用于肺癌的治疗性RNA的制作方法

背景技术：

技术实现思路

1、本发明通常包括对受试者的免疫治疗处理，包括施用rna(即疫苗rna)，所述rna编码一组氨基酸序列(即疫苗抗原)，每个所述氨基酸序列包括肿瘤抗原、其免疫原性变体，或肿瘤抗原或其免疫原性变体的免疫原性片段(即抗原性肽或蛋白质)。因此，疫苗抗原包括肿瘤抗原的表位，用于在受试者中诱导针对肿瘤抗原的免疫应答。施用编码疫苗抗原的rna以提供(在适当的靶细胞表达多核苷酸之后)抗原，用于诱导(即刺激，引发和/或扩增)针对靶抗原(肿瘤抗原)或其加工产物的免疫应答。在一个实施方案中，根据本公开诱导的免疫应答是t细胞介导的免疫应答。在一个实施方案中，免疫应答是抗癌免疫应答，特别是抗肺癌免疫应答，例如抗非小细胞肺癌(nsclc)免疫应答。本文所述的疫苗rna处理与包括施用除本文所述的疫苗rna以外的其它治疗剂的额外的治疗组合。在某些实施方案中，这种进一步的治疗剂包括一个或多个免疫检查点抑制剂、一个或多个化疗药物，或其的组合。

2、本文所述的疫苗包括作为活性成分的单链rna，所述单链rna可以在进入受体细胞时翻译成相应的蛋白质。除了野生型或密码子优化的编码抗原序列的序列之外，rna可以含有一个或多个结构元件，所述结构元件被优化用于rna的稳定性和翻译效率的最大功效(5’帽、5’utr、3’utr和poly(a)尾)。在一个实施方案中，rna含有所有这些元件。在一个实施方案中，β-s-arca(d1)(m27,2’-ogppspg)可用作rna药物物质的5’端的特异性帽化结构。作为5’utr序列，可以使用人α-珠蛋白质mrna的5’utr序列，任选地与优化的“kozak序列”一起，以提高翻译效率。作为3’utr序列，可以使用两个序列元件(f1元件)的组合，所述两个序列元件来源自“分离的氨基端增强子”(aes)mrna(称为f)和线粒体编码的12s核糖体rna(称为i)，所述12s核糖体rna置于编码序列和poly(a)尾之间以确保更高的最大蛋白质水平和延长的mrna持久性。这些是通过对赋予rna稳定性和增强总蛋白质表达的序列的离体选择方法来鉴定的(参见wo2017/060314，在此引入作为参考)。此外，可以使用长度为110个核苷酸的poly(a)尾，其由30个腺苷残基的延伸，随后是(随机核苷酸的)10个核苷酸的接头序列和另外70个腺苷残基组成。设计该poly(a)尾序列以增强rna稳定性和翻译效率。

3、在一个实施方案中，本文所述的疫苗抗原包括破坏免疫耐受性的氨基酸序列。破坏免疫耐受性的氨基酸序列可以直接或通过接头分开与疫苗序列的c端融合，即抗原性肽或蛋白质。任选地，破坏免疫耐受性的氨基酸序列可以连接抗原肽或蛋白质和mitd，如下文进一步描述的。破坏免疫耐受性的氨基酸序列可以是rna编码的。在一个实施方案中，抗原靶向rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna一起施用。这种编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna可以含有上述编码抗原的rna的稳定性和翻译效率而优化的用于rna的最大功效的结构元件(5’帽、5’utr、3’utr、poly(a)尾)。

4、在一个实施方案中，破坏免疫耐受性的氨基酸序列包括辅助表位。在一个实施方案中，辅助表位可以是破伤风类毒素κ来源的，例如，来源自破伤风梭菌(clostridiumtetani)的破伤风类毒素(tt)的p2p16氨基酸序列。这些序列可以通过在引发过程中提供肿瘤非特异性t细胞帮助来支持克服用于有效诱导对自身抗原的免疫应答的自身耐受性机制。破伤风类毒素重链包括可以与mhc ii类等位基因混杂结合并在几乎所有接种破伤风的个体中诱导cd4+记忆t细胞的表位。此外，与单独应用肿瘤相关抗原相比，已知tt辅助表位与肿瘤相关抗原的结合通过在引发过程中提供cd4+介导的t细胞帮助来改善免疫刺激。为了降低刺激cd8+ t细胞的风险，已知含有混杂结合辅助表位的两个肽序列可用于确保尽可能多地结合mhc ii类等位基因，例如p2和p16。

