精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中的用途及药物组合物

1.本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中的用途及药物组合物。


背景技术：

2.世界范围内，癌症是造成人类死亡的主要原因，其中，皮肤肿瘤尤其是黑色素瘤又是所有癌症类型中恶性程度极高的肿瘤。目前，黑色素瘤的临床组织学分型采用clark分型，包括四型：恶性雀斑痣样黑色素瘤；浅表扩散性黑色素瘤；肢端雀斑样黑色素瘤/黏膜黑色素瘤；结节性黑色素瘤。
3.皮肤恶性黑色素瘤的临床症状包括出血、瘙痒、压痛、溃疡等，一般来讲，黑色素瘤的症状与发病年龄相关，年轻患者一般表现为瘙痒、皮损的颜色变化和界限扩大，老年患者一般表现为皮损出现溃疡，通常提示预后不良。
4.虽然应对黑色素瘤的治疗方案在迅速发展，但是药物毒副作用和耐药性引起的术后复发给治疗带来了巨大挑战。随着“老药新用”概念的提出，越来越多医生和科学家认为若能在基础和临床得到验证，即可探究将已被普及应用的临床非抗肿瘤药物开发为新的抗癌药物。这既可以节约新药的开发成本和时间，也在药物的物化、药代和安全性方面得到一定的保证。


技术实现要素：

5.基于此，本发明的一个方面，提供了一种精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中尤其是抗黑色素瘤药物中的用途。
6.本发明的另一方面，还提供了一种用于治疗皮肤肿瘤的药物组合物。
7.本发明提供的技术方案如下：
8.一种精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中的用途，所述精神类药物为阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种。
9.发明人研究发现，上述精神类药物阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯，对皮肤肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用，能够有效抑制皮肤肿瘤细胞的生长，从而能够起到抗皮肤肿瘤的作用。
10.在其中一些实施例中，所述抗皮肤肿瘤药物为抗黑色素瘤药物。试验研究发现，上述精神类药物对黑色素瘤细胞系具有显著的增殖抑制作用，对黑色素瘤的药效显著。
11.在其中一些实施例中，所述阿米三嗪在药学上可接受的盐为甲磺酸阿米三嗪。
12.在其中一些实施例中，所述精神类药物作为所述抗皮肤肿瘤药物的药物活性成分。
13.一种用于治疗皮肤肿瘤的药物组合物，所述药物组合物包括阿米三嗪、阿米三嗪
在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐及坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种。
14.研究发现，精神类药物阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯能够有效抑制皮肤肿瘤细胞的生长，采用上述精神类药物作为活性成分的药物组合物对于皮肤肿瘤具有良好的治疗效果。
15.在其中一些实施例中，所述阿米三嗪在药学上可接受的盐为甲磺酸阿米三嗪。
16.在其中一些实施例中，所述药物组合物的剂型为注射剂、口服药剂和外用药剂中的任意一种。
17.在其中一些实施例中，所述药物组合物还包括药学上可接受的辅料。
18.在其中一些实施例中，所述药学上可接受的辅料包括赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、溶剂、助溶剂、助悬剂、粘稠剂和表面活性剂中的一种或多种。
19.在其中一些实施例中，所述皮肤肿瘤为黑色素瘤。
20.本发明提出了一种精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中，尤其是抗黑色素瘤药物中的新用途，以及一种用于治疗皮肤肿瘤的药物组合物；该精神类药物为阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种；通过试验验证，上述精神类药物对黑色素瘤细胞系具有显著的增殖抑制作用，对黑色素瘤的药效显著。
附图说明
21.图1为本发明实施例1中甲磺酸阿米三嗪以及实施例2中坦度螺酮分别在 10μmol/l浓度时对人恶性黑色素瘤sk-mel-5的抑制作用实验结果；
22.图2为本发明实施例3中实验结束后对照组和甲磺酸阿米三嗪组各5只小鼠的肿瘤体积对比照片；
