sGC刺激剂在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）治疗中的应用的制作方法

本公开内容涉及使用可溶性鸟苷酸环化酶(sgc)刺激剂和药学上可接受的盐，单独或与一种或多种另外的治疗剂组合，治疗非酒精性脂肪性肝炎(nash)的方法。

背景技术：

1、nash

2、非酒精性脂肪性肝炎(nash)是一种常见的，经常“无症状的”肝脏疾病。其类似于酒精性肝病，但发生在很少饮酒或不饮酒的人中。三大突出特点表征了nash并将其与代谢源的其他肝脏疾病区分开来：肝脏异常脂肪堆积或沉积(肝脂肪变性)，肝脏炎症，和肝损伤或肝组织损伤(纤维化)。

3、患有nash的大多数人感觉良好，而且不知道他们有肝脏问题。然而，nash可能是严重的，并可能导致肝硬化，这种情况下肝脏会永久性受损并且造成瘢痕，不再能正常工作。肝硬化可以进一步发展成为肝癌。大约10-15％的nash患者发展为肝硬化及其后遗症，例如肝功能衰竭和肝细胞癌(hcc)。

4、nash影响了2～5％的美国人。另外10％到20％的美国人在其肝脏中具有脂肪，但没有炎症或肝功能损伤，称为“脂肪肝”(脂肪变性)。虽然肝脏有脂肪是不正常的，但它本身几乎不会造成危害或永久损伤。如果脂肪是根据很少饮酒或不饮酒的人的验血结果或肝脏扫描怀疑，这个问题被称为非酒精性脂肪性肝病(nafld)。如果在这种情况下进行肝活检，它会显示一些人患有nash，而另一些人患有单纯性脂肪肝(fl)。

5、无论nash还是nafld正变得越来越普遍，可能是由于美国人肥胖数量的增长。在过去的10年中，成人肥胖率翻了一倍，儿童肥胖率变成了三倍。肥胖还会导致糖尿病和高血脂，这可能会使患有nash的人的健康进一步复杂化。

6、通常首先怀疑已经发现包括在常规血液测试板中的肝功能测试如丙氨酸氨基转移酶(alt)或天门冬氨酸转氨酶(ast)和甘油三酯(tg)升高的人患有nash。当进一步的评估显示肝脏疾病没有明显的原因(如药物，病毒性肝炎，或过量使用酒精)，并且当肝脏的x射线或成像研究显示脂肪，怀疑患有nash。提供nash诊断并将其从单纯性脂肪肝中区分出来的唯一手段是肝活检。对于肝活检，将针穿过皮肤插入以取出一小片肝脏。当用显微镜检查组织显示脂肪并伴有肝细胞炎症和损害或纤维化，诊断为nash。如果组织显示脂肪但无炎症和损伤，则诊断为单纯性脂肪肝或nafld。从活检了解的一个重要信息是，瘢痕组织(纤维化组织)是否已经在肝脏中发展。目前，还没有验血或扫描可以可靠地提供这些信息。

7、nash通常是一种具有很少或没有症状的无症状疾病。患者一般在早期阶段感觉良好，一旦该疾病进展或肝硬化发展，仅仅开始有症状，如疲劳、体重减轻、虚弱。nash的发展可能需要几年，甚至几十年。该过程可以停止，并在某些情况下，在无特殊治疗的情况下逆转。或者，nash可以慢慢恶化，进一步造成瘢痕(纤维化)出现，并在肝脏中累积。随着纤维化恶化，肝硬化发展；肝脏变得严重瘢痕，硬化，并且无法正常工作。不是每个患有nash的人都会发展为肝硬化，但一旦存在严重的瘢痕或肝硬化，几乎没有治疗可以停止该进程。患有肝硬化的人会经历水肿，肌肉萎缩，肠道出血和肝功能衰竭。肝移植是肝功能衰竭的晚期肝硬化的唯一疗法，并且患有nash的人越来越多地进行移植。在美国nash被列为肝硬化的主要原因之一，仅次于丙型肝炎和酒精性肝病。

