石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物在制备抗病毒药物中的应用的制作方法

本技术涉及生物医药领域，具体涉及石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物在制备抗病毒药物中的应用。

背景技术：

1、在整个说明书中对现有技术的任何讨论都不应被视为承认这些现有技术是广为人知的，或构成本领域公知常识的一部分。

2、石蒜科植物是活性生物碱的重要来源之一，其作为传统的药用植物，在我国有着悠久的应用历史。石蒜碱(lycorine)于1877年首次从石蒜科植物洋水仙(narcissuspseudonarcissus)中分离得到，现已发现其在石蒜科植物中有广泛的分布。至今,对它的研究持续了近一百五十年。石蒜碱属于异喹啉类生物碱，其结构如下。

3、

4、石蒜碱之所以能获得持久的关注，主要是因为它独特的结构和丰富的药理活性。石蒜碱包含四个连续手性中心的刚性骨架使其结构确认进展缓慢。石蒜碱的药理作用包含了抗癌、抗病毒、抗寄生虫、抗菌、抗炎、抑制乙酰胆碱酯酶等活性。体内外实验表明石蒜碱有广谱的抗病毒活性，包括单纯疱疹病毒、逆转录病毒hiv-1、冠状病毒sars-cov、脊髓灰质炎病毒(pv)、西尼罗河病毒(wnv)、登革热病毒、黄热病病毒、肠道病毒ev71、流感病毒、丙肝病毒和寨卡病毒。近来有研究表明，石蒜碱对于sars-cov-2也有较好的抑制活性，其ec50为0.31μm，cc50大于40μm。石蒜碱通过干扰病毒dna合成和抑制dna聚合酶活性表现出较好的抗带状疱疹病毒(hsv-1)作用。针对脊髓灰质炎病毒(pv)，石蒜碱通过抑制tnf-α的产生阻止病毒复制。西尼罗河病毒ns4a和ns4b蛋白中2k肽段中一个氨基酸的突变可以引起对石蒜碱的耐药作用，提示其可能为石蒜碱直接作用靶点。石蒜碱在5mg/kg和10mg/kg的给药量时对寨卡病毒引起的小鼠病理学损伤有明显的减轻，1mg/kg的给药量下未见明显效果，石蒜碱可以与寨卡病毒的非结构性蛋白ns5结合，降低其c端rdrp与宿主细胞作用形成复制酶复合体的活性，达到抗病毒的效果。

技术实现思路

1、本发明提供了石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物在制备抗病毒药物中的应用。本发明所述石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物对i型单纯疱疹病毒和/人冠状病毒表现出不同程度的抑制作用，且大部分化合物相较于石蒜碱具有更好的活性，表现出较好的抗病毒应用前景。

2、具体地，本发明提供了下述的技术方案。

3、在本发明的第一方面，本发明提供了石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物或其药物组合物或药物制剂在制备抗病毒药物中的应用，其中，石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物具有式i所示结构：

4、

5、其中，ar为c6-12芳烃或c3-10芳杂环，所述的芳杂环中的杂原子选自n、o、s；

6、r为ar上的取代基，为单取代或多取代(为一个或多个)，r独立地选自氢、卤素、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、羟基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、c2-6烯基、c3-6环烷基、苯基。

7、在本发明的实施方式中，所述病毒包括i型单纯疱疹病毒和人冠状病毒。

8、在本发明的一些实施方式中，所述病毒为i型单纯疱疹病毒ghsv-ul46和/或人冠状病毒oc43。

9、在本发明的一些实施方式中，式i化合物中，ar选自苯基、萘基、联苯基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并二噁茂基。

10、在本发明的一些实施方式中，式i化合物中，r为单取代或多取代，r独立地选自氢、卤素、三卤代c1-3烷基、三卤代c1-3烷氧基、硝基、羟基、c1-4烷基、c1-4烷氧基、c2-6链烯基氧基、c2-4烯基、苯基。

11、在本发明的一些实施方式中，式i化合物中，r为单取代或多取代的，所述多取代优选包括二取代或三取代。

12、在本发明的一些实施方式中，式i化合物中，r为单取代时，取代位置为c-4位或c-3位；r为二取代时，取代位置为c-2位和c-4位、c-3位和c-4位、c-2位和c-5位、或c-2位和c-6位；r为三取代时，取代位置为c-2位、c-4和c-5位，或c-3位、c-4和c-5位。

13、进一步地，ar选自r为单取代或多取代的，所述多取代优选包括二取代或三取代；r为单取代时，较为优选的取代位置为c-4位或c-2位；r为二取代时，取代位置优选位于c-2位和c-4位、c-3位和c-4位、c-2位和c-5位、c-2位和c-6位，更优选为c-2位和c-4位、c-3位和c-4位、或c-2位和c-6位；r为三取代时，取代位置优选为(c-2位、c-4和c-5位)或(c-3位、c-4和c-5位)。以上取代位置均以接入通式位置处为c-1位进行定位(下同)。