23.图3为本发明实施例3中对照组和甲磺酸阿米三嗪组的肿瘤体积变化的对比曲线；
24.图4为本发明实施例3中对照组和甲磺酸阿米三嗪组的小鼠体重变化对比图；
25.图5为本发明实施例4中实验结束后对照组和坦度螺酮组各5只小鼠的肿瘤体积对比照片；
26.图6为本发明实施例4中对照组和坦度螺酮组的肿瘤体积变化的对比曲线；
27.图7为本发明实施例4中对照组和坦度螺酮组的小鼠体重变化对比图。
具体实施方式
28.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
29.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材
料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
30.精神类药物是一类主要用于治疗精神分裂症、狂躁发作等其它严重精神障碍的药物。阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯，均属于精神类药物。
31.其中，甲磺酸阿米三嗪(almitrine mesylate)为一种阿米三嗪在药学上可接受的盐。甲磺酸阿米三嗪的cas号为29608-49-9，其分子式为c
28h37
f2n7o6s2，分子量为669.76，其结构式如下：
[0032][0033]
坦度螺酮(tandospirone)的cas号为87760-53-0，分子式为c
21h29
n5o2，分子量为383.49，其结构式如下：
[0034][0035]
上述精神类药物在制备治疗皮肤肿瘤尤其是黑色素瘤药物中的应用方面，目前尚未见报道。
[0036]
本发明的一种实施方式提供了一种精神类药物在制备抗皮肤肿瘤药物中的用途，该精神类药物为阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种。
[0037]
将临床非抗肿瘤药物阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯等用于处理黑色素瘤细胞，其对黑色素瘤细胞具有细胞增殖抑制作用。因此，可将上述的精神类药物作为药物活性成分应用于抗黑色素瘤药物中。
[0038]
具体地，阿米三嗪在药学上可接受的盐例如可以是甲磺酸阿米三嗪。
[0039]
研究发现，当甲磺酸阿米三嗪在dmem培养基中的浓度为10μmol/l时，对黑色素瘤sk-mel-5细胞具有显著的细胞增殖抑制作用。同样地，当坦度螺酮在dmem培养基中的浓度为10μmol/l时，对黑色素瘤sk-mel-5细胞也具有显著的细胞增殖抑制作用。
[0040]
本发明的另一些实施方式还提供了一种用于治疗皮肤肿瘤的药物组合物，该药物组合物包括阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐及坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种，还
包括药学上可接受的辅料。
[0041]
该药物组合物中，阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯作为药物组合物的活性组分，其能够有效地抑制黑色素瘤细胞的增殖，对黑色素瘤的治疗起主要作用。
[0042]
可以理解，精神类药物可以是单独的阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯；也可以是阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯中两种及两种以上的混合物；可以是单独的坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯；也可以是坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯中两种及两种以上的混合物；还可以是将阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯中的一种或多种与坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯中的一种或多种配合使用的混合物。
[0043]
其中，阿米三嗪在药学上可接受的盐可以是药学上常用类型的盐，如甲磺酸盐等；阿米三嗪在药学上可接受的酯也可以是药学上常用类型的酯，如直链或支链烷基酯、环烷基酯、芳香烷基酯、磷酸酯等；坦度螺酮在药学上可接受的盐可以是药学上常用类型的盐，如甲磺酸盐等；坦度螺酮在药学上可接受的酯也可以是药学上常用类型的酯，如直链或支链烷基酯、环烷基酯、芳香烷基酯、磷酸酯等。
