一种胶束型维生素K1注射液及其制备方法和应用与流程

一种胶束型维生素k1注射液及其制备方法和应用
技术领域
1.本技术涉及医药制剂技术领域，具体涉及一种胶束型维生素k1注射液及其制备方法和应用。


背景技术：

2.维生素k1(vitamin k1，phytonadione)是一种黄色至橙色澄清的黏稠液体，无臭或几乎无臭，遇光易分解。维生素k1在三氯甲烷、乙醚或植物油中易溶，在乙醇中略溶，在水中不溶。维生素k1的化学名称为：2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基-2-十六碳烯基)-1,4-萘二酮的反式和顺式异构体的混合物，其分子式：c
31h46
o2，分子量：450.71，结构式为：
[0003][0004]
目前，2020年版中国药典收载了维生素k1(vitamin k1)的原料药和注射液，美国药典usp40收载了维生素k1(phytonadione)的原料药、注射乳剂和片剂。
[0005]
维生素k1是一种脂溶性维生素，广泛存在于绿色植物中，以叶绿醌(phylloquinone)的形式存在，也可人工合成。维生素k1最早是从紫苜蓿中提纯出来的黄色油状液体，并命名为维生素k1，很早人们就利用维生素k1做止血药。其止血的药用价值在20世纪30年代发现。丹麦的生化学家赫立克
·
达姆研究鸡内出血的病症，他发现鸡在受伤时出血不止，无法凝结，直到食物中加入某种饲料，后来发现这种饲料中富含一种可立即止血的物质，这种止血的物质就是维生素k1。此后维生素k1渐渐地应用于各种出血性疾病。经多年的基础研究和临床使用，维生素k1止血以外的药理活性逐渐被发现：治疗呼吸道疾病、解痉止痛、防治骨质疏松、治疗肝炎、美容、抗肿瘤等。其药理活性确切，毒副作用轻，故广泛应用于临床，现维生素k1为临床常用药物。
[0006]
维生素k1为维生素k类药，维生素k是肝脏合成因子ⅱ、ⅶ、
ⅸ
、
ⅹ
所必须的物质，维生素k缺乏可引起这些凝血因子合成障碍或异常，临床可见出血倾向和凝血酶原时间延长。在临床上维生素k1可用于维生素k缺乏引起的出血，如梗阻性黄疸、胆瘘、慢性腹泻等所致出血，香豆素类、水杨酸钠等所致的低凝血酶原血症，预防新生儿出血以及长期应用广谱抗生素所致的体内维生素k缺乏。经多年的基础研究和临床使用，还发现维生素k1能防治呼吸道疾病、解痉止痛和治疗肝炎。另外还和骨质疏松及美容有关。维生素k1药理活性确切，毒副轻，故广泛应用于临床，现为临床常用药物。
[0007]
2020年版中国药典收载了维生素k1注射液，这是一种主药浓度为10mg/ml的呈黄色液体的灭菌水分散液，其允许微显浑浊，需要防冻保存，如果有油滴析出或分层，可在遮光条件下加热至70-80℃，振摇使其自然冷却，如果澄明度正常仍可继续使用，这些信息表明该药典记载的注射液是一种使用增溶剂使药物直接溶解于水中的注射液，而不是药剂学
领域通常理解的乳剂，因为乳剂发生油滴析出或分层后无法通过加热至70-80℃并振摇后能够达到临床可接受的澄明度。
[0008]
因此如何提高维生素k1注射液的澄清度一直是研究的重点，如中国专利申请201410271850.5中公开了一种维生素k1注射液及其制备方法，由活性成分维生素k1、辅料及注射用水配制而成，取80％配方量的注射用水，加入无水醋酸钠，得溶液a；依次称取配方量的维生素k1、hs15至干净无水容器中，乳化均匀得溶液b；将溶液a缓慢加入至溶液b中，再加焦亚硫酸钠，搅拌均匀，然后用冰醋酸调节ph至5.8-6.2；补充注射用水至配方量的全量，滤过，充氮灌封后经121℃旋转灭菌12分钟或者无菌制法，即得。与现有维生素k1注射液相比该发明制成的产品不仅符合维生素k1注射液药典标准而且还极大地提高了产品澄明度，但是该澄清度依然不能更好地满足需求，并且没有对注射液的稳定性进行记载。
[0009]
再如，中国专利申请201910199799.4中公开了一种维生素k1脂肪乳注射液，该乳剂组合物包含维生素k1、大豆油、磷脂、甘油、水。该组合物是通过制备水相、制备油相、制备粗乳、高压乳化、热压灭菌等工艺制备得到的。该发明乳剂组合物呈现如说明书所述一种或多种技术效果，例如，组合物使用时可以每次10mg，每日1-2次，24小时内总量不超过40mg，给药剂量和频率根据凝血酶原时间响应或临床症状调整；使用方式是静脉给药，输注可以不稀释，直接静脉推注，或者用5％葡萄糖注射液稀释后静脉滴注，该申请制备的维生素k1脂肪乳注射液的澄清度同样不能满足需求。
[0010]
因此需要提供一种粒径均匀、澄清度高且稳定性好的胶束型维生素k1注射液及其制备方法。


技术实现要素：

[0011]
本发明的目的是提供一种胶束型维生素k1注射液及其制备方法，这种注射液通过对辅料的选择，制备得到一种粒径均匀、澄清度高且稳定性好的胶束型维生素k1注射液。
[0012]
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0013]
