量约为50～60v/v％)，经过调配和过滤后，即得酒剂。
25.再一方面，本发明提供上述中药组合物在制备用于预防和/或治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的药物中的用途；优选地，所述慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征为ⅲ型慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征。
26.本发明的有益效果：
27.本发明的中药组合物中药材按照君臣佐使的原则共同发挥药效。所述组合物可采用常规剂量服用，也可以与其它治疗ⅲ型慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征的产品一起配合服用，副作用降低，安全性高，在补肾益精、清热利湿、活血化瘀、通络止痛、疏肝行气方面，达到药物协同增效作用，为广大男性cnp患者带来福音。
28.与现有技术相比较，本发明的中药组合物对ⅲ型慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征“瘀浊湿热阻滞精窍”的病机特点，治从清热凉血、活血祛瘀、行气止痛立法。雄性大鼠功效研究数据显示，本发明的中药组合物可显著改善前列腺组织il-6、 il-8、白细胞计数、卵磷
脂小体密度水平以及大鼠前列腺指数，表明本发明的药物组合物可以恢复大鼠前列腺功能。
29.本发明处方经新药开发成药性评估优化后，再经临床验证固定而成，能保证原药材中柴胡皂苷、虎杖苷、大黄素、小檗碱、绿原酸、芦丁(芸香苷)、乌药醇、香樟内酯等多种活性成分提取完全，同时，提取物日服用量降低，药物引湿性降低，可满足不同制剂工艺要求，保证制剂产品的质量稳定、可控，方便目标人群使用，提高长期服用的依从性。比既往使用的汤剂处方更适合用于新药开发。临床验证显示，疗效显著，未发现不良反应。本发明预期将解决我国长期以来未有专职用于cnp /cpps的中药新药上市的问题。
附图说明
30.图1为实验例5的前列腺组织he染色病理结果(
×
200)，其中a、假手术组；b、模型组；c、阳性药组；d、实施例5，图中箭头部位表示不同组别前列腺组织中腺腔间质炎症细胞浸润的变化情况。
具体实施方式
31.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种中药组合物及其制备方法及其在治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征方面的应用进行详细说明，本发明的保护范围不受以下实施例的限制。下面结合具体实施方式进行说明。
32.除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
33.实施例1用于治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，通过以下步骤制备：
34.(1)取柴胡6g、天花粉6g、桃仁3g、红花6g、败酱草6g、乌药6g、元胡 6g、虎杖12g，加入70v/v％乙醇510ml，浸泡30min，进行连续回流提取2次，每次60min，过滤，滤渣以70v/v％乙醇溶液510ml同法提取2次，合并3次滤液，减压过滤，得滤液1000ml；
35.(2)取步骤(1)的药渣，加入纯化水提取2次，每次加水600ml，煎煮 30min，合并提取液，弃药渣，减压过滤，得滤液870ml；
36.(3)取红藤9g、当归3g，加入纯化水120ml，浸泡30min，煎煮30min，过滤，滤渣再以120ml纯净水同法提取2次，合并3次滤液，弃药渣，减压过滤，得滤液200ml；
37.(4)将步骤(2)和(3)所得滤液合并，-0.06mpa,60度减压浓缩至500ml, 然后将步骤(1)所得滤液加入到浓缩液中，再补加95v/v％乙醇300ml，静置过夜，3000rpm离心10min，分别收集上清液和沉淀；
38.(5)将步骤(4)所得上清液-0.06mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至 300ml，过d101型大孔吸附树脂，以纯化水洗至无色，再以80v/v％乙醇500ml洗脱，收集洗脱液，-0.08mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至稠膏状；
39.(6)取步骤(4)所得的沉淀、与步骤(5)所得稠膏合并，-0.085mpa、60℃减压干燥，粉碎过60目筛，即得。
40.实施例2用于治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，通过以下步骤制备：