[0044]
在本发明的一个具体示例中，阿米三嗪在药学上可接受的盐为甲磺酸阿米三嗪。
[0045]
在其中一些实施方式中，药学上可接受的辅料包括但不限于赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、溶剂、助溶剂、助悬剂、粘稠剂、表面活性剂等。可根据药物组合物的剂型不同，选择合适的辅料。
[0046]
可以理解，赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、溶剂、助溶剂、助悬剂、粘稠剂、表面活性剂等均可以采用本领域中常规使用的相应药剂，在本发明中不对各药剂的具体种类进行限定。
[0047]
具体地，该药物组合物可采用的剂型包括但不限于注射剂、口服药剂、外用药剂中的任意一种。可根据需要采用上述的多种剂型，以满足不同给药方式的需求。例如，可将该药物组合物制成注射剂，以方便进行注射给药；可以将该药物组合物制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊等等，便于进行口服给药；还可以将该药物组合物制成膏剂、贴剂、散剂等。
[0048]
在其他一些实施例中，该药物组合物还可以为复方制剂。即可以将上述的阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯，与其他的药物活性成分一起复配使用。
[0049]
需要说明的是，该药物组合物中阿米三嗪、阿米三嗪在药学上可接受的盐、阿米三嗪在药学上可接受的酯、坦度螺酮、坦度螺酮在药学上可接受的盐、坦度螺酮在药学上可接受的酯的含量可以根据实际生产和使用情况在合适范围内进行确定，在本发明中不做具体限定。
[0050]
下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不应将其理解为对本发明保护范围的限制。
[0051]
实施例1：甲磺酸阿米三嗪抑制人源黑色素瘤sk-mel-5细胞增殖的体外实验
[0052]
1.实验材料
[0053]
1.1细胞株
[0054]
黑色素瘤细胞系sk-mel-5细胞来源于中南大学湘雅医院皮肤科实验室，采用含有体积浓度10％fbs(fetal bovine serum，胎牛血清)的dmem(dulbecco'smodified eagle medium)培养基，37℃温度下恒温、环境中co2浓度为5％条件下培养、备用。
[0055]
1.2试剂
[0056]
dmem培养基500ml一瓶(购自biological industries公司)；胎牛血清(购自biological industries公司)；胰酶消化液(购自beyotime公司)；pbs粉末 (购自servicebio公司)；双抗(购自biological industries公司)；甲磺酸阿米三嗪母液(10mmol/l，溶于dmso)，购自mce公司；cck8试剂(购自bimake 公司)。
[0057]
2.仪器与耗材
[0058]
2.1仪器
[0059]
超净工作台；细胞培养箱；离心机；细胞计数仪；负压吸引器；酶标仪。
[0060]
2.2耗材
[0061]
细胞培养皿；96孔板；15ml离心管；细胞计数板。
[0062]
3.实验方法与结果
[0063]
3.1细胞增殖实验
[0064]
实验过程为：黑色素瘤sk-mel-5细胞以3
×
103个/每孔接种于96孔板中进行培养(10％ fbs/dmem，环境温度37℃，co2浓度5％)，分试验组和对照组，每组设5个复孔。培养14h～16h后，向试验组培养基中加入甲磺酸阿米三嗪母液(10mmol/l)，使试验组培养基中甲磺酸阿米三嗪的终浓度为10 μmol/l。对照组仅加入培养基，不加入甲磺酸阿米三嗪。于48h向试验组和对照组中均加入cck8并于培养箱孵育2h，然后用酶标仪检测450nm波长下的各孔吸光度值(od值)。
[0065]
3.2实验结果
[0066]
通过cck8检测甲磺酸阿米三嗪对黑色素瘤细胞的增殖抑制作用。甲磺酸阿米三嗪在10μmol/l浓度时对人恶性黑色素瘤sk-mel-5的抑制作用实验结果如图1所示。图1中，control表示对照组。
[0067]
由图1可见，甲磺酸阿米三嗪对于人恶性黑色素瘤sk-mel-5细胞的增殖均具有显著的抑制作用。加入10μmol/l的甲磺酸阿米三嗪后试验组中人恶性黑色素瘤sk-mel-5细胞的存活率仅为24.6％；而对照组中仅加入培养基，没有加入甲磺酸阿米三嗪，其人恶性黑色素瘤sk-mel-5细胞的存活率为100％。