一种胶束型维生素k1注射液，由活性成分维生素k1、辅料及注射用水配制而成，所述维生素k1注射液ph值为4.9-5.1。
[0014]
所述的辅料包括辅料组合物1；所述的辅料组合物1包括大豆磷脂酰胆碱和甘氨胆酸；
[0015]
本技术还提供了上述辅料组合物1的制备方法，包括如下步骤：
[0016]
(1)称取总水量80％的注射用水加入配液罐中，加入氢氧化钠后搅拌至溶解，然后加入甘氨胆酸混合均匀后，采用氢氧化钠-盐酸调节ph至5.5-6.5，搅拌至澄清，得甘氨胆酸钠液备用；
[0017]
(2)向甘氨胆酸钠溶液中加入大豆磷脂酰胆碱，搅拌溶解至半固体粘稠状，停止搅拌，冷却后60℃干燥，控制水分≤3％，经摇摆整粒机整粒，得到辅料组合物1。
[0018]
所述的胶束型维生素k1注射液的制备方法包括以下步骤：
[0019]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，加入维生素k1，150-180rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至4.9-5.1，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.10ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶
束型维生素k1注射液。
[0020]
作为一些优选地实施例，所述的胶束型维生素k1注射液中的辅料还包括15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆。
[0021]
所述的泊洛沙姆优选为泊洛沙姆188。
[0022]
其中，所述的15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的质量比为3-6:1-2；
[0023]
优选地，所述的15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的质量比为3.75：1。
[0024]
所述的胶束型维生素k1注射液的制备方法包括以下步骤：
[0025]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188，40℃条件下加热搅拌至溶解，最后加入维生素k1，150-180rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至5.5-6.5，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.1ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶束型维生素k1注射液。
[0026]
作为一些优选地实施方案，所述的胶束型维生素k1注射液，其活性成分和辅料的用量为：维生素k15-20g/l、大豆磷脂酰胆碱60-90g/l、甘氨胆酸40-70g/l、氢氧化钠3-10g/l、1m盐酸0.5-5g/l、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯1.5-30g/l、泊洛沙姆1880.5-10g/l；
[0027]
优选地，所述的胶束型维生素k1注射液，其活性成分和辅料的用量为：维生素k110-20g/l、大豆磷脂酰胆碱70-80g/l、甘氨胆酸50-65g/l、氢氧化钠4-5g/l、1m盐酸1-3g/l、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯3-15g/l、泊洛沙姆1880.5-7.5g/l；
[0028]
再优选地，所述的胶束型维生素k1注射液，其活性成分和辅料的用量为：维生素k110g/l、大豆磷脂酰胆碱80g/l、甘氨胆酸50g/l、氢氧化钠4.5g/l、1m盐酸2g/l、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯7.5g/l、泊洛沙姆188 2g/l。
[0029]
本技术还提供了上述胶束型维生素k1注射液用于制备治疗维生素k缺乏引起的缺血、出血；香豆素类、水杨酸钠等导致的低凝血酶原血症；新生儿出血以及长期应用广谱抗生素所导致的体内维生素k缺乏药物中的应用。
[0030]
与现有技术相比，本技术的有益效果在于：
[0031]
(1)本技术提供的胶束型维生素k1注射液中以大豆磷脂酰胆碱和甘氨胆酸为增溶剂，首先将大豆磷脂酰胆碱和甘氨胆酸混合制备成辅料组合物1，然后再与维生素k1混合，制备得到的胶束型维生素k1注射液澄清度得到提到；
[0032]