5、此外，sec(分泌信号肽)和/或mitd(mhc i类运输结构域)可能与抗原编码区域和/或辅助表位编码区域融合，使得相应元件分别以n端或c端标签的形式被翻译。来自编码人mhc i类复合物(hla-b51、单倍型a2、b27/b51和cw2/cw3)的序列的融合蛋白标签已经显示出改善抗原加工和呈递。sec可对应于编码分泌信号肽的78bp片段，所述片段指导新生多肽链转运到内质网中。mitd可对应于mhc i类分子的跨膜结构域和细胞质结构域，也称为mhci类运输结构域。具有它们自己的分泌信号肽和跨膜结构域的抗原(如cldn6)可能不需要添加融合标签。编码主要由氨基酸甘氨酸(g)和丝氨酸(s)组成的短连接体肽的序列(通常用于融合蛋白)可以用作gs/接头。

6、疫苗rna可以与脂质体复合以产生用于静脉内(i.v.)施用的血清稳定的rna-脂质体复合物(rna(lip))。如果使用不同rna的组合，则可以将rna分别与脂质体复合以产生用于静脉内(i.v.)施用的血清稳定的rna-脂质体复合物(rna(lip))。rna(lip)靶向淋巴器官中的抗原呈递细胞(apc)，其导致免疫系统的有效刺激。

7、rna脂质体复合物颗粒可以使用脂质体制备，所述脂质体是通过将脂质在乙醇中的溶液注射到水或合适的水相中可获得的。在一个实施方案中，水相具有酸性ph。在一个实施方案中，水相包括例如约5mm的量的乙酸。脂质体可用于通过将脂质体与rna混合来制备rna脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，脂质体和rna脂质体复合物颗粒包括至少一种阳离子脂质和至少一种额外的脂质。在一个实施方案中，至少一种阳离子脂质包括1,2-二-o-十八烯基-3-三甲基铵丙烷(dotma)。在一个实施方案中，至少一种额外的脂质包括1,2-二-(9z-十八碳烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)。在一个实施方案中，至少一种阳离子脂质包括1，2-二-o-十八烯基-3-三甲基铵丙烷(dotma)，并且至少一种额外的脂质包括1,2-二-(9z-十八烯基)-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dope)。在一个实施方案中，脂质体和rna脂质体复合物颗粒包括1,2-二-o-十八碳烯基-3-三甲基铵丙烷(dotma)和1,2-二-(9z-十八碳烯酰基)-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dope)。在一个实施方案中，至少一种阳离子脂质与至少一种额外的脂质的摩尔比为约2:1。在一个实施方案中，在生理ph下，rna脂质体复合物颗粒中正电荷与负电荷的电荷比是约1.6:2至约1:2，或约1.6:2至约1.1:2。在具体的实施方案中，在生理ph下，rna脂质体复合物颗粒中正电荷与负电荷的电荷比是约1.6:2.0、约1.5:2.0、约1.4:2.0、约1.3:2.0、约1.2:2.0、约1.1:2.0或约1:2.0。

8、在一个实施方案中，疫苗rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制为脂质体复合物颗粒。

9、在一个方面，本发明涉及组合物或药物制剂，其包括：

10、(a)至少一种rna，其中至少一种rna编码以下氨基酸序列：

11、(i)氨基酸序列，其包括claudin 6(cldn6)、其免疫原性变体，或cldn6或其免疫原性变体的免疫原性片段；

12、(ii)氨基酸序列，其包括kita-kyushu肺癌抗原1(kk-lc-1)、其免疫原性变体，或kk-lc-1或其免疫原性变体的免疫原性片段；

13、(iii)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原a3(mage-a3)、其免疫原性变体，或mage-a3或其免疫原性变体的免疫原性片段；

14、(iv)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原4(mage-a4)、其免疫原性变体，或mage-a4或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

15、(v)氨基酸序列，其包括黑色素瘤优先表达抗原(prame)、其免疫原性变体，或prame或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

16、(b)进一步的治疗剂，其选自：免疫检查点抑制剂、化疗剂或其组合。

17、在一个实施方案中，至少一种rna进一步编码以下氨基酸序列中的一个或两个：

18、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

19、(vii)氨基酸序列，其包括纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)、其免疫原性变体，或ny-eso-1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

20、在一个实施方案中，至少一种rna进一步编码：

21、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

22、在一个实施方案中，至少一种rna编码：

23、(i)氨基酸序列，其包括claudin 6(cldn6)、其免疫原性变体，或cldn6或其免疫原性变体的免疫原性片段；

24、(ii)氨基酸序列，其包括kita-kyushu肺癌抗原1(kk-lc-1)、其免疫原性变体，或kk-lc-1或其免疫原性变体的免疫原性片段；

25、(iii)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原a3(mage-a3)、其免疫原性变体，或mage-a3或其免疫原性变体的免疫原性片段；

26、(iv)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原4(mage-a4)、其免疫原性变体，或mage-a4或其免疫原性变体的免疫原性片段；

