在癌症疗法中使用的抗半乳糖凝集素-9抗体和化疗剂的组合的制作方法

背景技术：

1、半乳糖凝集素-9是一种串联重复凝集素，由两个碳水化合物识别结构域(crd)组成，并且于1997年首次在患有霍奇金淋巴瘤(hl)的患者中发现和描述(tureci等人,j.biol.chem.1997,272,6416–6422)。存在三种同种型，并且可位于细胞内或细胞外。已在多种癌症中观察到半乳糖凝集素-9水平升高，包括黑素瘤、霍奇金淋巴瘤、肝细胞癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌和透明细胞肾细胞癌(wdowiak等人,int.j.mol.sci.2018,19,210)。在肾癌中，具有高半乳糖凝集素-9表达的患者显示出较晚期的疾病进展，其肿瘤尺寸较大(kawashima等人；bju int.2014；113:320–332)。在黑素瘤中，半乳糖凝集素-9在57％的肿瘤中表达，并且与健康对照相比，在晚期黑素瘤患者的血浆中显著增加(enninga等人,melanoma res.2016年10月；26(5):429–441)。许多研究已表明半乳糖凝集素-9作为预后标志物具有实用性，并且最近还表明其可作为潜在的新药物靶标(enninga等人,2016；kawashima等人,bju int 2014；113:320–332；kageshita等人,int j cancer.2002年6月20日；99(6):809-16，以及其中的参考文献)。

2、半乳糖凝集素-9已被描述在许多细胞过程(诸如粘附、癌细胞聚集、细胞凋亡和趋化性)中发挥重要作用。最近的研究表明，半乳糖凝集素-9在支持肿瘤的免疫调节中发挥作用，例如，通过负调节th1型响应、th2极化和巨噬细胞向m2表型的极化。这项工作还包括一些研究，这些研究表明半乳糖凝集素-9通过与t细胞免疫球蛋白和粘蛋白3(tim-3)受体的相互作用参与了t细胞的直接灭活(dardalhon等人,j immunol.,2010,185,1383-1392；sanchez-fueyo等人,nat immunol.,2003,4,1093-1101)。

3、还发现半乳糖凝集素-9在极化向肿瘤抑制表型的t细胞分化以及促进致耐受性巨噬细胞编程和适应性免疫抑制中发挥作用(daley等人,nat med.,2017,23,556-567)。在胰腺导管腺癌(pdac)的小鼠模型中，已表明阻断肿瘤微环境(tme)中在先天免疫细胞上发现的半乳糖凝集素-9与受体dectin-1之间的检查点相互作用可以增加tme中的抗肿瘤免疫响应并减缓肿瘤进展(daley等人,nat med.,2017,23,556-567)。还发现半乳糖凝集素-9与cd206(m2型巨噬细胞的表面标志物)结合，导致cvl22(mdc)(一种巨噬细胞衍生的趋化因子，与肺癌较长的存活期和较低的复发风险相关)的分泌减少(enninga等人,jpathol.2018年8月；245(4):468-477)。

技术实现思路

1、本公开基于意外的发现，即在动物模型中在涉及示例性抗半乳糖凝集素9抗体(例如，g9.2-17(igg4))和化疗剂诸如吉西他滨和紫杉醇(例如，纳米颗粒白蛋白结合的紫杉醇或nab-紫杉醇)的组合疗法中观察到协同作用。可替代地或另外，本公开至少部分地基于以下出乎意料的发现：与其他抗体治疗剂相比，抗半乳糖凝集素-9抗体g9.2-17(igg4)在人类受试者中具有更快的清除率。因此，开发了包括每周一次的给药时间表的治疗方案，以确保用于实现治疗效果的抗半乳糖凝集素9抗体(抗gal-9抗体)的合适血浆浓度，例如治疗性全身暴露水平。

2、因此，本文提供了用于治疗实体瘤的方法，涉及抗半乳糖凝集素-9抗体(例如，g9.2-17或其功能变体)和一种或多种化疗剂(例如，吉西他滨、紫杉醇诸如蛋白结合的紫杉醇(例如，nab-紫杉醇或)或其组合)的共同使用。在一些情况下，本文公开的抗gal-9抗体诸如g9.2-17(igg4)可以以每周一次的给药方案施用。