(2)本技术在胶束型维生素k1注射液中加入增溶剂15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，进一步提高了胶束型维生素k1注射液的澄清度，但是本领域公知增溶剂15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的价格比较昂贵，而本技术发明人在实施过程中意外地发现将15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆，尤其是和泊洛沙姆188混合使用能够在降低15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯用量的基础上对溶液澄清度以及粒度有明显的改善，得到的注射液粒度分布更加均匀，粒度值能够稳定在一定范围内，长期存放过程中不易聚集，更有利于药品稳定性。
附图说明
[0033]
图1为实施例4含量检测hplc图谱；
[0034]
图2实施例4有关物质检测hplc图谱。
具体实施方式
[0035]
下面结合试验及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术属于本发明的范围。
[0036]
本发明所使用的的原辅料以及仪器的厂家和型号如下：
[0037][0038]
实施例1一种胶束型维生素k1注射液的制备方法
[0039]
包括如下步骤：
[0040]
1、辅料组合物1的制备：
[0041]
1.1、称取总水量80％的注射用水加入配液罐中，加入氢氧化钠后搅拌至溶解，然后加入甘氨胆酸混合均匀后，采用氢氧化钠-盐酸调节ph至5.5，搅拌至澄清，得甘氨胆酸钠液备用；
[0042]
1.2、向甘氨胆酸钠溶液中加入大豆磷脂酰胆碱，搅拌溶解至半固体粘稠状，停止搅拌，冷却后60℃干燥，控制水分≤3％，经摇摆整粒机整粒，得到辅料组合物1；
[0043]
2、胶束型维生素k1注射液的制备：
[0044]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，加入维生素k1，150rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至5.5，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.1ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶束型维生素k1注射液。
[0045]
处方组成：
[0046]
成分1000支维生素k110g甘氨胆酸50g
大豆磷脂酰胆碱80g氢氧化钠(ph调节剂)4.5g盐酸(ph调节剂)2g注射用水加至1l
[0047]
实施例2一种胶束型维生素k1注射液的制备方法
[0048]
包括如下步骤：
[0049]
1、辅料组合物1的制备：
[0050]
1.1、称取总水量80％的注射用水加入配液罐中，加入氢氧化钠后搅拌至溶解，然后加入甘氨胆酸混合均匀后，采用氢氧化钠-盐酸调节ph至至6.5，搅拌至澄清，得甘氨胆酸钠液备用；
[0051]
1.2、向甘氨胆酸钠溶液中加入大豆磷脂酰胆碱，搅拌溶解至半固体粘稠状，停止搅拌，冷却后60℃干燥，控制水分≤3％，经摇摆整粒机整粒，得到辅料组合物1；
[0052]
2、胶束型维生素k1注射液的制备：
[0053]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188，40℃条件下加热搅拌至溶解，最后加入维生素k1，180rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至6.5，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.1ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶束型维生素k1注射液。
[0054]
处方组成：
[0055]
成分1000支维生素k110g甘氨胆酸55g大豆磷脂酰胆碱85g15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯10g泊洛沙姆1883g氢氧化钠(ph调节剂)6g盐酸(ph调节剂)3g注射用水加至1l
[0056]
实施例3一种胶束型维生素k1注射液的制备方法
[0057]
包括如下步骤：
[0058]
1、辅料组合物1的制备：
[0059]
1.1、称取总水量80％的注射用水加入配液罐中，加入氢氧化钠后搅拌至溶解，然后加入甘氨胆酸混合均匀后，采用氢氧化钠-盐酸调节ph至至6.0，搅拌至澄清，得甘氨胆酸钠液备用；
[0060]
1.2、向甘氨胆酸钠溶液中加入大豆磷脂酰胆碱，搅拌溶解至半固体粘稠状，停止搅拌，冷却后60℃干燥，控制水分≤3％，经摇摆整粒机整粒，得到辅料组合物1；
[0061]
2、胶束型维生素k1注射液的制备：
[0062]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，再