8、尽管已经nash变得越来越普遍，其根本原因尚不清楚。它通常发生在中年和超重或肥胖者中。许多nash患者有升高的血脂，如胆固醇和甘油三酯，并且许多有糖尿病或早期糖尿病，但并不是每个肥胖的人或每个糖尿病或早期糖尿病患者患有nash。此外，一些nash患者并不肥胖，没有糖尿病或早期糖尿病，并且有正常的血液胆固醇和血脂。nash可在没有任何明显的风险因素的情况下发生，甚至可能发生在儿童中。因此，nash不是影响肝脏的单纯肥胖。

9、虽然对于肝损伤导致nash潜在的机制是未知的，几个因素是可能的候选者。这些包括胰岛素抵抗、由脂肪细胞(细胞因子)释放毒性炎症蛋白和氧化应激。

10、目前，不存在用于nash的特定疗法。给患有这种疾病的人最重要的建议是减轻自己的体重(如果肥胖或超重)，遵循均衡和健康饮食，增加体力活动，避免饮酒，避免不必要的药物和控制他们的血糖，通常通过使用糖尿病药物。

11、在nash患者中评估的实验方法包括抗氧化剂，如维生素e，硒，和甜菜碱。这些药物通过减少氧化应激发挥作用(在nash患者的肝脏内似乎氧化应激有所增加)。这些物质是否实际帮助治疗疾病是不知道的，但在未来几年应该可获知临床试验结果。另一种治疗nash实验方法是使用较新的抗糖尿病药物，甚至在没有糖尿病或早期糖尿病的人中。大多数nash患者具有胰岛素抵抗，这意味着血液中正常存在的胰岛素在控制血糖和血液中的脂肪酸比非nash患者效果较差。较新的降糖药物使身体对胰岛素更敏感，可能有助于降低nash患者肝损伤。这些药物，包括二甲双胍(metformin)、罗格列酮(rosiglitazone)、吡格列酮(pioglitazone)、奥贝胆酸(obeticholic acid)或int-767(双法尼醇x受体(fxr)和tgr5激动剂)的研究目前正在进行中。

12、nash和no/cgmp途径

13、在体内，一氧化氮(no)从精氨酸和氧通过各种一氧化氮合酶(nos)的酶和通过顺序还原无机硝酸盐来合成。已经确定nos的三种不同的亚型：在活化的巨噬细胞中发现的诱导型nos(inos或nos ii)；神经元型nos(nnos或nos i)，参与神经传递和长期增强；和组成型内皮型nos(enos或nos iii)，其调节平滑肌松弛和血压。

14、可溶性鸟苷酸环化酶(sgc)为体内no的主要受体。响应于no活化，sgc将鸟苷三磷酸(gtp)转换成次级信使环鸟苷酸(cgmp)。增加的cgmp水平反过来调节下游效应因子包括蛋白激酶，如蛋白激酶g(pkg)、磷酸二酯酶(pde)和离子通道的活性。

15、细胞和动物研究实验证据表明，肝脏中no/cgmp/pkg途径的失调可能在炎症、脂肪变性和纤维化的发展中扮演至关重要的角色，炎症、脂肪变性和纤维化是nash的特征(参考，例如：nitric oxide plays a crucial role in the development/progression ofnonalcoholic steatohepatitis in the choline-deficient,l-amino acid-defineddiet-fed rat model，fujita k等，alcohol clin exp res.，2010；34suppl 1:s18-24或nitric oxide in liver diseases，yasuko iwakiri等，trends in pharmacol.sci.，36(8)，524(2015))。