14、在本发明的一些实施方式中，所述化合物具有式ii所示结构：

15、

16、其中，x1和x2中任一为c或n，且两者不同时为n；r同上文中所定义。

17、在本发明的一些实施方式中，在式ii化合物中，r为单取代或二取代，r独立地选自氢、卤素、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、羟基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、c2-6烯基、c3-6环烷基、苯基。

18、在本发明的一些实施方式中，在式ii化合物中，r为单取代或二取代，其中，r为单取代时，独立地选自氢、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、苯基；r为二取代时，独立地选自卤素和硝基。

19、进一步地，在本技术的一些实施方式中，x1或x2为n时，r优选为氢。

20、在本发明的一些实施方式中，所述化合物具有式ii’所示结构：

21、

22、其中，r同上文中所定义。

23、在本技术的一些实施方式中，式ii’结构中，r为单取代、二取代或三取代(即苯环上的r基团可以为一个或多个，r为多个比如2个或3个时，例如为)，r选自卤素、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、苯基。

24、在本技术的一些实施方式中，式ii’结构中，r为单取代(即苯环上r基团为一个)时，r选自卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、苯基；r为二取代或三取代(即苯环上有两个r基团或三个r基团)时，多个r基团独立地选自卤素和硝基。

25、在本技术的一些实施方式中，式ii’结构中，r为单取代时，r取代位置为对位(c-4位)或邻位(c-2位)；r为二取代或三取代时，r的取代位置为c-2位和c-4位或对c-3位和c-4位或c-2位和c-6位或c-2位和c-4位和c-5位或c-3位和c-4位和c-5位。

26、尤其是，在本技术的一些实施方式中，式ii’结构中，r独立地选自卤素、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、苯基。进一步地，r为单取代时，r独立地选自卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、硝基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6链烯基氧基、苯基；r为二取代或三取代时，r独立地选自卤素和硝基。优选地，所述卤素包括f、cl、br；所述卤代c1-6烷基为氟代c1-3烷基，优选为三氟甲基；所述卤代c1-6烷氧基为氟代c1-3烷氧基，优选为三氟甲氧基；c1-6烷基优选为甲基、乙基、丙基。