[0068]
实施例2：坦度螺酮抑制人源黑色素瘤sk-mel-5细胞增殖的体外实验
[0069]
1.实验材料
[0070]
1.1细胞株
[0071]
黑色素瘤细胞系sk-mel-5细胞来源于中南大学湘雅医院皮肤科实验室，采用含有体积浓度10％fbs的dmem培养基，37℃温度下恒温、环境中co2浓度为5％的条件下培养、备用。
[0072]
1.2试剂
[0073]
dmem培养基500ml一瓶(购自biological industries公司)；胎牛血清(购自
biological industries公司)；胰酶消化液(购自beyotime公司)；pbs粉末 (购自servicebio公司)；双抗(购自biological industries公司)；坦度螺酮母液(10mmol/l，溶于dmso)，购自mce公司；cck8试剂(购自bimake公司)。
[0074]
2.仪器与耗材
[0075]
2.1仪器
[0076]
超净工作台；细胞培养箱；离心机；细胞计数仪；负压吸引器；酶标仪。
[0077]
2.2耗材
[0078]
细胞培养皿；96孔板；15ml离心管；细胞计数板。
[0079]
3.实验方法与结果
[0080]
3.1细胞增殖实验
[0081]
实验过程为：黑色素瘤sk-mel-5细胞以3
×
103个/每孔接种于96孔板中进行培养(10％ fbs/dmem，温度为37℃，co2浓度5％)，分试验组和对照组，每组设5个复孔。培养14h～16h后，向试验组培养基中加入坦度螺酮母液 (10mmol/l)，使试验组培养基中坦度螺酮的终浓度为10μmol/l。对照组仅加入培养基，不加入坦度螺酮。于48h向试验组和对照组中均加入cck8并于培养箱孵育2h，然后用酶标仪检测450nm波长下的各孔吸光度值(od值)。
[0082]
3.2实验结果
[0083]
通过cck8检测坦度螺酮对黑色素瘤细胞的增殖抑制作用。坦度螺酮在10 μmol/l浓度时对人恶性黑色素瘤sk-mel-5的抑制作用实验结果如图1所示。图1中，control表示对照组。
[0084]
由图1可见，坦度螺酮对于人恶性黑色素瘤sk-mel-5细胞的增殖均具有显著的抑制作用。加入10μmol/l的坦度螺酮后试验组中人恶性黑色素瘤 sk-mel-5细胞的存活率仅为38％；而对照组中仅加入培养基，没有加入甲磺酸阿米三嗪，其人恶性黑色素瘤sk-mel-5细胞的存活率为100％。
[0085]
实施例3：甲磺酸阿米三嗪对b16f10荷瘤c57bl/6小鼠体内的肿瘤生长的影响
[0086]
1.实验材料
[0087]
1.1细胞株
[0088]
黑色素瘤细胞系b16f10细胞来源于中南大学湘雅医院皮肤科实验室，采用含有体积浓度10％fbs的rpmi-1640培养基(rpmi全称为roswell parkmemorial institute)，37℃温度下恒温、环境中co2浓度为5％条件下培养、备用。
[0089]
1.2试剂
[0090]
rpmi-1640培养基500ml一瓶(购自biological industries公司)；胎牛血清(购自biological industries公司)；胰酶消化液(购自beyotime公司)；pbs 粉末(购自servicebio公司)；双抗(购自biological industries公司)；甲磺酸阿米三嗪，购自mce公司。
[0091]
2.仪器与耗材
[0092]
2.1仪器
[0093]
超净工作台；细胞培养箱；离心机；细胞计数仪。
[0094]
2.2耗材
[0095]
细胞培养皿；15ml离心管；细胞计数板。
treatment为治疗天数，纵坐标tumor volume为肿瘤体积。
[0117]
由图6结果表明，随着治疗天数的增加，坦度螺酮组的小鼠肿瘤体积的增长明显小于对照组，说明坦度螺酮可以有效抑制小鼠肿瘤生长。
[0118]
称量各小组的小鼠体重，对照组和坦度螺酮组的小鼠体重变化对比图如图7 所示。图7中横坐标days after treatment为治疗天数，纵坐标body weight为小鼠体重。重复实验数据表示为平均值(n＝5)
±
sd；*p＜0.05。由图7可知，坦度螺酮组治疗后对小鼠的体重影响很小，说明坦度螺酮对小鼠无明显毒副作用。
[0119]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0120]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。