16、靶向no途径的各个步骤的物质已经被评估，主要是在动物模型中，用于nash的治疗。例如，使用给药脂肪乳(il)诱导的nash大鼠模型评估精氨酸补充(marwa m.abu-serie等，lipids in health and disease，14(128)，1，(2015))。no供体，例如s-亚硝基硫醇(例如s-亚硝基n-乙酰半胱氨酸，snap)已经被建议在ob/ob小鼠中用于防止和逆转nash(deoliverira cp等，j.am.coll.nutri.，27(2)，299-305(2008))。snap也被证明在大鼠动物模型，以防止nash的发病(de oliverira cp等，world j gastroenterol，12(12)，1905-1911(2006))。然而，没有no供体被批准供人类用于nash。已知用于治疗某些心血管疾病的no供体硝普钠、硝酸异山梨酯和硝酸甘油具有限制其长期使用的限制，例如耐受性和其他副作用的发展。

17、肝选择性no供体ncx-1000(具有no供体性质的熊去氧胆酸衍生物)显示出在大鼠中逆转实验性nash(haddad y等，int j hepatol.2011；2011:136816.doi:10.4061/2011/136816.epub 2011年10月16日)。相同的化合物，当在人类中测试时，没有减少肝硬化患者门静脉压力(berzigotti a等，am j gastroenterol.2010年5月；105(5)：1094-101doi:10.1038/ajg.2009.661.epub 2009年11月17日)。另一个肝选择性no供体，v-pyrro/no被证明在高脂肪饮食喂食的小鼠中对肝脂肪变性保护和改善餐后葡萄糖耐受(edyta maslak等，biochem pharmacol，93，389-400(2015年))。也有一些使用pde5抑制剂(如西地那非)在动物模型中治疗脂肪肝的报告(参见例如，tateya等，diabetes，62，1913-1922(2013))。

18、no及其衍生物在肝脏的生理学和病理生理学中都起重要作用。已经观察到no对肝脏疾病的发病机理和进展的某些影响模式。通常，来自肝窦内皮细胞(lsec)中的内皮no合酶(enos)的no似乎对疾病发展具有保护作用，而诱导型nos(inos)衍生的no似乎有助于病理过程。有人提出，在病理条件下，inos会产生大量的no，这是活性氮物种的主要来源，因而也就是氧化应激。还有人提出，在肝病中观察到的增加的inos衍生的no可能抑制enos活性(这有助于维持肝脏中的体内平衡)，导致enos衍生的no减少和no-cgmp-pkg途径的下调。

技术实现思路

1、发明简述

2、因此，在no信号传导受损的条件下激活sgc可能是有利的。sgc刺激剂是能够与no协同刺激sgc并且还以no非依赖性方式刺激sgc的化合物。因此，与目前向肝脏递送no或增加其合成的其他当前替代疗法相比，它们可提供相当大的优势。需要开发通过施用sgc的刺激剂来治疗nash的方法，特别是当这些sgc刺激剂能够优先分布到肝脏时。

3、仍然需要新的nash治疗方法。通过使用本公开的sgc刺激剂靶向异常的no-cgmp-pkg途径是治疗nash的新颖且有用的治疗方法。

4、在一个方面，本发明提供治疗nash的方法，包括向需要的患者施用治疗或预防有效量的sgc刺激剂或其药学上可接受的盐，单独或与治疗或预防有效量的一种或多种另外的治疗剂组合。

5、在另一个方面，本发明提供了包含sgc刺激剂或其药学上可接受的盐的药物组合物，用于在有此需要的患者中治疗nash。

6、在另一个方面，本发明提供了包含sgc刺激剂或其药学上可接受的盐的药物组合物，单独或与治疗或预防有效量的一种或多种另外的治疗剂组合，用于在有此需要的患者中治疗nash。

7、在又一方面，本发明提供了用于在有此需要的患者中治疗nash的试剂盒，包含至少两种单独的单位剂型(a)和(b)，其中(a)是治疗剂，多于一种治疗剂的组合，其药学上的可接受的盐，或其药物组合物，(b)是sgc刺激剂，其药学上可接受的盐，或包含sgc刺激剂或其药学上可接受的盐的药物组合物。