一种抗衰老组合物及其制备方法和应用与流程

本发明属于化妆品，具体涉及一种抗衰老组合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、皮肤衰老是由多种因素共同作用导致的一种皮肤形态及功能退行性改变的生理或病理现象。皮肤衰老影响因素可分为外源性衰老与内源性衰老。外源性衰老主要是由于暴露于日光照射、污染、细菌，毒素等因素下，出现皮肤正常功能的改变和皮肤老化。皮肤内源性衰老，也称为固有老化，受遗传，内分泌，皮肤组织的微循环，皮肤组织营养和皮肤组织新陈代谢等多因素的影响。

2、在皮肤衰老过程中，因为外在环境例如日光照射，细菌，或内在衰老因素，一些皮肤细胞的细胞表型会发生改变，真皮基质的蛋白(包括弹力纤维、胶原和蛋白多糖)结构和组成发生变化。细胞老化是皮肤老化的基础，细胞老化是指细胞由于逐渐积累了多种应激因素(包括紫外线辐射、自由基、端粒过度缩短、基因突变等)所引起的损伤而进入的一种不可逆的增殖停滞的状态。除增殖停滞外，活跃的分泌能力是老化细胞的另一个重要特征，即老化细胞会持续性表达一系列的促炎细胞因子(il-1β等)、趋化因子(cxcr2等)、生长因子以及蛋白酶(mmp1和mmp3)等，此即所谓的老化相关的分泌表型(senescence-associatedsecretoryphenotype，sasp)。这些sasp因子使皮肤组织处于低水平的慢性炎症状态，影响皮肤细胞的正常分化，并破坏皮肤干细胞壁龛，使其功能紊乱，损害皮肤的自我更新和创伤修复能力，导致皮肤老化。

3、由于皮肤衰老涉及皮肤的外源性因素，又涉及非常多的的细胞内生物学进程，如dna修复的改变和稳定、线粒体的功能、细胞周期和凋亡、细胞的抗氧化能力、细胞因子的分泌、细胞外基质、脂类合成、泛素引起的蛋白分解和细胞代谢等，因此，目前市售的具有抗衰老功能的化妆品效果差，无法实现有效改善和抑制皮肤的衰老。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种抗衰老组合物及其制备方法和应用，本发明提供的抗衰老组合物可以增强细胞增殖能力，抑制皮肤细胞衰老相关分泌表型(senescenceassociated secretory phenotype,sasp)因子的表达，增强细胞抗氧化能力，有效延缓皮肤衰老。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了一种抗衰老组合物，包括以下质量份数的组分：

4、灵芝多糖6～10份，黄芪多糖6～10份，β-烟酰胺单核苷酸1～2份，重组人源溶菌酶2～4份，肌肽1～2份，谷胱甘肽1～2份。

5、优选的，所述灵芝多糖中多糖的质量含量≥95％。

6、优选的，所述灵芝多糖的制备方法包括以下步骤：

7、将灵芝粉体浸渍于有机溶剂中，得到灵芝混合溶液；所述有机溶剂为乙醇和乙醚；

8、将所述灵芝混合溶液加热脱脂，固液分离后，收集固相组分得到脱脂灵芝粉体；

9、将所述脱脂灵芝粉体分散于水中，得到脱脂灵芝粉体水分散液；

10、将所述脱脂灵芝粉体水分散液煮沸提取，固液分离后，收集液相组分得到灵芝提取液；

11、将所述灵芝提取液浓缩，得到灵芝浓缩液；

12、将所述灵芝浓缩液和有机萃取剂混合进行萃取，得到灵芝萃取水相；

13、将所述灵芝萃取水相和乙醇混合进行醇沉，收集乙醇沉淀得到灵芝多糖粗品；

14、将所述灵芝多糖粗品溶解于水中，进行柱层析纯化，得到含灵芝多糖的洗脱液；所述柱层析纯化的洗脱液为氯化钠水溶液；

15、将所述含灵芝多糖的洗脱液透析，收集透析液干燥后得到灵芝多糖的纯品。

16、优选的，所述黄芪多糖中多糖的质量含量≥96％。

17、优选的，所述黄芪多糖的制备方法包括以下步骤：

18、将黄芪粉体浸渍于有机溶剂中，得到黄芪混合溶液；所述有机溶剂为乙醇和乙醚；

19、将所述黄芪混合溶液加热脱脂，固液分离后，收集固相组分得到脱脂黄芪粉体；

20、将所述脱脂黄芪粉体分散于碱性水溶液中，得到脱脂黄芪粉体分散液；所述碱性水溶液的ph值≥9；

21、将所述脱脂黄芪粉体分散液煮沸提取，固液分离后，收集液相组分得到黄芪提取液；

22、将所述黄芪提取液调节ph至6～7后浓缩，得到黄芪浓缩液；

23、将所述黄芪浓缩液和有机萃取剂混合进行萃取，得到黄芪萃取水相；

24、将所述黄芪萃取水相和乙醇混合进行醇沉，收集乙醇沉淀得到黄芪多糖粗品；

25、将所述黄芪多糖粗品溶解于水中，进行柱层析纯化，得到含黄芪多糖的洗脱液；所述柱层析纯化的洗脱液为氯化钠水溶液；

26、将所述含黄芪多糖的洗脱液透析，收集透析液干燥后得到黄芪多糖的纯品。

27、优选的，所述重组人源溶菌酶的纯度≥99％；所述重组人源溶菌酶的比活力≥120000u/mg。

28、优选的，所述重组人源溶菌酶由具有如seq id no.1所示的核苷酸序列表达后纯化得到。

29、本发明提供了上述技术方案所述的抗衰老组合物在抗衰老化妆品中的应用。

30、优选的，所述抗衰老组合物在抗衰老化妆品中的质量百分含量为5～30％。

31、优选的，所述抗衰老化妆品包括护肤水、护肤乳、面霜、精华液、洗面奶、面膜、体胶、口红和眼影中的一种或多种。

32、本发明提供了一种抗衰老组合物，包括以下质量份数的组分：灵芝多糖6～10份，黄芪多糖6～10份，β-烟酰胺单核苷酸1～2份，重组人源溶菌酶2～4份，肌肽1～2份，谷胱甘肽1～2份。本发明提供的组合物中：灵芝多糖具有调节机体免疫的作用，通过激活树突状细胞和巨噬细胞分化及成熟，诱导自然杀伤细胞，调节t、b淋巴细胞的增殖与免疫应答、促进免疫细胞因子生成，用于发挥提高机体非特异性和特异性免疫的作用。灵芝多糖还能提高肝脏、骨髓、血液合成dna、rna、蛋白质的能力；黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用；β-烟酰胺单核苷酸(nmn)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)的直接前体，nad+是细胞能量代谢的关键分子，对调节细胞衰老和维持机体正常功能至关重要；nmn不仅有抗皱、祛斑祛色素等显著功效外，还有抗炎、防晒、延缓衰老等作用；重组人源溶菌酶与人体天然溶菌酶的氨基酸序列是完全一致，将其用于人体不会造成免疫反应、过敏反应等副作用；肌肽(l-carnosine)具有抗炎、抗糖化、抗氧化和螯合作用；谷胱甘肽(glutathione，r-glutamyl cysteingl+glycine，gsh)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能帮助保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用、整合解毒作用。本发明利用上述六种组分在适宜的质量份数范围内实现了系统抗衰老的效果。综上，本发明提供的抗衰老组合物可以增强细胞增殖能力，抑制皮肤细胞衰老相关分泌表型(senescence associated secretory phenotype,sasp)因子的表达，增强细胞抗氧化能力，有效延缓皮肤衰老。