3、在一些实施方案中，本文公开的用于治疗实体瘤的方法可以包括向有需要的受试者施用有效量的结合人半乳糖凝集素-9的抗体(抗gal-9抗体)。抗gal-9抗体可以具有与抗体g9.2-17相同的重链互补决定区(cdr)和相同的轻链cdr。受试者可以接受包括一种或多种化疗剂的抗癌疗法。

4、在一些实施方案中，本文公开的用于治疗实体瘤的方法可以包括向有需要的受试者施用有效量的结合人半乳糖凝集素-9的抗体(抗gal-9抗体)和有效量的一种或多种化疗剂。抗gal-9抗体可以具有与抗体g9.2-17相同的重链互补决定区(cdr)和相同的轻链cdr。

5、在一些实施方案中，本文公开的用于治疗实体瘤的方法可以包括向有需要的受试者施用有效量的一种或多种化疗剂。受试者可以接受包含结合人半乳糖凝集素-9的抗体(抗gal-9抗体)的疗法，该抗体具有与抗体g9.2-17相同的重链互补决定区(cdr)和相同的轻链cdr。

6、本文公开的方法中的任一种可用于治疗转移性实体瘤。在一些实例中，实体瘤是胰腺导管腺癌(pdac)，例如转移性pdac。

7、在一些实施方案中，待通过本文公开的方法中的任一种治疗的受试者可具有以下特征中的一个或多个：(i)没有患可切除的癌症；(ii)

8、没有被sars-cov-2感染；以及(iii)没有活动性脑或柔脑膜转移。在一些实例中，实体瘤是胰腺导管腺癌(pdac)，并且受试者没有无远处器官转移性沉积的局部晚期pdac。

9、在一些实施方案中，本文公开的方法中的任一种涉及的一种或多种化疗剂可以包含抗代谢物(例如，核苷类似物)、微管抑制剂或其组合。在一些实例中，核苷类似物是吉西他滨和/或微管蛋白抑制剂是紫杉醇，例如，纳米微粒白蛋白结合的紫杉醇(例如，)。

10、在一些实施方案中，以约0.2mg/kg至约32mg/kg(例如，约0.2mg/kg至约16mg/kg、0.5mg/kg至约16mg/kg、约2mg/kg至约32mg/kg、或约2mg/kg至约16mg/kg、或约0.2mg/kg至约15mg/kg、或约0.2mg/kg至约16mg/kg或更高)的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。

11、在一些实施方案中，每周一次向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，可每周一次以约0.2mg/kg至约32mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，可每周一次以约10mg/kg至约16mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。可替代地，可每周一次以约650mg至约1120mg的剂量向受试者施用本文公开的抗gal-9抗体，诸如g9.2-17(igg4)。例如，可每周一次以10mg/kg的剂量或每周一次以约650-700mg的平稳剂量向受试者施用抗gal-9抗体。可替代地，可每周一次以16mg/kg的剂量或每周一次以约1040-1120mg的平稳剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。

12、在一些实施方案中，每2或3周一次向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，以选自0.2mg/kg、0.6mg/kg、0.63mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、6mg/kg、6.3mg/kg、8mg/kg、10mg/kg、12mg/kg或16mg/kg或更高剂量水平的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。在一些实施方案中，以选自2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg、12mg/kg或16mg/kg或更高的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。在一些实施方案中，以选自0.2mg/kg、0.6mg/kg、0.63mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、6mg/kg、6.3mg/kg、10mg/kg或16mg/kg或更高剂量水平的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。在一些实施方案中，每2周一次以选自0.2mg/kg、0.63mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、6mg/kg、6.3mg/kg、8mg/kg、10mg/kg、12mg/kg或16mg/kg的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。在一些实施方案中，每2周施用抗体一次。在一些实施方案中，每2周一次以选自2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg、12mg/kg或16mg/kg或更高的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。在一些实施方案中，每2周施用抗体一次。在一些实施方案中，每2周一次以选自0.2mg/kg、0.6mg/kg、0.63mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、6mg/kg、6.3mg/kg、10mg/kg或16mg/kg或更高的剂量向受试者施用抗半乳糖凝集素-9抗体。

13、在一些实施方案中，可每2-6周一次(例如，每2周一次、每3周一次或每4周一次)以约650mg至约1120mg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体，诸如g9.2-17(igg4)。在一些实例中，每2-6周一次(例如，每2周一次、每3周一次或每4周一次)以约650mg至约700mg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在其他实例中，每2-6周一次(例如，每2周一次、每3周一次或每4周一次)以约1040mg至约1120mg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。