27、(v)氨基酸序列，其包括黑色素瘤优先表达抗原(prame)、其免疫原性变体，或prame或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

28、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段的氨基酸序列。

29、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列由单独的rna编码。

30、在一个实施方案中，

31、(i)编码(i)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:3或seq id no:4的核苷酸序列，或与seq id no:3或seq id no:4的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

32、(ii)(i)下的氨基酸序列，其包括seq id no:1或seq id no:2的氨基酸序列，或与seq id no:1或seq id no:2的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

33、在一个实施方案中，

34、(i)编码(ii)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:7或seq id no:8的核苷酸序列，或与seq id no:7或seq id no:8的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

35、(ii)(ii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:5或seq id no:6的氨基酸序列，或与seq id no:5或seq id no:6的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

36、在一个实施方案中，

37、(i)编码(iii)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:11或seq id no:12的核苷酸序列，或与seq id no:11或seq id no:12的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

38、(ii)(iii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:9或seq id no:10的氨基酸序列，或与seq id no:9或seq id no:10的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

39、在一个实施方案中，

40、(i)编码(iv)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:15或seq id no:16的核苷酸序列，或与seq id no:15或seq id no:16的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

41、(ii)(iv)下的氨基酸序列，其包括seq id no:13或seq id no:14的氨基酸序列，或与seq id no:13或seq id no:14的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

42、在一个实施方案中，

43、(i)编码(v)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:19或seq id no:20的核苷酸序列，或与seq id no:19或seq id no:20的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

44、(ii)(v)下的氨基酸序列，其包括seq id no:17或seq id no:18的氨基酸序列，或与seq id no:17或seq id no:18的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％,85％或80％同一性的氨基酸序列。

45、在一个实施方案中，

46、(i)编码(vi)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:23或seq id no:24的核苷酸序列，或与seq id no:23或seq id no:24的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

47、(ii)(vi)下的氨基酸序列，其包括seq id no:21或seq id no:22的氨基酸序列，或与seq id no:21或seq id no:22的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

48、在一个实施方案中，

49、(i)编码(vii)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:27或seq id no:28的核苷酸序列，或与seq id no:27或seq id no:28的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

50、(ii)(vii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:25或seq id no:26的氨基酸序列，或与seq id no:25或seq id no:26的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

51、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的至少一个氨基酸序列包括破坏免疫耐受性的氨基酸序列和/或至少一种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna共同施用。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括破坏免疫耐受性的氨基酸序列和/或每种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna共同施用。在一个实施方案中，破坏免疫耐受性的氨基酸序列包括辅助表位，优选破伤风类毒素来源的辅助表位。在一个实施方案中，

52、(i)编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:34的核苷酸序列，或与seq id no:34的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

53、(ii)破坏免疫耐受性的氨基酸序列，其包括seq id no:33的氨基酸序列，或与seqid no:33的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

54、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的至少一个氨基酸序列由与野生型编码序列相比密码子优化和/或g/c含量增加的编码序列编码，其中密码子优化和/或g/c含量的增加优选不改变编码的氨基酸序列的序列。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)中的每一个氨基酸序列由与野生型编码序列相比密码子优化和/或其g/c含量增加的编码序列编码，其中密码子优化和/或g/c含量的增加优选不改变编码的氨基酸序列的序列。

55、在一个实施方案中，至少一种rna是修饰的rna，特别是稳定的mrna。在一个实施方案中，至少一种rna包括取代至少一个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，至少一种rna包括取代每个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，每种rna包括取代至少一个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，每种rna包括取代每个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，修饰的核苷独立地选自假尿苷(ψ)、n1-甲基-假尿苷(m1ψ)和5-甲基-尿苷(m5u)。

56、在一个实施方案中，至少一种rna包括5’帽m27,2’-ogppsp(5’)g。在一个实施方案中，每种rna包括5’帽m27,2’-ogppsp(5’)g。

57、在一个实施方案中，至少一种rna包括5’utr，所述5’utr包括seq id no:35的核苷酸序列，或与seq id no:35的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。在一个实施方案中，每种rna包括5’utr，所述5’utr包括seqid no:35的核苷酸序列，或与seq id no:35的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。

58、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的至少一个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列包括对应于mhc分子、优选mhc i类分子的跨膜结构域和细胞质结构域的氨基酸序列。在一个实施方案中，

59、(i)编码增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:32的核苷酸序列，或与seq id no:32的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

60、(ii)增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列，其包括seq id no:31的氨基酸序列，或与seq id no:31的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

61、在一个实施方案中，增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列进一步包括编码分泌信号肽的氨基酸序列。在一个实施方案中，