27、本发明上述实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

28、在本发明的一些实施方式中，所述化合物选自以下结构：

29、化合物1：1-(2-氟肉桂酰基)-石蒜碱；

30、化合物2：1-(3-氟肉桂酰基)-石蒜碱；

31、化合物3：1-(4-氟肉桂酰基)-石蒜碱；

32、化合物4：1-(2,4-二氟肉桂酰基)-石蒜碱；

33、化合物5：1-(3,4-二氟肉桂酰基)-石蒜碱；

34、化合物6：1-(2-三氟甲基肉桂酰基)-石蒜碱；

35、化合物7：1-(3-三氟甲基肉桂酰基)-石蒜碱；

36、化合物8：1-(4-三氟甲基肉桂酰基)-石蒜碱；

37、化合物9：1-(3-三氟甲氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

38、化合物10：1-(4-三氟甲氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

39、化合物11：1-(2-氯肉桂酰基)-石蒜碱；

40、化合物12：1-(3-氯肉桂酰基)-石蒜碱；

41、化合物13：1-(4-氯肉桂酰基)-石蒜碱；

42、化合物14：1-(2,5-二氯肉桂酰基)-石蒜碱；

43、化合物15：1-(2,6-二氯肉桂酰基)-石蒜碱；

44、化合物16：1-(3,4-二氯肉桂酰基)-石蒜碱；

45、化合物17：1-(4-氟-2-氯肉桂酰基)-石蒜碱；

46、化合物18：1-(2-氟-4-氯肉桂酰基)-石蒜碱；

47、化合物19：1-(4-溴肉桂酰基)-石蒜碱；

48、化合物20：1-(2-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

49、化合物21：1-(3-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

50、化合物22：1-(4-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

51、化合物23：1-(2-氯-5-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

52、化合物24：1-(4-氯-3-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

53、化合物25：1-(4,5-二甲氧基-2-硝基肉桂酰基)-石蒜碱；

54、化合物26：1-肉桂酰基-石蒜碱；

55、化合物27：1-(4-甲基肉桂酰基)-石蒜碱；

56、化合物28：1-(4-甲氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

57、化合物29：1-(4-丙氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

58、化合物30：1-(4-烯丙氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

59、化合物31：1-(4-羟基肉桂酰基)-石蒜碱；

60、化合物32：1-(3-甲氧基-4-羟基肉桂酰基)-石蒜碱；

61、化合物33：1-(3,4-二氧叉基肉桂酰基)-石蒜碱；

62、化合物34：1-(3,4,5-三甲氧基肉桂酰基)-石蒜碱；

63、化合物35：1-[3-(1-联苯)丙烯酰基)]-石蒜碱；

64、化合物36：1-[3-(2-呋喃)丙烯酰基)]-石蒜碱；

65、化合物37：1-[3-(2-噻吩)丙烯酰基)]-石蒜碱；

66、化合物38：1-[3-(3-吡啶)丙烯酰基)]-石蒜碱；

67、化合物39：1-[3-(2-吡啶)丙烯酰基)]-石蒜碱；

68、化合物40：1-[3-(1-萘基)丙烯酰基)]-石蒜碱。

69、在本发明的一些实施方式中，本技术所述的药学上可接受的盐是指上述化合物或其立体异构体，与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐，也包括两性离子盐(内盐)，还包括季铵盐，例如烷基铵盐。这些盐可以是在化合物的最后分离和纯化中直接得到。也可以是通过将上述化合物，或其立体异构体，与一定数量的酸或碱适当(例如等当量)进行混合而得到。这些盐可能在溶液中形成沉淀而以过滤方法收集，或在溶剂蒸发后回收而得到，或在水介质中反应后冷冻干燥制得。在本技术的一些实施方式中，本技术中所述药学上可接受的盐可以是上文中所述化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、丁二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、甲基磺酸盐、乙基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

70、溶剂合物是指通过与溶剂分子配位形成络合物的本技术的化合物的形式，其为固态或液态，水合物是与水发生配位的一种具体形式的溶剂合物。本技术所述溶剂合物的范畴中包含水合物。在本技术的一些实施方式中，所述溶剂合物包括式i所示化合物与水、乙醇、异丙醇、丙酮中任一种的溶剂合物。

71、在本发明的一些实施方式中，所述药物组合包含式i所示石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物。

72、在本发明的一些实施方式中，所述药物制剂包含式i所示石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，和至少一种药学上可接受的辅料或药物载体。

73、本技术所涉及的药物组合物或药物制剂可以含有本技术所述的石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物中的一种或多种。

74、在本技术的一些实施方式中，本技术所述药物组合物或药物制剂可以胃肠道给药或非胃肠道给药，所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、丸剂和注射剂等。

75、在本技术的第二方面，本技术提供了一种方法，其包括向受试者施用治疗有效量的上述式i结构所示的石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物或者包含该类物质的药物组合物或药物制剂以实现抗病毒的作用。所述病毒包括i型单纯疱疹病毒(hsv-1)和人冠状病毒(hcov)。

76、在本发明的一些实施方式中，所述病毒为hsv-1ghsv-ul46和hcov oc43。

77、所述“受试者”是指已经是治疗、观察或实验的对象的动物，优选指哺乳动物，最优选指人。所述“治疗有效量”是指包括本技术化合物在内的活性化合物或药剂的量，该量可引起研究者、兽医、医生或其他医疗人员所追求的组织系统、动物或人的生物学或医学响应，这包括减轻或部分减轻受治疗的疾病、综合征、病症或障碍的症状。

78、本技术化合物的最佳给药剂量和间隔是由化合物性质和诸如给药的形式、路径和部位以及所治疗的特定哺乳动物等外部条件决定的，而这一最佳给药剂量可用常规的技术确定。同时也必须认识到，最佳的疗程，即同时化合物在额定的时间内每日的剂量，可用本领域内公知的方法确定。虽然剂量随症状和病人的年龄，疾病或失调的性质及严重性和给药的途径和方式而变，但对成年病人口服给药的情况来说，作为参考，本技术化合物正常给药为每天总剂量1至1000mg，优选为5至500mg，以单剂量或分剂量形式给药，例如每日二次或三次；对于静脉注射的情况，每天可以分一至三次给用0.1至100mg，优选为0.5至50mg的剂量。

79、相较于现有技术，本发明的优势包括：

80、本发明提供了式ⅰ所示的石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物在在制备抗病毒药物中的新用途。通过初步的活性筛选实验发现这类化合物对i型单纯疱疹病毒ghsv-ul46和/或人冠状病毒oc43显示出不同程度的抑制活性，且大部分化合物对i型单纯疱疹病毒ghsv-ul46和/或人冠状病毒oc43具有显著优于石蒜碱的抑制活性，这表明具有此类结构的石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物具有较好的抗病毒应用前景。

81、当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点，但本发明以能够同时达到上述所有优点为最佳状态。