14、在一些实施方案中，每2周一次施用抗gal-9抗体持续一个周期，每2周一次施用持续两个周期，每2周一次施用持续3个周期，每2周一次施用持续4个周期，或每2周一次施用持续超过4个周期。在一些实施方案中，治疗的持续时间为0-3个月、0-6个月、3-6个月、6-12个月、12-24个月或更长。在一些实施方案中，治疗的持续时间为12-24个月或更长。在一些实施方案中，周期延续3个月至6个月或6个月至12个月或12个月至24个月或更长的持续时间。在一些实施方案中，将周期长度例如暂时或永久修改为更长的持续时间，例如3周或4周或6周。

15、在一些实施方案中，通过静脉内输注向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，癌症是pdac。在一些实施方案中，癌症是转移性癌症。在一些实例中，可以向受试者施用多剂量的抗半乳糖凝集素9抗体，并且较晚的剂量高于较早的剂量。

16、在一些实施方案中，可每两周一次通过静脉内输注以约0.5mg/kg至约32mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，可每两周一次通过静脉内输注以约0.2mg/kg至约32mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约0.5mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实施方案中，可每两周一次通过静脉内输注以约2mg/kg至约16mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，可通过静脉内注射每两周一次以约0.2mg/kg至约16mg/kg或更高的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约0.2mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约0.6mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约0.63mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约2mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约4mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约6mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约6.3mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约8mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约10mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约12mg/kg的剂量向受试者施用抗gal9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约16mg/kg或更高的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实例中，每两周一次通过静脉内输注以约32mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。在一些实施方案中，可每周一次以约10mg/kg至约16mg/kg的剂量向受试者施用抗gal-9抗体。

17、在本文公开的方法中的任一种中，一种或多种化疗剂包括抗代谢物、微管抑制剂或其组合。例如，抗代谢物可以是吉西他滨。可替代地或另外，微管抑制剂可以是紫杉醇。在一些情况下，紫杉醇是蛋白结合的紫杉醇，例如，纳米颗粒白蛋白结合的紫杉醇。在一些实施方案中，一种或多种化疗剂包含吉西他滨和紫杉醇的组合。

18、在一些实施方案中，该方法包括28天的周期，其中在第1天和第15天向受试者施用抗gal9抗体，并在第1天、第8天和第15天向受试者施用吉西他滨和紫杉醇(例如，纳米颗粒白蛋白结合的紫杉醇)。在一些实例中，以125mg/m2向受试者静脉内施用紫杉醇。在一些实例中，以1000mg/m2向受试者施用吉西他滨。

19、在一些情况下，本文公开的方法可以包括28天的周期，其中在第1天、第8天、第15天和第22天向受试者施用抗gal-9抗体，并在第1天、第8天和第15天向受试者施用吉西他滨和紫杉醇。在一些实例中，以125mg/m2向受试者静脉内施用紫杉醇。可替代地或另外，以1000mg/m2向受试者施用吉西他滨。

20、在一些实施方案中，抗半乳糖凝集素-9抗体包含如seq id no:1所示的轻链互补决定区1(cdr1)、如seq id no:2所示的轻链互补决定区2(cdr2)和如seq id no:3所示的轻链互补决定区3(cdr3)，并且/或者包含如seq id no:4所示的重链互补决定区1(cdr1)、如seq id no:5所示的重链互补决定区2(cdr2)和如seq id no:6所示的重链互补决定区3(cdr3)。

21、在一些实施方案中，抗gal9抗体可以包含含有seq id no:7的氨基酸序列的重链可变区(vh)；以及含有seq id no:8的氨基酸序列的轻链可变区(vl)。在一些实例中，抗gal9抗体可以是igg分子，例如，igg4分子。在具体实例中，抗gal9抗体可以包含含有seq id no:19的氨基酸序列的重链和含有seq id no:15的氨基酸序列的轻链。

22、在一些实施方案中，可以在受试者接受抗半乳糖凝集素9抗体的当天向受试者施用一种或多种化疗剂。可替代地，可以连续两天进行一种或多种化疗剂的施用和抗半乳糖凝集素9抗体的施用。在一些实例中，可以在抗gal-9抗体的施用之前进行一种或多种化疗剂的施用，例如，在第一给药日，并且在随后的一天施用抗半乳糖凝集素9抗体。

