miRNA-485抑制剂调控PSD95、突触素和半胱天冬酶3表达的用途的制作方法

本公开提供了mir-485抑制剂(例如，编码包含至少一个mir-485结合位点的核苷酸分子的多核苷酸)用于治疗与psd95、突触素和/或半胱天冬酶3的水平异常相关的疾病和病症的用途。

背景技术：

1、诸如psd95、突触素和半胱天冬酶3的蛋白质在各种生物学功能中发挥重要作用。例如，psd95是一种支架蛋白，其调控许多受体、通道和信号传导蛋白的突触定位。突触素调控中枢神经元中的突触小泡内吞作用的动力学。并且，半胱天冬酶3参与许多关键细胞蛋白质的特异性切割。因此，这些蛋白质的表达和/或活性异常可导致各种生物学损害，从而导致诸如肌张力障碍、神经精神疾病、智力障碍和/或成瘾的疾病或疾患。因此，通过调节此类蛋白质(和/或编码所述蛋白质的基因)的活性，可以治疗这些蛋白质的表达和/或活性异常的疾病或疾患。

技术实现思路

1、本文提供了一种治疗有需要的受试者的肌张力障碍的方法，所述方法包括向受试者施用抑制mir-485的化合物(mirna抑制剂)。在一些方面，肌张力障碍包括眼睑痉挛、颈部肌张力障碍(痉挛性斜颈)、多巴反应性肌张力障碍、药物诱发性肌张力障碍(迟发性运动障碍)、功能性肌张力障碍、全身性肌张力障碍、手部肌张力障碍(书写痉挛)、下肢肌张力障碍、音乐家肌张力障碍、肌阵挛肌张力障碍、与神经或代谢病症相关的肌张力障碍、口下颌肌张力障碍(颅肌张力障碍)、颅颈肌张力障碍、臂肌张力障碍、阵发性运动障碍、小儿肌张力障碍、痉挛性发声障碍(喉肌张力障碍)、快速发作的肌张力障碍-帕金森症、毒素诱发性肌张力障碍、创伤诱发性肌张力障碍、x连锁肌张力障碍-帕金森症或它们的组合。

2、本文还提供了一种治疗有需要的受试者的神经精神疾病的方法，所述方法包括向受试者施用抑制mir-485的化合物(mirna抑制剂)。在一些方面，神经精神疾病包括精神分裂症、抑郁症、自闭症、癫痫发作、注意力缺陷/多动症、妥瑞氏症(tourette's disorder)、认知缺陷障碍、麻痹、不受控的愤怒、偏头痛、进食障碍(例如，神经性厌食症和神经性贪食症)、抑郁症、焦虑症(例如，创伤后应激障碍)或它们的组合。

3、本公开还提供了一种治疗有需要的受试者的智力障碍的方法，所述方法包括向受试者施用抑制mir-485的化合物(mirna抑制剂)。在一些方面，智力障碍包括脆性x综合征、唐氏综合征、普瑞德-威利综合征(prader-willi syndrome，pws)、胎儿酒精谱系障碍(fasd)或它们的组合。

4、本文提供了一种治疗有需要的受试者的成瘾的方法，所述方法包括向受试者施用抑制mir-485的化合物(mirna抑制剂)。在一些方面，成瘾包括化学成瘾、行为成瘾或两者。

5、在一些方面，肌张力障碍、神经精神疾病、智力障碍和/或成瘾与psd95蛋白和/或psd95基因的水平异常相关。在一些方面，mirna抑制剂增加受试者中的psd95蛋白和/或psd95基因的水平。在一些方面，与psd95蛋白和/或psd95基因的参考水平(例如，施用之前的受试者中的相应水平和/或未接受施用的相应受试者中的水平)相比，受试者中的psd95蛋白和/或psd95基因水平增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约50倍或更多。

6、在一些方面，肌张力障碍、神经精神疾病、智力障碍和/或成瘾与突触素蛋白和/或突触素基因的水平异常相关。在一些方面，mirna抑制剂增加受试者中的突触素蛋白和/或突触素基因水平。在某些方面，与突触素蛋白和/或突触素基因的参考水平(例如，施用之前的受试者中的相应水平和/或未接受施用的相应受试者中的水平)相比，受试者中的突触素蛋白和/或突触素基因水平增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约50倍或更多。