62、(i)编码分泌信号肽的rna，所述分泌信号肽包括seq id no:30的核苷酸序列，或与seq id no:30的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

63、(ii)分泌信号肽，其包括seq id no:29的氨基酸序列，或与seq id no:29的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

64、在一个实施方案中，至少一种rna包括3’utr，所述3’utr包括seq id no:36的核苷酸序列，或与seq id no:36的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。在一个实施方案中，每种rna包括3’utr，所述3’utr包括seqid no:36的核苷酸序列，或与seq id no:36的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。

65、在一个实施方案中，至少一种rna包括poly-a序列。在一个实施方案中，每种rna包括poly-a序列。在一个实施方案中，poly-a序列包括至少100个核苷酸。在一个实施方案中，poly-a序列包括seq id no:37的核苷酸序列或由seq id no:37的核苷酸序列组成。

66、在一个实施方案中，rna被配制为液体、被配制为固体，或其组合。在一个实施方案中，rna被配制用于注射。在一个实施方案中，rna被配制用于静脉内施用。

67、在一个实施方案中，rna被配制或将被配制为脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，通过将rna与脂质体混合可获得rna脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的至少一种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制或将被共同配制为脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的每种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制或将被共同配制为脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制或将被共同配制为脂质体复合物颗粒，其中比例为约4:1至约16:1、约6:1至约14:1、约8:1至约12:1，或约10:1。

68、在一个实施方案中，组合物或药物制剂包括：

69、(i)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:2的氨基酸序列；

70、(ii)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:6的氨基酸序列；

71、(iii)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:10的氨基酸序列；

72、(iv)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:14的氨基酸序列；

73、(v)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:18的氨基酸序列；和

74、(vi)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:22的氨基酸序列。

75、在一个实施方案中，组合物或药物制剂包括：

76、(i)rna，其包括seq id no:4的核苷酸序列；

77、(ii)rna，其包括seq id no:8的核苷酸序列；

78、(iii)rna，其包括seq id no:12的核苷酸序列；

79、(iv)rna，其包括seq id no:16的核苷酸序列；

80、(v)rna，其包括seq id no:20的核苷酸序列；和

81、(vi)rna，其包括seq id no:24的核苷酸序列。

82、在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括一种或多种化疗剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括紫杉烷(例如多西他赛和/或紫杉醇)、叶酸抗代谢物(例如培美曲塞)、铂化合物(例如顺铂和/或卡铂)或其组合。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括多西他赛。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括多西他赛和雷莫芦单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括多西他赛和尼达尼布。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括紫杉醇。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括紫杉醇和铂化合物，例如顺铂和/或卡铂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括培美曲塞。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括培美曲塞和铂化合物，例如顺铂和/或卡铂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括顺铂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括卡铂。

83、在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括一种或多种免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括抗体，所述抗体选自抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体及其组合。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括抗pd-1抗体。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括西米普利单抗(libtayo，regn2810)、纳武单抗(opdivo；bms-936558)、派姆单抗(keytruda；mk-3475)、匹地利珠单抗(ct-011)、斯巴达珠单抗(pdr001)、medi0680(amp-514)、多塔利单抗(tsr-042)、西利单抗(jnj63723283)、特瑞普利单抗(js001)、amp-224(gsk-2661380)、pf-06801591、替雷利珠单抗(bgb-a317)、abbv-181、b1754091或shr-1210。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括西米普利单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括抗pd-l1抗体。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括阿特珠单抗(tecentriq；rg7446；mpdl3280a；r05541267)、度伐利尤单抗(medi4736)、bms-936559、阿维鲁单抗(bavencio)、洛达利单抗(ly3300054)、cx-072(proclaim-cx-072)、faz053、kn035或mdx-1105。

84、在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括一种或多种化疗剂和一种或多种免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括顺铂和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括卡铂和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括紫杉醇和顺铂和/或卡铂的组合(例如，紫杉醇和顺铂的组合、紫杉醇和卡铂的组合，或紫杉醇、顺铂和卡铂的组合)和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括培美曲塞和顺铂和/或卡铂的组合(例如，培美曲塞和顺铂的组合、培美曲塞和卡铂的组合，或培美曲塞、顺铂和卡铂的组合)和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗体，所述抗体选自抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体及其组合。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗pd-1抗体。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括西米普利单抗(libtayo，regn2810)、纳武单抗(opdivo；bms-936558)、派姆单抗(keytruda；mk-3475)、匹地利珠单抗(ct-011)、斯巴达珠单抗(pdr001)、med10680(amp-514)、多塔利单抗(tsr-042)、西利单抗(jnj63723283)、特瑞普利单抗(js001)、amp-224(gsk-2661380)、pf-06801591、替雷利珠单抗(bgb-a317)、abbv-181、b1754091或shr-1210。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括西米普利单抗。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗pd-l1抗体。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括阿特珠单抗(tecentriq；rg7446；mpdl3280a；r05541267)、度伐利尤单抗(medi4736)、bms-936559、阿维鲁单抗(bavencio)、洛达波单抗(ly3300054)、cx-072(proclaim’cx-072)、faz053、kn035或mdx-1105。