23、在本文公开的方法中的任一种中，受试者可以是人类患者。在一些实施方案中，受试者可以包含半乳糖凝集素-9阳性癌细胞或免疫细胞。在一些情况下，受试者可具有相对于对照值升高的半乳糖凝集素-9水平。例如，受试者可具有相对于对照值升高的半乳糖凝集素-9血清或血浆水平。

24、在一些实施方案中，受试者可能接受过至少一个线数的系统抗癌疗法。在其他实施方案中，受试者可能未接受过涉及吉西他滨和/或紫杉醇的既往疗法或者在施用抗gal-9抗体之前至少六个月接受过涉及吉西他滨和/或紫杉醇的既往疗法。

25、在一些情况下，在治疗之前、期间和/或之后检查受试者的以下特征中的一个或多个：(a)来自受试者的肿瘤活检样品中的一种或多种肿瘤标志物，任选地其中一种或多种肿瘤标志物包括ca15-3、ca-125、cea、ca19-9和/或α-胎儿蛋白，以及任何其他肿瘤类型特异性肿瘤标志物；(b)细胞因子谱；以及(c)半乳糖凝集素9血清/血浆水平，d)外周血单核细胞免疫分型，e)肿瘤组织活检/切除标本多重免疫分型，f)肿瘤组织活检/切除标本半乳糖凝集素-9表达水平和模式，g)任何其他免疫评分测试，诸如：pdl-1免疫组织化学、肿瘤突变负担(tmb)、肿瘤微卫星不稳定性状态，以及诸如以下项的组：在nanostring基因表达系统、18-基因标记、pancancer io 360tm测定(nanostring technologies)等上开发的-haliodx、immunoseq-adaptive biotechnologies、tis。也可检查对靶肿瘤特异的其他合适生物标志物。

26、本文公开的方法中的任一种还可以包括监测受试者中一种或多种不良作用的发生。在一些情况下，一种或多种不良作用包括肝损伤、血液毒性、神经毒性、皮肤毒性、胃肠毒性或其组合。

27、在一些实施方案中，该方法还可以包括当观察到不良作用时减少抗gal9抗体的剂量、一种或多种化疗剂的剂量或两者。例如，当在受试者中观察到中度至重度肝损伤时，该方法还可以包括减少抗gal-9抗体的剂量、吉西他滨的剂量、紫杉醇的剂量或其组合。在一个具体实例中，根据临床医生的评估，实施抗gal-9抗体剂量减少或至少减少30％。在另一个实例中，实施前一剂量水平的30％或50％的减少水平。如果需要，实施再一次剂量减少剂量水平-1(第一次剂量减少时的水平)的30％(剂量水平-2，第二次剂量减少时的水平)。在另一个实例中，实施再一次剂量减少剂量水平-1的50％(剂量水平-2)。在一些实施方案中，实施一次或多次剂量减少前一剂量水平的约10％至约80％。在一些实施方案中，实施一次或多次剂量减少前一水平的约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约40％至约50％、约50％至约60％或约70％至约80％。在一些实施方案中，实施一次或多次剂量减少前一水平的10％至20％、20％至30％、30％至40％、40％至50％、50％至60％或70％至80％。在一些实施方案中，实施一次或多次剂量减少前一水平的约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或约80％。在一些实施方案中，实施一次或多次剂量减少前一水平的10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％。在一些情况下，当受试者的天冬氨酸转氨酶(ast)水平大于10×正常上限(uln)、胆红素水平大于5×uln或两者时，停止施用紫杉醇。

28、在一些情况下，该方法还可以包括当观察到中度至重度肝损伤时，减少所述抗gal-9抗体的剂量、所述吉西他滨的剂量、所述紫杉醇的剂量或其组合。在其他情况下，该方法还可以包括当观察到严重的血液毒性、神经毒性、皮肤毒性和/或胃肠毒性时，减少所述抗gal-9抗体、所述吉西他滨、所述紫杉醇或其组合的剂量或终止施用。在一些实例中，紫杉醇的剂量减少至100mg/m2-75mg/m2。在其他实例中，吉西他滨的剂量减少至800mg/m2-600mg/m2。

29、在治疗实体瘤(例如，本文所述的那些并且包括转移性实体瘤)中使用的药物组合物以及抗半乳糖凝集素-9抗体中的任一种与如本文中还公开的一种或多种化疗剂组合用于制备用于治疗实体瘤的药物的用途也在本公开的范围内。

30、本发明的一个或多个实施方案的细节在下面的描述中阐述。本发明的其他特征或优点将从以下附图和几个实施方案的详细描述以及所附权利要求中变得明显。