7、在一些方面，肌张力障碍、神经精神疾病、智力障碍和/或成瘾与半胱天冬酶3蛋白和/或半胱天冬酶3基因的水平异常相关。在某些方面，mirna抑制剂降低受试者中的半胱天冬酶3蛋白和/或半胱天冬酶3基因水平。在某些方面，与半胱天冬酶3蛋白和/或半胱天冬酶3基因的参考水平(例如，施用之前的受试者中的相应水平和/或未接受施用的相应受试者中的水平)相比，受试者中的半胱天冬酶3蛋白和/或半胱天冬酶3基因水平降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％。

8、在一些方面，mirna抑制剂抑制mir485-3p。在一些方面，所述mir485-3p包含5'-gucauacacggcucuccucucu-3'(seq id no:1)。在一些方面，mirna抑制剂包含核苷酸序列，所述核苷酸序列包含5'-uguauga-3'(seq id no:2)，并且其中mirna抑制剂包含约6至约30个核苷酸的长度。

9、在一些方面，mirna抑制剂在核苷酸序列的5'包含至少1个核苷酸、至少2个核苷酸、至少3个核苷酸、至少4个核苷酸、至少5个核苷酸、至少6个核苷酸、至少7个核苷酸、至少8个核苷酸、至少9个核苷酸、至少10个核苷酸、至少11个核苷酸、至少12个核苷酸、至少13个核苷酸、至少14个核苷酸、至少15个核苷酸、至少16个核苷酸、至少17个核苷酸、至少18个核苷酸、至少19个核苷酸或至少20个核苷酸。在一些方面，mirna抑制剂在核苷酸序列的3'包含至少1个核苷酸、至少2个核苷酸、至少3个核苷酸、至少4个核苷酸、至少5个核苷酸、至少6个核苷酸、至少7个核苷酸、至少8个核苷酸、至少9个核苷酸、至少10个核苷酸、至少11个核苷酸、至少12个核苷酸、至少13个核苷酸、至少14个核苷酸、至少15个核苷酸、至少16个核苷酸、至少17个核苷酸、至少18个核苷酸、至少19个核苷酸或至少20个核苷酸。

10、在一些方面，mirna抑制剂具有选自由以下组成的组的序列：5'-uguauga-3'(seqid no:2)、5'-guguauga-3'(seq id no:3)、5'-cguguauga-3'(seq id no:4)、5'-ccguguauga-3'(seq id no:5)、5'-gccguguauga-3'(seq id no:6)、5'-agcc guguauga-3'(seq id no:7)、5'-gagccguguauga-3'(seq id no:8)、5'-agagccguguauga-3'(seq idno:9)、5'-gag agccguguauga-3'(seq id no:10)、5'-ggagagccguguau ga-3'(seq id no:11)、5'-aggagagccguguauga-3'(seq id no:12)、5'-gaggagagccguguauga-3'(seq id no:13)、5'-agaggagagccguguauga-3'(seq id no:14)、5'-gagag gagagccguguauga-3'(seqid no:15)、5'-uguaugac-3'(seq id no:16)、5'-guguaugac-3'(seq id no:17)、5'-cguguaugac-3'(seq id no:18)、5'-ccguguaugac-3'(seq id no:19)、5'-gccguguaugac-3'(seq id no:20)、5'-agccgu guaugac-3'(seq id no:21)、5'-gagccguguaugac-3'(se qid no:22)、5'-agagccguguaugac-3'(seq id no:23)、5'-gagagccguguaugac-3'(seq idno:24)、5'-ggagagccg uguaugac-3'(seq id no:25)、5'-aggagagccguguaugac-3'(seq idno:26)、5'-gaggagagccguguaugac-3'(seq id no:27)、5'-agaggagagccguguaugac-3'(seqid no:28)、5'-gagaggagagccguguaugac-3'(seq id no:29)和ag agaggagagccguguaugac(seq id no:30)。

