一种活性氧响应仿生纳米载体系统、制备方法及应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种活性氧响应仿生纳米载体系统、制备方法及应用。

背景技术：

1、结肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康。目前，化疗仍是结肠癌患者治疗的主要方法之一，常用的一线化疗药物有奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、伊立替康等。由于化疗药物对肿瘤的选择性不强，杀伤肿瘤细胞的同时，也会对机体其他正常细胞展开攻击，使得化疗药物不能发挥最佳的抗肿瘤效应且会带来严重的毒副作用。因此，有必要开发一种靶向性强、副作用小的治疗结肠癌的药物。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的问题，本发明目的在于提供一种活性氧响应仿生纳米载体系统、制备方法及应用，本发明提供的活性氧响应仿生纳米载体系统能够实现纳米药物颗粒体内长循环并且同源靶向至肿瘤部位，增强纳米药物颗粒在肿瘤部位的富集和滞留，对于结肠癌的化疗-光动力协同治疗具有较高的应用前景。

2、基于上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、第一方面，本发明提供一种活性氧响应仿生纳米载体系统，该活性氧响应仿生纳米载体系统为核壳结构，内核为负载疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6的纳米内核，壳体为细胞膜。

4、本发明共负载奥沙利铂和二氢卟吩e6的活性氧响应的红细胞膜与同源hct116细胞膜融合膜仿生纳米载体，在660nm红外光照射下，由光敏剂二氢卟吩e6产生活性氧杀伤肿瘤细胞的同时，触发内核崩解快速释放出奥沙利铂，进一步杀伤肿瘤细胞，提高奥沙利铂的抗肿瘤效应，并降低毒副作用。

5、优选地，所述细胞膜为红细胞膜、hct116细胞膜、ct26细胞膜、红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜、红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜中的一种。

6、共负载奥沙利铂(oxa)和二氢卟吩e6(ce6)的活性氧响应的细胞膜仿生纳米载体能够实现纳米药物颗粒体内长循环并且同源靶向至肿瘤部位，增强纳米药物颗粒在肿瘤部位的富集和滞留，抑制肿瘤的发生发展，且生物毒性较低。

7、第二方面，本发提供一种制备活性氧响应仿生纳米载体系统的方法，包括如下步骤：

8、(1)将疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6与tk-ppe混合，经纳米沉淀法制得负载疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6的纳米内核；

9、(2)将负载疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6的纳米内核与细胞膜混合，经膜挤出法制得细胞膜包裹纳米内核的活性氧响应仿生纳米载体系统。

10、优选地，纳米沉淀法包括如下步骤：将疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6与tk-ppe均匀分散于二甲基亚砜制得混合液，再将混合液逐滴加入水中形成负载疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6的纳米内核。

11、优选地，膜挤出法包括如下步骤：将负载疏水性奥沙利铂和/或二氢卟吩e6的纳米内核与细胞膜混合均匀，经孔径为200nm～400nm的聚碳酸酯膜挤压，再经离心制得细胞膜包裹纳米内核的活性氧响应仿生纳米载体系统。

12、优选地，疏水性奥沙利铂由如下方法制得，其制备方法包括如下步骤：

13、(1)将奥沙利铂分散于过氧化氢，经氧化、干燥，制得氧化的奥沙利铂；

14、(2)将氧化的奥沙利铂与月桂酸酐溶解于n,n-二甲基甲酰胺，于100℃～120℃搅拌反应后，经重结晶制得疏水性奥沙利铂。

15、药物的包载是通过亲疏水相互作用，如果是亲水性的药物，直接溶解在水里了，就不是纳米制剂了，故而奥沙利铂须经疏水化处理后方能形成纳米制剂。本发明采用将奥沙利铂两侧接枝烷基的疏水处理，这是由于奥沙利铂的铂元素的化合价是二价，若在其两侧接上烷基，就需要把铂氧化成四价，所以必须先将其氧化，再进行酯化反应接上烷基，完成疏水化处理。另外，若含有未疏水化完全的奥沙利铂，则会降低药物的载药率，最好是疏水化反应完全，以达到最优的载药效率。

16、本发明采用将奥沙利铂进行氧化后疏水化处理，在维持奥沙利铂药效的同时，实现了奥沙利铂的细胞膜包覆，有助于包覆的奥沙利铂纳米药物颗粒在体内长循环并且同源靶向至肿瘤部位，增强纳米药物颗粒在肿瘤部位的富集和滞留。

17、第三方面，本发明提供活性氧响应仿生纳米载体系统在制备治疗结肠癌药物中的应用。

18、第四方面，本发明提供一种治疗结肠癌的药物，该药物包括活性氧响应仿生纳米载体系统。

19、优选地，所述活性氧响应仿生纳米载体系统为红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹同时负载疏水性奥沙利铂和二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

20、或为，

21、红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹负载疏水性奥沙利铂纳米内核，形成的纳米载体系统；

22、或为，

23、红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

24、或为，

25、红细胞膜包裹同时负载疏水性奥沙利铂和二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

26、或为，

27、hct116细胞膜包裹同时负载疏水性奥沙利铂和二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

28、或为，

29、红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜，包裹同时负载疏水性奥沙利铂和二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

30、或为，

31、红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜，包裹负载疏水性奥沙利铂纳米内核，形成的纳米载体系统；

32、或为，

33、红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜，包裹负载二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

34、或为，

35、两种纳米载体系统的混合物，所述的两种纳米载体系统分别为：a)红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜，包裹负载疏水性奥沙利铂纳米内核，形成的纳米载体系统；b)红细胞膜与ct26细胞膜形成的融合膜，包裹负载二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统；

36、或为，

37、两种纳米载体系统的混合物，所述的两种纳米载体系统分别为：a)红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹负载疏水性奥沙利铂纳米内核，形成的纳米载体系统；b)红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹负载二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米的载体系统。

38、经荷瘤小鼠抗肿瘤实验发现，上述纳米载体系统对结肠癌肿瘤生长具有抑制作用。

39、优选地，活性氧响应仿生纳米载体系统为红细胞膜与hct116细胞膜形成的融合膜，包裹同时负载疏水性奥沙利铂和二氢卟吩e6纳米内核，形成的纳米载体系统。

40、经荷瘤小鼠抗肿瘤实验发现，此纳米载体系统对结肠癌肿瘤生长具有最佳抑制作用，具有实现化疗-光动力联合治疗结肠癌的良好优势。

41、与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

42、本发明的共负载奥沙利铂(oxa)和二氢卟吩e6(ce6)的活性氧响应的红细胞膜与同源hct116细胞膜融合膜仿生纳米载体hnpoc能够实现纳米颗粒体内长循环并且同源靶向至肿瘤部位，增强纳米载体在肿瘤部位的富集和滞留。

43、本发明的活性氧响应仿生纳米载体在进入体内后，由于表面具有红-癌细胞融合膜涂层，可延长其在体内的循环时间并且同源靶向至肿瘤部位，进一步被肿瘤细胞内吞摄取。在660nm红外光照射下，由光敏剂ce6产生活性氧杀伤肿瘤细胞的同时，触发内核崩解快速释放出oxa，进一步杀伤肿瘤细胞，提高oxa的抗肿瘤效应，降低毒副作用，具有化疗-光动力联合治疗结肠癌的应用前景，为结肠癌的治疗提供纳米医学参考。