85、在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括一种或多种化疗剂和西米普利单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括顺铂和西米普利单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括卡铂和西米普利单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括紫杉醇和顺铂和/或卡铂的组合(例如，紫杉醇和顺铂的组合、紫杉醇和卡铂的组合，或紫杉醇、顺铂和卡铂的组合)和西米普利单抗。在某些实施方案中，组合物或药物制剂包括培美曲塞和顺铂和/或卡铂的组合(例如，培美曲塞和顺铂的组合、培美曲塞和卡铂的组合，或培美曲塞、顺铂和卡铂的组合)和西米普利单抗。

86、在某些实施方案中，西米普利单抗包括抗体，所述抗体选自：

87、(i)抗体，其包括重链和轻链序列，其中：

88、(a)重链，其包括氨基酸序列：

89、

90、和

91、(b)轻链，其包括氨基酸序列：

92、

93、

94、(iii)抗体，其包括来自seq id no:62和seq id no:63的六个cdr序列(例如，来自seq id no:62的三个重链cdr和来自seq id no:63的三个轻链cdr)；

95、(iv)抗体，其包括来自seq id no:62的重链可变区和来自seq id no:63的轻链可变区；

96、(v)抗体，其包括：(a)重链可变区(vh)，其包括cdr-1、cdr-2和cdr-3，所述cdr-1包括氨基酸序列ftfsnfg，所述cdr-2包括氨基酸序列isgggrdt，并且所述cdr-3包括氨基酸序列vkwgniyfdy，和(b)轻链可变区(vl)，其包括cdr-1、cdr-2和cdr-3，所述cdr-1包括氨基酸序列lsintf，所述cdr-2包括氨基酸序列aas，并且所述cdr-3包括氨基酸序列qqssntpft的cdr-3。

97、在一个实施方案中，组合物或药物制剂是药物组合物。在一个实施方案中，药物组合物进一步包括一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。

98、在一个实施方案中，药物制剂是试剂盒。在一个实施方案中，rna和另外的治疗剂在单独的小瓶中。

99、在一个实施方案中，组合物或药物制剂进一步包括使用组合物或药物制剂治疗或预防肺癌的说明书。

100、在一个实施方案中，组合物或药物制剂用于药物用途。在一个实施方案中，药物用途包括对疾病或病症的治疗性或预防性治疗。在一个实施方案中，对疾病或病症的治疗性或预防性治疗包括治疗或预防肺癌。在一个实施方案中，组合物或药物制剂用于对人施用。

101、在另一个方面，本发明涉及治疗受试者的肺癌的方法，其包括施用：

102、(a)至少一种针对受试者的rna，其中至少一种rna编码以下氨基酸序列：

103、(i)氨基酸序列，其包括claudin 6(cldn6)、其免疫原性变体，或cldn6或其免疫原性变体的免疫原性片段；

104、(ii)氨基酸序列，其包括kita-kyushu肺癌抗原1(kk-lc-1)、其免疫原性变体，或kk-lc-1或其免疫原性变体的免疫原性片段；

105、(iii)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原a3(mage-a3)、其免疫原性变体，或mage-a3或其免疫原性变体的免疫原性片段；

106、(iv)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原4(mage-a4)、其免疫原性变体，或mage-a4或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

107、(v)氨基酸序列，其包括黑色素瘤优先表达抗原(prame)、其免疫原性变体，或prame或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

108、(b)进一步的治疗剂，其选自：免疫检查点抑制剂、化疗剂或其组合。

109、在一个实施方案中，至少一种rna进一步编码以下氨基酸序列中的一个或两个：

110、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

111、(vii)氨基酸序列，其包括纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)、其免疫原性变体，或ny-eso-1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

112、在一个实施方案中，至少一种rna进一步编码：

113、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

114、在一个实施方案中，至少一种rna编码：

115、(i)氨基酸序列，其包括claudin 6(cldn6)、其免疫原性变体，或cldn6或其免疫原性变体的免疫原性片段；

116、(ii)氨基酸序列，其包括kita-kyushu肺癌抗原1(kk-lc-1)、其免疫原性变体，或kk-lc-1或其免疫原性变体的免疫原性片段；

117、(iii)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原a3(mage-a3)、其免疫原性变体，或mage-a3或其免疫原性变体的免疫原性片段；

118、(iv)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原4(mage-a4)、其免疫原性变体，或mage-a4或其免疫原性变体的免疫原性片段；