11、在一些方面，mirna抑制剂具有选自由以下组成的组的序列：5'-tgtatga-3'(seqid no:62)、5'-gtgtatga-3'(seq id no:63)、5'-cgtgtatga-3'(seq id no:64)、5'-ccgtgtatga-3'(seq id no:65)、5'-gccgtgtatga-3'(seq id no:66)、5'-agc cgtgtatga-3'(seq id no:67)、5'-gagccgtgtatga-3'(seqid no:68)、5'-agagccgtgtatga-3'(seq idno:69)、5'-ga gagccgtgtatga-3'(seq id no:70)、5'-ggagagccgtgtat ga-3'(seq idno:71)、5'-aggagagccgtgtatga-3'(seq id no:72)、5'-gaggagagccgtgtatga-3'(seq idno:73)、5'-agaggagagccgtgtatga-3'(seq id no:74)、5'-gagagga gagccgtgtatga-3'(seq id no:75)、5'-tgtatgac-3'(seq id no:76)、5'-gtgtatgac-3'(seq id no:77)、5'-cgtgtatga c-3'(seq id no:78)、5'-ccgtgtatgac-3'(seq id no:79)、5'-gccgtgtatgac-3'(seq id no:80)、5'-agccgtgtatgac-3'(seq id no:81)、5'-gagccgtgtatgac-3'(seqid no:82)、5'-agagccgtgtatgac-3'(seq id no:83)、5'-gagagccgtgt atgac-3'(seq idno:84)、5'-ggagagccgtgtatgac-3'(se q id no:85)、5'-aggagagccgtgtatgac-3'(seq idno:86)、5'-gaggagagccgtgtatgac-3'(seq id no:87)、5'-aga ggagagccgtgtatgac-3'(seq id no:88)、5'-gagaggaga gccgtgtatgac-3'(seq id no:89)和5'-agagaggagagccgtgtatgac-3'(seq id no:90)。

12、在一些方面，mirna抑制剂的序列与5'-agagaggagagcc guguaugac-3'(seq idno:30)或5'-agagaggagagccgtg tatgac-3'(seq id no:90)具有至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％或至少约95％的序列同一性。在一些方面，mirna抑制剂具有与5'-agagaggagagccguguaugac-3'(seqid no:30)或5'-agagaggagagccgtgtatgac-3'(seq idno:90)具有至少90％相似性的序列。在一些方面，mirna抑制剂包含核苷酸序列5'-agagaggagagccguguaugac-3'(seq id no:30)或5'-agagaggagagccgtgtatgac-3'(seq idno:90)，具有一个取代或两个取代。在一些方面，mirna抑制剂包含核苷酸序列5'-agagaggagagccguguaugac-3'(seq id no:30)或5'-agagaggagagccgtgtatgac-3'(seq idno:90)。在一些方面，mirna抑制剂包含核苷酸序列5'-agagaggagagcc guguaugac-3'(seqid no:30)。

13、在一些方面，mirna抑制剂包含至少一种经修饰的核苷酸。在一些方面，至少一种经修饰的核苷酸是锁核酸(lna)、解锁核酸(una)、阿拉伯核酸(aba)、桥联核酸(bna)和/或肽核酸(pna)。在一些方面，mirna抑制剂包含主链修饰。在一些方面，主链修饰是二氨基磷酸酯吗啉代低聚物(pmo)和/或硫代磷酸酯(ps)修饰。

14、在一些方面，mirna抑制剂在递送剂中递送。在一些方面，递送剂包括胶束、外泌体、类脂质、脂质体、脂质复合物、脂质纳米颗粒、细胞外囊泡、合成囊泡、聚合化合物、肽、蛋白质、细胞、纳米颗粒模拟物、纳米管、缀合物、病毒载体或它们的组合。

15、在一些方面，递送剂包含阳离子载体单元，所述阳离子载体单元包含

16、[wp]-l1-[cc]-l2-[am](式i)

17、或

18、[wp]-l1-[am]-l2-[cc](式ii)

19、其中

20、wp是水溶性生物聚合物部分；

21、cc是阳离子载体部分；

22、am是佐剂部分；并且，

23、l1和l2独立地是任选的接头。

24、在一些方面，阳离子载体单元和分离的多核苷酸当混合在一起时能够相互缔合形成胶束。在一些方面，缔合是通过共价键。在某些方面，缔合是通过非共价键。在一些方面，非共价键包括离子键。

25、在一些方面，水溶性聚合物包括聚(烷二醇)、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯烃醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(甲基丙烯酸羟烷基酯)、聚(糖类)、聚(α-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚甘油、聚磷腈、聚噁唑啉(“poz”)聚(n-丙烯酰吗啉)或它们的任何组合。在一些方面，水溶性聚合物包括聚乙二醇(“peg”)、聚甘油或聚(丙二醇)(“ppg”)。

26、在一些方面，水溶性聚合物包含：

27、

28、其中n是1-1000。

29、在一些方面，n是至少约110、至少约111、至少约112、至少约113、至少约114、至少约115、至少约116、至少约117、至少约118、至少约119、至少约120、至少约121、至少约122、至少约123、至少约124、至少约125、至少约126、至少约127、至少约128、至少约129、至少约130、至少约131、至少约132、至少约133、至少约134、至少约135、至少约136、至少约137、至少约138、至少约139、至少约140或至少约141。在一些方面，n是约80至约90、约90至约100、约100至约110、约110至约120、约120至约130、约140至约150或约150至约160。