41.(1)取柴胡300g、天花粉300g、桃仁240g、红花360g、败酱草240g、乌药 240g、元胡210g、虎杖240g，加入70v/v％乙醇22l,浸泡30min,进行连续回流提取，每次60min，过滤，滤渣以70v/v％乙醇溶液22l同法提取2次，合并3次滤液，减压过滤，得滤液38l；
42.(2)取步骤(1)的药渣，加入纯化水提取2次，每次加水20l，煎煮 60min，合并提取液，弃药渣，减压过滤，得滤液36l；
43.(3)取红藤240g、当归240g，加入纯化水5l，浸泡30min，煎煮60min，过滤，滤渣分别以5l纯净水同法提取2次，合并3次滤液，弃药渣，减压过滤，得滤液8.6l；
44.(4)将步骤(2)和(3)所得滤液合并，-0.06mpa,60度减压浓缩至20l, 然后将步骤(1)所得滤液加入到浓缩液中，再补加95v/v％乙醇5l，静置过夜， 3000rpm离心10min，分别收集上清液和沉淀；
45.(5)将步骤4)所得上清液-0.06mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至4l，过d101 型大孔吸附树脂，以纯化水洗至无色，再以80v/v％乙醇2l洗脱，收集洗脱液，
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0.08mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至稠膏状；
46.(6)取步骤(4)所得的沉淀、与步骤(5)所得稠膏合并，-0.085mpa、60℃减压干燥，粉碎过60目筛，即得。
47.实施例3用于治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，通过以下步骤制备：
48.(1)取柴胡9g、天花粉9g、桃仁6g、红花6g、败酱草12g、乌药6g、元胡 12g、虎杖12g，加入70％乙醇720ml，浸泡30min，进行连续回流提取，每次 60min，过滤，滤渣以70％乙醇溶液720ml同法提取2次，合并3次滤液，减压过滤，得滤液1300ml；
49.(2)取步骤(1)的药渣，加入纯化水提取2次，每次加水720ml，煎煮 60min，合并提取液，弃药渣，减压过滤，得滤液1200ml；
50.(3)取红藤9g、当归6g，加入纯化水150ml，浸泡30min，煎煮60min，过滤，滤渣分别以150ml纯净水同法提取2次，合并3次滤液，弃药渣，减压过滤，得滤液260ml；
51.(4)将步骤(2)和(3)所得滤液合并，-0.06mpa,60度减压浓缩至400ml, 然后将步骤(1)所得滤液加入到浓缩液中，再补加95％乙醇600ml，静置过夜， 3000rpm离心10min，分别收集上清液和沉淀；
52.(5)将步骤4)所得上清液-0.06mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至300ml，过d101型大孔吸附树脂，以纯化水洗至无色，再以80％乙醇2000ml洗脱，收集洗脱液，-0.08mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至稠膏状；
53.(6)取步骤(4)所得的沉淀、与步骤(5)所得稠膏合并，-0.085mpa、60℃减压干燥，粉碎过60目筛，即得。
54.实施例4用于治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，通过以下步骤制备：
55.(1)取柴胡240g、天花粉240g、桃仁150g、红花180g、败酱草180g、乌药 150g、元胡180g、虎杖180g，加入70v/v％乙醇15l,浸泡30min,进行连续回流提取，每次60min，过滤，滤渣以70v/v％乙醇溶液15l同法提取2次，合并3次滤液，减压过滤，得滤液28l；
56.(2)取步骤(1)的药渣，加入纯化水提取2次，每次加水13l，煎煮 60min，合并提取液，弃药渣，减压过滤，得滤液22l；
57.(3)取红藤180g、当归150g，加入纯化水3.3l，浸泡30min，煎煮60min，过滤，滤渣分别以3.3l纯净水同法提取2次，合并3次滤液，弃药渣，减压过滤，得滤液3.6l；
58.(4)将步骤(2)和(3)所得滤液合并，-0.06mpa,60度减压浓缩至3.6l, 然后将步骤(1)所得滤液加入到浓缩液中，再补加95v/v％乙醇1.8l，静置过夜， 3000rpm离心10min，分别收集上清液和沉淀；
59.(5)将步骤(4)所得上清液-0.06mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至0.9l，过d101型大孔吸附树脂，以纯化水洗至无色，再以80v/v％乙醇2l洗脱，收集洗脱液，-0.08mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至稠膏状；