119、(v)氨基酸序列，其包括黑色素瘤优先表达抗原(prame)、其免疫原性变体，或prame或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

120、(vi)氨基酸序列，其包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

121、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列由单独的rna编码。

122、在一个实施方案中，

123、(i)编码(i)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:3或4的核苷酸序列，或与seq id no:3或seq id no:4的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

124、(ii)(i)下的氨基酸序列，其包括seq id no:1或seq id no:2的氨基酸序列，或与seq id no:1或seq id no:2的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

125、在一个实施方案中，

126、(i)编码(ii)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:7或seq id no:8的核苷酸序列，或与seq id no:7或seq id no:8的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

127、(ii)(ii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:5或seq id no:6的氨基酸序列，或与seq id no:5或seq id no:6的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

128、在一个实施方案中，

129、(i)编码(iii)中的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:11或seq id no:12的核苷酸序列，或与seq id no:11或seq id no:12的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

130、(ii)(iii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:9或seq id no:10的氨基酸序列，或与seq id no:9或seq id no:10的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

131、在一个实施方案中，

132、(i)编码(iv)中的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:15或seq id no:16的核苷酸序列，或与seq id no:15或seq id no:16的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

133、(ii)(iv)下的氨基酸序列，其包括seq id no:13或seq id no:14的氨基酸序列，或与seq id no:13或seq id no:14的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

134、在一个实施方案中，

135、(i)编码(v)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:19或seq id no:20的核苷酸序列，或与seq id no:19或seq id no:20的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

136、(ii)(v)下的氨基酸序列包括seq id no:17或seq id no:18的氨基酸序列，或与seq id no:17或seq id no:18的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

137、在一个实施方案中，

138、(i)编码(vi)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:23或seq id no:24的核苷酸序列，或与seq id no:23或seq id no:24的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

139、(ii)(vi)下的氨基酸序列，其包括seq id no:21或seq id no:22的氨基酸序列，或与seq id no:21或seq id no:22的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

140、在一个实施方案中，

141、(i)编码(vii)下的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:27或seq id no:28的核苷酸序列，或与seq id no:27或seq id no:28的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

142、(ii)(vii)下的氨基酸序列，其包括seq id no:25或seq id no:26的氨基酸序列，或与seq id no:25或seq id no:26的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

143、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的至少一个氨基酸序列包括破坏免疫耐受性的氨基酸序列和/或至少一种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna共同施用。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括破坏免疫耐受性的氨基酸序列和/或每种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna共同施用。在一个实施方案中，破坏免疫耐受性的氨基酸序列包括辅助表位，优选破伤风类毒素来源的辅助表位。在一个实施方案中，

144、(i)编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:34的核苷酸序列，或与seq id no:34的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

145、(ii)破坏免疫耐受性的氨基酸序列，其包括seq id no:33的氨基酸序列，或与seqid no:33的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

146、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)中的至少一个氨基酸序列由与野生型编码序列相比密码子优化和/或g/c含量增加的编码序列编码，其中密码子优化和/或g/c含量的增加优选不改变编码的氨基酸序列的序列。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)中的每一个氨基酸序列由与野生型编码序列相比密码子优化和/或其g/c含量增加的编码序列编码，其中密码子优化和/或g/c含量的增加优选不改变编码的氨基酸序列的序列。

147、在一个实施方案中，至少一种rna是修饰的rna，特别是稳定的mrna。在一个实施方案中，至少一种rna包括取代至少一个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，至少一种rna包括取代每个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，每种rna包括取代至少一个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，每种rna包括取代每个尿苷的修饰的核苷。在一个实施方案中，修饰的核苷独立地选自假尿苷(ψ)、n1-甲基-假尿苷(m1ψ)和5-甲基-尿苷(m5u)。

148、在一个实施方案中，至少一种rna包括55’帽m27,2’-ogppsp(5’)g。在一个实施方案中，每种rna包括5’帽m27,2’-ogppsp(5’)g。

149、在一个实施方案中，至少一种rna包括5’utr，所述5’utr包括seq id no:35的核苷酸序列，或与seq id no:35的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。在一个实施方案中，每种rna包括5’utr，所述5’utr包括seqid no:35的核苷酸序列，或与seq id no:35的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。

150、在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的至少一个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)或(vii)下的每个氨基酸序列包括增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列。在一个实施方案中，增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列包括对应于mhc分子、优选mhc i类分子的跨膜结构域和细胞质结构域的氨基酸序列。在一个实施方案中，

151、(i)编码增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列的rna，其包括seq id no:32的核苷酸序列，或与seq id no:32的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

152、(ii)增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列，其包括seq id no:31的氨基酸序列，或与seq id no:31的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

