一种治疗皮肤损伤的组合物的制作方法

1.本发明属于中医药技术领域，具体涉及一种治疗皮肤损伤的组合物。


背景技术：

2.皮肤创伤是临床上较为常见的疾病，一般表现为皮肤组织的损伤，严重的可能引起全身性继发感染甚至死亡。因此，如何促进伤口快速愈合避免继发感染及并发症的出现是国内外研究的热点问题。近年来许多天然药物在促进皮肤创伤愈合方面取得了良好的临床效果。并且随着分子生物学的飞速发展和临床新技术的广泛应用，国内外学者越来越重视天然药物外用治疗皮肤创伤的修复机制。
3.穿山甲甲片作为一种天然中药材，在临床上可起到消肿排脓和疏通经络等作用，并具有良好的生物相容性和降解性。穿山甲甲片在药典中记载其具有“活血消瘢，通经下乳，消肿排脓，搜风通络”的独特功效。但目前还尚未有关于穿山甲甲片与伤口愈合等方面的研究。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供穿山甲甲片的新用途，即穿山甲甲片在治疗皮肤损伤中的应用；并且基于该应用提供一种利用穿山甲甲片制作成凝胶形式的治疗皮肤损伤的组合物。
5.本发明的第一个目的是提供穿山甲甲片在治疗皮肤损伤中的应用。本发明实验结果表明，穿山甲甲片对机械性损伤的细胞具有良好的保护作用，能降低机械性损伤的皮肤的炎症反应。
6.优选，所述的治疗皮肤损伤为治疗皮肤烫伤、割伤或擦伤。
7.本发明的第二个目的是提供一种治疗皮肤损伤的组合物，其为含有穿山甲甲片成分及可接受的皮肤用药物辅料的组合物。
8.优选，所述的治疗皮肤损伤的组合物为穿山甲甲片水凝胶，是通过如下步骤制备得到的：
9.将醋穿山甲甲片粗粉加水浸泡、煎煮、过滤收集滤液，并重复上述步骤多次，合并滤液然后浓缩，趁热加入适量卡波姆粉末搅匀，制备成穿山甲甲片水凝胶。
10.优选，所述的穿山甲甲片水凝胶，是通过如下步骤制备得到的：
11.s1.按醋穿山甲甲片粗粉与水为1g：5ml的比例将醋穿山甲甲片粗粉加入到水中，浸泡1h后，文火加热煎煮20min，过滤收集滤液；
12.s2.重复步骤s1两次；
13.s3.合并3次滤液，水浴加热浓缩滤液至滤液体积与s1中加入的醋穿山甲甲片粗粉的比例为10ml：1g，趁热向滤液中加入0.5g卡波姆粉末搅匀，制备成穿山甲甲片水凝胶。
14.优选，所述的穿山甲甲片水凝胶于4℃保存。
15.本发明的优点和有益效果如下：
16.1、穿山甲甲片水凝胶对机械性损伤的细胞、动物模型均具有良好的修复作用。
17.2、穿山甲甲片水凝胶对正常的皮肤无刺激作用。
18.3、穿山甲甲片水凝胶理化性质稳定。
19.4、穿山甲甲片水凝胶具有良好的抗炎作用，能够降低损伤后sd大鼠的皮肤炎症反应。
20.5、使用穿山甲甲片水凝胶治疗后，大鼠机械损伤的皮肤水肿明显减轻，创面肉芽组织增生明显，炎性细胞浸润减少。穿山甲甲片水凝胶对机械性皮肤损伤有较好的损伤修复作用。
21.6、穿山甲甲片制成凝胶后，方便用药，涂抹简易，能显著降低机械性皮肤损伤的发生率及进展，并且其副作用小，产品成熟。
附图说明
22.图1为穿山甲甲片水凝胶促全切层皮肤损伤愈合；图a为在手术后第0、5、10、15、20、25天拍摄伤口部位的图像；图b为根据表1得到的评分柱状图。
23.图2为穿山甲甲片水凝胶促烫伤愈合；图a为在烫伤后第0、7、14、21天拍摄伤口部位的图像；图b为根据表1得到的评分柱状图。
24.图3为穿山甲甲片水凝胶促烫伤愈合；图中为不同处理21天后相应皮肤组织的he染色结果。
具体实施方式
25.以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
26.以下实施例中：卡波姆粉末(30克，型号940)购自路博润生物公司；sd雄性大鼠购自广东省实验动物中心，实验过程中符合动物实验的伦理要求；阳性对照商品药物京万红软膏(20克，主要成分地榆、地黄、当归等，每次用量0.2g)购自天津达仁堂京万红药业有限公司。醋穿山甲甲片粗粉赠自广东省林业科学院野生动物监测救护中心，其制备方法是：将穿山甲鳞片清洗干净后，使用中药加工传统方法煎炒醋萃法进行炮制后磨成40目的醋穿山甲甲片粗粉。
27.实施例1：穿山甲甲片水凝胶的制备
28.穿山甲甲片水凝胶的制备方法为：将10g醋穿山甲甲片粗粉加入50ml蒸馏水，浸泡1h后，文火加热煎煮20min，100目滤网过滤收集滤液；然后重复两次上述的加水、浸泡、煎煮和过滤收集滤液步骤，合并3次滤液。水浴加热浓缩至滤液体积为100ml溶液，趁热加入0.5g卡波姆粉末并搅拌均匀，制备成10％穿山甲甲片水凝胶，4℃保存待用。水凝胶有醋穿山甲的特殊香气，颜色淡黄，透明。
29.进一步对穿山甲甲片水凝胶的理化性质进行检测，结果证明其具有良好的稳定性。
30.(1)配制完成的穿山甲甲片水凝胶呈淡黄色，凝胶胶体整体均匀、细腻，在常温时保持胶状，无干涸及液化现象出现。