30、在一些方面，水溶性聚合物是直链的、支链的或树枝状的。在一些方面，阳离子载体部分包含一个或多个碱性氨基酸。在一些方面，阳离子载体部分包含至少约三个、至少约四个、至少约五个、至少约六个、至少约七个、至少约八个、至少约九个、至少约十个、至少约11个、至少约12个、至少约13个、至少约14个、至少约15个、至少约16个、至少约17个、至少约18个、至少约19个、至少约20个、至少约21个、至少约22个、至少约23个、至少约24个、至少约25个、至少约26个、至少约27个、至少约28个、至少约29个、至少约30个、至少约31个、至少约32个、至少约33个、至少约34个、至少约35个、至少约36个、至少约37个、至少约38个、至少约39个、至少约40个、至少约41个、至少约42个、至少约43个、至少约44个、至少约45个、至少约46个、至少约47个、至少约48个、至少约49个或至少约50个碱性氨基酸。在某些方面，阳离子载体部分包含约30至约50个碱性氨基酸。

31、在一些方面，碱性氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、组氨酸或它们的任何组合。在一些方面，阳离子载体部分包含约40个赖氨酸单体。

32、在一些方面，佐剂部分能够调节免疫应答、炎症应答和/或组织。在某些方面，佐剂部分包含咪唑衍生物、氨基酸、维生素或它们的任何组合。在一些方面，所述佐剂部分包含：

33、

34、其中g1和g2各自是h、芳族环或1-10烷基，或者g1和g2一起形成芳族环，并且其中n是1-10。

35、在一些方面，佐剂部分包含硝基咪唑。在一些方面，佐剂部分包含甲硝唑、替硝唑、尼莫唑、地美硝唑、普瑞玛尼、奥硝唑、美格唑、阿扎硝唑、苄硝唑或它们的任何组合。在一些方面，佐剂部分包含氨基酸。在一些方面，佐剂部分包含

36、

37、其中ar是并且

38、其中z1和z2各自是h或oh。

39、在一些方面，佐剂部分包含维生素。在一些方面，维生素包含环状环或环状杂原子环和羧基或羟基。在一些方面，维生素包含：

40、

41、其中y1和y2各自是c、n、o或s，并且其中n是1或2。

42、在一些方面，维生素选自由以下组成的组：维生素a、维生素b1、维生素b2、维生素b3、维生素b6、维生素b7、维生素b9、维生素b12、维生素c、维生素d2、维生素d3、维生素e、维生素m、维生素h以及它们的任何组合。在某些方面，维生素是维生素b3。

43、在一些方面，佐剂部分包含至少约两个、至少约三个、至少约四个、至少约五个、至少约六个、至少约七个、至少约八个、至少约九个、至少约十个、至少约11个、至少约12个、至少约13个、至少约14个、至少约15个、至少约16个、至少约17个、至少约18个、至少约19个或至少约20个维生素b3。在某些方面，佐剂部分包含约10个维生素b3。

44、在一些方面，递送剂包含具有约120至约130个peg单元的水溶性生物聚合物部分、包含具有约30至约40个赖氨酸的聚赖氨酸的阳离子载体部分和具有约5至约10个维生素b3的佐剂部分。

45、在一些方面，阳离子载体单元能够保护mirna抑制剂免于酶促降解。

46、在一些方面，mirna抑制剂通过肠胃外、肌内、皮下、眼部、静脉内、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脑室内、脊柱内、心室内、鞘内、脑池内、囊内、肿瘤内、局部或它们的任何组合施用。

47、在一些方面，递送剂是胶束。在某些方面，胶束包含(i)约100至约200个peg单元；(ii)约30至约40个赖氨酸，各自具有胺基团；(iii)约15至约20个赖氨酸，各自具有硫醇基团；以及(iv)约30至约40个赖氨酸，各自连接至维生素b3。在一些方面，胶束包含(i)约120至约130个peg单元；(ii)约32个赖氨酸，各自具有胺基团；(iii)约16个赖氨酸，各自具有硫醇基团；以及(iv)约32个赖氨酸，各自连接至维生素b3。

48、在一些方面，靶向部分进一步连接至peg单元。在某些方面，靶向部分是lat1靶向配体。在一些方面，靶向部分是苯丙氨酸。