153、在一个实施方案中，增强抗原加工和/或抗原呈递的氨基酸序列进一步包括编码分泌信号肽的氨基酸序列。在一个实施方案中，

154、(i)编码分泌信号肽的rna，其包括seq id no:30的核苷酸序列，或与seq id no:30的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列；和/或

155、(ii)分泌信号肽，其包括seq id no:29的氨基酸序列，或与seq id no:29的氨基酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的氨基酸序列。

156、在一个实施方案中，至少一种rna包括3’utr，所述3’utr包括seq id no:36的核苷酸序列，或与seq id no:36的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。在一个实施方案中，每种rna包括3’utr，所述3’utr包括seqid no:36的核苷酸序列，或与seq id no:36的核苷酸序列具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、85％或80％同一性的核苷酸序列。

157、在一个实施方案中，至少一种rna包括poly-a序列。在一个实施方案中，每种rna包括poly-a序列。在一个实施方案中，poly-a序列包括至少100个核苷酸。在一个实施方案中，poly-a序列包括seq id no:37的核苷酸序列或由seq id no:37的核苷酸序列组成。

158、在一个实施方案中，rna通过注射施用。在一个实施方案中，rna通过静脉内施用来施用。

159、在一个实施方案中，rna被配制成脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，通过将rna与脂质体混合可获得rna脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的至少一种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制为脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的每种rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna共同配制为脂质体复合物颗粒。在一个实施方案中，编码(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)下的氨基酸序列的rna与编码破坏免疫耐受性的氨基酸序列的rna被共同配制为脂质体复合物颗粒，其中比例为约4:1至约16:1、约6:1至约14:1、约8:1至约12:1，或约10:1。

160、在一个实施方案中，方法包括施用：

161、(i)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:2；

162、(ii)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:6；

163、(iii)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:10；

164、(iv)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:14的氨基酸序列的rna；

165、(v)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:18；和

166、(vi)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括seq id no:22。

167、在一个实施方案中，方法包括施用：

168、(i)rna，其包括核苷酸序列seq id no:4；

169、(ii)rna，其包括核苷酸序列seq id no:8；

170、(iii)rna，其包括核苷酸序列seq id no:12；

171、(iv)rna，其包括核苷酸序列seq id no:16；

172、(v)rna，其包括核苷酸序列seq id no:20；和

173、(vi)rna，其包括核苷酸序列seq id no:24。

174、在某些实施方案中，方法包括施用一种或多种化疗剂。在某些实施方案中，方法包括施用紫杉烷(例如多西他赛和/或紫杉醇)、叶酸抗代谢物(例如培美曲塞)、铂化合物(例如顺铂和/或卡铂)或其组合。在某些实施方案中，方法包括施用多西他赛。在某些实施方案中，方法包括施用多西他赛和雷莫芦单抗。在某些实施方案中，方法包括施用多西他赛和尼达尼布。在某些实施方案中，方法包括施用紫杉醇。在某些实施方案中，方法包括施用紫杉醇和铂化合物(例如顺铂和/或卡铂)。在某些实施方案中，方法包括施用培美曲塞。在某些实施方案中，方法包括施用培美曲塞和铂化合物(例如顺铂和/或卡铂)。在某些实施方案中，方法包括施用包括顺铂。在某些实施方案中，所述方法包括施用卡铂。

175、在某些实施方案中，方法包括施用一种或多种免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，方法包括施用抗体，所述抗体选自：抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体及其组合的。在某些实施方案中，方法包括施用抗pd-1抗体。在某些实施方案中，方法包括施用西米普利单抗(libtayo，regn2810)、纳武单抗(opdivo；bms-936558)、派姆单抗(keytruda；mk-3475)、匹地利珠单抗(ct-011)、斯巴达珠单抗(pdro01)、medi0680(amp-514)、多塔利单抗(tsr-042)、西利单抗(jnj63723283)、特瑞普利单抗(jso01)、amp-224(gsk-2661380)、pf-06801591、替雷利珠单抗(bgb-a317)、abbv-181、bi 754091或shr-1210。在某些实施方案中，方法包括施用西米普利单抗。在某些实施方案中，方法包括施用抗pd-l1抗体。在某些实施方案中，方法包括施用阿特珠单抗(tecentriq；rg7446；mpdl3280a；r05541267)、度伐利尤单抗(medi4736)、bms-936559、阿维鲁单抗(bavencio)、洛达利单抗(ly3300054)、cx-072(proclaim-cx-072)、faz053、kn035或mdx-1105。