31.(2)穿山甲甲片水凝胶具有很好的延展性，无气泡产生。
32.(3)利用sartorius ph计检测穿山甲甲片水凝胶ph值，测得穿山甲甲片水凝胶的
ph值为5.5左右，在正常人体皮肤表面ph值(5.0～7.0)范围中。穿山甲甲片水凝胶的ph值在中性范围，适宜用在皮肤上。
33.(4)供试品适量，置于载玻片上，涂成薄层，薄层面积相当于盖玻片面积，共涂3片，未测出大于180μm的粒子。
34.(5)将穿山甲甲片水凝胶放入50ml无菌离心管中，密封放置于-20℃冰箱内24h，55℃恒温箱中6h，观察凝胶胶体，凝胶整体均匀、细腻，在常温时保持胶状，无干涸及液化现象出现。
35.综上，上述制备的穿山甲甲片水凝胶具有良好的稳定性。
36.实施例2
37.1、sd雄性大鼠全层皮肤缺损模型的建立
38.将21只约250g的雄性sd大鼠建立全层皮肤缺损模型，对大鼠背部皮肤剃净毛发备皮后，无菌条件下，使用手术组织剪在大鼠背部皮肤上造一个长轴约4cm、短轴约3cm的全层皮肤缺口。21只大鼠全部存活，背部伤口可见深层肌肉，提示造模成功。
39.2、穿山甲甲片水凝胶对全层皮肤缺损模型的疗效
40.将21只造模成功的sd大鼠随机分为三组，其中，非治疗组、商品药物组、甲片组各7只。非治疗组仅使用碘伏消毒伤口；商品药物组使用碘伏消毒伤口后，涂抹商品药物；甲片组使用碘伏消毒伤口后，涂抹实施例1制备的穿山甲甲片水凝胶。连续给药14d，每日给药1次。分别在利用商品药物或穿山甲甲片水凝胶处理后0天、5天、10天、15天、20天和25天拍摄伤口(图1a)。结果显示，在第5天全切层损伤甲片治疗组中，大鼠伤口边缘收缩迅速，血痂已完全消失(图1a，days 5)。此外，在甲片治疗组第20天也显示出最佳的伤口愈合加速能力(图1a，days 20)。当治疗25天甲片组大鼠伤口面积与商品药物组相比明显减小，而且与未治疗组有显著差异(图1a，days 25)。而根据评分(图1b及表2，对应为表1中的评分标准，为了判断药物对于大鼠皮肤创伤的治疗效果，从创面评估与创面转归两个大方向设计了本评估标准)可得，当20days时，甲片组在创面大小及深度、创面上皮化覆盖率上都有显著优势，对比另外两组的得分差异显著(图1b，days 20)。当25days时，甲片组在创面评估与创面转归多个指标中得到了14分的评分，提示愈合情况良好，评分与非治疗组呈差异显著(图1b，25days)。
41.表1药物治疗大鼠全切层皮肤损伤愈合效果评价标准
[0042][0043]
表2药物治疗大鼠全切层皮肤损伤愈合效果得分细则
[0044]
[0045][0046]
实施例3
[0047]
1、sd雄性大鼠烫伤皮肤模型的建立
[0048]
将21只约250g的雄性sd大鼠建立烫伤皮肤模型，对大鼠背部皮肤剃净毛发备皮后，无菌条件下，使用沸水加热至100℃的铁制砝码在大鼠背部皮肤上停留30s，造成半径1cm的烫伤伤口。21只大鼠全部存活，烫伤部位皮肤苍白，隆起，保留有水泡痂，提示造模成功。
[0049]
2、穿山甲甲片水凝胶对烫伤皮肤模型的疗效
[0050]
将21只造模成功的sd大鼠随机分为三组，其中，非治疗组、商品药物组、甲片组各7只。非治疗组仅使用碘伏消毒伤口；商品药物组使用碘伏消毒伤口后，涂抹商品药物；甲片组使用碘伏消毒伤口后，涂抹实施例1制备的穿山甲甲片水凝胶。连续给药14d，每日给药1次。分别在利用商品药物或穿山甲甲片水凝胶处理后0天、7天、14天、21天拍摄伤口。实验观察可得，在烫伤治疗14天时，甲片组大鼠皮肤表皮痂皮已脱落，内部愈合良好(图2a，days 14)，且21天后伤口几乎完全愈合(图2a，days 21)，对比非治疗组(图2a，days 21)具有显著差异。而根据评分(图2b及表4，对应为表3中的评分标准，为了判断药物对于大鼠皮肤创伤的治疗效果，从创面评估与创面转归两个大方向设计了本评估标准)可得，当14days时，甲片组在创面大小及深度、创面上皮化覆盖率上都有显著优势，对比另外两组的得分差异显著(图2b，days 14)。当21days时，甲片组在创面评估与创面转归多个指标中得到了14分的评分，提示愈合情况良好，评分与非治疗组呈差异显著(图2b，21days)。
[0051]
表3药物治疗大鼠烫伤皮肤损伤愈合效果评价标准
[0052]
[0053][0054]
表4药物治疗大鼠烫伤皮肤损伤愈合效果得分细则
[0055][0056]
3、烫伤治疗后组织病理切片分析
[0057]
烫伤治疗后进行组织病理切片分析，病理图片观察甲片组(穿山甲甲片水凝胶处理组)皮肤完整度较好可分为3层即表皮、真皮和皮下组织，商品药物组也可看见明显的3层皮肤组织，但表皮完成度稍差，而非治疗组表皮和真皮组织出现明显缺损(图3)。