生物制药组合物和相关方法与流程

发明领域本公开涉及用于治疗白介素5(il-5)介导的疾病的组合物和相关方法。

背景技术：

0、发明背景

1、il-5是一种分泌蛋白。il-5在多种不同疾病中起作用，例如哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、轻度嗜酸性哮喘、中度嗜酸性哮喘、重度嗜酸性哮喘、不受控制的嗜酸性哮喘、嗜酸性哮喘、亚嗜酸性哮喘、慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性肉芽肿伴多血管炎、高嗜酸性粒细胞增多综合征、鼻息肉病、大疱性类天疱疮、嗜酸性食管炎、特应性皮炎、中度特应性皮炎和重度特应性皮炎。这些严重的疾病影响着全世界亿万人民。

2、这意味着需要适合于治疗il-5介导的疾病的组合物。本公开提供了此类组合物和相关方法。

技术实现思路

0、发明概述

1、本公开的一方面是抗原结合蛋白，其包含重链可变区，所述重链可变区具有seqid no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有seq id no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列。

2、本公开的另一方面是抗原结合蛋白，其包含具有seq id no:3中所示的氨基酸序列的重链可变区序列；以及具有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链可变区序列。

3、本公开的另一方面是抗体，其包含重链和轻链，其中a)重链包含重链可变区，所述重链可变区具有seq id no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；并且b)轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区具有seq id no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列。

4、本公开的另一方面是抗体，其包含重链和轻链，其中a)重链包含具有seq id no:3中所示的氨基酸序列的重链可变区序列；并且b)轻链包含具有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链可变区序列。

5、本公开的另一方面是抗体，其包含具有seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链。

6、本公开的另一方面是肽链，其包含seq id no:3中所示的氨基酸序列。

7、本公开的另一方面是肽链，其包含seq id no:1中所示的氨基酸序列。

8、本公开的另一方面是组合物，其包含编码seq id no:3中所示的氨基酸序列的核酸和编码seq id no:4中所示的氨基酸序列的核酸。

9、本公开的另一方面是组合物，其包含编码seq id no:1中所示的氨基酸序列的核酸和编码seq id no:2中所示的氨基酸序列的核酸。

10、本公开的另一方面是组合物，其包含编码seq id no:3中所示的氨基酸序列的核酸。

11、本公开的另一方面是组合物，其包含编码seq id no:1中所示的氨基酸序列的核酸。

12、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:15中所示的序列的核酸和具有seq id no:16中所示的序列的核酸。

13、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:17中所示的序列的核酸和具有seq id no:18中所示的氨基酸序列的核酸。

14、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:13中所示的序列的核酸和具有seq id no:14中所示的氨基酸序列的核酸。

15、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:15中所示的序列的核酸。

16、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:17中所示的序列的核酸。

17、本公开的另一方面是组合物，其包含具有seq id no:13中所示的序列的核酸。

18、本公开的另一方面是用于产生包含seq id no:3所示的氨基酸序列的肽链的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码seq id no:3中所示的氨基酸序列的核酸的重组宿主细胞；以及回收肽链。

19、本公开的另一方面是用于产生抗体的方法，其包括以下步骤：a)培养包含表达载体的重组宿主细胞，所述表达载体包含具有seq id no:17中所示的序列的核酸和具有seqid no:18中所示的序列的核酸；以及b)回收抗体；由此产生抗体。

20、本公开的另一方面是药物组合物，其包含：a)抗原结合蛋白，其包含重链可变区，所述重链可变区具有seq id no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有seq id no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列；和b)药学上可接受的载体。

21、本公开的另一方面是药物组合物，其包含：a)抗体，其包含重链可变区，所述重链可变区具有seq id no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有seqid no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列；和b)药学上可接受的载体。

22、本公开的另一方面是药物组合物，其包含：a)抗体，其包含重链和轻链，其中重链包含具有seq id no:3中所示的氨基酸序列的重链可变区序列；并且轻链包含具有seq idno:4中所示的氨基酸序列的轻链可变区序列；和b)药学上可接受的载体。