60.(6)取步骤(4)所得的沉淀、与步骤(5)所得稠膏合并，-0.085mpa、60℃减压干燥，粉碎过60目筛，即得。
61.实施例5用于治疗ⅲ型慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的中药组合物，通过以下步骤制备：
62.(1)取柴胡30g、天花粉30g、桃仁12g、红花12g、败酱草30g、乌药12 g、元胡24g、虎杖24g，加入70v/v％乙醇1.74l,浸泡30min,进行连续回流提取，每次60min，过滤，滤渣以70v/v％乙醇溶液1.74l同法提取2次，合并3次滤液，减压过滤，得滤液3l；
63.(2)取步骤(1)的药渣，加入纯化水提取2次，每次加水1.74l，煎煮 60min，合并提取液，弃药渣，减压过滤，得滤液3l；
64.(3)取红藤24g、当归12g，加入纯化水0.4l，浸泡30min，煎煮60min，过滤，滤渣分别以0.4l纯净水同法提取2次，合并3次滤液，弃药渣，减压过滤，得滤液0.8l；
65.(4)将步骤(2)和(3)所得滤液合并，-0.06mpa,60度减压浓缩至1l,然后将步骤(1)所得滤液加入到浓缩液中，再补加95v/v％乙醇1l，静置过夜，3000rpm 离心10min，分别收集上清液和沉淀；
66.(5)将步骤(4)所得上清液-0.06mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至2l，过d101型大孔吸附树脂，以纯化水洗至无色，再以80v/v％乙醇洗脱，收集洗脱液，-0.08mpa、60℃减压回收乙醇，并浓缩至稠膏状；
67.(6)取步骤(4)所得的沉淀、与步骤(5)所得稠膏合并，-0.085mpa、60℃减压干燥，粉碎过60目筛，即得。
68.实验分析
69.实验例1
70.(一)实验材料
71.1、实验动物：把大鼠按体重随机分组，分成假手术组、模型组、阳性药组、给药组，共4组，每组10只动物。7周龄雄性sd大鼠(spf级，40只)， 220-250g。
72.2、给药剂量：本发明给药组：实施例5，其对大鼠的给药量为11.87g生药/kg 体重，阳性药组：前列康片(0.57g/片，国药准字z33020303，浙江康恩贝制药股份有限公司)大鼠给药量为0.5g/kg体重，给药体积为0.1ml/10g体重。模型组和假手术组灌胃给予等体积生理盐水，每日灌胃1次，连续30天。
73.(二)实验方法
74.1、造模方法：在造模手术当天腹腔注射100g
·
l-1
的水合氯醛3ml
·
kg-1
，待大鼠麻醉后于下腹纵向开约1cm切口，暴露膀胱背侧前列腺及精液囊。假手术组大鼠立即缝合肌肉
皮肤；角叉菜胶组大鼠给予10g
·
l-1
角叉菜胶生理盐水，按照每只每侧0.05ml注入两侧精液囊内，缝合肌肉皮肤。
75.2、机械刺激缩足阈(paw withdrawal threshold，pwt)：将大鼠置于半透明有机玻璃笼中，用一系列标准化的细纤维(von frey纤维)刺激后肢足底中部，以纤毛稍弯曲作为完全受力的标准，使纤维弯成s形(代表机械刺激1-50g)，持续 6-8s，观察缩足反应。按照克数顺序(2、4、6、8、10、15、26g)依次使用vonfrey丝，每次刺激持续2s，间隔15s，连续5次。能够引起3/5次抬腿的最低 von frey丝克数被定义为pwt。前期试验中我们发现，造模后6周大鼠cox2介导的脊髓后角疼痛敏化开始增强，故造模后6周测量pwt。
76.3、前列腺指数检测：连续给药30d后，大鼠禁食不禁水12h，称定体质量，解剖取前列腺组织，生理盐水冲洗，滤纸吸取多余水分，电子天平称定湿质量，计算前列腺指数，公式为前列腺指数＝[前列腺湿质量/大鼠体质量]
×
100％、肿胀率＝[(致炎鼠前列腺指数-假手术鼠前列腺指数)/假手术鼠前列腺指数]
×
100％、肿胀抑制率＝[(模型组肿胀率-用药组肿胀率)/模型组肿胀率]
×
100％。
[0077]
4、前列腺组织il-6、il-8水平检测：取大鼠左侧前列腺组织，称定质量，加入2倍生理盐水行匀浆，静置，3 000r/min离心15min，采用elisa法检测前列腺组织匀浆液中il-6、il-8水平。
[0078]
5、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平：采集的全血样本，用三分类血细胞分析仪检测各组大鼠全血中白细胞计数(wbc)。
[0079]
白细胞的总数/l＝4个大方格内的白细胞总数
×
50
×
106。
[0080]