加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188，40℃条件下加热搅拌至溶解，最后加入维生素k1，160rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至6.0，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.1ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶束型维生素k1注射液。
[0063]
处方组成：
[0064][0065][0066]
实施例4一种胶束型维生素k1注射液的制备方法
[0067]
包括如下步骤：
[0068]
1、辅料组合物1的制备：
[0069]
1.1、称取总水量80％的注射用水加入配液罐中，加入氢氧化钠后搅拌至溶解，然后加入甘氨胆酸混合均匀后，采用氢氧化钠-盐酸调节ph至至6.0，搅拌至澄清，得甘氨胆酸钠液备用；
[0070]
1.2、向甘氨胆酸钠溶液中加入大豆磷脂酰胆碱，搅拌溶解至半固体粘稠状，停止搅拌，冷却后60℃干燥，控制水分≤3％，经摇摆整粒机整粒，得到辅料组合物1；
[0071]
2、胶束型维生素k1注射液的制备：
[0072]
取总水量50％的注射用水加入至配液罐中，然后加入辅料组合物1，搅拌溶解，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188，40℃条件下加热搅拌至溶解，最后加入维生素k1，160rpm搅拌2小时，得初始药液；采用氢氧化钠-盐酸溶液调节初始药液ph至6.0，得胶束型维生素k1注射液，待胶束型维生素k1注射液温度降至室温后定容至全量，分装于1ml棕色安瓿瓶中，装量1.05-1.1ml，于121℃条件下湿热灭菌15分钟，即得到胶束型维生素k1注射液。
[0073]
处方组成：
[0074][0075][0076]
对比例1
[0077]
与实施例4的区别在于：仅在注射液中添加15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯(含量为15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的总质量)，其他操作和步骤与实施例4相同。
[0078]
即：
[0079]
成分1000支维生素k110g甘氨胆酸50g大豆磷脂酰胆碱80g15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯9.5g泊洛沙姆188-氢氧化钠(ph调节剂)4.5g盐酸(ph调节剂)2g注射用水加至1l
[0080]
对比例2
[0081]
与实施例4的区别在于：15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的质量比为1:8.5(含量为15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的总质量)，其他操作和步骤与实施例4相同。
[0082]
即：
[0083]
[0084][0085]
对比例3
[0086]
与实施例4的区别在于：15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的质量比为94:1(含量为15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的总质量)，其他操作和步骤与实施例4相同。
[0087]
即：
[0088]
成分1000支维生素k110g甘氨胆酸50g大豆磷脂酰胆碱80g15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯9.4g泊洛沙姆1880.1g氢氧化钠(ph调节剂)4.5g盐酸(ph调节剂)2g注射用水加至1l
[0089]
对比例4
[0090]
与实施例4的区别在于：将泊洛沙姆188替换为聚山梨酯80，其他操作和步骤与实施例4相同。
[0091]
即：
[0092]
成分1000支维生素k110g甘氨胆酸50g大豆磷脂酰胆碱80g15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯7.5g泊洛沙姆188-聚山梨酯802g氢氧化钠(ph调节剂)4.5g盐酸(ph调节剂)2g注射用水加至1l
[0093]
效果实验
[0094]
1、澄清度及颜色检测
[0095]
检测方法：将供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管中，在浊度标准液制备5分钟后，在暗室内垂直同置于伞棚灯下，照度为1000lx，从水平方向观察、比较(中国药典2020年版四部通则0902)；
[0096]