23、本公开的另一方面是药物组合物，其包含：a)抗体，其包含具有seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；和b)药学上可接受的载体。

24、本公开的另一方面是治疗受试者中轻度至中度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有轻度哮喘至中度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区具有如seq idno:5中所示的cdr氨基酸序列，如seqid no:6中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:7中所示的cdr氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有如seq id no:8中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:9中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:10中所示的cdr氨基酸序列；由此治疗受试者中轻度至中度哮喘。

25、本公开的另一方面是治疗受试者中轻度至中度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有轻度哮喘至中度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中轻度至中度哮喘。

26、本公开的另一方面是治疗受试者中轻度至中度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有轻度哮喘至中度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含抗体和药学上有效的载体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中轻度至中度哮喘。

27、本公开的另一方面是治疗受试者中重度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有重度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区具有如seq id no:5中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:6中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:7中所示的cdr氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有如seq id no:8中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:9中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:10中所示的cdr氨基酸序列；由此治疗受试者中重度哮喘。

28、本公开的另一方面是治疗受试者中重度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有重度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中重度哮喘。

29、本公开的另一方面是治疗受试者中重度哮喘的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有重度哮喘诊断的受试者；和(b)向受试者施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含抗体和药学上有效的载体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；

30、由此治疗受试者中重度哮喘。

31、本公开的另一方面是治疗有此需要的受试者中中度至重度特应性皮炎的方法，其包括以下步骤：a)鉴定具有选自下组的至少一种的受试者：i)根据eichenfield修订的hanifin和rajka标准的特应性皮炎诊断；ii)治疗前大于或等于约两年的特应性皮炎的事先诊断；iii)大于或等于约3的医疗保健专业人员的整体评价得分；iv)大于或等于约10％的体表面积的特应性皮炎受累；v)大于或等于16的湿疹面积和严重性指数得分；vi)每μl大于或等于150个细胞、每μl大于或等于200个细胞、每μl大于或等于300个细胞或每μl大于或等于350个细胞的绝对血液嗜酸性粒细胞计数；和vii)治疗前选自下组的至少一种状况：1)大于或等于六个月的对特应性皮炎的局部用药反应不足；2)对特应性皮炎的局部用药耐受性差；3)来自对特应性皮炎的局部用药的副作用；和4)对特应性皮炎的非药理治疗反应不足；和b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区具有如seq id no:5中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:6中所示的cdr氨基酸序列和如seqid no:7中所示的cdr氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有如seq id no:8中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:9中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:10中所示的cdr氨基酸序列；由此治疗受试者中特应性皮炎。

32、本公开的另一方面是治疗有此需要的受试者中中度至重度特应性皮炎的方法，其包括以下步骤：a)鉴定具有选自下组的至少一种的受试者：i)根据eichenfield修订的hanifin和rajka标准的特应性皮炎诊断；ii)治疗前大于或等于约两年的特应性皮炎的事先诊断；iii)大于或等于约3的医疗保健专业人员的整体评价得分；iv)大于或等于约10％的体表面积的特应性皮炎受累；v)大于或等于16的湿疹面积和严重性指数得分；vi)每μl大于或等于150个细胞、每μl大于或等于200个细胞以及每μl大于或等于350个细胞的绝对血液嗜酸性粒细胞计数；和vii)治疗前选自下组的至少一种状况：1)大于或等于六个月的对特应性皮炎的局部用药反应不足；2)对特应性皮炎的局部用药耐受性差；3)来自对特应性皮炎的局部用药的副作用；和4)对特应性皮炎的非药理治疗反应不足；和b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中特应性皮炎。