选择另外一个前列腺液放置在载玻片上，盖上玻片，镜下检验卵磷脂小体密度。卵磷脂小体密度的平均评分标准:卵磷脂小体满视野，4分；卵磷脂小体3/4视野，3 分；卵磷脂小体1/2视野，2分；卵磷脂小体1/4视野，1分。
[0081]
(三)实验结果
[0082]
1、对大鼠体质量、前列腺湿质量、前列腺指数的影响
[0083]
各组大鼠体质量比较，差异无统计学意义(p＞0.05)，表明造模和给药对大鼠体质量增长无明显影响。通过与假手术组比较，模型组大鼠前列腺湿质量、前列腺指数升高，痛阀显著降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组相比，阳性药组和本发明实施例5的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀均显著变化(p＜0.05)；通过与阳性药对比，本发明实施例5组的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀均显著优于阳性药物组(p＜0.05)，详见表1。
[0084]
表1：本发明组对大鼠前列腺指数的影响
[0085][0086]
注：与假手术组对比，
*
p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05；与阳性药组对比，
§
p《0.05。
[0087]
2、本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数和卵磷脂小体密度水平的影响：与假手术组比较，模型组大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数升高(p＜
0.05)，卵磷脂小体密度降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组比较，阳性药组、本实施例5组大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数下降，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)；与阳性药组相比，本实施例5组的大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数显著下降(p＜0.05)，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)，详见表2。
[0088]
表2：本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平的影响
[0089][0090]
注：与假手术组对比，*p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05；与阳性药组对比，
§
p《0.05。
[0091]
(四)实验结论
[0092]
试验结果表明：在大鼠慢性前列腺炎实验中观察到，与对照组假手术组比较， il-6、il-8和白细胞计数均显著升高，卵磷脂小体密度显著降低，表明建模成功。与模型组相比，阳性药组和本发明实施例5的前列腺炎指标均得到明显改善，以本发明实施例5效果最明显。与阳性药组进行对比分析，给药30天后大鼠前列腺炎数据显示，本发明实施例5组前列腺数据显著变化的同时并得到一定程度的保护作用，表明本发明组可以恢复大鼠前列腺功能。
[0093]
实验例2
[0094]
(一)实验材料
[0095]
1、实验动物：把大鼠按体重随机分组，分成假手术组、模型组、实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5，共7组，每组10只动物。7周龄雄性sd 大鼠(spf级，70只)，220-250g。
[0096]
2、给药剂量：实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5各组的大鼠给药量均为11.87g生药/kg体重，给药前，将药物配成相应浓度再灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g体重。模型组和假手术组灌胃给予等体积生理盐水，每日灌胃 1次，连续30天。
[0097]
(二)实验方法
[0098]
1造模方法：同实验例1。
[0099]
2、机械刺激缩足阈(paw withdrawal threshold，pwt)、前列腺指数检测、前列腺组织il-6、il-8水平检测、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平：同实验例1。
[0100]
(三)实验结果
[0101]
1、对大鼠体质量、前列腺湿质量、前列腺指数的影响
[0102]