表1各实施例澄清度及颜色检测
[0097][0098]
根据表1的检测数据可以看出：本技术实施例2-4制备的胶束型维生素k1注射液澄清度高，而对比例1中没有在注射液组分中添加15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆制备的注射液的澄清度明显降低，对比例1中仅添加15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯作为增溶剂得到的注射液的澄清度也明显降低，相对于实施例1改进不大，对比例4将泊洛沙姆188替换为聚山梨酯80，即替换成其他增溶剂，得到的注射液的澄清度较实施例1也无明显改进；对比例2-3改变15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆188的质量比不在本技术保护范围内，会在一定程度上影响注射液的澄清度，使澄清度降低。
[0099]
2、粒径检测
[0100]
2.1检测仪器
[0101]
仪器名称：纳米粒度及zeta电位仪；厂家：珠海真理光学仪器有限公司；型号：nanolink sz901。
[0102]
2.2检测方法
[0103]
打开计算机和仪器电源，启动操作软件nanosizer，选择纳米粒度检测或zeta电位检测，将待测样品(纳米粒度检测约2ml，zeta电位检测约1ml)倒入样品池并将样品池放入检测仓中(zeta电位检测需要插入点击后再放入检测仓中)，在操作软件中选择样品池类型，填写光学参数、测试温度、温度平衡时间、测量时间和次数，开始进行纳米粒度或zeta电位的检测，检测结束后关闭操作软件、仪器和计算机电源。
[0104]
表2不同实施例zata电位与激光粒度分布测试结果
[0105][0106]
根据表2的检测数据可以看出：本技术实施例2-4制备的注射液的粒度明显小于实施例1，与澄清度的检测结果相一致，对比例1-4改变增溶剂的种类以及配比灰在一定程度上影响注射液的粒度因此会影响注射液的澄清度，进一步说明本技术实施例2-4制备的注射液粒度分布更加均匀，粒度值能够稳定在一定范围内，长期存放过程中不易聚集，更有利于药品稳定性。
[0107]
3、质量对比及稳定性数据
[0108]
3.1含量
[0109]
3.1.1检测仪器
[0110]
仪器名称：高效液相色谱仪；厂家：日本岛津；型号：lc-20a
[0111]
3.1.2检测方法
[0112]
色谱条件：
[0113]
色谱柱：ymc carotenoid(150
×
4.6mm，3μm)；流动相：甲醇-水(97:3)；流速：1.0ml/min；检测波长：270nm；进样体积：20μl；柱温：30℃；稀释剂：无水乙醇
[0114]
3.2有关物质
[0115]
3.2.1检测仪器
[0116]
仪器名称：高效液相色谱仪；厂家：日本岛津；型号：lc-20a
[0117]
3.2.2检测方法
[0118]
色谱条件：
[0119]
色谱柱：ace excel super c18(250
×
4.6mm，5μm)；流动相a：甲醇-异丙醇-乙腈-水(65:20:5:10)；流动相b：甲醇-异丙醇(65:35)；流速：1.2ml/min；检测波长：254nm；进样体积：20μl；柱温：30℃；稀释剂：无水乙醇
[0120]
梯度程序：
[0121]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)01000141000206535556535
560100750100761000901000
[0122]
3.3检测结果
[0123]
表3不同实施例含量与有关物质检测
[0124][0125]
表4实施例4长期稳定性检测结果
[0126][0127]
根据表3的检测数据可以看出：本技术实施例2-4制备的注射液的稳定性最好，单一最大杂质量以及总杂质量均明显低于实施例1和对比例1-4；综上，本技术采用泊洛沙姆188和15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯混合作为辅料制备得到的胶束型维生素k1注射液能够在
降低15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯用量的基础上对溶液澄清度以及粒度有明显的改善，得到的注射液粒度分布更加均匀，粒度值能够稳定在一定范围内。
[0128]
根据表4的检测数据可以看出：制备得到的胶束型维生素k1注射液在长期存放过程中不易聚集，性状、ph值、含量及有关物质等关键指标无明显增长趋势，现有工艺更有利于药品稳定性。
[0129]
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，虽然可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，但是并不脱离本发明技术方案的实质和范围。