176、在某些实施方案中，方法包括施用一种或多种化疗剂和一种或多种免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，方法包括施用顺铂和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，方法包括施用卡铂和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，方法包括施用紫杉醇和顺铂和/或卡铂的组合(例如，紫杉醇和顺铂的组合、紫杉醇和卡铂的组合，或紫杉醇、顺铂和卡铂的组合)和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，方法包括施用培美曲塞和顺铂和/或卡铂的组合(例如，培美曲塞和顺铂的组合、培美曲塞和卡铂的组合，或培美曲塞、顺铂和卡铂的组合)和免疫检查点抑制剂。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗体，所述抗体选自：抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体及其组合。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗pd-1抗体。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括西米普利单抗(libtayo，regn2810)、纳武单抗(opdivo；bms-936558)、派姆单抗(keytruda；mk-3475)、匹地利珠单抗(ct-011)、斯巴达珠单抗(pdr001)、medi0680(amp-514)、多塔利单抗(tsr-042)、西利单抗(jnj63723283)、特瑞普利单抗(js001)、amp-224(gsk-2661380)、pf-06801591、替雷利珠单抗(bgb-a317)、abbv-181、bl 754091或shr-1210。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括西米普利单抗。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括抗pd-l1抗体。在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂包括阿特珠单抗(tecentriq；rg7446；mpdl3280a；r0s541267)、度伐利尤单抗(medi4736),、bms-936559、阿维鲁单抗(bavencio)、洛达利单抗(ly3300054)、cx-072(proclaim-cx-072)、faz053,kn035或mdx-1105。

177、在某些实施方案中，方法包括施用一种或多种化疗剂和西米普利单抗。在某些实施方案中，方法包括施用顺铂和西米普利单抗。在某些实施方案中，方法包括施用卡铂和西米普利单抗。在某些实施方案中，方法包括施用紫杉醇与顺铂和/或卡铂的组合(例如，紫杉醇和顺铂的组合、紫杉醇和卡铂的组合，或紫杉醇、顺铂和卡铂的组合)和西米普利单抗。在某些实施方案中，方法包括施用培美曲塞和顺铂和/或卡铂的组合(例如，培美曲塞和顺铂的组合、培美曲塞和卡铂的组合，或培美曲塞、顺铂和卡铂的组合)和西米普利单抗。

178、在某些实施方案中，西米普利单抗包括选自以下的抗体：

179、(i)抗体，其包括重链和轻链序列，其中：

180、(a)重链，其包括氨基酸序列：

181、

182、

183、和

184、(b)轻链，其包括氨基酸序列：

185、

186、(iii)抗体，其包括来自seq id no:62和seq id no:63的六个cdr序列(例如，来自seq id no:62的三个重链cdr和来自seq id no:63的三个轻链cdr)；

187、(iv)抗体，其包括来自seq id no:62的重链可变区和来自seq id no:63的轻链可变区；

188、(v)抗体，其包括：(a)重链可变区(vh)，其包括cdr-1、cdr-2和cdr-3，所述cdr-1包括氨基酸序列ftfsnfg，所述cdr-2包括氨基酸序列isgggrdt，并且所述cdr-3包括氨基酸序列vkwgniyfdy，和(b)轻链可变区(vl)，其包括cdr-1、cdr-2和cdr-3，所述cdr-1包括氨基酸序列lsintf，所述cdr-2包括氨基酸序列aas，并且所述cdr-3包括氨基酸序列qqssntpft。

189、在一个实施方案中，受试者是人。

190、在一个方面，本文提供了本文所述的rna用于本文所述的方法，例如，

191、(i)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括claudin 6(cldn6)、其免疫原性变体，或cldn6或其免疫原性变体的免疫原性片段；

192、(ii)编码包括氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括kita-kyushu肺癌抗原1(kk-1lc-1)、其免疫原性变体，或kk-lc-1或其免疫原性变体的免疫原性片段；

193、(iii)编码包括氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括黑色素瘤抗原a3(mage-a3)、其免疫原性变体，或mage-a3或其免疫原性变体的免疫原性片段；

194、(iv)编码包括氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括黑色素瘤抗原4(mage-a4)、其免疫原性变体，或mage-a4或其免疫原性变体的免疫原性片段；和

195、(v)编码氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括黑色素瘤优先表达抗原(prame)、其免疫原性变体，或prame或其免疫原性变体的免疫原性片段；

196、和任选地一种或多种：

197、(vi)编码包括氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括黑色素瘤抗原c1(mage-c1)、其免疫原性变体，或mage-c1或其免疫原性变体的免疫原性片段；和/或

198、(vii)编码包括氨基酸序列的rna，所述氨基酸序列包括纽约食管鳞状细胞癌-1(nv-eso-1)、其免疫原性变体，或nv-eso-1或其免疫原性变体的免疫原性片段。

199、用于所述用途的rna的实施方案如本文所述，例如关于本发明的组合物或药物制剂或方法。