各组大鼠体质量比较，差异无统计学意义(p＞0.05)，表明造模和给药对大鼠体质量增长无明显影响。通过与假手术组比较，模型组大鼠前列腺湿质量、前列腺指数升高，痛阀显著降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组相比，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀均显著变化(p＜0.05)；本发明实施例5组的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀较优于其余4组实施例，详见表3。
[0103]
表3：本发明组对大鼠前列腺指数的影响
[0104][0105]
注：与假手术组对比，
*
p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0106]
2、本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数和卵磷脂小体密度水平的影响：与假手术组比较，模型组大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数升高(p＜0.05)，卵磷脂小体密度降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组比较，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的大鼠前列腺组织il-6、 il-8水平和白细胞计数下降，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)；与模型组相比，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的大鼠前列腺组织il-6、il-8 水平和白细胞计数有不同程度的下降(p＜0.05)，卵磷脂小体密度显著升高(p＜ 0.05)，详见表4。
[0107]
表4：本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平的影响
[0108][0109]
注：与假手术组对比，*p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0110]
(四)实验结论
[0111]
试验结果表明：在大鼠慢性前列腺炎实验中观察到，与对照组假手术组比较， il-6、il-8和白细胞计数均显著升高，卵磷脂小体密度显著降低，表明建模成功。与模型组相比，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的前列腺炎指标均得到明显改善，以本发明实施例5效果最明显。与模型组进行对比分析，给药30天后大鼠前列腺炎数据显示，本发明实施例5组前列腺数据显著变化的同时并得到一定程度的保护作用，表明本发明组可以恢复大鼠前列腺功能。
[0112]
实验例3
[0113]
(一)实验材料
[0114]
1、实验动物：把大鼠按体重随机分组，分成假手术组、模型组、a组、b组、c 组和d组，共6组，每组10只动物。7周龄雄性sd大鼠(spf级，60只)， 220-250g。
[0115]
2、试验分组：具体每组药物组分如下:
[0116]
a组：取升麻30g、天花粉30g、桃仁12g、红花12g、败酱草30g、乌药12 g、元胡24g、虎杖24g，红藤24g、当归12g；
[0117]
b组:取柴胡30g、葛根30g、桃仁12g、红花12g、败酱草30g、乌药12g、元胡24g、虎杖24g，红藤24g、当归12g；
[0118]
c组:取柴胡30g、天花粉30g、桃仁12g、红花12g、鱼腥草30g、乌药12 g、元胡24g、虎杖24g，红藤24g、当归12g；
[0119]
d组(实施例5):取柴胡30g、天花粉30g、桃仁12g、红花12g、败酱草30 g、乌药12g、元胡24g、虎杖24g，红藤24g、当归12g；
[0120]
3、给药剂量：a组、b组、c组和d组的大鼠给药量均为11.87g生药/kg体重；给药前，将药物配成相应浓度再灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g体重。模型组和假手术组灌胃给予等体积生理盐水，每日灌胃1次，连续30天。
[0121]
(二)实验方法
[0122]
1、造模方法：同实验例1
[0123]
2、机械刺激缩足阈(paw withdrawal threshold，pwt)、前列腺指数检测、前列腺组织il-6、il-8水平检测、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平：同实验例1。
[0124]
(三)实验结果
[0125]
1、对大鼠体质量、前列腺湿质量、前列腺指数的影响