33、本公开的另一方面是治疗受试者中中度至重度特应性皮炎的方法，其包括以下步骤：a)鉴定具有选自下组的至少一种的受试者：i)根据eichenfield修订的hanifin和rajka标准的特应性皮炎诊断；ii)治疗前大于或等于约两年的特应性皮炎的事先诊断；iii)大于或等于约3的医疗保健专业人员的整体评价得分；iv)大于或等于约10％的体表面积的特应性皮炎受累；v)大于或等于16的湿疹面积和严重性指数得分；vi)每μl大于或等于150个细胞、每μl大于或等于200个细胞以及每μl大于或等于350个细胞的绝对血液嗜酸性粒细胞计数；和vii)治疗前选自下组的至少一种状况：1)大于或等于六个月的对特应性皮炎的局部用药反应不足；2)对特应性皮炎的局部用药耐受性差；3)来自对特应性皮炎的局部用药的副作用；和4)对特应性皮炎的非药理治疗反应不足；和b)向受试者施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含抗体和药学上有效的载体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中特应性皮炎。

34、本公开的另一方面是降低受试者中绝对血液嗜酸性粒细胞计数的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有选自下组的状况的受试者：哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、轻度嗜酸性哮喘、中度嗜酸性哮喘、重度嗜酸性哮喘、不受控制的嗜酸性哮喘、嗜酸性哮喘、亚嗜酸性哮喘、慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性肉芽肿伴多血管炎、高嗜酸性粒细胞增多综合征、鼻息肉病、大疱性类天疱疮、嗜酸性食管炎和特应性皮炎；和(b)向所述受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区具有如seq id no:5中所示的cdr氨基酸序列，如seq id no:6中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:7中所示的cdr氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有如seq id no:8中所示的cdr氨基酸序列，如seqid no:9中所示的cdr氨基酸序列和如seq id no:10中所示的cdr氨基酸序列；由此降低受试者中绝对血液嗜酸性粒细胞计数。

35、本公开的另一方面是降低受试者中绝对血液嗜酸性粒细胞计数的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有选自下组的状况的受试者：哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、轻度嗜酸性哮喘、中度嗜酸性哮喘、重度嗜酸性哮喘、不受控制的嗜酸性哮喘、嗜酸性哮喘、亚嗜酸性哮喘、慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性肉芽肿伴多血管炎、高嗜酸性粒细胞增多综合征、鼻息肉病、大疱性类天疱疮、嗜酸性食管炎、特应性皮炎、中度特应性皮炎和重度特应性皮炎；和(b)向受试者施用治疗有效量的抗体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此治疗受试者中特应性皮炎。

36、本公开的另一方面是降低受试者中绝对血液嗜酸性粒细胞计数的方法，其包括以下步骤：(a)鉴定具有选自下组的状况的受试者：哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、轻度嗜酸性哮喘、中度嗜酸性哮喘、重度嗜酸性哮喘、不受控制的嗜酸性哮喘、嗜酸性哮喘、亚嗜酸性哮喘、慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性肉芽肿伴多血管炎、高嗜酸性粒细胞增多综合征、鼻息肉病、大疱性类天疱疮、嗜酸性食管炎、特应性皮炎、中度特应性皮炎和重度特应性皮炎；和(b)向受试者施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含抗体和药学上有效的载体，所述抗体包含具有如seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有如seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链；由此降低受试者中绝对血液嗜酸性粒细胞计数。

37、本发明包括以下实施方案：

38、实施方案1.抗原结合蛋白，其包含重链可变区，所述重链可变区具有seq id no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区具有seq id no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列。

39、实施方案2.实施方案1的抗原结合蛋白，其中所述重链可变区进一步包含如seqid no:21中所示的重链fr4氨基酸序列。

40、实施方案3.实施方案2的抗原结合蛋白，其包含重链fc结构域，所述重链fc结构域具有位置252处的酪氨酸残基，位置254处的苏氨酸残基和位置256处的谷氨酸残基，并且其中所述重链fc结构域的氨基末端与所述重链可变区的羧基末端连接。

41、实施方案4.抗原结合蛋白，其包含具有seq id no:3中所示的氨基酸序列的重链可变区序列；以及具有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链可变区序列。

42、实施方案5.实施方案4的抗原结合蛋白，其包含重链fc结构域，所述重链fc结构域具有位置252处的酪氨酸残基，位置254处的苏氨酸残基和位置256处的谷氨酸残基，并且其中所述重链fc结构域的氨基末端与所述重链可变区的羧基末端连接。