[0126]
各组大鼠体质量比较，差异无统计学意义(p＞0.05)，表明造模和给药对大鼠体质量增长无明显影响。通过与假手术组比较，模型组大鼠前列腺湿质量、前列腺指数升高，痛阀显著降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组相比，a组、b组、 c组和d组(实施例5)的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀均显著变化(p＜ 0.05)；本发明实施例5组的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀较优于a组、b 组和c组，详见表5。
[0127]
表5：本发明组对大鼠前列腺指数的影响
[0128][0129]
注：与假手术组对比，
*
p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0130]
2、本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数和卵磷脂小体密度水平的影响：与假手术组比较，模型组大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数升高(p＜0.05)，卵磷脂小体密度降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组比较，a组、b组、c组和d组的大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数下降，卵磷脂小体密度显著升高(p＜
0.05)；与模型组相比，实a组、b组、c组和d 组的大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数有不同程度的下降(p＜0.05)，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)，详见表6。
[0131]
表6：本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平的影响
[0132][0133]
注：与假手术组对比，*p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0134]
(四)实验结论
[0135]
试验结果表明：在大鼠慢性前列腺炎实验中观察到，与对照组假手术组比较， il-6、il-8和白细胞计数均显著升高，卵磷脂小体密度显著降低，表明建模成功。与模型组相比，a组、b组、c组和d组的前列腺炎指标均得到明显改善，以本发明实施例5(d组)的效果最明显。与模型组进行对比分析，给药30天后大鼠前列腺炎数据显示，本发明实施例5组(d组)前列腺数据显著变化的同时并得到一定程度的保护作用，表明本发明组可以恢复大鼠前列腺功能。
[0136]
实验例4
[0137]
(一)实验材料
[0138]
1、实验动物：把大鼠按体重随机分组，分成假手术组、模型组、a组、b组和c组，共5组，每组10只动物。7周龄雄性sd大鼠(spf级，50只)， 220-250g。
[0139]
2、试验分组：具体每组药物组分如下:
[0140]
a组(专利cn1814074a)：取丹参396.3g、赤芍139g、泽兰69.8g、红花 46.5g、桃仁46.5g、延胡索46.5g、王不留行115.7g、金银花23.3、败酱草46.5 g、茯苓23.3g、泽泻23.3g、大枣23.3g；
[0141]
b组(cn106474410a):取金银花10g、芦根9g、覆盆子6g、薤白5g,葛根 5g、芡实7g,山药11g、桃仁5g、昆布6g,蒲公英5g、薏苡仁9g、鱼腥草5g、益智仁5g、小茴香6g、菊花6g；
[0142]
c组(实施例5):取取柴胡30g、天花粉30g、桃仁12g、红花12g、败酱草30 g、乌药12g、元胡24g、虎杖24g，红藤24g、当归12g；
[0143]
3、给药剂量：a组、b组和c组的大鼠给药量均为11.87g生药/kg体重；给药前，将药物配成相应浓度再灌胃给药，给药体积为0.1ml/10g体重。模型组和假手术组灌胃给予等体积生理盐水，每日灌胃1次，连续30天。
[0144]
(二)实验方法
[0145]
1、造模方法：同实验例1
[0146]
2、机械刺激缩足阈(paw withdrawal threshold，pwt)、前列腺指数检测、前列腺组织il-6、il-8水平检测、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平：同实验例1。
[0147]
(三)实验结果
[0148]
1、对大鼠体质量、前列腺湿质量、前列腺指数的影响
[0149]
各组大鼠体质量比较，差异无统计学意义(p＞0.05)，表明造模和给药对大鼠体质量增长无明显影响。通过与假手术组比较，模型组大鼠前列腺湿质量、前列腺指数升高，痛阀显著降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组相比，a组、b组和c组的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀均显著变化(p＜0.05)；c组(本发明实施例5)组的大鼠前列腺湿质量、前列腺指数、痛阀较优于a组和b组，详见表7。
[0150]
表7：本发明组对大鼠前列腺指数的影响
[0151][0152]
注：与假手术组对比，
*
p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0153]
2、本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数和卵磷脂小体密度水平的影响：与假手术组比较，模型组大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数升高(p＜0.05)，卵磷脂小体密度降低(p＜0.05)，表明造模成功；与模型组比较，a组、b组和c组的大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数下降，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)；与模型组相比，a组、b组和c组的大鼠前列腺组织il-6、il-8水平和白细胞计数有不同程度的下降(p＜0.05)，卵磷脂小体密度显著升高(p＜0.05)，详见表8。
[0154]
表8：本发明组对大鼠前列腺组织il-6、il-8、白细胞计数、卵磷脂小体密度水平的影响
[0155][0156][0157]
注：与假手术组对比，*p《0.05；与模型组对比，
#
p《0.05。
[0158]
(四)实验结论
[0159]
试验结果表明：在大鼠慢性前列腺炎实验中观察到，与对照组假手术组比较， il-6、il-8和白细胞计数均显著升高，卵磷脂小体密度显著降低，表明建模成功。与模型组相比，a组、b组和c组的前列腺炎指标均得到明显改善，以本发明实施例5(c组)的效果最明显。与模型组进行对比分析，给药30天后大鼠前列腺炎数据显示，本发明实施例5组(c组)前列腺数据显著变化的同时并得到一定程度的保护作用，表明本发明组可以恢复大鼠前列腺功
能。
[0160]
实验例5
[0161]
(一)实验材料
[0162]
1、实验动物：把大鼠按体重随机分组，分成假手术组、模型组、阳性药组、实施例5，共4组，每组10只动物。7周龄雄性sd大鼠(spf级，40只)， 220-250g。
[0163]
2、给药剂量：本发明给药组：实施例5，其对大鼠的给药量为11.87g生药/kg 体重，阳性药组：前列康片(0.57g/片，国药准字z33020303，浙江康恩贝制药股份有限公司)大鼠给药量为0.5g/kg体重，给药体积为0.1ml/10g体重。模型组和假手术组灌胃给予等体积生理盐水，每日灌胃1次，连续30天。
[0164]
(二)实验方法
[0165]
1、造模方法：同实验例1。
[0166]
2、病理学指标：对前列腺组织进行常规包埋切片后行he染色，取各组用4％甲醛溶液固定的前列腺组织，24h后梯度脱水、石蜡包埋。制成切片(5μm)。常规脱蜡脱水后，苏木精－伊红染色，光学显微镜下观察。
[0167]
(三)实验结果
[0168]
1、前列腺组织he染色病理结果
[0169]
前列腺组织he染色病理结果如图1所示。从病理切片可以看出：假手术组前列腺组织结构完整，界限清晰，腺腔规则，腺上皮细胞排列整齐，腺腔间质少量炎症细胞浸润。模型组的病理结果是大鼠前列腺组织he染色结果与空白组相比变化明显，可观察到前列腺组织内血管扩张充血，腔内分泌物减少，泡腔明显狭窄，腺泡上皮呈现乳头状增生，间质疏松水肿、纤维化，腺腔间质周围见大量淋巴细胞浸润，表明前列腺炎大鼠模型复制成功。阳性药组的病理结果是大鼠前列腺组织腺腔扩大且不规则，腺腔上皮细胞排列紊乱，腺腔间质周围较少见淋巴细胞浸润。实施例5组的病理结果是大部分腺腔结构完整，但腺上皮细胞排列不齐，基膜向腺腔内凹陷，间质见少量炎性细胞浸润。
[0170]
(四)实验结论
[0171]
在大鼠慢性前列腺炎病理实验中的结果表明：通过模型组与假手术组对比，模型组病理改变明显；阳性药和实施例5分别与模型组对比，大鼠前列腺病理结果均得到较好改善，间质仅见少量炎性细胞浸润。给药30天后病理结果显示，本发明实施例5组前列腺病理图像变化显著，该药物对前列腺组织有一定程度的保护作用，表明本发明组可以较好地改善大鼠前列腺病理组织。