43、实施方案6.抗体，其包含重链和轻链，其中

44、a)所述重链包含重链可变区，所述重链可变区具有seq id no:5中所示的cdrh1氨基酸序列，seq id no:6中所示的cdrh2氨基酸序列和seq id no:7中所示的cdrh3氨基酸序列；并且

45、b)所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区具有seq id no:8中所示的cdrl1氨基酸序列，seq id no:9中所示的cdrl2氨基酸序列和seq id no:10中所示的cdrl3氨基酸序列。

46、实施方案7.实施方案6的抗体，其中所述重链可变区进一步包含如seq id no:21中所示的重链fr4氨基酸序列。

47、实施方案8.实施方案7的抗体，其中所述重链包含重链fc结构域，所述重链fc结构域具有位置252处的酪氨酸残基，位置254处的苏氨酸残基和位置256处的谷氨酸残基。

48、实施方案9.抗体，其包含重链和轻链，其中

49、a)所述重链包含具有seq id no:3中所示的氨基酸序列的重链可变区序列；并且

50、b)所述轻链包含具有seq id no:4中所示的氨基酸序列的轻链可变区序列。

51、实施方案10.实施方案9的抗体，其中所述重链包含重链fc结构域，所述重链fc结构域具有位置252处的酪氨酸残基，位置254处的苏氨酸残基和位置256处的谷氨酸残基。

52、实施方案11.抗体，其包含具有seq id no:1中所示的氨基酸序列的重链和具有seq id no:2中所示的氨基酸序列的轻链。

53、实施方案12.肽链，其包含seq id no:3中所示的氨基酸序列。

54、实施方案13.肽链，其包含seq id no:1中所示的氨基酸序列。

55、实施方案14.组合物，其包含编码实施方案1的重链可变区的核酸和编码实施方案1的抗原结合蛋白的轻链可变区的核酸。

56、实施方案15.组合物，其包含编码实施方案2的重链可变区的核酸和编码实施方案2的轻链可变区的核酸。

57、实施方案16.组合物，其包含编码实施方案3的与重链可变区的羧基末端连接的重链fc结构域的核酸和编码实施方案3的轻链可变区的核酸。

58、实施方案17.组合物，其包含编码实施方案6的重链可变区的核酸和编码实施方案6的抗原结合蛋白的轻链可变区的核酸。

59、实施方案18.组合物，其包含编码实施方案7的重链可变区的核酸和编码实施方案7的轻链可变区的核酸。

60、实施方案19.组合物，其包含编码实施方案8的与重链可变区的羧基末端连接的重链fc结构域的核酸和编码实施方案8的轻链可变区的核酸。

61、实施方案20.组合物，其包含编码seq id no:3中所示的氨基酸序列的核酸和编码seq id no:4中所示的氨基酸序列的核酸。

62、实施方案21.组合物，其包含编码seq id no:1中所示的氨基酸序列的核酸和编码seq id no:2中所示的氨基酸序列的核酸。

63、实施方案22.组合物，其包含编码seq id no:3中所示的氨基酸序列的核酸。

64、实施方案23.组合物，其包含编码seq id no:1中所示的氨基酸序列的核酸。

65、实施方案24.组合物，其包含具有seq id no:15中所示的序列的核酸和具有seqid no:16中所示的序列的核酸。

66、实施方案25.组合物，其包含具有seq id no:17中所示的序列的核酸和具有seqid no:18中所示的序列的核酸。

67、实施方案26.组合物，其包含具有seq id no:13中所示的序列的核酸和具有seqid no:14中所示的序列的核酸。

68、实施方案27.组合物，其包含具有seq id no:15中所示的序列的核酸。

69、实施方案28.组合物，其包含具有seq id no:17中所示的序列的核酸。

70、实施方案29.组合物，其包含具有seq id no:13中所示的序列的核酸。

71、实施方案30.组合物，其包含选自下组的至少一项：a)编码实施方案1的重链可变区的核酸；b)编码实施方案2的重链可变区的核酸；和c)编码如实施方案3中与重链可变区的羧基末端连接的重链fc结构域的核酸。